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RESUMEN

Aislamiento purificación y conservación de microorganismos, términos relacionados con la


bioprospeccion de los mismos son procesos cuyas bases radican en técnicas microbiológicas. en el
laboratorio se sometieron a dichas pruebas microbiológicas bacterias acumuladoras provenientes
de agua de rio. después de sembrar e inoculación en el medio de cultivo propicio se espera una
formación de colonias, para posteriormente efectuar la descripción macroscópica de las UFC. las
pruebas de tinción como la tinción de gram, son efectivas en el momento de identificar
microorganismos pero existen igualmente otras técnicas que permiten identificar los
microorganismos por medio de marcadores moleculares , no obstante antes de efectuar estas
pruebas se debe aislar el ADN del microorganismo a trabajar, en una breve descripción el ADN
fue aislado así; siguiendo el protocolo establecido; usando lisozima se hizo lisis de la membrana
celular, , posteriormente se hizo proteólisis apoyándose en la proteínasa k, por último se destruyo
el ARN con RNAsa, el contenido obtenido fue sometido a electroforesis para verificar que fuera
ADN, el proceso se puede sintetizar en; preparación del gel; aplicación de las muestras ,
electroforesis y fragmentación. del ADN obtenido se puede hacer un análisis de secuencias
usando los software BIOEDIT RDP II Y MEGA 5.0.
MARCO TEORICO

Bioprospección se define como la búsqueda sistemática, clasificación e investigación de


nuevas fuentes de compuestos químicos, genes, proteínas y otros productos que posean un
valor económico actual o potencial y que se encuentran en los componentes de la
diversidad biológica. Está dedicado al hallazgo de organismos y sustancias con posibles
usos para el beneficio del ser humano que pueden tener un valor comercial significativo en
sectores como el industrial, alimentario, cosmético y farmacéutico. A nivel global se han
llevado a cabo estudios sobre bioactividad en varios grupos de organismos marinos, entre
los cuales vale la pena mencionar esponjas, cnidarios, equinodermos, tunicados, algas,
bacterias y hongos. Mediante el uso sostenible, mediante la biotecnología, de recursos
biológicos y su conservación.

El desarrollo de los métodos moleculares ha llevado a la necesidad de crear métodos de extracción


de ADN más simples y eficientes, sin embargo, variaciones en la eficiencia de la lisis, el
rendimiento y la pureza del ADN pueden afectar los resultados de técnicas moleculares como la
RCP, la hibridización y el clonaje. La técnica de RAPD necesita un método de extracción de ADN
genómico lo más estandarizado posible con el que se obtenga un ADN puro, no degradado, libre
de ARN y de inhibidores de la RCP para de esa forma obtener patrones reproducibles de RAPD.[]
En comparación con otros métodos de extracción de ADN, CTAB disminuye la cantidad de pasos y
el tiempo total del proceso, minimizándose las posibles contaminaciones accidentales de las
muestras durante la extracción, con el cual se obtiene mayor concentración y rendimiento . [web]

El crecimiento durante la última década del siglo XX, los avances de la ingeniería genética y
empleando las nuevas tecnologías surgidas como la flexible, la cual se basa en análisis informáticos
aplicativos, han sido de gran utilidad para llevar al surgimiento de una disciplina que creó vínculos
indisolubles entre la Informática y las ciencias biológicas, el cual se conoce como Bioinformática;
por medio del cual se obtienen datos y simulaciones de secuencias. Este procedimiento se empleó
para realizar un análisis secuenciado de ADN en donde se buscó conocer características, nombres
dé cada secuencia y posteriormente obtener el árbol filogenético a través de RDP “Ribosoma
Database Project”.
RESULTADOS

Extracción de ADN bacteriano: para entender cómo se llego a la obtención de ADN microbiano
dividiremos la explicación en 3 fases.

1. adición de lisozima:Al adicionar lisozima siguiendo el protocolo se da una lisis de la membrana


celular; lisozima es una enzima que Cataliza la hidrólisis de enlaces glicosídicos β(1-4) entre N-
acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico, mucopolisacáridos presentes en la pared celular
bacteriana. Bajo determinadas condiciones, esta actividad conduce a la alteración del equilibrio de
las funciones de la célula, con dispersión de su contenido. En el laboratorio produce remoción de
la turbidez de la suspensión bacteriana [wb2]

2. adición de proteasa: siguiendo el protocoló se agrega proteínas K para hacer lisis sobre las
proteínas (digerirlas) celulares y liberar el ADN;

3. Adicion de RNAsa : esta enzima cataliza la hidrólisis de ARN en componentes más pequeños y
no afecta de ninguna forma al ADN puesto que el inhibidor de ribonucleasa (IR) no lo permite.
Ampliación del mecanismo de acción CTAB [ bromuro de cetil-trimetil amonio ]:este compuesto
es un surfactante de tipo catiónico, por el hecho de ser surfactante influyo por medio de la tensión
superficial en la superficie de contacto entre las fases que se formaron en la solución, y permitió
conseguir y mantener la emulsión, El CTAB tiene la propiedad de precipitar ácidos nucleicos y
polisacáridos ácidos en soluciones de baja concentración iónica pero al agregar NaCl 5M se elevó
la concentración iónica de la solución y En soluciones de alta concentración iónica el CTAB forma
complejos con las proteínas y polisacáridos pero no precipita ácidos nucleicos.

CONCLUSIONES.

Con el proceso de electroforesis se constató que El contenido obtenido tras el proceso de


extracción de ADN bacteriano, era ADN.