CARRERA: Ing.

en biotecnología
INTRODUCCIÓN

Desde que el hombre domestico a los animales ha intentado modificar sus

características con la intención de obtener mayor producción de leche o carne y
lo hace mediante la selección de los más aptos y el cruzamiento de ejemplares que
presentan mejores características.

En la actualidad gracias a la biotecnología se planifican y dirigen los procesos

reproductivos, se transmiten los rasgos deseados y se acelera la mejora genética,
y con los últimos avances de la ingeniería genética, se han desarrollado técnicas
que permiten introducir, eliminar o modificar de forma específica un gen o
determinados tipos de genes, dando origen a los organismos modificados
genéticamente.

DESARROLLO

TRANSGENESIS
La transgénesis es un procedimiento biotecnológico por el que se introduce un gen
foráneo (transgén) en el genoma de un ser vivo, con la intensión de que el transgen
se integre en la línea germinal (gametos) de una manera estable, asegurando así
que es nuevo gen incorporado pueda ser heredado por la descendencia.
Un transgen es una construcción de ácido desoxirribonucleico (ADN) que contiene
una secuencia que codifica una proteína especifica la cual aporta la mejora
genética deseada (exón); una región que confiere a esta secuencia la capacidad de
expresarse de forma ubicua o en tejidos específicos (promotor), y consta de una
serie de secuencias aisladoras y reguladoras que protegen y modulan la expresión
del gen de interés.
En animales el transgen, se introduce en ovocitos y los embriones que integren el
ADN extraño a su genoma, previamente a la primera división, producirán un
organismo transgénico, con ello el transgen pasara a las siguientes generaciones.

Fig. 1 Modificación genética animal.

Un buen sistema para producir proteínas recombinantes debe de elaborar grandes
cantidades de ellas y asegurar que sean biológicamente idénticas a las endógenas
y tener un costo razonable, por ello a pesar de que se tiene un menor costo en
producir biomoleculas en microorganismos como bacterias y levaduras, estos
organismos no realizan varias de las modificaciones postraducionales que son
requeridas para la correcta función in vivo de las proteínas de interés. Por ello es
de gran interés poder producir altas concentraciones de estas proteínas en
animales de granja.

Las proteínas de gran interés biomédico pueden ser producidas en varios fluidos
biológicos del animal, como sangre, orina, líquido seminal saliva y leche, en
función del promotor (transgen) que se coloque en la construcción. Debido a la
gran cantidad de volumen que se puede obtener y a la facilidad de la recolección,
el fluido de elección para expresar la proteína de valor biomédico en animales
transgénicos es la leche. La glándula mamaria puede expresar más de 2 g de
proteína recombinante por litro de leche.

Debido a que existen proteínas que solo se expresan en la leche (como la caseína,
la lactoglobulina y la proteína acídica del suero), se introduce por recombinación
homologa el gen de una proteína de interés bajo el promotor de una de estas
proteínas, obteniendo la expresión de la proteína recombinante deseada en la
leche del animal transgénico.
Los vectores de clonación posibilitan el proceso de transferencia de un gen
exógeno a la célula, facilitando se entrada y biodisponibilidad intracelular. Existen
una gran variedad de vectores que se clasifican en vectores virales (adenovirus,
retrovirus) y vectores no virales (plásmidos, cromosoma artificial de levaduras o
YACs.
La preparación de un transgen comienza con el aislamiento de la molécula de ADN
más compleja, con la utilización de enzimas de restricción, oligonucleótidos y PCR,
en el transgen se combinan secuencias de distintos orígenes, como poder ser el
gen que codifica la proteína de interés y el promotor que dirige la expresión a un
determinado tejido (a la glándula mamaria).

TRANSFORMACION GENETICA DE UNA VACA PARA PRODUCIR INSULINA

La insulina es una proteína que tiene como función principal disminuir la

concentración de glucosa en la sangre, y la deficiencia de esta proteína causa la
diabetes mellitus que es una enfermedad renal terminal, en muchos países. Por
lo que producir la insulina a través de la leche de una vaca a la que se le va
insertar el gen que codifica esta proteína es gran interés de salud así como
económico.
AISLAMIENTO DEL GEN QUE PRODUCE LA INSULINA
Usando la técnica del ADN recombinante se aislara el gen humano que codifica la
proteína de la insulina, se purificara y se implantara en el plásmido pCX-EGFP,
el cual está diseñado solo para expresarse en las glándulas mamarias.

Fig. 2 Plásmido que expresa el gen de la insulina

IMPLANTACIÓN DEL TRANSGEN

Utilizando la técnica de micro inyección pronuclear se insertara el vector de

clonación dentro de un ovulo fecundado de la vaca. Se realiza utilizando un micro
pipeta de vidrio (0.1 micras de diámetro) para poder inyectar el ADN de interés en
el pronúcleo de un ovulo fecundado, para ello se requiere de un equipo de ópticas
y brazos mecánicos móviles (micromanipulador).

Fig. 3 Inserción del transgen en el ovulo fecundado.

Fig. 4 Sistema óptico para inserción del transgen en el ovulo.

Posteriormente estos óvulos fecundados y micro inyectados se introducen en

madres receptoras, previamente sincronizados hormonalmente, para gestarlos
aplicando la técnica de transferencia de embriones y finalmente los recién nacidos
se examinaran para ver si tienen incorporado el transgén.

Para obtener la proteína de la insulina es necesario esperar que el animal llegue

a su etapa reproductiva y poder extraer la proteína de la leche por medio de
técnicas especiales de purificación.

CONCLUSIÓN

Las técnicas de transformación genética son una herramienta de gran utilidad

para generar OGM, ya que nos permiten identificar y aislar el gen de interés que
deseamos expresar en otro ser vivo (Animal, vegetal o microorganismo), para
producir un metabolito de interés farmacéutico.

Es por ello que como estudiantes de biotecnología debemos de tener el

conocimiento de las técnicas de transformación genética, que nos permitan
desarrollar estos proyectos biotecnológicos.

REFERENCIAS
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http://web.cua.uam.mx/docs/CNI/profesores/archivos/295.pdf
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animales de interés zootécnico RIA. Revista de Investigaciones Agropecuarias, vol.
40, núm. 2. Pp 141-144. Disponible en.
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Disponible en.
http://www.colvema.org/pdf/amg1.pdf
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http://www.sofarchi.cl/medios/pub/Dorfman_MD_Revista_de_Farmacologia_de
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