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MICROBIOLOGIA I

TEMA: TÉCNICAS ASÉPTICAS. ESTERILIZACION

Se denomina esterilización al proceso por el cual se obtiene un producto

libre de microorganismos viables.

Los agentes que matan microbios son denominados microbicidas (cida=

“matar”) o más comúnmente denominados “germicidas”. Si el agente
específicamente destruye bacterias, es llamado bactericida; si mata hongos
es denominado fungicida. Tras una exposición del objeto esterilizado al aire
o a sus alrededores, éste se habrá contaminado de nuevo con
microorganismos.

Los métodos térmicos de esterilización son comúnmente los más utilizados

para eliminar los microorganismos, incluyendo las formas más resistentes
como lo son las endosporas.

 Calor seco: Comprende a su vez varias fases: el calor directo, el

flameado y la esterilización al horno.
 Calor húmedo: Comprende varias modalidades, ebullición,
pasteurización y empleo del autoclave.

Factores que influyen en la efectividad de los

tratamientos antimicrobianos

El número de microorganismos: A mayor número de microorganismos

que se tengan al inicio, mayor tiempo para eliminar la población entera.

Influencias ambientales: La presencia de materia orgánica regularmente

inhibe la acción de antimicrobianos químicos. Microorganismos localizados
en biopelículas, son difíciles de matar por biocidas, porque la actividad de
éste es dependiente de la temperatura de la reacción química; los
desinfectantes funcionan un poco mejor bajo temperaturas altas.

Tiempo de exposición: Los químicos antimicrobianos suelen requerir un

mayor tiempo de exposición para microorganismos más resistentes o
endoesporas, esto con el fin de que sea efectivo.

Características microbianas: Dependiendo las características del

microorganismo se van a tener que usar diferentes métodos para poder
eliminarlo.

Métodos de esterilización

Existen varios métodos de esterilización, detallados a continuación:

 Métodos físicos
o Calor húmedo (en autoclave de vapor)
o Calor seco (en horno de esterilización)
 Flama directa
o Incineración
o Aire caliente
o Pasteurización
o Ebullición
o Vapor
o Tindalización
o Radiación
 Radiación ionizante
 Radiación no ionizante: (p. ej:Radiación infrarroja y
Radiación ultravioleta)
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 Métodos químicos
o Alcoholes
 Etanol
 Alcohol isopropílico
o Aldehídos
 Formol
 Glutaraldehído
o Fenoles
 Fenol (Ácido carbólico)
 Xilenol
o Óxido de etileno
o Peróxido de hidrógeno

Métodos químicos

Los métodos químicos de esterilización son aquellos que involucran el

empleo de sustancias letales para los microorganismos, tales como el óxido
de etileno y el peróxido de hidrógeno. El uso de este método es muy
limitado para la Industria Alimentaria pero muy utilizado en otras industrias
como la farmacéutica.

Métodos físicos

Los métodos físicos son aquellos que no involucran el empleo de sustancias

letales para los microorganismos, sino procedimientos físicos como la
radiación ionizante, el calor o la filtración de soluciones con membranas
que impiden el paso de microorganismos, incluyendo virus. El método más
usado en esta categoría es el calor que mata microorganismos por la
desnaturalización de las enzimas; el cambio resultante en la forma
tridimensional de las proteínas las inactiva. La resistencia al calor varía
entre los diferentes microorganismos; esta diferencia puede ser expresada
como el punto térmico de muerte (PTM) el cual se define como la
temperatura más baja a la cual todos los microorganismos en una
suspensión líquida serán eliminados en 10 minutos.

Otro factor que debe ser considerado en una esterilización es el tiempo

requerido. Este puede expresarse como el tiempo de muerte térmica (TMT),
el cual es el tiempo mínimo para que toda bacteria en un cultivo líquido en
particular sea exterminada a una temperatura determinada.

Ambos PTM y TMT son guías útiles que indican la severidad del tratamiento
requerido para matar a una población de bacterias dada. El tiempo de
reducción decimal (TRD, o valor D) es el tercer concepto relacionado con la
resistencia bacteriana al calor. TRD es el tiempo, en minutos, en el cual el
90 % de una población bacteriana a cierta temperatura será eliminada los
tratamientos, térmicos en resumen,son métodos para conservar los
alimentos.

Métodos térmicos

Los métodos térmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen
entre sus fines la destrucción de los microorganismos por el calor. Los
métodos son tanto la pasteurización como la esterilización, cuya finalidad
principal es la destrucción microbiana, como al escaldado y a la cocción,
procesos en los que también se consigue una cierta reducción de la flora
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Esterilización por calor seco
microbiana, pero que sus objetivos Temperatura Tiempo
principales son la variación de las (°C) (minutos)
propiedades físicas. 121 360
140 180
Calor húmedo 150 150
160 120
Las condiciones de temperatura y presión 170 60
de un proceso de esterilización por vapor 180 30
de agua en un autoclave van de 121 °C a
134 °C y 275-350 kPa. Para el tratamiento de residuos hospitalarios se
emplean tiempos de operación entre 20 y 30 minutos. El método de
esterilización por autoclave utiliza pruebas microbiológicas, las cuales se
ingresan dentro del ciclo de operación y posteriormente por medio de una
incubadora se busca detectar si hay crecimiento de microorganismos. Uno
de los microorganismos utilizados en estas pruebas es el Bacillus
stearothermophilus.

Calor seco

Las temperaturas de esterilización van desde 121 °C a 180 °C, teniendo en

cuenta los tiempos de esterilización para cada caso. 3

Aplicaciones

En investigación de laboratorios científicos es empleado principalmente

para eliminar microorganismos de los elementos de trabajo, evitando así la
contaminación de la muestra, recipientes y material de trabajo.

En la industria alimentaria se emplea para aumentar la vida útil de los

alimentos. Los alimentos esterilizados más comunes son los enlatados.

Se usa también para la conservación y alargamiento de la vida de libros,

muebles, obras de arte y otros bienes.

En los hospitales es empleado principalmente para eliminar agentes

patógenos de los instrumentos quirúrgicos reutilizables.

Los fabricantes de productos sanitarios esterilizan los productos para poder

utilizarlo con asepsia en un procedimiento quirúrgico o de laboratorio por
los profesionales sanitarios.

En el tratamiento de residuos peligrosos hospitalarios, se utiliza la

esterilización de alta eficiencia, con el fin de eliminar todos los
microorganismos patógenos y así disminuir los riesgos de infección
asociados.