PREGUNTAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR 2013

Prof. Alejandra Sandoval A.

Graciela Berrios P

1. En relación a las normas de orden y bioseguridad, cuales considera usted son las

necesarias en un laboratorio de Biología Molecular?

2. En lo práctico, ¿Cuáles son las principales características que distinguen la extracción

de ADN y al ARN?

3. ¿Cómo fue destruida la pared celular de las hojas de D. antarctica?

4. ¿Cómo fue destruida la pared celular de las bacterias en la extracción del ADN

plasmidial?

5. ¿Qué función tienen las sales en una extracción de ADN, por ejemplo el acetato de

potasio (KAc)?

6. ¿Cuál es la función del dodecilsulfato sódico (SDS) en la extracción de ADN plasmidial?

7. ¿Qué finalidad tiene la neutralización en el método de “lisis alcalina”?

8. ¿Por qué la alcalinización en presencia de SDS afecta menos a los plásmidos que al

ADN cromosómico?

9. ¿Qué finalidad tiene el paso de incubación con ribonucleasa A (RNAsa) en la

purificación de ADN plasmídico?

10. ¿Por qué se irradian los geles con luz UV?

11. ¿Qué característica o factor está determinando el movimiento de moléculas en la

electroforesis?
12. En una electroforesis, ¿Cómo distingue entre ADN genómico y ARN total (planta)?

Dibuje si es necesario.

13. ¿Cómo puede distinguir la presencia de ARN mensajero en la muestra de ARN total?

14. Indique la función de los siguientes reactivos en la extracción de ácidos nucleicos,

recuerda el procedimiento especifico en el cual fueron utilizados?, comente:

a) Etanol 75%
b) Alcohol isopropanol
c) Etanol Absoluto
d) Cloroformo
e) Agua con Dietilpirocarbonato
f) Guanidino Tiocianato en solución
g) Formamida desionizada
h) Formaldehido
i) Nitrógeno Liquido
j) ADESI
k) Glicerol/azul de bromofenol
l) GelRed
m) Buffer TAE1x
n) Buffer MOPS1X
o) Agarosa
p) Glucosa
q) EDTA
r) NaOH
s) Acido acético glacial
t) Fenol : cloroformo
15. Respecto de los reactivos anteriores: ¿A qué temperatura se deben almacenar; Cuál es

su nivel de peligrosidad; Qué consideraciones debe tener antes de usarlos (cada uno)?

16. ¿A qué temperatura se deben almacenar el ADN y el ARN? Por qué?

17. ¿Cuáles son las diferencias entre un gel natural y un gel denaturante?

18. ¿Cómo se visualizan en un gel las moléculas de ADN plasmidial y ADN genómico?

19. ¿Qué tipo de gel utilizara para visualizar ácidos nucleicos?

20. ¿Las muestras de ADN y ARN, requieren el mismo procedimiento para su análisis?

21. ¿Qué tipo de estudios puede realizar con moléculas de ADN?

22. ¿Qué tipo de estudios puede realizar con moléculas de ARN?

23. Calcule la concentración en ng/ul de las siguientes muestras de ADN y ARN total:

Muestra ABS 260 nm 260/280 260/230

ADN 0.008 1.09 1.69
ADN 0.870 1.79 1.99
ADN 0.009 1.85 2.09
ARN 0.678 2.00 2.20
ARN 0.065 1.84 1.96
ARN 0.006 0.99 1.59

¿Respecto del grado de pureza de cada muestra, que puede usted concluir?
24. Identifique y comente cada figura:

a. Carriles 1, 2 y 3
1 2 3

b. Flecha A y B

c. Carriles 1 y 6
1 2 3 4 5 6
d. Carriles 1 y 2; Flecha

e. Carriles 1 y 4; Flecha
1 2 3 4
f. Comente los siguientes resultados indicando que contiene cada gel y calidad de la
extracción.

1 2 3 4 5 6 7 8

1 2 3

1 2 3