PREPARACIÓN DE REATIVOS/LAB.

BIOQUÍMICA

11 de febrero de 2015

1. Azul de bromotimol (100mg/L) Preparar 100 ml

2. Rojo congo (100mg/L) Preparar 100 ml
3. Permanganato de potasio (100mg/L) Preparar 100 ml
4. Acido acético 5% Preparar 100 ml
5. Amortiguador de fósfato 0.2M pH 7.5 Preparar 100 ml
6. Acido tricloroacético al 5% Preparar 200 ml
7. Cloruro de sodio al 10% Preparar 500 ml
8. Cloruro de sodio 0.15 M Preparar 200 ml
9. Reactivo de orcinol Preparar 100 ml
10. Sulfato de cobre 0.1M Preparar 200 ml
11. Hidróxido de sodio 10 M Preparar 200 ml
12. Amortiguador salino Preparar 200 ml
13. Nitrito de sodio 10g/L Preparar 100 ml
14. Nihidrina 0.2% en etanol o acetona Preparar 100 ml
15. Nihidrina 1% en etanol o acetona Preparar 100 ml
16. Alanina 0.1% Preparar 100 ml
17. Leucina 0.1% Preparar 100 ml
18. Fenilalanina 0.1% Preparar 100 ml
19. Tirosina 0.1% Preparar 100 ml
20. Cisteina 0.1% Preparar 100 ml
21. Acido aspártico 0.1% Preparar 100 ml
22. Metionina 0.1% Preparar 100 ml
23. Prolina 0.1% Preparar 100 ml
24. Glicina 0.1% Preparar 100 ml
25. Triptófano 0.1% Preparar 100 ml
26. Fenol 0.1% Preparar 100 ml
27. Asparagina 0.1% Preparar 100 ml
28. Solvente de cromatografía Preparar 300 ml
29. Nitroprusiato de sodio 2% Preparar 100 ml
30. Mezcla de aminoácidos (Ala, Leu y Asp) Preparar 100 ml
31. HCl 9N Preparar 100 ml
32. Cloruro de sodio 20% Preparar 100 ml
33. Acido tricloroacético 50% Preparar 100 ml
34. Hidróxido de sodio 5M Preparar 100 ml
35. Ácido nítrico 20% Preparar 100 ml

Grupo 1: Prepara los reactivos 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33.
Grupo 2: Prepara los reactivos 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34
Grupo 3: Prepara los reactivos 3, 7, 11, 15, 19, 23, 27, 31, 35
Grupo 4: Prepara los reactivos 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32
Reactivo de Orcinol:
Se disuelven 0.1 g de FeCl3 en 100 ml de HCl y se mezclan con 3.5 ml de etanol que
llevan disueltos 0.3 g de Orcinol.
Amortiguador salino:
Se mezclan citrato de sodio 0.015 M y NaCl 0.15 M en volúmenes iguales.

Lugol:
Para 500 ml, pesar 0.83 g de KI y disolver en agua. Agregar 1.3 g de Yodo metálico. Agitar
fuertemente.

Ninhidrina 0.2%:
Ninhidrina 0.6 g y disolver en 300 ml, de acetona.
La acetona puede reemplazarse por etanol, etanol o isopropanol.

Solvente para la cromatografía:

Para 800 ml, se mezclan 640 ml de etanol, 80 ml de agua destilada y 80 ml de amoniaco.
Mezcla de aminoácidos: (Alanina, leucina y ácido aspártico 0.1 g de cada aminoácido y llevar a 100
mL en un matraz aforado.

PREPARACIÓN DE SOLUCION BUFFER FÓSFATO EN

DIFERENTES PH

Solución stock A: (0.2 M NaH2PO4) Disolver 27.6 g NaH2PO4 llevar a 1 L con agua destilada.

Solución stock B: (Na2HPO4) Disolver 28.4g de Na2HPO4 y llevar a 1 L con agua destilada.

PH %A %B PH %A %B

5.8 92.0 8.0 6.9 45.0 55.0

5.9 90.0 10.0 7.0 39.0 61.0
6.0 87.7 12.3 7.1 33.0 67.0
6.1 85.0 15.0 7.2 28.0 72.0
6.2 81.5 19.5 7.3 23.0 77.0
6.3 77.5 22.5 7.4 19.0 81.0
6.4 73.5 26.5 7.5 16.0 84.0
6.5 68.5 31.5 7.6 13.0 87.0
6.6 62.5 37.5 7.7 10.5 89.5
6.7 56.5 43.5 7.8 8.5 91.5
6.8 51.0 49.0

NOTA:
Pedir con anticipación todos los materiales que necesiten, incluyendo
en cada laboratorio un frasco lavador. Los reactivos siempre los pide la
profesora.