CALCULOS PARA PREPARAR TRIPSINA VERSENE NaCl 8.00 g = 0.800% KCl 0.40 g = 0.040% Na2HPO4 + 12H2O 0.12 g = 0.

012% KH2PO4 0.06 g = 0.006% Versene (EDTA) 2 g = 0.200% Tripsina 1.50 g NaHCO3 2.50 g Rojo de fenol 0.02 g Complete a 1000 ml con agua destilada. En el laboratorio se tienen algunos de estos reactivos en solucin as: NaCl 5 M = 1 M NaCl = 58.44 g en 1 Litro, 5 M = 292.2 g Equivale a 29.22% KCl al 10 % Na2HPO4 al10 % EDTA 0.5 M = 1 M de EDTA = 372.2 g ,0.5 M de EDTA = 186.1 g Que equivale a 18.61% NaHCO3 al 10 % = pm 100% X 10% = 8,401 g/mol 1000 ml 100 ml = 0,8401 gr. A partir de estas soluciones se prepara la Tripsina as: V1 x C1 = V1 x C2. Volumen total = 1000 ml.
NaCl 5M= KCl Na2HPO4 KH2PO4 EDTA 0.5 M = NaHCO3 29.22 % 10 % 10 % 10 % 18.61% 10 % 1000 ml x 0.8 % = V2 x 29.22% = V2= 27.3 ml 1000 ml x 0.04 % = V2 x 10 % = V2= 4 ml 1000 ml x 0.012% = V2 x 10 % = V2= 1.2 ml 1000 ml x 0.006% = V2 x 10 % = V2= 0.6 ml 1000 ml x 0.200% = V2 x 18.61% = V2=10.74 ml 1000 ml x 0.25 % = V2 x 10 % = V2 =25 ml

A parte pesa tripsina "'SIGMA'' 1.5g Rojo de fenol 0.02 g Agua destilada hasta completar 1000 ml Ajuste pH = 7.2 100 ml = 100 gr. (densidad 1.0) pesado. Menos los gramos de reactivo que se halla

FORMULA PARA PREPARAR PBS A PARTIR DE SOLUCION STOCK

NaCl 0,8% KCl 0,02% Na2HPO4 0,144% KH2PO4 0,024%

27 ml. 2 ml. 14,4 ml. 2,4 ml.

Complete a 1000 ml con agua destilada Los reactivos utilizados se encuentran en solucin se procede igual que con la Tripsina Versene. PH = 7,4