PRACTICA DE EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DEL DNA

Introducción

ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico. Constituye el material

genético de los organismos. Es el componente químico primario de los
cromosomas y el material del que los genes están formados, los genes que son
los que llevan la información de la vida y las especies en la naturaleza, no existe
otro mecanismo conocido hasta el momento acerca de la herencia que no sea
dado a través del DNA. Esta doble cadena de nucleótidos unidas por puentes de
hidrogena, alberga los secretos de cada especie. Es por esto que su estudio y
manipulación ha revolucionada las ciencias biológicas y de hecho ha creado una
gran rama, llamada Biología Molecular.

El desarrollo de la biología molecular ha sido posible gracias a la posibilidad de

manipulación de esta molécula, por eso desde sus inicios su extracción,
separación y purificación ha sido fundamental para los avances en esta área.
Existen múltiples técnicas para su extracción y purificación, las hay desde muy
tecnificadas y costosas, como el uso de kit comerciales que tienen de columnas de
sílica hasta las más caseras en donde se usan ingredientes básicos como jabón y
sales. En esta práctica usaremos una técnica sencilla que permite su extracción y
separación sin llegar a obtener un DNA puro (sin proteínas) como se obtiene en
las columnas.

Objetivo

Extraer y separar DNA desde una muestra de sangre usando un método sencillo.

Materiales

1. Sangre anticuagulada
 2. Agua desionizada
3. Solución TRIS 50mM, NaCl 100 mM
4. Isopropanol
5. Tubos de ensayo
6. Centrifuga

Procedimiento y preguntas

1. Agregar en un tubo de ensayo 1ml de sangre anticoagulada mas 4 ml de

agua desionizada
Que se espera que suceda con las células en este procedimiento?
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2. Centrifugar a 3000 rpm durante 10 min
3. Descartar sobrenadante
4. Agregar 4ml de la solución de Tris y Nacl, agitar por 2 minutos
Cual es la función de estos dos
reactivos?_______________________________________
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5. Como esta especificado en el esquema, es decir por
los bordes del tubo agregar 2-3 ml de isopropanol
frio a la mezcla
Para que se agrega el Isopropanol?
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6. Observar el parte de superior de la mezcla el DNA que se ve como motas

de algodón