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Identificación molecular de Sarcocystis

arieticanis en ovinos, mediante NESTED-PCR,
PCR del gen 18S (ssu rRNA) y secuenciamiento

Conference Paper · September 2004

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3 authors, including:

Armando Hung Nino Arias

Universidad Peruana Cayetano Heredia Universidad Peruana Cayetano Heredia
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 Identificación molecular de Sarcocystis arieticanis en ovinos, mediante NESTED-PCR, PCR
del gen 18S (ssu rRNA) y secuenciamiento.

Armando Hung, Giuliana Medrano y Nino Arias.

Universidad Peruana Cayetano Heredia.

Resúmenes del XVII Congreso de Ciencias Veterinarias. Tacna, Perú. Septiembre 2004
página 115

RESUMEN
Los ovinos pueden ser infectados con Sarcocystis mediante la ingestión de agua y alimentos
contaminados con ooquistes de canes infectados. Sarcocystis tenella y Sarcocystis arieticanis son
dos especies patogénicas que afectan a los ovinos. Estas especies forman microquistes en su
hospedero intermediario, el ovino y la severidad de la enfermedad depende de la dosis y del
estado inmune del hospedero. La identificación y clasificación de las especies de Sarcocystis
tradicionalmente ha sido basada en la morfología ultraestructural del quiste. El propósito del
presente estudio fue identificar molecularmente la especie de Sarcocystis que afecta a los ovinos
de la sierra del Perú. Para ello, se colectaron muestras de tejido muscular cardiaco de ovinos en el
camal de Pilpichaca, Huancavelica. Las muestras colectadas que tuvieron la presencia de
microquistes (observadas al microscopio de luz) fueron procesadas para la extracción de ADN
genómico del parásito. El nested-PCR fue realizado empleando los primers ST1/AP2 y 8/ST3
para S. tenella y STA/SA2 y universal/SA1 para S. arieticanis. El nested-PCR produjo un
fragmento de 1,548 pb en el primer PCR y otro de 375 pb correspondientes al gen ssu rRNA,
coincidiendo con el patrón de S. arieticanis. El PCR 18S fue realizado utilizando los primers
1055F Y 3475 diseñados para la amplificación de la región conservada del gen 18S (ssu rRNA)
de Sarcocystis. Los amplicones de dicho PCR produjeron un fragmento de 212 pb, los cuales
fueron purificados a partir del gel de agarosa y secuenciados en un secuenciador ABI. El
alineamiento de las secuencias fue realizado empleando los programas Vector NTI y BLAST. La
secuenciación de este fragmento presentó una similitud de 98% con la especie S. arieticanis. No
se amplificó ningún fragmento con los primers para S. tenella. Con el presente trabajo de
investigación se logró identificar molecularmente por primera vez en el país a S. arieticanis,
como la especie causante de sarcocistiosis en los ovinos de la sierra del Perú.

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