I.

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué es importante conocer los métodos de extracción, purificación e

inmovilización de enzimas?
Debido a la gran importancia biotecnológica que han adquirido estas enzimas,
es necesario saber como se realiza la obtención de lipasas relativamente puras
en el laboratorio, para su posterior aplicación.

2. ¿Qué son las lipasas extracelulares?

Son enzimas que fueron producidas dentro de la célula, pero que son
transportadas al exterior para poder degradar los lípidos presentes en el
ambiente, y que estos puedan ingresar a la matriz celular para ser aprovechados.

3. ¿Cuál es el método más utilizado para la extracción de lipasas?

Debido a que la mayoría de lipasas producidas son extracelulares, la extracción
se realiza directamente desde el medio de cultivo de los microorganismos
productores de estas enzimas, así se evita usar métodos de lisis celular.

4. ¿Cuál es la clasificación de los métodos de lisis celular?

Los métodos de lisis celular se pueden clasificar en métodos mecánicos y no
mecánicos, a su vez los métodos mecánicos se pueden clasificar en métodos
físicos, métodos químicos y métodos enzimáticos.

5. ¿Cómo funciona la lisis celular por detergentes?

Se utilizan sustancias anfóteras las cuales se unen a los lípidos de la pared celular
de los microorganismos formando micelas, esto desestabiliza la pared celular y
permite la extracción de la enzima del interior de la célula.

6. ¿Cuáles son los mejores métodos para purificar una lipasa?

la mejor manera de lograr la purificación de las lipasas es optando por la
cromatografía de afinidad, tal como la cromatografía de interacción hidrofóbica

7. ¿Cómo funciona el método de purificación por micelas inversas?

Este método utiliza solventes orgánicos unidos a surfactantes, estas sustancias
van a formar micelas inversas con las enzimas de interés, las micelas son
extraídas posteriormente en otro medio y separadas las enzimas.

8. ¿Cuánto disminuye la actividad al inmovilizar una enzima?

Disminuye un 25%

9. ¿En qué consiste en método de atrapamiento?

Consiste en la retención física de la enzima en las cavidades interiores de una
matriz sólida porosa constituida generalmente por polímeros del tipo
poliacrilamida, colágeno, alginato, carraginato o resinas de poliuretano.
10. ¿Qué interacciones intervienen en la adsorción para que una enzima se
una a un soporte?
mediante interacciones iónicas, fuerzas de Van der Waals y por puentes de
hidrógeno.