SALMONELLA

Tipos de medios y tipos de cultivos

1. Objetivos
1.1 Objetivo general

* I n v e s t i g a r l a p r e s e n c i a d e Salmonella en alimentos de consumo humano.

1.2 Objetivos especficos

* R e a l i z a r u n r e c u e n t o d e Salmonella

* C onocer el m t od o de anl i si s y el uso de l os m edi os de c ul t i vo

2. Fundamento terico
El gnero Salmonella se incluye en la familia Enterobacteriaceae, integrada por bacilos
Gram ne gat i vos an a erobi os facul t at i vos. P oseen, por l o t ant o, l as car ac
t er s t i cas generales de las enterobacterias: son fermentadores de la glucosa,
catalasa positiva,oxidasa negativa y suelen ser mviles; representa una excepcin Salmonella
gallinarum,siempre inmvil.La nomenclatura deSalmonella es compleja. Se han usado
diferentes sistemas parareferir a este gnero. Teniendo en cuenta que estas bacterias
tienen una muy importantehomologa general de su ADN, deberan ser caracterizadas
como dos nicas especies.Esta propuesta, formulada por Le Minor y Popoff en la
dcada de los ochenta, no hasi do com pl et a m ent e ac ept ada.
El gnero Salmonella es de taxonoma difcil, modificada en estos ltimos aos por el
aporte de estudios moleculares de homologa de ADN que han clarificado el panorama
taxonmico de las enterobacterias.
Para la bacteriologa clnica, la Salmonella es un bacilo patgeno primario
(como Shigella, Yersinia y ciertas cepas de E. coli), anaerobio facultativo, algunos
mviles y no fermentan la lactosa. S. typhi es la nica serovariedad que no produce gas
en la fermentacin de los azcares.
Clsicamente se distinguan tres nicas especies patgenas primarias: S. typhy, S.
cholerae-suis y S. enteritidis. A su vez, segn la serotipificacin de Kauffman y White,
estas se clasificaban en ms de 2000 serotipos con base en antgenos flagelares H
(proteicos) y antgenos somticos O (fraccin polisacrida del lipopolisacrido bacilar).
La S. typhi posee adems un antgeno de virulencia (Vi).
El tratamiento taxonmico actual de Salmonella ha simplificado el espectro y
reagrupado as todas las cepas (patgenas o no) en dos nicas especies: S. enterica y S.
bongori. sta ltima (antes subespecie V) no es patgena para el ser humano.
La especie S. enterica tiene seis subespecies (a veces presentadas como subgrupos
bajo numeracin romana):

I enterica
II salamae
IIIa arizonae
IIIb diarizonae
IV houtenae
V S. bongori, ya incluida en una especie distinta
VI indica
La salmonelosis es una enfermedad de transmisin alimentaria, en especial por
alimentos de origen animal; pueden aparecer en brotes en escuelas, guarderas,
restaurantes y residencias de ancianos. El perodo de incubacin es por lo general entre
12 y 36 horas, a veces hasta 6 y 48 horas.
El tamao del inculo de Salmonella requerido para causar enfermedad sintomtica en
adultos sanos no est bien establecido. En general, se necesita una inoculacin
relativamente grande, entre y organismos.6 En un humano voluntario, apenas
25 organismos fueron suficientes para producir la enfermedad. En otro estudio con 12
voluntarios que ingirieron entre 17 y organismos, en ms de la mitad de los casos,
fueron suficientes menos de 1000 organismos.7
Al ser estas bacterias muy poco resistentes a los medios cidos, no sobreviven en el
estmago. Sin embargo, un pH estomacal artificialmente elevado, poco cido, reduce
enormemente el nmero de organismos necesario para provocar sntomas. Los
microorganismos que llegan hasta el intestino se topan con otras dos defensas: la
rapidez del trnsito intestinal y la flora bacteriana normal. Los que logran vencer estas
defensas, se adhieren a la mucosas y producen bien algn patrn: bien uno secretor
(diarrea aguda acuosa), bien uno invasor (enfermedad clnica conocida como fiebre
entrica, fiebre tifoidea o fiebre paratifoidea).6 7
La salmonella habita normalmente en la superficie de los huevos, la piel de tomates y de
aquellos frutos y verduras que tienen contacto con la tierra.
La fiebre tifoidea es otra de las enfermedades que pueden ocasionar las bacterias del
gnero Salmonella. Habitualmente esta enfermedad la provocan cepas de Salmonella
enterica susp. enterica serotipo Typhi (Salmonella Typhi). El nico reservorio de
la Salmonella Typhi es el hombre, de modo que se transmite de persona a persona.
Microbiologa
Salmonella crece con facilidad en agar sangre formando colonias de 2 a 3 milmetros.
En laboratorios de microbiologa clnica se asla con medios selectivos Selenito,
Hektoen, SS o XLD para inhibir el crecimiento de otras bacterias patgenas y de
la flora intestinal saprfita. Tienen los siguientes antgenos:

Somtico O, del lipopolisacrido en la pared celular, termoestable y es la base de la

clasificacin en subgrupos.
Flagelar H, de la protena flagelina, termolbil, es la base de la clasificacin de
especies.
Envoltura Vi, termolbil, responsable de la virulencia de varias especies
patognicas.

3 -. Materiales y Medios

Cajas Petri
Tubos de ensayo con tapones
Pipetas
Matraz Erlenmeyer
Desinfectante
Alcohol (70%)
Mechero de alcohol

Muestra de chorizo (25g triturado)

Medio : XLD
Agar : TSI
3. Metodologa

1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.

2. En una balanza pesar 25 gr de muestra ( Chorizo) intruducirlo en una bolsa de

estomache.

3. En una probeta medir 225 ml de agua tamponada y mezclar con los 25 gr de la muestra
homogeneizar e incubar durante 24 hrs y T = 37C 1C

4. Con una pipeta sacar un 1 ml y aadir al caldo tetrationato (10ml) se incuba a 42C 1C
durante 24 hrs

5. Una ves transcurrido el tiempo de incubacin homogenizar nuestro tubo y con una asa
volumtrica sembrar por estra en XLD incubar durante 24 48 hrs a T= 37C 1C

6. De nuestro medio solido XLD aislar una colonia tpica salmonella y sembrar en TSI ,
LIA , MIO y CS con asas de punta de aguja.

7. El agar TSI con una aguja de inoculacin hacer estra y una picadura en el fondo y
incubar a 37C 1C durante 24 hrs
8. El agar LIA con una aguja inoculacin hacer una picadora en el fondo y estriar al pico
de flauta y incubar a 37C 1C durante 24 48 hrs
9. El agar MIO solo realizar picadura incubar a 37C 1C durante 24 hrs

10. el agar CS solo realizar estria e incubar a 37C 1C durante 24 hrs

11. 37 C (1 C) durante 48 horas .

12. confirmacin serolgica de las colonias sospechosas.

4. Datos y clculos

5. Resultados

Se eligi la placa 10-5 para el recuento de colonias dando 28

6. Observaciones
7. Conclusiones

8. Cuestionario

9. Bibliografa

http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan/013761/013761-05.pdf
http://html.rincondelvago.com/salmonella.html
http://www.anmat.gov.ar/renaloa/docs/Analisis_microbiologico_de_los_alimentos_Vol_I.pdf