INTRODUCCIN

El diagnstico Gentico Preimplantacional (DGP) es un nuevo mtodo de

diagnstico que se realiza en el embrin antes de su implantacin en el
tero. El DGP informa sobre el estado de cada uno de los embriones
concebidos, y permite que nicamente los sanos sean transferidos al
tero. La tcnica del DGP es el resultado de la combinacin de una
Fecundacin in Vitro y el anlisis gentico.

El DGP ha demostrado ser tcnicamente posible en la deteccin de

enfermedades monognicas, anomalas cromosmicas estructurales y
embriones aneuploides, usando diferentes tcnicas tanto para la biopsia
como para el diagnstico molecular. Para enfermedades monognicas, el
PCR mediante marcadores fluorescentes se ha convertido en el estndar
de oro.

La FISH es la tcnica que se emplea cuando se desea estudiar tanto

anomalas cromosmicas como estructurales.

El objetivo principal del DGP es ayudar a las parejas con riesgo elevado
de transmisin de enfermedades genticas a tener hijos sanos.
 OBJETIVOS

Definir al Diagnstico Gentico Preimplantacional.

Mencionar los pasos para el Diagnstico Gentico

Preimplantacional.

Identificar los tipos de Diagnstico Gentico

Preimplantacional.
 DIGNOSTICO GENTICO PREIMPLANTACIONAL

El Diagnstico Gentico Preimplantacional (DGP) es un mtodo de

laboratorio especialmente dirigido al estudio gentico de los embriones
antes de ser transferidos y por lo tanto antes de que se haya producido
la implantacin, para determinar si padecen alguna enfermedad
hereditaria o si son portadores de algn factor gentico de riesgo de
enfermedad.

CANDIDATOS E INDICACIONES DEL DIAGNSTICO GENTICO

PREIMPLANTACIONAL

En sus inicios el DGP se plante como una alternativa al diagnostico

prenatal y a la posterior interrupcin del embarazo en los casos afectos
y se dirigi a portadores de enfermedades genticas graves. Durante los
primeros aos de sus aplicaciones clnicas, las posibilidades diagnosticas
fueron limitadas, centrndose en unas pocas enfermedades
monognicas y en ciertas anomalas cromosmicas. No obstante, la
evolucin del DGP a lo largo de los ltimos aos ha sido notable y las
indicaciones en las que se puede plantear un DGP han aumentado sin
cesar.

Se consideran candidatos a DGP: los portadores de enfermedades

monognicas de las que se dispone de un diagnostico fiables, los
portadores de anomalas cromosmicas estructurales o numricas, las
parejas con fallos de repetidos de implantacin en ciclos de FIV, las
pacientes de ciclos FIV mayores de 35 aos y los factores masculinos
severos. As pues, el mbito principal de aplicacin del DGP sigue siendo
la deteccin de enfermedades hereditarias graves as como la de
alteraciones que puedan comprometer la viabilidad del preembrin. Se
considera que el DGP esta indicado cuando el diagnostico gentico sea
tcnicamente posible, su fiabilidad sea elevada, las posibilidades de
xitos sean aceptables y las tcnicas de reproduccin asistida sean
factibles .

Las posibilidades que se plantean a travs del DGP estn superando con
creces las previsiones de futuro que se haban planteado a principios de
los aos 90. Las aplicaciones del DGP ya no quedan limitadas a
patologas que puedan manifestarse en recin nacidos, y en la
actualidad su aplicacin puede ir dirigida a evitar la manifestacin de
enfermedades de predisposicin gentica de aparicin tarda o a su
realizacin para fines teraputicos a terceros (por ejemplo, la
caracterizacin gentica dirigida a evitar la transmisin de una
determinada enfermedad y a su vez determinar la compatibilidad para
disponer de clulas de cordn umbilical que nos permita realizar un
trasplante a un hermano/a enfermos).
DESCRIPCIN DEL PROCEDIMIENTO

El DGP es un procedimiento complejo que involucra varios pasos:

Hiperestimulacin ovrica:
Para producir muchos ovocitos que puedan ser fecundados in vitro.
Los ovocitos son obtenidos mediante aspiracin por
ultrasonografa transvaginal.

Fecundacin en el laboratorio (in vitro) de los ovocitos

obtenidos mediante la inyeccin intracitoplasmtica de
espermatozoides (ICSI). Aun cuando en muchos casos se podra
incubar los ovocitos y espermatozoides para que ocurra la
fecundacin, la ICSI es la tcnica de eleccin cuando se trata de
un factor masculino, fallos anteriores en TRA o cuando se va a
estudiar una enfermedad que requiera el uso de tcnicas de
biotecnologa molecular, ya que la presencia del material gentico
de los espermatozoides que no logran fecundar y de las clulas de
la granulosa (que rodean al ovocito) puede llevar a errores en el
diagnstico. Los ovocitos fecundados mediante ICSI son colocados
en medios de cultivo adecuados e incubados hasta que alcancen
generalmente el estadio de 8 a 12 clulas.

Biopsia o extraccin de una clula blastmera del embrin,

generalmente al tercer da del procedimiento (6-8 clulas). La
biopsia se realiza en este momento porque el embrin tiene
suficientes clulas para que la prdida de una no comprometa su
desarrollo y porque el embrin no ha empezado a compactarse. El
embrin biopsiado se coloca posteriormente en las condiciones.
Una vez realizada la biopsia, el embrin es devuelto al incubador
del Laboratorio, donde se mantendr en cultivo in Vitro con las
 condiciones ambientales adecuadas para continuar su desarrollo
hasta el momento de la transferencia al tero de la paciente.

Anlisis gentico diagnstico:

La clula obtenida mediante biopsia es procesada para su anlisis

y sometida a estudio gentico.

Transferencia embrionaria:
El resultado del anlisis gentico se transmite al equipo de
reproduccin asistida mediante informe detallado y se decide qu
embriones van a ser transferidos en funcin de la dotacin
cromosmica y de las caractersticas morfolgicas de viabilidad
embrionaria.

La transferencia se realiza inmediatamente despus del anlisis,

habitualmente 4 o 5 das despus de la recuperacin de los vulos.

BIOPSIA DEL OVOCITO O DEL EMBRIN

El DGP se puede realizar en diferentes etapas del desarrollo embrionario

que incluye: ovocito, estadio de 6 a 8 clulas y blastocisto.
Independientemente del estadio en el cual se efecte la biopsia, la
perforacin de la zona pelcida es lo primero que hay que hacer. sta
debe ser pequea, pero debe permitir sacar la clula necesaria para el
estudio, asimismo no deben causarse dao a las clulas embrionarias
restantes.
La biopsia se puede efectuar mediante distintos mtodos tales como:

Mecnico, mediante una aguja o una pinza. Este mtodo se

empleo inicialmente.

Qumico, usando una solucin cida de Tyrode. Se efecta

tratando una porcin de la zona pelcida del embrin con una
solucin cida (pH 2,3). El tamao de la perforacin depende del
tiempoi de exposicin del cido.
Segn la European Society for Human Reproduction and
Embriology (ESHRE), hasta 2002, 60% de las biopsias (3 530/5 891
ciclos) se haban efectuado con este mtodo. Estos datos lo
colocan como el mtodo ms utilizado por los centros que
efectan DPG.

Fototermlisis empleando un lser. El tamao de la perforacin

depende del tiempo de exposicin a la luz del lser, a mayor
exposicin el agujero ser mayor.

TIPOS DE DIAGNSTICO GENTICO PREIMPLANTACIONAL (DGP)

Se pueden realizar bsicamente tres tipos de DGP:

DGP para el estudio de aneuploidas: en los casos de

esterilidad, es frecuente realizar este tipo de anlisis en los
embriones. Se estudia la dotacin cromosmica del embrin, es
 decir, el nmero de cromosomas que tiene el embrin. Esto
permite seleccionar solo aquellos embriones con el nmero
correcto de cromosomas. Se recomienda cuando:

La mujer tiene ms de 38 aos: edad materna avanzada.

La pareja ha tenido 2 o ms abortos: abortadoras de

repeticin.

Alteraciones cromosmicas en los espermatozoides: FISH en

espermatozoides.

Alteraciones en el proceso de la meiosis masculina: estudio

de meiosis alterado.

Dos o ms ciclos realizados de Fecundacin in Vitro sin

embarazo: Fallos de implantacin.

DGP para el estudio de anomalas cromosmicas: cuando

uno de los dos miembros de la pareja es portador de una anomala
cromosmica en el cariotipo (por ejemplo: translocacin,
inversin). En estos casos se analizan los embriones con el
objetivo de seleccionar aquellos que son sanos o equilibrados para
la anomala cromosmica estudiada.

An cuando tericamente el DGP puede aumentar las

posibilidades de tener un hijo sano a un portador de una
translocacin balanceada, hay limitaciones para este estudio.

Generalmente el DGP se hace por FISH utilizando diversas

combinaciones de sondas (locus especficas, -satlite o
subtelomricas) que cubran el punto de ruptura de una
translocacin o inversin cromosmica dada y que permitan
determinar el estatus del embrin. Por lo general, las sondas
 necesarias son caso-especficas lo cual hace que el procedimiento
sea costoso y los tiempos para optimizar la prueba sean largos.

DGP para el estudio de enfermedades hereditarias

monognicas: cuando uno de los dos miembros de la pareja es
portador de una enfermedad hereditaria monofnicas (por
ejemplo: fibrosis qustica, distrofia muscular).

Actualmente disponemos de mtodos eficientes para llevar a cabo

el anlisis de secuencias especficas de DNA que permiten la
identificacin de numerosas alteraciones relacionadas con
patologas genticas de herencia monognica. El anlisis
molecular de las biopsias suele llevarse a cabo a partir de la
amplificacin especfica de secuencias de DNA, utilizando diversos
protocolos de PCR y de estrategias de anlisis de los productos
obtenidos (multiplex PCR, PCR fluorescente, PCR en tiempo real,
deteccin directa de mutaciones, estudios indirectos de
marcadores).

El nmero de enfermedades hereditarias susceptibles de ser

diagnosticadas mediante DGP sigue siendo limitado si lo
comparamos con las que pueden ser detectados a travs de un
diagnstico prenatal. No obstante, las posibilidades para abordar
anlisis genticos en clulas nicas aumentan da a da, el listado
de enfermedades y de patologas hereditarias susceptibles de ser
detectadas mediante DGP no deja de ampliarse y ya se acerca a
las doscientas. Entre los diagnsticos ms frecuentes observamos
los dirigidos a evitar la transferencia de embriones afectos de
fibrosis qustica, -talasemia, atrofia muscular espinal, distrofias
miotnicas, distrofia muscular de Duchenne y Becker, hemofilia A
y B, enfermedad de Huntington y X frgil.
 DGP para el estudio de enfermedades ligadas al sexo:

ENFERMEDADES POR LAS QUE SE HACE DGP

Las indicaciones ms frecuentes del DGP son, segn muestran los datos
ms recientes del consorcio ESHRE + (european society human
reproduction and embriology) y por orden de frecuencia:

Alteracin cromosmica (41,4%)

Ligada al sexo (18,8%),
Autosmica recesiva (18,6%)
Autosmica dominante (16,3%).

El siguiente listado muestra diversas enfermedades en las que se ha

publicado la prctica de esta tecnologa.

Autosmicas recesivas
1. Fibrosis Qustica
2. Atrofia Muscular Espinal tipo I o enfermedad de Werdnig-Hoffmann .
3. Talasemia
4. Anemia Falciforme
5. Fenilcetonuria
6. Enfermedades metablicas
7. Incompatibilidad factor Rhesus D.

Autosmicas dominantes
1. Distrofia Miotnica o Enfermedad de Steinert
2. Enfermedad de Huntington.
3. Enfermedad Charcot-Marie-Tooth
4. Poliquistosis renal autosmico dominante
5. Sndrome de Marfan
6. Neurofibromatosis Tipo I
Ligadas al cromosoma X
1. Sndrome del X frgil.
2. Distrofia Miotnica de Duchenne/Becker
3. Hemofilia A y B.
4. Enfermedad de Lesch-Nyhan
5. Sndrome de Hunter
6. Deficiencia en G6PD
7. Enfermedad de Kennedy
8. Hipofosfatemia
9. Incontinencia pigmento
10. Enfermedad de Charcot-Marie-Tooth ligada al X
11. Sndrome de Alport.

NUEVAS APLICACIONES

Trabajos recientes han ampliado y refinado el alcance del DGP ya que

emplean biopsias mltiples que incluyen ambos cuerpos polares para la
deteccin de enfermedades monognicas y una blastmera para la
deteccin de aneuploidas. De esta manera, no slo se conoce el estatus
para una enfermedad en particular sino que adicionalmente se estudia
la composicin cromosmica del embrin antes de ser transferido.

Un enfoque similar se emplea para estudiar embriones de parejas con

hijos afectados de enfermedades hematolgicas que necesitan un
trasplante, en este caso se estudia por PCR (en ambos cuerpos polares)
que los embriones no tengan el defecto gentico y se determina el
haplotipo de HLA para que sea compatible con un hermano que necesita
un trasplante y se hace el descarte de aneuploidas mediante PCR. Este
tipo de enfoque mltiple, aunque tcnicamente difcil, es el futuro
diagnstico preconcepcional y preimplantacional.

UTILIDAD
 Los cnceres hereditarios representan entre un 5-10% de todos los
tumores, siendo consecuencia de mutaciones germinales en genes que
incrementan la susceptibilidad para padecer cncer. Se hereda la
susceptibilidad a padecer cncer, una susceptibilidad que se transmite
segn distintos patrones de herencia. En los ltimos 20 aos, se han
identificado unos 40 genes implicados en sndromes de predisposicin
hereditaria al cncer.

Partiendo de estos progresos, y como apunta la Dra. Ana Polo, del

Programa de Reproduccin Asistida del Hospital de Sant Pau-Fundaci
Puigvert de Barcelona, se ha comprobado como el DGP puede ser til
en la prevencin de embarazos con embriones que manifiestan una
alta susceptibilidad para padecer cncer, representando hoy en da una
alternativa al diagnstico prenatal (DP). En cualquier caso, como
matiza el Dr. Brunet, en el mbito de los centros pblicos no consta
ningn caso llevado a cabo, al menos en los sndromes hereditarios,
ms frecuentes como el cncer de mama y de colon.

La realizacin de un DGP en cncer hereditario debera estar sujeta a

una serie de requisitos, que pasan necesariamente por la consulta de
consejo gentico (donde se informa sobre la probabilidad de transmitir
a su descendencia la predisposicin al cncer y la probabilidad que
tienen sta de desarrollar neoplasias), la intervencin de un equipo
multidisciplinar (genetistas, onclogos, psiclogos, radilogos,
gineclogos, cirujanos), la estricta valoracin del riesgo de transmisin
del tumor hereditario, la implementacin de un estudio gentico y el
asesoramiento sobre medidas de deteccin precoz o prevencin
disponibles en el momento actual, analizando su eficacia y
limitaciones.
En general, tal y como resume la Dra. Esther Fernndez Garca,
presidenta del grupo de DGP de la Asociacin para el estudio de la
Biologa de la Reproduccin (ASEBIR), las parejas que suelen acudir al
DGP con una indicacin gentica son aquellas con enfermedades
monognicas (dominantes, recesivas o ligadas al X) y cuya mutacin es
conocida, aquellas con trastornos ligados al X cuya mutacin es
conocida o no pero que se evita con la seleccin de sexo y las que
refieren anomalas cromosmicas estructurales o numricas. Con
todo, destaca, las indicaciones del DGP se estn ampliando,
apareciendo otras no contempladas en el diagnstico prenatal (como la
histocompatibilidad para trasplante, las enfermedades degenerativas,
la predisposicin gentica al cncer, el BRCA2, el Li-Fraumeni o la
neurofibromatosis 1 y 2).
Segn la ginecloga Ana Polo, el DGP es una posibilidad para lograr
una descendencia sana realizando el diagnstico de manera precoz,
pero el camino es complicado. En este sentido, indica, es necesario
contar con unas guas sobre planificacin de descendencia en cnceres
hereditarios, que reflejen la realidad legislativa, tica y social de
nuestro pas.

En la misma lnea se expresa la Dra. Esther Fernndez, para quien el

DGP es en la actualidad una herramienta prctica para las Unidades
de Reproduccin Asistida y una alternativa real al Diagnstico
Prenatal.
 CONCLUSIONES

Se logr definir al Diagnstico Gentico Preimplantacional.

 Se lleg a mencionar los pasos para el Diagnstico Gentico
Preimplantacional.

Se logr identificar los tipos de Diagnstico Gentico

Preimplantacional.

REFERENCIAS

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