Castrop H, IM Schiel.

Fisiologa y Fisiopatologa de la renal Na-K - 2Cl

cotransporter (NKCC2). AM J Physiol Renal Physiol 307: F991-F1002, 2014. Firstpublished 03 de

septiembre de 2014; cotransporter de doi:10.1152/ajprenal.00432.2014.The Na-K - 2Cl
(NKCC2; BSC1) se encuentra en la membrana apical de las clulas epiteliales del miembro
ascendente grueso del lazo de Henle (TAL). NKCC2 facilita el 20 25% de la recaptacin del total
filtrada carga de NaCl. NKCC2 es thereforeone de las protenas de transporte con el mayor
general reabsorptive capacidad en el rin. En consecuencia, cambios incluso sutiles en la
actividad de transporte NKCC2 modificar considerablemente la capacidad reabsorptive renal de
NaCl y causar toperturbations de la homeostasis de agua y sal. Adems de facilitar la reabsorcin
de la mayor parte de NaCl en el TAL, NKCC2 actividad de transporte en las clulas de densa del
macula de la TAL constituye el paso inicial de la comunicacin tubular vascular dentro del
aparato yuxtaglomerular (JGA); esta comunicacin permite el TAL modular la resistencia
preglomerular de la arteriola aferente y la secrecin de renina de las clulas granulares de la
JGA. Esta revisin proporciona un resumen de nuestros conocimientos actuales con respecto a
las funciones generales de NKCC2, la modulacin de su actividad de transporte por diferentes
mecanismos y nuevos desarrollos en la fisiopatologa del transporte renal de NaCl NKCC2-
dependiente.

HUMANOS riones filtran aproximadamente 1,5 kg de NaCl y 180 litros de agua cada da. La
mayor parte de la carga ltered es reabsorbida a lo largo del sistema tubular y los conductos
colectores, que se traduce en la formacin de 1.5 litros de orina al da. En total, 20-25%
ofthelteredNaClisreabsorbedalongthethickascending miembro del lazo de Henle (TAL),
mientras que prcticamente no hay agua es reabsorbido en esta porcin de la nefrona por la
falta de permeabilidad paracelular y transcelular. La va principal entrada apical para NaCl es
proporcionada por el cotransporter de Na-K - 2Cl, NKCC2 (BSC1, sensible a la bumetanida
cotransporter 1), que representa el 80% de la total reabsorcin sal oftheTAL(52,64).
ThedrivingforceforNKCC2-dependentsalt transporte es proporcionado por la actividad de la
basolateral Na-KATPase; conductividad de cloruro basolateral (canales clcnkb) y apical K
reciclaje va canales ROMK completan el transporte transcelular red de NaCl en el TAL (53).
NKCC2 es codificada por un solo gen, pero empalme diferencial de su pre-ARNm da lugar a varias
isoformas de empalme, que difieren notablemente en sus caractersticas de transporte y en su
localizacin a lo largo de la lat (46, 63). Tres isoformas diferentes, NKCC2B, NKCC2A y NKCC2F,
se diferencian en el exn variable 4, que codifica los aminocidos del segundo dominio
transmembrana y las partes del lazo intracelular adyacente de cotransporter (96, 114). Esta
porcin de especficas de NKCC2 ha sido crucial para el atascamiento de cloruro. Adems de
estos tres isoformas de larga duracin, variantes truncadas de NKCC2 se han divulgado; estas
variantes difieren en la porcin c-terminal de la protena y aumentar el nmero total de
isoformas NKCC2 a por lo menos seis (96, 114). Adems, isoformas con tndem repite del exn
4, como exn 4A/4F, 4B/4F 4B/4A, han sido descritos (20, 43, 67, 161).

Debido a la alta capacidad de transporte total sal de NKCC2 y su papel crucial en el mecanismo
de concentracin urinario, incluso sutiles modulaciones en la actividad de transporte NKCC2
provocar cambios considerables en la capacidad renal de reabsorptive sal (103). Por lo tanto
inhibidores de NKCC2, conocidos como diurticos de asa, constituyen la clase ms potente de
los diurticos. El profundo impacto de NKCC2 inhibicin en la reabsorcin renal de sal es
reforzado por la capacidad limitada de transporte de la
portionsofthenephrondownstreamoftheTAL, suchasthedistal enrevesado tbulo o conducto
que recoge. La gran cantidad de sal reabsorcin mediada por NKCC2 es muy probablemente
responsable de la evolucin de una compleja red de regulacin en el TAL; Esta red modula
expresin NKCC2, diferencial de splicing del pre-mRNA, superficie trafcking, actividad de
transporte especficas y, en ltima instancia, TAL sal reabsorptive capacidad. La red reguladora
que expresin controles NKCC2 y actividad comprende hormonas sistmicas (como la
angiotensina II, catecolaminas y vasopresina) y paracrina/autocrina factores (como el xido
ntrico), que modulan la compleja red de sealizacin intracelular de las clulas epiteliales de
TAL (61).

La recuperacin sal NKCC2-dependiente en el TAL contribuye substancialmente a la general sal

reabsorptive capacidad del rin; Adems, NKCC2 actividad de transporte inicia tubularvascular
Cruz hable dentro del rin (81, 126). As transporte sal NKCC2dependent es el primer paso que
une a la concentracin tubular de cloruro en la mcula densa (MD) para el control del tono de
la arteriola aferente y, finalmente, la tasa de ltration glomerular (GFR) de la nefrona respectiva
(129). Este mecanismo se denomina retroalimentacin tubuloglomerular (TGF) (143), y causa
una constriccin de la arteriola aferente y por lo tanto disminuye la nefrona nica (sn) GFR
cuando aumenta la concentracin de cloruro tubular en el MD. En consonancia con el papel de
NKCC2 como sensor tubular de sal, TGF est virtualmente ausente en presencia de diurticos.
Adems de controlar la resistencia preglomerular, transporte sal MD NKCC2 dependiente
constituye el paso inicial del control de MD de la secrecin de renina de las clulas granulares
de la arteriola aferente (137); Este paso parece ser particularmente relevante en la regulacin a
corto plazo del sistema renina-angiotensina (104).

Reglamento de transporte de sal dependiente NKCC2

Regulacin de la expresin NKCC2, trafcking superficial y actividad de transporte. Teniendo en

cuenta el papel clave de NKCC2 en reabsorcin sal Valle, parece lgico que la expresin de genes,
trafcking la superficie y la actividad especficas del cotransporter de la membrana estn
estrictamente regulados. Dos principales vas reguladoras afectan la actividad de expresin y de
transporte de membrana de NKCC2: las vas del AMPc y GMPC, con la primera estimuladora y el
ltimo ser inhibitorio. SeveralhormonesandparacrinefactorsmaymodulatetheTAL niveles de
cAMP intracelulares. la expresin de la mayora es vasopresina (64, 65, 94, 138), aunque algunos
datos sugieren que los niveles de campo en Valle humano aislado no pueden verse afectados
por la vasopresina (27). Otras hormonas, que no estn relacionadas con la homeostasis de NaCl
principalmente, estn tan involucrados, glucagn, calcitonina, hormonas paratiroideas y
catecolaminas (35) como. Adems, los factores que activan el receptor sensor de calcio (CaR),
como Ca2, mg 2 y aminocidos (revisados en detalle en Ref. 45), pueden modular los niveles de
campo de las clulas del valle. Ms estudios de abordar la funcin de las hormonas de este
ltimo en NKCC2 Reglamento fueron realizados en Valle aislada y en cultivo celular y la
contribucin de estos factores in vivo a
overallNKCC2regulationmuststillbedetermined.Hormones, como endotelinas, pptidos
natriurticos atriales y el xido ntrico generado localmente, aumentan Valle de niveles
intracelulares de cGMP. Al parecer, cGMP contrarresta los efectos de las vas reguladoras de
cAMPelevating por activacin de la fosfodiesterasa de cAMPdegrading 2 (4, 66, 107, 108). A su
vez, cAMP es el mediador clave de estimulante de la regulacin de NKCC2 y afecta as a la
expresin de genes, el trafcking superficial y la actividad de especficas de cotransporter (5,
34). NKCC2 genes. NKCC2 (BSC1) es codificada por el gen Slc12a1 (familia portador absoluto 12,
miembro 1). cAMPresponsive elemento se identifican en el promotor Slc12a1 y es probable que
sean funcionalmente relevantes (68). Aunque no hay estudios de eliminacin especficas se han
realizado en el elemento cAMPresponsive del promotor NKCC2, parece que la estimulacin de
la expresin NKCC2 observado en situaciones de aumento intracelular campo de la formacin,
como los causados por vasopresina durante la restriccin de agua, est mediada por los efectos
directos del campo en el promotor Slc12a1. Adems de ser modulado por la actividad
transcripcional, la abundancia total de NKCC2 protena parece ser dependiente de mecanismos
transcripcionales post (141). As, en ratones con la eliminacin de uno de los alelos del gen
Slc12a1, niveles de transcripcin son 50% de los ratones de tipo salvaje, mientras que los niveles
de protena son indistinguibles de la de tipo silvestre, dando por resultado el fenotipo aparente
nm. en NKCC2 / animales (141).

Trafcking NKCC2 y nivel. Cambios en levelsarefunctionally de

expressioninresponsetoincreasedcAMP NKCC2 relevante slo si son algunas por casa de campo
correspondiente en la expresin superficial del cotransporter. En la abundancia de la evidencia
sugiere que la trafcking de NKCC2 a la membrana apical de las clulas es facilitado por la va de
campo del Valle (17, 48, 92, 106). Experimento usando el inhibidor de la PKA H-89 haba sugerido
que activa el campo de la migracin de las vesculas que contienen el NKCC2 a la superficie de
la clula por una membrana PKAdependentprocessbecausetheabundanceofNKCC2intheapical
Valle, que redujo en un 60% en presencia de H-89 (17). No queda claro si la inhibicin parcial de
NKCC2 superficial trafcking qu relacin a en la inhibicin de la inefcient de PCA o si pueden
indicar que los restantes trafcking NKCC2 ocurre de manera independiente de la PKA.

Para identificar las quinasas implicadas en el nivel de NKCC2 se hicieron considerables esfuerzos
en los ltimos aos. Las quinasas mejor caracterizadas son el SPAK (Ste20 y cinasa prolina SPS1
relacionadas- y ricos en alanina) y OSR1 (o quinasa sensible al estrs oxidativo) quinasas (111).
SPAK y OSR1 son altamente homlogas quinasas y mediar el nivel de hypotonicityinduced de
NKCC2 (121). Global SPAKdecient ratones son hipotensos y, sorprendentemente, demostr
mayor expresin NKCC2 y fosforilacin en comparacin con los ratones de tipo salvaje, mientras
que la fosforilacin de la cotransporter abajo situado na-CL (NCC) que reducido, lo que sugiere
que otras quinasas, posiblemente OSR1, compensar el control de NKCC2 (160). Activacin OSR1
y posteriormente hiperfosforilacin de NKCC2 en los globales ratones knockout SPAK fueron
sugeridos a estar mediada por la canceladura de inhibidoras especficas de la Valle y quinasa
defectuoso SPAK isoforma (SPAK2), dando por resultado la desinhibicin de OSR1 (54, 90). Por
el contrario las observaciones en la cepa de ratn SPAKdecient global, un modelo de ratn
knockin de SPAK llevando un mutante SPAK quinasa muertos demostr reduce nivel de NKCC2
y expresin (118).

Candidatos para la preparacin de las quinasas de SPAK/OSR1 incluyen la familia de cinasas WNK
(con no lisina), como WNK3 WNK1 y WNK4 (82, 105, 123). Enfermedades hereditarias raras
como Seudohipoaldosteronismo tipo II (PHAII) demuestran la importancia clnica de cinasas
WNK con respecto a la funcin renal. PHAII es causado por diversas mutaciones de las cinasas
WNK, incluyendo ganar-de-funcin mutaciones o mutaciones sin sentido en WNK4 en WNK1.
Todas estas mutaciones dan lugar a hipertensin volumen-dependiente, sugiriendo que su
efecto global sobre la reabsorcin renal de sal es estimulante e inhibitorio, respectivamente (29,
40, 72, 156, 157). WNK3 facilitatesthephosphorylationofNKCC2byactivationoftheSPAK camino y
puede mediar la deteccin de cloruro de las clulas del Valle (109, 115, 123). Aunque existe
evidencia slida que indica que WNK3 es un estimulador de NKCC2 actividad in vitro, la
importancia global de esta quinasa en vivo parece ser limitada. As, en ratones WNK3-decient,
no obvia prdida de sal lo que observ fenotipo, qu eje que probablemente con el upregulation
compensatoria de WNK1/SPAK (93, 102). Al parecer, la compleja red de quinasas interactuando
en las clulas del valle mantiene la regulacin de NKCC2, que es crucial para la supervivencia y
WNK3 en vivo Foxx la buena afinacin de la funcin reabsorptive tubular en lugar de controlar
la reabsorcin sal a granel. En consonancia con el concepto de mltiples mecanismos
compensatorios, globales SPAK deciency en ratones conducen a hipotensin a pesar de
aumento de la expresin NKCC2 y elevada fosforilacin NKCC2, sugiriendo una regulacin
compensatoria de NKCC2 OSR1 o otras quinasas en clulas del Valle (160). Dos isoformas
diferentes de WNK1 se expresan en el rin, la isoforma ubicua de WNK1 L WNK1 y el rin-
especficas WNK1 isoforma ks WNK1. Estas dos isoformas de WNK1 ejercen efectos opuestos en
el NKCC2 (entre otro sistema de transporte renal de sal) (57). L WNK1 lo demostrado para
estimular la actividad de NKCC2, mientras que el ks WNK1 tiene sobre el efecto inhibidor (28,
84). Basado en las observaciones en ratones con inactivacin gentica de ambas isoformas de
WNK1, los efectos de la activacin WNK1 L en la mayora de las condiciones parecen superar los
efectos de ks-WNK1 (163). La WNK1 animales de esta cepa especficas estaban hipotensos,
sugiriendo otra vez que el efecto neto de L WNK1 y ks WNK1 sobre el transporte tubular de sal
es estimulante. En la tensin generada independientemente de WNK1 ratones, sin embargo,
qu normotensos (140), sugiriendo una marcada influencia de los antecedentes genticos en el
fenotipo y acentuando an ms la gran capacidad compensatoria de las clulas del valle.

Acumular evidencia para vas de fosforilacin adicional de NKCC2, incluyendo, pero

probablemente no se limita a caminos no PKA y la quinasa activada por AMP (AMPK); Estas
quinasas podran proporcionar mecanismos regulatorios adicionales, que pueden ser relevantes
para la vasopresina- y baja-cloruro-dependiente de la fosforilacin de cotransporter,
respectivamente (30, 32, 55, 61, 121). La actividad de estas quinasas puede ser otra explicacin
para al parecer altamente eficiente mecanismos compensatorios, cuyas funciones aumentan si
se compromete la funcin de una de las vas clsicas. La fisiologa de estas quinasas alternativas
con respecto a la fosforilacin de NKCC2 lo revisaron en detalle recientemente (5). Adems, el
nivel normal de NKCC2 requiere la presencia de la protena de Tamm-Horsfall (97). Protena
TammHorsfall es la protena ms abundante en la orina, aunque no tenga ninguna actividad
cinasa intrnseca. As, en ratones de Tamm-Horsfall protena decient, la expresin superficial
de NKCC2 en la membrana apical del valle lo discreto, pero el estado de fosforilacin de Thr96 y
Thr101 lo reduce. La fosforilacin reducida que funcionalmente relevantes porque la diuresis
inducida por furosemida qu redujo de Tamm-Horsfall ratones proteindecient con respecto a
animales de tipo silvestre (97). Las quinasas afectadas y los mecanismos subyacentes, sin
embargo, siguen siendo desconocidos.

Slida evidencia sugiere que la trafcking de NKCC2 a la membrana apical del Valle de las clulas
implica interaccin con la protena de membrana asociada a vesculas 2 (VAMP2).
Coimmunoprecipitation y localizacin de los estudios han demostrado que VAMP2 se asocia con
NKCC2 y que ambas protenas colocalize en los dominios mismos de la membrana apical.
Adems, el VAMP2 trafcking a la superficie celular y la interaccin con NKCC2 fueron
dependientes de cAMP y silenciamiento de VAMP2 por (si) RNA interferentes pequeos haba
abolida la sensibilidad cAMP de la expresin superficial de NKCC2 (18).

Empalme diferencial de NKCC2: bella de ajuste de funcin NKCC2. Splicing diferencial es un

fenmeno comn, que gen Consejo de un gran nmero de protenas diferentes de un nmero
limitado de genes (74). Splicing diferencial afecta varios sodio-potasio de iones, incluyendo
NKCC2, que es codificada por el gen Slc12a1 (42, 46). Spicing alternativo del Len variable 4 del
gen Slc12a1 conduce a la formacin de tres diferentes isoformas de cuerpo entero del NKCC2
cotrans
Protena de Porter; Tesis empalme isoformas difieren en su localizacin a lo largo del valle y las
caractersticas de su transporte (20, 67, 110, 125). Dependiendo si Moiss 3 est ligado al exn
4B, 4A 4F o tres isoformas de larga duracin se generan y son conocidos como NKCC2B, NKCC2A
y NKCC2F. Exn 4 del gen Slc12a1 codifica 32 aminocidos, que se localizan en el segundo
dominio transmembrana y el lazo intracelular adyacente del cotransporter. Esta porcin de
NKCC2 es crtica para el transporte de cloruro y el atascamiento de diurticos de asa (56).
Adems de las isoformas de larga duracin, isoformas truncados han sido identifican. Expresin
heterloga en oocytes del Xenopus laevis sugiri que las isoformas NKCC2 corto se activan en
condiciones hipotnicas y median en un transportador de NaCl K independiente y sensible a la
bumetanida (112). Adems, durante el coexpression con las transcripciones de larga duracin,
una funcin reguladora negativa de las isoformas truncadas en las isoformas de larga duracin
podra ser demostrada (96, 114).

Adems, eventos de splicing anormales conducen a la generacin de transcritos con repeticiones

en tndem del exn 4, como 4B/4F, 4F/4A y 4B/A, con la combinacin de este ltimo se limite a
NKCC2 humano (20, 43, 67, 161). Las protenas del transportador derivadas de estas
transcripciones aberrantes tienen un efecto dominante-negativo NKCC2 actividad. En
consecuencia, absorcin de iones NKCC2 dependientes en ovocitos se redujo en un 50% cuando
fueron coexpressed isoformas NKCC2A tanto NKCC2A/F, en comparacin con la sola expresin
de NKCC2A (14).

Localizacin de las isoformas NKCC2 a lo largo del TAL. Las tres isoformas de larga duracin se
diferencian en su localizacin a lo largo del TAL. Se realizaron varios estudios de localizacin para
las transcripciones de isoforma NKCC2 en conejos, ratas y ratones (26). Para conejo y rata de los
riones, la isoforma NKCC2F se encontr exclusivamente en el TAL medular. En contraste, la
isoforma NKCC2B se expres slo en la corteza, mientras que la transcripcin de NKCC2A fue
encontrada en la mdula y la corteza (110, 161). La total expresin de las isoformas mRNA
NKCC2 en la rata fue 70:20:10 para NKCC2F, NKCC2A y NKCC2B, segn lo determinado por
ensayos de proteccin de Rnasa de isoforma especficas (26). Resultados similares se obtuvieron
para la localizacin de las isoformas NKCC2 en ratones. La transcripcin de NKCC2B slo se
expres en el TAL cortical y en niveles bajos en la franja externa de la mdula externa (125). La
isoforma NKCC2F fue localizada al interior y a una cantidad menor, la franja exterior de la TAL
medular externo. La isoforma NKCC2A se expres en la corteza y la mdula, mientras que la
localizacin medular fue restringida a la franja externa de la mdula externa (103). Deber
hacerse constar en este contexto que el NKCC2 dos isoformas en el TAL medular (NKCC2F y
NKCC2A) podran estar involucrados en la activacin del factor nuclear de clulas T activadas
tipo 5 (NFAT5) (60), que es importante preservar la funcin de la mdula renal (15)
forprotectingcellsagainstahyperosmoticenvironmentandfor.

El cotransporter NKCC2 se expresa tambin en el segmento de MD de la lat, donde funciona

como un sensor de NaCl, como se discute en detalle ms adelante (143). En ratones, dos
transcripciones de NKCC2 eran identifican dentro del segmento de MD del TAL: NKCC2A y
NKCC2B (104).

Similar a la idea en los roedores, las isoformas NKCC2 de

thehumankidneydifferintheirlocalizationalongtheTALand en sus caractersticas de transporte
(20). En el rin humano, sin embargo, la transcripcin de NKCC2A es la isoforma dominante.
En general, la expresin de NKCC2 en humanos disminuye en el orden NKCC2A NKCC2F NKCC2B.
Similar a la situacin en roedores, NKCC2A se expresa a lo largo de TAL todo, pero los ms altos
niveles de expresin se encuentran en la franja exterior de la TAL medular externo (20). Como
se inform recientemente por roedores (103, 110, 161), la localizacin de la isoforma de NKCC2B
en el rin humano tambin fue restringida a la corteza. El patrn de distribucin de la
transcripcin de NKCC2F en los seres humanos es menos clara. Aunque se limitan a la mdula
en roedores, la transcripcin de NKCC2F se encontr a lo largo del TAL medular y cortical,
incluyendo MD, en los seres humanos (20).

Caractersticas de transporte de NKCC2 isoformas. Los diferentes productos de splicing del gen
Slc12a1 difieren en sus caractersticas de transporte (26). Experimentos en la dcada de 1970
en aislado y perfundidas pitales demostraron un transporte ms rpido de la sal en el TAL
medular en relacin a en el cortical TAL segmentos. Sin embargo, los segmentos TAL corticales
revelaron una energa ms alta dilucin (16, 124). La base molecular para este encontrar es
probablemente la existencia de las diferentes isoformas de NKCC2. Estudios de expresin
heterloga utilizando el sistema de ovocitos de X. laevis fueron utilizados para estudiar la
afnities de ion aparente de murino, conejo y humano NKCC2 isoformas (20, 42, 49, 113). Para
los roedores, los valores de Km de las isoformas NKCC2 variaron notablemente entre diferentes
estudios y especies. Por ejemplo, en conejos, Km para el cloruro de 9, 45 y 111 mM se
determinaron valores para las isoformas NKCC2B, A y F, respectivamente (49). Datos de un
segundo estudio, sin embargo, difieren considerablemente en comparacin con el estudio
anterior, con Km de NKCC2A para el cloruro de 15 mm (43). En ratones, los correspondientes
valores de Km para el cloruro de isoforma NKCC2B, A y F son mucho menores: 12, 22 y 29 mM,
respectivamente (113). Un reciente estudio de modelado reevalu NKCC2 datos transporte y
ofrece una posible explicacin de estas discrepancias aparentes (87). Los autores encontraron
que las diferencias en los valores publicados de la Km para el transporte de Na y Cl se
correlacionaron inversamente con las concentraciones ambiente bao de K y Rb utilizada en
experimentos de ovocitos transfected diferentes. Esta idea sugerir que la idea discrepante de la
de valores Km en roedores pueden deberse a diferentes protocolos experimentales (87). Sin
embargo, a pesar de las discrepancias cuantitativas en los valores de Km, hubo una tendencia
constante de la afnity aparente cloruro de roedores NKCC2 isoformas en el orden NKCC2B
NKCC2A NKCC2F (26). La isoforma con el ms alto cloruro afnity, el NKCC2B cortical situado, es
la isoforma con la menor capacidad de transporte (49, 113). Estos resultados son consistentes
con las diferencias entre la actividad de transporte de sal medular y cortical encontrada por
Rocha y colegas (124), revelando un mayor poder de dilucin, pero menor capacidad de
transporte de los segmentos corticales de TAL en comparacin con los segmentos medulares.

Diurticos de asa inhiben la protena del cotransporter del NKCC2 en el sitio de unin a cloruro
(56), lo que explica por qu clulas corticales de TAL NKCC2Bproviding tienen una sensibilidad
mayor para diurticos que TAL medular clulas (77). Adems, modelar simulaciones revel que
cuando las condiciones del bao eran similares a las de la mdula externa (por ejemplo, la alta
osmolalidad), NKCC2F mediada por una mayor reabsorcin de Na en ovocitos en comparacin
con NKCC2A. Adems, la reabsorcin de Na por NKCC2F requiere menor consumo de energa
comparado con el de NKCC2A. Curiosamente, la mayor eficiencia energtica de NKCC2F en
comparacin con NKCC2A fue suprimida cuando las condiciones de bao son similares a los de
la corteza renal (e.g. osmolalidad). Estas observaciones sugieren que la NKCC2F sirve como una
isoforma NKCC2 especializada, ofreciendo optimizacin de transporte caractersticas de
ambiente medular hiperosmolar (87).

En los seres humanos, NKCC2B tiene el ms alto afnity cloruro, similar a lo observado en los
roedores. Por el contrario, el cloruro afnity de la isoforma ms abundante en los seres
humanos, NKCC2A, es algo pequea en comparacin con su equivalente del roedor. En
Resumen, el cloruro afnity de las isoformas humanas de NKCC2 declinar en el orden dado:
NKCC2B NKCC2F NKCC2A (20).

El impacto del variable exn 4 en la capacidad de afnity y transporte de cloruro de la isoforma

NKCC2 resultante podra ser ms confirm durante las investigaciones de las diferentes
mutaciones del aminocido en la secuencia codificado por el exn 4 (41, 42, 47). Mutaciones en
6 de 32 aminocidos, que se encuentra en el segundo dominio transmembrana y en el lazo
intracelular adyacente de NKCC2B, condujeron a una marcada disminucin de cloruro afnity,
que era comparable a la de la isoforma de NKCC2F (47).

Hasta la fecha, la funcin de transporte en vivo de NKCC2 isoformas se ha investigado en ratones

knockout de NKCC2A y NKCC2B. Para la interrupcin dirigida de isoformas individuales, los
exones alternativos 4B y A fueron alterados por la introduccin de codones de parada en el
marco, conduciendo a la terminacin de la traduccin. El resultado fue la ausencia de ambos el
cuerpo entero y la correspondiente truncado isoformas (103, 104). Las concentraciones de
cloruro tubular distal y absorcin se evaluaron midiendo las concentraciones de cloruro y las
tasas de flujo de uid en muestras de uid tubular distal con microperfused in situ supercial
nephrons de ratones decient NKCC2A y NKCC2B. Para las tasas de flujo de perfusin baja, que
corresponden a las concentraciones de cloruro tubular baja en segmentos de TAL ro abajo, los
ratones NKCC2B decient revelaron la absorcin deteriorada cloruro comparada con la de
ratones de tipo salvaje (103). Este deterioro no se observ en los ratones de NKCC2A-decient.
As, para tasas de flujo de perfusin baja, no se detect ninguna diferencia en la absorcin de
cloruro entre NKCC2A-decient y ratones de tipo salvaje (104). Estos datos in vivo son
congruentes con el cloruro alta afnity de la isoforma de NKCC2B, segn lo determinado in vitro
(41, 42, 49, 113). Comparado con la isoforma de NKCC2B, NKCC2A tiene afnity de cloruro
menor, pero mayor capacidad de transporte in vitro (20, 42, 49, 113). Consistente con esta idea,
la situacin in vivo revelada problemas de absorcin de cloruro en ratones NKCC2A-decient en
las tasas de flujo de perfusin supranormal, por ejemplo, para altas concentraciones de cloruro
de TAL. Estos datos sugieren que las isoformas de NKCC2B y NKCC2A funcionalmente cooperan
para facilitar la absorcin de NaCl en un amplio rango de concentraciones de cloruro tubular
uctuating.

Diferencial splicing del pre-mRNA NKCC2 es un proceso regulado. Como se mencion

anteriormente, empalme diferencial del variable exn 4 del gen Slc12a1 conduce a la expresin
de tres NKCC2 diferentes isoformas, que difieren sustancialmente en sus caractersticas de
transporte. Esta diferencia da lugar a la cuestin de si el empalme diferencial puede ser una
medida para adaptarse a las modulaciones de la ingesta de sal y contribuir a la capacidad de
adaptacin del rin para hacer frente a cambios en las necesidades de absorcin.
Recientemente hemos demostrado que la ingesta de sal modula NKCC2 diferencial empalmar
de una manera tal que una dieta restringida en sal provoca un cambio en la expresin de la
isoforma de la cloruro de baja afnity A-isoform al cloruro de alta afnity B-isoform en el TAL
medular cortical y externo, como resumido en la figura 1 (125). Este efecto fue parcialmente
mediado por la angiotensina II y parcialmente dependiente de la actividad de transporte de sal
de TAL, segn lo determinado en experimentos con furosemida en las secciones de rin
sobrefundido, es decir, en ausencia de hormonas sistmicas. Furosemida tambin redujo la
expresin de NKCC2F en la franja interna de la TAL medular externo (OMIS), el segmento en el
que NKCC2F es la isoforma dominante. As, cuando se reduce la actividad de transporte NKCC2
en presencia de furosemida, el empalme diferencial de NKCC2 cambia a un patrn de expresin
que se asemeja a la del patrn de expresin basal en ms porciones posteriores de la TAL.
Downregulation de NKCC2F durante la intheOMISwasaccompaniedbyincreasedlevelsofNKCC2B
de la administracin de furosemida y NKCC2A, cuya expresin en la OMIS en condiciones
normales es baja. Del mismo modo, en un estudio reciente, furosemida reduce el nivel de
expresin de NKCC2F, mientras que indujo la expresin de NKCC2A en el rin de ratn (14). En
condiciones normales, existe un gradiente de la concentracin de NaCl en el TAL, y las
concentraciones de cloruro en las porciones ms distales de la TAL (en el rea del segmento MD)
se estimaron en 35 mM (127). Este gradiente puede ser la razn de los bajos niveles de expresin
de NKCC2F en el TAL cortical bajo las condiciones iniciales. En consecuencia, furosemida
transforma al TAL de la OMIS en un estado que se asemeja a la situacin en el TAL cortical bajo
las condiciones iniciales (125).

Estos datos sugieren que la actividad de transporte de sal y as la composicin intracelular de

iones, de la TAL pueden influencia la funcin de la maquinaria de corte y empalme. Este supuesto
es apoyado por el encontrar que la expresin NKCC2B es upregulated en ratones NKCC2A-
decient. En el ratn TAL cortical, NKCC2B y NKCC2A son coexpressed, y, en consecuencia, la
inactivacin gentica de una isoformas resultar en una situacin similar a la inhibicin parcial
del transporte por diurticos de asa. Aunque poco se sabe en general sobre los mecanismos que
modulan el empalme diferencial, existen otros ejemplos que sugieren que la composicin
intracelular de iones y osmolaridad puede influencia la maquinaria de corte y empalme (50).
Tambin se evalu el impacto funcional de la cambio del empalme diferencial de NKCC2A a
NKCC2B por una dieta con restriccin de sal en un reciente estudio de modelado. Los resultados
de este anlisis sugieren que la modulacin de splicing diferencial durante bajo en sal aumenta
la reabsorcin de sal en la TAL y en consecuencia reduce la entrega de NaCl para el segmento
de MD (37).

Fisiopatologa de la NKCC2

Prdida de funcin de NKCC2: tubulopathy prdida de sal. La clnica signicance del NKCC2
cotransporter de homeostasis de electrolitos y agua es demostrada por la gravedad del tipo 1
del sndrome de Bartter. Sndrome de Bartter es una nefropata saltwasting rara, que a menudo
ocurre en familias consanguneas y fue descrita originalmente por Bartter et en 1962 (79).
Pacientes con sndrome de Bartter son afectados por poliuria, alcalosis hipocalimica,
hiperplasia del aparato yuxtaglomerular acompaada de elevaciones en la actividad de renina
plasmtica y por hiperaldosteronismo secundario (9). A pesar de las marcadas elevaciones en la
actividad de renina plasmtica, los pacientes son generalmente hipotenso (12).

Sndromes de Bartter son enfermedades heterogneas e involucran un grupo de graves

mutaciones gen autosmico recesivo, todos los cuales conducen a una reduccin o ausencia de
capacidad de reabsorcin de sal en el TAL (44). Hasta la fecha, cinco genes diferentes han
demostrado ser responsables de los diferentes tipos de sndrome de Bartter (134-136, 148, 153).
Como se describi antes, NKCC2, ROMK apical y la basolateral clcnkb median reabsorcin de sal
en el TAL. Las mutaciones en cualquiera de los correspondientes genes comprometen la
reabsorcin tubular de sal y representan el tipo 1 del sndrome de Bartter tipo 2 y tipo 3,
respectivamente.

Tipo 1 del sndrome de Bartter es causado por mutaciones de la apical cotransporter NKCC2.
Simon et al (135) primera relaciona el NKCC2 codificacin gen Slc12a1 en el cromosoma 15
sndrome de Bartter, cuando se utiliza un enfoque de gene del candidato (135). Los autores
investigaron a familias afectada de cinco y seis mutaciones independientes identifican como
cambios de marco y substituciones del aminocido (136). Tales mutaciones en el gen NKCC2
conducen a sal extrema emaciacin en el TAL, y esta prdida de la sal no es compensada por
una reduccin en la tasa de filtracin glomerular. Esta falta de compensacin de tasa de filtracin
glomerular est probablemente relacionada con la funcin de sensor comprometido de las
clulas de la MD, como se describe en detalle ms adelante (143). Junto con el sndrome tipo de
Bartter 2, que es causada por mutaciones en el gen KCNJ1 codificacin de ROMK (136, 150), el
tipo 1 es clasificadas como la forma prenatal ms severa de la enfermedad. Los pacientes
homocigotos padecen hipercalciuria severa, acompaada de nefrocalcinosis; nefrocalcinosis en
tipo 1 Bartter'spatientsdevelopsearly,sometimesinutero(91). Polyuria fetal causa el
polihidramnios. Adems, la excesiva formacin de PGE2 est relacionada probablemente con la
mayor probabilidad de parto prematuro del nio. Niveles altos de PGE2 en el tejido del suero,
la orina y el rin son causados predominantemente por la sobreexpresin de la ciclooxigenasa-
2 (COX-2) y desempean un papel clave en el sndrome de Bartter patologa. Hipopotasemia,
contraccin crnica de volumen y altos niveles de angiotensina II estimulan la generacin de
PGE2 (165, 166), y PGE2 estimula a su vez la secrecin de renina, hiperaldosteronismo y
hypokalemia (39, 101, 131). Adems, la PGE2 inhibe
vasopressinmediatedwaterreabsorptionintheTALandthusintensiesthe poliuria (98). La poliuria
en estos pacientes contina despus del nacimiento, llevando a peligrosa prdida de sal y
deshidratacin (133). La nefrocalcinosis complica an ms la situacin y eventualmente
desencadena insuficiencia renal (117).

Tipo de sndromes de Bartter 3, 4 y 5 son menos severos. Una mutacin inactivador de la

codificacin del gene para el cloruro basolateral canal clcnkb es conocida como sndrome de
Bartter tipo 3, esta mutacin cuentas y para el sndrome de Bartter clsico supuesto (134, 149).
Tipo 4 es causada por una mutacin inactivador de Barttin (BSND), una subunidad reguladora
de los canales de cloruro clcnkb y clcnka (13, 38). En contraste con las otras mutaciones,
sndrome de Bartter tipo 5 es causado por una mutacin de offunction de ganancia del receptor
activado por el calcio en el TAL (148). En condiciones normales, la actividad de NKCC2 y ROMK
es inhibida por los niveles altos de calcio extracelular a travs de este receptor activado por
calcio (120, 153). El receptor mutado, sin embargo, media estos efectos en mucho niveles
inferiores de calcio extracelular, llevando a prdida de sal en el TAL (148).

Para estudiar la compleja Fisiopatologa del tipo 1 del sndrome de Bartter en un modelo animal,
recombinacin homloga fue utilizado para inactivar el gen Slc12a1 en ratones (142). El fenotipo
de los ratones decient NKCC2 pareca en muchos aspectos la situacin en pacientes humanos
que sufren de tipo 1 (142) del sndrome de Bartter. La descendencia homocigtica fue
severamente polyuric y, como consecuencia, afectadas por deshidratacin severa (142) y muri
en su primera 2 semanas de vida. Parmetros de la sangre revelaron hypokalemia,
hyperreninemia, y una forma mayor hematocrito indicativo de deplecin de volumen
extracelular (142). Como se mencion anteriormente, hyperreninemia en el sndrome de Bartter
prenatal se asocia con elevaciones de dependientes de la COX-2 en suero y PGE2 urinarias (8,
99, 119). Por lo tanto, el incentivar indometacina inhibidor COX es utilizada con xito para
controlar la poliuria (88, 89, 130). De acuerdo con las pautas de tratamiento en pacientes
humanos, Takashi et al (142) forma mejora la supervivencia de los cachorros homocigotos
aplicando indometacina a partir de da 1 despus del parto (142). Sin embargo, los adultos
animales homocigticos mostraron muchas similitudes a pacientes del tipo 1 sndrome de
Bartter, como polyuria masivo, Hipercalciuria, nefrocalcinosis, alcalosis hipocalimica,
hyperreninemia y aumento de los niveles de PGE2 urinario. Un similar, aunque el fenotipo
menos severo se observ en otra cepa de ratones, que se gener por un enfoque al azar
mutacin qumica (75). Mutagnesis qumica inducida por una mutacin de punto en el gen
Slc12a1 en ratones de esta variedad, llevando a una sola substitucin del aminocido. En
contraste con el NKCC2 Modelo knockout (142), esta nueva cepa de tipo 1 del sndrome de
Bartter tarda era viable y frtil, sugiriendo que la funcin NKCC2 era parcialmente conservados
(75). En contraste con pacientes humanos, ratones decient NKCC2 desarrollaron hidronefrosis
bilateral severa a la temprana edad de 7 das (142). Hidronefrosis se observa ocasionalmente en
los seres humanos, y es menos severa que lo que se vio en los ratones nulos NKCC2 (132, 142).
Los autores asumieron que la hidronefrosis puede estar relacionado con la presin generada por
la poliuria. Como los riones humanos son ms maduros que los riones de ratn en el
nacimiento (80), la inmadurez puede ser una explicacin de los efectos ms severos de poliuria
en el desarrollo de hidronefrosis en ratones. Esta hiptesis fue ms apoyada por datos obtenidos
de ratones de 4 semanas de edad tratados con furosemida (142). Estos animales de tipo salvaje
desarrollaron hydronephrosis suave. Cuando trato de furosemida se inici justo despus del
nacimiento, hidronefrosis en estos ratones fue ms severa, sugiriendo otra vez que la
vulnerabilidad del rin depende de su estado de desarrollo (142).

Porque el tipo 1 del sndrome de Bartter es causado por una mutacin recesiva autosmica en
el gen Slc12a1, se encuentra comnmente en familias consanguneas (79). La
parentsofthepatientsdonotshowanysymptoms heterozigtico. Congruentwith esta observacin
en seres humanos, el fenotipo del heterocigotos ratones knockout de NKCC2 fue discreta (141).
Aunque los niveles de los mRNA NKCC2 en NKCC2 / ratones fueron slo 50% de los de los ratones
de tipo salvaje, no hubo diferencias en la expresin de protenas de membrana y en la
distribucin de NKCC2 a lo largo del TAL. Se sugiri que una regulacin postraduccional de
sodiummediated conduce a un aumento trafcking del transportador activo de la membrana
apical (141).

Idea similar se obtuvieron cuando solo isoformas del cotransporter NKCC2 fueron eliminados en
el modelo murino (103, 104). Como se describi anteriormente, esto se realiz para caracterizar
la contribucin de las isoformas NKCC2A y B para el transporte de sal de TAL. En contraste con
NKCC2 ratones nulos, NKCC2A y los ratones NKCC2B decient tenan las tasas de supervivencia
normal y homeostasis en gran parte oculta de sal y agua (103, 104, 142). El fenotipo suave de
ratones que carecen de especialmente NKCC2A y NKCC2B sugiere un menor aporte de estas
alternativas solo empalme productos a la reabsorcin total de sal en el TAL (103, 104). La
expresin de NKCC2F, la isoforma con la mayor capacidad de transporte para el cloruro, junto
con otra isoforma restantes (A o B), parece de personas para compensar en gran medida la
prdida de las isoformas individuales A y B (103, 104). Similares al fenotipo leve renal de ratones
NKCC2Bdecient, un caso humano de especficas NKCC2B deciency ha sido documentada
(147). Este paciente masculino mostr alcalosis hipocalimica suave, hyperreninemia,
hiperaldosteronismo y la hipercalciuria. El fenotipo ms suave se asemej a la del sndrome de
Bartter clsico, pero el paciente tena ningunas mutaciones en el gen CLCNKB. En cambio, una
mutacin sin sentido heterozigtica de 690 nucletido en el exn 4B fue detectada, que caus
la substitucin de una glicocola por un cido asprtico en la posicin 224 (147). La importancia
funcional de esta mutacin fue evaluada in vitro. De acuerdo con la idea en vivo, la mutacin en
el exn 4B del paciente condujo a una prdida de la funcin NKCC2B (47).

Teniendo en cuenta las similitudes en el fenotipo del paciente NKCC2Bdecient y los afectados
por el tipo del sndrome de Bartter 3, parece probable que los individuos con mutaciones
similares a veces son errneamente clasificadas como tipo a pacientes de Bartter 3.

Adems de las mutaciones o la canceladura del gene NKCC2, los fenotipos como el sndrome de
Bartter pueden desarrollar debido a la activacin deteriorada de NKCC2. Como se describi
anteriormente, el transportador NKCC2 es activado por fosforilacin y esto puede ser realizado
por varias quinasas. Un estudio reciente en ratones demostr la influencia de la quinasa
activadora de NKCC2 OSR1 en el control de la homeostasis de la sal y la presin arterial (83).
Homocigtica OSR1 nocaut animales letalmente fueron afectados, mientras que el
heterozigtico OSR1 decient animales manifestadas la hipotensin acompaada de reduccin
en los niveles de pNKCC1 en el tejido artico y haba disminuido los niveles de pNKCC2 en el
rin (83). En cambio, renales especficas OSR1 ratones nulos eran normotensos. Esto indica que
una reduccin en activado NKCC1, en lugar de
NKCC2accountsfortheattenuatedbloodpressureinheterozygous OSR1 null ratones. Al investigar
el rin especficas OSR1 ratones, los autores encontraron niveles reducidos de pNKCC2 y una
respuesta parcialmente romas a furosemida (83). Adems, cuando alimentados con una dieta
baja en sal, los ratones de decient OSR1 especficas del rin excretan ms sodio que los
controles de tipo salvaje, lo que indica un defecto moderado en funcin de TAL. Porque OSR1 se
expresa principalmente en el TAL medular (160), parece probable NKCC2, en lugar de NCC es el
principal sustrato de la quinasa. Los autores encontraron sndrome-como el fenotipo de un
Bartter suave, incluyendo sodio y perder potasio y la hipercalciuria, que fue acompaada por
elevaciones en la abundancia de pNCC (83). Este ltimo puede ser compensatorio y en parte
responsable del fenotipo renal leve. De acuerdo con estas observaciones, varios diferentes
modelos animales de sndrome de Bartter mostraron elevaciones en expresin de NCC (19, 122,
151).

Otro grupo describe el fenotipo sal-que pierde del adenylylcyclase 6 (AC6)-ratones decient
(122). AC6 est implicado en la regulacin dependiente del campo de expresin NKCC2 y su
activacin en respuesta a la vasopresina (122). AC6-decient los ratones mostraron reduccin
en los niveles de fosforilacin mediada por la vasopresina de NKCC2 (pS126 NKCC2). Adems, el
AC6 / ratones revelaron hipocaliemia y alcalosis, tanto caractersticas comunes de los sndromes
de Bartter (122). Asimismo, en los ratones heterocigotos de - decient Gs (162), la abundancia
de la protena NKCC2 fue forma reducida y la capacidad de concentracin urinaria fue
comprometida (36). Este ltimo podra estar relacionado con la expresin reducida de NKCC2 y
haba comprometida formacin de campo en otros segmentos de la nefrona como el tbulo
proximal y el conducto colector (36).

Ganancia de funcin de NKCC2: hipertensin sal-sensible. Porque la prdida de funcin de

NKCC2 inevitablemente conduce a un fenotipo de sal-perdidosa marcado en los seres humanos
y todos otros mamferos investigados, parece razonable suponer que la ganancia de
functionofNKCC2maylinkthecotransportertostates de abierta sal reabsorcin, que
eventualmente resultara en el desarrollo de hipertensin sal-sensible. En contraste con la
correlacin bien definidos entre la actividad de canal de Na epitelial y la hipertensin, no hay
ningn anlogo monogenticos de sndrome de Liddle para NKCC2. Sin embargo, est
acumulando evidencia de que cambios en la actividad de cotransporter pueden estar
relacionados con la hipertensin. Teniendo en cuenta la masiva general sal reabsorptive
capacidad de NKCC2, es obvio que aumenta incluso muy sutil en la actividad de cotransporter
dara lugar a aberraciones considerables de sal homeostasis y, en consecuencia, la presin
arterial. Tales cambios en la actividad NKCC2 pueden estar relacionado con el cotransporter s
mismo (es decir, mutaciones de la ganar-de-funcin) o pueden estar relacionada con
alteraciones en las vas reguladoras que regulan la actividad de transporte y trafcking NKCC2.
A diferencia de las mutaciones de ganancia de funcin de NKCC2, raras mutaciones del gen
Slc12a1, ms de la que dio lugar a una disfuncin NKCC2 clnicamente inaparente en portadores
heterozigticos, fueron identifican en una cohorte de 3.000 individuos inscritos en el estudio de
corazn Framingham y estas mutaciones se asociaron con bajar la presin arterial (1, 70, 95).
Por lo tanto el largo plazo la presin arterial sistlica entre heterocigotos portadores de las
mutaciones fue 6 mmHg ms baja en comparacin con la presin arterial media de todos los
individuos incluidos en el estudio (70). En consecuencia, portadores de las mutaciones eran
representados en el 10% de las personas con la presin arterial ms baja (16). Adems, las
diferencias tnicas en la capacidad de concentracin urinaria al inicio y durante la restriccin de
agua son probablemente parcialmente relacionadas con diferencias de menor importancia en
reabsorcin sal NKCC2-dependiente. As la osmolaridad urinaria es mayor y el volumen de orina
promedio es menor en individuos de origen africano en comparacin con caucsicos (145). En
consecuencia, caucsicos excretan una carga de agua ms rpidamente que los afroamericanos,
y esta diferencia parece no estar relacionada con diferencias en los niveles de vasopresina (7,
58, 154). Por otra parte, una excrecin reducida de calcio en los afroamericanos en comparacin
con caucsicos indirectamente puede estar relacionada al aumento de la actividad NKCC2, que
se espera mejorar la fuerza impulsora para la reabsorcin de calcio paracelular en el TAL (116,
155). En este contexto, las variaciones genticas comunes del coche en el TAL pueden ser otro
componente que afecta a las diferencias raciales en actividad NKCC2 y la susceptibilidad a la
hipertensin (71). El coche se activa por el aumento de Ca extracelular y conduce a una
inhibicin de NKCC2 (45).

Similar a la situacin de los seres humanos, en ratas de Dahl sal-sensibles, que son un modelo
animal de hipertensin sal-sensible, el Rb absorcin en segmentos aislados de TAL se
increment notablemente en comparacin con que control resistente a la sal ratas y este
aumento estaba relacionada con actividad de transporte NKCC2 en lugar de abundancia porque
el NKCC2 los niveles en las ratas de Dahl saltsensitive eran realmente regulada (3 , 6). El aumento
de la actividad de NKCC2 en las ratas de Dahl sensible a la sal fue sugerido para ser relacionado
con la hiperfosforilacin de la cotransporter por SPAK y OSR1 (6). Cabe sealar que NKCC2
ciertamente no es el gen candidato slo renal responsable del desarrollo de la hipertensin
arterial (sensibles a la sal) (31); otros transportadores y canales inicos, como el TAL cloruro
basolateral canal clcnkb (24) o ms puntos aguas abajo de la reabsorcin de sodio (por ejemplo,
el epitelio Na canal), podran tener similar importancia, adems de mltiples factores del
extrarenal, que modulan la presin arterial.

La funcin reguladora de NKCC2: MD Control de resistencia Preglomerular y la secrecin de

renina

Las clulas de la MD se encuentran en el extremo distal del TAL. Estas clulas especializadas de
TAL directamente en contacto con el mesangio extraglomerular de los glomrulos
correspondiente (73). La funcin de las clulas de la MD es doble: las clulas de la MD sensacin
la concentracin de sal en la resistencia 1) preglomerular tubular de uid y de influencia y, en
consecuencia, la snGFR y 2) la secrecin de renina de las yuxtaglomerular (JG) las clulas
granulares de la arteriola aferente (22, 137, 143). Aunque los puntos finales de comunicacin
tubular vascular son diferentes, comparten el mismo paso inicial, es decir, sal de deteccin por
las clulas de la MD. Cuando la concentracin tubular (ms precisamente la concentracin de
cloruro) (76, 78) aumenta, las clulas de la MD inician una cascada de sealizacin que
eventualmente resulta en una supresin de la secrecin de renina y el aumento concomitante
en el tono de la arteriola aferente. La respuesta de este ltimo se denomina el mecanismo de
retroalimentacin tubuloglomerular, y conduce a una disminucin de la snGFR. El control de la
secrecin de la funcin y la renina vascular por las clulas de la MD est mediado por la
generacin de factores extracelulares tales como ATP, adenosina y las prostaglandinas (10, 23,
51, 139, 144), como recientemente la revisin en detalle (21, 22, 128).

La actividad de NKCC2 en la membrana apical de las clulas de la MD es probablemente el

mecanismo primario por el cual las clulas de la MD detectan la concentracin tubular (11, 81,
100, 126, 158). As inhibicin de NKCC2 por diurticos suprime la respuesta de la TGF y conduce
a un marcado aumento en la secrecin de renina (22, 62, 86, 158). Este ltimo, sin embargo, al
menos cuando el diurtico de asa es aplicado sistemticamente, puede estar parcialmente
mediado por una inhibicin concomitante de NKCC1, que es expresado por clulas JG (25, 33) y
efectos sistmicos como prdida de volumen y una reduccin en la presin arterial (146), que
estimula la secrecin de renina independientemente de la va de MD. Diurticos del asa inhiben
NKCC1 y NKCC2 con confirmaciones similares, y el uso farmacolgico de diurticos se basa en
sus altas concentraciones de tubulares, que son causadas por su secrecin en el tbulo proximal
(59). Segn un efecto estimulante directo de diurticos en la secrecin de renina,
NKCC1decient ratones con elevada actividad de renina plasmtica y la estimulacin aguda de
la secrecin de renina por diurticos de asa se reduce considerablemente (25, 152).

Dependiendo de la especie investigada, las clulas de la MD expresan generalmente ms de una

isoforma NKCC2. As en los ratones, NKCC2B y NKCC2A se expresan en las clulas de la MD (103).
Estudios in vivo utilizando ratn cepas con inactivacin dirigida de NKCC2B y NKCC2A sugirieron
que el coexpression de ambas isoformas con diferentes cloruro afnities en el MD puede haber
evolucionado para facilitar la deteccin de la sal en un segmento de la nefrona en que las
concentraciones de cloruro varan sustancialmente (103, 104, 128). Segn esta hiptesis, en
ratones NKCC2B decient, las curvas de respuesta TGF fueron derecho de puesto en
comparacin con los ratones de tipo salvaje; en cambio, en los ratones NKCC2Adecient, las
curvas de respuesta TGF eran izquierda-cambiado de puesto, y la magnitud de la respuesta
mxima se redujo en comparacin con la de animales de tipo silvestre. Estos datos sugieren que
NKCC2B (cloruro alta afnity) y NKCC2A (baja cloruro afnity) cooperar en su funcin de
deteccin de sal y cubren una gama relativamente amplia de concentraciones de cloruro tubular
uctuating (26). Resultados similares se obtuvieron en un control tubular de
oftheroleofthedifferentMDNKCC2isoformsintermsofthe de evaluacin de la secrecin de renina.
Cuando se administraron a ratones una inyeccin intraperitoneal de solucin salina isotnica,
que se utiliza como un modelo de volumen de carga asociados con concentraciones de cloruro
tubular distal mayor (85), la supresin aguda de la secrecin de renina fue prcticamente
ausente en los ratones NKCC2Adecient, mientras que estaba aumentada en los ratones
NKCC2B-decient en relacin a que en animales de tipo salvaje (103, 104). Al parecer, cuando
las concentraciones de cloruro en el MD son altas, la supresin de la secrecin de renina
depende de la funcin de NKCC2A como bajo-afnity, isoforma de alta capacidad. La
interpretacin de la mayor supresin de la secrecin de renina en ratones NKCC2B-decient en
comparacin con controles no es tan obvia pero puede estar relacionado con el hecho de que la
prdida de NKCC2B aguas arriba de el MD pudo haber llevado a altas concentraciones de cloruro
en el MD, segn lo sugerido por la anteriormente mencionada medida de la concentracin de
cloruro distal.

Resumen y perspectivas

El trmino de bsqueda "NKCC2" proporciona 400 golpes en PubMed, y manuscritos de ms de

120 en NKCC2 han sido publicados en los ltimos 3 aos. El enfoque durante los ltimos aos ha
sido en 1) las vas de sealizacin intracelulares que modulan trafcking NKCC2 y la actividad de
especficas del cotransporter y 2) el papel de splicing diferencial en la bella de ajuste de funcin
NKCC2. Ha avanzado sustancialmente la cooperacin de varias quinasas y en la identificacin de
los correspondientes sitios de fosforilacin de protenas objetivo, control de recuperacin sal
NKCC2 mediado TAL. Algunas de estas quinasas que parece ser crucial, cuando se evalu en un
entorno aislado in vitro, parecen funcionar en una red redundante y pueden compensarse por
otras vas en vivo, como se muestra recientemente por SPAK y WNK3 (93, 102, 160). Estos
mecanismos de control redundante pueden han desarrollado durante la evolucin, porque
incluso pequeas desviaciones del control normal de NKCC2 tienen un resultado perjudicial
sobre la supervivencia y, eventualmente, en el fitness gentica de un individuo.

NKCC2 ha sido considerado como un gen marcador del TAL, pero existe evidencia creciente que
NKCC2 no es tan especficas del rin como generalmente se crea. Al parecer, NKCC2 tambin
se expresa en los tejidos del extrarenal, tales como pncreas - clulas (2) y del tracto
gastrointestinal (69, 159, 164). La relevancia funcional de NKCC2 en estos tejidos del extrarenal
es desconocida.