La Espectrometra de Masas es una tcnica microanaltica usada para identificar

compuestos desconocidos, cuantificar compuestos conocidos, y para elucidar la

estructura y propiedades qumicas de las molculas. Requiere cantidades
pequeas de muestra y obtiene informacin caracterstica como el peso y algunas
veces la estructura del analito.

La tcnica de deteccin de iones se basa en el fenmeno conocido

como desbastado (sputtering, en ingls) de partculas centradas en un blanco, que son
bombardeadas mediante iones, tomos o molculas.

En la Espectrometra de masas la muestra es ionizada (y por tanto destruida)

usando diversos procedimientos para ello. De todos ellos el ms usual y/o utilizado
es la tcnica denominada de Impacto Electrnico consistente en el bombardeo de
la muestra (previamente vaporizada mediante el uso de alto vaco y una fuente de
calor) con una corriente de electrones a alta velocidad.

Mediante este proceso, la sustancia pierde algunos electrones y se fragmenta

dando diferentes iones, radicales y molculas neutras. Los iones (molculas o
fragmentos cargados) son entonces conducidos mediante un acelerador de iones
a un tubo analizador curvado sobre el que existe un fuerte campo magntico y
conducidos a un colector/analizador sobre el que se recogen los impactos de
dichos iones en funcin de la relacin carga/masa de los mismos.

Cada compuesto es nico, y cada uno de los compuestos se ionizar y

fragmentar de una determinada manera, y en este principio se basa la
espectrometra de masas para identificar cada analito.

Con la espectrometra de masas somos capaces de proporcionar informacin

acerca de la:

Composicin elemental de las muestras: de esta se encarga la

espectrometra de masas atmico.
Composicin de las molculas inorgnicas, orgnicas y biolgicas.
 Composicin cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas.
Estructura y composicin de superficies slidas.
Relaciones isotpicas de tomos en las muestras.

La espectrometra de masas se fundamenta en un principio simple: cuando un

flujo de partculas cargadas se somete a la accin de un campo magntico,
experimenta una desviacin; la amplitud de dicha desviacin depende de la masa
y de la carga de las partculas que integran el flujo.

HISTORIA

En 1886, Eugen Goldstein observ rayos de descarga en gases a baja presin

que viajaban lejos del nodo y a travs de canales en un ctodo perforado,
opuestos a la direccin de los rayos catdicos cargados negativamente (que viajan
desde el ctodo al nodo). Goldstein llam a estos rayos de nodo con carga
positiva Kanalstrahlen (rayos canales). Wilhelm Wien descubri que fuertes
campos elctricos o magnticos desviaban esos rayos canales, y en 1899
construy un dispositivo con campos elctricos y magnticos paralelos que
separaba los rayos positivos en funcin de su relacin carga-masa (Q/m). Wien
descubri que la relacin de carga a masa dependa de la naturaleza del gas en el
tubo de descarga. El cientfico ingls J. J. Thomson, que estaba interesado en
medir la relacin masa-carga del electrn, mejor ms tarde el trabajo de Wien
reduciendo la presin para crear el primer instrumento similar a un espectrmetro
de masas.

Funcionamiento

Detector.
En trminos generales, las molculas tienen masas diversas, hecho que un
espectrmetro de masas utiliza para determinar qu molculas estn presentes en
una muestra. Por ejemplo, se vaporiza sal de mesa (NaCl) y se analizan los iones
en la primera parte del espectrmetro de masa. Esto produce iones del sodio e
iones del cloro que tienen pesos moleculares especficos. Estos iones tambin
tienen una carga, que significa que debido a ella tendrn movimiento bajo
influencia de un campo elctrico determinado.

Estos iones se envan a un compartimiento de aceleracin y se pasan a travs de

una lmina metlica. Se aplica un campo magntico a un lado del compartimiento
que atrae a cada uno de los iones con la misma fuerza (suponiendo carga
idntica), y se los desva sobre un detector. Naturalmente, los iones ms ligeros se
desviarn ms que los iones pesados porque la fuerza aplicada a cada ion es
igual pero los iones ligeros tienen menos masa. El detector mide exactamente
cun lejos se ha desviado cada ion, y a partir de ese dato se calcula el "cociente
masa por unidad de carga". Con esta informacin es posible determinar con un
alto nivel de certeza cul es la composicin qumica de la muestra original.

Hay muchos tipos de espectrmetros de masas que no solamente analizan los

iones, sino que tambin producen diversos tipos de iones. Sin embargo, todos
utilizan campos elctricos y magnticos para cambiar la trayectoria inica de
determinada manera.

Funcionamiento
Este aparato de rayos positivos utiliza campos magnticos y electrostticos que
producen desviaciones opuestas en el mismo plano para convertir las molculas
en iones, a continuacin, ordena los iones por su masa-carga cociente.

Caractersticas
Todos los espectrmetros de masas cuentan con cuatro caractersticas comunes:
un sistema para introducir la sustancia que se desea analizar en el instrumento, un
sistema para ionizar la sustancia, un acelerador que dirige los iones hacia el
instrumento de medida y un sistema para separar los distintos iones analizados y
para registrar el espectro de masas de la sustancia.

Partes
El espectrmetro o espectrgrafo de masas consta, esencialmente, de tres partes:
la cmara de ionizacin, la cmara de desviacin y el detector.

Cmara de ionizacin

En la cmara de ionizacin, los tomos de la sustancia que se pretende identificar

reciben una energa de excitacin que les hace perder electrones. A veces dicha
energa se consigue simplemente calentando la muestra. Como consecuencia de
la prdida de electrones, los tomos se convierten en partculas cargadas
positivamente que reciben el nombre de iones. Los iones producidos en la cmara
de ionizacin pasan luego a la cmara de desviacin.

Camara de desviacin
La cmara de desviacin est sometida a un campo magntico intenso. Cuando el
flujo de iones positivos atraviesa la cmara, la trayectoria de cada uno de ellos
experimenta una desviacin por efecto del campo magntico; en lugar de
atravesar la cmara en lnea recta, lo hacen siguiendo una curva. El grado de
curvatura de cada trayectoria depende de la masa y la carga del ion positivo; los
iones pesados siguen una trayectoria que no se aparta mucho de la lnea recta,
mientras que los ms ligeros resultan ms desviados.

Al salir de la cmara de desviacin, los iones positivos chocan con una placa
fotogrfica, o un elemento similar, instalada en el detector.

Detector

El detector registra la magnitud de las desviaciones con respecto a la lnea recta

experimentadas por las trayectorias de las partculas que integran la muestra,
indicando as la masa y la carga de dichas partculas. Dado que cada elemento y
cada tomo poseen una masa y una carga caractersticas, la lectura del registro
recogido por el detector permite identificar los tomos presentes en la muestra.

Aplicaciones
Los espectrmetros de masas pueden proporcionar un alto grado de resolucin
como ayuda a los anlisis de mezclas complejas. Por ejemplo, los productos del
refinado y procesamiento del petrleo, que contienen normalmente hidrocarburos
muy similares, son difciles de separar con mtodos de anlisis qumico
convencionales, pero pueden ser aislados y analizados con un espectrmetro de
masas.

Se consigue una mayor precisin con espectrmetros de masas en serie, que

consisten en varios espectrmetros colocados uno tras otro. En el campo de la
biologa molecular, los espectrmetros en serie (con dos espectrmetros de
masas) permiten determinar en pocos minutos la secuencia lineal de los
aminocidos de una protena.

Estos espectrmetros de masas son ms de mil veces ms precisos que un

dispositivo nico, lo que hace que resulten muy tiles para analizar cantidades
muy pequeas de compuestos biolgicos con masas moleculares muy altas. Los
dispositivos ms sensibles que pueden emplearse en la espectrometra de masas
son los aceleradores electrostticos en serie, que comprenden varios
espectrmetros de masas dispuestos en serie y conectados a un potente
acelerador electrosttico de partculas.
Al permitir determinar las masas de las partculas que forman parte de una
muestra, con el objeto de identificarlas, la espectrometra de masas ha tenido y
tiene aplicaciones innumerables.

Actualmente, por ejemplo, se emplea para identificar los vestigios de sustancias

hallados en lugares donde se ha cometido un delito, cuando las cantidades
encontradas son demasiado pequeas para ser identificadas de otra manera.

Requisitos:

1. Condiciones de las muestras:

o Muestras a analizar: slidas, lquidas
o Cantidad: se recomienda un mnimo de 50 l
o Concentracin: del orden de 0.21 mg/ml
o Pureza: tan puras como sea posible
2. Intervalo de aplicacin:
o Peso molecular comprendido entre 50 y 800 u
o Compuestos voltiles
o Poco termolbiles
o Polaridad baja o media
3. Disolventes:
o Los disolventes voltiles son los ms adecuados
o Los preferidos: metanol, agua, diclorometano y cloroformo
o Evitar disolventes con altos puntos de ebullicin, tales como el DMSO, que son
problemticos en la Espectrometra de Masas
o Se ruega consultar antes de hacer uso de otros disolventes y aditivos
4. No se pueden analizar mediante esta tcnica:
o Compuestos con puntos de fusin superior a 400 C, o que fundan con descomposicin.
o Compuestos muy voltiles (lquidos o slidos sublimables)
o Evitar cidos, bases y sales inorgnicas, as como cualquier sustancia no voltil HP LCMS