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MANUAL DE PRCTICAS
FITOPATOLOGA
MANUAL DE PRCTICAS DE FITOPATOLOGA
COMPILADORES:
Principal: M. en C. Rocio Cortes Rodrguez
Colaboradores: M. en C. Rocio Cortes Rodrguez
Revisado por: Academia de Biologia 2011
CONTENIDO
Practica 6: Cenicillas..18
Practica 7: Pudricin caf de frutales con hueso..22
Practica 9: Carbones.29
Practica 10: Royas.32
Practica 11: Tizones y manchas foliares bacterianas..35
Objetivo:
Introduccin:
Materiales:
Autoclave
Balanza analtica
Termoplato
Agua destilada
Algodn
Gasas
Matraz 500 ml
Tape
1
LaboratoriodeFitopatologa
Procedimient
o:
Con esta preparacin se coloca el medio PDA ya bien disuelto en cajas petri hasta o
y se llenan tubos de ensayo si se requiere hasta la marca de y luego se sellan
con cinta.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Resultados
:
2
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Conclusiones:
3
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Objetivo
:
Introduccin
:
Materiale
s:
4
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Por el mtodo de raspado. Se coloca un portaobjetos una gota de rojo colorante; luego
la mancha del material vegetativo se raspa con un bistur o una navaja y una vez que
se monto la muestra en el portaobjetos con una gota de rojo colorante se procede a
observarla en el microscopio.
Se debe tener 3 cajas petri; en la primera colocar agua destilada, en la segunda cloro al
5% y en la tercera agua destilada.
Para esto se tiene los dos mecheros prendidos, se coloca papel secante sobre la mesa
en que est trabajando y se humedece la superficie de esta con cloro.
Luego se esteriliza el asa de platino, se abre la caja petri y se coloca la muestra en ella,
se acerca al mechero y se sella y a los pocos das se ver el desarrollo del hongo.
Otro mtodo es utilizando papel filtro, este papel se humedece con agua y se coloca en
la caja petri, despus se acomoda el hongo dentro de ella y se tapa. El hongo se
desarrolla as en la humedad.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
5
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Resultados:
6
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Procedimiento 3 (raspado)
7
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Conclusiones:
8
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Objetivo
:
Introduccin
:
Materiale
s:
Papel filtro
Algodn
Jeringa desechable
Procedimiento
1:
Se toma con una jeringa una muestra de 4cc y se deposita en la base del tallo,
abrindose el tejido con la aguja y ah se inocula. O bien, solo deposite el contenido
(4cc) en la base del tallo de la planta.
9
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Procedimiento
2:
Se saca un block de 1cm y se deposita adherido a la planta a un lado del tallo, este
block ser del de los hongos en el medio PDA, esto reporta la ventaja de que si hongo
llega al suelo y tiene medio para nutrirse, despus se tapa con suelo.
Procedimiento
3:
Procedimiento
4:
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Resultados
:
Procedimiento 1:
10
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Procedimiento 2:
Procedimiento 3:
11
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Procedimiento 4:
Conclusiones:
12
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Objetivo:
Introduccin:
Materiales:
Microscopio de diseccin
Microscopio compuesto
Muestra de hongo desarrollado en la caja petri
Asa de platino Formol
Porta y cubre objetos Cutex
Azul o rojo colorantes
Fibra de vidrio
Etiquetas adheribles
Procedimiento:
Se abren las cajas petri cerca del mechero. En un porta objetos se coloca una gota de
formal y una de colorante (rojo o azul). Se coloca cierta cantidad del hongo en el
portaobjetos y se protege con pequeos trozos de fibra de vidrio. Lentamente se coloca
el cubreobjetos. Se sella con cutex. Se pasa al microscopio y se observa, si no es muy
visible utiliza aceite de inmersin.
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Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Resultados:
14
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Conclusiones:
15
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Objetivo
:
Introduccin
:
Los organismos del suelo que ms importancia tienen cuantiaba y cualitativamente son
las bacterias. Entre estas merecen citarse especialmente las vinculadas con el ciclo del
nitrgeno, ya que lo utilizan para su sntesis orgnica, adems de que son capaces de
atacar todo compuesto orgnico. Los hongos son hetertrofos estrictos que prosperan
en suelos cidos, porque en estas condiciones las bacterias no pueden competir con
ellos. Tambin son agentes activos de descomposicin.
Materiale
s:
Muestras de suelo.
Navaja
500 ml de agua
Procedimient
o:
Se coloca la muestra de suelo en el recipiente. Se riega hasta que est bien hmeda.
Se parte en cortes laterales el material vegetal. Se colocan enterrados hasta la mitad
cada uno de los cortes vegetales en la superficie del suelo contenido en el recipiente.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
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Resultados:
Conclusiones:
17
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Practica 6: Cenicillas
Objetivo
:
Describir y dibujar los signos y los sntomas causados por las cenicillas.
Introduccin
:
Esta enfermedad es causada por hongos ascomicentos del orden Erysiphales los
cuales son parsitos estrictos y se manifiesta por el desarrollo de una cubierta
pulverulenta de color blanco grisaseo en las partes areas de las cuales plantas
infectadas.
Las cenicillas son de distribucin mundial, habindose observado por primera vez en el
ao 1894 en algunas plantas de la familia cucurbitceas. En la actualidad han sido
reportadas ms de 7100 especies de angiospermas hospedantes encontrndose en
frutales, hortalizas, gramneas y ornamentales. Este grupo de hongos produce, en la
fase sexual de su ciclo de vida, ascocarpos del tipo cleistotecio, los cuales pueden
contener en su interior, una o varas ascas, las que a su vez contienen de dos a ocho
ascas.
Por otra parte, el estado asexual o imperfecto puede estar representado por el gnero
Oidium, Oidiopsis y Ovulariopsis. En los cleistotecios es importante observar la
morfologa de los apndices que desarrolla, lo que permite identificar los gneros.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Porta y cubreobjetos
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
18
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Procedimient
o:
Observar y describir los sntomas y signos en las diferentes plantas indicando las
siguientes caractersticas: aspecto de las lesiones, coloracin, tamao, forma y
distribucin.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi-prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados
:
19
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Conclusiones:
20
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Microsphaera sp.
Podosphaera sp.
Erysiphe sp.
21
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Objetivo
:
Introduccin
:
Esta es una enfermedad de tipo necrtico causada por un hongo ascomiceto del
gnero Monilinia del cual se conocen tres especies: M. fructigena causante de la
pudricin caf europea descubierta en 1796 y M. fructicola y M. laza causantes de la
pudricin americana, descubiertas en 1807 en ciruelos silvestres, de los cuales
posteriormente paso a durazneros cultivados.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Bistur
Cajas de petri
Cubre y portaobjetos
Papel estraza
Vasos de precipitados
Cmara hmeda
Estufa de incubacin
Lactofenol
22
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Procedimient
o:
Describir y dibujar los signos y sntomas producidos por Monilinia. Aislar el hongo
causante de la enfermedad en cultivo puro utilizando placas con medio PDA. Hacer una
preparacin de las estructuras fngicas y observar al microscopio. Reproducir los
sntomas de la pudricin caf inoculando frutos sanos con el cultivo puro.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi -prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados
:
23
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Conclusiones:
24
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Objetivo:
Introduccin:
Los mildus son enfermedades que afectan a una gran variedad de plantas, en regiones
donde prevalecen condiciones ambientales de humedad y frio. Los hongos causantes
comprenden alrededor de 300 especies, que incluyen a patgenos muy destructivos de
las plantas cultivadas.
Material:
Agujas de diseccin
Cubreobjetos y portaobjetos
Navaja de diseccin
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
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Procedimiento:
Hacer una preparacin a partir de un raspado de la lesin con una gota de lactofenol o
agua, entre porta y cubreobjetos, para observar a microscopio.
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicion. Academic Press. 636 pp.
Smith I.M. 1992. Manual de enfermedades de las plantas. Mundi -prensa. Madrid. 671
pp.
Resultados:
26
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Conclusiones:
27
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Bremia sp.
Peronospora sp.
Plasmopara sp.
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Practica 9: Carbones
Objetivo
:
Introduccin
:
Los carbones son enfermedades causadas por basidiomicetos del orden ustilafinales.
En estas enfermedades hay desplazamiento del contenido del grano por una masa de
esporas pulverulentas de color negro que se parecen al holln denominadas soros y
que disminuyen en forma drstica los rendimientos.
Los hongos causantes de los carbones atacan las semillas de las gramneas y se
desarrollan en ellas destruyndolas por completo. Sin embargo varios carbones atacan
a las hojas, tallos o verticilos florales y algunos infectan semillas o plntulas antes de
que emerjan del suelo y se desarrollan en el interior hasta la formacin de las
inflorescencias; otras solo producen infecciones locales sobre hojas, tallos y otros
rganos. Hoy formacin de soros que se mantienen unidos temporalmente por una
membrana delgada y rara vez matan a su hospedero, en algunos casos, l as plantas
pueden atrofiarse notablemente.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Bistur
Cajas de petri
Cubre y portaobjetos
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
29
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Procedimiento:
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados:
30
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Conclusiones:
31
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Objetivo
:
Introduccin
:
Las royas son enfermedades causadas por hongos basidiomicetos del orden
uredinales, los cuales son parsitos estrictos. En su gran mayora, tienen una
distribucin mundial atacando en forma agresiva cereales y plantas forrajeras,
forestales, frutales, hortcolas, industriales y ornamentales.
Los gneros de hongos responsables de las royas, generalmente infectan las partes
areas de las plantas produciendo lesiones pustilares conocidas con el nombre de
soros, agallas y diversos tipos de ramificaciones conocidas como escoba de bruja o
una reduccin en su desarrollo.
De las royas de los cereales, la del trigo mas importante econmicamente, ya que se
presenta en todos los lugares del mundo donde s cultiva esta gramnea, siendo la mas
destructiva la causada por Puccinia graminiss, la cual forma uredosoros de color caf-
rojizo oscuro en ambos lados de las hojas, en los tallos y en las espigas.
Materiale
s:
Agujas de diseccin
Bistur
Cajas de petri
Cubre y portaobjetos
Microscopio
Estereoscopio
Lactofenol
32
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Procedimiento:
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados:
33
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Conclusiones:
34
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Objetivo
:
Introduccin:
Materiales:
Agujas de diseccin
Asa bacteriolgica
Cajas petri
Cubreobjetos y portaobjetos
Jeringas desechables
Matraces Erlenmeyer 35
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Morteros
Pinzas
Tubos de vidrio
Vasos de precipitado
Microscopio
Estereoscopio
Procedimient
o:
Examinar las hojas de las plantas enfermas. Describir y anotar los tipos de sntomas y
signos.
Lavar con agua corriente las hojas daadas y posteriormente desinfectar con
hipoclorito de sodio o agua jabonosa, para eliminar ambos, enjuagar con agua
destilada estril.
Hacer cortes de los tejidos enfermos, con navaja o tijeras, tomando tejido sano y
enfermo, aprox. De 0.5 cm de dimetro.
Hacer aislamientos por estra cruzada en placas con medio de cultivo B de King.
Tanto las colonias fluorescentes como las de pigmentacin amarilla sern asperjadas
con una suspensin de 3 x 108 clulas por mililitro en pantas de frijol sanas.
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Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados:
37
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Conclusiones:
38
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Objetivo
:
Introduccin
:
La marchitez bacteriana es una de las enfermedades de tipo sistemtico que se
observa en muchas plantas vasculares y la cual tiene una distribucin mundial ya que
ha sido reportada en frica, Argentina, Canad, EU, Europa, Japn y Mxico.
Las bacterias responsables de esta enfermedad, entran en los tejidos de las plantas, se
propagan y mueven a travs de los vasos xilematicos, y debido a la gran cantidad de
bacterias producidas as como a la produccin de polisacridos dentro de estos vasos
se produce una interferencia en la translocacion de agua y nutrimentos.
Material
:
Agujas de diseccin
Cajas petri
Porta y cubreobjetos
Matraces erlenmeyer
Tubos de ensayo
Vasos de precipitados
Micro y estereoscopio
Equipos Gram
Plantas de tomate
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Procedimiento:
Hacer una descripcin de los sntomas y signos presentes en plantas de tomate y/o de
papa con sntomas de marchitez bacteriana.
Moler los trozos de tejido ya tratado hasta obtener una masa bacteriana.
Inocular mediante la tcnica del palillo, mesa bacteriana, en la axila de las hojas.
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
40
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Resultados:
41
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Conclusiones:
42
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Objetivo
:
Describir los sntomas necrticos y manchados causados por diferentes hongos, tanto
en frutos como en follaje.
Introduccin
:
Las partes areas de las plantas cultivadas: follaje, flores, frutos, peciolos y ramas
jvenes, pueden ser daadas por una serie de hongos imperfectos pertenecientes a
diversos gneros como: Alternaria, Cercospora, Colletotrichum, Helminthosporium,
Micosphaerella, Pestalotia, Phytophthora, Pseudooeziza, Pyricularia y otros.
A las enfermedades que producen las diferentes especies del hongo Calletotrichum, se
les da el nombre de Antracnosis las cuales se presentan en leguminosas como el
frijol, en rboles frutales como: el aguacate, el cafeto y el mango, adems, en otros
cultivos como la sandia.
Material
:
Agujas de diseccin
Cajas de petri
Cubre y portaobjetos
Estufa de incubacin
Matraces erlenmeyer
Navaja
Vasos de precipitados
Micro y estereoscopio
Hipoclorito de sodio al 2%
Procedimiento:
Cortar trozos de tejido de 0.5 cm de dimetro y desinfectar las muestras con solucin
de hipoclorito de sodio al 2% durante cinco minutos. Decantar el hipoclorito y lavar dos
veces con agua destilada estril; colocar los trozos de tejido desinfectado en placas
con PDA.
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
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Resultados:
45
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Conclusiones:
46
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Cylindrosporium sp.
Pestalotia sp.
Colletotrichum
47
LaboratoriodeFitopatologa
Objetivo
:
Diferenciar el tipo de pudricin inducido por Erwinia carotovora de aquel producido por
Bacilluis spp.
Introduccin
:
Las bacterias que inducen desintegracin de tejidos vegetales por efecto de las
enzimas, se presentan con mayor frecuencia en hortalizas constituidas por tejidos
carnosos tales como: Apio, berenjena, calabaza, cebolla, col, espinaca, papa, rbano,
tomate y zanahoria; en estos cultivos se producen prdidas considerables en el campo,
durante su transporte, almacenamiento y mercadeo.
Los sntomas son semejantes en todos los hospederos, al principio en dichos rganos
aparece una pequea lesin aguanosa que se extiende con rapidez tanto en dimetro
como en profundidad, la zona afectada se ablanda y suaviza. Su superficie puede
quedar manchada o hendida, o bien arrugarse y quedar vejigosa, los bordes al principio
estn bien definidos pero despus se hacen irregulares. Los tejidos se vuelven opacos
y en corto tiempo adquieren un color cremoso y se vuelven mucilaginosos
desintegrndose hasta formar una masa de clulas desorganizadas. En los frutos y
tubrculos la superficie externa permanece intacta a diferencia de sus contenidos que
cambian hasta constituir un lquido turbio, pero es ms frecuente que se formen grietas
y exude un liquido mucilaginoso a travs de ellas, casi no tiene aroma, hasta que se
colapsan sus tejidos infectados despus de lo cual, las bacterias secundarias hacen
que los tejidos se descompongan y produzcan un olor desagradable.
Material
: Asa
Bistur
Cajas de petri
Cubreobjetos y portaobjetos
Matraces erlenmeyer
Pinzas
Vasos de precipitados
Micro y estereoscopio
Alcohol
Procedimiento:
Hacer cortes de tejidos enfermos y sanos con navaja o tijeras tomando aprox. 0.5 cm
de dimetro. Colocar los cortes de tejido en tubos de caldo nutritivo o agua destilada
estril y/o forma directa a partir de la lesin/
Hacer aislamientos por estra cruzada, tomando una asada a partir de los tubrculos
con agua destilada estril y/o directa e incubar a temperatura ambiente.
Hacer una incisin que pase por el centro de la rodaja teniendo cuidado de no llegar a
los extremos, la profundidad de esta incisin no deber ser mayor de 3 milmetros.
Inocular por medio de una asa bacteriolgica masa bacteriana a lo largo de incisin, a
partir del cultivo puro de la cepa que se aisl.
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Adicionar acido tnico con trixido de cromo y dejar actuar por 10 min.
Observar a microscopio.
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicion. Academic Press. 636 pp.
Resultados:
50
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Conclusiones:
51
LaboratoriodeFitopatologa
Objetivo
:
Introduccin
:
Materiale
s:
Suelo fresco
Embudo 52
LaboratoriodeFitopatologa
Abrazadera Tela
Soporte universal
Papel filtro
Ligas
Cajas petri
Procedimient
o:
Utilizando una muestra fresca del suelo aproximadamente de 100 a 300 cc. Los
nematodos pueden aislarse mediante el mtodo del embudo de Baermann o mediante
tamizado.
Mtodo 1: Embudo de
Baermann
Mtodo 2: Por
tamizado
Se basa en que una muestra pequea de suelo (300cc) se mezcla con un volumen
mucho mayor de agua (2Lts), los nematodos flotan en el agua y pueden ser colectados
en tamices con poros de ciertos tamaos.
53
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Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados
:
54
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Conclusiones:
55
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Objetivo
:
Introduccin:
Materiales:
Planta contaminada
Estuche de diseccin
Agua
Embudo de vidrio
Tubo de goma
Soporte universal
Papel filtro
Tela 56
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Ligas Cajas
petri
Estereoscopio
Procedimient
o:
Sin tomar en cuenta el rgano de la planta que contenga a los nematodos, se cortan
en piezas pequeas ya sea con la mano o utilizando una mezcladora durante unos
segundos y se vierte entonces en el embudo de Baermann segn el mtodo. Los
nematodos salen de los tejidos y nadan en el aguan del tubo a partir del cual se
colectan en caja petri.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
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Resultados:
58
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Conclusiones:
59
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Objetivo
:
Introduccin:
Los virus a los que Beijerink les dio el nombre, se caracterizan por su tamao
ultramicroscpico, por su multiplicacin intracelular obligada, porque no han sido
cultivados en medio libre de clulas y por si composicin nucleoproteinica
diferenciandose de esta forma de otros fitopatogenos. Los sntomas que inducen los
virus son primarios y secundarios, los primeros son manifestaciones iniciales en la
planta y resultan frecuetnemente de las inoculaciones mecanicas artificiales y
posteriormente de infecciones naturales. Los secundarios se manifiestan
posteriormente y se pueden observar en partes no inoculadas como es el caso de las
infecciones sistmicas.
Materiales:
Atomizadores
Carborum
Cubre y portaobjetos
Hisopos
Microplacas inmunolgicas
Morteros
Matraces erlenmeyer
Balanza analtica
Floxina
Formalina al 2% 60
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Glicerol
Procedimiento:
Aplicar una cantidad pequea de carborundum en el haz de las hojas de las plantas de
tabaco.
Inocular con solucin amortiguadora una hoja de tabaco, la cual servir como testigo.
Inclusiones virales
Colocar las tiras de tejido en las microplacas serolgicas, que contiene formalina al 2%
y dejar actuar por 15 min.
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Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados:
62
LaboratoriodeFitopatologa
Conclusiones:
63
LaboratoriodeFitopatologa
Objetivo
:
Introduccin
:
La bsqueda de sistemas de control biolgico, que contribuyan a la solucin de
problemas fitopatologicos para eliminar la utilizacin de productos qumicos que tanto
daan el ambiente, ha sido motivo de preocupacin de los investigadores en los ltimos
aos.
Sin embargo realmente son pocos los sistemas biolgicos de control de enfermedades
de plantas que han tenido xito y que se han llegado a comercializar. El xito de estos
sistemas depende de la eficiencia con la que controla el patgeno, la facilidad de
manipulacin del microorganismo antagnico para su produccin a escala industrial y
su bajo costo de produccin.
Material
:
Agitador de vidrio
Tubos de ensaye de 10 x 15
Pipetas de 1 ml
Agujas de diseccin
Cajas petri
Estufa de incubacin
Balanza granataria 64
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Agua destilada
Cloruro de sodio
Procedimiento
Pesar 10 gr de suelo de vivero sin que haya sido tratado con algn plaguicida.
Preparar diluciones: 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7, 10-8 a partir de la suspensin
de suelo.
Pipetear 0.1 ml de diluciones 10 -6, 10-7, 10-8, sembrar por duplicado y depositar en
placas que contengan medio B King. Distribuir sobre la superficie del medio con una
varilla acodada estril e incubar a 28 grados C hasta la aparicin de colonias
bacterianas.
Sembrar en el centro de la placa PDA una porcin del hongo aislado obtenido mediante
un sacabocados de 0.3 cm de dimetro.
Sembrar por la tcnica de punto a una distancia de 2.5 cm del hongo cada una de las
colonias bacterianas seleccionadas.
Incubar las placas sembradas con el hongo y las bacterias a 28 grados C, hasta que se
manifieste una zona de inhibicin por parte de las bacterias con capacidad antagnica.
Dejar como testigo dos placas de PDA sembradas nicamente con el hongo.
Medir el dimetro de la colonia del hongo, cada 24 hr hasta que el testigo haya cubierto
la totalidad de la superficie del medio.
Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
66
LaboratoriodeFitopatologa
Resultados:
67
LaboratoriodeFitopatologa
Conclusiones:
68
LaboratoriodeFitopatologa
Objetivo
:
Conocer los daos que causan los hongos Aspergillus, Penicillium y Fusarium en
granos almacenados.
Introduccin:
Los factores que determinan un grado de infeccin de los hongos son los siguientes:
contenido de humedad del grano, temperatura, humedad relativa, tiempo que
permanece el grano en el almacn, condicin fsica de la semilla e infestaciones por
insectos. Todos estos aspectos se pueden encontrar interactuando, lo cual se traduce
en problemas de contaminacin por hongos de almacn los cuales pueden ser
incrementados por cosecha de los gramos con un contenido de humedad alto,
descuido del grano durante su transporte a largas distancias por un sistema de
ventilacin deficiente en el almacn.
Material
:
Cajas petri
Cubre y portaobjetos
Hipoclorito de sodio 2%
Lactofenol
Matraces erlenmeyer
Pinzas de diseccin 69
LaboratoriodeFitopatologa
de vidrio Soporte
universal Pinzas de
Mohr Jeringa de 20
ml Navaja de un solo
filo
Microscopio compuesto
Microscopio estereoscopio
Cmara hmeda
Estufa de incubacin
Medio PDA
Mac
Harina de maz
Procedimiento:
Desinfectar cinco semillas daadas y cinco semillas sanas con solucin de hipoclorito
de sodio al 2% durante 5 min. Eliminar el exceso de hipoclorito mediante dos lavados
con agua destilada estril.
Pruebas de germinacin
Las semillas seleccionadas sern lavadas con agua corriente para posteriormente ser
sometidas por separado a una solucin de hipoclorito de sodio al 2% seguido de dos
lavados de agua destilada estril.
Enrollar la toalla de papel tendido cuidando que las semillas se mantengan en el mismo
lugar donde fueron ordenadas.
Los rollos formados sern etiquetados y colocados en una cmara hmeda y puestos a
incubar a 28 grados C durante 6 das.
Referencia
s:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
Resultados
:
71
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Conclusiones:
72
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Aspergillus sp.
Fusarium sp.
Penicillium sp. 73
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Objetivo:
Introduccin:
Las aflatoxinas B1, los mayores niveles de contaminacin por aflatoxinas se han
registrado en semillas de algodn y maz, cacahuates, nueces, avellanas y otros frutos
secos. En cereales como el trigo, arroz, centeno o cebada la presencia de estos txicos
suele ser menor.
Materiales:
Licuadora
Balanza analtica
NaCl
Metanol
Filtro
Jeringa de 20 ml
Columnas aflatest
Fluorometro
Solucin de bromo
Procedimiento:
74
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Referencias:
Agrios G.N. 1997. Plant Pathology. 4ta Edicin. Academic Press. 636 pp.
Baudin A.B., Hooper D.E., Matre y R.B. Carrol. 1988. Laboratory Exercises in plant
pathology. An instructional kit. A.P.S. St. Paul Minnesota. 196 pp.
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Resultados:
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Conclusiones:
77