BIOQUIMICA AMBIENTAL

Informe de laboratorio N3
(Medicin y crecimiento microbiano)

DOCENTE:

FLORES GARCA JORGE ANTONIO

ESTUDIANTES:
FERNNDEZ BRAVO, Dayana.
MAYTA QUISPE, Estefani.
HILARIO LEN, Ruth

SECCIN:
BI 1231

Huancayo - Per
2016
 LABORATORIO N 3
MEDICIN Y CRECIMIENTO MICROBIANO

1. OBJETIVO:

Describir las actividades especficas de medicin y crecimiento microbiano.

2. INTRODUCCIN:

Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del nmero de

microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento
de un nico microorganismo (ciclo celular) sino al demogrfico de una poblacin.
En este tema nos centraremos en el crecimiento de bacterias, el estudio que se
hace puede servir tambin para entender el crecimiento de levaduras y de otros
hongos. Se define crecimiento como un aumento en la cantidad de
constituyentes y estructuras celulares, cuando hay crecimiento en ausencia de
divisin celular hay aumento en el tamao y peso de la clula. Mientras que
cuando el crecimiento es seguido de divisin celular hay un aumento en el
nmero de clulas.

Es importante distinguir entre el crecimiento de clulas individuales y el

crecimiento de poblaciones, ya que en los microorganismos debido a su pequeo
tamao no se hacen estudios de crecimiento individual sino estudios de
crecimiento de poblaciones.
El crecimiento de una poblacin es el aumento del nmero de clulas como
consecuencia de un crecimiento individual y posterior divisin. El crecimiento de
una poblacin ocurre de una manera exponencial. El crecimiento exponencial es
una consecuencia del hecho de que cada clula se divide dando dos (2) clulas
hijas, las cuales al dividirse darn cada una dos clulas hijas, as es que en cada
perodo de divisin la poblacin se duplica.

La velocidad de crecimiento exponencial se expresa como tiempo de

generacin (G) y este se define como el tiempo que tarda una poblacin en
duplicarse. Los tiempos de generacin varan ampliamente entre los
microorganismos, algunos crecen rpidamente y presentan tiempos de
generacin de unos 30 minutos y otros tienen tiempos de generacin de varias
horas o incluso das (1).
3. EQUIPOS/MATERIALES y REACTIVOS A UTILIZAR EN LA PRCTICA:

CANTIDAD MATERIALES CAPACIDAD

1 Incubadora de 35C-37C

4 Tubos de ensayo estriles 16x150mm

6 Placa Petri estril para siembra con agar

nutritivo

1 Pipeta graduada estril 10mL.

3 Pipeta graduada estril 1 mL

1 Mechero Bunsen

1 Pipetor o propipeta

50 mL Agua destilada estril

4. PROCEDIMIENTO:
A. INOCULACIN Y PREPARACIN DE LAS DILUCIONES DEL JUGO
PREPARADO

Pipetear por duplicado, en placas Petri estriles, alcuotas de 1ml a partir

de la muestra original. Emplear diluciones decimales cuando se sospeche
de una alta carga microbiana en la muestra. Transferir 1mL de la muestra
original a un tubo conteniendo 9ml de agua destilada estril (10-1), mezclar
vigorosamente y continuar con el procedimiento hasta obtener la dilucin
correspondiente.

Templar o calentar el medio de cultivo (agar nutritivo) a 44-46C

aproximadamente, y verter inmediatamente en las placas Petri un mnimo
de 10-12ml. Limpiar el frasco con papel toalla y flamearlo antes de verter
el medio.
 Homogenizar cuidadosamente de la siguiente forma: Mover la placa
verticalmente 5 veces, luego moverla 5 veces en forma horizontal, moverla
5 veces en sentido horario y finalmente 5 veces en el sentido anti horario.

Dejar solidificar el medio e invertir las placas para incubarlas a 35C-37C

durante 48 horas.
B. Incubacin y recuento

Dejar solidificar el medio e invertir las placas para incubarlas a 35C-37C

durante 48 horas.

EL conteo fue en el primero de 27 y en el segundo 7

Expresar el resultado en unidades formadora de colonias por mililitro

(UFC/mL) y calcular con la siguiente expresin:

Recuento de microbiano = Promedio obtenido x Factor de Dilucin

o 10-1=27
o 10-2=7
o RECUENTO:
34
o PROMEDIO:
34
= 17
2
o DILUCIN:
17 65 = 1105
5. RESULTADOS:

Placas Petri reaccionando ante la temperatura.

Resultados del crecimiento microbiano, despus de 43 horas aproximadamente.

En esta imagen se puede ver 33 colonias de bacterias.

6. En esta imagen se logra apreciar que el aumento de colonias va incrementado

conforme al tiempo transcurrido de las placas Petri expuestos aun temperatura
idnea para su crecimiento
7. DISCUSIN:
La velocidad de crecimiento exponencial se expresa como tiempo de generacin (G) y este
se define como el tiempo que tarda una poblacin en duplicarse. Los tiempos de
generacin varan ampliamente entre los microorganismos, algunos crecen rpidamente y
presentan tiempos de generacin de unos 30 minutos y otros tienen tiempos de
generacin de varias horas o incluso das. En la siguiente tabla se presenta un experimento
de crecimiento partiendo de una clula (bacteria), que tiene un tiempo de generacin de
30 minutos.

Se presenta una tcnica para la optimizacin del medio de cultivo Caldo

Triptona Soya suplementado con suero equino para el crecimiento
de Gardnerella vaginalis. Se utiliz un diseo experimental 22 donde se
evalu la influencia de dos componentes del medio y un diseo compuesto
central para mejorar los rendimientos celulares. Con la mejor variante de
este estudio se realizaron corridas para caracterizar el crecimiento
bacteriano empleando diferentes estimaciones. Se obtuvo que la direccin
hacia los mayores crecimientos se localiz hacia mayores concentraciones
de triptona soya y suero equino. La variacin en la concentracin de los
componentes evaluados no influy en la expresin de las protenas
antignicas dado por los perfiles electroforticos obtenidos.

Palabras clave: Gardnerella vaginalis, medio de cultivo, crecimiento,

optimizacin, diseo experimental.

Con respecto a los resultados obtenidos en el conteo de unidades

formadoras de colonia (4,06 x108 0,17 UFC/mL) y la concentracin de
protenas (2,75 mg/mL) a las 18 h de crecimiento se destaca el medio
evaluado TS+se modificado al comparase con el medio control,
correspondiendo con un nivel de significacin de p<0,05. En este sentido,
los resultados coinciden con lo reportado sobre los diferentes mtodos que
existen para la estimacin del crecimiento de bacterias como G. vaginalis,
uno de ellos es la medicin de la turbidez que tiene una alta
reproducibilidad y correlacin con el peso seco y el conteo de clulas
viables; siendo este ltimo el ms sensible para la determinacin de la
biomasa bacteriana.
1. CONCLUSIN:

El crecimiento de la poblacin bacteriana; se incrementa en relacin con la

exposicin de este cultivo ante una temperatura determinada.

2. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS CONSULTADAS Y/O ENLACES

RECOMENDADOS

1. Tirado J, Paredes D, Velasquez G, et al. Crecimiento microbiano en productos

crnicos refrigerados. Rev. Redalyc. 2005; 5(1): 66-76: Disponible en:
http://www.redalyc.org/pdf/724/72450110.pdf

2. http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema
_6_crecimiento.pdf

3. Dowd T, Bourne N. Inventing a new diagnostic test for vaginal infection.

BMJ. 1994;309:40-2: Disponible en
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
03002009000200011

4. Karmali MA, Simor AE, Roscoe M, Fleming PC, Smith SS, Lane J.
Evaluation of a blood-free, charcoal based selective medium for the
isolation of Campylobacter organisms from feces. J Clin
Microbial.1986;23:456-9:
Disponible en
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
03002009000200011