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BIORREACTORES

OBJETIVOS:
Analizar y comprender la importancia del
crecimiento celular como base del
funcionamiento de un biorreactor.

Establecer las ecuaciones de diseo propias de un
biorreactor ya sea intermitente o continuo.

Indicar los factores o condiciones de proceso que
afectan el funcionamiento de un biorreactor.

BIORREACTORES
1. CRECIMIENTO Y DIVISIN CELULAR
Crecimiento de un organismo aerbico sigue la
ecuacin:





Sustrato clulas Ms clulas + Producto

Crecimiento celular en un reactor discontinuo
2. LEYES DE VELOCIDAD
Hay muchas leyes para velocidad de crecimiento celular de
nuevas clulas, por ejemplo:
Clulas + sustrato ms clulas + producto

Sin embargo, la expresin ms empleada es la ecuacin de
Monod par crecimiento exponencial

rg= *Cc
Donde
r
g
= velocidad de crecimiento de la clula, g/dm
3
.s
c
c
= concentracin de clulas ,g/dm
3

= velocidad de crecimiento especifico, s
1

La velocidad de crecimiento especifico de las clula se
puede expresar como:
=
mx
c
s
k
s
+c
s
s
1

Al combinar las ecuaciones 1 y 2, llegamos a la ecuacin de
Monod para la velocidad de crecimiento de las clulas
bacterianas.


Para bacterias distintas, la constante
es pequea, en cuyo caso la ley de velocidad se reduce a:
rg= mx*Cc



=

+

Ecuacin de Tessier



Ecuacin de Moser


mx= [1-exp(

)]
=

( +

)

La estequiometria del crecimiento celular es muy
compleja y vara segn los microrganismos.

+ +

El coeficiente de rendimiento para clulas y sustrato
es

=


=



3. ESTEQUIOMETRIA

=
1


La velocidad de formacin para el producto es

=


=



Hacemos que el producto de

y sea (

)
Si el producto se forma durante la fase estacionaria

)

El coeficiente de rendimiento que relaciona la cantidad
de producto formado por masa de sustrato consumido
es

=


=



Parte del sustrato que se utiliza para mantener las
actividades cotidianas de las clulas.

=




Un valor tpico es
= 0.05



1

= 0.05
1


Si la tasa de consumo de sustrato para mantenimiento



SI el mantenimiento es despreciable



en donde:

=





Utilizacin de sustrato.




La velocidad correspondiente de formacin de producto es



Durante la fase estacionaria no existe crecimiento celular.

La velocidad de formacin de producto durante la fase
estacionaria es similar en forma de la ecuacin de Monod.



La velocidad neta de consumo de nutrimento
secundario durante la fase estacionaria es



Dado que el producto deseado puede sintetizarse
cuando no hay crecimiento celular.





La tasa especfica de formacin de producto (q
p
) se da
en trminos de la ecuacin de Luedeking-Piret

=

La cual tiene dos parmetros, (crecimiento) y
(ausencia de crecimiento).
con



4. BALANCE DE MASA
Hay dos formas en las que podramos explicar
el crecimiento de los microorganismos.
Tomar en cuenta el nmero de clulas
vivas.

La masa de clulas vivas.
Un balance de masa para el microorganismo
en un reactor continuo de mezcla perfecta
(quimiostato) de volumen constante es:
Velocidad de
acumulacin
de clulas
g/s
Velocidad de
entrada de
clulas g/s
Velocidad de
salida de
clulas, g/s
Velocidad
neta de
generacin
de clulas
vivas, g/s

(25)
Balance de masa de un quimiostato
V=cte
Para un sustrato el balance es:

Velocidad de
acumulacin
de sustrato,
g/s
Velocidad de
entrada de
sustrato, g/s
Velocidad de
salida de
sustrato, g/s
Velocidad de
generacin
de sustrato,
g/s

=
0

(26)

En casi todos los sistemas la concentracin de entrada del
microorganismo C
c0
es igual a cero.

OPERACIN INTERMITENTE:
Un sistema intermitente =

= y los balances de masa son


los siguientes:
Clulas:
V

Balance de masa

Dividiendo entre el V del reactor se tiene:

(27)
Sustrato:
La velocidad de desaparicin del sustrato, -r
s
, se deriva del
sustrato empleado para el crecimiento y mantenimiento celular.
V

(28)
Dividiendo entre V:

Fase de crecimiento (29)


Para clulas en fase estacionaria.
V

Fase estacionaria (30)




Producto:
La velocidad de formacin de producto, r
p
, puede relacionarse
con la velocidad de consumo del sustrato a travs del siguiente
balance:
V


Durante la fase de crecimiento se puede relacionar la velocidad
de formacin del producto, con la velocidad de crecimiento
celular.
El nutriente esta
uniformemente
distribuido y, en caso
de haber ms de una
especie de
microorganismo, estas
tienen el mismo
acceso al nutriente.
CARACTERSTICAS

Permite al operador
controlar la velocidad
de crecimiento celular, a
travs del ajuste del
flujo volumtrico.
CARACTERSTICAS
CMO OPERA UN QUIMIOSTATO
La agitacin se lograr
por impulsores o por
el movimiento de la
fase lquida.
El suministro de
oxgeno a los
microorganismos se
lleva a cabo, por
burbujeo de aire.
CMO OPERA UN QUIMIOSTATO
La temperatura se mantiene
constante y uniforme por
medio de la circulacin de
agua de enfriamiento.
El pH del medio de cultivo se
controla con la adicin de
cido o de base.
6. ECUACION DE DISEO

En esta seccin recordaremos:

balance celular:
.. (1)

balance de sustrato:

(2)

=
0
*Cc
0
- *Cc + (r
g
r
d
)

=
0
*Cs
0
- *Cs + r
s
*V

A continuacin definiremos un parmetro a los
biorreactores llamado tasa de dilucin.

:tasa de dilucin
:flujo volumtrico
:volumen


La tasa de dilucin recproco al tiempo espacial .



=


Dividimos las ecuaciones (a) y (b) entre V, y
aplicamos la definicin de la tasa de dilucin.

Acumulacin=Entradas Salidas + Generacin

Clulas: (3)

Sustrato: (4)

= 0 D*Cc + (r
g
r
d
)

= D*Cs
0
D*Cs + r
s

Para operaciones en estado estacionario,
tenemos:

Clulas: (5)



Sustrato:
(6)



D*Cc = r
g
r
d

D(Cs
0
Cs) = -r
s

Usando la ecuacin de Monod, la tasa de
crecimiento se determina como sigue:

(7)

Donde:
: velocidad de crecimiento especficos, s
-1

Ks: constante de Monod, g/dm
3

Cs: concentracin de sustrato, g/dm
3


r
g
= *Cc =

max
CsCc
+

De a ecuacin (5) despreciaremos la velocidad
de muerte, r
d
luego combinamos las ecuaciones
(5) y (7)para operacin en estado estacionario.


Reemplazamos rg


dividimos entre Cc*V


D*Cc = r
g


D*Cc = *Cc
D =

Empleando la ecuacin (8) para sustituir en
trminos de la concentracin de sustrato

(8)

y despus resolviendo para concentracin de
sustrato en estado estable, obtenemos:

(9)



=
max
*

+

Cs =

max

Asumiendo un solo nutrimento sea el
limitante, la estequiometra es:


Sustituyendo Cs de la ecuacin (9) obtenemos:


Cc = Y
s/c
(Cs
0
Cs)
Cc = Y
s/c
(Cs
0


max
)
7. DESAPARICIN
Para comprender el efecto de la tasa de dilucin,
combinaremos las ecuaciones (3) y (13), e
igualaremos r
d
= 0
(13)

para obtener:
(14)

r
g
= * Cc

= ( - D)* Cc

La tasa de dilucin a la cual ocurre la
desaparicin se obtiene de la ecuacin (12)
igualando Cc = 0

(15)

D
max
=
max 0
+0

A continuacin determinamos la tasa de dilucin
mxima de clulas. La tasa de produccin celular por
volumen unitario del reactor es el flujo msico de
clulas que salen del reactor (es decir, m
c
= Cc =
Cc*
0
divida entre el volumen V.


Usando la ecuacin (12) para sustituir Cc, se obtiene

(16)

Cc

= D*Cc
D*Cc = D*Y
c/s
(Cs
0
-

max
)
En la figura 7-22 se muestra la tasa de produccin, la
concentracin de clulas y la concentracin de
sustratos como funciones de la tasa de dilucin.
(17)



()

= 0


La tasa mxima de produccin de clulas es:

(18)
D
prod.max
=
max
(1 -

+0
)
8. CRECIMIENTO LIMITADO POR OXIGENO
La velocidad de transferencia de
oxigeno se relaciona con la
concentracin de clulas.
rO
2
= Q
O2
*C
c


8.1. Ejemplo:


Se obtuvieron los siguientes datos con la levadura
para pan en determinado medio a 23.4 C y diversas
presiones parciales de oxgeno.

P
O2
Q
O2
(sin sulfanilamida)
0.0 0.0
0.5 23.5
1.0 33.0
1.5 37.5
2.5 42.0
3.5 43.0
5.0 43.0
Calcule Q
O2
mxima (Vmax) y la constante de
Michaelis Menten Km.
La ecuacin de Michaelis menten:

+
=

+


Sea: Q
O2
= r
p
y P
O2
=S

1

=
+

=

(
1

) +
1



1/P
O2

1/Q
O2
(sin
sulfanilamida)
2 0.04255319
1 0.03030303
0.66666667 0.02666667
0.4 0.02380952
0.28571429 0.02325581
0.2 0.02325581
Acomodando los datos:

Graficando 1/Q
O2
vs. 1/P
O2


0
0.005
0.01
0.015
0.02
0.025
0.03
0.035
0.04
0.045
0 0.5 1 1.5 2 2.5
De la grafica obtenemos que:

y = 0.0111x + 0.0199
pendiente = 0.0111
Interseccin: 0.0199

=0.0199
Vmax= 50.25 mL O
2
/hr.mg de clulas

=0.0111
Km= 0.5578

9. Escalamiento

Conclusiones
Para comprender el funcionamiento de un
biorreactor es necesario precisar las condiciones
a las que tiene lugar el desarrollo de la vida
celular, as como las etapas y la velocidad de
crecimiento de un microorganismo, especificado
en la ecuacin de Monod.

=


1
(2)

Con las ecuaciones de diseo se puede explicar
el crecimiento y desarrollo de los
microorganismos dentro de un biorreactor, ya sea
intermitente o continuo. Asimismo podemos
expresarlo con la ayuda del balance de masa de
las clulas vivas. Para lo cual debemos conocer la
velocidad de generacin y de desaparicin de
clulas, como se expresa en la siguiente ecuacin:

=
0

+ (

) (25)

Para un garantizar que los microorganismos de
la biomasa no mueran, es necesario disear
un biorreactor que maximice la transferencia
de oxgeno entre las burbujas del aire
inyectadas y las clulas, en sistemas limitados
por oxigeno.