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II. OBJETIVOS
Identificar las principales caractersticas del tejido vegetal.
Identificar los principales organelos de las clulas.
a) MITOSIS
Profase
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La envoltura nuclear se desorganiza.
Los centriolos migran a los polos, esto no se dan en las clulas vegetales
superiores ya que no poseen centriolos.
Se forma el huso acromtico: se polimeriza la tubulina formando micro
tbulos, que constituyen las fibras del huso.
Metafase:
Los cromosomas se enganchan a las fibras del huso, los cromosomas se ubican
en la placa ecuatorial
Traccionados por las fibras del huso, los cromosomas se ubican en la placa
ecuatorial.
Los cromosomas alcanzan el mximo grado de condensacin.
Anafase:
Telofase:
Es una forma de divisin celular que da lugar a la formacin de clulas con diferente
informacin gentica para los mismos caracteres. Se da con reduccin de la cantidad de
cromosomas a la mitad, de tal manera que partiendo de una clula diploide obtenemos
clulas haploides. Llevndose a cabo en las clulas germinales que forman gametos.
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1 DIVISIN MEIOTICA: Comprende cuatro fases:
Metafase I:
Anafase I:
Telofase I:
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2 DIVISION MEIOTICA: Luego de un perodo breve denominado intercinesis (sin replicacin
de ADN) cada clula sufre Meiosis II. En las fases de la meiosis II (Profase II y Metafase II) se
dan sucesos semejantes a los de la mitosis. Se distinguen las siguientes fases:
Anafase II: Las dos cromtidas de cada cromosoma se separan y los nuevos cromosomas
hijos migran hacia los polos.
Telofase II: Los cromosomas se desespirilizan, aparecen los dos ncleos hijos y por la
citocinesis se divide el citoplasma, resultando 4 clulas hijas de las 2 que haba al iniciarse
esta 2 divisin.
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IV. MATERIALES
Microscopio
Cuchilla
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Agua Destilada
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Procedimiento
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2.
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4.
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V. RESULTADOS
Aumento: 100X
VI. CONCLUSIONES
- Las clulas meristemticas son clulas que se encuentran en los vegetales y que tienen la
facultad de dividirse, las primarias hacen crecer al vegetal en longitud, estn en las yemas
y en las puntas de las races. Por ello se us la cebolla como muestra biolgica, el extremo
apical de la raz (pice).
- En la tincin de la muestra de las raicillas, se us la orcena actica 1% ya que detiene el
proceso de divisin de la clula el cual permite ver los cromosomas. Dichos cromosomas
tomaran un color morado.
VII. CUESTIONARIO
1) Cmo se utilizan los preparados temporales y permanentes?
La preparacin permanente es aquella en la que la muestra se coloca en el portaobjetos, se
recubre de algn tipo de resina o medio de montaje (pegamento) que no dae las estructuras
y se pone encima un cubreobjetos. Esa preparacin permanente, tras dejarla secar, puede
estudiarse todas las veces que se requiera.
La preparacin temporal tiene como objetivo hacer una identificacin rpida de la muestra
a travs de observacin al microscopio, tras lo cual se desecha, o dicho de otro modo, se
pone la muestra sobre el porta, se pone cubre si hace falta, se mira al microscopio y se tira,
porque no se emplea ninguna resina que preserve la muestra en el tiempo.
2) Cmo se utiliza el micrtomo?
Estos micrtomos se componen de un sujeta-muestras fijo y una cuchilla que est fijada
sobre una corredera. Para garantizar un corte estable, normalmente las correderas de los
micrtomos suelen pesar bastante. Durante el corte se presiona la cuchilla a travs de la
muestra. El micrtomo de deslizamiento permite cortes con un espesor de 1 a 60 m.
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Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a clulas, tejidos, fibras,
etctera. De acuerdo con su origen, se pueden dividir en: colorantes naturales, los cuales son
extrados de plantas o animales, y colorantes artificiales, que son aquellos de minerales
procesados y manipulados en el laboratorio.
Se utiliza para destacar alguna estructura celular o tisular empleando colorantes inocuos
para la vida de las clulas, no modifican la estructura de ellas ni interfieren en sus funciones.
A este procedimiento se le conoce como coloracin vital.
Existen dos tipos de coloracin vital:
Coloracin intravital; consiste en la administracin de colorantes vitales a travs de
las vas digestiva o intratraqueal; mediante inyecciones sanguneas, linfticas,
subcutnea, o intraperitoneal. Las soluciones de uso ms frecuente son: tinta china,
carmn de litio, azul tripan (partculas colorantes que demuestran la capacidad
fagoctica).
Coloracin supravital; En este procedimiento se emplean colorantes que se aplican
a clulas o tejidos provenientes de organismos vivos.
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Todos los seres vivos, unicelulares y pluricelulares tienen como misin fundamental la de
reproducirse preservando sus caractersticas esenciales a travs de las generaciones. Los
fenmenos que tienen lugar durante la reproduccin celular corresponden a una de las etapas
del proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la coordinacin de una serie de
procesos que involucran la integracin que conducen a la duplicacin de ADN, su condensacin,
segregacin y posterior descondensacin. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante
la cual una clula da origen a dos clulas hijas con igual dotacin de cromosomas. Aunque la
mitosis, de por s es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas
consecutivas de acuerdo a los cambios morfolgicos que va experimentando la clula y que se
continan con la citocinesis.
II. OBJETIVOS
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Muchos de los detalles de la mitosis varan de unos organismos a otros; sin embargo, la
mitosis est dividida convencionalmente en cuatro etapas -profase, metafase, anafase,
telofase-, las cuales tienen como funcin realizar los movimientos necesarios para repartir
equitativamente el material gentico. La ruptura de la envoltura nuclear marca el inicio de la
profase. Cada cromosoma est formado por dos cromtides dispuestas muy juntas
longitudinalmente y conectadas por el centrmero. Durante la metafase los pares de
cromtides de mueven dentro del huso y finalmente se dispone en el plano medial de la
clula. En la anafase las cromtides hermanas se separan bruscamente y son conducidas a los
polos opuestos del huso, mientras que el alargamiento del huso aumenta la separacin entre
los polos, cada cromtida se transforma en un cromosoma separado. Al iniciarse la telofase,
los cromosomas alcanzaron los polos opuestos y el huso comienza a dispersarse en dmeros
de tubulina y finalmente se vuelven a formar envolturas nucleares alrededor de los conjuntos
de cromosomas.
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Metafase. Los microtbulos del cinetocoro alinean los cromosomas en un plano ecuatorial de
la clula. Cada cromosoma se mantiene en tensin en esta placa metaf- sica por los
cinetocoros apareados y por sus microtbulos asociados, los cuales estn unidos a los polos
opuestos del huso (centrolos).
Anafase. Inicia cuando los cinetocoros apareados se separan, permitiendo que cada
cromtida sea arrastrada lentamente hacia un polo del huso.1
Telofase. Los cromosomas hijos separados llegan a los poros y los microtbulos del
cinetocoro desaparecen. Los microtbulos polares se alargan an mas y se vuelve a formar la
envoltura nuclear. La cromatina condensada se expande y los nucleolos reaparecen; la mitosis
ha llegado a su fin.
Figura 1. Ciclo Celular. Nuez, R.; Escalona, J. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.
Extrado de:
http://fournier.facmed.unam.mx/deptos/embrio/images/PDF/ciclo%20celular.pdf
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El ciclo celular. Lomanto, L; Ortiz, O; Gomez, A y Mesa, V. Articulo Estudiantil de la UNAB.
Extrado de: http://www.biologia.bio.br/curso/r616_ae_c1.pdf
IV. MATERIALES
Pinzas de punta aguda
Microscopio
Bistur
Mechero de alcohol
Alcohol
Agua destilada
Colorante orcena actica 1%
Cebolla (comprobando que conservan sus pices radiculares)
Placa Petri
Cubre Objeto
Porta Objeto
Esmalte transparente
Vaso o frasco
V. PROCEDIMIENTOS
Paso N2: Se saca con cuidado los pices de la cebolla y se coloca en la placa Petri
para luego con ayuda de la lupa se har el corte longitudinal y transversal (4
fragmentos).
Paso N3: Colocar el pice radicular en la placa Petri con 5ml de alcohol, dejar 10 a
20 min. Evitar que se evapore la preparacin.
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Paso N4: Se extrae los pices con una pinza,
se coloca en el portaobjeto; para luego
secarlas con el papel filtro.
Paso N5: Se agrega una gota de colorante de
tincin. Con el pulgar se presiona sobre la
parte superior del cubre objeto; luego se
pinta con el esmalte transparente
cuidadosamente y por ltimo se flamea (10
pasadas) la muestra. Fig. N2: en esta foto se encuentra el
Paso N6: Finalmente se lleva al microscopio pice radicular de la cebolla con 5ml de
alcohol.
para distinguir el objetivo trazado.
VI. RESULTADOS
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FIG. 2 INTERFASE
FIG. 4 METAFASE
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FIG. 5 ANAFASE
VII. CONCLUSIONES
Se demuestra que todas las clulas de cualquier planta o animal han surgido a partir de
una nica clula inicial como el vulo fecundado por un proceso de divisin.
Se concluye que una clula mittica se divide y forma dos clulas hijas idnticas, cada
una de las cuales contiene un juego de cromosomas idntico al de la clula parental.
En esta prctica pudimos observar cada una de las fases de la mitosis, reconocerlas y
diferenciarlas con facilidad, ya que en cada una ocurren procesos muy diferentes.
Al observar las fases de la mitosis en clulas somticas, se distinguieron las fases que
comprende la divisin celular
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VIII. CUESTIONARIO
1. Cul es el rol que juega la mitosis en la gentica? de qu factores depende la duracin
de la mitosis?
Se realizan en las clulas corporales, favorecen el crecimiento, formacin y reparacin de los tejidos.
Los factores de la duracin de la mitosis son las fases que se lleva durante este proceso
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2. La cebolla Allium cepa es una especie vegetal con 2n=16 cromosomas Cuntas
cromtidas recibe cada polo en anafase?
ANAFASE
8 cromosomas 8 cromosomas
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En la Telofase los cromosomas ya se han separado estando solo las cromtidas que seran 32, que
se reparten a cada polo (16) para que al momento de la divisin celular se generen 2 hijas.
Si al pasar en el periodo S los cromosomas no entran en mitosis, sino que vuelven a pasar por S,
cada cromosoma tendr cuatro cromtidas, ocho en caso de repetirse la anomala y as
sucesivamente.
El anlisis gentico es una prueba muy compleja que se realiza en un laboratorio especializado en
el anlisis del genoma. Dicho estudio sirve para identificar la causa gentica (la mutacin) de una
determinada enfermedad en un paciente. En algunos casos, las mutaciones pueden ser tan grandes
que se pueden detectar observando los cromosomas al microscopio. A ese tipo de anlisis se le
llama cariotipo, o estudio citogentico. Sin embargo, normalmente, las mutaciones son cambios tan
pequeos que afectan a una nica base qumica del ADN (una letra del genoma). Para detectar estas
mutaciones tan pequeas, es necesario utilizar tcnicas sofisticadas de anlisis del ADN. Estas
tcnicas, mucho ms complejas, se denominan estudios moleculares, y normalmente se realizan
mediante la secuenciacin de una pequea parte del genoma del paciente.
Porque slo los tejidos que estn en crecimiento tienen muchas clulas en Fase M, tos tejidos con
clulas maduras y que no estn en crecimiento tienen ms clulas en interface, en este caso la raz
no crece tan rpidamente como por ejemplo las hojas, y en ese caso la raz tiene pocas clulas en
fase de divisin.
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ANLISIS CROMOSMICO
I. INTRODUCCION
Los cromosomas son las estructuras en que se organiza la cromatina nuclear y que
tienen una expresin dinmica en las distintas fases del ciclo celular. En la mitosis estas
estructuras comienzan un proceso de compactacin que alcanza su mximo nivel en la
metafase. Los cromosomas se tien fcilmente cuando estn condensados y pueden
ser individualizados con el microscopio ptico. Cada cromosoma contiene una molcula
de ADN lineal asociado a distintas protenas y el contenido de genes es variable, aunque
est en relacin con su tamao. Por eso, cualquier alteracin en el nmero o la
estructura de los cromosomas puede ser causa de enfermedades. Para la deteccin de
estas alteraciones se desarrollaron numerosas tcnicas.
II. OBJETIVOS
Controlar el nmero de cromosomas de distintas especies vegetales
Realizar un anlisis cromosmico completo
Realizar un ideograma
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Los tratamientos que se aplican para detener la mitosis en metafase se denominan C-mitticos,
actan de dos maneras, destruyendo el huso acromtico o disminuyendo la energa.
Desorganizando el huso acromtico se impide que los cromosomas se separen por el
centrmero y las cromtidas emigren a los polos, es decir que no se produce la anafase. Por
otra parte, al destruir el huso acromtico, los cromosomas quedan sueltos y es ms fcil
visualizarlos.
Las clulas del cuerpo, o clulas somticas, de cualquier organismo superior tienen un nmero
cromosmico definido y caracterstico de la especie, representado por el nmero cromosmico
2n o nmero diploide. Este nmero significa que los cromosomas en las clulas somticas
existen formando pares, recibiendo cada miembro del par el nombre de homlogo.
Los gametos o clulas reproductoras, se forman por meiosis y tienen un nmero cromosmico
n o haploide (del griego: haplos que significa mitad). En las especies en las que el sexo est
determinado por cromosomas se pueden distinguir:
a) Un par de cromosomas sexuales
b) Autosomas o cromosomas no sexuales
El Cariotipo es el complemento o conjunto cromosmico tpico del individuo o de la especie en
el que se describe el nmero, forma y tamao de los mismos. El cariotipo se perpeta
normalmente en la progenie (Battaglia, 1953). Es decir, en trminos generales, se admite la
constancia en forma, tamao y nmero de los cromosomas, en todas las clulas que componen
el ncleo de un individuo y en los individuos de cada especie. En el cariotipo se ordenan los
pares de homlogos en series, de acuerdo a su longitud, en forma creciente.
La representacin esquemtica del cariotipo se conoce con el nombre de Ideograma. El anlisis
de la morfologa cromosmica se lleva a cabo en el estado de metafase que es el momento en
el que los cromosomas presentan el mayor grado de espiralizacin, y compactacin. Es en este
estado tambin cuando muestra las mejores condiciones de tincin con tintes que presentan
afinidad por los cidos nucleicos; razn que favorece an ms el estudio citogentico de una
determinada especie en esta fase del ciclo de divisin celular.
Para confeccionar un cariotipo se deben tener en cuenta:
1. Nmero bsico de cromosomas; en principio, todos los individuos de una especie tienen el
mismo nmero de cromosomas. Dos especies distintas pueden tener el mismo nmero de
cromosomas.
2. Morfologa del cromosoma, distinguimos:
2.1. Posicin del centrmero: La morfologa depende de la posicin del centrmero. Segn sea
la posicin del centrmero: Posicin media, submedia, subterminal o terminal los
cromosomas se clasificarn en:
- Metacntricos o isobraquiales (centrmero equidistante de los extremos, brazos de
igual longitud).
- Submetacntricos o heterobraquiales (centrmero muy prximo al centro)
- Acrocntricos o cefalobraquiales (centrmero muy prximo a un extremo)
- Telocntricos (centrmero terminal, no se puede hablar propiamente de constriccin,
ni de brazos, slo existe un brazo)
La posicin del centrmero o constriccin primaria se calcula teniendo en cuenta los siguientes
parmetros:
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c= largo total del cromosoma
l= largo del brazo mayor
s= largo del brazo menor
La posicin ser igual a: c = l + s d = c s
El ndice centromrico:
( )
=
ndice de proporcionalidad centromrica (IPC)
=
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La localizacin de la heterocromatina (tanto constitutiva como facultativa) puede llevarse
a cabo analizando cromosomas en placas metafsicas procedentes de cualquier organismo
previo tratamiento y tincin especfica de las mismas.
Las bandas de heterocromatina constitutiva, o bandas G, son observables con la tincin de
Giemsa y su posicin es constante en los cromosomas a lo largo de todo el ciclo celular,
razn por la cual se utilizan para la comparacin de genomas de especies emparentadas.
IV. MATERIALES
Microscopio
Mechero de alcohol
Luna de reloj
Bistur o Gillette
Pinzas de punta aguda
Papel absorbente filtro
Alcohol acido
Agua destilada (helada)
Colorante orcena actica 1%
Meristemo de raz de cebolla (punta de raz germinada)
V. PROCEDIMIENTO
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VI. RESULTADOS
Se pudo visualizar en una de las muestras la siguiente imagen:
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VII. CONCLUSIONES
VIII. CUESTIONARIO
1) Calcule el ndice centromrico de cada par de cromosomas homlogos
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El ndice del centromrico es:
I = (s x 100)/ c
longitud del brazo corto
ndice de proporcionalidad centromrica (IPC) = longitud total del cromosoma
Los cromosomas homlogos son similares en forma y tamao, adems poseen los mismos
genes para determinados caracteres, pero no necesariamente la misma informacin
gentica. De cada par, un cromosoma procede del padre y el otro, de la madre. Los
cromosomas homlogos se aparean en la profase I e intercambian fragmentos de ADN
(sobre cruzamiento) para producir nuevas combinaciones de genes (recombinacin
gentica) que proporciona una gran variabilidad gentica a las especies con reproduccin
sexual.
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Las alogamas son aquellas en que por factores geneticos (incompatibilidad entre gametos
masculino y femenino), o por factores fsicos (no est disponible el polen para la misma
planta por arquitectura floral) el polen de una planta no puede fecundar a la misma planta
y si a otra del mismo gnero y especie que este cerca ya que el polen puede ser llevado por
el viento o insectos de una a otra. Las autogamas son aquellas que si su propio polen
fecunda a la flor femenina generando un nuevo individuo. En lneas generales es lo mismo
que escribiste solo que trate de dar una explicacion ms sencilla. Ejemplo en cereales de
Invierno: trigo Autonoma Centeno Alogama.
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