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POR:
Albert Einstein.
AGRADECIMIENTOS
elevas tu vista al infinito del firmamento y das gracias a Dios que te inspiro
apreciar lo mucho que tuviste que superar para llegar hasta la cumbre.
(Rosado, 2006).
Agradezco a Dios por darme su fuerza y fortaleza cada momento y cada instante de mi
vida.
Agradezco a mi Tutor, El profesor Javier de la cruz, por todo su tiempo invertido, sus
consejos y su ayuda, las cuales han hecho posible esta tesis.
A mi familia por todo su apoyo incondicional, y que siempre han estado conmigo en todo
momento.
Finalmente agradezco a mis amigos y a todas aquellas personas que de forma directa e
indirecta me animaron para la culminacin del presente trabajo
TABLA DE CONTENIDO
RESUMEN ........................................................................................................................................ 8
ABSTRAC .............................................................................................................................................. 9
INTRODUCCION ................................................................................................................................. 10
1. MARCO TERICO ....................................................................................................................... 11
1.1 Qu es el cido hipocloroso? .......................................................................................... 11
1.2 Historia del cido hipocloroso ........................................................................................... 11
1.3 Produccin fisiolgica del cido hipocloroso ................................................................... 12
1.4 Produccin qumica ........................................................................................................... 13
1.4.1 Hidrlisis del gas cloro ................................................................................................... 13
1.4.2 Acidificacin de hipoclorito ........................................................................................................ 13
1.4.3 Electrolisis de solucin de sal ..................................................................................................... 13
1.5 Caractersticas del cido hipocloroso ................................................................................ 14
1.5.1 Capacidad de desinfeccin en funcin del valor del ph ....................................................... 15
1.5.2 Influencia de la temperatura................................................................................................ 16
1.6 Usos del cido Hipocloroso ............................................................................................... 17
1.7 Conceptos y definiciones ....................................................................................................... 17
1.7.1 Limpieza ............................................................................................................................... 17
1.7.2 Desinfeccin ......................................................................................................................... 17
1.8 Cmo escoger un Desinfectante?.......................................................................................... 18
1.8.1 Propiedades de un buen desinfectante .............................................................................. 18
1.9 Riesgos de infeccin ................................................................................................................ 19
1.9.1 Crtica: .................................................................................................................................. 19
1.9.2 Semicrtica ............................................................................................................................ 19
1.9.3 No crtica: ............................................................................................................................. 19
1.10 Categorizacin de los Desinfectantes segn la EPA .............................................................. 19
1.10.1 Desinfectante limitado: ................................................................................................................ 19
1.10.2 Desinfectante de Hospital: ................................................................................................. 20
1.11 Mecanismos de accin de los antispticos y desinfectantes ................................................ 20
........................................................................................................................................................... 20
........................................................................................................................................................... 20
1.11.1 Resistencia Microbiana a los desinfectantes .................................................................... 21
1.11.2 Resistencia intrnseca de las bacterias Gram Positivas ...................................................... 21
1.11.3 Resistencia intrnseca de las bacterias Gram Negativas .................................................... 21
1.11.4 Resistencia intrnseca de hongos ....................................................................................... 21
1.12 Mecanismos de accin de los agentes desinfectantes ......................................................... 22
1.13 Tipos de desinfectantes......................................................................................................... 23
1.14 Revisin de normatividad...................................................................................................... 27
1.14.1 Decreto 3075 de 1997 ........................................................................................................ 27
1.14.2 Decreto 2676 de 2000 ........................................................................................................ 27
1.14.3 NTC 2455-NTC 5150 ...................................................................................................................... 27
2. FORMULACIN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIN ................................................................... 28
3. OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 29
3.1 Objetivo general ...................................................................................................................... 29
3.2 Objetivos especficos ............................................................................................................... 29
4. MATERIALES Y MTODOS.......................................................................................................... 30
4.1 Proceso de Electroactivacin Qumica por Electrolisis de Diafragma ..................................... 30
4.1.1 Condiciones de operacin .................................................................................................... 31
4.1.2 Medidas de seguridad .......................................................................................................... 31
4.1.3 Puesta en marcha ................................................................................................................. 32
4.1.4 Proceso de encendido .......................................................................................................... 32
4.1.5 Mantenimiento del equipo .................................................................................................. 33
4.2 Caractersticas del Proceso Productivo .................................................................................. 33
4.2.1 Protocolo de Limpieza y Lavado de Manos .......................................................................... 33
4.2.2 Elementos de Bioseguridad ................................................................................................. 34
4.2.4 Medida de pH y Alcalinidad.................................................................................................. 34
4.3 MTODOS ................................................................................................................................ 35
4.3.1 Lugar de Estudio ................................................................................................................... 35
4.4 Cepas ...................................................................................................................................... 35
4.4.1 Determinacin de la Viabilidad ............................................................................................ 35
4.4.2 Estndar Macfarln .............................................................................................................. 35
4.4.3 Determinacin de la DBO ..................................................................................................... 36
4.4.3.1 Mtodo utilizado.5220C (Respiromtrico)........................................................................ 36
4.4.4 Determinacin de la DQO .................................................................................................... 37
4.4.4.1 Mtodo utilizado.5220C .................................................................................................... 37
5. RESULTADOS Y DISCUSIN ............................................................................................................ 38
5.1 Anlisis de la DBO obtenida. .................................................................................................. 38
5.2 Anlisis de la Biodegradabilidad.............................................................................................. 39
5.3 Recuentos viables ................................................................................................................... 40
5.4 Estndar Macfarln aplicado en cepas ATCC Bacterianas. .................................................... 40
5.5 Estndar Macfarln aplicado en cepas de Hongos. ................................................................ 41
6. CONCLUSIONES ............................................................................................................................. 42
7. RECOMENDACIONES ................................................................................................................. 43
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................................................... 44
9. ANEXOS ................................................................................................................................. 49
Bibliografa de bacterias y hongos .................................................................................................... 58
INDICE DE FIGURAS
INDICE DE TABLAS
Se visit la funeraria San Juan Bautista, ubicada en la ciudad de Medelln con el fin de
evaluar y valorar el porcentaje de desinfeccin en las reas ms contaminadas como: el
fretro o atad donde va el cuerpo, la parte trasera del carro fnebre o planchn que
permite la entrada del cuerpo y su transporte, como tambin la mesa de preparacin del
cuerpo en el laboratorio de tanatopraxia, obtenindose que despus de la aplicacin del
desinfectante se alcanz un grado de desinfeccin mayor al 90%.(ver anexo 9)
En el presente estudio, se determina la actividad bactericida del Bioasepsia sobre 4 cepas
bacterianas patgenas de referencia internacional ATCC (American Type Culture
Colletion): Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium,
Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y de 4 cepas de hongos Trichoderma,
Penicillum, Fusarum y dermatofito , bajo la aplicacin de la NTC 5150,NTC 2455 que son
las normativas tcnicas Colombianas, para la evaluacin de desinfectantes; los anlisis
se realizan en condiciones controladas de temperatura, concentracin del Bioasepsia
(500ppm) y tiempos de accin de 5,10 y 15 minutos, alcanzando un porcentaje de
inhibicin del 99.9%.
ABSTRAC
The mortuary San Juan Bautista, located in the city of Medellin was visited in order to
evaluate and assess the percentage of disinfection in the most polluted areas as: the
casket or coffin where the body is, the back of the hearse or slab that allowed in the body
and transport, as well as the body prep table in the laboratory of embalming, obtained after
the application of disinfectant disinfection reached a level of over 90%. (see Annex 9)
the present study, it determine the bactericidal activity of 4 Bioasepsia pathogenic bacterial
strains international reference ATCC (American Type Culture colletion): Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Listeria
monocytogenes and 4 strains of Trichoderma, Penicillium, Fusarum and dermatophyte,
upon application of the NTC 5150, NTC 2455 are Colombian technical standards for the
evaluation of disinfectants, analyzes are performed in controlled conditions of temperature,
concentration of Bioasepsia (500ppm) and action time 5,10 and 15 minutes. Reaching a
percent inhibition of 99.9%.
INTRODUCCION
Los usos teraputicos del HClO, inician en la Primera Guerra Mundial(1914-1918), cuando
el alarmante incremento de muertes por infecciones en los soldados, hicieron que se
emprendiera la bsqueda de un desinfectante que se aplicara directamente en las
heridas, que destruyera microorganismos y sus toxinas, sin daar el tejido normal.
En 1915 el tamizaje de ms de 200 compuestos con accin bactericida permiti a los
investigadores Alexis Carrel y Henry Dakin, obtener una solucin de hipoclorito de sodio
tamponado (solucin de Dakin), el cual generaba concentraciones ideales de HClO. La
tcnica de CarrelDakin como fue llamada, se convirti en mtodo para tratar las heridas
infectadas durante la Guerra. Desafortunadamente la baja estabilidad de la solucin, el
dispendioso mtodo de preparacin y los grandes volmenes requeridos, hicieron que el
mtodo perdiera vigencia. [5]
Hacia los aos 80 son retomadas las investigaciones sobre el cido hipocloroso. En 1989
el cientfico britnico Stephen J. Weiss, observ in vitro el poder bactericida del HClO
liberado por neutrfilos (glbulos blancos que intervienen en la defensa del organismo
contra sustancias extraas o agentes infecciosos).Los anlisis cuantitativos demostraron
que al activar (0.6) neutrfilos, durante una incubacin de dos horas se producen
aproximadamente 2*10-7 mol de HClO, cantidad capaz de destruir 150 millones de
bacterias E coli. [5]
En Colombia en 1992, se obtuvo la molcula de HOCl, con una estabilidad superior a un
ao, permitiendo el desarrollo e investigacin profunda del compuesto, hasta lograr la
primera formulacin farmacutica en el mundo a base de HOCl, certificada con el registro
INVIMA nmero 2004M-0003037.Esta formulacin est indicada como solucin
antisptica para el tratamiento y cuidado de heridas en patologas de miembros inferiores
como:lceras venosas, arteriales, traumas venosos, pie diabtico, el producto estabilizado
se llam de NEUTRODERM, desarrollado por Laboratorios AQUILABS S.A. [5]
Cuando se aade cloro al agua en forma de Cl2 (cloro gaseoso), se producen dos
reacciones: la reaccin de hidrlisis y la de ionizacin. La hidrlisis se puede definir de la
siguiente forma:
La constante de reaccin de ionizacin (Ki) .La distribucin relativa de estas dos especies
qumicas HOCl y OCl es muy importante, puesto que la capacidad de destruccin de
organismos por parte del HOCl est entre 40 y 80 veces. [7]
El hipoclorito se hace ms y ms cido en presencia de iones hidrogeno H bajando su
pH, segn la siguiente reaccin:
Los sistemas de electrolisis salina generan cloro a partir de la sal comn disuelta en el
agua. Cuando hacemos circular una corriente elctrica continua por una disolucin salina,
sobr la superficie de los electrodos de la clula de electrolisis se producen las siguientes
reacciones qumicas. [8] :
POLO NEGATIVO (ctodo): 2H 2O 2e H 2 2OH rxn-4.
agua Hidrogeno Hidroxilo
NaCl Cl 2 2 Na 2e rxn-6.
sal _ comun
Acido hipocloroso puede penetrar capas limosas, paredes celulares y capas protectoras
de microorganismos, provocando su muerte o haciendo que su actividad reproductiva se
vea inhibida. [9]
Las soluciones de cloro con pH por arriba de 8 son relativamente inefectivas contra los
Microorganismos patgenos. Por debajo de pH 6, el cloro es ms corrosivo para los
equipos y su actividad se pierde rpidamente. A un pH alrededor de 7 se mantendr cerca
del 80 % del cloro en la forma disponible (cido hipocloroso) con muy poco gas
formado (Figura 5).En el rango entre 7 y7.8 se producir una proporcin de cido
hipocloroso suficiente para garantizar una buena desinfeccin . [11]
1.7.1 Limpieza
1.7.2 Desinfeccin
Las caractersticas que debe tener un buen desinfectante estn determinadas dentro de lo
siguiente: debe tener una alta actividad germicida an diluido, un espectro de accin
amplio que abarque las bacterias Gram positivas y Gram negativas, bacterias, acido-
alcohol-resistentes, virus y hongos, ser bactericida mejor que bacteriosttico yaqu este
ltimo no produce la muerte a una bacteria solo impide su reproduccin, se debe buscar
tambin que todos los microorganismos se mueran gradualmente y en un tiempo corto no
ms de 15 minutos, adems que el desinfectante pueda permanecer almacenado por
varios meses, que sea compatible con otros productos que se usen antes o
simultneamente como los jabones y clorgenos, no debe ser toxico en tejidos humanos,
debe conseguir una reduccin logartmica de los microorganismos patgenos y resulta de
mayor valor cuando sucede en el menor tiempo posible. [16]
1.9.3 No crtica: Los elementos de esta categora entran en contacto con la piel
sana, pero no con las membranas mucosas. La piel intacta es una barrera efectiva
para la mayora de los microorganismos. En contraste con los elementos crticos y
semicrticos, gran parte de los no crticos que pueden volver a usarse deben limpiarse
con desinfectantes de bajo nivel o de nivel intermedio. Pueden contribuir a la
transmisin secundaria de infecciones, contaminando las manos del personal de salud
y el equipo mdico. No obstante, hoy se considera un riesgo a tener en cuenta la
transmisin de agentes infecciosos entre pacientes por la va no crtica. [17]
NIVEL DE
DESINFECTANTE
DESINFECCIN
Glutaraldehido 2%, perxido de hidrgeno 6%, cido
Alto
peractico
Intermedio-alto Compuestos clorados
Intermedio Alcohol, iodforos
Intermedio-bajo Fenoles, clorhexidina
Bajo Amonios cuaternarios
(1) (2)
(3)
Interaccin con la Alteraciones de Entrada al Daos bioqumicos
superficie del la viabilidad del microorganismo interferencia
microorganismo microorganismo
metablica
y/o lisis del microbio
En esta secuencia se muestra que el primer paso sera la interaccin del agente con la
superficie del microorganismo (paso 1),con el propsito de penetrar al mismo para
alcanzar el blanco de accin (paso 2),causando daos bioqumicos diversos y/o
causando alteraciones metablicas, cuyo resultado final sea la destruccin microbiana
(paso 3).Es de notar que la propia superficie microbiana puede causar daos suficientes
para alterar la viabilidad del microorganismo particular [19].
1.11.1 Resistencia Microbiana a los desinfectantes
COMPUEST
CLOR- FORMAL- GLUTARAL-
ALCOHOL OS
HEXIDINA DEHIDO DEHIDO
IODADOS
Glutaraldehid
Alcohol
Gluconato de Povidona o
Compuestos etlico Alcohol
clorhexidina iodada Glutaraldehid
isoproplico
o-fenolato
Concentraci 2%-
60-90% 0.1-4% 7,5%-10% 1%-4%
n 7%(fenol)
Tiempo > = 10 min 2-20 min > = 10 min 24 horas > = 20 min
Espectro
xx
x xx
Bacterias xx Gram(+) x xx x xx
Gram(+) Gram (-)
Gram (-)
Hongos x xx X x x xx x xx
Virus xx - xx x xx x xx
Micobacteri
x xx - xx x xx x xx
as
Esporas - - -/ x X x xx
Nivel Intermedio-
Intermedio Intermedio Alto Alto
desinfeccin bajo
Alteracin
Disrupcin de Alteracin de
membrana,
sntesis y cidos
MecanismoD Des_ naturalizacin coagulacin Alquilacin
estructura de nucleicos y
e accin de protenas de protenas de protenas
c. Nucleico y de sntesis
y c.
protenas. proteica
Nucleicos
Antisptico
de piel (4%)
y mucosas
Escaso uso
(0.1%), Desinfeccin
sanitario por
preparacin de
Antisptico en piel Antisptico su alto nivel
de piel endoscopios,
intacta. Desinfecc en piel, de toxicidad.
(0.5%) equipos de
in de material no mucosas, Preparacin
Indicaciones y lavado terapia
crtico heridas, vacunas
quirrgicos respiratoria,
(termmetros, lavado virales,
(0.02%) dializadores,
estetoscopios) quirrgico. conservaci
(alternativa equipos de
n piezas
al yodo). anestesia
anatmicas.
Desinfectant
e de material
no crtico.
Se inactiva Se activa
frente a con solucin
materia alcalina. Se
orgnica, inactiva
Uso en
Se inactiva frente a tensoactivos, La dilucin frente a
esterilizacin
materia orgnica. aguas duras, aumenta la materia
Actividad y en
Escasa accin jabones, eficacia orgnica.
desinfeccin
residual cremas. germicida Solucin
de alto nivel.
Mayor acci activada
n residual estable 14-
que el 28 das
alcohol segn uso.
Irritacin de
Olor piel y
Bajo grado
desagradabl mucosas,
de toxicidad
e. vas
aunque
Carcinognic respiratorias.
produce
Leve irritacin o, irritacin Lmite de
daos si se
Irritacin de piel no de piel de piel y exposicin
Toxicidad instila en
intacta y mucosas. y mucosas, mucosas, 0,2 ppm. El
odo medio o
alergia. vas glutaraldeido
crnea (a
respiratorias. -fenolato
alta
Lmite de presenta
concentraci
exposicin menor
n).
0,75 ppm/8h toxicidad y
corrosin
Precauciones Inflamable: evitar Aclarar bien No combinar Habitacin Habitacin
contacto con la piel antes con ventilada. No ventilada.
fuentes de calor. de aplicar el soluciones utilizar agua Utilizar
Evitar uso en antisptico. mercuriales. caliente en guantes,
plsticos y caucho. Evitar Evitar en la gafas,
Daa cabezal de productos pacientes con preparacin pantallas
tonmetros. clorados en alteraciones de faciales,
el lavado de tiroideas soluciones. recipientes
tejido con tapa No
manchado utilizar agua
con caliente en la
clorhexidina preparacin
(produce de
mancha). soluciones.
Diluir en Aclarar
agua con agua
destilada, no corriente o
en agua estril.
corriente.
PERXIDO
CIDO AMONIOS
COMPUESTOS DE
PERACTIC FENOLES CUATER-
CLORADOS HIDRGEN
O NARIOS
O
Ac.
Ortofenilfenol
COMPUESTO Hipoclorito sdico Peractico A Cloruro de
bencil-
S (leja) c. benzalconio
paraclorofenol
peroxiactico
segn Segn
CONCENT. 500-5000ppm 3%-25% 0,2%-1%
producto producto.
> = 3 segn Segn
TIEMPO > = 10 min > = 12 min
horas producto producto.
ESPECTRO
x xx
Streptoccus,
X
X staphylococcu
Bacterias x xx x xx Gram(+)
Gram (+) s,
Gram (-)
Escherichia
coli.
Hongos x xx x xx xx xx X
Virus x xx x xx xx xx X
Micobacterias x xx x xx xx xx _
Esporas X X xx _ _
NIVEL Intermedio-
Intermedio-alto Alto Alto Bajo
DESINF. bajo
MEC. Inactivacin de c. Altera Des- Alteran Inactivacin
ACCIN nucleicos, membramna naturalizacin protenas yy des-
desnaturalizacin s lipdicas, protenas, membranas naturalizaci
protenas, inhibe ADN, alteracin celulares. n de
enzimtica radicales pared celular, protenas.
libres oxidacin Baja
hidroxilos. enzimas actividad
frente a
Gram -.
Desinfecci
Al 3% como
n de bajo
antisptico
nivel de
en heridas.
INDICACION superficies,
Del 6% al Desinfeccin
ES camas,
Suelos, camas, 25% como Desinfeccin de nivel
muebles.
lavabos, WC, desinfeccin de medio-bajo de
Neutraliza
superficies no de alto nivel endoscopios, superficies y
los malos
metlicas (tonmetros, dializadores. material no
olores.
lentes de crtico.
contacto,
equipos
terap. resp.)
Mayor
pH cido. Pierde
actividad en
Se incativa Activo frente a actividad
pH cido y
rpidamente tras materia Habitualment con aguas
alta
dilucin y frente a orgnica y a e utilizados duras,
ACTIVIDAD temperatura
materia orgnica. baja soluciones jabn,
. Se inactiva
La cloramina es temperatura. detergentes. algodn o
por materia
ms estable Inestable una residuos
orgnica,
vez diluido. inicos.
aire, luz.
Irritacin de
Baja
piel y
toxicidad. Irritante de
mucosas.
Mezclado con Propiedades piel y Escasa
Olor
formaldehido oxidantes. mucosas a toxicidad.
TOXICIDAD desagradable.
produce compuest A altas altas conc. No
Hiperbilirrubin
os carcinognicos concent. irri Cancergeno corrosivo
e
ta piel y a conc>1%.
mia en
mucosas
lactantes.
Diluir en agua fra.
Daa
Muy corrosivo, Pueden Evitar su
caucho,
evitar mezcla con quedar uso junto a
plsticos y Daa caucho,
detergentes cidos residuos en aguas
PRECAUCIO- metales. No plsticos,
y amoniacales. No los materiales duras,
NES inyectar en corrosin de
en superficies porosos, detergentes
cavidades metales.
metlicas. No causando aninicos,
cerradas
mezclar con otros irritacin algodn.
(libera O2)
desinfectantes
+++= Muy efectivo; ++ = Medianamente efectivo; + = Poco efectivo; - = No efectivo
1.14 Revisin de normatividad
Un alto nmero de bacterias est presente en los alimentos como la carne, el pollo,
pescado, las frutas, vegetales, granos en la leche y derivados. En la piel, pelo y pezuas
de los animales de carne roja as como en su tracto gastro-intestinal. Los
microorganismos de la piel incluyen especies de Staphylococcus, Micrococcus y
Pseudomonas, hongos y levaduras y especies aportadas por la materia fecal y el suelo.
Adicionalmente para estar presentes en la piel y en las vsceras, las bacterias pueden
prevenir de recursos del ambiente de procesos como pisos, paredes, superficies de
contacto, y de las manos de las mismas personas.
Este estudio permitir hacer una serie de anlisis microbiolgicos con cepas ATCC de
bacterias, hongos patgenos y as determinar cul es el porcentaje de inhibicin y su
amplio espectro antimicrobiano, Como tambin se practicaran pruebas de DBO y DQO,
para determinar la Biodegradabilidad del desinfectante en el medioambiente
3. OBJETIVOS
El equipo debe almacenarse en un cuarto cuya temperatura del aire este entre 10 y 35C,
y cuya humedad relativa se encuentre en valores no superiores al 80%, ya que estas
permiten garantizar que no ocurran daos futuros en el quipo ni proceso productivo.
Para que el proceso de produccin sea exitoso, es necesario ubicar el LMP-80-8 en una
habitacin ventilada, equipada con una toma de agua potable, red de alcantarillado y luz
elctrica. Es de gran importancia, conectar el equipo a la toma de agua, garantizando que
la vlvula de suministro de solucin salina este cerrada, para que durante algunos
minutos previos a la produccin se permita la libre circulacin de esta con el propsito de
realizar un lavado al equipo que permita la eliminacin de impurezas o residuos slidos
remanentes en el interior de este. Debe garantizarse siempre que la manguera que
conecta el equipo con la solucin salina este bien sumergida en el contenedor de esta.
Una vez finalizado el proceso de lavado, debe conectarse el equipo a la toma de corriente
elctrica dejndolo listo para su uso.
Una vez estn ajustados los volmenes de descarga y basados en los lineamientos
planteados para el cumplimiento de los estndares calidad del producto, se procede al
encendido del generador y la regulacin de la entrada de solucin salina al sistema, ya
que dependiendo del flujo de este ltimo, el medidor de amperaje del equipo se
estabilizar en un valor, que para el caso especfico de nuestro proceso de produccin se
encuentra entre 20 y 23 Ampere, puesto que en estos lmites se garantiza que el producto
logre una concentracin de 500 ppm de HOCl y un pH de 7.8, estos valores certifican su
efectiva actividad bactericida.
Estabilizados ya los estndares de operacin del equipo, deben dirigirse las mangueras
de descarga de los productos del proceso hacia los recipientes de almacenamiento, hasta
alcanzar el nivel productivo requerido.
Habiendo finalizado el proceso productivo, el equipo debe desconectarse del suministro
elctrico, y deben abrirse las perillas reguladoras de flujo para permitir la libre circulacin
de agua por al menos 20 minutos.
4.1.5 Mantenimiento del equipo
Antes de iniciar la produccin de Bioasepsia se deben lavar las manos con jabn yodado
que es un excelente jabn bactericida siguiendo las reglas de asepsia:
33
1. Aplicar suficiente jabn yodado para cubrir todas las superficies de las manos.
2. Frotar las palmas de las manos entre s.
3. Frotar la palma de la mano derecha contra el dorso de la mano izquierda
entrelazados los dedos, y viceversa.
4. Frotarse las palmas de las manos entre s, con los dedos entrelazados.
5. Frotar el dorso de los dedos de una mano contra la palma de una mano opuesta,
manteniendo unido los dedos.
6. Rodeando el pulgar izquierdo con la palma de la mano derecha, frotar con un
movimiento de rotacin y viceversa.
7. Enjuague las manos.
8. Squese con una toalla de un solo uso. [26]
El objetivo de un correcto lavado de manos es el de reducir el nmero de
microorganismos en las manos y el riesgo de contaminacin cruzada, empleando
un mximo nivel de higiene.
34
4.3 MTODOS
4.4 Cepas
Se utiliza este estndar de turbidez para saber el nmero de bacterias por mililitro o ms
bien UFC, segn la escala de Macfarln que va desde 0.5 a 10.Este estndar se crea al
mezclar soluciones de cloruro de bario anhidro ( Cl 2 Ba ) al 1% con cido sulfrico
( So4 H 2 ) al 1% en volmenes especficos. Los estndares se comparan visualmente con
suspensiones bacterianas en caldos BHI (Brain Heart Infusion), este medio de infusin de
corazn de res y cerebro de ternera as como peptona provee la fuente de carbono,
nitrgeno, sulfuro y vitaminas para el cultivo de los microorganismos.
35
Procedimiento:
1. se prepararon 5ml del medio de cultivo BHI y se mezclaron con las cepas de
microorganismos a analizar, y se encubaron a 24 h, a 37C.
2. se prepar la solucin patrn de Macfarln con una solucin de Cl 2 Ba al 1% y
So4 H 2 al 1% y se mezclaron las 2 soluciones con volmenes de 0.2ml de Cl 2 Ba
y 9.8ml de So4 H 2 (escala 2 de Macfarln).
3. Se mezcl la solucin patrn con 3ml de H 2 O + el medio de cultivo BHI
4. Se prepar el desinfectante al 5%.
5. Se tom una alcuota de 10ml de desinfectante y se mezclan con 0.5ml de las
cepas previamente cultivadas en caldo de BHI.
6. se empez a contabilizar el tiempo a los 5 minutos, a los 10 minutos y las 15
minutos para mirar si se presenta o no turbidez.
36
Este CO2 forma carbonatos de sodio evitando que se produzca un compensacin del
volumen de oxigeno consumido por los microorganismos.
Desde el punto de vista ambiental la DQO, es una medida aproximada del contenido total
de materia orgnica presente en una muestra de agua. Esta materia orgnica en
condiciones naturales puede ser Biodegradada lentamente (esto es oxidada) a CO2 y
H 2 O , mediante un proceso lento que puede tardar desde unos pocos das hasta unos
cuantos millones de aos, dependiendo del tipo de materia orgnica presente y de las
condiciones de biodegradacin.
37
5. RESULTADOS Y DISCUSIN
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
TIEMPO (DIAS)
38
fcilmente en la membrana citoplasmtica, actuando sobre protenas, y cidos
nucledos de los microorganismos inhibiendo totalmente su accin.
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
TIEMPO (DIAS)
39
5.3 Recuentos viables (UFC/ml)
Se encontr que al analizar las cepas staphylococcus aureus ATCC 6538 y
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9057, bajo el mtodo de prueba NTC 5150,realizado
en los laboratorios microbiolgicos de la Universidad de Antioquia; el Bioasepsia tuvo una
efectividad del 99.99% a concentraciones de [50% v/v], [25%v/v] y [puro] a los 5 minutos
de accin; yaqu al comparar con el inoculo inicial de staphylococcus aureus 2.2 *108
UFC/ml y pseudomonas aeruginosa 7.5 *107 UFC/ml, en contacto con el desinfectante
se tuvo un recuento viable menor a 1.5 *10 2 UFC/ml para las tres concentraciones
dadas.(ver tabla 7).
Tabla 8.Evaluacin del Bioasepsia sobre cepas bacterianas. Tomado del anexo 2
Tiempo Escherichia Coli Salmonella Staphylococcus Pseudomona
de Typhimurium Aureus Aeroginosa
Contacto
5 mn. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
10 mn. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
15 mn. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
40
5.5 Estndar Macfarln aplicado en cepas de Hongos.
Tabla 9.Evaluacin del Bioasepsia sobre cepas de Hongos. Tomado del anexo 3.
Tiempo de Trichoderma Penicillium Fusarum Dermatofito
contacto
5 mn. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
10 mn. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
15 mn. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
Mientras que en la figura de la derecha ,se tienen las mismas soluciones en cajas petri y
se puede observar con mayor claridad, que la caja petri # 1 que contienen el blanco
presenta mayor grado de turbidez, comparada con la caja petri # 2 que contiene la
solucion patron con el desinfectante y no presenta turbidez.por lotanto se concluye que el
desifectante fue fecetivo en un 99.9%
41
6. CONCLUSIONES
42
7. RECOMENDACIONES
43
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
44
1 http://www.piscinasblanes.com/es/que-ofrecemos/tratamiento-de-aguas/58-tractament-
0 quimic-amb-clor.
]
[ Q. d. agua, Capacidad de desinfeccion en funcion del valor de pH, [En lnea]. Available:
1 http://www.quimicadelagua.com/Conceptos.Analiticos.Cloro.2.html.
1
]
[ R. C. d. I. e. Odontologia, Eficacia del desinfectante del Acido Hipocloroso sobre sepas con
1 poder patogenico de cavidad oral, [En lnea]. Available:
4 http://www.rcio.org/index.php/rcio/article/view/34/47.
]
45
]
[ Poolek, Mechanisms of bacterial biocide and antibiotic resistance, J APP1 Microbiol, n 92, pp.
1 55-64, 2002.
9
]
[ E. Moderna, Lavado de manos segun la OMS, 5 enero 2011. [En lnea]. Available:
2 http://enfermeriapablo.blogspot.com/2011/01/lavado-de-manos-segun-la-oms.html.
6
]
46
[ Standard methods for the examination of water and waste water, APHA, 1995.
2
7
]
[ elika.Fundacion Vasca para la seguridad agroalimentaria, Escherichia Coli, 2013. [En lnea].
3 Available: http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Documento84/3.Ecoli.pdf.
0
]
[ The Nemours Foun Dation, Infecciones por estafilococos, 1995-2013. [En lnea]. Available:
3 http://kidshealth.org/teen/en_espanol/infecciones/staph_esp.html.
3
]
47
] agricultura-sostenible.
48
9. ANEXOS
ANEXO # 1. Anlisis del Bioasepsia sobre cepas de bacterias ATCC, practicados en los
laboratorios de la Universidad de Antioquia.
49
Anexo #2. Anlisis del Bioasepsia sobre cepas de bacterias ATCC, practicados en los
laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
50
Anexo # 3. Anlisis del Biaosepsia sobre cepas de Hongos, practicados en los
laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
51
Anexo # 4. Anlisis del Biaosepsia sobre la cepa del Hongo Dermatofito, practicados en
los laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
52
Anexo # 5. Anlisis de DBO, DQU y Biodegradabilidad del Biaosepsia practicado en los
laboratorios de Ingeniera Sanitaria de la Universidad Nacional.
53
Anexo 6 .Hongos empleados en el anlisis bicida del Bioasepsia. Fuente [7],[8]
El gnero Trichoderma est en el ambiente y especialmente
Figura 9.Trichoderma 7 en suelos abundantes en materia orgnica o desechos
vegetales en descomposicin y por su relacin con ella est
clasificado en el grupo de hongos hipgeos, lignolcolas y
depredadores. Es aerbico y pueden estar en los suelos con
pH neutro hasta cido.
El gnero Trichoderma posee buenas cualidades para el
control de enfermedades en plantas causadas por patgenos
fngicos (hongos) del suelo, principalmente de los gneros
Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotium, Pythium y Fusarium
yaqu activa el crecimiento radicular (races) de las plantas,
es capaz de colonizar y crecer en las races a medida que
estas se desarrollan y aumenta la resistencia del cultivo
frente al ataque de posibles patgenos 7
55
El nombre de esta bacteria proviene de la
Figura 14.Staphylococcus aureus 4 raz griega , que se compone de staphyl, que
significa racimo y coccus, que significa grano,
baya o uva; y del latn aureus que significa
dorado. Este nombre significa racimo de uvas
dorado .Es un coco gram-positivo 4,3 , no mvil.
No forma esporas, puede encontrarse solo, en
pares, en cadenas cortas o en racimos. Es un
anaerobio facultativo, pero crece mejor en
condiciones aerobias. El microorganismo
produce catalasa, coagulasa y crece
4
rpidamente en agar sangre.
El estafilococo aureus suele estar en la piel de
animales y personas, en las membranas
mucosas; garganta, fosas nasales, los genitales
--------------- y el ano. Sin embargo, cuando la piel se lastima
4, 3
Son bacterias que por la tincin de o sufre una puncin, las bacterias
Gram, se tien de un color azul oscuro estafiloccicas pueden ingresar en la herida y
o violeta. provocar una infeccin.
El S. aureus tambin puede liberar El S. aureus provoca ms frecuentemente
toxinas (sustancias txicas) que infecciones en la piel, como foliculitis,
pueden producir enfermedades tales fornculos, imptigo y celulitis, que se limitan a
como intoxicacin por alimentos o una pequea rea de la piel de una persona. 5
sndrome de shock txico. 5
Figura 15. Pseudomona Aeroginosa 6 son bacterias gram negativas 2, 2 aerbicas 6,1
posee un flagelo para su movimiento,
ampliamente distribuidas en la naturaleza
(suelo, agua, animales, plantas como la
menta) y sistemas de tratamiento de agua,
demostrando as su adaptacin al medio
ambiente con baja concentracin de
nutrientes y sobre un rango grande de
temperatura entre 4 y 42C, puede
encontrarse en el tracto digestivo y su
principal reservorio es el ambiente hmedo
(caos, deshumedecedores ,fregaderos
,duchas, baos ), es capaz de permanecer
por tiempos prolongados en lquidos y
superficies como antispticos, alimentos
6,1
Las bacterias aerbicas son
aquellas que crecen y viven en parenterales 6, 2 , fluidos de dilisis,
presencia del oxgeno. P. aeruginosa tiene una propiedad innata de
6, 2
Alimentacin parenteral es unirse a superficies, formando biofilms
administrar por va endovenosa los durante el proceso de infeccin; coloniza las
lquidos y nutrientes necesarios para el mangueras de unidades dentales que
paciente enfermo. pueden ser contaminadas por el paciente o
impurezas del agua. 6
56
Anexo 8. Dermatofito, hongo empleado para el anlisis del Bioasepsia. Fuente [10]
CARACTERSTICAS ENFERMEDADES
Las dermatofitosis o tias (Tinea) son micosis
superficiales causadas por un grupo de hongos
figura 16.Tia Corporis
queratinoflicos estrechamente relacionados,
denominados dermatofitos. Estos afectan la capa
crnea de la piel, pelos y uas.
Los dermatofitos se dividen en tres gneros que se
distinguen por las caractersticas morfolgicas de sus
macroconidios:
57
Bibliografa de bacterias y hongos
[2] elika.Fundacion Vasca para la seguridad agroalimentaria, Escherichia Coli, 2013. [En lnea].
Available: http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Documento84/3.Ecoli.pdf.
[5] The Nemours Foun Dation, Infecciones por estafilococos, 1995-2013. [En lnea]. Available:
http://kidshealth.org/teen/en_espanol/infecciones/staph_esp.html.
[8] L. Carrillo, Los Hongos de los Alimentos y forraje.Penicillum, [En lnea]. Available:
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/05htextopenicilios.pdf.
[9] L. Carrillo, Los Hongos de los Alimentos y forraje.Fusarium, [En lnea]. Available:
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/06htextofusarios.pdf.
58
Anexo 9. INFORME PRUEBAS DE DESINFECCIN
1. Elementos utilizados
El ATP es la principal molcula que utilizan las clulas para capturar, transferir y
almacenar energa. La cantidad de ATP recuperado en el hisopo depende de la
contaminacin microbiana y de la presencia de residuos orgnicos.
59
se pretende por otro lado embellecer el cuerpo y darle buena apariencia.
Se hizo la toma de muestra con el hisopo, sobre el rea contaminada de bacterias para
mirar cuanto es su grado de bioluminiscencia, y as comparar la zona infectada con la
zona desinfectada.
60
Figura 2. Aplicacin del producto
61
Figura 5.toma de muestra rea desinfectada
62
Figura 8.resultadosantes de la desinfeccin
El grado de infestacin de la mesa presenta un porcentaje de 914 URL, que es muy alto
comparado con las otras muestras que se haba tomado antes.
63
Figura 10.resultados despus de la desinfeccin
Tabla [1]. Bioasepsia al 99.99% de eficiencia, valor monetario $12.852 por litro
64
Para la desinfeccin de la mesa de tanatopraxia, se gasta aproximadamente 10 ml, para
el fretro 3ml, para el planchn fnebre 2 ml, que equivale a un costo total mensual de
28917$, que equivaldra a utilizar 2 litros y medio de Bioasepsia por mes para lograr
desinfectar estas reas.
Tabla [2].Hipoclorito de sodio (NaOCl) a 5000 ppm, valor monetario $ 11.012 galn
NaOCl al
Material a desechar 13% Instrumental NaOCl al 6%
concentracin utilizada de NaOCl (ml) 38 concentracin utilizada de NaOCl (ml) 85
volumen de NaOCl disponible (ml) 99.473 volumen de NaOCl disponible (ml) 44.470.58
vol. gastado diariamente (ml) 331,57 vol. gastado diariamente (ml) 148.23
costo por galn ($)diluido en ppm 418.45 costo por galn ($) diluido 936,02
costo por litro ($) diluido en ppm 110.72 costo por litro ($) diluido 247.62
costo total por galn ($) concentrado 1.354.47
Las superficies contaminadas constituyen una de las formas de exposicin de los riesgos
bilgicos, para reas altamente contaminadas segn las normas de bioseguridad en
entidades de salud y funerarias se recomienda utilizar una concentracin de 5000 ppm
NAOCL; para la parte instrumental se debe diluir al 6% y para material a desechar al
13%.
Comparando los costos de la tabla [1] con los de la tabla [2], econmicamente es ms
barato utilizar como desinfectante el NAOCL, pero su grado de desinfeccin es muy bajito
comparado con el HCLO que es 80 veces mayor, siendo un potente desinfectante que
penetra fcilmente en la clula bacteriana, actuando sobre protenas y cidos, nucledos
de los microorganismos causantes de las infecciones inhibiendo totalmente su accin.
65
3. Conclusiones
luego de hacer una rutina de limpieza, de cada uno de los elementos o equipos
que se utilizan, tanto en laboratorio de tanatopraxia, los vehculos utilizados para el
transporte de los cuerpos, como es el carro fnebre, el atad, se debe aplicar en
cada rea de trabajo un desinfectante que ayude a bajar de forma inmediata el
grado de infestacin, y as el estado de limpieza sea ptimo.
El cumplimiento del decreto 2676 del 2000, debe ser obligatorio para todas las
funerarias, como tambin el cumplimiento de las normas de bioseguridad y
verificacin de las medidas preventivas y de proteccin; debido a que los
trabajadores que desarrollan su actividad en los servicios funerarios pueden
presentar distintos riesgos: exposicin a agentes fsicos, qumicos y bilgicos.
66