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MHernandezGonzalez 2
MHernandezGonzalez 2
microorganismos celulolticos
Hernndez Gonzlez Mara1, Tirado Gallegos Juan Manuel1, Ilin Anna2, Lpez
Trujillo Ramiro1, Rebolloso Padilla Oscar No1, Ruelas Chacn Xchitl1.
Resumen
El presente estudio se llevo a cabo con la finalidad de extraer el colorante
bixina, presente en la semilla del achiote, ampliamente utilizado por la industria
alimentaria, mediante un tratamiento que ofrezca adems de buenos rendimientos,
un producto libre de componentes txicos. El proceso se basa en el uso de
microorganismos productores de celulasas, capaces de degradar la pared celular
de las semillas donde se encuentra el pigmento para facilitar su liberacin en un
medio acuoso, obtenindose rendimientos del 81%, mayores a los ofrecidos por
extraccin acuosa y ligeramente menores que los obtenidos con tratamiento cido-
base, cuestionados por la comunidad Europea, obtenindose una pasta que
muestra picos en el intervalo de los 1600 cm- 1 representativo de los grupos
carbonilos caractersticos de la estructura de la bixina.
Palabras clave: Bixina, achiote, microorganismos celulolticos.
Abstract
This assay was carried out to extract bixine, a colorant attached to achiote
seeds, widely used in food industry, by a method which may offer besides good
yields, a toxin free product. The process is based on the use of cellulolytic
microorganisms able to degrade the seeds cellular wall, where the pigment is
attached, in order to facilitate the pigments liberation in a watery medium. 81% of
the pigment was recovered, this percentage is higher than the one offered by the
aqueous treatment and lower than the one offered by the acid-basic procedure, not
well accepted by the European community. The final paste obtained showed peaks
near to 1600 cm-1 representative of the carbonyl groups characteristic of the bixine
structure.
Key words: Bixine, achiote, cellulolytic microorganisms
Introduccin
El color de los alimentos es un atributo que tiene mucho peso dentro del
juicio del consumidor, este puede llegar a ser determinante para que un comestible
sea aceptado o rechazado. (Badui, 1993). La industria alimentaria utiliza una serie
de sustancias , mejor conocidas como aditivos; que tienen como funcin primordial
impartir alguna coloracin en particular o simplemente resaltar la que por la
naturaleza tienen las materias primas o, en su caso, de los procesos tecnolgicos
en la coloracin del producto final.
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Los aditivos que son utilizados como sustancias colorantes pueden ser
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obtenidos
por sntesis qumica en la industria (colorantes sintticos) o provenir de fuentes
naturales como los vegetales (colorantes o pigmentos naturales). En los ltimos
tiempos los colorantes sintticos han sido cuestionados debido a sus efectos
toxicolgicos, inclusive algunos han sido eliminados de algunas legislaciones. Lo
anterior aunado a la tendencia que tienen los consumidores, sobre todo en los
pases desarrollados, a consumir alimentos con un mnimo o nulo contenido de
sustancias sintticas; ello ha provocado que el uso de colorantes naturales vaya
en aumento y sustituyendo a los sintticos (Salas, 2003).
Para abastecer la creciente demanda de colorantes naturales sin problemas
de legislacin, se procede a la extraccin de los pigmentos presentes en los
tejidos vegetales o animales por medio de diferentes mtodos, cada uno presenta
sus limitantes y ventajas.
El colorante obtenido de las semillas de achiote (Bixa orellana), esta
compuesto en su mayora por el carotenoide bixina, que se utiliza en la industria
lctica, crnica, condimentara, cosmtica, farmacutica, etc.; es un colorante
natural exento de certificacin. La extraccin ms rudimentaria se basa en un
lavado con agua en ebullicin y a escala industrial se ha implementado un proceso
de extraccin alcalino que es de fcil aplicacin, pero que tiene el inconveniente
de que el producto final contiene al mximo 30 a 40% de pigmentos (Vzquez,
2001).
Las posibilidades de incrementar el rendimiento y la pureza del colorante
obtenido del achiote siguen siendo tema de estudio, se debe buscar un mtodo de
extraccin de fcil aplicacin, que eleve el grado de rendimiento, dando como
resultado un extracto exento o con un mnimo de impurezas qumicas, que
disminuya los riesgos que implica al consumidor el uso de solventes o los
tratamientos cido alcalinos.
Metodologa experimental
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Los hongos fueron viabilizados en un medio lquido y posteriormente
inoculados en placas de agar carboximelticelulosa (CMC). Despus de 7 das de
incubacin a 28C se evalu su actividad sobre la celulosa aplicando la tcnica del
rojo congo de acuerdo con los lineamientos propuestos por Ilin (2002). De esta
etapa se logr seleccionar tres cepas para su posterior caracterizacin.
Resultados y discusin
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funcionar en el proceso de Biocatlisis como una fuente de carbono caracterizada
por fibras que pueden ser desdobladas por complejos enzimticos presentes en
organismos como los hongos.
Los resultados obtenidos aplicando la tcnica del rojo congo, para
seleccionar la cepa con mayor actividad celuloltica, fueron sometidos a un anlisis
de varianza con una p<0.05; esto con la finalidad de elegir con mayor seguridad
cual o cuales microorganismo son los que ms se adecuan a la investigacin. Los
resultados del anlisis se reportan en el cuadro nmero 1, como las medias
analizadas por la prueba de t-Student (p<0.05).
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Figura 1. Pasta colorante obtenida para cada tratamiento.
De la misma manera que en el anlisis de varianza, se observa que la
interaccin que ofrece el mayor rendimiento es cepa 7, pH 7 y temperatura de
35C, presentando 1.2 g de extracto colorante, los cuales contienen 0.022 g de
bixina total obtenidos a partir de una muestra de 2 g; por lo que se espera que de
100 g de semilla se obtengan 1.13 g de bixina lo que representa el 80.7 % de
extraccin ya que la semilla contiene 1.4 g de bixina por 100 g de semilla como se
cit anteriormente.
En la figura 2 se muestra un espectro infrarrojo (IR) para la pasta colorante
recuperada, destacndose un pico sobresaliente cercano a 1600 cm -1, el cual es
representativo de los grupos carbonilos, as como un pico en el intervalo de los
1700 a 1880 cm-1 aproximadamente, representativo de los dobles enlaces
presentes en las estructuras orgnicas, caractersticas de la bixina.
105.2
100
715.39
1974.96
825.88
90
879.51
80 m 'b' esporas
70
2927.12
1266.98 772.05
%T
60
3271.00
1373.24
50 1598.96
40
30 1048.10
25.0
4000.0 3000 2000 1500 1000 600.0
cm-1
Conclusiones
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Aspergillus, lo cual fue confirmado al monitorear la formacin y consumo de
azcares totales y reductores presentando un comportamiento tpico para este tipo
de hongos excretando la enzima al medio para obtener carbohidratos simples y
asimilarlos constantemente.
Fue posible establecer que las condiciones para el ptimo desarrollo
fngico, con su consecuente efectividad en la degradacin de la materia en
cuestin para facilitar la liberacin del pigmento, fueron de pH 7 y temperatura de
35C, para la cepa 7 identificada como Aspergillus spp. Antes citado.
Comparando los procesos usando las otras cepas estudiadas y sin inculo,
el tratamiento con Aspergillus result un 30% mas efectivo que los antes
mencionados.
Las condiciones antes citadas ofrecen un rendimiento de extraccin de
bixina de hasta un 80 % comparado a lo obtenido con agua, e inferior al reportado
utilizando los mtodos alcalinos, sin contener los residuos qumicos txicos que se
presentan en dicha extraccin, cuestionados recientemente por la unin Europea.
Literatura citada
AOAC. 1980. Oficial Methods of Anlisis of the Association of Official Alytical Chemists. Thirteenth
edition. 353 p.
Badui, D. S. 1993. Qumica de los alimentos. Addison Wesley Longman de Mxico, S. A. DE C. V.
Mxico D. F., Mxico.
Dubois, M., Guilles, K. A., Hamilton, J. K., Rebers, P. A. and Smith, F. 1956. Colorimetric meted for
determination of sugars and related substances. Anal. Chem. 28:530.
Ilin A. 2002. Manual de Prcticas de crdito 1 Introduccin a la Biotecnologa U. A. de C. 38 p.
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Salas, G. L. 2003. Educacin Alimentaria, manual indispensable en educacin para la salud. Ed.
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51: 780 p
Vzquez, H. C. 2001. Estudio preliminar de la degradacin de bixina en polvo en los diferentes
tipos de empaques y temperaturas establecidas. Tesis ING. Instituto Tecnolgico de Villahermosa.
Villahermosa, Tabasco, Mxico.
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