Historia del cerdo transgnico y la evolucin tecnolgica.

El primer cerdo transgnico (Astrid) se obtuvo en 1991, por cientficos ingleses de la

compaa Imutran, inyectando ADN humano en un embrin de cerdo. Posteriormente en
el mismo ao, investigadores de la compaa DNX, de New Jersey, Estados Unidos, copian
dos genes que controlan la produccin de hemoglobina en el hombre y los inyectan en
embriones de cerdo. Al nacer, los cerdos transgnicos presentaron 15% de sus
hemoglobinas iguales a la del hombre.

Las hemoglobinas humanas pudieron ser separadas de las del cerdo, debido a las cargas
elctricas diferentes y se usaron como una solucin alternativa a la falta de sangre para
transfusiones en el hombre.

El xenotrasplante, o trasplante de clulas, tejidos u rganos entre diferentes especies

animales, con finalidad clnica, se inici a mitad del siglo pasado. Sin embargo, existen
muchas barreras de rechazo inmunolgico entre especies que limitan su uso, este rechazo
es ms intenso cuanto el animal esta filogenticamente ms alejado del hombre.

La existencia de xenoanticuerpos naturales que activan al sistema sanguneo del

complemento humano es la causa principal del conocido rechazo hiperagudo (debido a la
presencia de anticuerpos naturales contra eptopes del disacrido galactosa 1-3 galactosa
presente en las superficies celulares de mamferos, pero que estaran ausentes en las
superficies celulares de humanos y monos) que origina que los rganos se necrosen casi
inmediatamente al trasplante.

Durante unas dcadas las investigaciones sobre xenotrasplantes se debilitaron ya que

tuvo lugar el desarrollo y xito de los programas clnicos de alotrasplantes entre humanos
donantes y receptores. Sin embargo, en el transcurso de la pasada dcada el tema
resurgi nuevamente con fuerza, debido principalmente a factores como el desarrollo de
la inmunogentica y de la biologa molecular y especialmente por la carencia de
suficientes rganos de donantes humanos capaces de satisfacer la gran demanda
existente.

Por ello, pronto se intensificaron las investigaciones y se lleg a la conclusin que, la

fuente ms idnea de rganos xenotrasplantables era el cerdo y que para evitar los
fenmenos de rechazo se poda acudir a la biotecnologa, obteniendo cerdos transgnicos
capaces de anular la activacin del sistema complemento humano. Para ello, estos
habran de ser capaces de expresar en su endotelio a inhibidores fisiolgicos del sistema
humano del complemento. Otro paso adelante sera la futura obtencin clnica de tales
cerdos transgnicos ya que de ese modo se contara con un material de partida
controlado y totalmente reproducible.

Los primeros xitos llegaron pronto y ya existen casi media docena de empresas
biotecnolgicas que han obtenido cerdos transgnicos capaces de expresar los inhibidores
del complemento, lo que significa la desaparicin del rechazo hiperagudo. Este es uno de
los principales usos donde la tecnologa de recombinacin homloga acoplada con
transferencia nuclear est siendo explotada. La reciente generacin de cerdos
transgnicos en los que se elimin el gen 1-3 galactosiltransferasa y que permitira la
produccin de animales que carecen del eptope responsable del rechazo hiperagudo, es
una clara demostracin del poder de esta tecnologa.

Sin embargo, con ello no finalizan las complicaciones inmunolgicas ya que existen otras
respuestas inmunolgicas adversas que se han puesto de manifiesto al incrementarse la
supervivencia de los animales receptores de xenotrasplantes: por una parte, rechazo
vascular retardado y rechazo celular, as como otro rechazo, el crnico de injertos.

El rechazo vascular agudo ha sido estudiado principalmente en xenotrasplantes de cerdos

transgnicos a primates, llegando a ser controlado el fenmeno, mediante el suministro
intensivo de sustancias inmunosupresoras, pero la consecuencia directa o indirecta de ello
provoca el fallecimiento del animal trasplantado.

En cuanto al rechazo celular y al crnico del injerto se han descubierto al estudiar monos
trasplantados con riones de cerdos transgnicos, logrndose supervivencias que, en
algunos casos, han superado los tres meses, se pudo comprobar la funcionalidad de los
rganos trasplantados y las complicaciones que acompaaron el proceso, tales como la
necesidad de suministro de eritropoyetina.

Una situacin anloga, ha tenido lugar en experiencias con corazones de cerdos

transgnicos a monos. El modelo animal desarrollado en la Universidad de Cambridge por
White ha sido patentado por la empresa Imutran, dirigida por el mismo cientfico. Esta
compaa, en la actualidad, ha empezado a desarrollar acuerdos de colaboracin con
otros centros de investigacin en el mundo para el desarrollo de nuevas estrategias que
permitan optimizar y mejorar las actuales pautas inmunosupresoras. El objetivo que se
persigue es prolongar la supervivencia de los rganos trasplantados y establecer pautas de
inmunosupresin equiparables a las que se administran en la actualidad en alotrasplantes.
CRISPR: LA TCNICA QUE PODRA CURAR ENFERMEDADES GENTICAS

Las siglas CRISPR provienen de Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats.
Estas secuencias de ARN cumplen una funcin inmune en arqueobacterias y bacterias,
pero durante el ltimo ao, los cientficos las han utilizado para reescribir genes.

La secuencia de ARN sirve como gua para localizar una secuencia de ADN en, La secuencia
de gua dirige una enzima, Cas9, hasta el ADN de inters. Cas9 puede cortar la doble
hebra, slo una hebra, o incluso inhibir (knockdown) la expresin gnica. Despus de que
Cas9 dae el ADN, los sistemas de reparacin corrigen la secuenciao bien pueden
insertarse nuevas secuencias. (Tolosa, 2015)

USO DE CRISPR PARA INACTIVAR RETROVIRUS EN CERDOS

Un equipo de investigadores de la Universidad de Harvard ha conseguido modificar de

forma precisa 62 regiones especficas del genoma del cerdo, el mayor nmero de
ediciones genticas llevadas a cabo sobre el genoma de un organismo, de forma
simultnea, hasta la fecha.

Las modificaciones, llevadas a cabo utilizando el potente sistema de edicin CRISPR-Cas9,

estaban destinadas a inactivar retrovirus endgenos del genoma del cerdo y evitar los
riesgos que podra tener su transmisin a humanos en el caso de un trasplante de cerdo a
humano. (Harvard, 2015)

PROBLEMATICA

Una de las principales limitaciones de los sistemas clnicos de trasplantes de rganos es la

demanda, los rganos daados que necesitan ser reemplazados, es mucho mayor que la
oferta.

Esto ha llevado a plantear alternativas, como por ejemplo, los xenotrasplantes o

trasplantes de rganos de una especie a otra (en este caso, la humana). Uno de los
candidatos ms prometedores es el cerdo, debido a la similitud de tamao y fisiologa
respecto a la especie humana. Sin embargo, la presencia de retrovirus endgenos en el
genoma del cerdo (tambin llamados PERVs por sus siglas en ingls) supone una
preocupacin, debido al riesgo a que estos virus latentes se transmitan y activen en
humanos tras un trasplante.
Los investigadores, dirigidos por George Church, identificaron todos los retrovirus
endgenos presentes en el genoma de una lnea celular porcina y disearon los
componentes del sistema CRISPR-Cas 9 para inactivar uno de los genes que los hacen
activos. De este modo alteraron las 62 copias de retrovirus endgenos del genoma de las
clulas, consiguiendo una reduccin en ms de 1.000 veces de su transmisin a clulas

La transmisin de los PERVs desde el genoma porcino a humanos no se demostrado in

vivo. No obstante, se considera un riesgo a evitar. Los resultados del trabajo abren el
camino hacia la generacin de rganos porcinos ms seguros para su utilizacin en
trasplantes. Los PERVs y la falta de capacidad para eliminarlos del ADN del cerdo han
supuesto un fallo crtico en lo que haba sido un escenario prometedor para los
xenotrasplantes, indica Church.

Los investigadores confan en poder desarrollar una lnea de cerdos con los retrovirus
endgenos inactivados.

XENOTRANSPLANTE

El xenotrasplante de rganos implica el trasplante de rganos entre especies distintas

filogenticamente, y el desarrollo actual en su investigacin se basa en su potencial
aplicabilidad clnica, es decir, la posibilidad de trasplantar rganos animales en el ser
humano. Esta idea no es nueva, ya que ha sido un sueo muy antiguo durante muchos
aos, y en la historia de la medicina existen numerosas evidencias en este sentido. Si
realizamos un repaso histrico, la historia del xenotrasplante se podra dividir en cuatro
perodos:

1. La prehistoria.

Abarcara desde las primeras civilizaciones arcaicas hasta finales del siglo xix. Es una poca
de absoluta oscuridad desde el punto de vista cientfico.

2. Primera mitad del siglo xx, ampliada hasta la dcada de los sesenta.

Los primeros trasplantes clnicos que se hacen a principios de siglo son xenotrasplantes;
inmediatamente se superan las barreras tcnicas. Los trasplantes se hacen sin
complicaciones vasculares, pero los rganos no funcionan (barrera biolgica).

Se hacen decenas de xenotrasplantes, sobre todo de rin, aunque tambin de corazn e

hgado, usando diferentes animales como donantes. Los rganos procedentes de primates
funcionan, en algunos casos, incluso varios meses (rin de chimpac, 9 meses). Durante
este perodo se estudia intensamente la barrera biolgica responsable de que los rganos
trasplantados no funcionen y se describe el fenmeno del segundo injerto y del rechazo.
Se demuestra que el rechazo es tanto ms intenso cuanto ms distante filogenticamente
es la especie animal usada como donante, debido al rechazo hiperagudo, donde los
rganos se necrosan inmediatamente por accin del complemento activado por
xenoanticuerpos naturales.

3. 1970-1990. En la historia de los xenotrasplantes clnicos y preclnicos (usando el mono

como receptor) existe un perodo de casi silencio absoluto coincidente con la
consolidacin y xito de los programas clnicos de alotrasplantes.

4. ltima dcada del siglo xx.

Los mdicos y los investigadores en el rea de trasplantes comienzan a pensar

nuevamente en el xenotrasplante como una posibilidad, debido fundamentalmente a dos
razones:

a) El aumento extraordinario de la demanda de rganos, con un importante aumento

de pacientes para trasplante y de fallecidos en lista de espera a la espera del
trasplante, tanto en los EE.UU. donde fallecen 15 pacientes todos los das en lista
de espera, como en Europa, incluida Espaa, a pesar de que en este pas hemos
alcanzado y mantenido desde 1994 la tasa ms elevada del mundo de donacin de
rganos y trasplantes por milln de habitantes, por encima de los EE.UU. y de
todos los pases de la Unin Europea.
b) Los nuevos avances de las ciencias biomdicas, sobre todo en los campos de la
inmunologa y la gentica, con el desarrollo de la tecnologa transgnica, han
posibilitado vencer la barrera del rechazo hiperagudo. En este sentido no cabe
duda de que, al menos tericamente, poder disponer de rganos animales para
trasplante solucionara el problema de la escasez de rganos.

FUENTES DE RGANOS PARA EL XENOTRASPLANTE

En los primeros intentos de xenotrasplante los primates no humanos parecan ser el

donante ideal para los xenotrasplantes aplicados a la clnica, pues son los ms
relacionados filogenticamente con los seres humanos; sin embargo, su utilizacin como
donantes presentaba varios inconvenientes:

a) los problemas ticos concernientes al uso de estos animales en peligro de extincin

b) existe un elevado riesgo de infecciones transmitidas por los primates, dadas las
similitudes fisiolgicas con la especie humana
c) los problemas derivados de su largo perodo de gestacin y su largo tiempo de
crecimiento

d) por razones tcnicas y ticas los primates son pobres candidatos para la manipulacin
gentica.

En la actualidad la mayora de los grupos de investigacin en xenotrasplante estn de

acuerdo en que la fuente ideal son los rganos de cerdos modificados genticamente para
evitar el rechazo, ya que son animales de fcil acceso y con un perodo de crecimiento
corto; adems es ampliamente aceptada su utilizacin para la alimentacin y la
experimentacin, su obtencin libre de patgenos es fcil, y el tamao de sus rganos y su
fisiologa son bastante similares a los humanos. En la actualidad, al menos cuatro
empresas de biotecnologa han conseguido cerdos transgnicos que en su endotelio
expresan inhibidores fisiolgicos del complemento humano, con lo que se ha conseguido
prevenir el rechazo hiperagudo de manera reproducible cuando los rganos de estos
cerdos se trasplantan en primates.

Barreras para el xenotrasplante clnico

La tcnica quirrgica para la realizacin de los xenotrasplantes est ampliamente

desarrollada. Sin embargo, para que stos puedan llegar a ser una realidad clnica, deben
superarse las otras tres barreras que existen en la actualidad.

a) la barrera inmunolgica

b) la barrera fisiolgica

c) las xenozoonosis

Barreras inmunolgicas

Para poder aceptar el xenotrasplante como una realidad clnica desde el punto de vista
inmunolgico, la condicin necesaria sera que el xenorrechazo pudiera modularse y
transformarse a un allorejection-type, que los clnicos saben controlar de forma rutinaria.
Se han identificado al menos cuatro tipos de xenorrechazo:

1. Rechazo hiperagudo.

La interaccin de los xenoanticuerpos naturales del receptor con los xenoantgenos (con
predominio de -gal) del endotelio vascular del donante induce la activacin del
complemento, responsable del dao endotelial y finalmente de los fenmenos de
trombosis y hemorragia que necrosan en minutos el rgano xenotrasplantado.
Los avances en la tecnologa transgnica han resuelto por completo el rechazo
hiperagudo. Se ha demostrado que trasplantando rganos de cerdos transgnicos para
protenas reguladoras del complemento (MCP, CD55, CD59, etc.), a primates no humanos
se previene el rechazo hiperagudo, en el caso de xenotrasplante de rin, de corazn o de
hgado. Esto, junto con el desarrollo de nuevas medicaciones, sobre todo las inhibidoras
del complemento, est mejorando los resultados en cuanto al control del rechazo.

2. Rechazo vascular agudo retardado.

El control del rechazo hiperagudo ha permitido conocer un tipo de xenorrechazo,

conocido como rechazo vascular agudo retardado, de mecanismo an no bien esclarecido,
con un componente humoral y otro componente celular (macrfagos, celulas natural killer
[NK], etc.).

3. Rechazo celular y crnico. Como consecuencia de que algunos monos trasplantados con
riones transgnicos han sobrevivido varios meses (supervivencia mxima de 100 das), ha
sido posible observar fenmenos de rechazo celular e incluso, de forma reciente, de
rechazo crnico en estos injertos. sta ha sido una importante ventana de investigacin
que se abre por primera vez cara a plantear la realidad clnica de los xenotrasplantes.
(Ramirez & Rios, 2002)

Barreras fisiolgicas

Los ensayos preclnicos de rganos porcinos transgnicos para protenas reguladoras de

complemento han obtenido sobrevidas mximas superiores a 2 meses en el rin, 30 das
en el corazn y 8 das en el hgado. Estas sobrevidas han permitido estudiar la
compatibilidad fisiolgica de estos rganos porcinos trasplantados en los monos durante
estos perodos.

Barreras infecciosas: xenozoonosis

Los riesgos potenciales ms importantes del xenotrasplante son las infecciones, la

transmisin de zoonosis a la especie humana. Existen dos tipos de infecciones que
potencialmente se podran transmitir

a) las vehiculizadas por los grmenes especficos porcinos.

b) las que utilizaran el rgano porcino como vector (retrovirus porcinos).

ETICA

El problema de considerar a los animales como reservorio de rganos humanos tiene

importantes consecuencias. Detrs de los xenotransplantes est la vieja idea de que el
hombre es el centro de la creacin, lo que le permite usar y abusar de la naturaleza,
modificndola a su antojo.

Por otro lado, la cultura occidental est fundada en una base de uso de los animales como
"recursos" de la naturaleza que slo son medios para nuestros fines. Desde esta ptica, es
perfectamente defendible e incluso, ticamente loable criar animales para dar rganos a
las personas siendo una opcin ms tica para enfrentar nuestra salud pblica, pasa
necesariamente por una potenciacin de la donacin voluntaria de rganos. Una sociedad
generosa y ticamente sana requiere considerar a otros como agentes.

Bibliografa
Harvard. (octubre de 2015). Transplanting from Pig to Human. Obtenido de Harvard medical
school.

Ramirez, P., & Rios, A. (2002). Estado actual del xenotrasplante de rganos. El sevier.

Tolosa, A. (2015). ransplanting from Pig to Human. genetica medica.