BIOLOGA MOLECULAR DE

ANTGENOS Y ANTICUERPOS
1 Tecnologa Mdica
2013
INTRODUCCIN. ASPECTOS GENERALES
Anticuerpos, corresponden a glicoprotenas que
estn relacionadas con la Inmunidad Humoral.

3 clases de molculas
Molculas del CHP.
que se utilizan en la
Receptores Linfocitos T.
inmunidad innata para
Anticuerpos reconocer antgenos

Se unen al espectro mas

amplio de estructuras
antignicas.
ANTICUERPOS Muestra mayor capacidad de
discriminacin. 2
Unin con mas Fuerza
ANTICUERPOS. DISTRIBUCIN Y PRODUCCIN
Fluidos Biolgicos. (sangre y Linfa)
Distribucin
Membrana celular (N limitado de clulas)

SINTESIS Linfocitos B

Se encuentran en vesculas de secrecin dentro

de los linfocitos, (GOLGI).
En la membrana linfocitaria se expresan como
protenas integrales de membrana.
Se unen a clulas inmunitarias. (F. mono nucleares, 3
mastocitos y NK)
TRANSPORTE Y DISTRIBUCIN DE LOS
ANTICUERPOS (ISOTIPOS)

Docente Alejandra Arancibia Daz

4
DISTRIBUCIN DE ISOTIPOS EN EL
ORGANISMO

1. Superficie de clulas B
productoras (todos)
2. Plasma (IgG, IgA,
IgMpent) y fluido
intersticial (IgG)
3. Unidos a receptores de
alta afinidad en la
superficie de otras clulas
(IgE)
4. En lquidos secretados IgA
dimrica
5
 Ag.
Forma secretada

Ag.

Ig Ab

Clula plasmtica Forma de membrana (BCR)

ANTICUERPOS.
En sangre coagulada los anticuerpos permanecen
en el sobrenadante denominado SUERO.

Experimentalmente a ese suero es posible

agregarle antgenos y es cuando se denomina
ANTISUERO.

El estudio de la relacin antgeno-anticuerpo se

denomina SEROLOGA. 7
ANTICUERPOS
Un adulto promedio (70 Kg) produce 3g de Anticuerpos
que pueden ser detectados por serologa.

De los 3 g de Anticuerpos el 67% corresponde al

denominado IgA.

IgA se produce por los linfocitos B en las paredes del A.

digestivo y A respiratorio.

Estos se ubican en el lumen de estos sistemas.

El tipo mas frecuente que se encuentra en el suero en

el IgG 8
ESTRUCTURA MOLECULAR DE ANTICUERPOS
1 estudios basados en anticuerpos purificados
procedentes de sangre de individuos inmunizados
con diversos antgenos.

Imposible definir estructura molecular.

Mezclas de anticuerpos secretados por linfocitos B clones.
Respuesta a distintas porciones de un antgeno. (EPITOPOS)
Anticuerpos policlonales.
9
ESTRUCTURA MOLECULAR DE ANTICUERPOS

Tumor monoclonal de clulas

plasmticas.
MIELOMA MULTIPLE
Produccin de anticuerpos
idnticos en sangre u orina.

1975 Khler y Milsteins

produccin in vitro de
ANTICUERPOS
hibridomas.
MONOCLONALES
Aislamiento de Anticuerpos
monoclonales.

10
Clulas del Bazo

11
ANTICUERPOS
Disponibilidad Homognea de Anticuerpos.

Clulas productoras de anticuerpos.

Determinacin de la secuencia de aminocidos y la

clonacin molecular de molculas de anticuerpos
concretos.

Determinacin cristalogrficas de rayos X.

12
ANTICUERPOS
Gammaglobulinas o Inmunoglobulinas.

Poseen componentes estructurales bsicos, con

una variabilidad en las regiones que se unen a los
antgenos.

Existen entre 107-109 molculas de anticuerpos

distintas en cada individuo.

Poseen secuencias aminocidicas nicas en sus

sitios de unin con el antgeno. 13
ANTICUERPOS.
De forma monomrica en
Y.

Docente Alejandra Arancibia Daz

Posee 2 cadenas ligeras
(L) idnticas y 2 pesadas
(H) iguales.

Uniones disulfuros:
Las dos H-H.

Cada H con una L. S-S.

14
ANTICUERPOS
Cadena Ligera: 24 kD.
Cadenas
ligeras Cadenas
Cadena Pesada: 55-70 kD.
pesadas

Ambas poseen una serie de Sitios de unin

unidades homlogas que se al antgeno

repiten.

110 aa aprox. de longitud. Regin

Regin
Variable Constante
Especificidad
Funcin
Se repliegan independiente
en una estructura globular
llamada DOMINIO Ig 15
DOMINIOS DE INMUNOGLOBULINAS

16
DOMINIOS DE INMUNOGLOBULINAS
Un dominio Ig posee:
2 laminas en beta-plegada.
Cada lamina con 3-5 hebras polipeptidica antiparalelas.

El gen codifica el domino inmunoglobulina es el

ms repetido en nuestro genoma, 765 veces.

Todas las molculas que poseen este patrn de

plegamiento se les incluye en la superfamilia Ig

17
ANTICUERPOS
Ambas cadenas (L y H)
poseen regiones
aminoterminales
variables. (V) asociadas al
reconocimiento
antignico.

Adems poseen las

regiones constantes (C)
carboxiterminales que
median la funcin efectora
18
ANTICUERPOS

Posee un dominio Ig Posee un dominio Ig

Posee 3-4 dominio Ig

19
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES EN LAS
REGIONES VARIABLES.

Son breves segmentos en las regiones V.

Se denominan regiones Hipervariables.

Corresponden solo a 10 residuos de aminocidos y

mantienen su posicin gracias a la estabilidad de
las regiones mas conservadas de dominio Ig.

Estas zonas hipervariables se encuentran en un

espacio tridimensional para formar la superficie de
unin al antgeno. 20
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES EN LAS
REGIONES VARIABLES.

Reciben el nombre de Regiones determinantes

de complementariedad (CDR)

Tienen la capacidad de formar boucles sobre las

estructuras de del antgeno y as generar una
relacin mas estrecha y especfica.

La unin del antgeno a las molculas de

anticuerpo es fundamentalmente una funcin de las
regiones hipervariables.
21
REGIONES VARIABLES (HVR) Y
REGIONES
HVR3

150
Variability Index

100 HVR2
HVR1

50
FR1 FR2 FR3 FR4

0
25 50 75 100 22

Amino acid residue

CDR CDR CDR
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LAS
REGIONES CONSTANTES

Los anticuerpos se pueden subdividir en clases y

sub clases dependiendo de las diferencias en las
estructuras de sus regiones C.

g d a e

Las clases de molculas de anticuerpos se

denominan ISOTIPOS 23
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LAS
REGIONES CONSTANTES

En el humano Ig A y IgG se pueden subdividir en:

IgA (1 y 2)
IgG (1, 2, 3, 4)

En las regiones C de anticuerpo de un isotipo o

subtipo tienen esencialmente la misma secuencia
de aa.

Las cadenas pesadas se designan con el alfabeto

griego correspondiente al isotipo del anticuerpo.
24
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES
DIFERENCIALES:

Variacin discreta (categorizable):

Cadena pesada clases e Isotipos
a,d, e, g1,g2,g3,g4
cadena ligera. Tipos: y . 4 isotipos
Variacin continua (no categorizable):
- Nmero de clones muy elevado
- Diversidad de la regin variable 109 a 1011 molculas
diferentes con secuencias nicas en sus sitios de unin al
antgeno.

g 25
d a e
VARIACIN DISCRETA
Variacin gnica (en distintos loci)

En funcin de cadena pesada, clases:

aIgA, dIgD, eIgE, IgM, gIgG.

Isotipos, subtipos o subclases: 95 % de identidad

productos de segmentos gnicos diferentes.

Ig G1, Ig G2, Ig G3, Ig G4(por orden decreciente de

concentracin en suero).

Ig A1 suero, Ig A2 (secreciones)
Subtipo determina funcin biolgica 26
cadena ligera. Tipos: y . 4 isotipos
UNIN DE LOS ANTICUERPOS A LOS
ANTGENOS

Que es un
Antgeno??

Se define como cualquier sustancia que puede

unirse especficamente a una molcula de
anticuerpo o a un receptor de linfocito T

27
UNIN DE LOS ANTICUERPOS A LOS
ANTGENOS

Anticuerpo reconoce a casi todo los tipos de

molculas biolgicas.

Necesita de los inmunogenos que estimulan a

los linfocitos B a generar la respuesta humoral.

Las macromolculas suelen ser mucho mas

grandes que los puntos de unin al anticuerpo.

Los anticuerpos por lo tanto se fijan a una porcin

de la macromolcula que se denomina
Determinante o eptopo. 28
UNIN DE LOS ANTICUERPOS A LOS ANTGENOS
Las macromolculas pueden contener mltiples
eptopos repetidos. (c/u se une a un anticuerpo).

Mltiples determinantes idnticos se denomina:

Polivalencia o multivalencia
No contienes eptopos
Protenas globulares
idnticos mltiples

Poseen y se encuentran
Polisacridos
separados en forma regular
Molculas
Poseen y se encuentran Polivalentes
cidos Nucleicos
separados en forma regular

29
Superficies celulares (bacterias) poseen formaciones polivalentes de
eptopos antignicos de protenas e hidratos de carbono
DETERMINANTE ANTIGNICO O EPTOPOS
Porcin de una molcula que es reconocida por el
anticuerpo.

Tipos:
Determinante conformacional.
Determinante Lineal.
Determinante neoantignico. (creado por
protelisis)

La configuracin espacial de los diferentes

eptopos en una molcula de protena puede influir 30
en la unin de diferentes formas.
DETERMINANTE CONFORMACIONALES O DISCONTINUOS

Formados por aminocidos de porciones

separadas en la secuencia primaria de la protena
pero que estn juntos yuxtapuestos en la estructura
tridimensional.

31
EPTOPOS LINEALES
Corresponden a 6 aminocidos correlativos en la
estructura primaria.

32
EPTOPOS LINEALES
Cuando estos aparecen en la superficie externa de
la protena plegada nativa estos pueden ser
accesible a los anticuerpos.

Comnmente son inaccesibles en la conformacin

nativa y aparecen solo cuando esta es sometida a
un proceso de desnaturalizacin.

33
DETERMINANTES NEO ANTIGNICOS
Corresponden a eptopos formados in vitro.

Las protenas pueden sufrir modificaciones tales

como fosforilacin y protelisis.

Estas modificaciones alteran la estructura

covalente, generando nuevos determinantes.

Estos determinantes son los que se denominan

Neo antignicos.
34
BASES ESTRUCTURALES DE LA UNIN AL
ANTGENO

Unin no covalente, reversible pero de alta

afinidad.
Se ubican en las Regiones hipervariables.
1. Mayor variacin entre diversos anticuerpos.
2. Cambios en su secuencia alteran la especificidad
de unin.
3. Forman lazos extendidos expuestos en la
superficie del anticuerpo.
4. Los residuos aminocidos de las regiones
hipervariables estn en contacto con el antgeno
35
unido, sobre todo la regin CDR3, (la ms variable).
BASES ESTRUCTURALES DE LA UNIN AL ANTGENO

Docente Alejandra Arancibia Daz

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