Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Manual de Practicas
Manual de Practicas
MANUAL DE PRCTICAS DE
LABORATORIO
SERIE BLANCA
ELABOR:
Serie Blanca 1
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
VENTAJAS.
Facilidad
con que puede obtenerse
Especialm
ente til en pacientes geritricos y en nios, en particular, recin nacidos.
DESVENTAJAS.
Slo logra
obtenerse una pequea cantidad de sangre que puede ser insuficiente.
Es un
mtodo por lo general tardado y que tiende a provocar hemlisis de la muestra
En pacientes inmunocomprometidos puede provocar infecciones, excepto cuando se
realiza la puncin despus de 8 a 10 min. de contacto con la piel con un buen
antisptico.
VENTAJAS.
Nos permite hacer mltiples exmenes y en repetidas veces si se desea, con la misma
muestra.
Las alcuotas de plasma y suero pueden congelarse para futura referencia.
DESVENTAJAS
Puede provocar la coagulacin de la sangre si el procedimiento lleva mucho tiempo.
Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulada.
Puede dificultarse en nios, pacientes obesos en estado de shock.
Puede ocasionarse hemlisis de las muestras afectando ciertas determinaciones, por
las siguientes causas:
Serie Blanca 2
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Anticoagulantes Empleados.
Estas sustancias impiden la formacin de cogulos. El mecanismo por el que se evita la
coagulacin, vara segn el anticoagulante; por ejemplo, EDTA, citrato y oxalato se unen con
el calcio, mientras que la heparina impide la conversin de protrombina en trombina.
Ejemplos de anticoagulantes son EDTA, citrato de sodio, y heparina en forma de sal de
litio ,Los tubos deben invertirse varias veces para asegurar la mezcla adecuada despus e
la recoleccin, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
2. PRINCIPIO Y METODOLOGA .
El sitio ms prctico para obtener sangre venosa es la flexura anterior del brazo, de
preferencia justo por arriba de alguna de las ramas venosas que all se encuentran. Las
venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las ms comnes para la
venopuncin. Las tres venas principales que se utilizan son:
1) vena ceflica, ubicada en la parte superior del antebrazo y del lado del pulgar de la
mano; 2) vena baslica, ubicada en la parte inferior del antebrazo y del lado del dedo
meique de la mano; y 3) vena cubital mediana, que conecta las venas baslica y ceflica
en la fosa antecubital ( flexin del codo) y es la vena de eleccin.Si el paciente aprieta el
puo despus de aplicar el torniquete, la vena se tornar ms prominente.
El torniquete facilita la obtencin. En los nios pequeos se pueden utilizar otros sitios; si es
as, es mejor que la sangre la obtenga alguna persona con experiencia. Usar una aguja
puntiaguda, nunca menor de calibre 21 y una jeringa de 5 ml de 10 ml. Tanto la aguja como
la jeringa debern estar limpias, secas y estriles. Con prctica se puede obtener sangre
usando slo una aguja con un tubo de goma por el que se deja correr la sangre hasta los
tubos en los que se recoge la muestra. Para esta tcnica se utilizan agujas de calibre 19.
3. LISTA DE REQUERIMIENTOS
Serie Blanca 3
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4. PROCEDIMIENTO.
4.1.1 Indicaciones.
4.1.3 Tcnica.
Serie Blanca 4
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4.2.1 Indicaciones.
Debe indicarse al paciente la posicin correcta, que puede ser sentado recostado,
apoyando bien el brazo en posicin horizontal.
Elegir la vena adecuada, prefirindose la cubital mediana, la vena baslica, la ceflica, las
venas de la mueca, tobillo y mano, ya que resultan fciles de palpar.
4.2.2 Tcnica
Actividades:
- Practicar la toma de sangre capilar.
- Practicar la toma de sangre venosa.
Serie Blanca 5
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Serie Blanca 6
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
-Realizar esquema de los diferentes sistemas de extraccin: jeringa y sus partes; sistema
vacutainer y sus partes; tipos de tubos y colores de tapones empleados en el sistema
vacutainer, de acuerdo con el anticoagulante empleado .
- Reporte de resultados.____________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
Serie Blanca 7
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2. PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Los frotis de sangre deben confeccionarse con lminas portaobjetos de vidrio que
previamente se hayan lavado y secado de manera conveniente, con la finalidad de eliminar
cualquier resto de grasa que pudiera quedar en ellos y evitar as una mala calidad en la
tincin. Los frotis de sangre son esenciales para el estudio morfolgico y cuantitativo de las
clulas sanguneas. Cuando un frotis se encuentra bien realizado, se podrn distinguir en l
tres reas importantes: la cabeza zona de inicio, el cuerpo zona media y la cola rea
final del mismo. Un frotis no deber ser ni grueso ni delgado, pues en ninguno de ellos se
podrn apreciar bien las reas antes mencionadas. En un frotis bien realizado, la tincin ser
de mejor calidad.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS
Serie Blanca 8
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4. PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 9
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Serie Blanca 10
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
- Reporte de resultados.____________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
2. PRINCIPIO Y METODOLOGA .
COLORANTES.
A los colorantes de les puede clasificar en tres grupos:
1) Acidos. Son aquellos constitudos por sales cuya base es incolora y cuyo cido es
coloreado. A este grupo pertenecen las eosinas. Estas soluciones se usan para la coloracin
citoplasmtica coloracin de fondo.
2) Basicos. Son aquellas sales de cido incoloro y base coloreada como el clorhidrato
de azul de metileno. Estos colorantes tien por lo general algunos elementos del ncleo.
3) Neutros. Son aquellas sales con el cido y la base coloreados, por ejemplo, los
eosinatos de azul y azur de metileno , los ms empleados en hematologa. El mtodo de
Romanowsky, que emplea estos colorantes, ha sido la base de las coloraciones panpticas
utilizadas en la actualidad ya que ha tenido un gran xito en la tincin diferencial de la
Serie Blanca 11
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ANTICOAGULANTES.
Serie Blanca 12
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3. LISTA DE REQUERIMIENTOS
3.1 Reactivos.
NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CANTIDAD
1 Colorante de Wright 0.1 g
2 Metanol 60 ml
3 Na2HPO4 2.56 g
4 KH2PO4 6.66 g
5 EDTA 3g
6 Oxalato de amonio 0.8g
7 Agua destilada 1.5L
Balanza Granataria
Balanza Analtica
3.4.1Colorante de Wright:
Serie Blanca 13
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Se tritura el colorante con el alcohol en un mortero; sto se hace poco a poco. Esta
operacin debe durar 30 min. hasta completar disolucin. Se deja reposar dos das y se filtra.
Na2HPO4 2.56 g
KH2PO4 6.66 g
Agua destilada para aforar a 1L
Mezclar las sales con poca cantidad de agua destilada, e ir agregando poco a poco
ms agua, hasta aforar a 1 L. Guardar en un frasco mbar de 1 L.
3.4.3- EDTA.
EDTA 3g
Agua destilada 100 ml
4.PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 14
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
El alumno deber ensayar tiempos hasta ajustar aquellos que ms convengan para una
ptima coloracin. As, con tres frotis ms deber ensayar: 2 minutos de colorante y 4 de
amortiguador; 6 minutos de colorante y 6 minutos de amortiguador; 6 minutos de colorante y
11 minutos de amortiguador.
Serie Blanca 15
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Actividades:
-Practicar la tincin de Wright con frotis de sangre perifrica.
-Corregir de acuerdo al recuadro , errores encontrados en la tincin.
Una vez que se ha hecho y teido un frotis satisfactorio, ste puede ser evaluado en
bsqueda de anormalidades. Cada examen debera incluir anlisis con bajo poder ( 10X ), con
alto poder ( 40 45 X), e inmersin ( 100X ).Un error comn consiste en comenzar el examen
con el objetivo de inmersin.Ciertos problemas de la muestra y anormalidades morfolgicas
significativas pueden pasarse por alto a menos que todos los objetivos sean empleados.
Serie Blanca 16
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Lo mismo aplica para las plaquetas, las clulas ms pequeas de sangre perifrica.Se
puede hacer un recuento indirecto de las mismas cuando as se requiera, y buscar
anormalidades en su forma y en su tamao. Algunas anormalidades pueden requerir que se
indique le severidad del cambio. Todas estas determinaciones pueden diferir de observador a
observador, conduciendo a una variacin considerable en el anlisis del mismo frotis de
sangre.
Tan importante como el que haya consistencia entre los observadores, es importante
tambin la seleccin de una rea apropiada del frotis para la evaluacin. En un frotis en "
cua ", en el rea "aplumada" terminal del frotis, demuestran cambios que pueden
considerarse patolgicos, p.e. macrocitosis, esferocitosis, clulas en "diana ", etc. En el rea
gruesa del frotis, las clulas pueden interpretarse como microcticas en forma equivocada, y la
morfologa puede ser difcil de evaluar. Tambin tendern a formar apilamientos ( rouleaux )
en esta rea. Por ello, el rea ideal para examinar un frotis, es aquella que contiene
aproximadamente 200-250 clulas por campo a seco fuerte. Esto corresponde a una rea en
donde los eritrocitos se tocan pero no se enciman. En el verdadero Roleaux, los mrgenes
individuales de las clulas son difciles de distinguir y dan una imagen como de pilas de
monedas que han sido empujadas y tiradas, imagen que persiste an en las reas ms
delgadas del frotis, aunque ah exista menor cantidad de clulas. La intensidad de la
formacin de "rouleaux" depende de la concentracin de las protenas plasmticas,
especialmente el fibringeno. En enfermedades inflamatorias, los niveles de fibringeno
pueden aumentar. Tambin la elevacin de gama globulinas, como se observa en el Mieloma
mltiple, provoca formacin de "rouleaux".
2. PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Serie Blanca 17
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Este objetivo debe utilizarse para evaluar la calidad de la tincin.Las clulas blancas
deberan verse fcilmente con este aumento.Si no es asi, el frotis debe ser nuevamente
teido.El borde aplumado debe ser examinado para buscar cmulos de plaquetas
filamentos de fibrina, indicando esto que debe realizarse una nueva toma, ya que esta
evidencia de coagulacin podra interferir con muchas pruebas hematolgicas. Los extremos
laterales y aplumado deben evaluarse en bsqueda de un nmero desproporcionado de
leucocitos.,Las clulas ms grandes ( por ejemplo los neutrfilos y los monocitos, tienden a
acumularse ms en estos lugares y si el frotis est mal hecho, se acumularn ms en estas
reas, las cuales estn fuera del rea ideal de observacin.Si la mayora de las clulas se
encuentran en el borde aplumado, el frotis deber descartarse y prepararse uno nuevo.
El nmero de plaquetas tambin puede ser estimado con este objetivo. Empleando la
misma rea que para la cuenta diferencial, es decir, donde los eritrocitos se tocan pero no se
Serie Blanca 18
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
sobreponen, deben contarse las plaquetas en al menos diez campos. Este nmero ser
convertido en no. de plaquetas/l de sangre, como se hizo con la cuenta de leucocitos.
Deber calcularse el nmero promedio de plaquetas por campo, y dicho nmero se
multiplicar por un factor determinado por el propio laboratorio en base a la combinacin de
los objetivos y oculares empleados en sus microscopios. Por ejemplo, cada plaqueta,
observada representa 15,000 plaquetas 20,000 / l. Si se llegaron a observar un promedio
de 12 plaquetas por campo, entonces, la cuenta total de plaquetas sera de 180,000/ l en el
primer caso, 240,000 / l en el segundo caso.
La ltima actividad a realizar con este objetivo, sera evaluar la morfologa celular. Esto
puede irse haciendo a medida que se va realizando la cuenta diferencial. Cualquier
anormalidad inclusin en clulas rojas y blancas, deber reportarse. Tambin es importante
evaluar la forma y el tamao de los eritrocitos en esta misma rea. Las clulas suelen
distorsionarse en reas muy delgadas, demasiado gruesas. Las plaquetas tambin debern
evaluarse en su tamao y forma. Ms de una forma inusualmente grande de plaquetas, en
cada cinco campos debern ser reportadas .
3. LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Microscopio de Luz
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con colorante de Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 19
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES:
- Reporte de resultados
Serie Blanca 20
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Metamielocitos _____
Bandas _____
Segmentados _____
Linfocitos _____
Monocitos _____
Eosinfilos _____
Basfilos _____
100
leucocitos ___________________________________________________________
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se realizar el recuento diferencial, de acuerdo como se indica en el procedimiento, y se
comparar contra los siguientes valores normales .Se anexan tambin, adems de los valores
normales en %, los valores normales absolutos, que indican el nmero de cada estirpe celular
expresado por microlitro . ( para obtenerlos, ver prctica no.7 )
-VALORES NORMALES.
Serie Blanca 21
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3. LISTA DE REQUERIMIENTOS
3.1 Equipo de Laboratorio
1. Microscopio de Luz
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con colorante de Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Con el objetivo de inmersin, identificar cuando menos 100 leucocitos consecutivos en un
frotis teido con Wright, y reportar estos valores en por ciento.Se aconseja identificar el
rea ideal para la observacin: el rea del cuerpo del frotis, donde las clulas se tocan pero
no se sobreponen. El recorrido debe hacerse de manera vertical, para no omitir clulas de
los mrgenes y para no salirse del rea ideal para el recuento.
ACTIVIDADES.
Investigar en qu casos pueden encontrarse cada una de las lneas celulares reportadas en
la cuenta diferencial, con valores por arriba y por debajo de lo normal.
REPORTE DE RESULTADOS:
Serie Blanca 22
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
1.INTRODUCCIN.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Las pipetas empleadas para el recuento manual de glbulos blancos, son similares a
las que se usan para el recuento de glbulos rojos, pero presentan en su capilar superior, la
grabacin 11, y en la inferior, la grabacin 0.5, lo cual indica una dilucin distinta, que es en
Serie Blanca 23
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
este caso de 1:20. Se emplea la misma cmara cuentaglbulos llamada cmara de Neubauer,
nada ms que el conteo y los clculos se realizan de diferente manera.
La cmara cuentaglbulos presenta un retculo con una superfcie total de 9mm, de
1 mm cada uno. Los cuadrados de las cuatro esquinas estn subdivididos en 16 cuadrados,
y el cuadrado central, en 25.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Reactivos
Serie Blanca 24
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
1. Microscopio de Luz
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Cmara de Neubauer
1 Pipeta para recuento de glbulos blancos
1 Tubo de ensaye de 13 X 100
1 Boquilla
5 PROCEDIMIENTO.
5.1 Tcnica.
N______x______20______x______10 = N X 50
4
En donde:
Serie Blanca 25
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Y= 35 _ x 15,000
100 + 35
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 26
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Serie Blanca 27
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Un cambio en sangre perifrica que no est asociado con ningn cambio morfolgico
celular pero que est asociado con enfermedad, es un incremento en las bandas.
Esto puede ser referido como una " desviacin hacia la izquierda ", particularmente si
formas an ms jvenes son encontradas en la circulacin. Normalmente la cuenta de
neutrfilos tambin se encuentra aumentada, ya que si no es as, sto puede indicar un peor
pronstico para el paciente, por lo que algunos autores se refieren a la primera circunstancia
como un " cambio regenerativo hacia la izquierda ", y a la segunda , con cuenta normal
baja de leucocitos, como un " cambio degenerativo hacia la izquierda ".
Ocasionalmente, el aumento en la cuenta total de blancos y la aparicin de formas
neutroflicas jvenes, es tan marcada, que pareciera la sangre perifrica que se analiza en
pacientes con leucemia mieloctica crnica.
Este exceso de salida de estas formas a la circulacin, de hecho s es debido a algn
otro proceso patolgico y debe ser distinguido de leucemia. El trmino " Reaccin
Leucemoide " es el indicado en esta situacin.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se debern buscar tanto en el frotis sanguneo como por medio del recuento de glbulos
blancos en el contador electrnico por el mtodo manual, el nmero aproximado de
leucocitos en una muestra que previamente haya sido analizada y de la cual se haya
reportado leucocitosis y desviacin a la izquierda. El hallazgo de un nmero aumentado de
Serie Blanca 28
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4.PROCEDIMIENTO.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 29
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con colorante de Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 30
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
Realizar una lista de enfermedades en las que se encuentren elevados los eosinfilos.
Serie Blanca 31
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
__________________________________________________________________________
_______________________________________________________________
1.INTRODUCCIN.
Picnosis.
El ncleo del neutrfilo normalmente es algo picntico, pero pueden distinguirse la
paracromatina y la cromatina.Las clulas muertas las que estn a punto de morir, sin
embargo, tendrn un ncleo obscuro y redondo sin evidencia de estructura nuclear. Los
lbulos pueden estar separados puede haber un nico y redondo ncleo en degeneracin.
Las clulas pueden distinguirse como neutrfilas porque el citoplasma retiene el tiente rosa
habitual. Estas clulas tambin pueden ser identificadas como necrobiticas. En una muestra
fresca, estas clulas son evidencia de que el organismo est " perdiendo la batalla " en un
paciente con infeccin; tambin pueden aparecer en pacientes que reciben quimioterapia.
Estos cambios tambin pueden encontrarse como resultado de una prolongada exposicin al
EDTA.
Organismos intracelulares.
Esta es un tipo de inclusin muy rara de encontrar e indica la presencia del organismo
infectante, ya que una sola clula que presente un microorganismo es significativo. Puede ser
o bien una bacteria, bien una levadura, y puede observarse intra extracelularmente, e
indica una septicemia abrumadora, de mal pronstico aunque podra ser un artificio originado
por la toma de la muestra a travs de algn catter contaminado.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se analizarn muestras en las que exista el hallazgo de picnosis y microorganismos
intracelulares.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 32
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright
4.PROCEDIMIENTO.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 33
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Granulaciones Txicas.
Este cambio representa la presencia de grnulos primarios no especficos, los cuales se
tien de color azul-prpura con la tincin de Wright como sucede con los del promielocito.
Pueden deberse al menor nmero de mitosis realizadas durante la maduracin celular.
Algunas clulas pueden contener slo unos pocos grnulos, otras, pueden contener muchos.
Las granulaciones txicas pueden ser vistas en una variedad de desrdenes inflamatorios
txicos, como por ejemplo, en infeccin bacteriana, ataque al corazn, insuficiencia renal,
gota, artritis reumatoide, as como en respuesta a una neoplasia.
Una granulacin aumentada tambin puede ser vista cuando el frotis es teido por mucho
tiempo. Si estos grnulos fueran realmente debidos a un proceso patolgico, no seran vistos
en todas las clulas, y adems aquellas que en verdad presenten granulaciones txicas, lo
harn en variedad de grados. Si todas las clulas se ven afectadas y en el mismo grado de
intensidad, sto debe considerarse como un artificio del frotis.
Vacuolizacin.
Ya que la principal funcin de los neutrfilos es la fagocitosis, si existe actividad
fagoctica aumentada, pueden haber numerosas vacuolas dentro del citoplasma como una
evidencia de sto. Estas son identificadas morfolgicamente como " hoyos " dentro del
citoplasma. Sin embargo, sto tambin puede ser el resultado de una exposicin prolongada
al EDTA. Al igual que en las granulaciones txicas, si todas las clulas se ven afectadas en el
mismo grado, debe sospecharse un artificio del frotis.
La vacuolizacin puede encontrarse frecuentemente cuando el paciente tiene una
infeccin bacteriana, especialmente con las bacterias pigenas . Tambin es frecuente
observarlas junto con las granulaciones txicas.
Cuerpos de Dhle.
Serie Blanca 34
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Estas inclusiones son a menudo encontradas junto con las granulaciones txicas y/
vacuolizacin, aunque no siempre. A veces pueden ser la nica evidencia de un proceso
txico reactivo en un paciente. Los cuerpos de Dhle son pedazos de RNA residual
( retculo endoplsmico rugoso ) en el citoplasma. Tienen el caracterstico color azul tenue del
RNA y se les encuentra frecuentemente cerca de la membrana citoplasmtica de la clula.
En algunas clulas, pueden ser muy prominentes, y en otras, pequeos y muy tenues, y
pueden pasarse por alto si el observador no tiene suficiente cuidado en la observacin.
En ocasiones pueden observarse los tres tipos de cambios txicos en la misma clula.
Agranulacin citoplsmica.
En ocasiones, la nica evidencia de neutrfilos activados es una rea clara agranular
en la periferia de la clula, que indica la formacin de un pseudpodo. Estas clulas tambin
se distinguen por un borde citoplsmico irregular en contraste con el borde redondo usual del
neutrfilo. Tambin sto puede ser visto junto con las granulaciones txicas, la vacuolizacin,
y los cuerpos de Dhle, aunque cada uno de ellos puede verse individualmente, y a menudo
estos cambios se asocian con aumento en las formas en banda y cuenta elevada de
leucocitos, aunque no siempre.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se analizarn muestras con alteraciones en las que exista el hallazgo de varios cambios
morfolgico-benignos.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frois de sangre perifrica teido con Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Observar imgenes en laminillas y/ diapositivas correspondientes con estas
alteraciones.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 35
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
El trmino " atpico ", ha sido utilizado para describir cualquier forma que vare del
criterio morfolgico empleado para un linfocito normal. Debido a que varias formas son el
resultado de infeccin viral, el trmino " reactivo" y el ms especfico de " virocito " han sido
asociados con esta respuesta. Puede aplicarse el trmino " linfocitos variantes " ya que no
todos los cambios son " reactivos " asociados con infeccin viral.
La mayora de las formas variantes estn asociadas con infecciones virales,
especialmente con el grupo herpes virus ( por ejemplo, el virus Epstein-Barr-la causa de
mononucleosis infecciosa, citomegalovirus herpes simplex tipos 1 y 2 ), y virus de hepatitis
B y C. Tambin pueden encontrarse en casos de toxoplasmosis, sfilis tuberculosis.
Debido a que ocasionalmente puede encontrarse algn linfocito atpico y considerarse
normal, algunos laboratorios los reportan como un porcentaje separado de leucocitos, por
ejemplo, un porcentaje de linfocitos normales y un porcentaje de formas variantes. Otros
pueden usar un mtodo semicuantitativo, como " 1+, 2+, 3+ " " leve, marcado severo ",
para indicar su frecuencia relativa. Siempre que ms del 10% sean clasificados como
variantes, el hallazgo es considerado clnicamente significativo y debe ser reportado.
Otra de las formas se asemejan muy a menudo a un monocito. Son grandes, con
citoplasma abundante y a menudo vacuolado, el cual puede ser ms gris, comparando con el
usual color azul cielo del linfocito normal. El ncleo puede ser redondo, doblado, indentado
lobulado y tiene una apariencia ms abierta y color ms tenue que lo usual. No presenta
nucleolos. A veces, el citoplasma es predominantemente azul cielo, y contiene reas de un
azul ms intenso, que tienden a irradiar del ncleo a concentrarse en la periferia de la
clula, especialmente en donde hace contacto con las clulas que la rodean. A esta
caracterstica se le conoce como basofilia radial basofilia perifrica, respectivamente.
Estas clulas, como puede verse, pueden ser especialmente difciles de distinguir de los
monocitos. Algunos rasgos tiles para distinguirlos es que los monocitos son clulas que
empujan a otras y tienden a indentarlas cuando estn muy prximas a ellas. En cambio, los
linfocitos ms fcilmente sufren esa indentacin . El ncleo del monocito, tpicamente es ms
doblado lobulado, y el patrn cromatnico es ms delicado y fino. Por otro lado, si se est
en duda, puede seguirse una regla general que menciona que si hay muchos linfocitos en el
frotis, la clula que se sospecha ms seguramente es un linfocito tambin.
Serie Blanca 36
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
En un momento dado, hay quien puede confundir estas clulas con formas malignas
blastos. Debe recordarse entonces que en casos de leucemia, las clulas tienden a ser muy
similares morfolgicamente, dando una apariencia montona, homognea, especialmente al
observarse con pocos aumentos.En contraste, las enfermedades asociadas con formas
variantes, demostrarn una apariencia muy heterognea.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se analizarn muestras en las que exista el hallazgo de linfocitos atpicos.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Observar imgenes en laminillas y/ diapositivas correspondientes con estas
alteraciones.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 37
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Una de las formas en que se presenta el linfocito atpico, comparte rasgos con la clula
plasmtica, la cual no es encontrada normalmente en sangre perifrica. Ambas tienen un
citoplasma azul muy intenso y pueden medir de 15-20 .Los dos pueden distinguirse por su
patrn de cromatina nuclear. En el linfocito " plasmacitoide ", el ncleo tiene una apariencia
abierta y laxa y tiene un color rojo-prpura ms tenue. Pueden verse tambin nucleolos. Esto
es en contraste con la apariencia amontonada, abultada del ncleo de la clula plasmtica y
su localizacin excntrica dentro de la clula. No hay una rea clara perinuclear en el linfocito
plasmacitoide como la hay en la clula plasmtica.
Los linfocitos plasmocitoides son comnes de encontrar en ciertas enfermedades
virales como el dengue y las enfermedades exantemticas de la infancia.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se analizarn muestras que tengan el hallazgo de linfocitos plasmocitoides.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright
4. PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 38
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Se analizarn muestras que tengan el hallazgo de hipersegmentacin nuclear en neutrfilos
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 39
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4. PROCEDIMIENTO.
Observar imgenes en laminillas y/ diapositivas correspondientes con estas
alteraciones.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 40
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Estudio medular .
El tipo de procedimiento utilizado para el estudio de la mdula sea (aspirado, biopsia
o ambos), depende de la sospecha clnica. En trminos generales se plantean cuatro
posibilidades:
Compromiso de precursores hematopoyticos con alteraciones citolgicas, como en las
anemias y leucemias. En estos casos, est mejor indicado el aspirado medular o mielograma.
Compromiso de las estructuras de soporte del tejido hematopoytico o del mismo hueso como
en la mielofibrosis, metstasis o granulomas, o que haya disminucin del tejido
Serie Blanca 41
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
2.1 Principio.
Los extendidos de mdula sea se colorean con Wright siguiendo la tcnica usual.
Inicialmente son observados macroscpicamente para determinar la presencia de partculas.
Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la relativa cantidad de
grasa y de contenido celular hematopoytico de acuerdo al cual la mdula se puede clasificar
como: hipocelular, normocelular e hipercelular.
Despus de la observacin en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X localizando
los campos donde se hallan las partculas y se procede al anlisis de las clulas sanguneas
que habitan en la mdula sea. Se establece la relacin del nmero de las clulas blancas
frente al nmero de clulas rojas nucleadas. Esta proporcin se denomina relacin mielo -
eritroide (M:E). Para estimar esta relacin es necesario la identificacin y tabulacin de 300 -
500 clulas nucleadas. Se observa aumento en la relacin mielo-eritroide, cuando se
aumentan los precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos,
leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la insuficiencia renal
crnica. Una disminucin en la relacin mielo-eritroide se presenta cuando se disminuyen los
Serie Blanca 42
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.2 Metodologa
Serie Blanca 43
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Serie Roja
Proeritroblastos 0.2-1.3
Eritroblastos Basfilos 0.5-2.4
Eritroblastos Policromticos 17.9-29.2
Eritroblastos Ortocromticos 0.4-4.6
Linfocitos 11.1-23.1
Megacariocitos 0-0.4
Plasmocitos 0.4-3,9
Serie Blanca 44
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
4.PROCEDIMIENTO.
Observar las laminillas diapositivas y reportar el mielograma de acuerdo con el formato
que aparece en el reporte de resultados.
ACTIVIDADES.
-Observacin de laminillas y/ diapositivas con imgenes de aspirados de mdula sea
normal .
-Reportar un mielograma normal.
Serie Blanca 45
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
R E P O RT E DE MIELOGRAMA
Serie Blanca
Mieloblastos
Promielocitos
Mielocitos
Metamielocitos
Bandas + segmentados
Serie Roja
Proeritroblastos
Eritroblastos Basfilos
Eritroblastos Policromticos
Eritroblastos Ortocromticos
Linfocitos
Megacariocitos
Monocitos + macrfagos
Plasmocitos
Relacin Mieloide-Eritroide
Serie Blanca 46
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
LEUCEMIAS CRNICAS
La mutacin original se produce en una CTH, que madura terminalmente hacia todas las
lneas celulares, pero lo hace de predominantemente hacia la lnea granuloctica, y
frecuentemente hacia la megacarioctica.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Presencia de eritroblastos
Datos Citogenticos :
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
Serie Blanca 48
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4.PROCEDIMIENTO.
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
1.INTRODUCCIN.
Serie Blanca 49
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
En las leucemias mieloides crnicas, la CTH tienen todava ms capacidad de dividirse que
una CTH normal.
Si la maduracin predomina hacia la lnea de los eritrocitos, se tendr:Policitemia vera.
Cuando la proliferacin es predominantemente hacia la lnea de los megacariocitos, pero
stos se mueren en la etapa de megacariocito maduro, a esta neoplasia se le llama
Mielofibrosis con Metaplasia Mieloide.
Se origina tambin en una CTH que madura hacia todas las lneas mieloides pero
predominantemente hacia los megacariocitos
En la Mdula sea existe aumento de todas las lneas, pero predominantemente
hacia los megacariocitos los cuales mueren en la etapa de megacariocitos maduros,
liberando los factores de crecimiento fibroblsticos, lo cual lleva a la mielofibrosis.
Al ocuparse el tejido medular por el tejido fibroso, se origina la hematopoyesis
extramedular.
En sangre perifrica usualmente hay un cuadro leucoeritroblstico.( elevacin del
nmero de granulocitos inmaduros y muchos eritroblastos
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Proliferacin de la CTH hacia todas las lineas con predominio hacia la lnea
eritroctica:plaquetas ,eritroblastos ,basofilia , eosinofilia, granulocitosis
con clulas no ms inmaduras que los mielocitos.Sin embargo la Biometra
Hemtica no es definitiva.
Serie Blanca 50
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
Serie Blanca 51
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 52
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
La clula que sufre la mutacin neoplsica, es la CTH, que madura hacia todas las
lneas, pero con predominio hacia la lnea de megacariocitos-plaquetas.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Serie Blanca 53
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
ACTIVIDADES.
LEUCEMIAS AGUDAS
Serie Blanca 54
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
La Leucemia M0, es una leucemia aguda cuya cuenta tpica de Mdula Osea es la siguiente:
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y / diapositivas
Serie Blanca 55
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 56
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Mieloblastos: 83%
Promielocitos: 3%
Mielocitos: 2%
Eritroblastos: 12%
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
>3% y < 10% de clulas tienen grnulos MPO positivos bastones de Auer
observables con la tincin citoqumica para MPO son clulas con un poco ms de
maduracin . ( que pueden ser: mieloblastos 1b ( mieloperoxidasa + ) , mieloblastos 2,
promielocitos , mielocitos.
90% de clulas son mieloblastos sin grnulos ( mieloblastos 1 =negativos para
mieloperoxidasa )
Hay anemia, granulocitopenia, trombocitopenia
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
ACTIVIDADES.
Serie Blanca 57
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Serie Blanca 58
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
La Leucemia mieloide aguda M2, presenta la siguiente cuenta tpica de Mdula Osea:
Mieloblastos: 52%
Promielocitos: 33%
Mielocitos: 7%
Granulocitos ms maduros: 3%
Eritroblastos: 5%
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de Mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
Serie Blanca 59
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 60
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
MPO Esterasas
M3 +++ -
M5b + +++
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 61
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 62
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
Serie Blanca 63
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 64
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Monoblastos: 90%
Promonocitos y monocitos: 6%
Eritroblastos: 4%
Monoblastos: 6%
Promonocitos: 85%
Monocitos: 7%
Eritroblastos: 2%
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA.
M5a M5b
> 80% de clulas son de estirpe > 80% de clulas son de estirpe monoctica:
monoctica: monoblastos, promonocitos y monoblastos, promonocitos y monocitos en
monocitos en una cuenta sin eritroblastos. una cuenta sin eritroblastos.
Serie Blanca 65
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
La M5a poco diferenciada ( equivalente a > 80% de las clulas de estirpe monoctica
la M0) se forma de monoblastos 1 y son promonocitos y monocitos; stos se
constituye el 15% de los casos de distinguen por sus grnulos azurfilos con
M5a.Debe distinguirse de la M0 de la Wright
L2:
-usando anticuerpos monoclonales para
CD14
-Demostrando la presencia de esterasas
no especficas en el RER con el
microscopio electrnico, la ausencia de
MPO.
La M5a bien diferenciada, se forma de Puede confundirse son la M3 variedad
monoblastos 1b y 2 y ---es positiva para microgranular
esterasas no especficas.
-es positiva para anticuerpos
monoclonales anti CD14, CD36 y CD68.
-MPO negativa, pero ocasionalmente
positiva.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 66
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 67
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
1.INTRODUCCIN.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 68
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
CANTIDAD DESCRIPCION
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 69
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
>30% de blastos en Mdula osea, de los cuales: >50% deben pertenecer a la lnea de
los megacariocitos.
Las clulas son positivas para los anticuerpos anti CD41 y CD61, que ponen en
evidencia las glicoprotenas plaquetarias. ( tcnicas inmunocitoqumicas )
Mieloperoxidasa negativa en los blastos ( megacarioblastos )
Esterasas no especficas positivas focalmente en el aparato de Golgi.
De acuerdo con la etapa hasta la cual llegan a madurar las clulas se consideran:
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
Serie Blanca 70
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 71
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
1.INTRODUCCIN.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Serie Blanca 72
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Clulas pequeas
Citoplasma muy plido y con muchas microvellosidades filiformes
Ncleos pequeos como los de los linfocitos, pero cromatina no tan densa.
Las clulas tienen caractersticamente grnulos con fosfatasa cida resistente al
cido tartrico.
La mdula sea es difcil de aspirar, ya que, como es tpico, tiene fibrosis.
Inmunofenotpicamente son positivas para CD19 y CD20, CD11 y CD25.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 73
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Leucemia L1. Corresponden al tipo ms comn de leucemia aguda infantil y es la que tiene
el mejor pronstico de las 3.
Leucemia L2.Tienen un peor pronstico que las L1
Leucemia L3. Casi todos los casos corresponden a clulas B.Tienen mal pronstico
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
blastos muy pequeos, en donde el ncleo ocupa la mayor parte de la superficie y por
lo tanto hay muy escaso citoplasma, el cual carece de vacuolas presenta muy
escasas;
hay homogeneidad en cuanto al tamao celular y densidad cromatnica;
la cromatina es fina, aunque no tanto como la de los mieloblastos-
Ocasionalmente, la cromatina es gruesa y pueden confundirse con linfocitos pequeos.
Los linfoblastos ocasionalmente adquieren forma de raqueta de mano.
Serie Blanca 74
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Clulas muy caractersticas, con citoplasma basfilo repleto de vacuolas claras, que
contienen lpidos neutros, positivas con rojo oleoso y PAS negativas
Ncleos con cromatina fina granular y enormes nucleolos.
Las clulas son morfolgica e inmunofenotpicamente indistinguibles de las que
proliferan en el linfoma de Burkitt.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre perifrica teido con Wright y/ diapositivas
1 Aspirado de mdula sea teido con Wright y/ diapositivas
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 75
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
Serie Blanca 76
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
ACTIVIDADES.
- Reporte de resultados .______________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Serie Blanca 77
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
A menudo resulta difcil diferenciar los blastos leucmicos de la leucemia linfoblstica aguda
de los de la leucemia mieloblastica (M1), monoblstica aguda (M5A) y la leucemia
megacarioblstica aguda (M7) utilizando solamente extensiones con las coloraciones de May-
Grnwald-Giemsa.
2.PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Serie Blanca 78
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS
3.1 Reactivos.
CANTIDAD DESCRIPCIN
2 Vasos de precipitados de 100 ml
2 Matraces aforados de 100 ml
1 Pipeta graduada de 10 ml
2 Pipetas graduadas de 5 ml
1 Pipeta graduada de 1 ml
2 Frascos de 250 ml
10 Frotis de sangre perifrica
Serie Blanca 79
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Modo de Preparacin:
4.PROCEDIMIENTO.
4.1 Tcnica:
4.1.1. Los frotis se fijan por un minuto con la solucin formol etanol
4.1.2 Lavar con agua de la llave
4.1.3 Secar al aire PERFECTAMENTE
4.1.4 Sumergir en la solucin colorante por 30 segundos.
4.1.5 Lavar con agua de la llave
4.1.6 Contrateir por 30 segundos con solucin acuosa de safranina al 1%
4.1.7 Lavar con agua de la llave
4.1.8 Secar al aire
4.1.9 Sellar con resina sinttica y cubrir con cubreobjetos del #1
Actividades:
-Practicar la tincin citoqumica para Mieloperoxidasa con frotis de sangre perifrica.
Serie Blanca 80
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
2. PRINCIPIO Y METODOLOGA .
Utilizando como substrato el naftol-AS-C-cloroacetato (CAE) se detecta una esterasa
que es especfica de la granulopoyesis neutrfila en la que es positiva a partir del
mieloblasto y se expresa en forma de un precipitado rojo anaranjado muy brillante. Su
utilidad diagnstica se centra bsicamente en el reconocimiento de clulas blsticas
mieloides, si bien su aparicin es ms tarda que la de la mieloperoxidasa aunque
iguala a sta en especificidad.
Utilizando como substrato el naftol-AS-D-acetato, se obtiene una intensa positividad en
la serie monoctica que, a diferencia de las restantes clulas hematopoyticas, es
fluoruro sensible. Dada su positividad ms restrictiva es preferente usar el substrato -
naftil-acetato o -naftil-butirato para marcar la serie monoctica y sus precursores,
cuya positividad es intensa y se manifiesta en forma de un precipitado difuso por todo
el citoplasma.
3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.
3.1 Reactivos.
Serie Blanca 81
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
Balanza granataria
Balanza analtica
CANTIDAD DESCRIPCIN
2 Vasos de precipitados de 100 ml
2 Vasos de precipitados de 500 ml
2 Probetas de 100 ml
2 Probetas de 500 ml
1 Matraz volumtrico de 50 ml
1 Tubo de 13X100 ml
3 Pipetas de 10 ml
4 Pipetas de 5 ml
2 Goteros de 10 ml
2 Goteros de 100 ml
2 Frascos de 500 ml
10 Frotis de sangre perifrica
Soluciones de Fijacin
3.4.1 Solucin A
Na2HPO4 20 mg
KH2PO4 100 mg
Agua destilada 30 ml
Formaldehdo al 37% 25 ml
Acetona 45 ml
Solucin A ( #1 ) 30 ml
( Esta solucin se guarda a 4C )
Serie Blanca 82
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
a) Na2HPO4 2.366 g
H2O destilada 250 ml
b) KH2PO4 2.267 g
H2O destilada 250 ml
Soluciones de Tincin
Serie Blanca 83
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
4.PROCEDIMIENTO.
4.1 Tcnica:
Actividades:
-Practicar la tincin citoqumica para Esterasas con frotis de sangre perifrica.
Serie Blanca 84
Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
BIBLIOGRAFA
1 .BLOOD CELL MORPHOLOGY. Peripheral Smear Evaluation. Manual 1.Lynn Maedel and
Sandra Sommer.American Society of Clinical Pathologysts.Chicago.
6.Citoqumica.
http://web.udl.es/dept/medicina/citoweb/libro/pass/paginas/contenido/libro/citoquim.htm
Serie Blanca 85