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Tesis257 PDF
Tesis257 PDF
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial para optar al titulo de
MICROBILOGO INDUSTRIAL
APROBADO
APROBADO
Pg.
RESUMEN
1. INTRODUCCIN .................................................................................................1
2. MARCO TERICO ..............................................................................................3
2.1. Generalidades ..........................................................................................3
2.1.1. Los Hongos Macromycetes.......................................................................3
2.1.1.1. Ascomycetes..........................................................................................4
2.1.1.2. Basidiomycetes......................................................................................5
2.1.1.2.1. Orden Agaricales....... .........5
2.1.1.3. Ciclo de vida de los Hongos Macromycetes........ .........7
2.2.Los Hongos Comestibles cultivables .........................................................9
2.2.1. Historia del cultivo de los Hongos Comestible ........................................ 10
2.2.2. Etapas del Cultivo de los Hongos Comestibles....................................... 11
2.2.2.1. Semilla ................................................................................................. 11
2.2.2.2. Inoculacin........................................................................................... 12
2.2.2.3. Incubacin............................................................................................ 12
2.2.2.4. Fructificacin........................................................................................ 12
2.2.2.5. Cosecha............................................................................................... 12
2.2.3. Requerimientos nutricionales para el crecimiento de Hongos ....................
Comestibles ............................................................................................ 13
3. JUSTIFICACIN ...............................................................................................32
4. OBJETIVOS ......................................................................................................33
4.1.OBJETIVO GENERAL ............................................................................ 33
4.2. OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................. 33
5. HIPOTESIS........................................................................................................34
6. MATERIALES Y MTODOS .............................................................................35
6.1 Diseo de la investigacin....................................................................... 35
6.1.1. Poblacin de estudio............................................................................... 35
6.1.1.1. Localizacin ........................................................................................ 35
6.1.1.2. Muestra ................................................................................................ 35
6.1.2. Variables del estudio............................................................................... 36
6.2. Metodologa............................................................................................ 36
6.2.1. Preparacin del sustrato. ............................. 36
6.2.1.1. Deshidratacin y adecuacin de los residuos ........................... 36
6.2.1.2. Mezcla de los materiales que conforman el sustrato ........................... 37
6.2.1.3. Elaboracin de los bloques de sustrato ............................................... 38
6.2.2. Inoculacin.............................................................................................. 38
6.2.3. Incubacin............................................................................................... 39
6.2.4. Fructificacin........................................................................................... 40
6.2.5. Cosecha y pesaje de los carpforos ....................................................... 40
6.2.6. Prueba sensorial ..................................................................................... 40
6.2.7. Anlisis de Carbono y Nitrgeno total de los residuos
agroindustriales....................................................................................... 41
8. CONCLUSIONES .............................................................................................65
9. RECOMENDACIONES......................................................................................67
10. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ...............................................................70
LISTA DE TABLAS
Pg.
Pg.
Pg.
Anexo 1. Resumen de la produccin de Pleurotus ostreatus en cada
uno de los sustratos evaluados......................................................... 78
Anexo 2. Anlisis estadstico de los datos del crecimiento y produccin
de Pleurotus ostreatus ....................................................................... 79
Anexo 3. Nmeros aleatorios de la prueba sensorial....................................... 89
Anexo 4. Formato de evaluacin de la prueba sensorial ................................. 90
Anexo 5. Anlisis estadstico de la prueba sensorial ....................................... 92
RESUMEN
2.1. Generalidades
Los hongos Macromycetes estn formados por largas hifas ramificadas que
se renen en cordones y cuerpos de reproduccin visibles y medibles en
centmetros. Son saprfitos ya que crecen en materia descompuesta
absorbiendo la materia orgnica, en simbiosis con plantas formando
ectomicorrizas o como parsitos sobre los rboles. Algunos son comestibles,
otros venenosos e incluso pueden producir efectos psicoactivos. Suelen
crecer en la humedad que proporciona la sombra de los rboles, pero
tambin en cualquier ambiente hmedo y con poca luz (Saldarriaga, 2001).
2.1.1.1. Ascomycetes
Estos hongos pueden ser unicelulares estar formados por un micelio con
hifas de paredes quitinosas, con septos transversales incompletos (presentan
un poro central). Las hifas, pueden ser uni multinucleadas, homocariticas
dicariticas ramificadas. La principal caracterstica de estos hongos es que
como producto de su reproduccin sexual, se forman unos sacos o bolsas
llamados ascos los cuales, contienen en su interior a las esporas de origen
sexual (ascosporas). Los cuerpos productores de ascos se denominan
ascocarpos. No existen clulas flageladas a ningn nivel. Algunas especies
se asocian con ciertas algas formando lquenes, conocidos como
ascolquenes (Moore, 1996).
Las esporas que dan nombre al grupo son las basidiosporas, producidas
exgenamente en rganos especiales, llamados basidios. En los
Basidiomycetes superiores se producen cuatro basidiosporas tpicamente y
los basidios se encuentran en lneas aserradas o en las laminillas de los
grandes basiocarpos carnosos. Los Basidiomycetes inferiores tienen un ciclo
vital ms complicado y su lugar en la clasificacin no es muy seguro. Un
buen nmero de especies de Agaricales pueden desarrollarse en cultivos
artificiales (Stamets, 2003).
Los hongos del orden Agaricales son hongos que se caracterizan por tener
esporas color caf chocolate, presentar anillos diferentes a partir de un velo
parcial y laminillas o agallas libres. Este orden de hongos lo integran tanto
especies comestibles como venenosas. Son de gran importancia econmica
para el hombre por sus diferentes usos, tanto en alimentacin, medicina,
agricultura, industria, etc. Pueden ser saprfitos, parsitos o ectomicorrizicos.
Las principales partes que componen un hongo Macromycete del orden
Agaricales (Solomon y colaboradores, 1996) son (Figura 2.1):
2.2.2.1. Semilla
2.2.2.2 Inoculacin
2.2.2.3 Incubacin
2.2.2.4 Fructificacin
2.2.2.5 Cosecha
2.3.1. Generalidades
REINO: Fungi
DIVISIN: Basidiomycota
SUBDIVISIN: Basidiomycotina
CLASE: Himenomycetes
ORDEN: Agaricales
FAMILIA: Tricholomataceae
GNERO: Pleurotus
ESPECIE: ostreatus
SUSTANCIA %
Agua 92.20
Materia seca 7.80
Ceniza 9.50
Grasa 1.00
Protena bruta 39.00
Fibra 7.50
Fibra cruda 1.40
Nitrgeno total 2.40
Calcio 33mg/100g
Fsforo 1.34mg/100g
Potasio 3793mg/100g
Hierro 15.20mg/100g
cido ascrbico. Vit. C 90-144mg/100g
Tiamina. Vit. B1 1.16-4.80mg/100g
Niacina. Vit. B5 46-108.7mg/100g
cido flico 65mg/100g
Fuente: Romero y colaboradores, 2000
El cultivo del hongo Pleurotus ostreatus posee las mismas etapas que las del
cultivo de hongos comestibles en bloques estriles pero se diferencia
bsicamente en las etapas de incubacin y fructificacin, puesto que se hace
necesario adecuar las condiciones ambientales del cuarto de produccin,
permitiendo simular sus condiciones de crecimiento en la naturaleza.
2.3.5.1. Condiciones de Incubacin
2.4.1.1. Celulosa
2.4.1.2. Hemicelulosa
2.4.1.3. Lignina
2.4.1.4 Extractivos
Los principales residuos agroindustriales de este tipo de cultivo son las tusas,
los tallos y hojas verdes restantes del cultivo, las brcteas (hojas de la
mazorca), las barbas, las mazorcas que presenten daos por manipulacin o
con signos de haber sido afectados por plagas o enfermedades y las
malezas que crecen en el borde del cultivo (Prez y colaboradores, 2005).
Los robles son rboles de gran porte, hasta de una altura de 40 m de fuste,
casi siempre recto y cilndrico, a veces ramificaciones profusas desde la
base; la corteza inicialmente es lisa y luego exfoliable de color negruzco. La
copa es globosa y densa con presencia de yemas vegetativas de posicin
lateral, protegidas por catfilos o escamas ciliadas. Las hojas son simples,
alternas, enteras, lanceoladas, coriceas y delgadas, y de pice agudo
(Agudelo y Ramrez 1995).
Hiptesis general
6.1.1.1. Localizacin
6.1.1.2. Muestra
6.2. Metodologa
6.2.2. Inoculacin
La semilla fue adquirida en Champifung, lista para ser inoculada en cada uno
de los sustratos. La semilla vena empacada bajo condiciones de esterilidad,
cubierta en papel kraft. Se mantuvo bajo las condiciones estipuladas por la
casa comercial (refrigeracin a 4 C) hasta el momento en que se realiz la
inoculacin.
6.2.3. Incubacin
Para llevar a cabo este proyecto se realiz un anlisis de tipo descriptivo con
la asesora del estadstico Miguel Pinzn, docente de la Facultad de Ciencias
de la Universidad Javeriana, por medio del uso de programas estadsticos
como Biomates y Excel avanzado 2005.
Variables dependientes:
Ho: i= c
Ha: No todos los i son iguales
Planteamiento de hiptesis Tusa de mazorca Vs. control:
6.3.1.5.2. Anlisis sensorial de los hongos cosechados de Pleurotus
ostreatus en cada uno de los sustratos evaluados
Ho: i= c
Ha: No todos los i son iguales
Para esto se defini esta comparacin para cada uno de los sustratos en los
siguientes trminos:
Planteamiento de hiptesis Tusa de mazorca Vs. Control para la
prueba sensorial:
7. RESULTADOS Y DISCUSIN
El tiempo de corrida del micelio hace referencia al tiempo que tarda el hongo
en colonizar el sustrato que se puede evidenciar con el cambio de color a
blanco y la compactacin del bloque (Figura 7.2). Este momento precede la
formacin de los primordios sobre el sustrato. Dicha cobertura se observ en
todos los sustratos evaluados, incluyendo el sustrato control, bajo las mismas
condiciones de temperatura (24C - 26 C), humedad relativa entre 70-80% y
oscuridad (Fernndez, 2004; Romero y colaboradores, 2000; Garca, 2003).
.
Figura 7.1. Sustrato antes de la corrida Figura 7.2. Corrida de micelio sobre el
de micelio en tusa de mazorca sustrato en tusa de mazorca
Al observar el tiempo de corrida del micelio del hongo en cada uno de los
sustratos (Figura 7.3) se puede ver que el tiempo de corrida de micelio en el
capacho de uchuva, la cscara de arveja y la tusa de mazorca fue mayor al
del control.
TIEMPO DE CORRIDA DEL MICELIO DE
Pleurotus ostreatus EN DIFERENTES
SUSTRATOS
30 27
23
TIEMPO (Das)
25 20 18
20
15
10
5
0
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO
Otro factor que puede afectar la corrida del micelio es la compactacin del
bloque de sustrato y segn los resultados obtenidos, se observ que tanto en
la cscara de arveja como en la tusa de mazorca se tom ms tiempo la
corrida del micelio que en el control y en el capacho de uchuva, esto pudo
deberse a que al preparar la mezcla de los sustratos se observ la formacin
de apelmazamientos en la cscara de arveja y en la tusa de mazorca. A
pesar de que todos los sustratos fueron sometidos al mismo proceso de
molido, esto pudo generar una baja difusibilidad de oxgeno en el sustrato,
importante para el desarrollo y crecimiento del micelio (Hami, 1990). En
contraparte, el sustrato control y el capacho de uchuva presentaban una
contextura ms fibrosa que no permita la formacin de apelmazamientos
durante la preparacin de la mezcla.
7.1.3. Anlisis del nmero de hongos producidos por bolsa de Pleurotus
ostreatus en cada uno de los sustratos evaluados
80
65
58.9
60 51.4
40 34.5
20
0
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO
8
DIAMETRO (cm)
0
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO ANALIZADO
Figura 7.8. Tamao de los carpforos producidos en cada uno de los sustratos
Segn los datos obtenidos del tamao de los carpforos se pudo determinar
(Anexo 2) por medio de ANOVA que no hubo diferencia estadsticamente
significativa ya que se obtuvo una probabilidad igual a 0.359 y con la prueba t
de student se determin que ninguno de los residuos analizados como son
capacho de uchuva (p=0.437), cscara de arveja (p=0.120) y tusa de
mazorca (p=0.180) supero al cultivo control ya que no existi diferencia
estadsticamente significativa entre estos, indicando que el sustrato no influy
en el desarrollo del dimetro de los carpforos. Sin embargo segn Magae y
colaboradores (1995), el dimetro de los carpforos de los hongos
producidos por bolsa no es relevante como su peso fresco, ya que lo
importante de un sustrato es el rendimiento y la productividad en cuanto al
peso fresco que este pueda generar. Aun as es necesario observar el
tamao y forma de los carpforos ya que se sabe que el crecimiento de este
hongo sobre cierto tipos de sustrato puede llegar a generar deformaciones
del carpforo, sin embargo en este estudio no se evidenci este evento. En
este estudio se observ que el tamao de los carpforos en todos los
residuos evaluados eran similares entre s, aproximadamente de 5 a 6 cm, y
que no exista una diferencia estadsticamente significativa con respecto al
de los producidos en el sustrato control al realizar la prueba t de student.
567
600
400
200
0
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO ANALIZADO
Figura 7.10. Peso fresco obtenido de Pleurotus ostreatus en cada uno de los
sustratos evaluados
76.10 70.00
80.00 68.60
EFICIENCIA
56.70
60.00
40.00
20.00
0.00
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO ANALIZADO
60.00
39.03 35.90
40.00 35.18
29.08
20.00
0.00
CAPACHO DE CASCARA DE TUSA DE CONTROL
UCHUVA ARVEJA MAZORCA
SUSTRATO
No. de hongos
65 51.4 34.5 58.9
producidos
Dimetro
promedio por 5.87 5.47 5.53 5.77
bolsa (cm)
Eficiencia
76.1 68.6 56.7 70
biolgica %
RENDIMIENTO
2 7.43 6.7 5.54 6.84
(Kg/cm )
Los valores reportados son el promedio de las diez bolsas cultivadas en cada sustrato.
ANEXO 2
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE
UCHUVA
10 650 65 32.2222222
ASERRN DE
ROBLE
10 589 58.9 56.3222222
CSCARA DE
ARVEJA
10 514 51.4 29.8222222
TUSA DE
MAZORCA
10 345 34.5 36.7222222
ANLISIS DE VARIANZA
Grados Promedio de
Origen de las Suma de Valor crtico
de los F Probabilidad
variaciones cuadrados para F
libertad cuadrados
Total 6619.9 39
Prueba t de student
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE UCHUVA 10 58.6 5.860.26488889
ASERRN DE ROBLE 10 57.7 5.770.27788889
CSCARA DE ARVEJA 10 54.7 5.470.35344444
TUSA DE MAZORCA 10 55.3 5.53 0.369
ANLISIS DE VARIANZA
Origen de las Suma de Grados de Promedio de Valor crtico
variaciones cuadrados libertad los cuadrados F Probabilidad para F
Total 12.43775 39
Prueba t de student
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE UCHUVA 10 7610 761 1521.11111
ASERRN DE ROBLE 10 7000 700 511.111111
CSCARA DE ARVEJA 10 6860 686 293.333333
TUSA DE MAZORCA 10 5670 567 10690
ANLISIS DE VARIANZA
Grados
Origen de las Suma de de Promedio de Valor crtico
variaciones cuadrados libertad los cuadrados F Probabilidad para F
Total 314710 39
Prueba t de student
Diferencia hipottica
de las medias 0
Grados de libertad 14
Estadstico t 4.279019218
P(T<=t) una cola 0.000381974
Valor crtico de t (una
cola) 1.761310115
P(T<=t) dos colas 0.000763948
Valor crtico de t (dos
colas) 2.144786681
Prueba t para dos muestras suponiendo varianzas desiguales
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE UCHUVA 10 761 76.1 15.2111111
ASERRN DE ROBLE 10 700 70 5.11111111
CSCARA DE ARVEJA 10 686 68.6 2.93333333
TUSA DE MAZORCA 10 567 56.7 106.9
ANLISIS DE VARIANZA
Grados Promedio de
Origen de las Suma de de los Valor crtico
variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad para F
Entre grupos 1975.7 3 658.566667 20.2393717 7.3929E-08 2.86626556
Dentro de los grupos 1171.4 36 32.5388889
Total 3147.1 39
Prueba t de student
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE UCHUVA 10 74.34 7.434 0.14413778
ASERRN DE ROBLE 10 68.39 6.839 0.05001
CSCARA DE ARVEJA 10 67.02 6.702 0.02819556
TUSA DE MAZORCA 10 55.37 5.537 1.01917889
ANLISIS DE VARIANZA
Grados Promedio de
Origen de las Suma de de los Valor crtico
variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad para F
Entre grupos 18.89914 3 6.29971333 20.2967397 7.1635E-08 2.86626556
Dentro de los grupos 11.1737 36 0.31038056
Total 30.07284 39
Prueba t de student
CSCARA DE
ARVEJA ASERRN DE ROBLE
Media 6.702 6.839
Varianza 0.028195556 0.05001
Observaciones 10 10
Diferencia hipottica de las medias 0
Grados de libertad 17
Estadstico t -1.549179582
P(T<=t) una cola 0.069876688
Valor crtico de t (una cola) 1.739606716
P(T<=t) dos colas 0.139753376
Valor crtico de t (dos colas) 2.109815559
FECHA: .
NOMBRE: .
OCUPACIN: .
Sobre la mesa encontrara cuatro vasos marcados aleatoriamente; pruebe las cuatro
muestras y acomdelas de la que MS LE GUSTE A LA QUE MENOS LE GUSTE.
No puede existir igualdad entre las muestras.
Indique sus respuestas usando el nmero asignado a cada uno de los vasos que
contienen la muestra.
Beba agua pura y consuma galletas de soda despus de probar cada muestra.
Ms me gusta
Menos me gusta
MUCHAS GRACIAS
Comentarios:
FECHA: .
NOMBRE: .
OCUPACIN: .
Sobre la mesa encontrara cuatro vasos marcados aleatoriamente; pruebe las cuatro
muestras y acomdelas de la que MS LE GUSTE A LA QUE MENOS LE GUSTE.
No puede existir igualdad entre las muestras.
Indique sus respuestas usando el nmero asignado a cada uno de los vasos que
contienen la muestra.
Beba agua pura y consuma galletas de soda despus de probar cada muestra.
Ms me gusta
Menos me gusta
MUCHAS GRACIAS
Comentarios:
ANEXO 5
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE
UCHUVA 30 12,36 0,412 0,52013379
ASERRIN DE
ROBLE 30 -0,86 -0,02866667 0,36008782
CSCARA DE
ARVEJA 30 -7,12 -0,23733333 0,50354437
TUSA DE
MAZORCA 30 -28,11 -0,937 0,08880103
ANLISIS DE VARIANZA
Grados Promedio de
Origen de las Suma de de los Valor crtico
variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad para F
Entre grupos 28,4532492 3 9,48441639 25,7629468 7,6192E-13 2,682809415
Dentro de los
grupos 42,7044433 116 0,36814175
Anlisis de Varianza
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
CAPACHO DE UCHUVA 30 7.51 0.25033333 0.5304654
ASERRIN DE ROBLE 30 -5.92 -0.19733333 0.5884892
CSCARA DE ARVEJA 30 -2.06 -0.06866667 0.42301885
TUSA DE MAZORCA 30 -29.44 -0.98133333 0.03430161
ANLISIS DE VARIANZA
Grados Promedio de
Origen de las Suma de Valor crtico
de los F Probabilidad
variaciones cuadrados para F
libertad cuadrados
Entre grupos 24.6250558 3 8.20835194 20.8297452 7.2578E-11 2.68280941
Dentro de los grupos 45.7119767 116 0.39406876
Prueba t de student