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MCriado Mayo 2011 PDF
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En 1921 Otto Loewi observ que el nervio Posteriores experimentos demostraron que la sus-
vago liberaba una sustancia que disminua la velo- tancia liberada era la acetilcolina y que sus efectos
cidad de los latidos de un corazn de rana. Adems, podan observarse en otros tejidos. En 1934 Sir Hen-
si el lquido de este corazn se transfera a otro, se ry Dale clasific estos efectos farmacolgicos como
reproduca el mismo efecto inhibitorio. Loewi des- muscarnicos o nicotnicos segn fueran repro-
cribi esta actividad como transmisin humoral. ducidos por los alcaloides muscarina o nicotina, res-
pectivamente. Estas sustancias actan unindose a
a c molculas receptoras e induciendo la consiguiente
respuesta. Los receptores muscarnicos se caracteri-
zan por respuestas prolongadas que son el resultado
de interacciones con sistemas de segundos mensa-
jeros a travs de las denominadas protenas G. Por
el contrario, las respuestas nicotnicas son rpidas y
breves, ya que el neurotransmisor se une al receptor
y provoca rpidos cambios en su estructura que con-
ducen a la apertura de un poro inico, selectivo para
cationes. Es llamativo que esta dualidad de respues-
tas tambin ocurre con otros neurotransmisores tales
como glutamato, serotonina, gamma-aminobutirato
(GABA) y adenosin trifosfato (ATP).
El papel de la acetilcolina en la transmisin
neuromuscular fue estudiado entre otros, por Bern-
b d hard Katz, John Eccles y Stephen Kuffler. Estos pio-
neros demostraron con mtodos electrofisilogicos
que la interaccin de acetilcolina con un receptor de
la membrana postsinptica provocaba un incremen-
to en la conductancia de la membrana a cationes,
producindose una despolarizacin de la membrana
de la clula muscular, lo que constitua, en suma, la
seal inicial para la contraccin muscular (Figura 1,
a-d). En 1953 David Nachmansohn sugiri que el
receptor postsinptico de la acetilcolina podra ser
una protena que al unir el neurotransmisor sufrira
un cambio conformacional que provocara la for-
macin de un tnel o canal para el paso de iones a
travs de la membrana. Resultados posteriores han
confirmado esta hiptesis.
Figura 1: Transmisin sinptica en la placa motora.
a) En condiciones de reposo apenas se libera acetilcolina (ACh) con lo que
solo se abren muy pocos canales dando lugar a potenciales de placa miniatura Bioqumica del receptor nicotnico
(ppm), lo que crea un cierto ruido. del rgano elctrico del Torpedo
b) La llegada de un potencial de accin (p.a.) provoca la entrada de iones
Ca y la liberacin de acetilcolina de las vesculas sinpticas, con lo que su A pesar de los avances obtenidos en la des-
concentracin en el espacio intersinptico aumenta de 10-8 a 10-4 M. cripcin electrofisiolgica y farmacolgica de la
c) La unin de acetilcolina al receptor provoca la apertura del canal respuesta colinrgica, no fue hasta mediados de
inico, pasando iones Na y K a su travs, merced al gradiente de potencial los aos 70 cuando se pudo abordar el estudio bio-
electroqumico y producindose la consiguiente despolarizacin de la qumico y estructural del receptor nicotnico. Dos
membrana regalos de la naturaleza facilitaron esta tarea. Por
d) El canal no conduce iones al pasar a su estado desensibilizado, pero la un lado la identificacin de ciertas neurotoxinas
despolarizacin mencionada anteriormente es suficiente para activar canales presentes en el veneno de serpientes tales como la
dependientes de voltaje que dejarn entrar iones sodio, comenzando la fase cobratoxina (procedente de la cobra Naja naja sia-
inicial de un potencial de accin. mensis) y la a-bungarotoxina (de Bungarus mul-
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ticinctus). Estas pequeas protenas compuestas
de aproximadamente 70 aminocidos se unan al
receptor y lo bloqueaban de forma prcticamente
irreversible. Toxinas conteniendo tomos radiacti-
vos en su estructura se usaron a continuacin para
el estudio de la localizacin, purificacin y cuanti-
ficacin del receptor nicotnico. El segundo regalo
fue la existencia de determinados peces elctricos
de la familia de los Torpedinidae (Torpedo califor-
nica, marmorata y nobiliana entre otros), cerca-
nos a las rayas. El rgano elctrico de estos peces
(Figura 2) puede generar potenciales de 50 V con
una intensidad de corriente de 50 A, gracias a su
peculiar arquitectura de pilas de clulas llamadas
electrocitos, clulas musculares que perdieron su
capacidad de producir contracciones pero no su
excitabilidad. El receptor es muy abundante en es-
tas clulas, aproximadamente 1000 veces mas que
en msculo estriado, lo que facilit su aislamiento
y purificacin mucho antes del desarrollo de las
modernas tcnicas de Biologa Molecular aplica-
das posteriormente al estudios de otros receptores
similares. La cromatografa de afinidad usando a-
bungarotoxina inmovilizada permiti la purifica-
cin del receptor nicotnico del rgano elctrico de
Torpedo, resultando estar compuesto por cinco ca-
denas polipeptdicas denominadas a, b, g y d, con
dos copias de a por molcula de receptor (Figura
2). Los estudios bioqumicos demostraron, entre
otras cosas que: a) el receptor es un pentmero que
Figura 2: El rgano elctrico derecho del Torpedo se presenta libre atraviesa la membrana con todas sus subunidades,
de la piel que lo cubre. Este rgano est formado por clulas denominadas b) el sitio de unin de acetilcolina y de otros ago-
electrocitos que se encuentran apiladas. La peculiar inervacin sita al receptor nistas y antagonistas reside principalmente en las
nicotnico en la membrana postsinptica en concentraciones muy altas. subunidades a, c) una vez purificado, el receptor
La purificacin y solubilizacin de estas membranas rinde una fraccin muy es capaz de ensamblarse en membranas lipdicas
rica en receptor que puede purificarse an mas por medio de la cromatografa de artificiales y reconstituir su funcin translocadora
afinidad con a-bungarotoxina inmovilizada. Si se lleva a cabo una electroforesis de iones al ser activado con agonistas, y d) el poro
del receptor purificado se comprueba que est compuesto por cuatro cadenas inico parece estar localizado en el centro de la
polipeptdicas diferentes, habiendo dos copias de la denominada subunidad a. molcula de receptor y a su formacin contribuyen
La microscopa electrnica de una preparacin hecha por el autor revela varias todas las subunidades.
molculas de receptor con estructura pentamrica y con una zona densa a los
electrones situada en el centro. Posteriormente se ha comprobado que esta zona
es la entrada del canal inico, a cuya formacin contribuyen las cinco subunidades
del receptor.
En 1982 el grupo de Numa public la se- c) dominios hidroflicos uniendo los anteriores
cuencia de aminocidos completa de la subunidad que son poco extensos a excepcin del que une los
a del receptor nicotnico de acetilcolina, obtenida fragmentos M3 y M4, que puede tener entre 50 y
a partir de la secuencia nucleotdica del correspon- 250 aminocidos, est orientado intracelularmente
diente ADN recombinante. A esta siguieron las de y es la nica zona de las subunidades que no tie-
las dems subunidades, tanto del rgano elctrico ne homologa, y d) un corto segmento C-terminal
del Torpedo como de la placa motora de varios extracelular. La estructura cuaternaria de una mo-
mamferos, comprobndose que todas ellas eran lcula de receptor (Figura 3b) viene dictada por el
homlogas y posean una organizacin estructural ensamblaje de cinco subunidades que pueden ser
similar (Figura 3a) compuesta por : a) un dominio iguales o distintas, pero que mantienen en todos
N-terminal hidroflico orientado hacia el exterior los casos la misma organizacin estructural. Resul-
celular, constitudo por unos 200 aminocidos y ta asi una molcula quasi-simtrica de forma pen-
que contiene los elementos mas importantes del tamrica y con el eje de simetra perpendicular al
sitio de unin de agonistas, b) cuatro segmentos plano de la membrana.
hidrofbicos (denominados M1 a M4) que atravie- La combinacin de las tcnicas bioqumicas
san la membrana como estructuras a-helicoidales, y farmacolgicas clsicas con las de biologa mole-
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cular permiti la diseccin de las zonas del receptor
implicadas en el reconocimiento de agonistas y an- a b
Casi el 20% de todas las muertes en los principal culpable. Una vez inhalado el humo
paises desarrollados se deben al uso del tabaco. del cigarrillo, la nicotina entra en la circulacin
Muchos fumadores tratan repetidamente de arterial y se distribuye rpidamente a todos
dejarlo pero vuelven a caer, el 80% de ellos los tejidos, tardando entre 10-20 segundos en
en menos de dos aos. Aunque queda todava llegar al cerebro. All encontrar su blanco:
mucho que aclarar sobre el mecanismo de los receptores nicotnicos de acetilcolina de
adiccin al tabaco, una cosa parece clara: tipo neuronal. Estos receptores son abundantes
un componente del tabaco, la nicotina, es el en la corteza cerebral, el tlamo y el ncleo
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interpeduncular y en menor medida en la
amgdala, el septum, nucleos motores del
tronco del encfalo y locus ceruleus. Durante
los ltimos 15 aos las tcnicas de ADN Dopamina
recombinante han facilitado la identificacin
de diversas subunidades de los receptores
nicotnicos neuronales. Estas subunidades
tienen una secuencia de aminocidos parecida a
las subunidades del receptor de tipo muscular y
fueron denominndose a2, a3... si se parecan a
la subunidad a, es decir, la que preferentemente
une agonistas, y b2, b3... si eran mas distantes.
Hasta el momento se han encontrado nueve
subunidades a (a2-a10) y tres subunidades
b (b2-b4). No todas ellas pueden combinarse Figura 6: Diagrama de los circuitos cerebrales involucrados en la
entre si, pero an as es posible una gran adiccin a nicotina.
diversidad de receptores. El receptor neuronal Se representa un corte sagital del cerebro de rata con los ncleos que representan
predominante en el cerebro y principal estructuras lmbicas: amgdala, hipocampo, corteza prefrontal (CPF), ncleo
responsable de los sitios de alta afinidad para accumbens (N. Acc.), ncleo plido ventral (NPV) y el rea ventral tegmental
nicotina es el formado por subunidades a4 (AVT). Neuronas dopaminrgicas en el AVT modulan el flujo de informacin a
y b2. En el sistema nervioso perifrico son travs del circuito lmbico, proyectando a N. Acc., amgdala, hipocampo, CPF y
las subunidades a3 y b4 las mayoritarias, NVP. La nicotina activa receptores nicotnicos situados en clulas dopamingicas
a veces acompaadas de la subunidad a5. del AVT que a su vez estimulan la liberacin de dopamina en los ncleos lmbicos.
Estos receptores no se bloquean con la
a-bungarotoxina, ya mencionada anteriormente
por su accin sobre el receptor muscular. Sin Patologas neurales y receptores
embargo, existe un receptor homomrico muy nicotnicos
abundante en el sistema nervioso, formado por
cinco subunidades a7, que es el responsable Dado el control que los receptores nicotni-
de los sitios de fijacin de a-bungarotoxina y cos neuronales pueden ejercer sobre la liberacin
posee una gran permeabilidad a iones calcio. de neurotransmisores, no es de extraar que se los
Por ltimo est la combinacin a9-a10 de encuentre involucrados en la patognesis de sn-
localizacin muy restringida en algunos dromes y enfermedades causados por la alteracin
tejidos sensoriales. En resumen, puede de determinados sistemas de neurotransmisores.
decirse que en diferentes reas del cerebro se En ciertos casos, tales como la depresin y la es-
encuentran diferentes receptores nicotnicos quizofrenia, la relacin parece ser indirecta, y se ha
con variadas propiedades electrofisiolgicas y deducido principalmente de los efectos benficos
farmacolgicas. Esta diversidad explicara los del tratamiento con nicotina, ya sea a travs de au-
mltiples efectos de la nicotina en humanos. tomedicacin en forma de tabaco o al tratamiento
En el sistema nervioso la activacin de con parches. En otros casos, que se mencionan a
receptores nicotnicos provoca principalmente continuacin, la relacin es mas clara.
la liberacin de neurotransmisores tales
como acetilcolina, serotonina, noradrenalina, Epilepsia
dopamina y otros, siendo los ncleos lmbicos La llamada epilepsia autosomal nocturma
del mesencfalo los implicados en la adiccin a dominante del lbulo frontal est causada por
nicotina y a otras drogas (Figura 6). Neuronas mutaciones en la subunidad a4 de los receptores
dopaminrgicas del rea ventral tegmental nicotnicos neuronales. En esta forma de epilepsia
proyectan hacia el ncleo accumbens y otras ocurren ataques breves durante el sueo ligero que
estructuras lmbicas, incluyendo la amgdala, a veces se diagnostican equivocadamente como
el hipocampo, la corteza prefrontal y el ncleo pesadillas. Relacionadas con este tipo de epilepsia
plido ventral. La nicotina incrementa la se han identificado varias mutaciones en el seg-
frecuencia de disparo de neuronas en el rea mento M2 de la subunidad a4 que tienen como
ventral tegmental y facilita la liberacin de consecuencia la prdida de la funcin del receptor.
neurotransmisores en el ncleo accumbens. Se cree que esta prdida funcional provoca una re-
Las neuronas dopaminrgicas expresan al duccin en la liberacin del neurotransmisor inhi-
menos tres subtipos de receptores nicotnicos. bitorio GABA de interneuronas, lo que conducira
Dos de ellos tienen en comn la presencia a una mayor excitabilidad cortical en los perodos
de subunidades b2 y una composicin mas de transicin entre sueo y vigilia.
heterognea de subunidades a, mientras que
el tercero est compuesto de slo subunidades Enfermedad de Alzheimer
a7. Este ltimo subtipo estara mas relacionado La intensa degeneracin de neuronas que
con los sntomas de abstinencia producidos al inervan la corteza cerebral, la amgdala y el hi-
prescindir de la nicotina (irritabilidad, ansiedad, pocampo provoca los tpicos sntomas de esta
malestar, incremento del apetito, etc.) enfermedad, tales como dificultad para aprender,
Bibliografa complementaria
Mammalian nicotinic acetylcholine receptors: from structure to function. E.X. Albuquerque, E.F.R.
Pereira, M. Alkondon y S.W. Rogers en Physiological Reviews, vol. 89, pgs 73-120, 2009.
Insight in nAChR subtype selectivity from AchBP crystal structures. P. Rucktooa, A.B. Smit y T.
K. Sixma en Biochemical Pharmacology, vol. 78, pgs 777-787, 2009.
Binding, activation and modulation of Cys-loop receptors. P.S. Miller y T.G. Smart en Trends in
Pharmacological Sciences, vol. 31, pgs 161-174, 2010.
Agradecimiento:
Quiero agradecer la labor de Stuart Ingham en la elaboracin de las figuras de este artculo.
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