BALANCE DE MATERIA

EN BIOPROCESOS

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 ALREDEDORES

ALREDEDORES
SISTEMA

Sistema cerrado Sistema abierto

proceso discontinuo proceso continuo
Sistema se encuentra separado de los alrededores, los cuales son el resto del
universo.
El limite del sistema puede ser real como las paredes de un fermentador o
imaginario.
SISTEMA ESTACIONARIO
Cuando todas las propieades del sistema como son
temperatura, presion, concentracion, volumen, masa, etc no
varian con el tiempo.

ECUACION GENERAL DE BALANCE DE MATERIA

Entrada - salida + generacin consumo = acumulacin

Sistema continuo en estado estacionario

Cuando Acumulacin = 0
Entrada + generacin = Salida + consumo
CUANTIFICACION DEL
CRECIMIENTO MICROBIANO
Estudio cuantitativo de la cintica de
fermentaciones.
Mtodos experimentales sencillos para
determinar el crecimiento de poblaciones
microbianas
Considerar el modo de reproduccin de
las clulas
Las clulas procariticas bacterianas se
reproducen por fisin binaria sin que sea
posible diferenciar una clula madre de una
clula hija.

Edad mxima c/clula es el lapso

comprendido entre dos replicaciones
sucesivas

Edad de cultivo es el tiempo transcurrido

desde la inoculacin.
Las bacterianas se presentan en forma
individual o en asociaciones dbiles de
pocos individuos,pudiendo ser
dispersadas homogneamente en el
medio de cultivo
Las eucariticas como levaduras se
desarrollan en clulas individuales
fcilmente dispersables que se
reproducen por gemacin produciendo
una clula hija y una clula madre.
Cultivo de levaduras es heterogneo en
cuanto a la edad y por lo tanto el
estado fisiolgico de las clulas que lo
componen.
Los hongos por crecimiento apical
formando hifas
Caractersticas reolgicas no-
newtonianas.
Mtodos de cuantificacin
del crecimiento microbiano
 Mtodo Fundamento Observaciones
Conteo directo No
Recuento en celda de clulas Requiere clulas individuales

Nefelometra Conteo directo No RCI Influencias de las

de clulas condiciones de incubacin
N.M.P. Dispersin de luz Requiere cultivo
homog. y traslcido

Peso Seco Estadstico RCI y medio limpio

Turbimetra Transmisin de luz RCI y medio limpio

Vol. empacado Centrifugacin Poco preciso

Fsico Qumicos Variados indirectos , pH, anlisis de

Comp. celulares, etc
Balance de masa Conservacin de Gran cantidad de datos
masa analticos
dX
.X
dt

X dX t

X0 X
. dt
0

X = Xo. e.t

1 dX d(lnX) (lnX)
.
X dt dt t
 1 dX d(lnX) (lnX)
.
X dt dt t
X = Xo. e.t
X Ln X

t t
 Se estudia el crecimiento celular de un microorganismo
obteniendo los siguientes datos

t X

dias celulas/ml

0 4.50E+05 2 1.77E+06
2.5 2.13E+06
0.2 5.20E+05
3 3.55E+06
0.5 6.50E+05 3.5 4.02E+06
1 8.10E+05 4 3.77E+06
4.5 2.20E+06
1.5 1.22E+06

a) Calcular la velocidad especfica del crecimiento celular

durante la fase de crecimiento
b) El tiempo de duplicacin del cultivo
 4.5E+06 16
4.0E+06 15.5
3.5E+06
15
3.0E+06
14.5

Ln X
2.5E+06
X

14
2.0E+06

1.5E+06
13.5

1.0E+06 13

5.0E+05 12.5
0.0E+00 12
0 1 2 3 4 5
Tiempo (dias)
 15.5

15

14.5
Ln (X)

14

13.5
ln X = 13.01+0.67 t
13 R2 = 0.99
12.5
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
Tiempo (dias)
Estequiometra del crecimiento

El crecimiento de las clulas obedece la ley de

Conservacin de Energa y Materia
Los tomos de (C), (O), (N) y otros elementos
consumidos durante el crecimiento se incorporan a las
nuevas clulas o se expulsan como productos
SUSTRATO Fuente de N Biomasa o clulas

CwHxOyNz + aO2 + b HgOhNi c CHON +dCO2 + eH2O (I)

W=6, X=12, Y=6 y Z=0a, b, c, d y e Coef. Estequiom.

Aprox. macroscpica C,H,O y N 95%
C 50 Na 1
N 20 Ca 0.5
O 14 Mg 0.5
H 8 Cl 0.5
P 3 Fe 0.2
S
1 Otros 0.3
K 1
Composicin de la bacteria Escherichia coli
 Calculo de Coeficientes
CwHxOyNz + aO2 + b HgOhNi c CHON +dCO2 + eH2O (I)

Balance de C : w = c + d : (i) a
Balance de H : x + b g = c + 2e : ii)
b
c
Balance de O y + 2a + bh = c + 2d + e (iii)
d
Balance de N z + bi = c (iv) e
COEFICIENTE Moles de CO 2 producidos d
RQ
RESPIRACION Moles de O 2 consumidos a

Debemos estar seguros que el sustrato no se utiliza para sintetizar

otros productos extracelulares que no sean CO2 y H2O

Resolviendo el sistema de ecuaciones Lineales

 Las bacterias tienden a tener contenidos de nitrogeno
ligeramente mayores (11-14%).

Los hongos tiene (6.3 9%)

Cuando no se dispone de la composicin puede utilizarse como

formula general : CH1.8O0. 5N0.2
este es el peso molecular medio de la biomasa basado en los contenidos
C,H,O,N es por lo tanto 24.6, aunque existe normalmente un 5 - 10%
de ceniza residual que no se incluye en la formula.
 14
y = -0.461x + 11.675
12
R2 = 0.9999
C{elulas [g/l]

10
8
6
4
2
0
0 10 20 30
Sustrato [g/l]
 Rendimiento de biomasa ( Yx/s)

DURANTE el CRECIMIENTO existe una relacin lineal

entre [Biomasa] producida y el [Sustrato] consumido

g clulas producidas MW Clulas

Yx/s Yx/s c
g sustrato consumido MWSustrato

Yx/s = k durante el crecimiento, su valor deter. experim.

puede utilizarse para calcular el coef. estequiom. C
Mw = peso molecular.
Para utilizar esta ecuacin el sustrato no se debe utilizar
para sintetizar otros productos que no sean CO2 y H2O.
 Estequiometra del producto (II)

CwHxOyNz + aO2+ b HgOhNi cCHON +dCO2+eH2O + fCjHkOlNm

SUSTRATO Fuente de N Biomasa Producto

Rendimiento de producto a partir del sustrato: Yp/s

g producto formado
Yp/s
g sustrato consumido

MWProducto
Yp/s f
MWSustrato
Se debe asegurare de que el sistema
experimental utilizado para medir Yp/s
corresponde a la ecuacin (II)
No puede aplicarse a la produccin
metablica secundaria como la fermentacin
de la penicilina
Formacin de producto debe estar asociado
directamente con el crecimiento celular
Balance de electrones
y grado de reduccin [H2O]= k

Balances de H y O pueden presentar dificultades

Conservacin de potencia reductora o electrones
disponibles
Si no se conoce la composicin de las celulas el B puede
tomarse como 4.2
Electrones disponibles
Al nmero de electrones disponibles
para transferir al O2 en la combustin
del sustrato a CO2, H2O y compuestos
que contengan nitrgeno
Se calcula a partir de la valencia de su elementos

C 4 S 6
H 1 -3 NH3

O -2 N 0 N2

P 5 5 NO3
CwHxOyNz + aO2+ b HgOhNi cCHON +dCO2+eH2O + fCjHkOlNm

Se define como el nmero de equivalentes de electrones disponibles

en aquella cantidad de materia que contenga 1 g tomo de carbono

Origen Frmula # de electrones Grado de

disponibles reduccin
Biomasa CHON 4 + - 2 - 3 4+ -2-3
Sustrato CwHxOyNz 4w + x - 2y - 3z (4w + x 2y-3z)/w

Producto CjHkOlNm 4j + k - 2l 3m (4j + k - 2l - 3m)/j

Composicin elemental y grado de
reduccin para algunos microorganismos
(en relacin al NH3)
BALANCE DE MASA Y ENERGIA

Demanda terica de oxigeno

La demanda de oxgeno (a) est directamente

relacionado con los electrones disponibles
O2 es el sustrato limitante en las fermentaciones
aerbicas

Cuando existe sntesis de producto, como

el representado por la ecuacin (II) el
balance de electrones es:
 Demanda terica de oxigeno

w s 4 a = c B +f j p (1)
a = ( w s - c B - f j p) (2)
La Ec.(2) es muy til porque si se conoce el microorganismo (B),
el sustrato (w y s) y el producto (j y p) involucrados en el
cultivo celular, y el rendimiento de biomasa (c ) y de producto (f),
la demanda de oxgeno (a) puede calcularse rpidamente.
a puede determ. resolviendo los coef. Esteq.de la ecuacin (II).

La ec. (2) permite una evaluacin ms rpida y no es necesario

conocer las cantidades de NH3, CO2 y H2O involucrados.
 Reparto de electrones disponibles en el sustrato
Rendimiento mximo posible.

4a c f.j.p
B 1
w.s w.s w.s
(s) (B) (P)
fraccin de e fraccin de e Fraccion de e
disponibles transf disponibles transf transferidos al
desde el Sust al O2 a la Biomasa Producto
w s
w s f max
c max j p
B
el rendimiento mximo
si todos los e disponibles de producto en
se utilizaran para la sntesis ausencia de sntesis de
de biomasa B = 1 biomasa
Rendimientos termodinmicos mximos de biomasa
 Requerimientos nutricionales
del Medio de Cultivo
para la construccin de una nueva clula esta contenida en los
cromosomas.
La materia debe ser suministrada a travs de los componentes del
medio de cultivo.
La E se obtiene del catabolismo de la fuente de C de cultivo.
Crecimiento microbiano una ecuacin qumica.
C, H, O y N y Mg, S, P,Ca, Na y K
Otros compuestos a niveles muy bajos y deben ser suministrados
como compuestos aptos para ser metabolizados.
La fuente de C: Carbohidrato-orgnico, CO2, CO3-2 HCO3-1 (caso
de clulas quimioautotrficas o fotosintticas).
La fuente de N : Amonio, nitrgeno amino de aminocidos y
protenas, rea, nitrato o nitrgeno elemental
 Medios complejos

Son formulados en base a desechos, subproductos y

extractos naturales.
la melaza, licor de maceracin de maz, extracto de
levadura y otros
Su composicin qumica es compleja y variable.
Contiene varias fuentes de cada elemento.
Pueden requerir ser suplementados con compuestos que
proporcionen cantidades adicionales de algunos
elementos, tales como, N, Mg y P
Muy utilizados en microbiologa bsica (taxonoma,
fisiologa y gentica), microb. analtica, produccin de
algas, alimentos, suelos y en fermentaciones
industriales
 Componentes de medios complejos industriales

a nivel industrial Baratos Mejores rendimientos

Medios definidos

Se formulan en base a compuestos puros, tales

como la glucosa, sulfato de amonio, metionina,
fosfatos, etc
composicin qumica es conocida y reproducible.
fuentes de cada elemento y los nutriente
esenciales que pueden ser requeridos.
investigacin y desarrollo de Proceso de
fermentacin.
permiten un mejor control de las condiciones
ambientales de crecimiento y produccin.
resultan ms productivas cuando se utilizan
medios definidos.
Ejemplo de medios definidos
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1

Continua.
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1
Corrida del Programa