VALIDACIN DEL MTODO DE DETERMINACIN DE Fe, Mn y Cu EN AGUAS

DEL RO CALI POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA DE

LLAMA

INTRODUCCION
En el siguiente trabajo se validara un mtodo que es un paso fundamental para
asegurar la veracidad de los resultados, obteniendo incertidumbres asociadas, en
donde se determinar los metales hierro (Fe), cobre (Cu) y manganeso (Mn) en
aguas del ro Cali por medio de la tcnica de absorcin atmica, evaluando los
parmetros de linealidad, precisin (repetitividad y reproducibilidad) y de
exactitud.

MARCO TERICO:
El ro Cali es el principal afluente que atraviesa por la ciudad que lleva su nombre
y abastece de agua potable a 500.000 habitantes de la ciudad (casi 1/5 de la
poblacin censada). Nace en Altos del Buey, ubicado en el parque nacional Los
Farallones de Cali, se extiende por cerca de 50 km desde su inicio hasta su
desembocadura en el ro Cauca y durante ese recorrido es contaminado con
aguas negras de la Ciudad que atraviesa y con residuos generados por la minera
ilegal que se lleva a cabo en los Farallones y en inmediaciones del ro Aguacatal
(cuyo cauce se une al del ro Cali). Las minas legales e ilegales contaminan los
ros mencionados, ya que los lixiviados, producto de su actividad, son filtrados
hasta el agua las aguas superficiales. Uno de estos contaminantes es la caparrosa
(sulfato de hierro), residuos generados por los lavado de los minerales de la mina
y vertidos al afluente. [1]
El manganeso es un metal que se encuentra en cantidades traza y al igual que el
hierro, no es perjudicial para la salud las cantidades de estos metales que se
encuentran en el agua. Ambos metales le dan un color, y olor indeseable al agua,
el hierro lo torna rojizo y el Manganeso caf. Las fuentes de estos en los ros son
en mayor medida las aguas negras vertidas en los ros, que contienen a ambos,
adems a medida que el agua se filtra por el suelo y las piedras pueden disolver
estos minerales y acarrearlos hacia el agua subterrnea. Los lixiviados de hierro y
manganeso producidos por la corrosin de tubos de hierro y los residuos de
plvora, cosmticos, pinturas, entre otros, respectivamente, son aportes de estos
metales a los ros.
El cobre es un elemento ampliamente extendidos en el ambiente y puede llegar a
los ros desde aguas residuales, deposicin el las fuentes hdricas tras ser
arrastrado por el aire, producto de la combustin de combustibles fsiles, la
produccin de madera y la produccin de abonos de fosfato. Los ros tienen una
concentracin de Cu que vara entre 0,5 y 1000 ppb aproximadamente

OBJETIVOS
GENERAL
Conocer y aplicar los criterios de evaluacin (linealidad, exactitud,
precisin) necesarios para realizar la validacin de un mtodo analtico.
ESPECFICO
Desarrollar un plan para la validacin del mtodo de determinacin de Fe,
Mn y Cu en aguas del ro Cali.
Establecer el rango lineal de concentraciones para curvas de Fe, Mn y Cu.
Evaluar la exactitud del mtodo para el anlisis de metales pesados en ro
(Fe, Mn y Cu).
Determinar la precisin del mtodo para el anlisis de metales pesados en
ro (Fe, Mn y Cu).
Realizar la determinacin de hierro, cobre y manganeso en aguas del ro
Cali por espectrofotometra de absorcin atmica.
EQUIPOS
Espectrofotmetro de absorcin atmica Perkin Elmer AAnalyst 100.
Lmpara de ctodo hueco de Fe.
Lmpara de ctodo hueco de Mn.
Lmpara de ctodo hueco de Cu.

REACTIVOS
Agua destilada
Agua desionizada
Estndar de Fe 1000 ppm (100 mL)
Estndar de Cu 1000 ppm (100 mL)
Estndar de Mn 1000 ppm (100 mL)
HNO3 65% grado analtico (100 mL)

MATERIALES
1 Botella de plstico 2L 1 Microesptula
40 Tarro plstico pequeo 24 matraces de 100 mL
2 Frasco lavador
 2 Goteros 1 Micropipeta 10-100
2 vasos 100 mL 1 Micropipeta 100-1000
1 vaso de 500 mL 1 Probeta de 10
3 vasos de 250 mL 1 Probeta 100 mL
1 Pesa sales 1 Plancha con agitador
Propipeta 3 Magnetos
Pipeta volumtrica 5 y 10 1 Sacamagneto
mL
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Muestreo: Muchos anlisis dependen de muestras qumicas que proporcionan
informacin sobre un objeto global. Debido a esto, es muy importante revisar las
etapas para un buen muestreo que permita que la muestra tomada sea
representativa de la poblacin. Para tomar la muestra de un ro muchas veces se
debe tener en cuenta su hidrografa. La muestra se puede tomar en un recipiente
plstico, recolectando a diferentes profundidades y cerca al centro del ro, evitando
zonas con aguas estancadas que no permitan conseguir una muestra
representativa. [2]

El muestreo se realizar en un recipiente plstico de 2 L (debidamente rotulado).

Nota: Es recomendable que todo el material usado se remoje con solucin

HNO3:Agua (1:1) y finalmente enjuagado con agua desionizada.
Tratamiento de la muestra: Transferir 100.00 mL de muestra, previamente
agitada y preservada con cido a un vaso de 250 mL (realizar en campana).
Adicionar 5 mL de HNO3 concentrado, piedras de ebullicin. Calentar suavemente
hasta ebullicin y evaporar hasta unos 1015 mL. Continuar calentando y
adicionar HNO3 conc. Hasta que la solucin se torne transparente y ligeramente
coloreada (aqu es cuando termina la digestin). Trasvasar a un matraz de 100 mL
lavando las paredes con agua desionizada, porciones de 5 mL en cada lavado (De
ser necesario realizar un filtrado previamente). Dejar enfriar y aforar. Agitar
vigorosamente y medir el metal deseado. [3]
La medida de la seal se realiza en un espectrofotmetro Perkin Elmer AAnalyst
100 con un quemador de con boquilla 10 cm, a un flujo de 1,8 L/s y con una
mezcla de aire-acetileno. Las condiciones para el uso de la lmpara se identifican
en la misma.
LINEALIDAD
Con el fin de determinar el rango lineal, se realizara un grfico de absorbancias en funcin
de concentraciones (curva), luego se observa y se establece por medio del factor de
respuesta (ecuacin 1), en funcin de la concentracin se evala el rango lineal por medio
del coeficiente de correlacin de manera estadstica con una prueba t de dos colas
(ecuacin 2)
Yib
=
Xi ecuacin1.
 |r| n2
t r=
1r 2 ecuacin 2.

A partir de soluciones aciduladas con (HNO3) de 1000 ppm de Fe y Cu preparar

soluciones estndar de 0.0, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 y 6.0 para los estndares de Fe y
Cu y 0.0, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 y 3.0 para los estndares de Mn en matraces de 100 mL,
aforar y realizar las respectivas lecturas en el equipo. Se grafica y establece el rango
lineal por medio de la observacin de la misma y se evala el coeficiente de correlacin
con la ecuacin 2.
Preparacin de estndares.
mL1 L
3
1000 mg Fe
10 mL
1 mmol Fe
1L
1 mmol Sal de Mohr
55.845 mg Fe
392.13 mg Sal de Mohr
1 mmol Fe
100 =702mg Sal de Mohr
1 mmol Salde Mohr

mL1 L
1000 mg Cu
103 mL
1 mmol Cu
1L
1mmol CuS O4 5 H 2 O
63.546 mg Cu
249.68 mg CuSO 4 5 H 2 O
1 mmolCu
100 =393 mgCuS O4
1 mmol CuSO 4 5 H 2 O

mL1 L
3
1000 mg Fe
10 mL
1 mmol Mn
1L
1mmol MnS O4 H 2 O
54.938 mg Mn
138.366 mg MnS O4 H 2 O
1 mmol Mn
100 =252 mg MnS O4
1mmol MnS O 4 H 2 O

PRECISIN
La precisin se puede evaluar en trminos de repetitividad y reproducibilidad
calculndose como desviacin estndar la imprecisin.
La repetitividad se evaluar realizando de 3 a 6 mediciones en las mismas
condiciones (tiempo, instrumento y analista) en donde el promedio de la seal se
expresara como porcentaje del coeficiente de variacin, en donde S es la
desviacin estndar y X el promedio de las seales.
La reproducibilidad se realizar utilizando el mismo mtodo, variando las
condiciones de (tiempo y analista) expresndose de igual como, por medio del
coeficiente de variacin.
s
%CV =
X

EXACTITUD
Para evaluar la presencia de efecto de matriz, se adicionara en 5 matraces 10 mL
de la muestra, a partir de las soluciones madres de los metales se adicionara 0.0,
100, 200, 300, 400, 500 L para Fe y Cu, y 0.0, 20, 50, 100 y 200 L para Mn
Se medir la exactitud por medio del porcentaje de recuperacin, en donde se
dopar la muestra en tres niveles para abarcar todo el rango (bajo, medio y alto)
durante los 3 das de anlisis, as la diferencia entre la media obtenida y el
resultado esperado representara el porcentaje de recuperacin (%R)
De acuerdo a la concentracin de los metales en la muestra de rio, se dopa con
los metales respectivos en cantidades de 100% 50% y 25% en metales, aforar los
matraces y realizar la respectiva lectura
grecuperado g muestra
%R= 100
g adicionado

LIMITES DE DETECCION
En un mtodo analtico una concentracin muy baja del analito en una muestra
que no genere seal, no se puede interpretar como ausencia del analito, puesto
que cada mtodo tiene un valor estimado de un lmite de deteccin (LDD) y de
cuantificacin (LDC) cuando no hay errores sistemticos significativos (efecto de
matriz).
En donde el lmite del instrumento se calcula con la siguiente expresin
Y D =Y B + K S B ecuacin 3

En donde YD es la seal analtica, Y B la seal del blanco, SB la incertidumbre

del blanco y K es por lo general 3 y 10 para LDD y LDC respectivamente, ya que
la seal del blanco es aproximado a la incertidumbre de la regresin (S R) se
realiza el siguiente tratamiento matemtico:
SB SR

Y B b
 Y D =Y B + K S B Y D =m C D +b

Se igualan ambas expresiones y se cancelan b y Y B

mC D + b=Y B + K S B

K SR
CD= ecuacin 4
m

PROCEDIMIENTO
Se debe lavar los materiales Validacin de metodos analtico: anlisis de
de vidrio previamente con metales en rio
HNO3 10%

1. Extraer 2 L de agua del rio Cali y acidificar con HNO3 hasta un pH<2

2. Transferir a un 100.00 mL de la muestra a un vaso de 250 mL en presencia de HNO 3

anteriormente, adicionar 5 mL de HNO3 y piedras de ebullicin en una campana de
extraccin

3. Hervir lentamente hasta un volumen de 10-15 mL, seguir calentando y adicionar HNO 3
concentrado hasta finalizacin de la digestin

Presenta turbidez?
SI
Filtrar la solucin

NO
Realizar por
4. Dejar enfriar y trasferir a un matraz de 100.0 mL, realizar lavados usando 5 mL
triplicado
de agua desionizada en cada porcin y aforar.

5. Preparar 100mL las soluciones madres aciduladas de 1000 ppm de Fe Mg Y Cu

6. preparar soluciones estndares de 0-2 ppm para Mn y 0-5 ppm para Fe y Cu

 7. Realizar las lecturas en el espectrofotmetro de absorcin atmica

8. determinar cualitativamente el rango lineal de la curva tambin complementado

con el clculo de factor de respuesta

9. realizar la curva de calibracin simple de cada metal a determinar con 5 puntos

en la curva

10. adicionar a 5 matraces de 100 mL, 10mL de muestra, luego adicionar

volmenes de 0.0-200 L para el Mn y de 0.00-500 L para Fe y Cu y aforar

11. Determinar estadsticamente la presencia de efectos de matriz en la muestra

Existe efectos de matriz?

NO SI

11.1. Realizar lectura del analito para

cuantificarlo
11.1. realizar los pasos
11.2 11.3 y 11,4 por
medio de la preparacin
de curvas de
calibraciones
11.2. Llevar a cabo proceso de repetitividad,
realizar de 3 a 6 mediciones

11.3. Llevar a cabo proceso de reproducibilidad

durante los 3 das

11.4. Llevar a cabo proceso de Exactitud por

\ triplicado durante los 3 das
 Tratar los desechos generados

Fin

CRONOGRAMA
Mayo 11: Se realizar la evaluacin de la linealidad, realizando el procedimiento
descrito, adems se verificar una parte de la exactitud por medio de la realizacin
de una curva de calibracin por adicin de estndar y se comparar con los
resultados obtenidos a partir de una curva de calibracin normal preparada el
mismo da. (Las curvas para la parte de exactitud las realizar un mismo analista).
Mayo 18: Una vez se conozca el rango lineal dinmico y la curva con la cual
trabajar, se preparar una nueva curva y muestra para comparar los resultados de
da diferentes y as evaluar la precisin. (Realizado por el mismo analista de la
sesin pasada).
Mayo 25: Se realizar nuevamente la curva y se compararn los datos con los
anteriores, para as evaluar la precisin. Se evaluarn los parmetros restantes
como la exactitud utilizando los porcentajes de recuperacin y se concluir la parte
experimental del proyecto

BIBLIOGRAFA
[1] Redaccin de El Pas. Aguas negras y naranjas contaminan el ro Aguacatal,
en el oeste de Cali. 25 de septiembre de 2012. El PAS. pp 1

[2] Ramos R, Seplveda R, Villalobos F. El agua en el medio ambiente: muestreo

y anlisis. 1 edicin. Plaza Valds Editores. Mxico. 2003. pp 161.

[3] APHA AWWA WEF. Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater. 21st edition. 2005. Metals part 3000, 3010A pag. 3-1

[4] Miller J, Miller J. C. Estadstica y quimiometra para qumica analtica. 4

edicin. Prentice Hill. Espaa.2002.pp 78, 126-130.
[5] Validacin de metodos y determinacin de la incertidumbre de la medicin:
aspectos generales sobre la validacin de metodos
Disponible: http://www.ispch.cl/sites/default/files/documento_tecnico/2010/12/Guia
%20T%C3%A9cnica%201%20validaci%C3%B3n%20de%20M%C3%A9todos
%20y%20determinaci%C3%B3n%20de%20la%20incertidumbre%20de%20la
%20medici%C3%B3n_1.pdf