GUA DE ESPECTRFOTOMETRA

Elaborada por:
Prof. Javier Santaella
1) Convierta los siguientes valores de de absorbancia en porciento de tramitancia (a) 0,020; (b)
0,11; (c) 0,60; (d) 1,00; (e) 1,50; (f) 1,80.

2) El compuesto orgnico 3-ciano-5-metilpiridina (C7H6N2, PM 118,14) presenta una banda de

absorcin a los 279 nm en solucin de etanol. Una solucin que contiene 0,274 mg de este
compuesto en 10 ml de etanol dio una absorbancia de 0,700 con una celda de 1,00cm. Calcule (a)
absortividad y (b) absortividad molar del compuesto en los 272 nm.

3) El compuesto orgnico soluble en agua e incoloro 1,10-fenantrolina (1,10-fen) forma un

complejo quelato con el Fe2+ de color rojo intenso, [Fe(fen)3]2+, que algunas veces se utiliza para la
determinacin espectrofotomtrica del hierro. La longitud de onda para la mxima absorcin, mx,
es 510 nm. Para desarrollar el color, la solucin se trata con un agente reductor como la
hidroxilamina, que convierte todo el a Fe2+ y despus se le adiciona un exceso de fen.
Siguiendo este procedimiento se trat una alcuota de 5.00 ml de una solucin estndar con
un total de 20,00 g de hierro y se diluy a un volumen final de 10,00 ml.Se encontr que la
absorbancia de la solucin a 510 nm en una celda de 1 cm fue de 0,397. Calcule la absortividad
molar de [Fe(fen)3]2+.

4) Una alcuota de 5,00 ml de una solucin que contena una cantidad de hierro desconocida se
trat con el mismo procedimiento del problema 3. La absorbancia en los 510 nm fue de 0,142 con
una celda de 1,00 cm. Calcule el contenido de hierro presente en la solucin desconocida en mg por
ml.

5) Una alcuota de 25,0 ml de una disolucin acuosa de quinina se diluyo hasta 50,0 ml y se
encontr una absorbancia de 0,832 a 348 nm, cuando se midi en una celda de 2,00 cm. Una
segunda alcuota de 25 ml se mezclo con 10 ml de una disolucin que contena 23,4 ppm de
quinina; despus de diluir hasta 50,0 ml, esta disolucin presento una absorbancia de 1,220 (cubeta
de 2,00 cm). Calcular la concentracin, en partes por milln de quinina en la muestra.
6) Un compuesto cuyo peso molecular es de 100 tiene una absortividad molar de 1,00x105
Cuntos gramo de este compuesto se deben disolver en exactamente 1 litro de solucin para que se
pueda diluir 200 veces la solucin tenga una absorbancia de 0,500 en una celda de 1 cm?

7) Muchas amina forman sales cristalinas con el cido pcrico. Todas las soluciones en etanol
de estas sales tienen casi el mismo espectro ultravioleta, con un mx = 380 nm y = 1,35*104,
debido al componente picrato. El peso molecular del cido pcrico (2,4,6-trinitrofenol, C6H3N3O7)
es de 229,1.
Una muestra de una amina desconocida se convirti en picrato y la sal se recristaliz y se
sec. Se disolvieron 16,20 mg de la sal en 100 ml etanol y 10 ml de esta solucin se diluy a 100.
La absorbancia de esta solucin fue de 0,624 a 380 nm en una celda de 1,00 cm. (a) Calcule el peso
molecular de la amina. (b) El qumico orgnico que tenia a la amina sospechaba de la 4-etilamina,
C2H11N. La determinacin del peso molecular confirma esto?

8) Una muestra de 0,525 g de una aleacin de acero se disolvi; el manganeso se oxido a

permanganato y la solucin se diluy a 100 ml en un matraz volumtrico. La absorbancia a 525 nm
en una celda de 1cm fue de 0,496. La absortividad molar del MnO4- es 2,24x103. Calcule el
porcentaje de Mn en el acero.

9) Una muestra de de 5,12 g de un pesticida se descompone por mineralizacin y a continuacin se

diluy a 200,0 ml en un matraz aforado. El anlisis se completo tratando las alcuotas de esta
disolucin como se indica.
Volmenes de rectivo utilizado
Volumen de 3,28 ppm Cu2+ Ligando H2O Absorbancia, A,
muestra tomada, 545 nm(cubetas
ml de 1cm)
50,0 0,00 20,0 30,0 0,512
50,0 4,00 20,0 26,0 0,844
Calcular el porcentaje de cobre en la muestra.

10) La siguiente tabla presenta las absortividades molares del Cr2O72- y el MnO4- a dos
longitudes de onda:
 Valores de
440 nm 545 nm
Cr2O72- 369 11
-
MnO4 95 2350
Una muestra de acero de 1,00 g se disolvi en los cidos adecuados (H2SO4, H3PO4 y
HNO3) y se trato con el persulfato y peryodato para oxidar el Mn a MnO4- y el Cr a Cr2O72-. Las
solucin final despus del tratamiento preliminar se diluyo a 100 ml en un matraz volumtrico y los
valores de absorbancia se determinaron en una celda de de 1,00 cm en 440 nm (A=0,108) y en 545
nm (A=1,296) Calcule los porcentajes de Cr y Mn presente en el acero.

11) El compuesto nicotinamida-adenin dinucleotido, abreviado NAD, es una coenzima

biolgica importante que participa en muchas reacciones redox catalizadas por enzimas en el
metabolismo celular. El par redox bsico se puede escribir como:
CONH2 H H
CONH2
+ + + 2 e- 0
H
N
+ E = -0,32 v
N pH=7

R
R
NAD+
NADH

R es muy grande, por lo que no a todos les gusta escribir la estructura completa; en la actividad
redox de la molcula slo participa el anillo de piridina tal y como se represent. E0 es el potencial
formal. Para hablar del compuesto en general, la utilizamos NAD, especialmente para la forma
oxidada NAD+ y para la forma reducida NADH. El NAD es el compuesto central de las reacciones
redox de las clulas vivas tambin se puede comprar para utilizarlo en el laboratorio, as como
muchas de las enzimas que participan en sus diversas reacciones.
A continuacin se presenta un esquema del espectro ultravioleta del NAD+ y del NADH
adems de algunos valores reales de absortividad molar
Por lo regular, las reacciones redox donde participa el NAD son muy lenta, a menos que estn
catalizada, y la enzima que las cataliza tiene una gran selectividad al permitir que solo uno de los
componentes de una mezcla compleja interaccione con el sistema NAD a una velocidad apreciable.
Por ejemplo, con la enzima alcohol deshidrogenasa (alcohol:NAD+-oxidorreductasa) cataliza la
siguiente reaccin.
+
CH3CH2OH + NAD+ NADAH + CH3CHO + H
Despus de un accidente automovilstico se llev al laboratorio un individuo para realizar
una prueba de alcohol en la sangre. El laboratorio tomo una muestra de sangre; por centrifugacin
separ el plasma de las clulas y pipeteo 0,200 ml de plasma en un matraz volumtrico. Se adicion
algn amortiguador de pH=7 seguido por un exceso de NAD+ y un poco de enzima alcohol
deshidrogenasa. Despus de unos cuantos minutos, la solucin se diluyo exactamente a 25 ml y se
medio la absorbancia a340 nm en una celda de un centmetro. El valor obtenido fue 0,986. Calcule
la concentracin de alcohol (PM=46,1) en miligramos por 100 ml de plasma sanguneo.

12) Una enzima llamada uricasa o urato: O2 oxidoreductasa cataliza la oxidacin del urato (sal
de cido urico) a alantona que es causada por el aire:

URATO + O2 ALANTONA + CO2

El equilibrio se desplaza completamente hacia la derecha y la desaparicin de urato es cuantitativa,
pero en ausencia de la enzima la conversin es despreciable. A pH=8,5 el cido urico (pka=3,9) esta
en la forma de urato con una banda ultravioleta en los 290 nm, =10 965.
Una cierta solucin desconocida contiene urato, as como otras sustancias que absorben a
290 nm; sin embargo, el urato es el nico componente sobre el cual puede actual la enzima. A 5,0
ml de solucin desconocida se le agrego suficiente amortiguador de pH=8,5 y agua para obtener un
volumen final de 10 ml. La absorbancia de esta solucin fue 0,924 en una celda de 1,00 cm a 290
nm. A otra alcuota de 5,00 ml de la solucin desconocida se le agregaron el mismo amortiguad, un
poco de solucin enzimtica y agua para obtener un volumen de 10 ml. se burbujeo aire a la
solucin durante un tiempo adecuado para completar la reaccin y la absorbancia de esta solucin
en la misma celda de 0,86. Calcule la concentracin del ion urato (PM=157,1) en la solucin
desconocida expresada en miligramo por 100 ml.

13) Tras las diluciones oportunas de una disolucin patrn, se obtuvieron disoluciones de hierro
cuyas concentraciones se muestran a continuacin. Posteriormente se obtuvo el complejo de
Fe(II)/1,10-fenantrolina en alcuotas de 25,0 ml de estas disoluciones a continuacin cada una de
ellas de diluy a 50 ml. Se leyeron las siguientes absorbancia, a 510 nm:
Concentracin de Fe(II) en las Absorbancia, A (cubeta de
disoluciones originales, ppm, 1,00 cm)
2,00 0,164
5,00 0,425
8,00 0,628
12,00 0,951
16,00 1,260
20,00 1,582
a) Construir una curva A=m(CFe)
b) Por el mtodo de los mnimos cuadrado obtenga una ecuacin que relacione A con CFe
c) Un anlisis de hierro en muestras de agua del rio manzanares, realizado con una cubeta o celda
de 1,00 cm, tomando alcuotas (volumen de muestras) de 25,0 ml arroj valores de Absorbancia de
0,107; 0,721 y 1,538. Cul es la concentracin de Fe en las muestras de agua?Cual es la cantidad
en g y g de Fe en los 25 ml de agua?