Microbiologa general

2008 - 2009
Antonio G. Pisabarro
Catedrtico de Microbiologa
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Estructura de los microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 rbol filogentico universal Eucariontes

Patgenas

Procariontes
Microorganismos Prescott
 Clulas procariticas y eucariticas

3.000x106 aos

Woese, Carl R. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 8392-8396

Copyright 2000 by the National Academy of Sciences

rbol filogentico universal

Biologa de los Microorganismos de Brock

Estructura de las clulas eucariticas
 Estructura interna de una clula eucariota

1- Ncleo con varios cromosomas

2.- Organismos diploides
3.- Citoplasma con orgnulos celulares (mitocondrias, retculo
endoplsmico, Golgi, vacuolas, etc).
4.- Ribosomas eucariticos 80S
Los microorganismos eucariticos ms relevantes en clnica incluyen
ciertos animales de pequeo tamao productores de enfermedades
parasitarias, protozoos y hongos unicelulares o pluricelulares.
 Levaduras

Saccharomyces cerevisiae

Cryptococcus neoformans
 Estructura de la hifa de un hongo
Spitzenkorpen conjunto
de vesculas de sntesis
Vacuola
de pared celular
Retculo
endoplsmico

Pared celular formada por quitina y

polisacridos. Diferente de las de
plantas y bacterias Ncleo Mitocondrias
eucaritico
Estructura de las clulas procariticas

Formas y tinciones
 Morfologa de bacterias (G+)

Cuerpos de
Mesosoma Ncleo Ribosoma Inclusin Cpsula

Protenas Pared Celular Espacio Membrana

Superficiales Periplsmico Plasmtica

No existe la separacin entre ncleo y citoplasma

Flagelo Haploides
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Tamao y morfologa de las bacterias.
Formas L: estado de una bacteria que
La forma de una bacteria viene carece de peptidoglicano (pared celular)
determinada por la rigidez de su
pared celular. Las formas L son
Las bacterias poseen una de las conocidas desde 1930
tres formas fundamentales:
Las formas L son similares
esfrica, cilndrica o hlice. a los micoplasmas

Las formas L son resistentes

a los antibiticos -lactmicos

No se sabe si en la naturaleza las formas L son

un accidente o una adaptacin que permite a
algunas bacterias escapar del sistema inmune y
emigrar a otras localizaciones en el cuerpo
 Tamao y morfologa de las bacterias.

Formas L

A B

Clulas normales de Bacillus subtilis (A) y formas L de esta bacteria (B)

Ryuji Shingaki et al. 2003. Induction of L-form-like cell shape change of Bacillus
subtilis under microculture conditions. Microbiology (2003), 149, 25012511
 Tamao y morfologa de las bacterias.
Formas L

Micrografas electrnicas
de formas L de B. subtilis Ryuji Shingaki et al. 2003. Induction of L-form-like cell shape change of Bacillus
subtilis under microculture conditions. Microbiology (2003), 149, 25012511
Tamao y morfologa de las bacterias.
Las clulas esfricas se
denominan cocos y suelen ser
redondeadas aunque pueden
ser ovoides o elpticas.

Estafilococo

Estreptococo

Diplococo
Tamao y morfologa de las bacterias.
A las de forma cilndrica se
las denomina bacilos. Los
extremos de estas clulas
suelen ser redondeados,
rectos, en forma de huso o
cuerno.

Bacillus anthracis

Escherichia coli
Tamao y morfologa de las bacterias.
A las de forma espiral o
helicoidal se las denomina
espirilos y se caracterizan por
su forma de sacacorchos.

Treponema pallidum
Tamao y morfologa de las bacterias.
Existen modificaciones a
estas tres formas
fundamentales y aunque la
mayor parte de las bacterias
mantienen constante su
forma, algunas especies
pueden variar la forma por lo
que se les llama pleomrficas.
Arthrobacter es un ejemplo
de pleomorfismo debido a que
su forma cambia en funcin de
la edad del cultivo. Arthrobacter spp.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Tamao: Invisibles al ojo
humano las bacterias se miden
en m que equivale a 10-3 mm.
El tamao de las bacterias 1 mm
vara dependiendo de las
especies entre menos de 1 m
y 250 m; siendo lo ms
habitual entre 1 y 10 m.
En las clulas bacterianas la
relacin superficie y volumen
de la clula es muy alta lo que 10 m
permite la entrada de muchos
nutrientes para alimentar a un
pequeo volumen y una alta Lmite de resolucin ocular
actividad metablica
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
Antonie van Leeuvenhoek
Delft, Holanda 1632-1723
Fue el primero en ver
espermatozoides, clulas de
la sangre y bacterias
Antonie van Leeuvenhoek

Bacterias de la placa dental

 Microscopio ptico
Debido a su pequeo tamao, la observacin de los
microorganismos ha de realizarse mediante el uso de
microscopios.

En el caso de la mayora de los microorganismos

procariticos, la observacin microscpica se limita a
determinar la forma, el modo de agrupamiento, el
movimiento y la presencia de algunos elementos
extracelulares tales como las cpsulas. En el caso de
microorganismos eucariticos, la informacin que se
obtiene de la observacin microscpica es mucho
mayor porque tambin lo es su diversidad morfolgica
y anatmica.
 Resolucin de microscopios
La resolucin indica el tamao mnimo distinguible
La resolucin del mejor microscopio ptico est limitado unas 0,2
m con un de 540 nm (luz verde)
La resolucin de un microscopio electrnico de transmisin
(MET) es de cerca de 2 nm
La resolucin del microscopio electrnico de barrido (MEB) es de
1 - 10 nm
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Tinciones
TINCIN SIMPLE
Permite observar la forma, tamao y agrupamiento de
las bacterias usando un nico colorante (normalmente
bsico).

Escherichia coli Bacillus coagulans

 Tincin de Gram
Hans Christian Joachim GRAM (1853 - 1938)
Bacterilogo dans graduado en medicina en
Copenhague en 1878, viaj por varios pases de
Europa entre 1878 y 1885 estudiando
farmacologa y bacteriologa. Mientras se
encontraba en Berln en 1884, descubri el
mtodo para teir las bacterias que lleva su
nombre y que se usa ampliamente para clasificar
las bacterias.
Gram sigui el mtodo de Paul Ehrlich, utilizando
una solucin de anilina y violeta de genciana.
Despus un tratamiento con lugol (iodo en yoduro
potsico acuoso) y etanol observ que algunas
bacterias retenan el colorante (por ejemplo los
neumococos) mientras que otras no lo hacian.
Esto permiti dividir las bacterias en Gram-
positivas y en Gram negativas, clasificacin que
es de gran utilidad hoy da para elegir un
tratamiento antibitico.
En 1891 Gram fu nombrado profesor de
farmacologa de la Universidad de Copenhague,
donde mostr un gran inters en los aspectos
clnicos de la farmacologa. Fu un mdico
practicante durante toda su vida. Fu Presidente
de la Comisin de la Pharmacopoeia entre 1901 y
1921 y directro del departamento de medicina
interna del Hospital Frederick de Copenhague,
hasta su retiro 1923.
Tomado de: http://www.iqb.es/historiamedicina/lista.htm
 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram
Es un sistema de dos tinciones simples sucesivas,
separadas por una fase de decoloracin selectiva.
Permite diferenciar las bacterias que retienen el
primer color (Gram-positivas) de las que no lo retienen
(Gram-negativas). Esta diferencia en comportamiento
refleja diferencias estructurales y fisiolgicas entre
ambos grupos de bacterias.

Staphylococcus aureus Neisseria meningitidis

 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram

Klebsiella pneumoniae
Bacillus cereus
 Tincin de Gram: Staphylococcus aureus

Es una bacteria gram-positiva (tincin azul) con forma de coco (coccus), que
forma racimos (staphylo-) caractersticos
 Tincin de Gram: Enterococos

Son bacterias del grupo de los estreptococos (forman cadenas) Gram positivos
(coloracin azul) que se ven teidos sobre un fondo que contiene clulas eucariticas
(que se ven aqu en color rojo)
 Tincin de Gram: Acinetobacter baumanii

Es una bacteria negativa (tincin roja) con forma de bacilo pequeo aislado
 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram

Tincin de Gram de una muestra de lquido

cerebroespinal infectado con B. anthracis
 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de esporas

Bacillus cereus Clostridium botulinum

 Tinciones
TINCIN DIFERENCIALTincin de Ziehl-Neelsen
(cido-alcohol resistencia)
Es un tipo especial de tincin que permite la
identificacin de microorganismos de los grupos
Mycobacterium y Nocardia de gran relevancia clnica

Mycobacterium Mycobacterium
leprae tuberculosis
 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de cpsulas
Se trata de una tincin negativa usando tinta china
que permite determinar la presencia de cpsulas
polisacardicas.

Cryptococcus neoformans
 Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de flagelos
Permite teir flagelos usando un mordiente para
incrementar su grosor y hacerlos visibles al
microscopio ptico.

Vibrio cholerae Proteus sp.

 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Membrana bacteriana
ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA INTERNA
La membrana interna est formada por una bicapa
lipdica. En las bacterias los lpidos que forman esta
membrana son generalmente fosfolpidos y no se
encuentran esteroles (salvo en el caso de los
micoplasmas). Esto diferencia claramente las
membranas bacterianas de las de clulas eucariticas
que s tienen esteroles en sus membranas

FUNCIONES DE LA MEMBRANA INTERNA

1.- Barrera de permeabilidad selectiva
2.- Soporte ordenado de sistemas enzimticos
 Membrana plasmtica
Grupos
Fosfolpidos Hidroflicos

Grupo
Hidro -
fbicos

Fosfolpido

Protenas de Membrana

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Acciones de las Protenas de
Transporte
Exterio
r

Interio
r
Uniporte Simporte Antiporte

Molcula Transportada
Molcula
Cotransportada

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Comparacin del Transporte Activo
con la Difusin Simple

Transporte
activo
Concentracin
Interna de
solutos

Difusin Simple

Concentracin Externa de solutos

Biologa de los Microorganismos de Brock

 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

Macromolcula que rodea a bacterias proporcionando

resistencia mecnica y confiriendo la forma.

Est formada por un polmero complejo (murena) que

forma una macromolcula que recubre completamente
la clula.

Estructuralmente est formado por cadenas

glucosdicas en que se repite una unidad elemental de
N-acetil-glucosamina unida por un enlace glicosdico
14 a cido N-acetil-murmico. Las unidades
elementales estn entre s mediante enlaces
glicosdicos 14.
 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

Las cadenas
glucosdicas estn
orientadas de forma
paralela y estn unidas
entre s mediante
puentes peptdicos
formados por cadenas
de aminocidos que
estn unidos al resto
de cido N-acetil-
murmico.
 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

En las cadenas
peptdicas se
alternan aminocidos
con configuracin L y
con configuracin D.
Subunidades del Peptidoglicano
 Sntesis del peptidoglicano

Exterior -lactmicos
Punto de crecimiento
Peptidoglicano
Peptidoglicano de la pared celular

Pentapptido
Membrana
citoplasmtica

Bactoprenol
Interior

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Estructura de los microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

La capa de peptidoglicano de las bacterias Gram-

positivas es ms gruesa que la de las Gram-negativas
Gram Positiva Gram
PG PG Negativa

MI
MI ME

ME
PG MI
MI PG
 Capa externa de Lipopolisacridos y
Protenas (LPS)

O-Polisacrido

LPS
Ncleo Protena Lpido Porina
Polisacrido A
Capa
Externa de
Gram
Negativa

8 nm

Fosfolpido
Lipoproten
a
Espacio Peptidoglicano
Periplsmico
Membrana Citoplasmtica

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Ribosomas bacterianos.
Los ribosomas, procariticos o eucariticos, estn formados por
protenas y ARN; sin embargo, ambos tipos de ribosmas son
diferentes de suerte que puede disponerse de inhibidores
(antibiticos) especficos de ribosomas procariticos que no
afectan a los eucariticos y viceversa.
 Elementos facultativos
Las cpsulas estn formadas por polisacridos o polipptidos
Participan en la adhesin de las bacterias a superficies, retardan
la desecacin de las bacterias en ambientes secos y proporcionan
proteccin frente a la fagocitosis.
No solo las bacterias presentan cpsulas sino que tambin han
sido descritas en algunos hongos unicelulares (Cryptococcus
neoformans).
Una caracterstica macroscpica fcilmente observable de los
microorganismos con cpsula es que forman colonias de aspecto
mucoso y liso.
Las diferentes variantes de cpsula de distintas cepas de una
misma especie se pueden identificar mediante mtodos
serolgicos. El antgeno capsular se conoce como antgeno K.
 Elementos facultativos
La capa S formada por protenas y glicoprotenas
Participa en la adhesin de las bacterias a superficies,
la proteccin frente a la fagocitosis y acta como
barrera frente a enzimas o substancias que pudieran
daar a las bacterias que la poseen.
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Apndices bacterianos: flagelos y
fmbrias.
FLAGELOS
Bacterias mviles El antgeno flagelar se conoce como antgeno H.
Las bacterias flageladas pueden tener entre uno y 20 flagelos por clula.
Composicin proteica
Tamao es de unos 20 nm de dimetro y de entre 5 y 20 m de longitud.
FIMBRIAS
Pequeas fibras proteicas
Su nmero vara entre 100 y 1000 por bacteria
Tamao entre 2 a 9 nm de dimetro y 1 a 5 m de longitud.
Gran importancia en la adhesin
PELO F
Es un tipo especial de fimbria producido por bacterias capaces de transmitir
su informacin gentica a otras mediante conjugacin bacteriana. Cuando
est presente hay slo uno por clula. Su naturaleza es proteica. Su longitud
llega a alcanzar las 10 m.
PROLONGACIONES DE ADHESIN
Algunos tipos de microorganismos son portadores de prolongaciones con
forma de ventosa que les permiten adherirse a las clulas animales que
infectan. Esto ocurre, por ejemplo, en ciertos micoplasmas.
 Apndices bacterianos: flagelos y
fmbrias.
PELO F
Es un tipo especial de
fimbria producido por
bacterias capaces de
transmitir su
informacin gentica a
otras mediante
conjugacin bacteriana.
Cuando est presente
hay slo uno por clula.
Su naturaleza es
proteica. Su longitud
llega a alcanzar las 10
m.
 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
Esporas

Biologa de los Microorganismos de Brock

Ciclo Celular

Clula Vegetativa

Clula
Espolulante

Espor
a

Germinacin
Espora

Clula Vegetativa

Biologa de los Microorganismos de Brock

Fases de formacin de la Endoespora

Biologa de los Microorganismos de Brock

cido dipicolnico

Grupos
Carboxilo

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.
 Estructura de los virus.

Poliovirus Rhinovirus Virus hepatitis A

Adenovirus

Poxvirus
Estructura de los virus.

Virus influenza
 Estructura de un Bacterifago

Cabeza

Ncleo

Base

Biologa de los Microorganismos de Brock

 Priones

Concepto de prin Depsitos amiloides en un

paciente con Creutzfeldt-
Jakob