CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs (conocido tambin como ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo del
cido ctrico) es un ciclo metablico de importancia fundamental en todas las clulas
que utilizan oxgeno durante el proceso de respiracin celular. En estos organismos
aerbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjuncin de las rutas metablicas
responsables de la degradacin y desasimilacin de los carbohidratos, las grasas y
las protenas en anhdrido carbnico y agua, con la formacin de energa qumica.
El ciclo de Krebs es una ruta metablica anfiblica, ya que participa tanto en procesos

catablicos como anablicos. Este ciclo proporciona muchos precursores para la

produccin de algunos aminocidos, como por ejemplo el cetogluta rato y el
oxalacetato, as como otras molculas fundamentales para la clula.
Al trmino del ciclo mismo, los dos tomos de carbono introducidos por el acetil-CoA
sern oxidados en dos molculas de CO2, regenerando de nuevo oxalacetato capaz
de condensar con acetil-CoA. La produccin relevante desde el punto de vista
energtico, sin embargo, se produce a partir de una molcula de GTP (utilizada
inmediatamente para regenerar una molcula de ATP), de tres molculas de NADH y
una

de

FADH2.

Los cofactores reducidos, NADH y FADH2, se comportan como intermediarios

xido/reductores. Cuando estn reducidos, son capaces de transportar electrones a
energa relativamente alta (por ejemplo sustrada a los sustratos oxidados en la
glucolisis o en el mismo ciclo de Krebs), hasta la cadena respiratoria mitocondrial.
Cerca de tal cadena se re oxidan a NAD+ y a FAD, y ceden los electrones a la cadena
misma,

La

que

reaccin

ser

as

neta

capaz

es

de

la

regenerar

molculas

de

ADP

ATP.

siguiente:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + ADP + Pi => CoA-SH + 3 NADH + H+ + FADH2 + ATP + 2

CO2
La energa que se saca de la ruptura completa de una molcula de glucosa pasa los
tres estadios de la respiracin celular (glucolisis, ciclo de Krebs y cadena de transporte
de electrones), es idealmente de 36 molculas de ATP. En realidad son 38 las
molculas netas de ATP que se producen, pero dos de ellas se consumen para

transportar (mediante transporte activo), desde el citoplasma a la matriz mitocondrial,

las dos molculas de NADH + H+ producidas en la glucolisis.

ETAPAS DEL CICLO DE KREBS

Reaccin 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato)
El sitio activo de la enzima, activa el acetil-CoA para hacerlo afn a un centro
carbonoso del oxalacetato. Como consecuencia de la unin entre las dos molculas, el
grupo

tioster

(CoA)

se

hidroliza,

formando

as

la

molcula

de

citrato.

La reaccin es sumamente exoergnica (G'=-31.4 kJ/mol), motivo por el cual este

paso es irreversible. El citrato producido por la enzima,
adems, es capaz de inhibir competitivamente la actividad
de la enzima
Incluso estando la reaccin muy favorecida (porque es
exoergnica), la citrato sintasa puede ser perfectamente
regulada. Este aspecto tiene una notable importancia biolgica, puesto que permite
una completa regulacin del ciclo de Krebs completo, convirtiendo a la enzima en una
especie

de

marcapasos

del

ciclo.

Reaccin 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato)

La aconitasa cataliza la isomerizacin del citrato a isocitrato, por la formacin de cisaconitato. La enzima cataliza tambin la reaccin inversa, pero en el ciclo de Krebs tal
reaccin es unidireccional a causa de la ley de accin de masa: las concentraciones
(en condiciones estndar) de citrato (91%), del intermediario cis-aconitato (3%) y de
isocitrato (6%), empujan decididamente la reaccin hacia la produccin de isocitrato.
En el sitio activo de la enzima est presente un clster hierro-azufre que, junto a
algunos residuos de aminocidos polares, liga el sustrato. En concreto, la unin al
sustrato se asegura por la presencia de un resto de serina, de arginina, de histidina y
de aspartato, que permiten slo la unin estereospecifica del citrato 1R,2S,
rechazando la forma opuesta.

Reaccin 3: Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato)

La isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzima dependiente de la presencia
de NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Inicialmente, la enzima cataliza la oxidacin del isocitrato a
oxalsuccinato, lo que genera una molcula de NADH a partir de NAD +. Sucesivamente,
la presencia de un in bivalente, que forma un complejo con los oxgenos del grupo
carboxilo en posicin alfa, aumenta la electronegatividad de esa regin molecular. Esto
genera una reorganizacin de los electrones en la molcula, con la consiguiente rotura
de la unin entre el carbono en posicin gamma y el grupo carboxilo adyacente. De
este modo se tiene una descarboxilacin, es decir, la salida de una molcula de CO 2,
que conduce a la formacin de -cetoglutarato, caracterizado por dos carboxilos en las
extremidades y una cetona en posicin alfa con respecto de uno de los dos grupos
carboxilo.
Reaccin

4:

-cetoglutarato

deshidrogenasa

(De

oxoglutarato a Succinil-CoA)
Despus de la conversin del isocitrato en -cetoglutarato se produce una segunda
reaccin de descarboxilacin oxidativa, que lleva a la formacin de succinil CoA. La
descarboxilacin oxidativa del -chetoglutarato es muy parecida a la del piruvato, otro
-cetocido.
Ambas reacciones incluyen la descarboxilacin de un -cetocido y la consiguiente
produccin de una unin tioster a alta energa con la coenzima A. Los complejos que
catalizan
La

tales

-cetoglutarato

deshidrogenasa),
*
*

Subunidad

reacciones

son

deshidrogenasa
est
E1:

Subunidad

(o,

compuesta
las

dos
E2:

parecidos
ms
de

entre

correctamente,
tres

enzimas

ellos.

oxoglutarato
diferentes:

cetoglutarato

deshidrogenasas.

la

transuccinilasa.

(La subunidad E1 y E2 presentan una gran homologa con las de la piruvato

deshidrogenasa.)
* Subunidad E3: la dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo polipptido
presente en el otro complejo enzimtico.

Reaccin 5: Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)

El succinil-CoA es un tioster a alta energa (su G de hidrlisis est en unos -33.5
kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ mol-1). La citrato sintasa se sirve de
un intermediario con tal unin a alta energa para llevar a cabo la fusin entre una
molcula con dos tomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro (oxalacetato). La
enzima succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energa para fosforilar un nuclesido
difosfato

purinico

como

el

GDP.

La energa procedente del tioster viene convertida en energa ligada a una unin
fosfato. El primer paso de la reaccin genera un nuevo intermediario a alta energa,
conocido como succinil fosfato. Sucesivamente, una histidina presente en el sitio
cataltico remueve el fosfato de la molcula glucdica, generando el producto succinato
y una molcula de fosfohistidina, que dona velozmente el fosfato a un nuclesido
difosfato, recargndolo a trifosfato. Se trata del nico paso del ciclo de Krebs en el que
se

produce

una

fosforilacin

nivel

de

sustrato.

El GTP est implicado principalmente en las rutas de transduccin de seales, pero su

papel en un proceso energtico como el ciclo de Krebs es, en cambio, esencialmente
trasladar grupos fosfato hacia el ATP, en una reaccin catalizada por la enzima
nuclesido

difosfoquinasa.

Reaccin 6: Succinato deshidrogenasa (De succinato a

fumarato)
La parte final del ciclo consiste en la reorganizacin de molculas a cuatro tomos de
carbono hasta la regeneracin del oxalacetato. Para que eso sea posible, el grupo
metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un carbonilo. Como ocurre en
otras rutas, por ejemplo en la beta oxidacin de los cidos grasos, tal conversin
ocurre mediante tres pasos: una primera oxidacin, una hidratacin y una segunda
oxidacin. Estos tres pasos, adems de regenerar oxalacetato, permiten la extraccin
ulterior

de

energa

mediante

la

formacin

de

FADH2

NADH.

La primera reaccin de oxidacin es catalizada por el

complejo enzimtico de la succinato deshidrogenasa, la
nica enzima del ciclo que tiene como aceptor de
hidrgeno al FAD en vez de al NAD+. El FAD es enlazado
de modo covalente a la enzima por un residuo de histidina.
La enzima se vale del FAD ya que la energa asociada a la reaccin no es suficiente
para

reducir

NAD+.

el

El complejo enzimtico tambin es el nico del ciclo que pasa dentro de la membrana
mitocondrial. Tal posicin se debe a la implicacin de la enzima en la cadena de
transporte de los electrones. Los electrones pasados sobre el FAD se introducen
directamente en la cadena gracias a la unin estable entre la enzima y el cofactor
mismo.

Reaccin 7: Fumarasa (De fumarato a L-malato)

La fumarasa cataliza la adicin en trans de un protn y un grupo OH - procedentes de
una

molcula

de agua.

La

hidratacin

del

fumarato

produce

L-malato.

Reaccin 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a

oxalacetato)
La ltima reaccin del ciclo de Krebs consiste en la
oxidacin del malato a oxalacetato. La reaccin, catalizada
por la malato deshidrogenasa, utiliza otra molcula de NAD + como aceptor de
hidrgeno,

produciendo

La energa libre de Gibbs asociada con esta ltima reaccin es

decididamente positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad de la
enzima es remolcada por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato
sintasa, y de NADH por parte de la cadena de transporte de electrones.

NADH.

GLUCOLISIS
Glucolisis o glicolisis es la ruta metablica, formada por diez reacciones enzimticas,
mediante la que se degrada una molcula de glucosa hasta dos molculas de piruvato,
adems de producir energa en forma de ATP y de NADH. Es una ruta metablica
universalmente distribuida en todos los organismos y clulas. Su funcin es la
degradacin de glucosa y otros monosacridos para la obtencin de energa.
FASES:
a) Preparatoria: Cuatro reacciones: dos son de fosforilacin y consumen 2 ATP por
molcula de glucosa.
b) la ruptura de la hexosa produce 2 triosas, que acaban en 2 molculas de
gliceraldehido-3-P.
c) De beneficios: Oxidacin del gliceraldehido-3-fosfato (x 2) hasta piruvato (x 2) y
formacin acoplada de ATP en 2 de las reacciones, en total se forman 4 ATP y 2
NADH.
Reacciones:
* Tres irreversibles, que van a soportar la regulacin de la va. Son estas tres
reacciones junto a la catalizada por la fosfoglicerato quinasa (7) las que son
fuertemente exergnicas.
* Siete reversibles, que se producirn en sentido glucoltico cuando la clula requiera
energa (ATP) y disponga de glucosa para degradarla
Reacciones Glicolticas:
Hay 5 tipos de reacciones importantes:
1. Transferencia de fosforilo: se transfiere un grupo fosforilo desde el ATP a un
intermedio glucoltico, o desde un intermedio glucoltico hasta el ADP, por una kinasa.
2. Desplazamiento del fosforilo: un grupo fosforilo es desplazado desde un tomo de
oxgeno a otro dentro de la molcula por una mutasa.
3. isomerizacion: la conversion de una cetosa en una aldosa, o a la inversa, por una
isomerasa.
4. deshidracion: la separacin de una molcula de agua por una dehidratasa.
5. Ruptura aldlica: la ruptura de un enlace C-C en un proceso inverso de la
condensacin aldlica por una aldolasa.

 Los intermedios fosforilados tienen gran importancia en la marcha de la ruta. Los acilfosfatos (1,3-BPG) y los enolfosfatos (PEP) poseen un alto potencial de transferencia
de grupos fosfato. Se forman en reacciones endergnicas y donan el fosforilo a otros
compuestos en reacciones muy exergnicas y as se favorece la ruta.

* El 2,3-BPG, efector alostrico de la Hemoglobina, se forma a partir del 1,3-BPG,

metabolito de la segunda fase de la glucolisis, por la accin de la enzima
bisfosfoglicerato mutasa. Las mutasas (por ejemplo: bisfosfoglicerato mutasa) actan a
travs de intermediarios bisfosfato.
- Regulacin de la glucolisis:
1.- La hexoquinasa es inhibida por el producto de la reaccin que cataliza, la G-6-P y
activada por Pi. La isoenzima de la hexoquinasa en hgado se llama glucoquinasa y
tiene menor afinidad por la glucosa que la HK, KM
3.- La fosfofructoquinasa 1 (PFK1) es la enzima clave en el control de la glucolisis,
est regulada por metabolitos activadores (F-2,6-BP, AMP) y otros inhibidores (ATP,
citrato, H+ ); es una enzima alostrica.
10.- La piruvato quinasa es inhibida por el ATP, el Acetil-CoA y los cidos grasos de
cadena larga. Los ltimos pueden proporcionar ATP a travs del Ciclo de Krebs. Es
activada por F1,6-BP. En hgado resulta inhibida por fosforilacin
-Rutas alimentadoras de la glucolisis o incorporacin de otros glcidos a la glucolisis.
Polisacridos (Glucgeno, almidn).- El primero se degrada por la va de la
glucogenolisis (se estudia ms adelante, tema 7) hasta unidades de glucosa-1-P, que
se incorporan a la fase preparatoria de la glucolisis para su degradacin.
Disacridos.- Su hidrlisis produce monosacridos que se incorporan a la glucolisis
por diferentes vas
Sacarosa + H2O -------------> fructosa + glucosa sacarasa
Lactosa + H2O --------------> galactosa + glucosa lactasa
Maltosa + H2O --------------> 2 glucosa maltasa c
Rendimiento energtico de la oxidacin de una molcula de glucosa en la glucolisis:
(la glucosa se convierte a piruvato, en el citoplasma) n de reaccin
1 Fosforilacin de glucosa 1 ATP
3 Fosforilacin de fructosa-6-P 1 ATP
7 Defosforilacin de 2 molculas 1,3-BPG + 2 ATP
10 Defosforilacin de 2 molculas de PEP + 2 ATP
6 Oxidacin de 2 molculas de gliceraldehido-3-P
+ 2 NADH 2 ATP + 2 NADH

Balance global glucolisis: Glucosa + 2 ADP + 2 NAD + ------> 2 piruvato + 2 ATP + 2

NADH - Recordar que cada NADH citoplasmtico que entre en la cadena respiratoria
mitocondrial producir 3 ATP.