UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA II
PRCTICA # 5
CURSO: Cuarto Semestre

GRUPO: 3

FECHA: 20/junio/2016

INTEGRANTES:
Nazareno Iliana

Rugel Ingrid

Licuy Andrea

Pazmio Nicol

Paul Vargas

Narvez ngela

TEMA: HIDRLISIS CIDA Y ENZIMTICA DEL ALMIDN

OBJETIVOS:
Identificar polisacridos por hidrlisis cida y enzimtica del almidn
BASES TEORICAS:
ALMIDN
Es el producto de asimilacin ms importante de la fotosntesis y constituye la
principal sustancia de reserva delos vegetales. Qumicamente es un polisacrido
homogneo

que

est

formado

por

una

mezcla

de

dos

polisacridos

estructuralmente diferentes: amilosa y amilopectina.

Caracterstica y propiedades: Se presenta como polvo blanco fino, inspido,
constituido por granos caractersticos microscpicamente para cada especie. El
almidn es insoluble en agua fra; en agua caliente se hincha formando engrudo;
se tie de azul a azul violeta con sol. R lugol; da glucosa como producto final de la
hidrlisis total.
Usos: En alimentacin; por degradacin parcial se obtiene una mezcla de
polisacridos denominados como dextrina; obtencin industrial de glucosa por
hidrlisis total; como reactivo indicador en yodometra; como apresto de textiles y
papel, etc.
Fundamento
La hidrlisis cida por accin del HCl a 100C produce una hidrlisis total del
almidn y forma: glucosa, maltosa e isomaltosa.
La hidrlisis enzimtica por accin de la enzima alfa amilasa produce una hidrlisis
parcial, produciendo: glucosa, maltosa y dextrina que es una cadena ramificada y
para poder romperla se necesita de alfa 1,6 glucosidasa.
MATERIALES:

HCl concentrado

Lugol
Enzima alfa amilasa
Azcares: glucosa, maltosa
Reactivo de Benedict
Almidn al 2%
Gradilla
Fiola
Placa de porcelana
Reverbero
Pipetas
Tubos de ensayo

PROCEDIMIENTO HIDRLISIS CIDA

1.
2.
3.
4.

En una fiola agregar 20 ml de solucin de almidn al 2%

Agregar 1 ml HCl concentrado. Mezclar bien.
Llevar a bao de mara hirviendo, anotar el tiempo de inicio de la hidrlisis
Luego de 5 minutos, hacer una reaccin con Lugol en la placa de porcelana
poniendo una gota de la solucin de almidn con HCl en un orificio de la

placa.
5. Agregar 1 gota de Lugol. Hacer la reaccin hasta que adquiera el color del
Lugol.
6. Anotar el tiempo de la hidrlisis cida, teniendo siempre la fiola en el bao.
PROCEDIMIENTO HIDRLISIS ENZIMTICA
1.
2.
3.
4.

En un tubo de ensayo medir 4 ml de almidn al 2%

Llevar a bao a 37C por 5 minutos
Luego agregar 200 ul de la enzima alfa amilasa. Mezclar
Anotar el tiempo de inicio de la hidrlisis y cada 5 minutos hacer la reaccin

con lugol hasta completar 15 minutos.

5. A los 15 minutos sin sacar el tubo de ensayo, tomar 0,5 ml del hidrolizado y
colocar en un tubo de ensayo.
6. Luego que est en el bao continuar haciendo la reaccin con Lugol hasta
los 30 minutos.
7. Retirar el tubo del bao y tomar 0,5 ml del hidrolizado y colocar en otro tubo.
Para confirmar azcares reductores realizar la reaccin de Benedict:

TUBOS

SUSTANCIAS

REACTIVO DE BENEDICT

Solucin Almidn

0,5 ml

Glucosa

0,5 ml

Maltosa

0,5 ml

Hidrolizado enzimtico 15 min

0,5 ml

Hidrolizado enzimtico 30 min

0,5 ml

Hidrolizado cido

1
2
3
4

0,5 ml

2,5 ml
2,5 ml
2,5 ml
2,5 ml
2,5 ml
2,5 ml

Poner los tubos en bao mara hirviendo durante 5 minutos, retirar y observar.

REACTIVO
Solucin Almidn

REACCIN
Positivo

Glucosa
Positivo
Maltosa
Positivo

OBSERVACIN
Hidrlisis parcial
color verde azulado
Hidrlisis total
color rojo ladrillo
Hidrlisis total
color rojo ladrillo

H enzimtico 15 min
Negativo
H enzimtico 30 min

Negativo

Hidrolizado cido
ANEXOS:

Positivo

No hay cambio de coloracin

con el reactivo de Benedict
No hay cambio de coloracin
con el reactivo de Benedict
Hidrlisis total
color rojo ladrillo

CONCLUSIONES
En la hidrlisis cida los iones de yodo se introducen en los enlaces de almidn
por lo que si calentamos desaparece el color, pero si se lo deja enfriar regresa el
color porque se saturan los espacios intermoleculares, se forma glucosa, maltosa,
isomaltosa.
En la hidrlisis enzimtica se produce un rompimiento parcial de los enlaces que
mantienes unido a las unidades del almidn y se formar maltosa, glucosa y
dextrina lmite que es una cadena ramificada.