PRT 023vfg

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS
EN PLACA METODO BAM ONLINE 2001

Seccin Microbiologa
Alimentos y Agua
PRT-712.02-023
Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
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1.
OBJETIVO
Conocer el nmero de microorganismos aerobios mesfilos que contiene un alimento. Este
mtodo es uno de los indicadores microbiolgicos de calidad mas utilizado.
2.
CAMPO DE APLICACIN Y ALCANCE
Aplicar este procedimiento a alimentos congelados, enfriados, precocidos o preparados con
excepcin de los productos fermentados o madurados tales como queso, ciertos tipos de
embutidos, yogurt, etc.
3.
FUNDAMENTO
Este en un mtodo de recuento en placa y siembra en profundidad.
Los resultados de este anlisis permiten:
Verificar efectividad de los procedimientos de limpieza y desinfeccin.
Determinar si las temperaturas aplicadas en los procesos fueron las adecuadas.
Determinar el origen de la contaminacin durante los procesos de elaboracin de los
alimentos.
Verificar condiciones ptimas de almacenamiento y transporte.
Obtener informacin acerca de la vida til de los alimentos.
Indicar alteracin incipiente en ciertos alimentos.
4.
4.1
4.2
4.3
4.4
REFERENCIAS
Bacteriological Analytical Manual. Online Enero 2001.
Standard Methods for the Examination of Dairy Products.15 ed. 1992. (Para clculo de
resultados)
PRT-712.01-001 "Procedimiento de Recepcin de las muestras".
PRT-712.01-002 "Procedimiento de procesamiento de muestras de alimentos y agua"

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5.
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TERMINOLOGA
No Aplica
6.
MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS
6.1 MATERIALES Y EQUIPOS
6.1.1
Placas Petri estriles de vidrio o de plstico de 90-100 mm de dimetro.
6.1.2
Frascos de dilucin de 160 mL de vidrio borosilicato con tapa rosca.
6.1.3
Tubos de 16 x 160 mm marcados en 9 y 10 mL, que contengan 9 mL de solucin
diluyente estril.
6.1.4
Pipetas bacteriolgicas estriles de 1, 5 y 10 mL graduadas en 0,1 Ml
6.1.5
Incubadora regulada a 35 1C, y para muestras de leche regulada a 32 1C
6.1.6
Bao de agua termorregulado a 47 2 C.
6.1.7
Agitador de tubos
6.1.8
Contador de colonias, tipo Quebec de campo oscuro o equivalente
6.2 MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS
6.2.1
AGUA RECOMENDADA PARA USO EN MICROBIOLOGIA
Para preparar medios de cultivo, reactivos y blancos de dilucin slo se debe usar agua que ha
sido tratada por el desionizador Barnstead, para dejar libre de trazas de metales disueltos y
componentes bactericidas e inhibitorios.
6.2.2
DILUYENTE: Agua dilucin fosfato buferada de Butterfield pH 7.2 0.1 distribuida

en volmenes de 9 mL en tubos de tapa rosca.
6.2.3
AGAR PARA RECUENTO EN PLACA: Agar Plate Count Agar o Standard Methods
Agar estril, pH 70.1, distribuido en frasco Schott con 200 mL. (Anexo N 3)
7.
7.1
7.2
7.3
DESARROLLO
REQUISITOS "RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS
VIABLES" (Ver Anexo N 1)
PRECAUCIONES "RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS
VIABLES" (Ver Anexo N 2)
DILUCIONES Y SIEMBRA DE LA MUESTRA

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7.3.1 Recibir en el Laboratorio de Recuentos, las muestras procesadas en el Laboratorio de

Recepcin de Muestras de esta seccin y dejar constancia de ello en el registro cdigo
RG-712.00-037. Estas muestras son procesadas segn el PRT-712.01-001 de
"Procedimiento de Recepcin de las muestras" y el PRT-712.01-002 de "Procedimiento
de procesamiento de muestras de alimentos y agua".
7.3.2 Anotar en cuaderno de inscripcin, la clave y nmero de las muestras a sembrar.
7.3.3 Verificar que el volumen de cada tubo de dilucin contengan 9 mL.
7.3.4 Preparar diluciones decimales de 10, 10 , etc. a partir del homogeneizado de la
muestra o de muestra lquida directa. (Ver Anexo N 6). Para ello transferir 1 mL a un
frasco con 9 mL de diluyente. Agitar y proceder de igual forma para las diluciones
siguientes.
7.3.5 Identificar las placas Petri con clave, nmero de la muestra y dilucin.
7.3.6 Sembrar 1 mL por duplicado de cada dilucin en placas estriles previamente
identificadas. Sembrar como mnimo dos diluciones consecutivas. (Anexo N 4 Diagrama
Anlisis Recuento de microorganismos aerobios mesfilos).
7.3.7 Verter en cada placa Petri aproximadamente 12-15 mL de agar previamente fundido y
mantenido en bao de agua a 47C 2 C.
7.3.8 Mezclar el inculo con el medio fundido, inclinando y girando las placas. La forma
adecuada de llevar a cabo esta operacin sera la siguiente:
a) Mover la placa con movimientos de vaivn 5 veces en una direccin,
b) hacerla girar 5 veces en el sentido de las agujas del reloj,
c) mover con movimientos de vaivn en una direccin que forme ngulo recto con la
primera y
d) hacerla girar 5 veces en el sentido contrario a las agujas del reloj.
7.3.9 Una vez solidificado el agar, invertir las placas rpidamente para prevenir el crecimiento
de colonias invasivas por acumulacin de humedad. Incubar a 35 C durante 48 horas 2
horas.
Con el fin de validar los resultados se recomienda realizar controles de: ambiente,
esterilidad del medio de cultivo, esterilidad del diluyente
7.4 LECTURA Y RECUENTO DE COLONIAS
7.4.1 LECTURA DE LAS PLACAS
7.4.1.1 Luego de cumplir el perodo de incubacin realizar la lectura de las placas.

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7.4.1.2
7.4.1.3
7.4.1.4
7.4.1.5
7.4.1.6
7.4.1.7
7.4.2
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Si no es posible leerlas prontamente, guardarlas a 4C por no ms de 24 horas, pero

esto no hay que hacerlo de rutina.
Realizar el recuento con un contador de colonias modelo Quebec de campo oscuro.
Examinar las muestras dudosas con mayor aumento para distinguir las colonias de
materias extraas.
Evitar la fatiga ocular que puede causar imprecisiones.
Anotar la dilucin usada y el nmero de colonias contadas en cada placa en el registro
cdigo RG-712.00-023.
Anotar los resultados de los controles realizados en los siguientes registros segn
corresponda: RG-.712.00-001, RG-712.00-009 y RG-712.00-010.
RECUENTO DE COLONIAS Y REGISTRO (Anexo N 5 Casos, lectura, registro
clculo e informes de resultados)
El recuento de colonias en placa se realiza de acuerdo al siguiente esquema:

7.4.2.1
Placas normales (25 - 250 colonias):
Seleccionar las placas libres de crecimiento invasivo.

Contar todas las colonias incluyendo aquellas de tamao muy pequeo.
Anotar por dilucin, el nmero de colonias contadas en cada placa.
7.4.2.2
Casos especiales
Si no se tienen placas que cumplan con el requisito anterior, proceder de la siguiente manera:
7.4.2.2.1 Placas sobrepobladas (mas de 250 colonias):
a1)-Anotar los recuentos de placas sobrepobladas como muy numerosos para contar (MNPC)
cuando disponga de placas normales.
a2) Si no dispone de placas normales en las diluciones sembradas, contar las colonias en
porciones de la placa si su distribucin es homognea y calcular el recuento estimado en placa
(RPES).
Si hay menos de 10 colonias por cm, contar las colonias en 12 cuadrados, seleccionar 6
cuadrados consecutivos horizontales de la placa y 6 cuadrados consecutivos formando ngulo
recto, contar cada cuadrado slo una vez
Si hay ms de 10 colonias por cm contar las colonias en cuatro de tales porciones.

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En ambos casos, multiplicar el nmero promedio de las colonias contadas por cm por el rea
de la placa usada para estimar el nmero de colonias por placa. Cada laboratorio debe
determinar el rea en cm de las placas usadas. Registre los valores obtenidos e indique como
recuento estimado.
Si hay mas de 100 colonias por cm, registrar como >100 col / cm.
7.4.2.2.2 Placas con menos de 25 colonias (< 25 colonias)
Cuando las placas de las diluciones tienen menos de 25 colonias cada una, registre los valores
obtenidos e indique como recuento estimado.
7.4.2.2.3 Placas sin desarrollo de colonias
Cuando ninguna de las placas presente desarrollo de colonias, registrar como sin desarrollo en la
dilucin correspondiente (SD) o < 1 por la correspondiente dilucin ms baja e indique como
recuento estimado.
7.4.2.2.4 Crecimiento invasivo
Las colonias invasivas son generalmente de tres tipos:
a1) El primer tipo son las colonias en cadenas, que al parecer son causadas por desintegracin de
un grupo de bacterias cuando la placa Petri es rotada para mezclar el agar con la alcuota
analizada. Si solamente existe una de tales cadenas contar como una colonia . Si una o mas
cadenas parecieran originarse de fuentes distintas, contar cada fuente como una colonia. No
contar cada crecimiento individual de tal cadena como una colonia.
a2) El segundo tipo de colonia invasora es la que se desarrolla en una pelcula de agua entre el
agar y el fondo de la placa Petri.
a3) El tercer tipo es la que se forma en una pelcula de agua en el costado o en la superficie del
agar.
Estos dos ltimos tipos revelan una acumulacin de humedad en el punto en el cual se origina el
crecimiento invasivo. Cuando la alcuota de siembra es uniformemente distribuida en el medio,
las bacterias raramente desarrollan colonias invasivas.
a4) Si en las placas seleccionadas se presenta invasin, realizar recuento de colonias solamente:
Si el rea invadida no excede la mitad de la placa.
Si las colonias estn bien distribuidas fuera del rea invadida.
Si no se cumple lo anterior, registrar como crecimiento invasivo o accidente de laboratorio.

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Los laboratorios con un 5 % de placas cubiertas con ms de 1/4 de las placas con crecimiento
invasivo, deberan tomar medidas inmediatas, para eliminar este problema (reducir la humedad
ambiente en la cmara o estufa de incubacin y mezclar cuidadosamente el agar con la siembra).
7.4.2.2.5 Accidente de laboratorio o inhibidores de crecimiento bacteriano.
Cuando una placa presenta contaminacin u otra condicin insatisfactoria registrar como
"Accidente de Laboratorio". Especificar.
El analista puede sospechar la presencia de sustancias inhibidoras en las muestras que estn
siendo analizadas, cuando las placas no tienen crecimiento o tienen proporcionalmente menos
crecimiento en las diluciones mas bajas. Tal resultado no debera ser interpretado como
evidencia de inhibidores hasta confirmar la presencia de ellos en el producto
7.5
EXPRESION DE RESULTADOS
7.5.1 Clculo y registro de resultados ( Ver Anexo N 5)

Para los clculos del Recuento Standard en placa considerar slo los dos primeros dgitos.
Si el tercer dgito es 6, 7, 8 o 9 adicionar una unidad al segundo dgito. Si el tercer dgito es 1, 2,
3 o 4 considerar solamente los dos primeros dgitos. Cuando el tercer dgito es 5, agregar una
unidad al segundo dgito si este es impar y mantener el segundo dgito si este es par.
Usar ceros para los dems dgitos hacia la derecha.
Ejemplo
Lectura calculada
RAM
12.700
13.000
12.400
12.000
15.500
16.000
14.500
14.000
7.5.2
7.5.2.1
Placas normales
Cuando los recuentos de los duplicados de placas de slo una de las diluciones caen
dentro del rango 25 a 250 colonias:
- Utilizar para el clculo los recuentos obtenidos en placas normales

- Sacar promedio y multiplicar por el factor de dilucin.

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7.5.2.2
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Si los recuentos de las placas de dos diluciones consecutivas caen dentro del rango
25-250 colonias calcular el RAM segn la siguiente frmula:
C
N=
[ ( 1 x n1 ) + ( 0.1 x n2 ) ] x d
donde :
N
= nmero de colonias por ml o g de producto
C = suma de todas las colonias contadas en todas las placas

n1 = nmero de placas contadas de la menor dilucin.
n2 = nmero de placas contadas de la dilucin consecutiva.
d = dilucin de la cul fu obtenido el primer recuento
Ejemplo
1 : 100
1 :1000
232 y 244
33 y 28
N = 232 + 244 + 33 + 28
[( 1 x 2 )+( 0.1 x 2 )] x 0,01
= 537
0.022
= 24.409
7.5.2.3
= 24000
Cuando los recuentos de las placas en duplicado caen tanto dentro como fuera del
rango 25-250 colonias, usar slo aquellos recuentos que estn dentro de este rango.

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7.5.3
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Todas las placas con menos de 25 colonias.
Cuando las placas de ambas diluciones tienen menos de 25 colonias cada una, informar el
recuento como menor de 25 por el recproco del factor de dilucin menor.
Ejemplo
1 : 100
1 : 1.000
R A M ( mL o g )
18
< 2.500 recuento en placa estimado (RPES)
< 2.500 recuento en placa estimado (RPES)
7.5.4
Todas las placas con mas de 250 colonias
Cuando las placas de ambas diluciones tienen ms de 250 colonias cada una (pero menos de
100 por cm) contar las placas ms cercanas a 250, sacar promedio y multiplicar por el
recproco de la dilucin.
Ejemplo
1 :100
1 : 1.000
MNPC
640
R A M ( mL o g )
640.000 recuento en placa estimado (RPES)
( MNPC = Muy numeroso para contar )

7.5.5
Todas las placas con ms de 100 colonias promedio por cm.
Estimar que el R A M es mayor de 100 veces la mayor dilucin sembrada, por el rea de placa
utilizada y por el recproco de la dilucin.
Ejemplo
1 : 100
1 : 1.000
R A M ( mL o g )
TNPC
7.150*
> 6.500.000 * ( RPES )
TNPC
6.490**
>5.700.000 **( RPES )

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basado en un rea de placa de 65 cm ( 9 cm )
**
basado en un rea de placa de 57 cm ( 8,5 cm )
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7.5.6
Todas las placas con crecimiento invasivo, presencia de inhibidores o accidente

de laboratorio.
Informar segn corresponda.
7.6
INFORME DE RESULTADOS (Anexo N 5)
7.6.1 Informar el recuento de aerobios mesfilos (RAM) en unidades formadoras de colonias

(ufc) por mililitro o gramo segn corresponda.
Expresar el Resultado con slo un nmero entero y un decimal multiplicado por 10 elevado
a la potencia correspondiente. Ej 2.400 2,4 x 103 ufc / g o mL.
7.6.2 Siempre que se utilice el mtodo de recuento en placa para decidir si una partida de
alimentos se acepta o se rechaza, debe considerarse nicamente recuentos realizados dentro
del rango 25-250 colonias y nunca los recuentos estimados. Desde el punto de vista de un
Organismo Oficial, el recuento estimado es slo til como una aproximacin inicial para
valorar la calidad bacteriolgica de un alimento.
7.6.3 En el caso de que se utilice el recuento en placa para establecer si un alimento determinado
cumple una norma microbiolgica, debe tomarse en cuenta los planes de muestreo
especificados para ese alimento
7.7
REPRODUCIBILIDAD Y ERROR PERSONAL
El resultado obtenido al contar por segunda vez las colonias de una placa determinada debe
presentar:
7.7.1 Una diferencia mxima del 5% en el caso de que este recuento lo realice la misma persona.
7.7.2 Una diferencia mxima del 10% en el caso de que este recuento lo haya realizado otra u
otras personas.
Cuando la diferencia entre ambos es superior a estos lmites, puede deberse a defectos
visuales, a la dificultad de reconocer las colonias muy pequeas o lo que es mas frecuente,
a la incapacidad para diferenciar las colonias de las partculas ms pequeas

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Fecha emisin:
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Fecha revisin:
11/02/2008
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7.8 CONTROLES
7.8.1 Chequear esterilidad de:
- Agua de dilucin
- Agar para recuento en placa (Plate Count o agar Standard Methods)
- Pipetas
- Placas Petri
7.8.2 Control de ambiente por mtodo de sedimentacin en placa :
- Mesn de siembra
- Flujo laminar
7.8.3 Control de temperatura de incubadora diariamente.
7.8.4 Control temperatura bao termorregulado cada vez que se siembre muestras
8.
REGISTROS
Identificacin Almacenamiento
Proteccin
Recuperacin
del registro
Registro control Archivador verde
Acceso restringido a Papel
de ambiente,
Registros
personal
Seccin
RG-712.00-009. Laboratorio N346 Microbiologa.
Seccin
Microbiologia
Alimentos y Agua.
Registro control Archivador verde
Acceso restringido a Papel
de esterilidad de Registros
personal
Seccin
medios
de Laboratorio N346 Microbiologa.
cultivo
Seccin
utilizados en el Microbiologia
anlisis
Alimentos y Agua.
Laboratorio
346,
RG712.00-010.
Registro
Archivador
azul Acceso restringido a Papel
anlisis de
Registros
de personal
Seccin
muestras de
Lecturas e informes Microbiologa.
alimentos y
de
resultados
agua
Laboratorio
Tiempo retencin
y disposicin
5
aos
y
disposicin
en
basura
normal
partidos en trozos.
5
aos
y
disposicin
en
basura
normal
partidos en trozos.
5
aos
y
disposicin
en
basura
normal
partidos en trozos.

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Identificacin
del registro
Laboratorio de
Recuentos RG712.00-023.
Fecha revisin:
11/02/2008
Pgina 11 de 33
PRT-712.02-023
Almacenamiento
Proteccin
Recuperacin Tiempo retencin

y disposicin
Recuento
aerobios
mesfilos, S.aureus,
Mohos y levaduras
Seccin
Microbiologia
Alimentos y Agua.
Registro de
Archivador
rojo Acceso restringido a Papel
entrega diaria Registro
entrega personal
Seccin
de muestras a diaria
Laboratorio Microbiologa.
los laboratorios 340.
RG-712.00-037.
9.
Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
5
aos
y
disposicin
en
basura
normal
partidos en trozos.
TABLA DE MODIFICACIONES
Revisin N
8
Pg.
Modificada
1
1 a 31
Motivo del cambio

Se elimina formato pgina 1 por cambio en
formato de documento institucional.
Se cambia el formato del encabezado de
pgina a todo el documento.
Fecha
Aprobacin
11/02/2008
Se corrige PRT-702.02-023 por PRT -712.02023
Se cambia el nmero de revisin 8 por 9 y el

total de pginas.
En los puntos 4.3 y 4.4 se corrige PRT11/02/2008
702.01-001 y PRT-702.01-002 por PRT712.01-001 y PRT-712.01-002
respectivamente.
Se deja pie de pgina slo en pgina 1 y se
11/02/2008
actualizan los cargos.
En el punto 6.6 se cambia 45C 2 C por 47 11/02/2008
C 2C.
En tem Medios de Cultivo y Reactivos en el 11/02/2008
segundo prrafo Diluyente se cambia por:....9
mL en tubos tapa rosca y se elimina: Para

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Revisin N
Pg.
Modificada
PRT-712.02-023
Motivo del cambio
muestras de leche distribuida en frasco con 99
mL 2 mL.
En el punto 7.1 se corrige N por N
En el punto 7.3.1 se corrige la codificacin de
RG-702.00-037 por RG-712.00-037, PRT702.00-001 por PRT-712.01-001 y PRT702.01-002 por PRT-712.01-002.
En el punto 7.3.3 se cambia por:...tubo....9 mL.
En el punto 7.3.4 se cambia por:...1 mL...9
mL...
En el punto7.3.7 se cambia 48C por 47C
2C.
En el punto 7.3.11 en los prrafos 6 y 7 se
corrige RG -702.00-XXX por RG-712.00XXX.
Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
Pgina 12 de 33
Fecha
Aprobacin
8
8
3
3
8
8
3
4
En el punto 7.4.2 en el prrafo 7 se agrega al

final de la frase despus del punto seguido:
Registre los valores obtenidos e indique
como recuento estimado.
En el punto 7.4.2.b) en segundo prrafo se 11/02/2008

elimina: ....., proceder como punto 1 y se
agrega: registre los valores obtenidos e
indique como recuento estimado.
En el punto 7.4.2 c), en segundo prrafo se 11/02/2008
11
11/02/2008
11/02/2008
11/02/2008
11/02/2008
11/02/2008
11/02/2008
11/02/2008
agrega:... o < 1 por la correspondiente

dilucin ms baja e indique como recuento
estimado.
En el punto 7.5.3 en el ejemplo se agrega a la 11/02/2008
derecha de < 2.500: recuento en placa
estimado (RPES).
En el ejemplo del punto 7.5.4 se agrega al lado 11/02/2008
derecho del valor RAM: ...recuento en
placa...
Se cambia el punto 8.0 Responsables por
11/02/2008
Tabla registro por cambio de formato a nivel
institucional.

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Revisin N
8
Pg.
Modificada
11
11
12
14
15
17
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Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
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Motivo del cambio
Fecha
Aprobacin
Se cambia el punto 9.0 Distribucin por Tabla 11/02/2008
de modificaciones por cambio de formato a
nivel institucional
Se cambia el punto 10.0 Registros por Anexos 11/02/2008
por cambio formato a nivel institucional.
En la tabla Anexo 1 se reemplaza BOTELLAS 11/02/2008
DE DILUCIN por:TUBOS DE DILUCION:
Deben tener una capacidad aproximada de 20
mL, de vidrio de borosilicato con tapa de
rosca. Verificar que los tubos contengan la
cantidad adecuada. Se recomienda tubos
marcados indeleblemente a 9 mL y 10 mL
0,1 mL.
En la fila octava de la tabla se cambi 50C
11/02/2008
por 47C 2C.
En el Anexo N 2, en el prrafo nueve se
11/02/2008
cambi 48C 1C por 47 C 2C.
En el esquema del anexo N 4 se cambia 99 11/02/2008
mL de Agua peptonada 0,1 % por: 450 mL
de Solucin de Butterfield.
Se cambia 11 g por 50 g.
20
21
Se cambia 9 mL se agua peptonada 0,1% por

Solucin de Butterfield.
En los casos 1 y 2 a), b),c) se agrega RPESa 11/02/2008
los puntos mencionados en la columna
INFORME.
En el punto b), en la columna INFORME se
11/02/2008
agrega (RPES).
En el punto c), en la columna CALCULO Y
REGISTRO se agrega: < 1,0 x por el
recproco de dilucin menor y en al columna
Informe se cambia <1,0 x 10^3 por < 2,5 x
10^3 (RPES).
10.
ANEXOS

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10.1
10.2
10.3
10.4
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Fecha emisin:
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Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
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Anexo N 1 Requisitos Recuento de microorganismos aerobios mesfilos viables.

Anexo N 2 Precauciones Recuento de microorganismos aerobios mesfilos viables.
Anexo N 3 Caractersticas del agar Standard.
Anexo N4 Recuento de microorganismos aerobios mesfilos: Tcnica Recuento en placa
siembra en profundidad.
10.5 Anexo N 5 Recuento de microorganismos aerobios mesfilos.
10.6 Anexo N 6 Tabla de diluciones segn anlisis realizado en el lab. 346.
10.7 Anexo N 7 RG-712.00-023 "Registro de resultados anlisis RAM, S. aureus, Mohos y
Levaduras en alimentos y agua

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ANEXO N 1
VIABLES"
AUTOCLAVE :
El autoclave debe ser de tamao suficiente para prevenir el
amontonamiento de material en su interior y ser construido de
forma que provea temperaturas uniformes. Este equipo debe
constar de un termmetro registrador de temperatura.
HORNO
De tamao suficiente para evitar que se amontone el material en su
ESTERILIZADOR :
interior, que provea una temperatura uniforme. Debe tener
termmetro registrador de temperatura.
BALANZA :
Con sensibilidad de 0,1 g capacidad de 200 g de carga. Es
preferible de un slo plato.
CONTADOR DE
Se prefiere el modelo "Quebec" o uno que tenga aumento y
COLONIA :
visibilidad equivalente.
TUBOS DE DILUCION:
Deben tener una capacidad aproximada de 20 mL, de vidrio de
borosilicato con tapa de rosca. Verificar que los tubos contengan
la cantidad adecuada. Se recomienda tubos marcados
indeleblemente a 9 mL y 10 mL 0,1 mL.
INCUBADORA :
La temperatura dentro de la incubadora no debe variar mas de 35
1 C.
La temperatura dentro de la incubadora se determina cuando est
llena a su capacidad mxima.
Las placas deben llegar a la temperatura de incubacin dentro de 2
horas. Evitar la humedad excesiva dentro de la incubadora, para
reducir la tendencia de crecimiento de colonias invasivas. Prevenir
el desecamiento excesivo del medio, controlando la ventilacin y
circulacin de aire.
El agar de las placas incubadas no debe perder mas del 15 % del
peso durante las 48 horas de incubacin.

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VIABLES"
La incubadora debe cargarse de manera que quede no menos de
2,5 cm de espacio entre los grupos de placas o entre las placas y
las paredes del incubador.
Las incubadoras deben estar aisladas, equipadas con unidades bien
distribuidas de calefaccin y deben tener una circulacin mecnica
de aire.
Las incubadoras deben mantenerse en salas donde la temperatura
tenga un rango de 16 - 27 C.
La temperatura de la estufa o cmara de incubacin debera
chequearse dos veces al da; una antes de sacar el material en la
maana y otra en la tarde al finalizar la jornada trabajo. Esto debe
ser realizado con termmetros de registro de temperatura mxima
y mnima.
Los termmetros deben ser sumergidos en un recipiente con agua
hermticamente cerrado. La temperatura del aire no es un buen
ndice de la temperatura real del agar.
HOMOGENIZADOR
MECANICO:
Warring blender con vaso de vidrio o de acero inoxidable.
STOMACHER:
De capacidad 400 g.
PLACAS PETRI:
Los fondos de las placas Petri deben tener por lo menos 85 mm de

dimetro interior y una profundidad de 12 mm con superficies
interiores y exteriores libres de burbujas, rayaduras u otros
defectos. Pueden ser de vidrio o desechables.
CONTENEDORES DE
PLACAS PETRI.:
PIPETAS:
De acero inoxidable o aluminio, con tapa.

Para este anlisis se usan pipetas de 1 mL 0,25 mL, la que debe
entregar su contenido en mximo 4 segundos.
Usar slo pipetas intactas, taponadas, de material no torcido,
calibradas para uso bacteriolgico y en conformidad con las
especificaciones de APHA.

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VIABLES"
PROPIPETAS O PIPETAS
AUTOMATICAS .
CONTENEDOR DE
PIPETAS:
De acero inoxidable.
REFRIGERADOR :
Debe mantener las muestras a una temperatura de 0 -4.4 C hasta

ser analizadas. Se debe chequear la temperatura diariamente.
ESPACIO DE
ALMACENAJE:
Libre de polvo e insectos y adecuados para guardar material.
TERMOMETROS
Los termmetros deben tener un rango de -1,1 a 55 C. La

graduacin no debe exceder de 1 C. Los termmetros deben ser
chequeados con un termmetro certificado por lo menos una vez al
ao.
AREA DE TRABAJO:
Debe ser un mesn nivelado, con amplia superficie de trabajo,

limpio, iluminado. El laboratorio debe tener buena ventilacin,
libre de polvo y de corrientes de aire. El nmero de
microorganismos (bacterias, levaduras y hongos) en el aire del
rea de trabajo no debe exceder de 15 colonias por placa expuesta
durante 15 minutos.
BAO DE AGUA
TERMORREGULADO:
De dimensiones adecuadas, con control termosttico para

mantener el medio a 47C 2C.

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ANEXO N 2
PRECAUCIONES
"RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS VIABLES"
Al realizar las siembras usar propipeta. No pipetear con la boca.
Al retirar una pipeta estril de su contenedor evite contaminar la punta con las superficies
exteriores del envase.
No flamear pipetas estriles.
Introducir la pipeta no ms de 2,5 cm. dentro del homogeneizado de la muestra o dilucin.
Extraer un volumen ligeramente mayor a la alcuota deseada. Retirar la pipeta por sobre el
nivel del lquido y enrasar tocando con la punta de sta la pared interior del tubo o frasco
de dilucin.
Al inocular las diluciones, mantener la pipeta en un ngulo de 45 , y con la punta de sta

tocar el fondo de la placa Petri o la pared interior del envase de dilucin.
Levantar la tapa de la placa Petri lo necesario para introducir la pipeta. El tiempo que debe
transcurrir para que la pipeta entregue el volumen de 1 mL es de 2-4 segundos. Tocar un
punto seco de la placa manteniendo la pipeta en posicin vertical.
No expulsar la gota que queda en la punta de la pipeta.
Fundir la cantidad de medio de cultivo necesario para ser usada en un perodo de 3 horas y
mantenerlo en bao de agua a 47 C 2C.
Evitar exposiciones prolongadas del medio a altas temperaturas.

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ANEXO N 3
CARACTERSTICAS DEL AGAR STANDARD
Si el medio de cultivo es preparado por ingredientes stos deben tener las siguientes
especificaciones:
1-Casena pancretica: debe ser de calidad USP dada en la U.S. Pharmacopoeia, 1975 XIX p. 744.
2-Extracto de levadura: conforme a normas dadas por la U.S. Pharmacopoeia, 1975 XIX p. 758.
3-Glucosa: segn normas de U.S. Pharmacopoeia XIX p. 128. Debe ser anhidra.
4- Agar: conforme a las siguientes especificaciones.
a) Caractersticas generales:
El material seco debera ser granulado o en escamas, de color blanco cremoso. Una cantidad de 2 g
suspendida en 100 mL. de agua destilada fra. Debera disolverse completamente en 5 minutos
a 100 C. Despus de autoclavar esta solucin debe estar libre de materias extraas o
partculas en suspensin las cuales pueden interferir en la lectura. El pH de esta solucin al
2% no debe ser menos de 6,0.
b) Temperatura de gelificacin y fundido
La gelificacin de solucin acuosa caliente al 1.5% no debera ser sobre 43 C y no menor de 33
C. Luego de solidificado el medio no debera fundirse a menos de 70C.
c) Recuento de esporas viables
Este recuento no debera ser superior a 50.
A 2 g de agar agregar 100 mL. de caldo soya y autoclavar la mezcla a 121 C por 15 minutos.
Luego enfriar a 45 C y distribuir en 3 o 4 placas estriles. Incubar las placas por 48 horas a
35 C y contar las colonias. El total de colonias dividido por 2 no debera ser superior a 50.
CARACTERISTICAS FISICAS DEL AGAR STANDARD
1- Debera ser preparado con ingredientes que tengan las caractersticas anteriormente mencionadas.
2- El polvo debe ser beige claro o amarillo plido.
3- El contenido de humedad no debera ser menos del 5 %.
4- Debe ser soluble la solucin al 2,35 % al hervir 1 a 2 minutos. Esta solucin debe ser clara y libre
de precipitados.
5- Debe tener un pH final 7 0,2 a 25 C, despus de ser esterilizado a 121 por 15 minutos.
6- No debe presentar precipitado cuando es mantenido a 50-56 C, por 2 hrs. despus de ser
esterilizado.

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ANEXO N 4
RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS
Tcnica Recuento en placa siembra en profundidad
1 mL
HOMOGENEIZADO:
450 mL de Solucin de
Butterfield
9 mL de
Solucin de Butterfield
50 g muestra
Dil 10 -1
SIEMBRA :
10 -2
1 mL
1 mL
1 mL
1 mL
Agar Plate Count
INCUBACION:
35 C +-0,5C por 48 horas
LECTURA PLACAS :
Leer placas Petri segn anexo N 5
CALCULO :
Realizar los clculos segn anexo N 5
INFORME
Informar como N de UFC/g o mL de producto
10 -3
1 mL
1 mL
PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS EN

PLACA METODO BAM ONLINE 2001
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ANEXO N 5
LECTURA, REGISTRO, CALCULO E INFORME DE RESULTADOS RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS
Lic. T.M. Mariana Fernndez C. Instituto de Salud Pblica de Chile
CASOS
LECTURA Y REGISTRO
CALCULO Y REGISTRO
INFORME
1-Placas normales
ufc /g o mL
25-250 colonias
-Utilizar para el clculo los recuentos
a) Cuando los recuentos de los
obtenidos en placas normales.
duplicados de placas de slo
una de las diluciones caen
dentro del rango 25-250
-Si el tercer dgito es 6 , 7, 8 , o 9 adicionar
colonias
Ej 2 10= 301 y 289
2,4 x 10 ^5
1 unidad al segundo dgito
10= 244 y 232
Ej 1 = 238 x 1000 = 238.000
= 240.000
Ej 2 10= 301 y 289
10= 203 y 199
-Si el tercer dgito es 1, 2 , 3 , o 4 slo

considerar los dos primeros dgitos
Ej 2 = 201 x 1000 = 201.000
= 200.000
Ej 3 10= 301 y 289

10= 210 y 220
- Si el tercer dgito es 5, agregar 1 unidad al

2,2 x 10 ^5
segundo dgito si ste es impar y
mantener el segundo dgito si ste es par
Ej 3 = 215 x 1000 = 215.000
= 220.000
2,0 x 10 ^5

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Continuacin
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CASOS
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LECTURA Y REGISTRO
b) Si los recuentos de las placas de Ej

dos diluciones consecutivas
caen dentro del rango 25 - 250
colonias
10= 232
244
CALCULO Y REGISTRO
INFORME
ufc /g o mL
Calcular segn la siguiente frmula:
10= 33
28
N= ____________ C___________
2,4 x 10^4
[ ( 1x n1 ) + ( 0,1 x n2 ) ] x d
N=
232 + 244 + 33 + 28
[ ( 1x 2 ) + ( 0,1 x 2 ) ] x 0,01
N= 24.409
Ej
c) Cuando los recuentos de las
placas en duplicado caen tanto
dentro como fuera del rango 25
- 250 colonias , usar slo
aquellos recuentos que estn
dentro de este rango .
N
C
n1
n2
d
10= 238
263
10= 15
17
=Nmero de colonias / g o mL
= Suma de todas las colonias contadas en todas las placas
=Nmero de placas contadas de la menor dilucin
=Nmero de placas contadas de la dilucin consecutiva
=dilucin de la cual fue obtenido el primer recuento
=238 x 100 = 23.800

=24.000
2,4 x 10^3

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2- Casos especiales
a) Placas sobrepobladas
( > 250 colonias )
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CASOS
c) >100 colonias / cm .
* Basado en un rea de 65 cm ( 9 cm de dmetro.)
Fecha revisin:
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LECTURA Y REGISTRO
1- Mas de 250 colonias y disponga > 250

de placas normales
2- Si no dispone de placas
normales en las diluciones
sembradas y las placas
sembradas presentan mas de
250 colonias contar las mas
cercanas a 250 :
Contar 6 cuadrados
consecutivos horizontal y 6
a) < 10 colonias / cm .
consecutivos vertical
Ej
10 horiz.5, 7, 8, 3, 5, 6
Vert. 6, 7, 3, 4, 4, 5
b) > 10 colonias / cm
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Revisin: 9
Contar las colonias en

cuatro de stos cuadrados
Ej
10 77 , 46 , 38 , 67
Registrar como >100/cm
Ej 10 MNPC
10 >100 col / cm .
CALCULO Y REGISTRO
INFORME
ufc / g o mL
MNPC
(RPES)
3,4 x 10^5
5+7+8+3+5+6++6+7+3+4+4+5=63
63 / 12 x 65*x 1000 = 341000
(RPES)
77+46+38+67 = 288
288 / 4 x 65*x 1000 = 3705000
3,7 x 10^6
> 100 x 65*x 1000 = > 6.500.000
>6,5 x 10^6
MNPC = Muy numeroso para contar
(RPES)
(RPES)
RPES = Recuento en placa estimado

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Continuacin.
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CASOS
LECTURA Y REGISTRO
b) Todas las placas con

Placas de las diluciones sembradas Ej
menos de 25 colonias presentan menos de 25 colonias
cada una .
10
10
10
10
10 y 15
3y5
c) Placas sin desarrollo

de colonias
Ninguna de las placas presenta

desarrollo de colonias
Ej
d) Crecimiento invasivo
Tipos de crecimiento invasivo :
Slo contar s :
0y0
0y0
- El rea invadida no
excede la mitad de la
placa.
b) Colonia entre el agar y fondo de
la placa Petri
- Si las colonias estn bien
distribuidas fuera del rea
c) Colonia en una pelcula de agua
invadida.
en el costado o en la superficie
del agar
- Si no , registrar como
crecimiento invasivo (CI )
a) Colonias en cadenas
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Revisin: 9
CALCULO Y REGISTRO
< 25 x el recproco del factor de dilucin
menor
< 1,0 x por el recproco de dilucin menor
INFORME
ufc / g o mL
< 2,5 x 10^3
(RPES)
< 2,5 x 10^3

(RPES)
Crecimiento
Invasivo

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Continuacin
e) Accidente de
laboratorio o
inhibidores de
crecimiento
bacteriano
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CASOS
LECTURA Y REGISTRO
Fecha emisin:
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CALCULO Y REGISTRO
INFORME
ufc / g o mL
Accidente de laboratorio :
- Presencia de contaminacin u
otra condicin insatisfactoria.
Especificar
Accidente de
laboratorio
- Presencia de inhibidores
bacterianos
Cuando las placas no tienen

crecimiento o tienen
proporcionalmente menos
crecimiento en las
diluciones mas bajas
No informar
hasta confirmar
su presencia
REF: Standard Methods for the Examination of Dairy Products.15 ed. 1992. (Para clculo de resultados)

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ANEXO N 6
TABLA DE DILUCIONES SEGN ANLISIS REALIZADO EN EL LAB 346
Los anlisis que aparecen marcados en negrita, estn estipulados en el Reglamento sanitario de los Alimentos
Suubgrupo
Reglamento
CLAVE
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
Agar Plate Count.
RTO O NMP S. aureus

RTO : Agar Baird Parker
0,3 - 0,3 y 0,4 mL

1 mL en profundidad en
placas en duplicado de cada sembrado en 3 placas en
superficie
dilucin
RTO
MOHOS
Y
LEVADURAS
Agar OGY
1 mL en profundidad en
placas en duplicado de cada
dilucin
1.1
Leche cruda
2 placas dil 10-3 y 10-4
NMP serie 3-3-3-: Caldo

soya tripticasa con 10 %
NaCl 1% piruvato de
sodio.
1 mL en cada tubo de
cada dilucin
No
1.2
Leche y crema pasteurizada
Rto dil 10-1
No
1.3
Leche y crema en polvo
No
1.4
Leche y crema UHT (previa incubacin a

35 C por 10 das)
2 placas directo
NMP dil 10-1, 10-2 y 103

No
1.5.
Leche evaporada y crema esterilizada
No
No
No
No

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Suubgrupo
Reglamento
1.6
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CLAVE
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
Fecha emisin:
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RTO O NMP S. aureus
RTO
MOHOS
LEVADURAS
marcadas con rojo
Leche condensada azucarada y manjar

(dulce de leche)
No
No
1.7
Yogurt y productos lcteos fermentados o

acidificados
No
No

marcadas con rojo
1.8
Postres lcteos envasados no acidificados
Rto dil 10-1
1.9
Quesillo
Queso fresco chacra y queso de suero
No
Rto dil 10-1

marcadas con rojo
No
1.10
Queso madurado y rallado
No
Rto dil 10-1
No
1.11
Queso no madurado, queso suave y queso

crema
No
Rto dil 10-1
No
1.12
Queso procesado (fundido y en polvo)
Rto dil 10-1
No
2.1
Helados base leche simples
Rto dil 10-1
No
2.2
Helados base leche complejos con otros

ingredientes
Rto dil 10-1
No
2.3
Helados de agua
No
No
No
2.4
Mezclas para helados deshidratadas
No
No
3.1
Mantequilla y margarina
Rto dil 10-1
No

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Suubgrupo
Reglamento
4.1
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CLAVE
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
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RTO O NMP S. aureus
Caldos, sopas, cremas y mezclas

deshidratadas instantneas
No
Rto dil 10-1
RTO
MOHOS
LEVADURAS
No
4.2
Caldos, sopas, cremas y mezclas

deshidratadas que requieren coccin
No
Rto dil 10-1
No
4.3
Mezclas en seco de uso instantneo

(Refrescos, jaleas, gelatinas, budines,
cremas)
No
No
4.4
Mezclas en seco que requieren coccin

(budines, flanes)
No
No
5.1
Harinas y almidones
No
No

marcadas con rojo
5.2
Pastas frescas
Rto dil 10-1
No
5.3
Fideos y pastas rellenas desecadas
No
Rto dil 10-1

marcadas con rojo
5.4
Cereales para desayuno
No
No
6.1
Azcar
No
No
6.2
Miel
No
No
No
7.1
Productos de cacao y chocolate
No
No
No

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CLAVE
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
Fecha emisin:
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Suubgrupo
Reglamento
7.2
RTO O NMP S. aureus
Confites de azcar y frutos secos
No
No
8.1
Pan y masas horneadas sin relleno
No
No

marcadas con rojo
8.2
Masas horneadas con relleno y/o cobertura
Rto dil 10-1
No
8.3
Productos farinceos para cctel (snacks)
No
No
9.1
Leches en polvo , frmulas para lactantes,

productos en base a cereales y
preparaciones infantiles
NMP dil 10-1, 10-2 y 103

marcadas con rojo
No
9.2
Alimentos y frmulas de uso infantil

esterilizadas
No
No
No
9.3
Preparaciones infantiles listas para consumo 2 placas dil 10-1 y 10-2

que requieren calentamiento
No
9.4
Formulas lcteas con cereales
NMP
Lquidas: Directo, 10-1 y
10-2
Slidas: dil 10-1, 10-2 y
10-3
NMP
Lquidas: Directo, 10-1 y
10-2
10.1
Carne de res cruda
No
RTO
MOHOS
LEVADURAS
marcadas con rojo
No
No

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Suubgrupo
Reglamento
10.2
PRT-712.02-23
CLAVE
Fecha emisin:
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Revisin: 9
Fecha revisin:
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Pgina 30 de 33
Carne de ave cruda
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
RTO O NMP S. aureus

No
RTO
MOHOS
LEVADURAS
No
10.3
Cecinas cocidas
Rto dil 10-1
No
10.4
Cecinas crudas frescas y hamburguesas
Rto dil 10-1
No
10.5
Cecinas crudas maduradas
No
Rto dil 10-1
No
10.6
Cecinas crudas acidificadas
Rto dil 10-1
No
11.1
Moluscos bivalvos frescos
No
No
11.2
Pescados y mariscos crudos congelados
No
11.3
Pescados y mariscos precocidos o cocidos

congelados
NMP dil 10-1, 10-2 y 103

NMP dil 10-1, 10-2 y 103
11.4
Pescados y mariscos ahumados
12.1
Huevo pasteurizado, lquido, congelado,

deshidratado
12.2
13.1
No
No
NMP dil 10-1, 10-2 y 103

No
Huevo fresco
No
No
Mayonesa y otras salsas en base a huevo
Rto dil 10-1
No
No

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Suubgrupo
Reglamento
13.2
PRT-712.02-23
CLAVE
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
Fecha emisin:
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Revisin: 9
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RTO O NMP S. aureus
RTO
MOHOS
LEVADURAS
marcadas con rojo
No
Ketchup, salsa y condimento de mostaza,
salsa de tomate pasteurizada y/o preservada,
salsa de aj y aderezos
No
13.3
Especias y condimentos
No

marcadas con rojo
14.1
Frutas y verduras frescas
No
No
No
14.2
Frutas y verduras congeladas
No
No
14.3
Frutas y verduras desecadas o deshidratadas No
No

marcadas con rojo
14.4
Frutas y verduras en vinagre, aceite,

salmuera o alcohol, productos fermentados
No
No

marcadas con rojo
14.5
Mermeladas, jaleas, crema de castaas,

fruta confitada, preparados de frutas y
verduras (incluida la pulpa)
No
No

marcadas con rojo
15.1
Comidas y platos preparados listos para

consumo
Rto dil 10-1
No
15.2
Comidas y platos preparados que

necesariamente requieren coccin
No
Rto dil 10-1 y 10-2
No

Seccin Microbiologa
Alimentos y Agua
Suubgrupo
Reglamento
16.1
PRT-712.02-23
CLAVE
Bebidas analcohlicas carbonatadas
Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
Pgina 32 de 33
RTO AEROBIOS
MESOFILOS (RAM)
2 placas directo
RTO O NMP S. aureus

dil 10-1
RTO
MOHOS
LEVADURAS
marcadas con rojo
16.2
Bebidas analcohlicas no carbonatadas

(zumos y nctares pasteurizados y
productos concentrados en su envase
original)
* 2 placas dil 10-1 y 10-2
No
No
16.3
Agua potable, aguas minerales y hielo
2 placas directo y dil 10-1
Rto directo y dil 10-1
No
16.4
Zumos, nectares y bebidas a base de frutas

y verduras no pasteurizados
* 2 placas dil 10-2 y 10-3 (
No
17.1
Caf y sucedneo de caf
No
No
* 2 placas dil 10-1 y 10-2

marcadas con rojo
No
17.2
T y hierbas para infusiones
2 placas dil 10-1, 10-2 y 10-3
No
No

Seccin Microbiologa
Alimentos y Agua
Fecha emisin:
Agosto de 2002
Revisin: 9
Fecha revisin:
11/02/2008
Pgina 33 de 33
PRT-712.02-23
OTROS TIPOS DE MUESTRAS, NO ESTIPULADOS EN EL REGLAMENTO SANITARIO

CLAVE
RTO AEROBIOS MESOFILOS
S. AUREUS
RTO MOHOS Y LEVADURAS
(RAM)
RTO : Agar Baird Parker
Agar OGY
Agar Plate Count
0,3 - 0,3 y 0,4 mL sembrado en 3 placas 1 mL en profundidad en placas en
1 mL en profundidad en placas en
en superficie
duplicado de cada dilucin
duplicado de cada dilucin
NMP serie 3-3-3-:Caldo soya tripticasa
con 10 % NaCl 1% piruvato de sodio
1 mL en cada tubo de cada dilucin
Rto directo
Leche materna
Agua de dilisis
Rto directo
2 placas directo, dil 10-1 y 10-3
marcadas con azul e incubadas a 25 C
No
marcadas con rojo

marcadas con negro e incubadas a 35
C
Aguas contaminadas
Intoxicaciones
Segn tipo de muestra
Rto directo
No
Rto
-1,
-3
y
-5
dil 10 dil 10
dil 10
marcadas con rojo
* En las muestras que han sido tamponadas con buffer pH 7, para realizar la dilucin 10-1 es necesario tomar 2 mL de muestra diluida 1:2 y agregar a un tubo
con 8 mL de agua pertonada 0,1

PRT 023vfg

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PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

EN PLACA METODO BAM ONLINE 2001

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

DILUYENTE: Agua dilucin fosfato buferada de Butterfield pH 7.2 0.1 distribuida

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

7.3.1 Recibir en el Laboratorio de Recuentos, las muestras procesadas en el Laboratorio de

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

Si no es posible leerlas prontamente, guardarlas a 4C por no ms de 24 horas, pero

El recuento de colonias en placa se realiza de acuerdo al siguiente esquema:

Placas normales (25 - 250 colonias):

Seleccionar las placas libres de crecimiento invasivo.

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

7.5.1 Clculo y registro de resultados ( Ver Anexo N 5)

- Utilizar para el clculo los recuentos obtenidos en placas normales

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

= nmero de colonias por ml o g de producto

C = suma de todas las colonias contadas en todas las placas

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

Todas las placas con menos de 25 colonias.

< 2.500 recuento en placa estimado (RPES)

< 2.500 recuento en placa estimado (RPES)

Todas las placas con mas de 250 colonias

( MNPC = Muy numeroso para contar )

Todas las placas con ms de 100 colonias promedio por cm.

> 6.500.000 * ( RPES )

>5.700.000 **( RPES )

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

basado en un rea de placa de 65 cm ( 9 cm )

basado en un rea de placa de 57 cm ( 8,5 cm )

Todas las placas con crecimiento invasivo, presencia de inhibidores o accidente

INFORME DE RESULTADOS (Anexo N 5)

7.6.1 Informar el recuento de aerobios mesfilos (RAM) en unidades formadoras de colonias

REPRODUCIBILIDAD Y ERROR PERSONAL

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

Recuperacin Tiempo retencin

Motivo del cambio

Se corrige PRT-702.02-023 por PRT -712.02023

Se cambia el nmero de revisin 8 por 9 y el

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

En el punto 7.4.2 en el prrafo 7 se agrega al

En el punto 7.4.2.b) en segundo prrafo se 11/02/2008

agrega:... o < 1 por la correspondiente

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

Motivo del cambio

Se cambia 9 mL se agua peptonada 0,1% por

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

Anexo N 1 Requisitos Recuento de microorganismos aerobios mesfilos viables.

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

REQUISITOS "RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS

Warring blender con vaso de vidrio o de acero inoxidable.

Los fondos de las placas Petri deben tener por lo menos 85 mm de

De acero inoxidable o aluminio, con tapa.

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS

REQUISITOS "RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS

Debe mantener las muestras a una temperatura de 0 -4.4 C hasta

Libre de polvo e insectos y adecuados para guardar material.

Los termmetros deben tener un rango de -1,1 a 55 C. La

Debe ser un mesn nivelado, con amplia superficie de trabajo,

De dimensiones adecuadas, con control termosttico para

PROCEDIMIENTO RECUENTO AEROBIOS