Termodinamica y crecimiento

microbiano

EIcrecimiento de 105 microorganismos es un sistema abierto muy complejo en donde se realizan

transferencias de masa y energia, y no es una excepcion que las leyes de la termodinamica y de
la conservacion de las especies atomicas se cumplan en 105 cultivos bacterianos. Sin duda un
fermentador continuo es un sistema muy complicado que requeriria muchas ecuaciones
matematicas para poder definirlo. Sin embargo, sabemos que: a) Todos 105 atomos que entran al
fermentador salen aunque sea siendo parte de otros compuestos. b) Las reacciones que se
desarrollan dentro del fermentador son reacciones de oxido-reduccion principalmente, por 10
tanto se puede realizar un balance de electrones. c) Tanto 105 f1ujosentrantes como 105 salientes
pueden ser referidos a la produccion de la biomasa. La teorfa macrosc6pica utiliza estas tres
consideraciones para reducir el numero de ecuaciones necesarias para definir un fermentador.

La teoria macroscopica, aplicada al crecimiento de 105 microorganismos, esta definida por la

cantidad de biomasa seca en el estado estacionario y considerando que no cambia
la composicion de la biomasa.
EIconcepto de mol-carbon de un microorganismo se define como la cantidad de biomasa
que contiene un mol de carbon. La composicion atomica de un microorganismo esta dad a
por su formula elemental CHal Obl Ncl. Como puede apreciarse, solo el C, H, 0 Y N fueron 105
elementos considerados. Esto es valido, si sabemos que ellos representan 95% de la biomasa
en base seca. Se asume que el microorganismor-crece usando una Fuente de carbon y una
fuente de nitrogeno, la cual puede contener carbon, y produce biomasa y productos
conteniendo carbon y nitrogeno. La biomasa es una copia exacta del organismo, es decir con
la misma composicion elemental. Ademas, durante el crecimiento se intercambian con el
medio ambiente bioxido de carbono (C02), agua (H20) y oxigeno. En la figura 10.1 se muestra
un fermentador continuo en don de crece un microorganismo. Los f1ujos y la composicion de
105 mismos se hallan indicados.

Termodinamica bio/6gica

186

<Po

H2O
<I> H2O

Producto

<l>s

<l>p

CHa30b3Nc3

Biomasa

<l>N

<l>x

CHal0blNcl
CO2
<l>H 0
2
<I>C0

En un caso general, la figura

todos los flujos que contienen
de nitrogeno.

10.1 representa
carbon

un sistema en estado estacionario,

en donde
estim dados en base mol-carbon, a excepcion del flujo

EI vector de flujo <1>se halla definido

por siete magnitudes:

<1>x
<1>s
<1>p
<1>=

<1>N
<1>0
<1>C02
<1>H20

y la composicion

elemental

esta dada por la matriz E:

1
1
1

al

d4

0
1
0

E=

La ecuacion

10.1 considera

cuatro

En un caso general,

los flujos

EI sistema de ecuaciones,

Cl
C2

a4

b3
b4

C3
C4

0
0
2

2
2
1

0
0
0

ecuaciones

tres flujos pueden variar independientemente

de un balance elemental.
conocidos.

b1
b2

a2
a3

de biomasa

lineales entre los siete flujos. Solamente

los restantes deben

(<1>x),sustrato

hasta este punto,

ser definidos

(<1>s)y producto

no puede

ser resuelto,

por medio
(<1>p)resultan
haciendose

necesario

plantear

microorganismos
tal motivo

una serie de ecuaciones

pueden

es posible

EI concepto

analizarse

para este efecto.

como

una serie de reacciones

hacer un balance electronico

de grados de reduccion

Los sistemas de crecimiento

de oxidorreduccion.

de
Por

del sistema.

(a) fue introducido

por Minkevich

Eroshin en 1973,

mejorado por Erickson y colaboradores

durante 1978. Este concepto puede definirse como el
numero de electrones
disponibles
para ser transferidos
al oxigeno en la combustion
del
compuesto.
Este concepto
de grado de reduccion
resulta estrictamente
una convencion.
Debemos recordar que el crecimiento aerobio implica una combustion
del sustrato, siendo el
oxigeno

el aceptor

geno durante

final de electrones.

un cultivo

aerobio,

Los electrones

de cada elemento

disponibles

para ser transferidos

considerado

al oxi-

aqui son:

Estos valores se deducen de la valencia de los elementos.

En el caso del nitrogeno,
se
supone que el grado de reduccion
es -3 porque esta es la valencia predominante
en la
biomasa y es la misma que se encuentra en el amonio. Para un compuesto
de composicion
elemental

CHaObNc,

su grado de reduccion

sera:

Etanol
Bi6xido de carbono

Glucosa

Saccharomyces

4 + 3 + 1/2(-2)

= 4 + (2)(-2)

4 + 2 + (-2)

cerevisiae

(biomasa)

Carbon
Hidrogeno
Oxigeno
Nitrogeno
Balance de los flujos con respecto

a2<1>s + a4<1>N = a 1 <1>x + a3 <1>p

b2<1>s + b4<1>N + 2<1>02 = bl <1>x + b3<1>P + 2<1>C02
C2<1>S + C4<1>N
a la biomasa:
.<1>x = Biomasa

Cl<1>X + C3<1>P

<Px

Rendimiento

Rendimiento

biomasa / sustrato

biomasa / producto

A.

= Yx/s = --;;;;

= Yx/P =

<Px
;

-~

't'P -

Yx/P

<Do = Oxigeno

Balance por grado de reducci6n (oi)

00 <Do = Ox <Dx - Os <Ds + Op <Dp - ON <DN + OC02 <DC02 - OH20 <DH20

La ecuaci6n 10.15 es un balance general del grado de reducci6n. Este grado aparece
como una cantidad conservada y no hay consumo ni producci6n de grados de reducci6n. Es
importante hacer notar que el grado de reducci6n resulta aqui puramente una convenci6n de
calculo y tiene poco que ver con las valencias. Es una opci6n de combinaciones lineales
de balances elementales.

0=<JX<DX-<JS[:X

-4<D

-4<D0 =<Dx

<Do = <Dx
- 4

Os
[ Ox

xIS

]+Op[:X] xlP

---+--Op]
YxlS

'(xiP

[OX -~+~
YxlS

YXIP

Siguiendo las rutinas estandares de algebra usadas hasta ahora, tenemos para el C02 y el
agua las siguientes ecuaciones:

Ejemplo 10.1 EI crecimiento de Saccharomyces cerevisiae, en un cultivo continuo con

glucosa como {mica fuente de carbon y energia, consume 4.26 mol-C de glucosa por
cada mol de biomasa producida. Ademas, se originan 1.92 mol-C de etano!. Calcular el
consumo de oxigeno, si la fuente de nitrogeno es amonio. La composicion elemental de
la biomasa seca de la levadura es CH 1.800.56No.17.
Usando la ecuacion 10.22,

determinando el grado de reduccion de cada flujo,

(jx

= 4 + (1 )(1.8) + (-2)(0.56) + (-3)(0.17) = 4.17

(js

(jp

(biomasa)

= 4 + (1 )(2) + (-2)(1) = 4 (glucosa, CH20)

= 4 + (1 )(3) + (-2)(0.5) = 6 (etanol, CH300.S)

1
Yxis =-=0.235
4.26

1
Yx/P =--=0.521
1.92

1 [

= ---4-

4
6]
moles O2
4.17 - -0-.2-3-5
+ -0-.5-2-1= 0.34-m-o-I---C-bi-o-m-a-sa-

Experimentalmente, se obtuvo un valor de <Po= 0.35 moles 02/mol-C.

EI concepto de grado de reducci6n puede utilizarse facilmente en otros elementos,
aparte del C, H, 0 Y N. Por ejemplo, si se considera al azufre (S) y al f6sforo (P), se puede
considerar como fuente de azufre al H2S04 y de f6sforo al H3P04. Siendo estos dos
compuestos los productos oxidados, su grado de reducci6n debera ser igual a cero y
sabiendo que el hidr6geno es +1 y el oxigeno -2, tenemos entonces que Os= +6 Y Op= +5.
De 10 anterior, tendremos que el grado de reducci6n para un compuesto CHaObNcSdPe
estara dado por:

Cuando se conocen 105 flujos de bi6xido de carbono y oxigeno, en lugar de 105 flujos de
producto y biomasa, el sistema puede resolverse aplicando el mismo procedimiento. Paraeste
efecto podemos utilizar los siguientes cocientes:

Coeficiente respiratorio= QR=

CO

c02

'1'02

2
----0= -",--

02
Consumo de oxigeno= Ro= -S-

o,
=--;p;-

EI coeficiente respiratorio es un valor que relaciona el flujo de C02 que sale del
fermentador y el flujo de oxigeno que entra al sistema. EIconsumo de oxigeno relaciona el
flujo de oxigeno con el consumo de sustrato. Todos estos valores estan dados en mol-C.
Los flujos de biomasa <Pxy de producto <pppueden determinarse facilmente de la siguiente
manera:

La composici6n elemental de la biomasa parece ser independiente del organismo, las

condiciones de cultivo y la tasa de diluci6n, como se puede apreciar en la tabla 10.1, en
donde se presentan composiciones elementales de diferentes organismos cultivados bajo
diferentes condiciones. Esta biomasa presenta un grado de reducci6n promedio, si se usa

NH3 como
cuando

fuente

la fuente

de 4.2, de 5.8 cuando

de nitr6geno,
de nitr6geno

Tabla 10.1 Composici6n

es nitr6geno

elemental

acido

nitrico

es usado

0 de

4.8

atmosferico.

de biomasas

producidas

bajo diferentes

condiciones

de cultivo

Velocidad de
crecimiento
(h-1)
Candida utilis
Candida utilis

CH1.8300.54No.10
CH 1.8700.56No.zo
CH1.8300.46No.19

Candida utilis
Candida utilis
Klebsiella aerogenes

CH 1.8700.56No.zo
CH 1.7500.43No.22
CH 1.7300.43No.Z4
CH1.7500.47No.17
CH1.7300.43No.24

Klebsiella aerogenes
Klebsiella aerogenes
Klebsiella aerogenes
Saccharomyces
Saccharomyces

cerevisiae
cerevisiae

CH1.6400.5zNo.16
CH 1.8300.56No.17

Saccharomyces cerevisiae
Paracoccus denitrificans

CH1.8100.51 NO.17
CH 1.8100.51 No.zo
CH 1.5100.46No.19

Para coccus denitrificans

Escherichia coli

CH 1.7700.49No.24

Pseudomonas Cl2B
Aerobacter aerogenes

CHz.0000.5ZNo.Z3
CH 1.8300.55N 0.Z5

Cultivo aerobio
Saccharomyces

cerevisiae

Saccharomyces
Saccharomyces
Saccharomyces

cerevisiae
cerevisiae
cerevisiae

Saccharomyces
Saccharomyces

cerevisiae
cerevisiae

0.073
0.102
0.144
0.200
0.220
0.259

CHZ.0000.60No.17
CH 1.8900.5ZNo.17
CH1.9500.5ZNo.17

0.010
0.015
0.031
0.061
0.088
0.108

CH1.8500.74No.14
CH 1.7900.60No.15

CH1.5900.49No.17
CH1.6500.56No.18
CH 1.8900.59NO.ZO

Cultivo anaerobio
Saccharomyces
Saccharomyces

cerevisiae
cerevisiae

Sacchar9myces

cerevisiae

Saccharomyces

cerevisiae

Saccharomyces

cerevisiae

Saccharomyces

cerevisiae

Otra consideraci6n
esta constituida

importante

principalmente

tambien cantidades

significativas

CH 1.8900.51NO.16
CH 1.8000.55No.18

que debe hacerse, es el hecho que si bien la biomasa seca

de C, H, 0 Y N como materia combustible,

de cenizas. EI contenido

13.75% de la biomasa seca con un valor promedio

consideradas para convertir

CH1.9800.63No.16
CH1.8300.56No.19

la composici6n

elemental

la biomasa

contiene

de cenizas puede variar de 5.25% a

de alrededor

de 8%. Las cenizas deben ser

en f1ujo de biomasa seca.

Crecimiento sin formacion de producto y

con una fuente simple de nitrogeno
En esta parte, analizaremos un caso restringido, en donde no hay formaci6n de producto (<I>p=
0) y el sustrato no contiene nitr6geno. Ademas, en este caso la fuente de nitr6geno puede ser
NH3, HN03 0 N2. En esta situaci6n s610se consideran seis flujos y s610 se requiere conocer a
dos de ellos para definir al sistema. Tambien, el balance elemental es posible para los cuatro
elementos.
Realizando un balance general de grade de reducci6n se puede calcular el flujo de
oxigeno <1>0= <1>5,
quedando definido por la ecuaci6n siguiente:
1
o=-x

( ---

as
]
- ax

Ys/x

La ecuaci6n 10.32 puede simplificarse, si usamos el termino lIamado eficiencia del

oxigeno, llO:

De las ecuaciones 10.32 Y 10.33 resulta claro que si la eficiencia del oxigeno es igual a
uno (llo = 1) el flujo desde y hacia el sistema sera igual a cero (<1>0
= 0). Sin embargo, si el valor
de la eficiencia del oxigeno es menor a uno (llO < 1), habra un suministro 0 consumo de
oxigeno en el sistema. La combinaci6n de las ecuaciones 10.31 Y 10.32 nos permite determinar
el rendimiento del de la biomasa con respecto al oxigeno:

Yx

=
/0

Biomasa
Oxigeno

= (~]

ax

(~)
1-1]0

En donde Yx/o es la cantidad de biomasa producida (moles-C) por mol de oxigeno

consumido. Si consideramos, como ya se vio, que permanece casi con stante el grade de
reducci6n de la biomasa (ox), entonces debe de existir una relaci6n del rendimiento de la
biomasa (ox/o) y la eficiencia del oxigeno (llO), la cual seria independiente del sustrato, del
organismo y del sistema de cultivo.
Ejemplo 10.2 Una levadura esta creciendo con metanol como fuente de carb6n yenergia.

Durante el crecimiento se producen 0.4 g de biomasa seca por cada gramo de metanol
consumido. La composici6n de la biomasa es CH1.800.5No.2y contiene 5% de cenizas.
Calcular el consumo de oxigeno.
EI rendimiento biomasa/sustrato se puede calcular convirtiendo a cantidades molares:

(0.4)(0.95)(32)
Yx/s =

24.6

)()

- 0.494

ax= 4 + (1.8) (1) + (-2) (0.5) + (-3) (0.2) =.L2

as=

4 + (4) (1) + (-2) (1) = 6

110=Yx/sl ;;

Yx/

o = (~)l~)
(J x

)=(0.494{

0.346 ) = 0.504 moles - C biomasa

1- 0.346
moles 02

= ~(
4.2

1-110

4~2)=0.346

De otra manera, el consumo de oxigeno es de 1.98 moles/mol-C de biomasa a de

76.9 x 10-3 moles/g de biomasa seca.
Ejemplo 10.3 Enun cultivo continuo de levadura, se utiliza glucosa como fuente de carbon
y energia. La fuente de nitrogeno es NH3. EIconsumo de glucosa es de 2.24 moles-C par
mol-C de biomasa formada y el consumo de oxigeno en base mol-C de biomasa es de
0.69 moles. Determinar si hay formacion de producto.
Se tiene un consumo de oxigeno medido de:
1

Yx/o =--=--=145
Yo/x

0.69

1
= -= 0.446
Ys/x
224

Yx/s = --

ax = 4 + (1.79) (1) + (0.56) (-2) + (0.17) (-3) = 4.16

as

= 4

110

+ (2)

(1)

=Yx/s( :;

Y (_4_) (
/
XO

(J

+ (1)

(-2) = 4

)=(0.446)(

110
1-110

4~6 )=0.464

) = _4_(
4.16

0.464 ) = 0.832 moles - C biomasa

1- 0.464
moles 02

Como el valor medido es mayor que el calculado, se supone que posiblemente hay
formacion de algun producto.
La medicion del carbono orgimico total (COT) del f1uido a la salida del fermentador del
ejemplo anterior mostro que, adem as de la biomasa y el C02, se tenia el equivalente a 0.34
moles de carbon por mol-C de biomasa producida. La diferencia en el consumo de oxigeno
entre 10 determinado y 10 calculado es de 0.512 moles de 02 por mol-C de biomasa seca. Si
sabemos que cada mol de oxigeno tiene cuatro electrones disponibles, sabemos que esta

diferencia implica una disponibilidad de, 0.512 x 4 = 2.05 electrones. De donde, 105 electrones
disponibles 0 el grade de reducci6n del producto puede ser estimado de la manera siguiente:
(Jp

2.05
=--=6.03
0.34

Sabemos que el etanol tiene un grade de reducci6n de seis, as! que probablemente este
sea el producto de la fermentaci6n.

Crecimiento anaerobio sin aceptor de electrones externo

Una gran variedad de procesos formadores de productos no requieren del aporte de un aceptor
externo de electrones. En estes casas el sustrato tiene funciones tanto como donador como
aceptor de electrones. Para este caso tam bien se aplican sin ninguna restricci6n 105 balances elemental y de grade de reducci6n. EI sistema se muestra en la figura 10.2. La ecuaci6n
general de balance de grade de reducci6n queda como sigue:

H2O

<I> H2O

Producto

<I>p

cr3=crp

<I>X

crJ=crX

CHa30b3Nc3

Biomasa
CHa,Ob,Nc,

Figura 10.2 Sistema de flujos para el ana/isis macrosc6pico del crecimiento microbiano anaerobio sin aceptor de
electrones.

EIvalor de llO se calcula de la ecuacion 10.33 Y esta relacion es muy util para el analisis de
estos procesos.
Otro factor importante en el crecimiento anaerobio es la produccion de C02. Este flujo
puede deducirse a partir de un balance de carbon y de la ecuacion 10.34, quedando:

Crecimiento anaerobio con aceptor de electrones externo

Un gran numero de compuestos pueden sustituir al oxigeno como aceptor de electrones en
los procesos de crecimiento microbiano. Algunos ejemplos son la reduccion del bioxido de
carbono a metano, usando hidrogeno gaseoso; la reduccion del sulfato a sulfuro, y la reduccion
del nitrato a nitrito 0 a nitrogeno molecular.
Estos casos tambien pueden ser tratados facilmente en terminos de eficiencia del
oxigeno,o mejor dicho en eficiencia electronica del crecimiento. Dicha eficiencia se indicara
como llO, como en el caso de la eficiencia del oxigeno. EI consumo de un aceptor de
electrones durante el crecimiento, sin formacion de producto puede ser obtenido de la
siguiente ecuacion:

x/ =(:x

)(,~~oJ

donde K es una constante que depende del numero de moles de electrones que son transferidos
por mol de aceptor de electrones y YX/e es el rendimiento de biomasa en terminos de aceptor
de electrones (mol-C/mol). Para el oxigeno, el valor de K es de cuatro, pero existe una gran
variedad de aceptores de electrones (tabla 10.2).

02 + e- -+ 2 02C02 + 4 H2 -+ CH4 + H20

504

-+
-+

NH3
N02

N02

-+

1
2N2

CH2

-+

-+ $2-

N03
N03

"3 CH30,j, + "3 C02

moles/mol
moles/mol
moles/mol
moles/mol
2 moles/mol

4
8
8
8

02
C02
sulfato
nitrato
nitrato

Ejemplo 10.3 Un organismo con composicion elemental de CH l.S00SNO.2 crece

anaerobicamente usando glucosa como fuente de carbon y amonio como fuente de
nitrogeno. EI nitrato es el aceptor de electrones y se producen 0.6 moles-C de biomasa
por cada mol-C de sustrato. EI nitrato es reducido a nitrogeno gaseoso. lCuanto nitrato
es reducido por mol de biomasa producida?
La eficiencia de oxigeno se determina con la ecuacion 10.33:
1]0 = Yx/s(

:;

)=(0.6)(

4~2)=0.63

La reduccion del nitrato en nitrogeno tiene una K de 5, usando la ecuacion 10.39:

YX/e =

(:J(

1:~0)

= ( 4~2) ( 1~~.~3) = 2.03

Entonces por cada mol de biomasa producida se reducen 0.49 moles de nitrato.

Los principios de la termodinamica revisados en 105 primeros capitulos del presente libro,
pueden aplicarse al crecimiento microbiano. Los cambios de ental pia 0 calor, asi como 105
cambios de energia libre durante el crecimiento de los microbios pueden ser determinados
realizando una serie de calculos numericos. Suponiendo la idealidad, podemos decir que la
entalpia 0 la energia libre de Gibbs del sistema sera igual a la suma de las entalpias 0 energias
libres parciales molares de 105 componentes, Estos valores parciales molares dependeran
unicamente de las condiciones de temperatura, presion y concentracion del componente en
cuestion. Asi por ejemplo, la energia libre de Gibbs parcial molar (potencial quimico) sera
funcion de la concentracion del componente en cuestion.

-=fli

+RTln .()
Ci

=fli

donde f.!i es el potencial quimico 0 energia libre molar del compuesto i y donde f.!? es la
energia libre molar del compuesto a una concentracion de 1 M. Para efectuar esta estimacion
es necesario hacer dos consideraciones: La ental pia y la energia libre deben ser tratadas como
energias estandares, 0 sea a concentraciones de 1 M, a presion atmosferica y a 298 oK de
temperatura. La segunda consideracion concierne al hecho de que en crecimientos aerobios
la combustion del sustrato produce C02 y H20, de donde el bioxido de carbona, el agua y el
mitrogeno elemental no pueden suministrar energia para 105 sistemas vivos. Entonces, podemos
decir que el contenido energetico disponible sera equivalente a la entalpia de combustion
(llHcl y energia libre de combustion (llGod del sustrato.
Lasentalpias y las energias libres de combustion pueden ser referidas a mol-C y relacionadas
al grado de reduccion. Un analisis estadistico (tabla 10.3) nos muestra de la existencia de las
siguientes relaciones:
llHg= 775 a [KJ/mol-C]

[10.41]

llCg= 94.4 a+ 86.6 [KJ/mol-C]

[10.42]

En ambos casos, el error estandar es de alrededor de 18 KJ/mol-C.

Termodinamica

y crecimiento

Tabla 10.3 Calor de combustion

y energia Iibre de combustion

(1 M, 298 oK, 1 atm y pH 7)

Compuesto

Acido f6rmico
Acido acetico
Acido oxalico
Acido propi6nico
Acido lactico
Acido fumarico
Acido malico
Acido succinico
Acido butfrico
Acido citrico
Acido palmftico
Metano
Etano
Eteno
Etino
Metanol
Etanol
iso-Propanol
Butanol
Etilenglicol
Glicerol
Glucitol
Glucosa
Acetona
Formaldehfdo
Acetaldehfdo
Alanina
Arginina
Asparagina
Acido glutamico
Acido aspartico
Glutamina
Glicina
Leucina
Isoleucina
Fenilalanina
Serina
Treonina
Tript6fano
Tirosina
Valina
Guanina
Hidr6geno

Formula

CH202
C2H402
C2H204
C3H602
C3H603
C4H404
C4H60S
C4H604
C4HS02
C6Hs07
C16H3203
CH4
C2H6
C2H4
C2H2
CH40
C2H60
C3HsO
C4H100
C2H602
C3HS03
C6H1406
C6H1206
C3H60
CH20
C2H40
C3H7N02
C6H14N402
C4HSN203
CsHgN04
C4H7N04
CSHlON203
C2HsN02
C6H13N02
C6H13N02
C9HllN02
C3H7N03
C4HgN03
CllH12N202
C9HllN03
CSHllN02
CsHsNsO
H2

Grado de
reduccion
2
4
1
4.67
4
3
3
3.5
5
3
5.75
8
7
6
5
6
6
6
6
5
4.67
4.33
4
5.33
4
5
5
5.67
4.5
4.2
3.75
4.8
4.5
5.5
5.5
4.78
4.33
4.75
4.73
4.56
5.4
4.6
2

197

microbiano

en condiciones

estandar

KJ/mol
~Hg

~Gg

~Hg;O'

~Gg;O'

281
894
327
1533
1377
1448
1444
1599
2173
2147
9800
818
1467
1331
1235
693
1319
1946
2592
1170
1643
3084
2872
1734
501
1123
1642
3786
1999
2315
1686
2628
1011
3565
3564
4647
1502
2130
5649
4483
2920
2612
238

255
876
246
1529
1369
1337
1329
1493
2194
1963
9989
892
1562
1413
1310
798
1369
1989
2680
1160
1663
3049
2807
1793
572
1168
1707
3744
1936
2250
1608
2570
974
3588
3588
4653
1455
2104
5632
4437
2920
2500
286

140.5
111.8
163.5
109.4
114.8
120.7
120.3
114.2
108.7
119.3
106.5
102.3

127.5

104.8
110.9
123.5
115.5
109.9
108.1
108.0
117.0
117.4
118.6
119.7
108.4
125.3
112.3
109.5
111.3
111.1
110.2
112.4
109.5
112.3
108.0
108.0
108.0
115.6
112.1
108.6
109.2
108.2
113.6
119.0

109.5
123.0
109.2
114.1
111.3
110.8
106.7
109.7
109.1
108.6
111.5
111.6
117.8
130.1
121.3
114.1
110.5
111.7
118.1
118.7
117.3
117.0
112.1
142.9
116.8
113.8
110.0
107.6
107.1
107.2
107.1
108.2
108.7
108.7
108.2
112.0
110.7
108.3
108.1
108.2
108.7
143.0

Tabla 10.3 (Continuacion.) Calor de combustion

en condiciones
(1 M, 298

Compuesto

Formula

Grafito
Mon6xido de carbono
Amonio
Acido nitrico
Hidrazina
Acido sulfhidrico
Acido sulfuroso
Acido sulfurico
Biomasa
La ecuacion

oK,

Grado de
reduccion

4
2
3
-5
4
2
-4
-6
CH1.800.SNO.2 4.8

C
CO
NH3
HN03
N2H4
H2S
H2S03
H2SO4

energia libre de combustion

estandar

1 atm

pH 7).
KJ/mol

~Hg

~Gg

394
257
329
7.3
602.4

394
283
383
-30
622
247
-329
-602
560

323
-249.4
-507.4
541.2

10.41 establece que el calor de combustion

con el grado de reduccion

del compuesto

~Hg

/a

/a

98.5
128.5
109.7

98.5
141.5
127.7

-1.5
150.6
161.5
62.4
84.6
112.8

6.0
155.5
123.5
82.3
100.3
116.7

esta correlacionado

en base mol-C. Mientras

~Gg

directamente

que la ecuacion

10.42

establece que existe una proporcionalidad

entre el grado de reduccion y la energia libre de
combustion. Esta ultima relacion no es lineal y tiene una desviacion que varia desde 164 para un
grado de reduccion de 1, hasta 102 para un compuesto con grado de reduccion de 8. Esta desviacion
sistematica entre la entalpia

la energia libre de combustion

esta descrita por la entropia.

La figura 10.3 muestra los valores de entropia de combustion

calculados por medio de
la ecuacion 10.43 Y correlacionados
al grado de reduccion de todos los compuestos
de la

aI

III

<aE
1- .
-:>

2.5

5.0

Grado de reduccion,

cr

Figura 10.3 Contribucion de la en tropia, TDoS (KJ/molC), a la entalpia de combustion, en condiciones

funcion del grado de reduccion, cr, de los compuestos de la tabla 10.2.

estandar, en

tabla 10.3. Hay una clara tendencia y la contribuci6n

entr6pica se aumenta cuando
incrementa el grado de reducci6n.
Existen compuestos en los cuales sus calores de combusti6n no siguen la ecuaci6n 10.41,
Por ejemplo, el oxigeno y el acido dtrico que presentan grados de reduccion de -4 y
-5, respectivamente, siendo calores de combustion cercanos a cero. Por esta razon, estos
compuestos son aceptores de electrones efectivos.

Debido al incremento de la entropia en los sistemas, la energia libre que ingresa a un sistema
nunca es menor de la energia libre que deja al sistema. De esta situacion, podemos definir a
la eficiencia termodinamica del proceso, en relacion al balance de la energia libre entrante y
saliente. Sin embargo, existe el problema de que la energia libre no puede ser definida por si
sola y requiere para esto ser definida por medio de un valor de referencia. Si nosotros escogemos
arbitrariamente un valor basal, entonces pod em os calcular facilmente la eficiencia termodinamica de la manera ilustrada en la figura 10.4. La relacion entre la energia libre saliente del
sistema y la energia libre entrante es la eficiencia termodinamica,
~C2

77th = ~C
1

Energfa Iibre entrando

al sistema

Energfa Iibre saliendo

del sistema

Ahora aplicaremos la teoria termodinamica al crecimiento aerobio sin formacion de producto.

Tratandosede una combustion y con fundamento a 10 discutido anteriormente, pod emos proponer
que los cambios de energia libre de combustion para el H20, C02 Y N2 son igual a cero:
~GH20 = ~GC02 = ~GN2=

De esta manera, nuestro balance de energias libres de combustion quedara:

[10.45]

donde 0 es la disipacion

de energia dentro del biorreactor

y donde las participaciones

bioxido de carbono y nitrogeno elemental no aparecen. Sustituyendo

10.44 obtendremos la eficiencia termodinamica:
T)c

Combinando

esta ecuacion

del agua,

en la ecuacion

cDx 6Cx
cDs 6Cs + cDN 6CN

con nuestro balance elemental

de masas, tenemos,

6CX

1]c =

6Cs
Yx/s

+ (~)
c4

Si referimos nuestro analisis termodinamico

entalpica,

6CN

[10.48)

a la ental pia de combustion

podremos

definir

la eficiencia

1]H

en donde

C1

C4

son 105 contenidos

6Hx
(
6Hs + ~)6HN
Yx/s
c4

de nitrogeno

de la biomasa

respectivamente.
En un sistema de cultivo sin aporte de p.nergia mecanica,
entalpia (figura 10.5) estara dado por la siguiente

y de la fuente

0 sea sin agitacion,

de nitrogeno,
el balance de

igualdad:

cDs6Hs + cDN6HN= cDx6Hx + cDo

donde cDo es el f1ujo de calor del sistema 0 calor disipado

durante el cultivo.

cDO= cDs6Hs + cDN6HN - cDx6Hx

<1> CO

Figura 10.5 Diagrama de f1ujo de enta/pia en un sistema de crecimiento microbiano sin agitacion.

La ecuaci6n 10.52 nos permite estimar la producci6n de calor durante el crecimiento, si se

conocen el calor de combusti6n de la biomasa y la eficiencia entalpica del cultivo.
Regresemos a la ecuaci6n 10.41, la cual nos relaciona a la entalpia de combusti6n y el
grado de reducci6n:
!'..Hx

115 ax

[10.53]

!'..Hs

115 as

[10.54]

!'..HN = 115 d4aN

[10.55]

La sustituci6n de las ecuaciones anteriores en la ecuaci6n de eficiencia entalpica, nos

queda:
1150"x
1JH

1150"s
Yx/s

+115(

C~~4

<1>Q= 4<1>0

)O"N

1150"
o"x

460 <1>0

La ecuaci6n 10.58 nos indica el valor constante del calor producido durante el crecimiento
con respecto al consumo de oxigeno. Esta proporcionalidad tiene un valor de 460 Kl/mol 02.
Dicha relaci6n puede ser facilmente generalizada para todos 105 cultivos aerobios.
La relaci6n del flujo de calor y del flujo de oxigeno (ecuaci6n 10.58) se deriv6 para un
proceso aerobio, sin formaci6n de producto y usando una fuente de carb6n que no contiene
nitr6geno. Ahora, haremos el analisis para un proceso de crecimiento microbiano aerobio, con
la formaci6n de producto. Comenzando con un balance del grado de reducci6n, tenemos:

Si la fuente de nitr6geno es Cd4Ha40b4Nc4,la ecuaci6n anterior puede escribirse de la

siguiente manera:

<1>sC2= <1>,\JC4
+ <1>xc 1 + <1>pC]
combinando las dos ecuaciones anteriores:
<1>s(Ys= <1>Nd4(YN=
<1>X(YX + <1>p(Yp + 4<1>0
multiplicando por 115 y aplicando la ecuacion 10.39 en su forma:
(Y.
I

tlHj

=--

115

<1>stlHs + <1>NtlHN
= <1>xtlHx+ <1>ptlHp
+ 4<1>0
combinando con la ecuacion 10.50 del balance de calor, obtendremos:

Con esto queda demostrado que la relacion es general y su validez depende de que
sea valida la igualdad tlH; = 115 OJ.Una clara excepcion es cuando se usa acido nitrico
(HN03) como fuente de nitrogeno, debido a que este compuesto no obedece ala ecuacion
anterior, tlHj = 6oj.
Ejemplo 10.4 Un organismo crece en acido acetico como (mica fuente de carbon yenergia.

La fuente de nitrogeno es el amonio y no hay formacion de productos durante el crecimiento. La composicion elemental de la biomasa es CH1.800.sNo.2.Calcular la produccion de
calor si el rendimiento biomasa/sustrato es de 0.4.
Existen dos maneras de solucionar este problema.
a) Calculando Tjo por medio de la ecuacion 10.33:

ryo

= Yx/s(

::

Sabemos que Ox= 4.2 yOs = 4 , de donde

1]0 = 0.4(4.2 ) = 0.42

Ahora podemos calcular el consumo de oxigeno usando la ecuacion 10.34:
Yx/o =(~)(~)=~(
(Yx
1-1]0

42

0.42 )=0.69
1-0.42

mol-C biomasa/mol

sabiendo que,
I/Jo

= _1_

Yx/o

= 1.45moles 02 / mol- C biomasa

02

<1>Q
= 460 <1>0
= (460) (1.45) = 667 KJ/ mol-C de biomasa
b) Lasegundavia de solucion es usandael balancede entalpiasde combustion (ecuacion 10.50)
<1>s
~Hs + <1>N
~HN = <1>x
~Hx + <1>Q
en donde el flujo de nitrogeno puede estimarse a partir del balance de este elemento:

EIflujo de sustrato esta dado par:

s = ~=_1_=

f/J

Yx/s

0.4

2.5 mol-C /mol-C

biomasa seca

Del balance de entalpias de combustion:

<1>0
= <1>s
~Hs + <1>N
~HN - <1>x
+ ~Hx
<1>0
= <1>s
( 1150s) + <1>N
( 1150N) - <1>x
( 11 50x)
<1>0=115 [(2.5) (4) + (0.2) (0) - (1) (4.2)] = 667 KJ/ mol-C biomasa seca
5i se sustituyen a la ecuacion de balance de entalpias los valores de entalpias de combustion
presentados en la tabla 10.3 se obtiene un resultado de 612 KJ por mol-C de biomasa seca
producida. Esta diferencia menor de 10% del valor se debe a que el calor de combustion del
acido acetico esta sabreestimado en la ecuacion 10.64.
Ejemplo 10.5 La produccion de levadura (Saccharomyces cerevisiae) en un fermentador
continuo consume glucosa a razon de 0.096 mol-C por gramo de biomasa seca producida.
La composicion elemental de la biomasa es CH 1.7900.56No.17y esta contiene 8% de
cenizas. Hay formacion de etanol a razon de 0.0141 mol-C por gramo de biomasa. La
fuente de nitrogeno usada es el amonio, NH3. Calcular la produccion de calor.

PMbioma,a

= 12 + 1.79 + (0.56) (16) + (0.17) (14) = 25.13

f/Js=

(0.096)(25.13)
0.92

- 2.622f/Jx

(0.0141)(25.13)
f/Jp=-----=0.385f/Jx
0.92

(C1)

f/JN= (C )f/Jx=0.17f/Jx
4

t/Jo

= ( ~~

)[4.16

+ (0.385)(6) - (2.622)(4)] = 1.0045t/Jx

<PQ= 460 <Po(460) (1.0045 <Px)=462 <Px

Crecimiento con aceptores de electrones diferentes del oxigeno

En secciones anteriores mencionamos que el oxfgeno no es el unico aceptor de electrones
que puede sostener el crecimiento microbiano. Los nitratos 0 105 sulfatos tambien pueden
hacerlo. La propiedad caracterfstica es que durante la transferencia de un electron del sustrato
al aceptor de electrones se produzca una ganancia de energfa libre de Gibbs. Esta ganancia
de energfa libre puede, entonces, utilizarse para el crecimiento del microorganismo. La energfa
puede ser disipada para cumplir con la irreversabilidad 0 para transferir atomos de carbon de
un nivel de baja energfa a uno maS alto. La tabla 10.4 muestra 105 valores de energfa libre
de Gibbs que son disponibles cuando se transfiere un mol de electrones de la glucosa al
aceptor de electrones durante el proceso de reducci6n. Todos estos valores son para
condiciones estandar y a pH de 7.
Como se puede observar, 105 aceptores basados en azufre ofrecen bajas ganancias de
energfa, seguidos por 105 compuestos de nitrogeno y siendo el oxfgeno el que presenta la
ganancia mas elevada de energia libre por mol de electrones transferidos.
Ejemplo 10.6 La produccion de biomasa de un organismo creciendo con oxigeno como
aceptor de electrones es de 0.55 mol-C de biomasa por mol-C de sustrato. EIsustrato es
glucosa y la fuente de nitrogeno el amonio. Calcular la produccion de biomasa, si el
aceptor de electrones es nitrato, el cual se reduce a N2 y si el amonio sigue siendo la
fuente de nitrogeno. En ambos casas no hay formacion de productos.
EI numero de electrones transferidos al oxigeno durante el crecimiento esta dado por:

e-

[_4_ 0.55

4.19]C\>x

= 3.08C\>x

EI cambio de energia libre de Gibbs en la transferencia de una mol de electrones al

oxigeno es de 118.5 Kj, de donde:
L1Go=(118.5) (3.08) <1\= 365 KJ/ mol-C biomasa
Cuando el nitrato es el aceptor de electrones, la energia libre es de 111.9 KJ por mol
de electrones transferidos del sustrato al nitrato
L1Go=(111.9) (3.08) <Dx=344.6 KJ/ mol-C biomasa
Para producir una biomasa con la misma composici6n elemental a partir del mismo
sustrato se requiere la transferencia de la misma cantidad de energia libre de Gibbs. Por
10 que la producci6n de biomasa en el cultivo con nitrato estara dado por la siguiente
ecuaci6n:

(t.C

Yx/s =

N~J

(0.55)

(3446)

= --'-

(0.55) = 0.52 mol- C biomasa / mol- C sustrato

365

L1CN,

Como se puede observar, el rendimiento es muy diferente al obtenido con oxigeno

como aceptor de electrones.

Tabla 10.4 Ganancia de energia libre de Gibbs durante la transferencia de una mol de
electrones de la glucosa a diferentes aceptores de electrones
Aceptor de
electrones
5
503~
503~
504=
504=
504~
N2
N02N03N03N0302

Producto
H25
5
H25
503=
5
H25
NH4+
NH4+
N02NH4+
N2
H2O

Moles de etransferida

~G (reacci6n)
(KJ)

2
4
6
2
6
8
6
6
2
8
5
4

144.6
171.9
-21.2
123.4
150.7
79.1
435.5
162.9
598.4
559.5
473.9

27.7

L1G(mol e-)
(K) / mol e-)
13.9
36.2
28.7
-10.6
20.6
18.9
13.2
72.6
81.5
74.8
111.9
118.5