Curso de Microbiologa General

de Enrique Iez
ACCIN DE LOS AGENTES FSICOS
SOBRE LAS BACTERIAS (I)
NDICE:
1. INTRODUCCIN: EFECTO DE LOS FACTORES AMBIENTALES SOBRE LAS BACTERIAS
2. EFECTO DE LA TEMPERATURA
2.1. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE EL CRECIMIENTO
2.2. EFECTO LETAL DEL CALOR
2.3. EFECTO DE LAS BAJAS TEMPERATURAS
3. LIOFILIZACIN
4. DESECACIN

BARRA DE EXPLORACIN: Microbiologa General

1. INTRODUCCION: EFECTO DE LOS FACTORES

AMBIENTALES SOBRE LAS BACTERIAS

Debido a su pequeo tamao y a su estilo de vida individual, las clulas procariticas sufren los
cambios ambientales de un modo mucho ms directo e inmediato que las clulas de los organismos
pluricelulares. A lo largo de miles de millones de aos, las bacterias han venido estando sometidas a
diversas presiones ambientales, y han respondido evolutivamente creando numerosos mecanismos de
adaptacin. Actualmente, las nicas formas de vida existentes en determinados ambientes extremos
son exclusivamente procariticas. Desafiando a nuestras ideas preconcebidas de lo que es la vida
"normal", encontramos extraordinarios seres vivos unicelulares viviendo a pH muy cidos o muy
alcalinos, medrando en salmueras y salinas, o reproducindose a temperaturas de ms de 100C y a
grandes presiones...En este captulo y en el siguiente veremos algunas de estas notables adaptaciones.
Hasta ahora hemos venido considerando el crecimiento de las bacterias en funcin de su fondo
gentico, en relacin con los nutrientes, y en unas hipotticas condiciones ideales (ptimas). Sin
embargo, el trabajo experimental con microorganismos ha de tener en cuenta los factores
ambientales, es decir, una serie de agentes fsicos y qumicos que
1. modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de
dichos factores pueden llegar a ocasionar la muerte de microorganismos;
2. condicionan la distribuicin de los microorganismos en sus ecosistemas y hbitats naturales;
3. permiten a los humanos controlar el crecimiento microbiano, por medio de la fijacin de
parmetros para:
a. la mutagnesis,
b. la esterilizacin y desinfeccin,
c. la quimioterapia.

No todos los microorganismos toleran del mismo modo un determinado factor ambiental. As, unas
determinadas condiciones pueden ser nocivas para una especie bacteriana, y en cambio ser neutras o
beneficiosas para otra.
Antes de abordar el estudio de distintos agentes ambientales, conviene distinguir entre los efectos
que un determinado agente puede tener sobre la viabilidad y los efectos que pueden simplemente
afectar al crecimiento, a la capacidad de diferenciacin (si la hubiera) o de reproduccin.
Los principales tipos de factores a considerar se pueden desglosar de la siguiente manera:
Agentes fsicos

Agentes qumicos

Temperatura (tema actual, 17)

Desinfectantes y antispticos (tema 19)

Desecacin (tema 17)

Quimioterpicos de sntesis (tema 20)

Radiaciones (tema 18)

Antibiticos (tema 20)

Ondas sonoras (tema 18)

Presin hidrosttica (tema 18)
Presin osmtica (tema 18)

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA
2.1. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE EL CRECIMIENTO
La temperatura es uno de los parmetros ambientales ms importantes que condicionan el
crecimiento y la supervivencia de los microorganismos.
La temperatura afecta a la velocidad de crecimiento (y, por lo tanto al tiempo de generacin, g). Cada
bacteria (y suponiendo que el resto de condiciones ambientales se mantienten constantes) muestra
una curva caracterstica de tasa de crecimiento en funcin de la temperatura, donde podemos
distinguir tres puntos caractersticos llamados temperaturas cardinales:

temp0 mnima: por debajo de ella no hay crecimiento;

temp0 mxima: por encima de ella tampoco existe crecimiento;

temp0 ptima: permite la mxima tasa de crecimiento (o sea, g mnimo).

El margen entre la temperatura mnima y la mxima se suele llamar margen de crecimiento, y en

muchas bacterias suele comprender unos 40 grados.
La temperatura mnima se puede explicar en funcin de:

un descenso de la fluidez de la membrana, de modo que se detienen los procesos de

transporte de nutrientes y el gradiente de protones;

un aumento de la viscosidad del citoplasma;

un debilitamiento de los enlaces hidrfobos de las protenas(debido a cambios fsicos en la

estructura del agua de solvatacin) que provoca inactivacin de enzimas alostricos y de

actividad funcional de los ribosomas. En muchos casos los polisomas no se ensamblan.
Por encima de la temperatura mnima la tasa de crecimiento va aumentando proporcionalmente hasta
alcanzar la temperatura ptima, debido a que las reacciones metablicas catalizadas por enzimas se
van aproximando a su ptimo. En dicha temperatura ptima las enzimas y reacciones se dan a su
mxima tasa posible.
A partir de la temperatura ptima, si seguimos subiendo la temperatura se produce un descenso
acusado de la tasa de crecimiento hasta alcanzar la temperatura mxima. Dicha temperatura refleja:

desnaturalizacin e inactivacin de protenas enzimticas esenciales;

colapsamiento de la membrana citoplsmica;

lisis trmica de la bacteria.

Obsrvese en el grfico que la temperatura ptima est ms cerca de la mxima que de la mnima.
Cada especie o cepa bacteriana tiene temperaturas cardinales distintas, de modo que una bacteria
puede presentar una temperatura ptima superior a la temperatura mxima de otra, o inferior a la
temperatura mnima de una tercera.
Segn el rango de temperaturas al que pueden crecer las distintas bacterias, se pueden establecer tres
tipos principales:
1. psicrfilas o crifilas: crecen a partir de entre -5 a 5oC.
a. Las llamadas psicrfilas obligadas tienen t0 ptima a 15-18oC y t0 mxima a19-22oC,
como por ejemplo Flavobacterium. La bacteria Polaromonas vacuolata,
recientemente aislada en aguas heladas de la Antrtida es lo que pudiramos llamar un
psicrfilo extremo: tiene su ptimo de crecimiento en 4C, y es incapaz de crecer a
14C.
b. Las psicrfilas facultativas (tambin llamadas psicrotrofas) presentan t0 ptima en
torno a los 20-30oC y mximas a los 35oC.
2. Las mesfilas presentan t0 mnimas a los 10-15oC, ptimas a los 25-40oC y mximas entre
35 y 47oC. La mayor parte de las bacterias (incluyendo las patgenas) pertenecen a esta
categora.
3. Las termfilas presentan mnimos a 25oC, ptimos a 50-75oC y mximos entre 80 y 105oC.
Dentro de esta categora se suele distinguir las termfilas extremas (=hipertermfilas), que
pueden llegar a presentar ptimos cercanos a los 100oC, y que taxonmicamente pertenecen

al dominio de las Archaea.

a. Las termfilas estrictas (o estenotermfilas), con ptimos por encima de los 80C son
de hecho incapaces de crecer a menos de 37oC, como las citadas arqueas
(ej.,Thermoproteus, Pyrococcus, Pyrodictium). La arquea Pyrolobus fumarii,
habitante de los humeros termales submarinos tiene su ptimo nada menos que a
105C y puede llegar a aguantar 113C, y parece detiene su metabolismo (por "fro") a
la "agradable" temperatura de 90C (!)
b. Las termfilas facultativas (o euritermfilas) pueden crecer a menos de 37oC, como p.
ej. Thermus aquaticus.
Veamos brevemente unos cuantos casos de bacterias (y algn microorganismo eucaritico) adaptado
a medios con temperaturas extremas, y sus respectivas adaptaciones a dichas condiciones:
Ejemplos de medios permanentemente fros son la mayor parte de las aguas ocenicas (cuya
temperatura media es de unos 5oC, pero que en las profundidades alcanzan slo 1-2oC por encima de
cero) y las reas permanentemente heladas del rtico y de la Antrtida.
En los medios helados existen pequeas bolsas o microcavidades de agua lquida, donde pueden
medrar algunos microorganismos. Un ejemplo no bacteriano muy caracterstico es el alga de las
nieves (Chlamydomonas nivalis), que llega a conferir color rojo a la nieve en algunas zonas de
montaa a mitad de la estacin estival.
Los psicrotrofos (psicrfilos facultativos) son ms abundantes, ya que estn adaptados a soportar
grandes oscilaciones trmicas, y en verano pueden crecer a unos 30oC-40C.
Algunas bacterias y hongos pueden crecer en alimentos (carne, leche, frutas y hortalizas) que se
guardan en frigorficos, alterando las cualidades organolpticas e incluso, echndolos a perder (una
experiencia que casi todos hemos tenido).
Las principales adaptaciones bioqumicas a medios fros exhibidas por estos microorganismos son:

enzimas ms resistentes al fro;

sistemas de transporte adaptados a bajas temperaturas;

los fosfolpidos de la membrana celular aumentan la proporcin de cidos grasos insaturados

(y en algunas bacterias, poliinsaturados); ello supone que la membrana sigue en su estado
semifluido, evitndose su congelacin.

Los hbitats naturales con temperaturas permanentemente altas (por encima de 45-50oC) estn
restringidos a unas pocas zonas de la biosfera, normalmente relacionadas con fenmenos volcnicos:

fuentes termales volcnicas terrestres (en zonas de EE UU, Japn, Nueva Zelanda e Islandia);

fuentes termales submarinas: los llamados "humeros" (fumarolas hidrotermales) asociados a

las grandes dorsales ocenicas);

fumarolas.
Como ejemplo "clsico", muy conocido por documentales de divulgacin, recordemos
que en el famoso Parque Nacional de Yellowstone, en EE UU, existe la mayor
concentracin mundial de fuentes volcnicas, con giseres que emiten a ms de
100oC, siendo esta temperatura bastante constante, con oscilaciones de +/- 1 2oC.
Cuando esta agua sale, lo hace a punto de ebullicin. El riachuelo que genera va
bajando su temperatura en su recorrido, de modo que se genera un gradiente de
temperatura en el que se pueden estudiar fascinantes comunidades microbianas
adaptadas a esas diversas temperaturas. All fue donde T.D. Brock descubri la
eubacteria termfila Thermus aquaticus, de la que se extrae la ADN polimerasa
termorresistente empleada en la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Recientemente se est recurriendo a usar la polimerasa de una arquea
hipertermfila, Pyrococcus furiosus, que funciona muy bien a 100C.

Si confeccionamos una tabla donde se agrupen distintos seres vivos en funcin de las temperaturas
mximas a las que pueden vivir comprobaremos (Fig.1) que los procariotas, como conjunto aguantan
ms que los eucariotas. Dentro de los procariotas, las bacterias no fotosintticas crecen a mayores
temperaturas que las fotosintticas. Obsrvese que existen bacterias con ptimos a 55, 70 e incluso
100oC (el asombroso Pyrodictium crece a 110oC). Como ya dijimos, el "rcord" de termofilia lo
tienen ciertas arqueobacterias (como la que acabamos de citar), y crecen a esas temperaturas a gran
velocidad (tiempos de generacin g del orden de 1-7 horas).
Se han aislado bacterias termfilas en medios artificiales, como calentadores de agua domsticos e
industriales.
Las principales adaptaciones bioqumicas a altas temperaturas en clulas vegetativas bacterianas
son:

enzimas termorresistentes. Algunas de ellas tienen un interior molecular muy hidrfobo;

ribosomas termorresistentes;

membranas ricas en cidos grasos saturados, que permiten enlaces hidrofbicos ms fuertes.

En Arqueas hipertermfilas los lpidos son muy especiales: en vez de basarse en steres de
cidos grasos con el glicerol, se trata de teres de hidrocarburos unidos al glicerol (el enlace
ter es ms resistente). Algunas, adems, en vez de la tpica bicapa lpdica, exhiben
unamonocapa bioqumica de C40-bifitanil-tetrateres (resultado de unirse "cola con cola" dos

C20-fitanil-diteres), que condicionan una extrema resistencia a agentes ambientales.