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Longitud del tubo: Longitud que separa al objetivo del ocular, usualmente
en milmetros (160, 170, 220) o con el smbolo (8) para objetivos con
correccin infinita.
Espesor del cubre-objeto a emplear: Ha sido estandarizada a 0,17mm pero
hay diversos espesores lo cual produce aberraciones. Algunos objetivos
poseen un collar de correccin en las lentes internas para realizar la
correccin y se denominan CR, Corr, w/corr, o pueden tener una escala
graduada mvil para el ajuste.
Distancia focal: Distancia entre el punto focal y la lente frontal del
objetivo, expresada en milmetros.
Propiedades pticas especiales: En caso de objetivos que en ciertas
condiciones tienen resultados ptimos (para luz polarizada, contraste de
fase, entre otros).
Rosca del objetivo: La mayora de objetivos estn estandarizados de
acuerdo a la Royal Microscopy Society para garantizar una compatibilidad
universal y se designan con las siglas RMS, sin embargo, algunos
fabricantes tiene sus propias dimensiones. El dimetro general es de 20mm,
pero los objetivos Leica y Nikon son de rosca ms amplia y slo funcionan
en sus microscopios. M25 y M32 designan roscas de 25 y 32 mm
respectivamente.
Medio de inmersin: Algunos objetivos ameritan el uso de medios de
inmersin y para ello se emplea un cdigo de colores o las abreviaciones
Oil, Oel (aceite); HI (homogeneous immersion); W, Water, Wasser (agua) y
Gly (glicerol).
Cdigo de colores: Algunos fabricantes marcan sus objetivos con anillos de
colores para facilitar la identificacin del aumento (ver tabla 4-1).
Medio de inmersin
Aceite
Glicerol
Agua
Especial o multiuso
Aumento
1x, 2.5x
2x, 2.5x
4x, 5x
10x
16x, 20x
25x, 32x
40x, 50x
60x, 63x
100x, 250x, 200x
un hilo de metal (platino, carbn, tungsteno, entre otros) que al paso de una
corriente elctrica se pone incandescente y sirve para alumbrar (50).
Con el uso de la bombilla elctrica se suprime este espejo y los microscopios
pueden utilizarse en cualquier lugar. Sin embargo, algunos modelos de
microscopios actuales, desde los ms sencillos y econmicos hasta los ms
sofisticados, an poseen un espejo que sirve para desviar la luz producida
por la bombilla, en el caso que sta no se encuentre alineada con la platina.
El sistema de iluminacin est constituido por la fuente de luz, el
condensador y un diafragma o iris. Como regla general, el sistema de
iluminacin est colocado debajo de la platina y la finalidad es de iluminar
mediante luz transmitida. En la mayora de los casos el estudio de las
preparaciones histolgicas se hace por transiluminacin. En otros casos muy
especficos se emplea el mtodo de luz reflejada, en el cual se ilumina la
superficie del espcimen mediante epi-iluminacin (ver captulo 3). La
fuente de luz emite una radiacin que es recogida por un dispositivo
denominado condensador, que a su vez forma un cono luminoso necesario
para la visualizacin con objetivos de mayor aumento.
4.5.1.-Fuentes de luz
Aparte de la luz solar, empleada en microscopios sencillos con espejo,
existen numerosas fuentes de iluminacin artificial, tanto para la
observacin rutinaria como para la microfotografa. La luz artificial presenta
numerosas ventajas tales como la constancia, la uniformidad y la
intensidad; adems es muy favorable para los mayores aumentos. Existen
varios tipos de fuentes de luz artificial:
Bombillas de tungsteno y halgenas: La mayora de microscopios de luz
estn dotados de lmparas de este tipo cuyo poder oscila entre 10W y
100W. Se emplean como fuentes principales o accesorias. Estas lmparas
son radiadores trmicos que emiten una luz continua en un espectro
comprendido entre 300 1200 nm. Estn constituidas por un bulbo de
cristal relleno de un gas inerte y un filamento de tungsteno que es activado
por una corriente elctrica produciendo una importante cantidad de luz y
calor. Varan mucho en tamao, diseo y forma (68). Producen una luz
blanca pero incrementan la intensidad del azul al rojo. La luz puede ser muy
brillante para la observacin y se reduce con filtros que disminuyen la
intensidad, denominados filtros de densidad neutra, disminuyendo la
intensidad sin alterar los colores. Tambin se emplean filtros de colores que
compensen el color rojo, de manera que se pueda observar la imagen del
espcimen sobre un fondo iluminado neutro, blanco y claro. El vidrio azul
corrige el tinte amarillo que tiene la luz incandescente y se obtiene una luz
suave y agradable que aumenta la definicin.
Lmparas de arco elctrico: Son lmparas que pueden contener gases
(vapor de mercurio, xenn o circonio) y son empleadas para proveer una luz
monocromtica con filtros apropiados, ideal para microfotografa en blanco
Figura 4-15. Diagrama que representa una lente bi-convexa cercana al ojo y
a una flecha pequea (objeto en estudio) cuyos conos dibujados
Figura 4-16. Sin la lente colocada en fg el ojo ver la flecha con el ngulo
formado por las lneas punteadas b y c, formando la imagen bc. Los rayos
bf y cg emanados de las extremidades de la flecha son refractados por la
lente hacia el ojo en direccin f y g, los cuales crean un ngulo visual mayor
que hace que la fecha se vea ms grande (d-e).
Lo que se conoce sobre las propiedades de las lentes permitir comprender
el principio del microscopio compuesto, denominado as, en oposicin a la
lupa (microscopio simple) en base a que est conformado por dos sistemas
de lentes, los cuales deben estar centrados, es decir, tener el mismo eje
ptico. El primer sistema, cercano al objeto en estudio, se denomina
objetivo, posee una distancia focal muy corta y es posible colocar el objeto
un poco ms all de su punto focal para obtener una imagen real, invertida
y aumentada.
El sistema de lentes a travs del cual el observador examina se denomina
ocular y funciona como una lupa que aumenta la imagen real producida por
el objetivo. La distancia entre el ocular y el objetivo debe ser calculada de
manera que la imagen real obtenida por el objetivo se forme entre el ocular
y su punto focal (11). El aumento del microscopio depender en principio de
la longitud focal del objetivo. Mientras ms pequea sea esta longitud y el
objeto se acerque al objetivo, ms grande ser la imagen real. El aumento
tambin depende de la distancia focal del ocular y mientras ms corta sea
esta, mayor ser el aumento (fig. 4-17).
Figura 4-17. Esquema simplificado que muestra el trayecto que siguen los
rayos emanados del espcimen en estudio y su paso a travs de las lentes
objetivo y ocular para la formacin de las imgenes. La flecha ab
corresponde al espcimen, que est colocado un poco por delante del foco
(f) del objetivo, el cual forma una imagen real, aumentada e invertida en
ab. Esta imagen se forma por dentro del foco (f ) de la lente ocular. El ojo
del observador percibir a travs del ocular la imagen virtual, aumentada y
derecha ab de la imagen real ab.
4.7.-Accesorios del microscopio