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Guia para Evaluacion de Lodos Activados PDF
Guia para Evaluacion de Lodos Activados PDF
PARA LA ELABORACIN DE
ANLISIS
MICROBIOLGICOS DE
FANGOS ACTIVADOS DE
ESTACIONES
DEPURADORAS DE AGUAS
RESIDUALES
A nuestras familias,
por soportar estoicamente
las horas extras dedicadas
a estos estudios.
A todos aquellos que
se inicien en este campo,
tan til y apasionante.
Las exigencias ambientales de la sociedad se recogen en una legislacin cada vez ms estricta,
que necesita un reciclaje continuo de los tcnicos y la autoformacin de stos en un campo
novedoso que proporciona mejores medidas de control operacional. La Bioindicacin se muestra
como un ensayo con grandes posibilidades de futuro, ampliando las salidas profesionales de
aquellos que se acerquen a profundizar en su estudio. Se abre un campo de trabajo a las nuevas
generaciones de bilogos, como sistema ptimo de control de la depuracin y de los procesos
implicados, y los coloca en vanguardia de las distintas profesiones que abarcan este tema. Su
predisposicin y conocimientos en Biologa les ayudan a adquirir el manejo del protocolo de
manera rpida y eficiente y les permite integrar el concepto de ecosistema depurador. Por otra
parte, esta publicacin est adecuada a profesionales de otras especialidades que se adentren en el
mbito de las aguas residuales y que quieran adquirir conocimientos actuales sobre el control
biolgico de los procesos.
El objetivo de esta gua metodolgica es el de presentar un protocolo claro y prctico, que
permita a los profesionales del sector realizar los ensayos necesarios para el anlisis del fango
activado. Nos proponemos tambin posibilitar un complemento a la formacin universitaria, ms
concretamente a los futuros profesionales en el mbito de las aguas residuales. Para ello, nuestra
labor ha sido la de compilar informacin, en muchos casos desperdigada, estructurarla y
someterla a evaluacin mediante la prctica. En esta documentacin se presentan tambin
resultados y conocimientos generados por el GBS desde su formacin, en 1998.
NDICE
DEFINICIONES
1.- DEFINICIN DEL SISTEMA
INTRODUCCIN
EL ECOSISTEMA DEPURADOR
LA BIOINDICACIN
BIBLIOGRAFA
15
INTRODUCCIN
TCNICAS MICROSCPICAS
BIBLIOGRAFA
PROTOZOARIAS
BACTERIANAS
OTROS ASPECTOS
BIBLIOGRAFA
25
INTRODUCCIN
BACTERIAS FILAMENTOSAS
PROTOZOOS
METAZOOS
BIBLIOGRAFA
36
104
TCNICA ANALTICA
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
BIOINDICACIN APLICADA
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
BIBLIOGRAFA
PROTOZOOS
BACTERIAS FILAMENTOSAS
OTROS ASPECTOS
123
145
ii
151
FIGURAS Y TABLAS
Captulo 1
FIGURAS
Figura 1: Tratamiento convencional de las aguas residuales
Figura 2: El ecosistema depurador
Figura 3: Diversidad bitica en fangos activos
Figura 4: Relacin entre el tamao flocular y la edad de fango (Garrido et al., 1988)
Figura 5: Estructuracin de la biomasa activa en fangos activados
Figura 6: Cadenas trficas en fangos activados
TABLAS
Tabla 1: Parmetros legislados para vertidos de aguas residuales
Captulo 2
FIGURAS
Figura 1: El microscopio ptico (Microscopio ptico Zeiss Axiolab)
Figura 2: Visin al microscopio ptico bajo el objetivo 10X durante la calibracin del micrmetro
Figura 3: Uronema sp. en campo claro (A) y bajo contraste de fases (B). Uronema sp. en campo claro en un
medio adicionado con lugol (C)
TABLAS
Tabla 1: Problemas que se presentan habitualmente durante la observacin microscpica y que desencadenan en
una mala imagen
Captulo 4
FIGURAS
Figura 1: Esquema de un protozoo de la Clase Phitomastigophora
Figura 2: Euglena pisciforme
Figura 3: Euglena viridis
Figura 4: Euglena tripteris
Figura 5: Gnero Phacus
Figura 6: Gnero Trachelomonas
Figura 7: Gnero Astasia
Figura 8: Gnero Urceolus
Figura 9: Orden Peranematales
Figura 10: Esquema de un protozoo de la Clase Zoomastigophora
Figura 11: Familia Multiciliidae
Figura 12: Familia Mastigamoebidae
iii
Captulo 5
FIGURAS
Figura 1: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de SS (n=109)
Figura 2: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DQO (n=109)
Figura 3: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DBO (n=67)
Figura 4: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de nitrgeno y fsforo (n=67)
TABLAS
Tabla1: Categoras del ndice de Fango
Tabla 2: Cuantificacin de microorganismos filamentosos (EMASESA, 1997)
Tabla 3: Valoracin del IF
Tabla 4: Relacin de datos obtenidos en el estudio de cada uno de los participantes
Captulo 6
FIGURAS
Figura 1: Rutas degradativas
Figura 2: Metabolismo del carbono en fangos activados
Figura 3: Metabolismo del nitrgeno en fangos activados
Figura 4: Metabolismo del fsforo en fangos activados
Figura 5: Metabolismo del azufre en fangos activados
Figura 6: Relacin entre el tamao flocular y los rendimientos depuradores
Figura 7: Relacin entre la carga msica y el tamao flocular
Figura 8: Aprovechamiento del sustrato por bacterias filamentosas y no filamentosas
Figura 9: Distribucin de los organismos en funcin de los MLSS y el oxgeno presente en el reactor
Figura 10: Distribucin de los organismos entre la materia orgnica del influente y el tiempo de residencia en el
reactor biolgico
Figura 11: Reparto de los porcentajes de grupos de organismos en funcin de las caractersticas operacionales
(CM y MLSS)
TABLAS
Tabla 1: Relacin de bacterias filamentosas ms comunes en fangos activados con sus asociaciones
operacionales
Tabla 2: Tipo de alimentacin de diferentes especies de protozoos en funcin del tamao de partcula
Tabla 3: Tipo de alimentacin de distintos tipos de protozoos
Tabla 4: Frecuencia de aparicin de determinados organismos en funcin del rango de DBO5 de salida
Tabla 5: Citas bioindicadoras asociadas a protozoos
Captulo 7
NOTA: Las imgenes fotogrficas pertenecientes a este captulo se han nombrado como "lminas fotogrficas"
y estn enumeradas en la introduccin de este captulo
Captulo 8
FIGURAS
Figura 1: Representacin de resultados para el ndice de Madoni, en un ejercicio interlaboratorio
TABLAS
Tabla 1: Resultados de un ejercicio interlaboratorio
vi
INTRODUCCIN
El GRUPO BIOINDICACIN SEVILLA lo componen:
EVA RODRGUEZ GONZLEZ, Licenciada en Biologa (1988-1993). Jefe de Laboratorio de la EDAR
Tablada (Sevilla). S. E. Aguas Filtradas, S.A.
LAURA ISAC ORIA, Licenciada en Biologa (1992-1997). Tesis Doctoral: Determinacin de la
Actividad biolgica en procesos biolgicos aerobios. Grupo de Tratamiento de Aguas Residuales
(Universidad de Sevilla)-EMASESA.
NATIVIDAD FERNNDEZ MORIA, Licenciada en Qumica (1983-1988). Jefe de Laboratorio de la
EDAR Copero (Sevilla). S.E. Aguas Filtrada, S.A.
M DOLORES SALAS RODRGUEZ, Licenciada en Biologa (1986-1991). Explotacin EDAR
Guadalquivir (Sevilla). Itsmo94.
CARMEN JIMNEZ GAMERO, Licenciada en Qumica (1988-1993), Tcnico de Control de Calidad en
residuales. EMASESA.
Estos profesionales, relacionados todos con el sector de la depuracin, se renen en 1998 para
formar GBS partiendo de un objetivo comn: el estudio y difusin de los ensayos microbiolgicos en
fangos activados, como sistema de control efectivo y prctico del estado de actividad del reactor.
Todos ellos aportan al grupo su experiencia adquirida a lo largo de varios aos de dedicacin
profesional a varios aspectos directamente relacionados con el campo de las aguas residuales: puestas en
marcha, control analtico y explotacin de distintas EDARs, etc. y al medio ambiente en general.
Tras recopilar y revisar una amplia informacin bibliogrfica, desarrollan sus propios protocolos
de anlisis bilogico, los cuales someten a evaluacin de forma prctica, implantndolos en el control de
diversas estaciones depuradoras. Entonces elaboran un Manual de trabajo, que mediante interlaboratorios
programados de forma peridica, someten a continua revisin. Crean una base de bioindicacin, un lbum
fotogrfico y una gua bsica de protozoos. Parte de este trabajo se encuentra publicado en revistas
tcnicas y se ha presentado en congresos de mbito nacional e internacional como ponencias, psters, etc.
El grupo contina trabajando en diversos proyectos, con el fin de seguir profundizando y
desarrollando el anlisis microbiolgico en fangos activos (www.grupobioindicacionsevilla.com).
Este documento tiene como objetivo ofrecer una gua de trabajo en la que se rena toda la
informacin de inters, segn nuestro criterio, para realizar un anlisis microbiolgico de fangos activos.
Para ello se ha elaborado material diverso y se ha recopilado informacin de distintas fuentes,
que se encuentran citadas en el texto y desarrolladas en la bibliografa de cada captulo.
Sin embargo, existen varios apartados de esta gua (tinciones, manual de trabajo y claves
identificativas), donde la influencia de determinada bibliografa nos obliga a citarla como documento base
aparte:
Madoni, P. (1994). A Sludge Biotic Index (SBI) for the evaluation of the Biological
Performance of Activated Sludge Plants based on the Microfauna Analysis. Water Research
28, 1, 67-75.
Madoni, P. (1988). I protozoi ciliati nel controllo di efficienza dei fanghi attivi.
DEFINICIONES
% de reduccin: Porcentaje de eliminacin de contaminantes (SS, DQO y DBO5) en una E.D.A.R. en funcin
de las entradas y salidas a la misma.
Bacterofago: Organismo cuya alimentacin est basada en las bacterias.
Bulking filamentoso o esponjamiento: Alteracin en la sedimentabilidad de los fangos activos por crecimiento
excesivo de las bacterias filamentosas.
Bulking viscoso: Alteracin en la sedimentabilidad del fango producida por la excrecin masiva de polmeros
extracelulares, consecuencia del metabolismo estresado de las bacterias ante dficits de nutrientes.
Caractersticas macroscpicas: Caractersticas del fango activado observables a travs del ensayo de la V30.
Caractersticas microscpicas: Caractersticas del fango activado apreciables a travs de una observacin
microscpica.
CM: Carga msica; kg. de DBO5 de entrada al reactor biolgico en funcin de los MLSS disponibles
(alimento/comensales).
Crecimiento disperso: Desarrollo de bacterias libres en el espacio interflocular que generan aumentos de
turbidez en el clarificado.
Crecimiento epiftico: Crecimiento de bacterias sobre la superficie de otra, generalmente filamentosa. Puede
ser de forma transversal o en paralelo.
DBO5: Demanda biolgica de oxgeno por incubacin durante cinco das en oscuridad y a 20 C.
DQO: Demanda qumica de oxgeno por oxidacin con dicromato potsico.
Ecosistema: Unin de individuos de muchas especies, en el seno de un ambiente de caractersticas definidas e
implicados en un proceso dinmico e incesante de interaccin, ajuste y regulacin, expresable, bien como
intercambio de materia y energa, bien como una secuencia de nacimientos y muertes y uno de cuyos resultados
es la evolucin a nivel de las especies y la sucesin a nivel del sistema entero (Margalef, 1989).
Edad del fango: Relacin entre los MLSS y los slidos extrados mediante los fangos en exceso.
E.D.A.R. Estacin depuradora de aguas residuales. Equivalente a ERAR: Estacin recuperadora de aguas
residuales.
Efluente: Vertido depurado.
Escala de los saprobios: Sistema de clasificacin de los organismos en funcin del consumo de DBO5 de las
MLSS.
Medio anaerobio: Medio dnde no existe ninguna forma de oxgeno disponible por las bacterias y el
metabolismo es fermentativo.
Medio anxico: Medio dnde no existe oxgeno disuelto, pero existe oxgeno combinado formando parte de
molculas, como los NO3, como aceptores finales para el metabolismo bacteriano.
Medio xico: Medio dnde existe oxgeno disuelto; equiparable a medio aerobio.
Nicho ecolgico: Funcin de una especie dentro del ecosistema.
Oligosaprobios: Escala de saprobiedad para aquellos organismos asociados a consumos de DBO5 de su hbitat,
bajos.
Organismo auttrofo: Organismo que se nutre slo de compuestos inorgnicos que asimila mediante el
proceso denominado fotosntesis.
Organismo hetertrofo: Organismo que slo se nutre de sustancias elaboradas por otros seres vivos. Existen
diversos tipos de heterotrofia: depredacin, parasitismo, simbiosis, saprofitismo y comensalismo.
Organismo quimiorganotrofo: Aquel que obtiene energa para sus procesos metablicos mediante una sntesis
qumica de compuestos orgnicos sencillos (hidrgeno, metano...).
Pinpoint floc: Escasa formacin flocular, por vertidos o por corresponderse con la fase de formacin, que
determina un flculo de muy pequeo tamao, "en cabeza de alfiler", con mala decantacin.
Polisaprobios: Escala de saprobiedad para aquellos organismos asociados a consumos de DBO5 de su hbitat,
altos.
Ramificacin falsa: Bacteria filamentosa que presenta ramificacin, pero se puede apreciar la discontinuidad
citoplasmtica.
Ramificacin verdadera: Bacteria filamentosa que presenta ramificacin en la que existe continuidad
citoplasmtica.
Reactor biolgico o cuba de aireacin: Tanque de grandes dimensiones dnde se encuentra un cultivo
biolgico aerobio concentrado gracias a los fangos en exceso recirculados, que se encuentra alimentado por el
agua residual y es mantenido mediante un aporte extra de oxgeno.
Rosetas: Estructura radiada en forma de flor que generan las bacterias filamentosas del azufre, cuando su
metabolismo es alto.
SS : Slidos en suspensin.
INTRODUCCIN
El proceso que se desencadena en un cauce por un aporte extra de materia orgnica y nutrientes, en
cuyo estudio ha profundizado la limnologa, es por desgracia un fenmeno de actualidad, debido al desarrollo
industrial y al crecimiento de las urbanizaciones y de las explotaciones agrcolas. Estos factores han generado
tanto la degradacin de los medios acuticos, como el aumento en la necesidad de los recursos hdricos, cada da
ms escasos.
En la naturaleza se produce una serie de transformaciones cclicas en las que intervienen los
productores primarios mediante la asimilacin del CO2 a travs de la fotosntesis, consumidores primarios y
secundarios, as como la cadena inversa de estos procesos, es decir, la descomposicin y mineralizacin de los
restos orgnicos y organismos muertos, realizada por hongos y bacterias. De hecho, se calcula que el 90 % de la
mineralizacin de los tomos de carbono orgnico es el resultado de las actividades metablicas de hongos y
bacterias (Stanier et al., 1996).
Los organismos presentes en un cauce receptor, organizados en funcin de diversas circunstancias
externas e internas, se encuentran representados en funcin del grado de madurez del sistema, el cual se
relaciona a su vez con la complejidad y organizacin de la comunidad (Margalef, 1983). Cuando se produce una
entrada de carga orgnica en un cauce receptor, estos organismos reaccionan acelerando el metabolismo
descomponedor, teniendo en cuenta, entre otros factores, la velocidad de entrada de oxgeno en el sistema. Esta
nueva situacin genera una serie de cambios de especies hacia el rango de los polisaprobios.
Tanto la marcha del proceso como la ordenacin en el espacio de comunidades saprobias a las que da
lugar esta alteracin, dependen del material orgnico de entrada, cuya concentracin se puede expresar como
DBO5 o de una manera ms general, como cantidad total de oxgeno que se requiere para su oxidacin
(Margalef, 1983). El resultado es una nueva situacin en la que, para hacer frente a la alteracin producida, se
han modificado las cadenas trficas establecidas, reducindose las interacciones.
Este proceso natural, en el que no tiene porqu intervenir la mano del hombre y que se produce
espontneamente en los cauces, es equiparable al sistema biolgico utilizado para la depuracin de aguas
residuales mediante fangos activos. En dicho sistema de depuracin, los organismos presentes en el agua
residual son empleados como inculo en un ambiente controlado, en el que se permite el desarrollo de una
biocenosis capaz de aumentar la velocidad de mineralizacin de la materia orgnica.
Este sistema de depuracin fue denominado en 1914 por Arden y Lockett como lodos activos. El
proceso de tratamiento biolgico de aguas residuales por lodos activos, persigue el desarrollo de una biomasa de
microorganismos capaz de degradar y flocular la materia orgnica (Esteban, 1989). Este cultivo biolgico en
1
suspensin, adems, puede ser separado en los decantadores secundarios del agua depurada, que ser devuelta al
cauce receptor sin prejuicios para ste, contribuyendo al mantenimiento del caudal ecolgico. Este fango
activado o cultivo biolgico, tras ser concentrado y sometido a tratamientos posteriores, puede ser reutilizado en
diversos fines.
En resumen, el tratamiento convencional de aguas residuales urbanas (Figura 1), tiene como objetivo la
biodegradacin de la materia orgnica presente en el influente (colector), a partir de un tratamiento preliminar
de tipo fsico (pretratamiento y tratamiento primario) y un proceso de depuracin biolgica en el tratamiento
secundario. En el tratamiento biolgico o secundario se produce la asimilacin de la materia orgnica a partir de
un proceso de biofloculacin y metabolizacin selectiva de nutrientes (nitrgeno y fsforo), en el que interviene
un cultivo microbiolgico constituido principalmente por bacterias, que han sido seleccionadas en el agua
residual gracias a la modificacin de los parmetros operacionales (grado de oxigenacin, agitacin, tiempo de
residencia....).
AGUA
RESIDUAL
PRETRATAMIENTO
Y
TRATAMIENTO 1
REACTOR
BIOLGICO
FANGOS 1
ESPESAMIENTO
DECANTACIN 2
AGUA
TRATADA
FANGOS 2
DIGESTIN
DESHIDRATACIN
EVACUACIN
DE LODOS
Figura 1: Tratamiento convencional de las aguas residuales urbanas. Lnea de agua (Pretratamiento, tratamientos primario y secundario).
SS, DQO,
DBO
OXI
SS, DQO,
DBO
LUZ
NUTRIENTES
MLSS
VOLUMEN REACTOR AEROBIO
EMIGRACIONE
INMIGRACIONE
BIOCENOSIS
BIOCENOSIS
NUTRIENTES
OXGENO
BACTERIAS
SALIDA
ANIMALES MUERTOS
Y EXCRECIONES
CONSUMIDORES SECUNDARIOS
CIL BACTERIFAGO
CONSUMIDORES PRIMARIOS
FLAGELADOS
CILIADOS
CIL OMNVORO
PRODUCTORES PRIMARIOS
CIL CARNVORO
DESCOMPONEDORES
NUTRIENTES
ECOSISTEMA
ECOSISTEMA
Figura 2: El ecosistema depurador. Equivalencia entre un sistema natural (derecha) y el ecosistema artifical generado en una
E.D.A.R. con tratamiento biolgico (izquierda). CIL: ciliados.
En general, las poblaciones bacterianas y protozoarias siguen una curva normal de crecimiento, que se
ve alterada por la influencia de otras. Este crecimiento tiene varias fases:
-
Latencia: que es el tiempo que transcurre hasta alcanzar una velocidad de crecimiento constante.
Estacionaria: el nmero de clulas viables permanece estable por limitaciones medio ambientales,
como puedan ser las concentraciones de determinados oligoelementos, aportados por las aguas
brutas y que pueden determinar el potencial enzimtico de las clulas al actar como
biocatalizadores de las funciones esenciales.
(Margalef, 1989), que vendr impuesta por las necesidades operacionales y depuradoras de cada E.D.A.R. La
diversidad bitica presente en los fangos activados, est constituida fundamentalmente por los grupos de
bacterias, protozoos y pequeos metazoos (Figura 3).
Estos grupos de organismos reaccionan, junto con la materia orgnica del medio, formando estructuras
ecolgicas de menor tamao, con capacidad tanto depuradora, como diferenciadora de fases. Estas estructuras
ecolgicas mnimas se denominan flculos. Un flculo est compuesto por materia orgnica, bacterias
filamentosas y formadoras de flculo y constituye, en s mismo, el ncleo de la depuracin.
El estudio del flculo (estructura, compactacin, etc.) genera informacin sobre su desarrollo y sobre la
poblacin de bacterias filamentosas, lo que permite diagnosticar y prever el estado y rendimiento del proceso.
La concentracin de bacterias filamentosas que se encuentran en el flculo es fundamental, ya que crea el
entramado sobre el que se asientan el resto de componentes floculares. Un descenso excesivo en la
concentracin de filamentos, provoca un debilitamiento y rotura del flculo, que al ser agitado en el reactor, se
rompe y escapa con el efluente en forma de microflculo (lmina 78). En el caso contrario, una concentracin
elevada provoca un aumento de la superficie flocular, lo que dificulta la decantacin y promueve la liberacin
de slidos con el efluente (lminas 76-77). En el apartado de alteraciones de los fangos activados (Captulo 7),
se detallan los principales episodios que se pueden producir por modificaciones en la estructura del flculo.
ORGANISMOS
DEPURADORES
BACTERIAS
F OR MADORAS DE FLCULO
NO FORM DE FLCULO
FILAMENTOSAS
PROTOZOOS
FLAGELADOS
GRANDES FLAG
PEQ FLAG
AMEBAS
CON TECA
SIN TECA
CILIADOS
NAD ADOR
REPTANTE
METAZOO
ROTFERO
NEMTODO
GASTROTR ICO
ANLIDO
SSIL
TAMAO FLOCULAR ( m)
2000
m
1500
1000
500
0
1
DAS
Figura 4: Relacin entre el tamao flocular y la edad de fango (Garrido et al., 1988).
De esta forma, una estructura ptima de flculo se presenta con un ncleo de materia orgnica
condensada, dnde se produce un ambiente anxico y un exterior aerobio, con la consiguiente distribucin
espacio-temporal de los organismos implicados. Asociados a esta estructura, se encuentran los protozoos
ciliados, fundamentalmente reptantes y ssiles, estableciendo cadenas trficas ms o menos complejas segn el
estado y funcionamiento de la E.D.A.R.
Los distintos niveles de estudio en los que podemos dividir nuestro ecosistema partiendo de la
compartimentacin ms amplia del sistema, pueden ser (Figura 5):
En el reactor biolgico aerobio, se generarn una serie de relaciones trficas en funcin de las
caractersticas del influente y de las condiciones ambientales y operacionales. Los parmetros determinantes
dentro de las caractersticas del influente seran los nutrientes junto con la DQO y DBO5 biodegradables
(soluble y particulada) y su proporcin con las no biodegradables o inertes.
Como explotadores, debemos modificar los parmetros de operacin de forma que manteniendo los
costes y los rendimientos de depuracin, podamos generar la mayor cantidad de interrelaciones posibles, ya que
esto permitir una estabilizacin en nuestro ecosistema y un aprovechamiento mejor de los flujos de energa.
La recirculacin de fangos, mantendr una biomasa activa en el reactor, que junto con la edad del
fango, niveles de oxgeno y tiempos de residencia, permitir mantener en estado ptimo la definicin del
8
ecosistema en su unidad bsica: el flculo de fango activo. Esta estructura presenta como primer determinante
de su formacin los parmetros fijos de construccin, que limitarn en parte las relaciones, y a ellos se sumarn
las condiciones ambientales de la zona que, en principio, son ms difciles de controlar.
El siguiente paso de estudio de nuestro ecosistema, sera la divisin entre el flculo y el espacio
interflocular (Figura 5). En esta compartimentacin se encontraran los protozoos ciliados nadadores (lminas
19-21 y 23-25), flagelados (lminas 1-2) y amebas (lminas 3-9), asociados al espacio interflocular junto con
bacterias dispersas (lminas 79-80). Los organismos asociados al flculo son los ciliados reptantes, ssiles y
bacterias formadoras de flculo (lminas 81 y 85).
Las bacterias filamentosas (lminas 41-62) y los metazoos (lminas 34-40) comparten ambos
ambientes. Segn sea el estado del ecosistema, estos organismos aparecern situados en uno u otro espacio.
FLCULOS
FLAGELADOS
NCLEO
EXTERIOR
BACT FORMADORAS FLCULOS
BACTERIAS FILAMENTOSAS
CILIADO REPTANTE
CILIADO NADADOR
BACTERIAS DISPERSAS
CILIADO SSIL
BACTERIAS FILAMENTOSAS
M.ORGNICA NO FLOCULADA
ESPACIO INTERFLOCULAR
En el flculo, los ciliados reptantes llevan a cabo la eliminacin de bacterias de la superficie mediante
su ingesta (lminas 22 y 26-29), a la vez que mejoran la oxigenacin gracias a su desplazamiento sobre el
fculo, favoreciendo la transferencia de oxgeno a las zonas interiores. Las condiciones del sustrato natural de
este grupo, el flculo, van a determinar, entre otros factores, su nivel de poblacin.
Los ciliados ssiles contribuyen a dar consistencia al flculo (lminas 11-18), mejorando su
decantabilidad y disminuyendo con su alimentacin el nmero de bacterias dispersas libres en el espacio
interflocular.
METAZOOS
PROTOZOOS
PREDADORES
(CARNIVOROS)
PROTOZOOS
(PREDADOR
OMNIVORO)
PROTOZOOS
BACTERIOFAGOS
PROTOZOOS
FLAGELADOS
BACTERIAS
MATERIA
ORGANICA
LA BIOINDICACIN
A nivel ecolgico, el estudio de este ecosistema bajo condiciones de estrs, aporta una informacin
valiossima ante una situacin de desequilibrio (ambiental, operacional o variaciones del influente), pero no deja
de ser un estudio terico de funcionamiento. Sin embargo, si queremos aplicar este tipo de evaluacin al control
10
del proceso depurador, tenemos que encontrar tcnicas que permitan obtener informacin adicional a los
resultados aportados por los parmetros fsico-qumicos.
Es ms fcil y rpido determinar la cantidad de materia oxidable presente en un agua, que hacer un
censo de los organismos presentes (Margalef, 1983), ya que la tarea de identificacin es ardua y precisa de
conocimientos previos sobre morfologa, tinciones, etc. Sin embargo, en el estudio de la contaminacin, el uso
de indicadores biolgicos se justifica cuando el factor o agente que se desea medir, no es asequible por otros
mtodos (Margalef, 1983), como es el caso de los vertidos industriales. O simplemente, permite al operador
afrontar una situacin desde otro punto de vista, que aporte informacin para reducir las alteraciones que se
puedan producir.
Por otra parte, la legislacin en materia de aguas residuales (Directiva 91/271/CEE, RDL 11/1995 y RD
509/1996) exige unos rendimientos de depuracin que requieren de fuertes inversiones en materia de
infraestructura, para dotar a todas las poblaciones de ms de 2.000 h-eq de sistemas de depuracin. Dentro de
esta directiva se diferencian vertidos a cauces con riesgo de eutrofizacin (Tabla 1), dnde adems de los lmites
de SS, DBO5 y DQO se limitan las emisiones de nutrientes (nitrgeno y fsforo).
PARMETRO
DBO5
DQO
SS
CONCENTRACIN
25 mg/L
125 mg/L
35 mg/L (> 10000 h-eq)
% RED MNIMO
70-90 %
75%
90%
FSFORO TOTAL *
80%
NITRGENO TOTAL *
70-80 %
Ya que el objetivo de la normativa implica una relacin entre la explotacin de las depuradoras y el
mantenimiento de los sistemas acuticos, es recomendable disponer de herramientas que aporten otra visin
sobre procesos especficos, como son la eliminacin de nitrgeno (procesos de nitrificacin/desnitrificacin) y
la eliminacin de fsforo (alternancia de selectores anaerobio/anxico/xico), donde los parmetros fsicoqumicos pueden ser insuficientes.
Si a esto aadimos que en plantas pequeas las posibilidades de laboratorio y personal son escasas, se
plantea entonces como sistema alternativo adecuado, el control biolgico. Una persona especializada puede
controlar varias plantas pequeas con una dotacin de laboratorio mnima (microscopio y reactivos para
tinciones) y con un control de reducidos parmetros fsico-qumicos.
11
Este sistema lo constituira la bioindicacin, como control de las variaciones de organismos asociados a
fenmenos de causa-efecto. Valorando slo la etimologa de la palabra, podemos deducir que la bioindicacin se
trata de un estudio relacionado con la vida y con su posible aplicacin a determinar o indicar alguna
circunstancia. Esta aproximacin es bastante correcta, aunque no podemos quedarnos ah, ya que interesa que el
organismo que escojamos concurra en un margen estrecho de condiciones y que adems sea de fcil
identificacin. Esto implicara una deduccin lgica de asociacin del organismo (vegetal o animal) a una
condicin ambiental determinada.
Especies que concurrieran en un nicho superpuesto no podran ser organismos bioindicadores. Sin
embargo, si la superposicin es baja o nula, la aparicin de una especie permitir determinar un recurso sin
necesidad de realizar su anlisis. La abundancia relativa en un hbitat puede ser a menudo usada como gua para
indicar su importancia en la estructura ecolgica y el uso que hace de sus recursos.
Si tomamos la clasificacin de los seres vivos, dada su diversidad, podramos desalentarnos a la hora de
utilizar la bioindicacin como herramienta de trabajo. Sin embargo, nuestro campo esta circunscrito a unas
condiciones determinadas. Y as como los lquenes son bioindicadores de la calidad atmosfrica, los protozoos y
secundariamente el tipo de bacteria predominante, son bioindicadores de la calidad del agua depurada y del
estado biolgico de las cubas de aireacin en tratamiento convencionales, o del estado de las lagunas, biodiscos,
etc., en tratamientos no convencionales. Los estudios han demostrado claramente que la identificacin y
enumeracin de los protozoos en el licor mezcla de los fangos activos, puede proveer de una informacin rpida
de las condiciones de operacin de la planta (Al-Shahwani y Horan, 1991; Esteban et al., 1991; Madoni et al.,
1993; Salvad y Gracia, 1993; Salvad, 1994; Salvad et al., 1995).
Por lo tanto, para un buen control de las estaciones depuradoras, el estudio microscpico de los fangos
activos supone una gran ayuda, ya que aporta una visin inmediata de las condiciones imperantes.
Por lo general, la mayora de los protozoos presenta un amplio abanico de condiciones
medioambientales, sin embargo en lodos activados no se puede negar su selectividad para determinados
ambientes, existiendo numerosos estudios que utilizan a estos organismos como bioindicadores:
Protozoos como bioindicadores: Esteban (1989), Al-Shahwani y Horan (1991), Esteban et al..
(1991), Madoni et al. (1993), Salvad y Gracia (1993), Salvad (1994) y Salvad et al. (1995).
Aplicaciones prcticas al control de E.D.A.Rs: Fontei, Soprani y Struma (1987), Jenkins (1993).
12
BIBLIOGRAFA
Al-Shahwani, S. M. y Horan, N. J. (1991). The use of protozoa to indicate changes in the performance
of activated sludge plants. Wat. Res. 25, 6, 633-638.
Arden, E. y Lockett, W. T. (1914). Experiments and the oxidation of sewage sithout filters. J. Soc.
Chem. Int. 33, 521.
Curds, C.R. (1973). The role of protozoa in the activated-sludge process. Amer Zoo. 13, 161-169.
Curds, C.R. y Cockburn, A. (1970). Protozoa in biological sewage-treatment processes. Protozoa as
indicators in the activated-sludge processes. Wat Res. 4, 273-249.
Esteban Peneles, G. (1989). Los protozoos ciliados como bioindicadores en el tratamiento de las aguas
residuales. Tesis doctoral del Departamento de Microbiologa de la Facultad de Ciencias Biolgicas de
la Universidad Complutense (Madrid).
Fontei, I., Soprani, S. y Strumia, F. (1987). Microbiogie e depurazione. (La microbiologia al servizio
del gestore degli impianti di depurazione aerobici). Ed. Prodeco. Milano.
Gale, E. F. (1952). The Chemical activities of bacterias. Academic Press. Nueva York.
Garrido, A., Canals, M., Ramrez, J. y Castanedo, C., (1988). Seguimiento prctico por microscopa de
la formacin de flculos de fango activo en la puesta en marcha de una depuradora de aguas residuales.
Tecnologa del Agua 48, 35-44.
Glaser, D. (1988). Simultaneous consumption of bacteria and dissolved organic matter by Tetrahymena
pyriformis. Microb. Ecol. 15, 189-201.
Jenkins, D., Richard, M.G., Daigger, G.T. (1993). Manual on the causes and control of activated
sludge bulking an foaming, 2 edicin. Lewis Publishers. Michigan.
Madoni, P. y Ghetti, P. F. (1981). The structure of ciliated protozoa conmunities in biological sewagetreatment plants. Hidrobiologia 83, 207-215.
Madoni, P., Davoli, D. y Chierici, E. (1993). Comparative analysis of the activated sludge microfauna
in several sewage treatment works. Wat. Res. 27, 9, 1485-1491.
Margalef, R. (1989). Ecologa. Ed. Omega, Barcelona.
Margalef, R. (1983). Limnologa. Ed. Omega, Barcelona.
13
14
INTRODUCCIN
En el estudio de una muestra de fango activo, el microscopio ptico es una herramienta indispensable
que nos va a permitir no slo la identificacin y cuantificacin de las distintas especies pobladoras (bacterias y
protozoos, principalmente), sino el conocimiento de otras caractersticas relacionadas con la estructura de la
unidad morfolgica y estructural de dicha suspensin biolgica, es decir, el flculo de fango activo. As por
ejemplo, ante la presencia de un problema de operacin de tipo biolgico que se manifestase como una
deficiente separacin slido-lquido en el clarificador, las tcnicas de identificacin de microorganismos y de
estudio de la estructura flocular, van a hacer posible el aislamiento y cuantificacin de los organismos
responsables as como el conocimiento del nivel de repercusin sobre la organizacin del flculo. sta
informacin, en ltima instancia, nos permitir catalogar el problema como crecimiento disperso, bulking
viscoso, bulking filamentoso, foaming, pin point floc o subida de fangos (Jenkins et al., 1993) y actar en
consecuencia.
Un examen microscpico de estas caractersticas requiere de distintos niveles de observacin que, entre
otros aspectos, se han de corresponder con distintas necesidades en la magnificacin. As pues, el aumento
requerido para una primera exploracin de la muestra, no ser el mismo que el necesario para la observacin en
detalle de la estructura corporal de un protozoo ciliado. La capacidad de aumento de un microscopio se
denomina magnificacin y se corresponde con la expresin:
Magnificacin= M ocular x M objetivos x M optovar (si ste existe)
En la microscopa ptica, aumentos de 1.500x estaran prximos al lmite mximo, ya que adems de la
magnificacin, existe la resolucin, es decir, aquella propiedad que permite observar dos puntos adyacentes
como unidades distintas. Si bien la magnificacin podra incrementarse prcticamente sin lmite, la resolucin
est limitada por las propiedades fsicas de la luz. En un microscopio ptico, los lmites de resolucin se sitan
en aproximadamente 0,2 m, lo que significa que dos objetos que se encuentren ms prximos que esta
distancia no pueden visualizarse como entidades distintas. El poder de resolucin est determinado por la
longitud de onda de la luz y una propiedad innata de la lente que se denomina apertura numrica, medida de la
capacidad de captacin de la luz por la lente.
En general, existe una relacin directa entre la capacidad de aumento y la apertura numrica de una
lente, ya que una lente de alto aumento presentar una alta apertura numrica. La mayora de los microscopios
poseen oculares de aumento de 10 a 15x y objetivos desde 5 a 100x aumentos. Los objetivos de 100x (de
elevada apertura numrica) requieren del empleo de aceite de inmersin para evitar la presencia de aire entre el
objetivo y la preparacin y se denominan objetivos de inmersin. Este tipo de aceites se utiliza porque tienen
una mayor apertura numrica que el aire y un mayor ndice de refraccin, lo que incrementa la resolucin. Con
15
este tipo de objetivos la distancia de trabajo distancia que queda libre entre el objetivo en uso y la
preparacin, es prcticamente nula. En general, cuanto mayor sea la resolucin del objetivo, menor ser su
distancia de trabajo.
1. Tubos y oculares.
2. Objetivos.
3. Platina.
4. Condensador de desplazamiento
vertical.
5. Diafragma del condensador de
apertura.
6. Tornillos de centrado del
condensador.
7. Soporte del condensador.
8. Diafragma de campo.
9. Fuente de iluminacin.
10. Tornillos de agarre del condensador.
11. Mandos de enfoque.
12. Interruptor de red.
13. Regulador de la intensidad
luminosa.
Figura 1: El microscopio ptico (Microscopio ptico Zeiss Axiolab ).
Nota: al final del captulo, en la Tabla I, se recogen diversos problemas que surgen durante la observacin microscpica as como
sus soluciones.
En la descripcin de las distintas partes de un microscopio, podemos encontrarnos con los siguientes
elementos mecnicos, de iluminacin y pticos:
Platina
La platina est situada sobre el estativo o soporte y sobre ella se coloca el portaobjetos, que mediante
un sistema de traslacin dotado de mandos, podr hacerse desplazar en las dos direcciones del plano (x e y).
16
Reglas milimtricas situadas sobre la platina permiten conocer el alcance del movimiento as como la
localizacin precisa de cualquier rea de inters de la preparacin.
Mandos de enfoque
Permiten el desplazamiento en el plano vertical de la platina, alejando acercando la preparacin hacia
los elementos pticos. El enfoque macromtrico permite una aproximacin rpida a la preparacin o enfoque
grueso, mientras que el micromtrico proporciona un enfoque fino de la misma.
Fuente de iluminacin
Suele ser una lmpara halgena de bajo voltaje (6-12 v y 25-100 W), cuya luminosidad puede ser
regulada mediante un potencimetro. La iluminacin es una cuestin de especial importancia en el caso de la
microfotografa. Es recomendable controlar el haz lumnico cada cierto tiempo, lo que puede hacerse en la
revisin anual del microscopio.
Filtros
Situados sobre un portafiltros, los ms habituales son el filtro verde y el azul. Mientras que el verde se
utiliza en la ptica de contraste de fases, al aumentar el poder de resolucin, el filtro azul se emplea en campo
claro, para observar tinciones o resaltar contornos en organismos vivos.
Condensadores
Situados al pie del cuerpo principal se encuentran el condensador de campo y su diafragma, quienes
tienen como misin amplificar y colimar los rayos luminosos proyectados por la fuente luminosa. Situados en la
parte inferior a la platina se encuentran el condensador de apertura, con su diafragma y elementos de centrado.
Este condensador tiene como misin hacer converger la luz hacia la preparacin. El centrado del condensador se
realiza cerrando el diafragma de campo y llevando al centro el punto luminoso con ayuda de los mecanismos de
centrado. En algunos microscopios, adems, es necesario situar a la altura adecuada el diafragma de campo. A
continuacin se presenta un esquema de este procedimiento:
-
Enfocar la preparacin
Centrar la iluminacin
Bajar el condensador de apertura hasta que se observe la forma poligonal de la imagen del
diafragma de campo
17
Retirar un ocular para ver los anillos de fases, el blanco del condensador y el negro del ocular.
Situar los anillos concntricos (este paso diferir en funcin de que el condensador sea o no de
revolver)
Tanto en campo claro como en contraste de fases, los objetivos 100x requieren del empleo de aceite de
inmersin. Esto significa que tras ser utilizados, hay que retirar el aceite de la lente con un pao suave
impregnado en una solucin ter/etanol 3:1. Tambin es recomendable la limpieza de las dems lentes de vez en
cuando con esta misma solucin.
Oculares
Estn formados por dos lentes que se sitan sobre un soporte mvil que permite que sean ajustadas a la
distancia ocular del observador. Estas lentes son las encargadas de amplificar la imagen resuelta por los
objetivos, a la vez que la invierten. Uno de los oculares permite un ajuste diferencial para las dioptras de cada
ojo. En el caso de la microfotografa, la torreta es triocular, reservndose uno de los oculares (distinto de los dos
anteriores) para la adaptacin de la cmara fotogrfica. Normalmente, uno de los oculares consta de micrmetro,
es decir, un disco intercalado entre sus lentes que presenta una especie de regla con una serie de marcas
distribuidas regularmente (Figura 2).
18
0,0
0,0
50
100
0,5
1,0
Micrmetro ocular
1 mm
Portaobjetos milimetrado
19
Las numerosas innovaciones tecnolgicas en los campos de la informtica y la electrnica han hecho
avanzar tambin a la microscopa. La utilizacin de nuevos accesorios como vdeo-cmaras o vdeo-impresoras
habran de ser tenidos en cuenta a la hora de hablar de los componentes del microscopio.
20
Para que la emisin sea selectiva, los filtros de fluorescencia habrn de ser adecuados. Normalmente, se
emplea un filtro que delimita la banda de excitacin y un segundo filtro o filtro de barrera que slo deja pasar
la fluorescencia y elimina los restos de la luz de excitacin. Las tcnicas basadas en la microscopa de
epifluorescencia estn adquiriendo cada vez mayor auge gracias al desarrollo, entre otras, de las tcnicas de
estimacin de la biomasa viva y de determinacin de la actividad biolgica, de gran utilidad en el campo de los
procesos de depuracin de aguas residuales.
Contraste de polarizacin
En estos microscopios la luz es polarizada y aunque no necesita de objetivos especiales, s de un
polarizador situado entre la fuente de luz y el condensador, y de un analizador entre el objetivo y el ocular. Se
utilizan para la observacin de materiales birrefringentes, tal es el caso de algunas disciplinas como la
Mineraloga o la Petrografa.
Contraste Interferencial de Normarski
En esta tcnica se combina la luz polarizada con un principio similar al del contraste de fases, dando
como resultado una imagen similar a la aportada por un contraste de fases de gran resolucin pero con un
marcado efecto de relieve y a color. Este tipo de ptica, aunque de resultados muy satisfactorios, requiere un
equipamiento caro, constituido por accesorios como un condensador especial y prismas de polarizacin, que
hacen que su uso sea muy restringido.
22
Tabla 1: Problemas que se presentan habitualmente durante la observacin microscpica y que desencadenan en una mala imagen.
PROBLEMA
Oscuridad en la periferia
CAUSA
ACCIN
del
diafragma
cerrado
Lentes sucias
Limpieza
Volver a montar
contraste de fases)
Corregir la posicin
de
de visin
condensadores
centrados
Suciedad en las lentes del condensador. Limpieza. Revisar que no hay objetos
Agentes externos.
Condensador bajo
del diafragma
Limpieza
Poca
apertura
del
condensador bajo
del condensador
Aire en el aceite
Retirar aceite
Limpieza
Comprobar
el
grosor
del
cubreobjetos,
vara el enfoque
Ausencia de formacin de la Distancia interpupilar inadecuada
imagen binocular
dioptras
23
BIBLIOGRAFA
Jenkins, D., Richard, M. G. y Daigger, G. T. (1993). Manual on the Causes and Control of
Activated Sludge Bulking and Foaming. WRC, Pretoria and USEPA, Cincinnati.
Laboratorio Central del Departamento de Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1996).
Jornadas Prcticas: Observacin microscpica del fango activo: caracterizacin del flculo e
identificacin de microorganismos filamentosos. 20-24 de mayo de 1.996.
Manual de Instrucciones de Zeiss: Operating Instructions. Axiolab Microscope for transmitted
light and incident-light fluorescence.
24
INTRODUCCIN
Para identificar y clasificar los microorganismos presentes en nuestra muestra podemos realizar
observaciones in vivo o bien utilizar tcnicas auxiliares, como son la fijacin y la tincin. Estas ltimas sern
tiles cuando el material a observar sea necesario conservarlo durante algn tiempo, o simplemente para poner
de manifiesto estructuras difcilmente observables in vivo. Esto lo conseguimos mediante reacciones qumicas
realizadas sobre los microorganismos muertos que nos permitirn apreciar diferencias que nos ayudarn a
clasificar e identificar los microorganismos.
25
Inmovilizacin txica
Mediante esta tcnica se consigue reducir la movilidad de los organismos y favorecer as su
observacin.
REACTIVOS
1.- Solucin I: 0,5 mg de cloruro de cinc en 100 mL de agua destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Tomar una gota de muestra y mezclarla con una gota de solucin I
2.- Observar al microscopio
RESULTADOS:
Los organismos mviles ven retardado su desplazamiento, de forma que se pueden observar mejor
26
RESULTADOS:
Color azul-violeta: Gram +
Color rojo-rosa: Gram
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
1.- Solucin Cristal violeta: un mes
2.- Solucin Oxalato amnico: un mes
3.-Solucin I: 24 horas
4.- Solucin II: un mes
Tincin de Neisser
Tincin de grnulos de polifosfato almacenados en el interior de las bacterias, junto con el tricoma.
REACTIVOS:
1. Solucin I: 2 A + B (Mezclar 2 partes de la solucin A y una parte de B (v/v)
-A: 0,1 g de Azul de metileno +5 mL etanol 95 % + 5 mL cido actico glacial +100 mL agua
destilada
-B: 3,3 mL de Cristal violeta al 10 % en etanol al 95 % + 6,7 mL etanol 95 % +100 mL agua
destilada
2. Solucin II: 33,3 mL de Marrn Bismarck (Crisoidina) al 1 % en solucin acuosa + 66,7 mL de agua
destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Teir el frotis con solucin I durante 30 segundos
2.- Lavar con agua destilada durante unos segundos
3.- Teir durante 1 minuto con solucin II
4.- Aclarar con agua destilada
28
30
Tincin de vainas
Las clulas carentes de vainas aparecern intensamente teidas de color violeta mientras que las que
posean vaina se observarn de color claro o rosceas.
REACTIVOS:
1. Solucin I: Cristal violeta al 0,1 % (p/v) en solucin acuosa
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de fango activo con una gota de solucin I en un portaobjetos
2.- Colocar un cubreobjetos y observar a 100X bajo aceite de inmersin y en campo claro
RESULTADOS:
Filamentos violetas: bacterias sin vaina
Filamentos claros: bacterias con vaina
31
RESULTADOS variante 1:
- Grnulos intracelulares amarillos muy brillantes: S +
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
- Solucin 1: una semana
REACTIVOS variante 2:
Solucin I: 1 g tiosulfato sdico en 100 mL de agua destilada
PROCEDIMIENTO variante 2:
1.- Tomar una muestra de fango activo y dejarla decantar
2.- Transferir 20 mL de sobrenadante sin partculas en suspensin a un matraz
3.- Aadir 1 mL de solucin
4.- Someter a agitacin durante una noche a temperatura ambiente
5.- Observar a 100X con contraste de fase y bajo aceite de inmersin
RESULTADOS variante 2:
- Grnulos muy brillantes de color amarillo: S +
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
-Solucin 1: una semana
32
Choque lsico
Mediante este procedimiento, que rompe las clulas, se puede observar la presencia o ausencia de
vaina.
REACTIVOS:
- Solucin I: Disolucin de hipoclorito sdico al 1 % en agua destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Tomar 25 mL de muestra y aadir 10 mL de disolucin; agitar durante una noche
2.- Observar a 100X y bajo aceite de inmersin.
RESULTADOS:
- Filamentos donde se observen huecos de rotura de las clulas y exista continuidad del tricoma: vaina +
- Filamentos donde s existe hueco, hay rotura clara del filamento: vaina -
34
BIBLIOGRAFA
Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de laboratorio
para el anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del Exmo. Ayuntamiento de
Madrid.
Jenkins, D., Richard, M. y Daigger, G. (1993). Manual on the causes and control of activated sludge
bulking and foaming. 2 Edicin. Lewis Publishers. Michigan.
35
INTRODUCCIN
En este captulo, se presentan unas claves que sirven para identificar a los organismos con mayor
transcendencia para el proceso de depuracin biolgica de las aguas residuales. A continuacin, se adjunta la
bibliografa bsica empleada para el desarrollo de dichas claves:
Bacterias filamentosas:
EMASESA, 1997.
Protozoos
Metazoos
36
BACTERIAS FILAMENTOSAS
37
BACTERIAS FILAMENTOSAS
Dentro de cada tabla se especifican las caractersticas necesarias para su identificacin completa. Estas
caractersticas se pueden diferenciar en funcin de varios aspectos.
Caractersticas morfolgicas:
Tabla 1: Caractersticas morfolgicas identificativas para bacterias filamentosas (Ayuntamiento de Madrid, 1997).
Recto/ligeramente curvo/torcido/irregular/enrollado/micelial
Transparente/opaco/oscuro
Crecimiento epifitico
Septos celulares
Deteccin
Constricciones celulares
Deteccin
Dimensiones
Longitud/dimetro
Forma celular
Cuadrada/rectangular/oval/en tonel/discoidal/bacilar/coco
Dimensiones celulares
Longitud y dimetro
Reaccin a Tinciones:
Tabla 2: Caractersticas aplicables a tinciones para identificacin de bacterias filamentosas (Ayuntamiento de Madrid, 1997).
Tincin de Gram
Positiva/negativa/variable
Tincin de Neisser
Positiva/negativa
Grnulos Neisser
Positiva/negativa
Grnulos PHB
Positiva/negativa
Tincin vaina
Ausencia/presencia
38
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
MVIL
BACTERIA FILAMENTOSA
FLEXIBACTER SP.
BEGGIATOA SP.
CIANOPHICEA
TINCIN GRAM
NO
NO
NO
PHB
DIMETRO TRICOMA ( m)
1-3
2-5
20-100
100-500
100-1000
PIGMENTOS
MORFOLOGA TRICOMA
RECTOS/LIG CURVADOS
RECTOS/LIG CURVADOS
RECTOS
LOCALIZACIN TRICOMA
LIBRE
LIBRE
LIBRE
NO
SI
SI
NO
NO
SI
VAINA
NO
NO
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
1-3
2-5
4-8
5-15
RECTANGULAR
CUADRADAS/RECT./ EN TONEL
LARGO CELULAR ( m)
MORFOLOGA CELULAR
OTROS
S IN SITU
CREADORAS DE TURBIDEZ
BACTERIA FILAMENTOSA
Tipo 1863
TIpo 0211
Tipo 1852
TINCIN GRAM
NO
NO
NO
DIMETRO TRICOMA ( m)
0,8-1,5
0,3-0,5
0,6-0,8
<150
<100
20-80
MORFOLOGA TRICOMA
TORCIDOS O ENRROLLADOS
RECTOS O TORCIDOS
EXTENDINDOSE DESDE FLC
LOCALIZACIN TRICOMA
LIBRE
LIBRE
SI
SI
SI
SI
SI
NO
VAINA
NO
NO
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
0,8
0,3-0,5
0,6-0,8
LARGO CELULAR ( m)
1,5
0,5-0,7
1-2
MORFOLOGA CELULAR
ESFRICAS, COCOIDALES
EXTREMOS REDONDEADOS
RECTANGULARES
OTROS
CELULAS TRANSPARENTES
39
Tabla 4B: Clave identificativa para bacterias creadoras de turbidez (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
CREADORAS DE TURBIDEZ
BACTERIA FILAMENTOSA
Tipo 0411
STREPTOCOCCUS SP.
BACILLUS SP.
TINCIN GRAM
NO
NO
NO
DIMETRO TRICOMA ( m)
0,8
0,7-0,8
0,8-1
50-150
<100
20-50
MORFOLOGA TRICOMA
CADENA IRREGULAR
CADENAS CELULARES
LOCALIZACIN TRICOMA
BORDE FLOCULAR
LIBRE
LIBRE
SI
SI
SI
NO
VAINA
NO
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
0,8
0,7
0,8-1
NO
LARGO CELULAR ( m)
2-4
0,8
2-4
MORFOLOGA CELULAR
EXTREMOS REDONDEADOS
ESFRICAS
EXTREMOS REDONDEADOS
OTROS
Tabla 5A: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma superior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
BACTERIA FILAMENTOSA
Tipo 021N
Tipo 0041
TINCIN GRAM
Tipo 0961
-
SI
NO
NO
PHB
0,8-1,4
DIMETRO TRICOMA ( m)
1-2
1,2-1,6
100-1000
100-500
40-500
MORFOLOGA TRICOMA
RECTOS
LOCALIZACIN TRICOMA
INTERIOR O LIBRES
SI
SI
SI
SI
NO
NO
NO
VAINA
NO
SI
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
-,++
NO
ANCHO CELULAR ( m)
1-2
1,2-1,6
0,8-1,4
LARGO CELULAR ( m)
0,4-3
1,5-2,5
1,5-4
MORFOLOGA CELULAR
CUADRADAS/RECTANGULARES
RECTANGULARES
A VECES CUBIERTA N+
CELULAS TRANSPARENTES
OTROS
40
Tabla 5B: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma superior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
BACTERIA FILAMENTOSA
NOSTOCOIDA L II
TINCIN GRAM
NOSTOCOIDA L III
NO
NO
PHB
PHB
DIMETRO TRICOMA ( m)
1-1,4
1,6-2
100-200
MORFOLOGA TRICOMA
TORCIDOS O ENRROLLADOS
TORCIDDOS O ENRROLLADOS
LOCALIZACIN TRICOMA
INTERIOR
INTERIOR O EXTENDINDOSE
SI
SI
SI
SI
NO
VAINA
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
1,2-1,4
1,6-2
LARGO CELULAR ( m)
1,5-2
MORFOLOGA CELULAR
DISCOIDALES, OVALES
OTROS
Tabla 6A: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
BACTERIA FILAMENTOSA
NOSTOCOIDA L I
HALISCOMENOBACTER H.
MICROTRIX P.
TINCIN GRAM
NO
NO
NO
PHB
DIMETRO TRICOMA ( m)
0,6-0,8
0,3-0,5
0,6-0,8
100-300
20-100
100-400
MORFOLOGA TRICOMA
RECTOS O TORCIDOS
ENRROLLADOS
LOCALIZACIN TRICOMA
INTERIOR O EXTENDINDOSE
EN FLCULO Y LIBRES
DIFCIL VER
NO
NO
NO
NO
VAINA
NO
SI
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
-,+
NO
ANCHO CELULAR ( m)
0,6
0,3
0,6
LARGO CELULAR ( m)
0,8
0,5
0,8
MORFOLOGA CELULAR
OVALES
AGUJAS IRRADIADAS
OTROS
41
Tabla 6B: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
BACTERIA FILAMENTOSA
Tipo 0675
Tipo 0092
TINCIN GRAM
Tipo 1701
-
NO
NO
NO
0,5-1
0,8-1
0,7-1
PHB
50-150
<100
10-200
MORFOLOGA TRICOMA
RECTOS O LIGERAMENTE
CURVADOS
CURVADOS O TORCIDOS
TODOS SITIOS
LOCALIZACIN TRICOMA
INTERIOR
INTERIOR O LIBRES
SI
NO
SI
NO
NO
SI
VAINA
SI
NO
SI
CRECIMIENTO EPIFTICO
-,++
NO
-,++
ANCHO CELULAR ( m)
0,5-1
0,8
0,7-1
LARGO CELULAR ( m)
0,5-1
1-3,5
MORFOLOGA CELULAR
CUADRADAS
RECTANGULARES
EXTREMOS REDONDEADOS
OTROS
Tabla 6C: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
OTRAS CARACTERSTICAS
Tipo 1702
Tipo 1851
Tipo 0581
TINCIN GRAM
+ (LIGERO)
NO
NO
NO
0,6-0,8
0,5-0,8
0,4-0,7
LONGITUD TRICOMA ()
20-150
200-400
100-300
MORFOLOGA TRICOMA
RECTOS O TORCIDOS
LOCALIZACIN TRICOMA
LIBRES
NO
SI/NO
NO
NO
NO
NO
VAINA
SI
SI
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
-,+
NO
ANCHO CELULAR ( )
0,6
0,5-0,8
0,4
LARGO CELULAR ( )
0,8
1,7-3,5
0,7
MORFOLOGA CELULAR
RECTANGULARES
OTROS
A VECES EN MANOJOS
42
Tabla 6D: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
OTRAS CARACTERSTICAS
Tipo 0803
TINCIN GRAM
NO
0,8
LONGITUD TRICOMA ()
50-300
MORFOLOGA TRICOMA
LOCALIZACIN TRICOMA
LIBRES
SI
DIFCIL VER
VAINA
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
ANCHO CELULAR ( )
0,8
LARGO CELULAR ( )
1,5-2
MORFOLOGA CELULAR
CUADRADAS O RECTANGULARES
OTROS
ASPECTO RAMIFICADO
BACTERIA FILAMENTOSA
NOCARDIA SP.
SPHAEROTILUS N.
HONGOS
TINCIN GRAM
NO
NO
NO
PHB
PHB
GRNULOS
DIMETRO TRICOMA ( m)
1-1,8
3-8
10-100
100-1000
300-1000
MORFOLOGA TRICOMA
MICELIAL
LOCALIZACIN TRICOMA
EN FLCULO Y LIBRE
TODOS SITIOS
NO
SI
SI
NO
SI
SI
VAINA
NO
SI
NO
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
1-1,8
3-8
1,5-3
5-15
LARGO CELULAR ( m)
MORFOLOGA CELULAR
OTROS
EXTREMOS REDONDEADOS
RAMIF VERDADERA
43
LIG + AL GRAM
Tabla 8: Clave identificativa para bacterias que normalmente acumulan grnulos de azufre (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE
BACTERIA FILAMENTOSA
THIOTHRIX I
THIOTHRIX II
Tipo 0914
TINCIN GRAM
SI
SI
NO
PHB
PHB
PHB
DIMETRO TRICOMA ( m)
1,4-2,5
0,8-1,4
0,7-1
100-500
50-800
50-200
MORFOLOGA TRICOMA
LOCALIZACIN TRICOMA
SI
SI
SI
NO
NO
NO
NO
VAINA
SI
SI
CRECIMIENTO EPIFTICO
NO
NO
NO
ANCHO CELULAR ( m)
1,4-2,5
0,8-1,4
0,7-1
LARGO CELULAR ( m)
3-5
1-2
0,7-1
MORFOLOGA CELULAR
RECTANGULARES
RECTANGULARES
CUADRADAS
OTROS
ROSETAS Y GONIDIOS
ROSETAS Y GONIDIOS
GRNULOS S CUADRADOS
44
BIBLIOGRAFA
Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de laboratorio para el
anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del Exmo. Ayuntamiento de Madrid.
EMASESA (1997). Microorganismos filamentosos en el fango activo. Publicacin de la Empresa
Municipal de Abastecimiento y Saneamiento de Aguas de Sevilla, S.A.
45
PROTOZOOS
46
Gnero Euglena
Familia Euglenidae
Gnero Phacus
Gnero Trachelomonas
*Orden Euglenida
Gnero Astasia
CLASE
Familia Astasiidae
PHITOMASTIGOPHORA.
Gnero Urceolus
*Orden
Peranematales
Familia Multiciliidae
*Orden Rhizomastigida
Familia Mastigamoebidae
*Orden Polimastigida
Grupo Coanoflagelados
CLASE
*Orden Protomonadina
ZOOMASTIGPHORA.
Grupo Anfimonadinos
Grupo Bodonideos
*Orden Trichomonadina
*Orden Hypermastigida
*Orden Opalinida
47
SUBPHYLUM MASTIGOPHORA.
Los flagelados presentan normalmente uno o dos flagelos que se implantan cerca del extremo anterior de
la clula. Su alimentacin puede ser auttrofa (si bien en fangos activos no la desarrollan debido a la turbidez
que les impide realizar fotosntesis) y fagotrofas.
Su forma, movimientos y nmero de flagelos son caractersticas importantes en su sistemtica.
Presentan grandes variedades respecto a su tamao, desde 5-30 m en los zooflagelados (Clase
Zoomastigophora), hasta 40-100 m entre las euglenas (Clase Phitomastigophora).
CLASE PHITOMASTIGOPHORA
ORDEN EUGLENALES
Organismos unicelulares que nadan con flagelos. Forma alargada o en espiral. Color verdoso
consecuencia de los cloroplastos. Organismos muy plsticos.
Son hetertrofos (utilizan alimentos presintticos que absorben de forma disuelta a travs de la superficie
celular), algunas especies pueden realizar fagocitosis, pero la mayora se alimentan de bacterias, algas y algunos
pequeos protozoos.
Normalmente slo tienen un flagelo, aunque a veces pueden aparecer dos o tres. Su material de reserva
es el paramilo, que toma formas definidas en cada especie. Este parmetro ayuda en su identificacin.
Familia Euglenidae
Cuerpo plstico en forma de huso. Flagelo largo y curvado hacia atrs.
Tres gneros: Euglena, Phacus y Trachelomonas.
1
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
48
GNERO EUGLENA
Presenta estras longitudinales o espirales. Una pequea vacuola contrctil. Los pirenoides pueden estar
rodeados de una cubierta de almidn. Es caracterstico la forma del quiste, ya que aparecen como puntos verdes
en el fondo de la muestra.
EUGLENA
PISCIFORME
Longitud 25 m. Clulas fusiformes, redondeadas por delante, con corta pluma terminal detrs.
Membrana finamente estriada. Flagelo de igual longitud que el cuerpo. Dos cloroplastos en forma de cintas
laterales. Figura 2.
EUGLENA
VIRIDIS
Cuerpo fusiforme de 40-65 m de largo. Cloroplastos en forma de cinta y orientados hacia un pirenoide
central. Figura 3.
EUGLENA
TRIPTERIS
Clula de seccin triangular. Cuerpo retorcido, con el extremo posterior alargado en forma de pequea
cola. Cloroplasto longitudinal que cubre casi todo el cuerpo. Estriacin de la membrana en forma de espiral.
Tamao 70-120 m. Flagelo de tamao similar al cuerpo. Figura 4.
GNERO PHACUS
Forma aplanada, esfrica, con una cubierta exterior fina y forma corporal constante. Estriacin
longitudinal.
Posee un flagelo y cromatforos discoides de color verde. Figura 5.
GNERO TRACHELOMONAS
Presentan lriga, normalmente con espinas. Color amarillo-castao, consecuencia de las deposiciones de
hidrxido frrico con un compuesto mangnico sobre la lriga. Aparece un solo flagelo, largo, engrosado en su
anclaje con una estructura en forma de collar. Dos cromatforos en forma de disco curvo. Figura 6.
Familia Astasiidae
Morfologa similar a la familia euglenoide, pero sin cromatforos.
Cuerpo muy plstico, pero sin huso alargado. Presenta dos gneros fundamentalmente:
* Gnero Astasia:
Cuerpo alargado, de forma diversa, generalmente membrana con una fina estriacin espiralada.
Figura 7.
49
* Gnero Urceolus:
Cuerpo incoloro en forma de frasco estriado. Cuello similar a un embudo. Aparentemente simulan
una botella. Pueden presentar una espina terminal y estriacin espiralada.
Su movimiento es caracterstico al reptar sobre la boca del embudo y levantan la parte superior
del cuerpo sobre el sustrato. Hetertrofos. Figura 8.
ORDEN PERANEMATALES.
Cuerpo alargado, deformable con un movimiento de desplazamiento por compresin-alargamiento. Son
muy activos con un largo flagelo, siempre hacia delante y cuyo extremo presenta mayor mvilidad y ductilidad.
Citoplasma incoloro y alimentacin hetertrofa. Figura 9.
50
CLASE ZOOMASTIGOPHORA
Organismos flagelados que no presentan cloroplastos. De pequeo tamao y de vida libre. Se alimentan
de bacterias y sustancias orgnicas en descomposicin. Presentan uno o dos flagelos que utilizan para
desplazarse en movimientos pulsantes. Forma corporal de redondeada a alargada con algunos organismos en
estructuras coloniales. La mayora presenta un solo ncleo con estructura vesicular. El enquistamiento es un
fenmeno muy comn.
Presenta 6 rdenes, de los cuales cuatro son parsitos o simbiontes (Orden Polymastigda, Orden
Trichomonadina, Orden Hypermastigda y Orden Opalinida)
ORDEN RHIZOMASTIGIDA
Formas intermedias entre amebas y flagelados. Los flagelos varan en nmero de uno a varios y
pseudpodos en nmero variable.
Familia Multiciliidae
Cuerpo esfrico con pequeos pseudpodos. Entre 40-50 flagelos largos y distribuidos uniformemente
con acompaamiento de varios pseudpodos. Holozoico. Figura 11.
Familia Mastigamoebidae
Cuerpo ameboide con 1-4 flagelos y lobpodos en nmero variable. Solo un ncleo. Son de vida libre.
Holozoicos y saprozoicos. Figura 12.
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
51
ORDEN POLYMASTIGIDA
Organismos parsitos de mamferos y aves, pero que pueden aparecer en el agua residual al encontrarse
en el intestino. Clulas aplanadas de forma variable.
TETRAMITUS PIRYFORMIS
Clulas incoloras, de forma variable que se alimentan de bacterias. Presenta un largo flagelo posterior y
dos flagelos anteriores cortos junto a otro ms largo. Movimientos rotatorios. Tamao de 11-20 m. Figura 13.
HEXAMITA FISSA
Clulas ovaladas, con una terminacin en forma de espina ancha en la zona posterior. Se alimentan de
bacterias, pero tambin son saprfitos.
Los dos flagelos posteriores quedan libres hacia la zona terminal, y en la zona anterior dos grupos de tres
flagelos ms cortos a ambos lados.
Movimientos natatorios de rotacin. Tamao de 20-26 m. Figura 14.
TREPOMONAS ROTANS
Clulas ovaladas, con una mitad posterior aplanada y seccin en "s". Extremo posterior invaginado.
Bordes ligeramente curvos tambin hacia el interior corporal. Dos grupos de flagelos situados en la zona
intermedia. Dos largos, uno anterior y otro posterior y dos pequeos perpendiculares al cuerpo. Tamao de 7-25
m. Figura 15.
ORDEN PROTOMONADINA
Muchas especies parsitas, siendo clulas con uno o dos flagelos. Tres grupos principales.
* Grupo Coanoflagelados
Organismos solitarios y coloniales. Forman un pequeo embudo en la parte donde se ancla el
flagelo.
Muchos presentan un mucilago a su alrededor que atrapa las partculas, favorecido por el
movimiento rotatorio que crea un remolino que acerca las partculas alimenticias. Figura 16.
* Grupo Anfimonadinos
Organismos coloniales con envolturas gelatinosa.
Presentan de uno a dos flagelos de similar longitud, utilizando uno para anclarse a la colonia y el
otro hacia el exterior para la motilidad y la alimentacin. Figura 17.
52
* Grupo Bodonideos
Organismos unicelulares, pequeos con dos flagelos insertos en el mismo lugar, uno dirigido
anteriormente y otro posteriormente, generalmente mayor o igual a la longitud del cuerpo.
Movimientos rotatorios en zig-zag (BODO PUTRINUS) o saltando (BODO SALTANS). Figura 18.
53
FLAGELADOS
3
12
11
15
13
14
16
17
18
Figura 2: Euglena pisciforme; Figura 3: Euglena viridis; Figura 4: Euglena tripteris; Figura 5: Gnero Phacus; Figura 6: Gnero
Trachelomonas; Figura 7: Gnero Astasia; Figura 8: Gnero Urceolus; Figura 9: Orden Peranematales; Figura 11: Familia
Multiciliidae; Figura 12: Familia Mastigamoebidae; Figura 13: Tetraminus piryformis; Figura 14: Hexamita fissa; Figura 15:
Trepomonas rotans; Figura 16: Grupo Coanoflagelados; Figura 17: Grupo Anfimonadinos; Figura 18: Grupo Bodonideos
54
BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).
55
Gnero Naegleria
Familia Vahlkampfiidae
Gnero Vahlkampfia
Familia Chaosidae
Orden Amoebida
Familia Mayorellidae
Familia Thecamoebidae
CLASE
Familia Hyalodiscidae
RHIZOPODA
Orden Testaceas
CLASE
ACTINOPODA
Orden Heliozoa
56
Amoebida
Testacea
ORDEN AMOEBIDA.
Amebas desnudas; no presentan envoltura consistente y presentan un cuerpo muy verstil. Se distingue
la envoltura exterior del interior citoplasmtico o ectoplasma, que es ms translcido.
Al emitir un pseudpodo se puede diferenciar el endoplasma, del ectoplasma o cubierta exterior, ya que
se distingue una elongacin de ste. Dentro del interior citoplasmtico se pueden distinguir numerosas vacuolas
digestivas, formadas por invaginaciones previas del cuerpo celular. Pueden diferenciarse por su funcionalidad
en dos tipos:
57
A estas vacuolas digestivas se les aade los enzimas digestivos que permiten la digestin de los
alimentos.
Presentan reproduccin asexual por fisin binaria y ocasionalmente mltiple. Es muy comn la fase de
enquistamienteo en periodos de situaciones adversas.
Dentro de este orden encontramos cinco familias:
Vahlkampfiidae
Chaosidae
Mayorellidae
Thecamoebidae
Hyalodiscidae
Familia Vahlkampfiidae
Forma reptante. Dos gneros: Naegleria, Vahlkamfia.
GNERO NAEGLERIA
Tamao en torno a las 30 m. Presenta pseudpodos eruptivos que se caracterizan como hinchamiento
de la zona anterior hialina. Bacterifago. Quistes uninucleados con fase flagelada (dos flagelos).
NAEGLERIA AQUATILIS
Lobopodos grandes con movimientos en forma de cinta continua. Tamao de hasta 25 m. Figura 20.
GNERO VAHLKAMPFIA
Tamao en torno a 60 m. Pseudpodos hemisfricos con abultamiento anterior de la zona hialina y en
ocasiones presenta uroide posterior. Quistes sin forma flagelada. Bacterifago.
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
58
VAHLKAMPFIA LIMAX
Tamao en torno a las 100 m de largo por 50 de ancho. La zona anterior es ms ancha que la posterior,
con desplazamientos suaves. Presenta un borde corporal ondulado y en la zona anterior una serie de pequeos
filamentos. En ocasiones puede presentar cristales en el endoplasma. Figura 21.
Familia Chaosidae
Grandes amebas con citoplasmas muy densos y ncleos granulares. Pseudpodos con placas hialinas.
Polyploidal. Tamao entre 500-200 m. Se alimenta de algas y protozoos.
CHAOS DIFFLUENS
Tamao comprendido entre 300-600 m. Muy verstil en sus movimientos, con desplazamientos del
endoplasma hacia el pseudpodo. Se alimenta de paramecios. Figura 22.
PELOMYXA PALUSTRIS
Tamao comprendido entre 1-2 mm. Es una de las amebas mayores en aguas dulces. No presenta
erupciones citoplasmticas, sino que su forma es ms o menos ovoide o circular. Presenta un interior refringente
por numerosas vacuolas y grnulos. Figura 23.
Familia mayorellidae
Pseudpodos terminados en punta.
DINAMOEBA MIRABILIS
Tamao en torno a 60-160 m. Ovalada o esfrica con pseudpodos irradiados en punta, cubiertos de
pequeos pelos citoplasmticos. Movimiento por reptacin o flotacin. Generalmente presenta una cubierta
mucilaginosa que la envuelve. Figura 24.
Familia Thecamoebidae
Estadio intermedio entre las amebas desnudas y testceas, ya que presentan una capa exterior gruesa con
pliegues longitudinales. No presentan generalmente pseudpodos. Ectoplasma con apariencia verrugosa. Se
alimentan de algas filamentosas
THECAMOEBA VERRUCOSA
Tamao en torno a 350 m. Sus movimientos son lentos por desplazamiento del ectoplasma sin llegar a
producir pseudpodos. Color amarillo. Figura 25.
59
ORDEN TESTACEAS
Presentan una envoltura rgida o teca formada por estructuras de quitina, que en algunas especies pueden
ir reforzadas por conchas o piedras superpuestas. Generalmente los pseudpodos se emiten desde una zona
determinada donde no existe la teca.
5
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
60
61
CLASE ACTINOPODA
ORDEN HELIOZOO
Formas similares a un sol, con un cuerpo esfrico y pseudpodos muy largos irradiados en todas
direcciones. Se alimentan de flagelados, ciliados, rotferos, algas...
Pueden unirse en ocasiones formando colonias de alimentacin que luego se disgregan tras cumplir su
cometido. A veces pueden presentar cubierta mucilaginosa. En condiciones desfavorables pueden formar
quistes. Normalmente se reproducen por biparticin, pero en casos de deficiencia alimenticia, se inicia un
proceso de reproduccin sexual que recibe el nombre de autogamia.
ACTINOPRYS SOL
El Heliozoo por excelencia. Forma esfrica de 40-50 m. Se alimenta de flagelados, ciliados, algas
conjugadas unicelulares y levaduras. Individuos jvenes a menudo agrupados en comunidades alimentarias.
Figura 30.
ACTINOSPHAERIUM EICHORNI
Numerosos pseudpodos que se contraen al ms mnimo contacto. Tamao comprendido entre 200-300
m. Figura 31.
ACANTHOCYSTIS MIMETICA
El esqueleto est formado por escamas silceas tangenciales y acculas silceas radiales. Estas ltimas se
aprecian al secarse la muestra en el cubreobjetos. Figura 32.
62
AMEBAS Y HELIOZOOS
6
20
21
23
22
24
25
28
27
29
31
30
32
Figura 20: Naegleria aquatilis; Figura 21: Vahlkampfia limax; Figura 22:Chaos difflens; Figura 23: Pelomyxa palustris; Figura
24: Dinamoeba mirabilis; Figura 25: Thecamoeba verrucosa; Figura 27: Arcella gibosa; Figura 28: Arcella vulgaris; Figura 29:
Arcella hemisphaerica; Figura 30: Actinoprys sol; Figura 31: Actinosphaerium eichorni; Figura 32: Acanthocystis mimetica.
63
BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).
64
Ciliado libre,
desprovisto de
cirros.
Ciliado
pedunculado fijo al
sustrato por un
pednculo.
Clase Kinetogragminophora
(Holotricos).
*Cilios orales
distintos al resto.
Citostoma ventral.
Clase Oligohymenophora.
Subclase Hymenostomatia.
(Holotricos).
*Cilios orales
desarrollados en la
zona alrededor de la
membranela.
Citostoma opuesto a
la cavidad bucal.
Clase Polymenophora.
Orden Heterotrichida.
(Heterotricos).
*Forma adulta
privada de cilio y
dotada de largos
tentculos.
Clase Kinetogragminophora
Subclase Suctoria.
(Suctores).
*Forma privada de
tentculo. Cilios
sobresalientes en polo
anterior.
Carecen de cilios en
el resto del cuerpo.
Clase Oligohymenophora.
Subclase Peritrichia.
(Peritricos).
Ciliados dotados de
cirros, por medio
del cual se desplaza
sobre los flculos
del fango.
Clase Polymenophora.
Orden Hypotrichida.
(Hypotricos).
65
CLASE KINETOGRAGMINOPHORA.
Los miembros pertenecientes a esta clase se caracterizan por poseer unos cilios orales, slo levemente
diferentes de los somticos.
7
Subclase Gymnostomtia.
Citostoma se abre directamente al exterior en posicin apical o subapical.
Subclase Vestibuliferia.
Citostoma abierto en una cavidad vestibular en posicin apical o subapical.
Subclase Hypostomatia.
Citostoma no apical, situado sobre la superficie ventral del cuerpo.
Subclase Suctoria.
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
66
SUBCLASE GYMNOSTOMATIA.
Clave para el reconocimiento de la familia.
- Superficie del cuerpo cubierto de una densa placa. Citostoma apical. Familia Colepidae.
- Superficie del cuerpo sin placas.
*Citostoma redondo en el pice (zona ms afilada) del cuerpo. Familia Enchelydae.
*Citostoma en una grieta.
- Citostoma apical, extendido hacia un lado del cuerpo, situado sobre una cresta sin cilios.
Familia Spathidium.
- Citostoma situado a lo largo de un lado del cuerpo. Familia Amphileptidae.
Familia Colepidae.
Los miembros de esta familia tienen el citostoma en el polo anterior del cuerpo y estn dotados de
pequeas y numerosas placas situadas sobre la superficie del cuerpo. Un solo gnero est presente en los fangos
activos, el Gnero Coleps Nitzsch.
Cuerpo en forma de barril. Citostoma amplio, de seccin circular, situado en el pice del cuerpo y
rodeado de largos y delgados cilios. El polo inferior ms grueso, presenta espinas. Uno ms cilios caudales.
Una sola especie aparece en el fango activo.
COLEPS HIRTUS. (c. libre)
Longitud 40-60m. Caparazn dividido en 4 anillos transversales, con las placas principales atravesadas
por orificios arionados, asemejndose a un tonel. De 15 a 20 filas longitudinales de estrias, esto hace que
parezca un barril cuadriculado. La boca se sita en el polo anterior y est rodeada de una placa especial. En el
polo posterior tiene 3 espinas. Los cilios tienen una longitud uniforme en todo el cuerpo y en la extremidad
posterior tiene un largo cilio caudal. El macroncleo es esfrico. La vacuola contrctil se sita prxima al polo
posterior. Figura 34.
Es infrecuente esta especie en el fango activo. Su rgimen alimenticio es variado y comprende algas,
flagelados y, ocasionalmente, ciliados. Predador de protozoos. Nada velozmente y cambiando frecuentemente
de direccin. Presenta una baja tolerancia al in amonio y al amonaco y no se encuentra, por tanto, en
ambientes con altas concentraciones de este elemento. Este ciliado nadador puede estar presente en una cantidad
discreta en plantas que reciben aguas ricas en sustancia orgnica con bajo contenido en nitrgeno, como por
ejemplo un agua rica en celulosa. Su presencia en el fango activo es compatible con una buena eficacia de
depuracin.
67
Familia Enchelydae.
Algunos gneros de esta familia aparecen en tratamientos biolgicos de depuracin. El Gnero
Trachelophyllum es bastante comn en el fango activo.
GNERO THACHELOPHYLLUM.
Incluye pequeos ciliados alargados y flexibles.
En el polo anterior, que es ahusado, se abre el citostoma que contina en una larga y estrecha citofaringe
de seccin circular. Son visibles dos macroncleos esfricos, cada uno de los cuales tiene al lado un
microncleo. La vacuola contrctil se sita en posicin terminal.
Una sola especie se presenta en el fango activo.
TRACHELOPHYLLUM PUSILLUM. (c. libre)
Las caractersticas morfolgicas de este animal se corresponden a las del gnero al que pertenece.
Longitud 30-50m, cuerpo ahusado. Abunda en el fango activo. Se nutre de pequeos flagelados, bacterias y
segn algunos autores de otros ciliados. Cuando aparece junto a Aspidisca en proporciones iguales, nos indica
una buena calidad del agua tratada. Actualmente se denomina Acineria uncinata. Figura 35.
Familia Spathidiidae.
Los miembros de esta familia estn presentes en plantas depuradoras con 1 solo gnero.
GNERO SPATHIDIUM.
Ciliado con forma de frasco o de saco, comprimido ms o menos lateralmente. La regin anterior ms o
menos afilada forma un cuello truncado (incompleto, cortado). El citostoma ocupa toda la parte anterior.
Ciliatura uniforme, vacuola contrctil terminal. Algunas especies aparecen en el fango activo.
SPATHIDIUM OPIMUM. (c. libre)
Dimensiones 100-300m. Aplastado lateralmente y alargado. Polo anterior truncado, la apertura oral
presenta un labio provisto de "tricociste". Raro en el fango activo. Es predador de otros ciliados, se desplaza
velozmente. Otras especies del gnero aparecen raramente. Figura 36.
Familia Amphileptidae.
Los ciliados pertenecientes a esta familia son de forma alargada, afilado anteriormente y ms ancho
posteriormente. Estn comprimidos lateralmente, en modo que muestran normalmente al observador el lado
68
izquierdo del cuerpo. La apertura del citostoma se encuentra en la superficie ventral, que al observador le
aparece situada en el margen izquierdo.
GNERO HEMIOPHRYS.
Incluye ciliados en forma de frasco. La ciliatura del cuerpo se limita al lado derecho. La parte ventral y
convexa, presenta un largo citostoma en una hendidura.
Dos macroncleos esfricos, vacuola contrctil en gran nmero, que vara la cantidad en cada especie,
cuando aparece una sola vacuola, no se sita nunca en posicin completamente terminal. Alguna especie habita
en el fango activo.
HEMIOPHRYS FUSIDENS. (c. predador)
Longitud 80-200m, de forma esbelta. La regin anterior presenta numerosos "tricocistes". Una sola
vacuola contrctil situada en la proximidad del polo inferior del cuerpo.
Su presencia en el fango activo es espordica, en este ambiente desarrolla el papel de predador de otros
ciliados (Vorticella sp.), abunda asociado a Vorticella convallaria. Figura 37.
HEMIOPHRYS BIVACUOLATA. (c. predador)
Se observa la presencia de esta especie en el fango activo. Se distingue de la especie anterior por la
presencia de 2 vacuolas contrctiles. Ambas especies aparecen, en ocasiones, en fangos activos con largos
tiempos de permanencia.
En general, debido a la actividad predadora sobre otros ciliados, estos animales pertenecientes a este
gnero no realizan una actividad relacionada con la depuracin biolgica. Estos, no deben, por tanto, ser
incluidos dentro del grupo de los ciliados nadadores. Figura 38.
GNERO LITONOTUS.
Los ciliados de este gnero tienen caractersticas similares a los del Gnero Hemiophrys. Se distinguen
por la parte anterior, generalmente ms afilado y por la presencia de vacuola contrctil en posicin terminal.
Una sola especie aparece en el fango activo.
LITONOTUS FASCIOLA. (c. libre-predador)
Longitud 100m. Cuerpo alargado y comprimido lateralmente. Parte posterior y anterior afiladas. Parte
mediana ms gruesa. El cuerpo est cubierto en su totalidad por cilios, destacando por su tamao los de la
regin dorsal, que se disponen a forma de peine. Citostoma largo, casi un tercio del cuerpo. Dos macroncleos
esfricos en la parte media del cuerpo.
69
70
34
36
35
37
38
39
40
Figura 34: Coleps hirtus; Figura 35: Trachelophyllum pusillum; Figura 36: Spathidium opimum; Figura 37: Hemiophrys
fusidens; Figura 38: Hemiophrys bivacuolata; Figura 39: Litonotus fasciola; Figura 40: Colpoda cucullus.
71
SUBCLASE HYPOSTOMATIA.
- Orden Cyrtophorida: Cuerpo aplanado dorso-ventralmente.
- Orden Nassulida: Cuerpo aplanado lateralmente.
ORDEN CYRTOPHORIDA.
Dos familias aparecen en depuradoras de aguas residuales.
- Familia Dysteriidae: Presencia de un estilo mvil en el polo posterior.
- Familia Chilodonellidae: Ausencia de estilo.
Familia Dysteriidae.
Un solo gnero se observa en el fango activo.
GNERO TROCHILIA.
Ciliado de forma ovalada, con superficie dorsal convexa y superficie ventral plana cncava. Ciliatura
presente slo en la parte ventral. Citostoma colocado en un surco cercano en el lado derecho. Parte terminal
provista de una espina mvil. Macroncleo esfrico central, dos vacuolas contrctiles.
TROCHILIA MINUTA. (c. mvil de fondo)
Longitud 30-40m ovoidal. Frecuentemente en el fango activo apareciendo en abundante nmero. Se
alimenta de bacterias. La abundancia de esta especie est asociada al desarrollo de bacterias filamentosas, de las
cuales se alimenta.
Con el movimiento del cibo arrastra flculos de fango, por ello, su comportamiento debe ser
considerado, desde el punto de vista funcional, como ciliado mvil de fondo. Figura 41
Familia Chilodonellidal.
Un solo gnero aparece en depuradoras.
GNERO CHILODONELLA.
A este gnero pertenecen ciliados de forma oval, aplanados dorsoventralmente. La superficie dorsal es
convexa, mientras que la ventral es plana. La parte dorsal anterior, que es aplanada, es atravesada por una fila
de cilios largos. El citostoma es redondo, citofaringe sobresaliente con forma de cono. Macroncleo redondo.
Una ms vacuolas contrctiles, segn la especie. Dos especies aparecen en depuradoras.
72
ORDEN NASSULIDA.
- Gnero Leptopharynx: Apertura oral en parte anterior del cuerpo.
- Gnero Microthorax: Apertura oral cercana al final de la parte posterior del cuerpo.
GNERO LEPTOPHARINX.
Ciliado
aplanado
lateralmente.
Recorrido
longitudinalmente
por
surcos.
Ciliatura
dispersa,
predominando en el lado derecho. Citostoma colocado en el lado izquierdo del cuerpo, en la zona superior.
Citofaringe tubular. Macroncleo esfrico en posicin central, estn presentes dos vacuolas contrctiles. Una
sola especie aparece en el fango activo.
LEPTOPHARYNX EUGLENIVORA. (c. libre)
Longitud 25-40m. Las restantes caractersticas morfolgicas son las de su gnero. Infrecuente en el
fango activo. Este ciliado nadador se nutre de bacterias y de flagelados (Euglenceas).
ste aparece cuando en la balsa de aireacin existe una cantidad discreta de grandes flagelados (Euglena,
Peranema). En este caso ,su presencia indica una carga de entrada poco concentrada. Otras especies del gnero
pueden observarse en el fango activo, sobre todo en ocasiones con plantas ricas en materia vegetal en
descomposicin. Figura 44.
73
GNERO MICROTHORAX.
Ciliados pequeos y aplanados, provistos de una delicada armadura a forma de quilla ms menos
ahusada anteriormente y redondeada posteriormente. Citostoma ventral en la parte inferior del cuerpo, carece de
citofaringe. Macroncleo esfrico. Dos vacuolas contrctiles. Una sola especie en el fango activo.
MICROTHORAX SULCATUS. (c. libre)
Longitud 30-40m. Las dems caractersticas morfolgicas son las del gnero al cual pertenece. Bastante
raro en el fango activo. Fagocita bacterias y flagelados. Este ciliado nadador se observa sobre todo en fangos
ricos en partculas vegetales en descomposicin. Figura 45.
SUBCLASE SUCTORIA.
ORDEN SUCTORIDA.
Los miembros pertenecientes a este grupo no poseen cilios u otros rganos mviles para su
desplazamiento en la fase adulta. Durante la fase joven poseen cilios y nadan libremente.
Los miembros de este orden se caracterizan por la presencia de numerosos tentculos, por medio de los
cuales capturan otros animales, principalmente ciliados, de los que se alimentan. Los tentculos pueden estar
dispersos por la superficie del cuerpo, o bien, agrupados en haces.
El estudio taxonmico del grupo requiere el conocimiento del proceso reproductivo, de todas formas est
limitada su presencia en el fango activo a pocas especies y es posible una identificacin, en base a la morfologa
del estado adulto.
La presencia de este animal en el fango activo indica, en trminos generales, un largo tiempo de
retencin del fango. La actividad predadora sobre otros ciliados limita su importancia en el proceso biolgico de
depuracin, por esta razn los suctores, aunque ssiles, no deben ser incluidos en ninguno de los tres grupos
funcionales.
-
74
GNERO PODOPHRYA.
PODOPHRYA FIXA. (c. predador)
Suctor de forma esfrica. Dimetro 10-50m. Numerosos tentculos distribuidos por toda la superficie
del cuerpo. Pednculo poco ms largo que el cuerpo, estriado transversalmente. Macroncleo esfrico en
posicin ms o menos centrada y una vacuola contrctil en la parte anterior.
Frecuente en el fango activo. Asociado a una baja calidad del efluente. Frecuentemente se encuentra con
alta edad del fango. Figura 46.
PODOPHRYA MAUPASI. (c. predador)
Dimetro 40-50m. Parecido a Podophrya fixa, se diferencia de l por un nmero inferior de tentculos,
y por la presencia de una sutil capa gelatinosa que envuelve el cuerpo. Frecuente en el fango activo. Figura 47.
GNERO ACINETA.
ACINETA CUSPIDATA. (c. predador)
Dimensiones 30-50m. Lrica en forma de copa, apoyada sobre un corto pednculo. Dos haces de
tentculos se disponen en la parte superior. Ncleo redondo, situado en la zona inferior. Figura 48.
Infrecuente en el fango activo. A veces, pegado al fango, aparece otra especie. Acineta foetida. Su
rgimen alimenticio est condicionado por la presencia de ciliados holotricos e hipotricos que succiona con los
tentculos. Aparecen en los fangos activados de aireaciones prolongadas, con alta edad del fango, con buenas
calidades del agua tratada.
ERIACINETA S.P. (c. predador)
Cuerpo celular envuelto por un caparazn aplanado. De forma muy variable, ms estrecho en la base,
donde se apoya en un corto pednculo. Por la hendidura anterior de caparazn salen dos grupos de tentculos
terminados en una especie de botn. stos son retrctiles, extendindolos y contrayndolos continuamente.
Segn la forma presentan entre 1 y 8 vacuolas contrctiles. Tamao 65-450 m, sin embargo los que suelen
aparecer en depuradoras, tienen un tamao que oscila entre 80 y 150 m.
Frecuente en fangos activos. Suelen aparecer en condiciones de elevada edad del fango y baja carga. Su
presencia es compatible con buenos niveles de depuracin.
GNERO TOKOPHRYA.
TOKOPHRYA QUADRIPARTITA. (c. predador)
Longitud 50-70m. Forma de pirmide cuadrangular ms o menos redondeada. Cuatro haces de
tentculos en los ngulos de la superficie anterior. Pednculo rgido de longitud 2-4 veces la del cuerpo.
Macroncleo ovalado, situado en el centro del cuerpo. Vacuola contrctil situada en la regin anterior.
75
Frecuente en el fango activo. Predador de ciliados nadadores y reptantes. Es indicador de situaciones con
alta edad del fango, baja carga y buenos rendimientos de depuracin. Figura 49.
TOKOPHRYA INFUSIONUM. (c. predador)
Tiene forma de pirmide invertida, semejante a un corazn, con un corto pednculo con estriacin
transversal y longitudinal. Los tentculos salen de la regin frontal y se hallan agrupados en dos haces. El
macroncleo oval est situado en el centro del cuerpo y la vacuola contrctil est unida a la superficie celular
por canales permanentes. Tamao 60m.
Es indicador de situaciones con alta edad del fango, baja carga y buenos rendimientos de depuracin.
TOKOPHRYA LEMNARUM. (c. predador)
Suctor de cuerpo esfrico provisto de un largo pednculo. Presenta los tentculos limitados a la mitad
anterior del cuerpo, agrupados en dos haces. Cada tentculo est atravesado por un fino canal. El macroncleo
est situado en la posicin central y es esfrico, situndose una vacuola contrctil en la parte anterior. Tamao
70 m.
En los procesos de depuracin, aparece en las mismas circunstancias que T. quadripartita y T.
infusionum.
76
41
43
42
44
46
45
48
47
49
Figura 41: Trochilia minuta; Figura 42: Trochilia uncinata; Figura 43: Chiledonella cucullulus; Figura 44:
Leptopharynx euglenivora; Figura 45: Microthorax sulcatus; Figura 46: Podophrya fixa: Figura 47: Podophrya
maupasi; Figura 48: Acineta cuspidata; Figura 49: Tokophrya quadripartita.
77
CLASE OLIGOHYMENOPHORA.
SUBCLASE HYMENOSTOMATIA.
Los miembros de esta subclase se caracterizan por poseer una cavidad bucal bien definida, incluyendo
membranela. El rea bucal se sita en la superficie ventral del cuerpo, generalmente cerca del rea anterior.
10
SUBORDEN PENICULINA.
Un solo gnero aparece en depuradoras.
GNERO PARAMECIUM.
Los ciliados pertenecientes a este gnero tienen forma ovalada o de puro, con ciliatura repartida
uniformemente por todo el cuerpo, destacando un penacho de cilios ms largo en el polo posterior del cuerpo,
cavidad oral (vestbulo) profunda y ligeramente oblicua, que se abre en el peristoma. En el peristoma se sita
una membranela rodeada de dos grupos de caractersticos cilios.
Macroncleo elipsoidal, uno ms microncleos. 1 2 vacuolas contrctiles. Tienen en el cuerpo
numerosos "tricocistes", que, en caso de necesidad, pueden ser expulsados. Algunas especies aparecen en
depuradoras.
10
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
78
SUBORDEN TETRAHYMENINA.
Los ciliados pertenecientes a este grupo son de dimensiones pequeo-media. La ciliatura oral es
generalmente reducida.
-
GNERO SATHROPHILUS.
Los miembros de este gnero tienen el cuerpo ovalado y comprimido. Cavidad oral en el primer tercio
anterior del cuerpo, cercano al margen derecho del cuerpo. Macroncleo en zona central.
SATHROPHILUS PUTRINUS. (c. libre)
Dimensin 30-50m ovoidal, aplanado. Se nutre de bacterias dispersas.
En el fango activo, aparece de forma discreta durante la primera fase de colonizacin del reactor. Su
presencia en un fango bien formado indica que existe una carga muy fuerte o un tiempo de retencin muy breve.
Figura 52. A veces aparece en el fango activo SATHROPHILUS OVIFORMIS.
GNERO COLPIDIUM.
Ovoidal, con ciliatura uniforme dispuesta por un nmero variable de filas. Citostoma pequeo triangular,
situado cerca del polo anterior sobre el lado derecho. Bajo la apertura oral parte una sola fila de cilios.
79
80
SUBORDEN PLEURONEMATINA.
GNERO CYCLIDIUM.
Pequeo ciliado de forma ovoidal, provisto de una larga cerda caudal. Peristoma situado sobre el lado
derecho del cuerpo y provisto de una membrana que forma una larga cavidad entorno al citostoma. Ciliatura
dispersa a lo largo del cuerpo, macroncleo esfrico, vacuola contrctil ms menos terminal.
CYCLIDIUM GLAUCOMA. (c. libre)
Longitud 15-30m. Ovoidal con extremidad ligeramente truncada. Polo superior libre de cilios, polo
inferior dotado de un largo cilio caudal. Diez filas de cilios a lo largo del cuerpo. Membrana ondulante larga.
Macroncleo esfrico situado sobre la mitad anterior. Vacuola contrctil terminal. Se mueve mediante rpidos
saltos, alternados con periodos en los que permanece completamente quieto. Se nutre de bacterias.
Es infrecuente en el fango activo. Aparece durante las primeras fases de colonizacin, siendo indicador
cuando aparece en un cultivo establecido, de una carga fuerte o un tiempo corto de residencia. Figura 57.
SUBORDEN PHILASTERINA.
-
Endoplasma granuloso, muy oscuro. Vacuola contrctil hacia la mitad del cuerpo. Gnero
Dexiotricha.
*
-
GNERO CINETOCHILUM.
Pequeos ciliados de forma discoidal, aplanados. Ciliatura dispuesta sobre la superficie ventral. Cavidad
oral en la mitad inferior del cuerpo. Largo cilio terminal.
CINETOCHILUM MARGARITACEUM. (c. libre)
Longitud 15-45m; de forma ovoidal, aplanado. Ciliatura slo sobre la superficie ventral. 3-4 largos
cilios caudales. Cavidad oral situada en la regin inferior derecha del cuerpo. Macroncleo esfrico ms
menos central. Vacuola contrctil subterminal. Se alimenta de bacterias. Ciliado nadador frecuente en el fango
activo.
Presenta una baja tolerancia al amonaco libre y en general a los compuestos nitrogenados. Compatible
con una buena depuracin. Figura 58.
81
GNERO DEXIOTRICHA.
DEXIOTRICHA COLPIDIUPSIS. (c. libre)
Ciliado de forma ovalada ligeramente truncada por la extremidad superior. El cuerpo est uniformemente
cubierto de cilios y presenta un largo cilio caudal. Cavidad oral subapical, una fila de cilios corre
transversalmente a la extremidad derecha del peristoma. Longitud 50-65m, ovoidal, ciliatura dispuesta sobre
30-34 filas de cilios. Peristoma formado por un complejo sistema de membranelas. Macroncleo esfrico,
central; vacuola contrctil en el ltimo cuarto inferior del cuerpo.
Se mueve rpidamente en el licor mezcla. Se alimenta de bacterias y flagelados. Raro en el fango activo.
Aparece en la puesta en marcha del proceso y cuando se producen sobrecargas del mismo.
DEXIOTRICHA CENTRALIS. (c. libre)
Especie con aspecto arrionado, lateralmente comprimida. Presenta una fila de cilios oblicua desde la
mitad del cuerpo hasta el borde derecho de la foseta bucal. Los otros cilios se distribuyen de manera dispersa
por todo el cuerpo. La boca se encuentra en la zona ventral. Se alimenta de bacterias. Tamao 30-45m.
Habitual en situaciones de alta carga msica.
GNERO URONEMA.
Ciliado de forma ovoidal ms menos alargado, ligeramente aplanado y carece de cilios en el polo
anterior. Cavidad oral en el lado ventral de la parte superior del cuerpo y provisto de una pequea membrana.
Macroncleo esfrico. Vacuola contrctil terminal, un largo cilio caudal.
URONEMA NIGRICANS. (c. libre)
Longitud de 21-29m, ovoidal, cuerpo alargado y ligeramente comprimido anteriormente. 11-12 filas de
cilios recorren el cuerpo. Cavidad oral alargada, situada debajo del polo anterior en posicin ventral. Membrana
ondulante a lo largo del margen derecho de la cavidad oral. Vacuola contrctil terminal. Macroncleo esfrico
en posicin central. Nada a grandes saltos.
Se alimenta de bacterias. Ciliado nadador infrecuente en el fango activo. Ecologa similar a Sathrophilus.
Figura 59.
82
SUBCLASE HYMENOSTOMATIA
11
51
54
53
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55
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56
58
59
Figura 51: Paramecium caudatum; Figura 52:Sathrophilus putrinus: Figura 53: Colpidium colpoda; Figura 54:
Colpidium campylum; Figura 55: Tetrahymena pyriformis; Figura 56: Glaucoma scintillans; Figura 57: Cyclidium
glaucoma; Figura 58: Cinetochilum margaritaceum; Figura 59: Uronema nigricans.
11
83
SUBCLASE PERITRICHIA.
A este grupo pertenecen los ciliados que constituyen normalmente la componente ms significativa de la
microfauna del fango activo. La subclase se subdivide en un solo orden (Peritrichida) el cual, a su vez, se
subdivide en dos subrdenes (Sessilina y Mobilina).
12
SUBORDEN SESSILINA.
Son ciliados ssiles con forma de copa, que se agarran al sustrato por medio de un delgado pednculo.
Carecen de ciliatura somtica y estn dotados de cilios slo en torno al polo apical, en el cual se abre el
citostoma. Pueden ser individuales coloniales. El pednculo puede ser rgido contrctil. La contractibilidad
del pednculo es debido a la presencia de mionema en el interior del mismo. El macroncleo tiene forma de
cinta. La vacuola contrctil se sita en posicin subapical.
Los individuos ssiles pueden producir formas libres nadadoras (Telotroco) que carecen de pednculo y
provistos posteriormente de un anillo de cilios. Los telotrocos son producidos en mayor nmero cuando la carga
es muy baja y el tiempo de retencin del fango muy alto.
12
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
84
Forma ssil:
*
Lrica ausente:
- Pednculo contrctil. Familia Vorticellidae.
- Pednculo no contrctil:
- Presencia de un oprculo epistomal en el pice superior. Cuerpo casi nunca contrctil.
Familia Opercularidae.
- Oprculo no presente. Cuerpo contrctil. Familia Epistylididae.
Familia Vorticellidae.
-
Individuos coloniales, varios individuos se unen con sus pednculos a un pednculo principal.
*Mionema de los pednculos unidos entre s, de forma que toda la colonia se mueve junta.
Gnero Zoothamnium.
*Mionema de los distintos pednculos no conectados entre s, de forma que cada individuo se
contrae autnomamente. Gnero Carchesium.
Individuos solitarios, por el pednculo cada organismo se agarra al sustrato. Gnero Vorticella.
GNERO ZOOTHAMNIUM.
ZOOTHAMNIUM PYGMAEUN. (c. fijo)
Peritrico colonial. Contraccin simultnea de todos los organismos de la colonia. Estos animales se
nutren de bacterias. Son frecuentes en el fango activo. Figura 61.
ZOOTHAMNIUM MUCEDO. (c. fijo)
Es la otra especie que aparece en el fango activo. Estos prozoos se asocian a una buena depuracin y a
un efluente de alta calidad. Figura 62.
GNERO CARCHESIUM.
CARCHESIUM POLYPINUM. (c. fijo)
Longitud 80-140m. La colonia puede alcanzar un tamao superior al milmetro. Forma de campana con
peristoma amplio. Macroncleo con forma de "C". Pelcula externa no estriada. Los mionemas de cada
85
individuo no estn unidos entre s. El mionema se contrae en espiral. Se nutre de bacterias. Infrecuente en el
fango activo.
Estos ciliados se caracterizan por consumir una gran cantidad de oxgeno, por lo que su presencia est
ligada a una buena oxigenacin. Aparecen casi exclusivamente en las cubas de aireacin con media carga, as
como en CBR, rara vez en sistemas de fuerte carga y aireacin prolongada. Figura 63.
GNERO VORTICELLA.
VORTICELLA CAMPANULA. (c. fijo)
Es la especie ms grande de las que integra el gnero Vorticella. Longitud 50-160m, anchura 35100m. Pednculo 250-350m. Forma de campana con regin peristomal muy ancha. Cuerpo ligeramente
estriado transversalmente. Citoplasma con numerosos grnulos de reserva que son refractantes y oscuros.
Macroncleo en forma de "C". El pednculo es muy grueso y se contrae en espiral. Es muy similar a V.
convallaria, de la que fcilmente se distingue por su enorme tamao, el grosor del pednculo y la presencia de
grnulos de reserva.
Se nutre de bacterias. Es raro en el fango activo. Aparece en forma solitaria sin construir colonias.
Suelen indicar un empeoramiento en la calidad del flculo, mostrndose este ms disgregado y producindose
una ligera prdida del mismo en los decantadores. Figura 64.
VORTICELLA CONVALLARIA. (c. fijo)
Longitud 30-120m, lo ms habitual suele ser 80m anchura 35-70m. Longitud del pednculo 100500m. Se distingue de Vorticella campanula por poseer un cuerpo ms esbelto, el citoplasma ligeramente
amarillo y por no poseer grnulos refractantes. Peristoma ligeramente arqueado. Estras transversales fcilmente
observables. Vacuola alimentaria de contorno ovalado. Se alimenta de bacterias.
Es frecuente en el fango activo, se suele encontrar asociado a ASPIDISCA CICADA. Si se presenta
dominando al resto y en nmero alto, es ndice de un fenmeno transitorio debido a una fuerte extraccin de
fango de la balsa. En la situacin que ms abunda es con media carga. Puede constituir la fauna dominante de
un fango activo, sobre todo cuando el fango no est muy bien floculado, apareciendo muy disperso, por ello
puede haber una constante y ligera prdida de flculos en los decantadores. Figura 65.
VORTICELLA MICROSTOMA. (c. fijo)
Esta bacteria tiene forma de peonza. Longitud 35-83m, anchura 22-50m, longitud del pednculo hasta
400m. Peristoma estrecho 12-25m, cuerpo ligeramente estriado, macroncleo dispuesto longitudinalmente.
Presenta una vacuola contrctil cercana a la abertura oral y numerosas vacuolas digestivas de forma esfrica.
Se nutre de bacterias y flagelados. Es frecuente en el fango activo. Indicador de bajo rendimiento de
depuracin debido, casi siempre, a carencia de oxgeno. Frecuente en la fase de arranque o rearranque de la
planta. Al alimentarse tambin de algas unicelulares, suele ser frecuente en lagunas aireadas. Figura 66.
86
Familia Vaginicolidae.
Presencia de membrana lriga que engloba a 1 2 individuos con sin pednculo, presenta un cuerpo
alargado en forma de trompa. La extremidad apical, donde se sita la apertura oral, sale de la lriga cuando el
animal est completamente extendido. Un solo Gnero aparece en el fango activo, GNERO VAGINICOLA..
VAGINICOLA CRISTALLINA. (c. fijo)
Longitud 100-200m, lriga incolora de forma cilndrica, redondeada en la base. Generalmente la lriga
hospeda dos individuos alargados que se nutren de bacterias y flagelados.
No es tpica de depuradoras. La presencia, infrecuente, de ste ciliado se asocia casi siempre a efluentes
poco concentrados diluidos. Aparecen en sistemas de aireacin prolongada con muy baja carga y tiempos de
retencin muy altos. Figura 68.
Familia Operculidae.
OPERCULARIA COARCTATA. (c. fijo)
Longitud 45-50m. Longitud del pednculo 50-100m. Forma alargada, macroncleo curvado y situado
en el centro del cuerpo. Pednculo de la colonia no estriado longitudinalmente, no segmentado, que se ramifica
de forma dicotmica al formar la colonia. Colonia muy numerosa, generalmente de 4-6 individuos. Se alimenta
de bacterias. Es normal en el fango activo.
La presencia de una cantidad importante de este ciliado, indica una imperfecta depuracin biolgica
acompaada de valores de oxgeno disuelto muy bajos. Esta situacin es caracterstica de condiciones
transitorias como el aumento repentino de carga orgnica. Un fango colonizado casi exclusivamente por esta
especie es ndice de un vertido txico (sales metlicas) procedente de alguna industria. Figura 69.
OPERCULARIA MNIMA. (c. fijo)
En esta especie el pednculo, que es lo empleado para distinguirlo de las dems especies, es corto
segmentado y estriado longitudinalmente.
87
Familia Epistylididae.
EPISTYLIS PLICATILIS. (c. fijo)
Es la especie del GNERO EPISTYLIS, ms frecuente en el fango activo. Longitud 100m. Longitud de la
colonia hasta 3 mm. Forma alargada, disco peristomal ligeramente arqueado. La parte basal de un individuo
contrado, se presenta con un caracterstico pliegue. Macroncleo en posicin oblicua de forma tal que rodea la
citofaringe. Pednculo no estriado ni segmentado. Se alimenta de bacterias. Comn en el fango activo. Su
presencia es un hecho normal en un fango maduro.
La longitud de los pednculos varia en base a la concentracin de los fangos en la cuba, siendo largos en
concentraciones bajas y cortos cuando estn muy concentrados. Este microorganismo se encuentra
generalmente en condiciones de media carga y en depuradoras con aireacin prolongada. Presentan cierta
resistencia a vertidos puntuales con fuerte contaminacin, por lo que suelen ser indicativos de contaminacin
industrial. Su proliferacin en un momento dado, puede ser indicativo de alguna alteracin en el proceso,
variacin brusca de carga, vertidos puntuales.....
Figura 71.
En el fango activo es frecuente la presencia de EPISTYLIS URCEOLATA, de dimensiones variables
entre 120-190 y con el pednculo estriado longitudinalmente. Figura 72.
Otras especies observadas en el fango activo son: EPISTYLIS POLENICI (A) y EPISTYLIS
THIENEMANNI (B).
88
SUBCLASE PERITRICHIA
13
61
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65
69
64
63
66
70
67
68
71
72
Figura 61: Zoothamnium pygmaeun; Figura 62: Zoothamnium mucedo; Figura 63: Carchesium polypinum; Figura
64: Vorticella campanula; Figura 65: Vorticella convallaria; Figura 66: Vorticella microstoma; Figura 67: Vorticella
striata; Figura 68: Vaginicola cristallina; Figura 69: Opercularia coarctata; Figura 70: Opercularia microdiscum;
Figura 71: Epistylis plicatilis; Figura 72: Epistylis urceolata.
13
89
CLASE POLYMENOPHORA.
SUBCLASE SPIROTRICHIA.
Los ciliados pertenecientes a esta subclase se caracterizan por un gran desarrollo de la ciliatura oral con
una zona alrededor de la membranela. Dos rdenes se observan en el fango activo.
14
Ausencia de cirros, ciliatura comn uniforme por toda la superficie del cuerpo. Orden Heterotrichida.
ORDEN HETEROTRICHIDA.
-
GNERO SPIROSTOMUM.
Ciliado alargado, de forma cilndrica, muy aplanado, de color amarillo oscuro. Peristoma rodeado por
una corta membranela. Vacuola contrctil terminal amplia. Dimensin variable de 150m a 2 mm, segn la
especie.
SPIROSTOMUM TERES. (c. libre)
Longitud de 150-400m. Peristoma transcurre por un tercio de la longitud del cuerpo. Macroncleo
ovalado, vacuola contrctil terminal. Se alimenta de bacterias, flagelados y algas. Cuando nada avanza
lentamente porque retrocede rodando a lo largo del propio eje longitudinal del cuerpo. Infrecuente en el fango
activo.
Especie de baja tolerancia al amonaco. Su presencia en el fango activo siempre es indicadora de un
influente poco concentrado. Figura 74.
14
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
90
GNERO STENTOR.
A este grupo pertenecen ciliados muy contrctiles, que poseen una forma subesfrica (contraccin) de
trompa (extensin). La membranela que rodea el peristoma forma un crculo casi cerrado. La vacuola contrctil
se sita junto al citostoma.
Tiene la capacidad de fijarse al suelo con la extremidad inferior del cuerpo, al cual excreta una masa
gelatinosa. El endoplasma asume coloracin diversa dependiendo de la especie. Sin capacidad de natacin, su
movimiento se reduce a contraerse y dilatarse y a hacer girar sus cilios peribucales.
STENTOR ROESELI. (c. fijo)
Longitud 0,5-1mm. Aspecto de trompa. Muy contrctil. Endoplasma de color gris. Superficie del cuerpo
esparcida por grupos de largos cilios. Macroncleo nastriforme. Regin posterior cubierta por una espesa
envoltura gelatinosa. Raro en el fango activo.
Su presencia se asocia a plantas que funcionan correctamente, pero que estn alimentadas por agua con
una carga muy dbil. Por su capacidad de fijarse al suelo deben ser incluidos entre los ciliados ssiles. Figura
75.
STENTOR S.P. (c. fijo)
Tamao 1-2mm. Poco abundante en los fangos activos de depuradoras. Se suelen encontrar en lagunas
de maduracin, fijado sobre plantas acuticas o sustratos relativamente estables y en CBR.
ORDEN HYPOTRICHIDA.
A este grupo pertenecen ciliados que tienen la ciliatura somtica sobre la zona ventral del cuerpo
formada por cirros. Estos cirros colocados en la superficie ventral se distribuyen de la siguiente forma: frontal
ventral, transversal, marginal y caudal.
La zona alrededor de la membranela es muy prominente en la regin oral. El cuerpo est aplanado dorsoventralmente y frecuentemente presenta una pelcula rgida. Tres familias se observan en el fango activo.
-
Cirros marginales ausentes del lado derecho. Generalmente ausentes reducidos a 1-3 cirros en el lado
izquierdo.
* Zona alrededor de la membranela reducida a dos pequeos y distintos grupos. Familia
Aspidiscidae.
* Zona alrededor de la membranela bien desarrollada y prominente. Familia Euplotidae.
Cirro marginal siempre presente, al menos con una fila de 20 ms en cada lado. Familia
Oxytrichidae.
91
Familia Oxytrichidae.
-
GNERO TACHYSOMA.
TACHYSOMA PELLIONELLA. (c. mvil de fondo)
Longitud 65-85m. Forma elipsoidal alargada. 8 cirros frontales, 5 ventrales, 5 transversales muy largos,
2 filas de cirros marginales en cada lado. Vacuola contrctil en la regin mediana del lado izquierdo. Dos
macroncleos.
Se alimenta de bacterias, flagelados y algas. Raro en el fango activo. La presencia de esta especie mvil
de fondo indica, en general, un influente poco concentrado. Figura 76.
GNERO STYLONYCHIA.
STYLONYCHIA PUTRINA(A). (c. mvil de fondo)
Longitud 125-145m. Cuerpo rgido, aplanado, alargado de forma ovalada. Lado derecho e izquierdo
ms menos similares. 8 cirros frontales, 5 ventrales, 5 transversales y 3 caudales bastante visibles. Dos
macroncleos.
Este ciliado mvil de fondo se alimenta de bacterias y flagelados. Raro en el fango activo. A veces, es
posible observar en el fango la presencia de STYLONYCHIA MYTYLUS, especie similar a sta. Figura 77.
Familia Euplotidae.
Un solo Gnero Euplotes se observa en el fango activo.
GNERO EUPLOTES.
EUPLOTES AFFINIS. (c. mvil de fondo)
Longitud 40-70m, forma elipsoidal, aplanado dorso-ventralmente. En la parte anterior se observa un
collar de cirros que se dirigen hacia el citostoma. Superficie ventral con 9 cirros fronto-ventrales, de los cuales 2
estn en el margen derecho. 5 cirros transversales y 4 caudales situados hacia el lado izquierdo.
Macroncleo en forma de cinta dispuesto en forma de "3". Estrechamente ligado al flculo del fango,
donde se alimenta de bacterias y flagelados. Frecuente en el fango activo, sobre todo durante la fase transitoria
de colonizacin. Con frecuencia aparece junto a Aspidisca cicada, indicando una buena eficacia de depuracin.
Especie mvil de fondo.
Puede ser confundido con EUPLOTES CRENOSUS, tambin frecuente en el fango activo. Figura 78.
92
Familia Aspidiscidae.
Dos especies pertenecientes al Gnero Aspidisca viven comnmente en plantas depuradoras.
GNERO ASPIDISCA.
ASPIDISCA CICADA. (c. mvil de fondo)
Dimensiones 25-40m, de forma redondeada, provisto de una pelcula rgida, superficie dorsal convexa
y provista de 6 finas estrias similares a costillas, superficie ventral plana, portando 7 cirros fronto-ventrales y 5
transversales. La cavidad oral se abre en la parte posterior del margen izquierdo. Macroncleo en forma de cinta
doblada en "C". Vacuola contrctil cercana al margen derecho.
Esta especie, como todos los Hypotrichi que se describen, vive sobre el flculo del fango sobre el cual se
aposta en espera de alimento (bacterias dispersas), luego forma parte del grupo funcional de ciliados mviles de
fondo. Muy comn y abundante en el fango activo. Abunda en asociacin con Vorticella convallaria. La
presencia masiva de esta especie indica condiciones de estabilidad, asociado a una buena eficacia de depuracin
biolgica. Figura 80.
ASPIDISCA LYNCEUS. (c. mvil de fondo)
Longitud 30-50m. Caractersticas morfolgicas y comportamiento muy similar a Aspidisca cicada. Se
distingue de sta por poseer la superficie dorsal lisa y sin surcos. Se alimenta de bacterias. Infrecuente en el
fango activo. Figura 81.
93
CLASE POLYMENOPHORA
15
74
75
78
77
76
81
80
79
Figura 74: Spirostomum teres; Figura 75: Stentor roeseli; Figura 76: Tachysoma pellionella; Figura 77:
Stylonychia putrina; Figura 78: Euplotes affinis; Figura 79:Euplotes patella; Figura 80: Aspidisca cicada; Figura
81: Aspidisca lynceus.
15
94
BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC (Londres).
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MADONI, P. (1988). I protozoi ciliati nel controllo di efficienza dei fanghi attivi.
95
METAZOOS
96
METAZOOS
CLASE NEMATODOS.
Los nematodos se encuentran ampliamente distribuidos tanto en ambientes acuticos como terrestres.
En general, los nematodos de forma libre son muy similares en cuanto a apariencia. Presentan un cuerpo
cilndrico que se estrecha en ambos extremos (cuerpo fusiforme), con una longitud media en la mayora de las
especies de 0,5-3 mm. La boca se encuentra rodeada por papilas y se contina en una faringe musculosa que
desemboca en el ano. Se alimentan de bacterias, materia orgnica y pequeos organismos. Son indicadores de
elevadas edades de fango.
De los 10 rdenes reconocidos por Goodey slo estn presentes en plantas de aguas residuales:
Rhabditida, Enoplida (Tobrilus, Tripyla, Monochus), Dorylaimida (Dorylaimus), Araeolaimida (Plectus) y
Monhysterida (Monhystera). Las especies de los cuatro ltimos rdenes mencionados slo se observan rara vez
en las aguas residuales y son principalmente invasores casuales de los biotopos vecinos. Varias especies del
orden Rhabditida son representantes habituales de las plantas de tratamiento de aguas residuales. Los
componentes del orden Rhabditida se caracterizan por la posesin de un bulbo farngeo terminal y la ausencia
de glndulas caudales.
16
Figura 82. Estructura general de un nematodo y los principales tipos presentes en las aguas residuales. (A) Rhabditinae; (B) Diplogasterinae.
Abreviaturas: st = estoma; mb = bulbo farngeo medial, tb = bulbo farngeo medial, i = intestino, t = testculo, ov = ovario, v = vulva, b =
bursa. Tipos de estoma: Diplogasterinae: 1 = Mononchoides, 2 = Paroigolaimella, 3 = Diplogasteritus. Rhabditinae: 4 = Rhabditoodes.
Araeolaimida: 5 = Plectus. Monhysterida: 6 = Monhystera. Enoplida: 7 = Tobrilus. Dorylaimida: 8 = Dorylaimus.
16
97
La alimentacin de las especies ms habituales en los sistemas de fangos activos se desarrolla o bien
mediante filtracin de bacterias dispersas o materia orgnica particulada (de la misma forma que los ciliados
peritricos ssiles), proceso que se ve fcilitado por la fijacin al sustrato con el pie, o bien la alimentacin se
17
98
lleva a cabo ingiriendo pequeas porciones de flculos, consumiendo igualmente bacterias y materia orgnica.
En general, son indicadores de elevadas edades de fango.
Segn Voigt (1957), la clase Rotifera puede subdividirse en tres rdenes, de los que Seisonidae est
constituido por organismos marinos. Los otros dos, Bdelloidea y Monogononta estn ampliamente
representados en los procesos de tratamiento de aguas residuales, aunque en diferentes proporciones.
Bdelloidea est formado por cuatro familias, tres de las cuales se han encontrado en procesos de fangos
activos.
Monogononta est formada por once familias de las cuales la mayora son planctnicas, aunque dentro
de este grupo pueden encontrarse formas fijas al sustrato, reptantes (que recuerdan a Bdelloidea) y formas
totalmente libres. Este grupo est representado en todo el proceso de depuracin. Bdelloidea (p. ej. Philodina)
tiene un pie bien desarrollado con 0-4 dedos (Figura 83). Aunque son capaces de nadar, propulsados por la
agitacin de la corona de cilios, su mtodo habitual de movimiento es como el de un organismo reptante. Son
capaces de soportar largos periodos de desecacin; algunos Bdelloideos producen un quiste de proteccin
cuando las condiciones ambientales son adversas. Algunos permanecen en estado de enquistamiento durante
largos periodos de 3-4 aos. Este grupo est particularmente bien adaptado para sobrevivir en lugares de
condiciones ambientales cambiantes.
18
Figura 84 (a) Brachionus calcyfolius, (b) Keratella cochlearis, (c) Asplanchna sp., (d) Filinia longiseta
Monogononta abarca gneros que presentan todas las posibilidades en cuanto al desarrollo del pie.
Puede estar completamente ausente (Keratella cochlearis, Asplanchna sp. Figura 77); reducido y empleado
principalmente para adherirse ms que para desplazarse (Brachionus sp.) o el pie es empleado principalmente
18
99
para desplazarse (Lecane sp., Notommata sp.; Figura 2). La familia predominante de Monogononta es
Brachionidae, particularmente el gnero Brachionus (especie de pie reducido), que presenta cinco de las siete
especies de esta familia. En el fango activo, donde hay mucho material en suspensin, la familia predominante
de Monogononta es Lecanidae. Aunque slo sea morfolgicamente, esta familia recuerda a Brachionidae, pues
el gnero ms importante en las plantas de tratamiento de aguas residuales, Lecane, hace gran uso del pie
durante la locomocin. Este rotfero es el reptante ms frecuentemente hallado sobre las superficies de piedras o
de algas filamentosas.
ANLIDOS.
Filum Annelida
Clase Oligochaeta
Orden Plesiopora
1.
Aelosomatidae.
Anlido de aspecto vermiforme, de cuerpo segmentado y provisto de haces de sedas (3-4) o quetas en
cada segmento en la zona dorsal. Como la mayora de los oligoquetos, son de los organismos ms grandes
presentes en el sistema de fangos activos, con un tamao de 1,5-4 mm. Es caracterstico en este microorganismo
la presencia de abundantes vacuolas de color rojizo o amarillento que contienen sustancias oleosas. Es habitual,
tal que el resto de los oligoquetos, en procesos con elevadas edades de fango y durante etapas de nitrificacin.
Se alimentan de detritus, bacterias y algas.
19
Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".
100
2.
Enchytraeidae.
Enchytraeus albidus
Enchytraeus buchholzi
Enchytraeus coronatus
Enchytraeus minutus
Lumbricillus rivalis
Lumbricillus lineatus
Fredericia sp.
Buchholzia appendiculata
3.
Naididae.
Nais simplex
Pristina foreli
Chaetogaster langi
Pristina idrensis
Nais elinguis
Nais variabilis
4.
Tubificidae
Tubifex tubifex
Limnodrilus udekemiamus
5.
Lumbriculidae
Lumbriculus variegatus
Orden Opisthopora
6.
Lumbricidae
Hirudidae
Haemopsis sanguisuga
Orden Pharyngobdellidae
8.
Erpobdellidae
Trocheta subviridis
101
Figura 86: Chaetonus laroides las espinas que recubren el cuerpo carecen de puntas secundarias. Sobre el tercio
medio y posterior del cuerpo se disponen grandes espinas en 7 hileras longitudinales. Las espinas de la cabeza y
del cuello son 4 veces ms cortas; las espinas de la base cara dorsal llegan hasta la base de los dedos. 186-200
m.
20
102
BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).
103
TCNICA ANALTICA
Generalidades
El informe biolgico establecido consta de 4 "hojas de trabajo" o "fichas de recogida y anlisis de datos
microbiolgicos", en las que por una parte se establece una evaluacin de la calidad del fango como ndice de
fango (IF) (1"Evaluacin macroscpica y microscpica del fango activado"), y por otra, se realiza una
valoracin de la biota, tanto en el mbito de bacterias filamentosas (2"Evaluacin de las bacterias filamentosas")
como de protozoos (3"Evaluacin de la microfauna"). De la integracin de estas tres hojas de trabajo se obtiene
la ltima, en la que se concluye sobre la calidad previsible del agua de salida, as como la estabilidad biolgica
del sistema (4"Evaluacin final del fango activado").
Se sobreentiende que se poseen unos conocimientos mnimos sobre el manejo del microscopio
(Captulo 2) y de muestras de fango activado. Igualmente, se requiere de un adiestramiento suficiente como para
reconocer los diferentes grupos funcionales de protozoos (Captulo 4).
Campo de aplicacin
Este sistema est diseado para poder obtener, de una forma lo ms metdica posible, una informacin
complementaria a los anlisis fsico-qumicos, que permita mejorar la toma de decisiones respecto a los
parmetros operacionales de una E.D.A.R. convencional y conocer las causas de las alteraciones del proceso que
se puedan producir.
Fundamento
El anlisis se realiza sobre muestras in vivo del fango activado de una E.D.A.R. a la que se le pueden
realizar tres tipos de anlisis: sobre muestra viva, sobre muestra viva con colorante o sobre muestra fijada y
teida.
Procedimiento operativo de tratamiento y conservacin de las muestras
Preparacin del microscopio.
1.- Realizar ajuste Khler.
2.- Ajuste de anillos para contraste de fases.
3.- Limpieza de objetivos y portaobjetos con solucin ter/etanol 3:1.
4.- Utilizar filtro azul para observar tinciones o resaltar contornos en organismos vivos.
104
5.- Utilizar filtro verde para contraste de fases y resaltar tinciones Gram y Neisser difciles de determinar.
Toma de muestras.
1.- Utilizar botes de plstico limpios de 2.000 mL.
2.- Toma de muestras a profundidad determinada y fija.
3.- Punto de muestreo fijo y en zona de mxima homogeneidad del fango.
4.- Dejar siempre el bote de muestreo de su contenido vaco.
5.- Fijar inmediatamente una submuestra con Lquido de Bowin (5 mL Bowin por cada 100 mL de muestra).
6.- Conservar la muestra en nevera a 4 C cuando se vaya a observar despus de 24 horas y hasta un mximo de
48 horas.
Tratamiento de las muestras.
1.- Muestras in vivo.
* Para observacin de la muestra sin alterar, aadir directamente una gota (25-50 L) sobre un portaobjetos
y colocar encima un cubreobjetos.
* Para inmovilizar organismos y observar estructuras visibles sin necesidad de tincin, colocar la gota sobre
el portaobjetos, poner un cubreobjetos y prensar suavemente.
2.- Muestras fijadas.
* Estudio cuantitativo de organismos.
* Observacin de las estructuras de los organismos tal y como estaban en el momento de tomar la muestra.
3.- Muestras teidas.
* Para resaltar estructuras especficas que no se observan fcilmente en la muestra in vivo.
Procedimiento operativo.
1.- Agitar con suavidad la muestra para homogeneizar cuando se quieran observar las caractersticas del flculo
o cuando se quiera realizar un anlisis cuantitativo.
2.- Dejar decantar y tomar la muestra de la porcin sedimentada cuando se quiera estudiar diversidad de
organismos.
105
3.- Tomar entre 25 y 50 L con una micropipeta con punta de boca ancha, depositarlos en un portaobjetos
(previamente desengrasado) y colocar encima un cubreobjetos. Para recuentos, cambiar la punta de la
micropipeta entre rplicas, se trata de una fuente de error muy habitual.
4.- Proceder al anlisis microscpico de la preparacin utilizando los distintos objetivos. El de 100x u objetivo
de inmersin emplea aceite y se utiliza para observar estructuras en detalle.
5.- Observar al menos de 2-3 preparaciones de la muestra.
6.- Se recomienda como complemento el anlisis de los MLSS, V30 e IVF.
Interferencias
La muestra debe ser lo ms reciente posible y se debe realizar su anlisis cuanto antes. En caso de
retraso es necesario mantenerla refrigerada a 4 C.
Si el anlisis es de protozoos, no debe retardarse ms de 24 horas. Si por el contrario es de bacterias
filamentosas, este margen puede ampliarse, hablando la bibliografa de un margen de hasta 6 das.
Es preferible siempre realizar el anlisis cuanto antes, a fin de evitar variaciones en la composicin
bitica del fango y cambios en la estructura del flculo.
Procedimiento operativo para cada hoja de trabajo
1.- Evaluacin de la calidad de un fango biolgico: Niveles macroscpicos y microscpicos.
En esta hoja se han definido una serie de parmetros considerados de inters para establecer las
caractersticas ms generales de un fango, los cuales permiten obtener un estudio simplificado de la muestra,
que genera en funcin de las caractersticas macro y microscpicas de sta, un valor denominado ndice de
fango (IF).
El IF est directamente relacionado con los porcentajes de reduccin de SS, DQO y DBO de la
E.D.A.R., proporcionando la posibilidad de obtener un histrico de valores de calidad biolgica de forma rpida,
comparable y de protocolo sencillo, a partir de la puntuacin de una serie de caractersticas del fango
macroscpicas (observables a travs de la V30) y microscpicas (observables a travs de un objetivo de 10x). El
valor final, comprendido entre 0-100, define la calidad del fango.
A nivel macroscpico (sobre la V30):
-
Turbidez
Olor
A nivel microscpico:
Diversidad de protozoos
Todas estas observaciones se han de realizar con un objetivo de 10x y, al menos, sobre 2 preparaciones
distintas de la muestra, que ser homogenizada previamente con suavidad. Con ayuda de una pipeta Pasteur, se
toma un pequeo volumen de la suspensin biolgica, se deposita sobre un portaobjetos y se coloca encima un
cubreobjetos. La informacin que se deduce de las observaciones microscpicas, junto con la obtenida durante
el ensayo de decantacin en probeta o V30, permiten otorgar un valor final de puntuacin que permitir evaluar
la calidad del fango, al encontrarse dicha puntuacin divida en distintas categoras.
Tabla 1: Categoras de ndice de Fango
NDICE DE FANGOS
0-20 psimo
20-40 malo
40-60 regular
60-80 bueno
80-100 ptimo
bacterias mviles
107
ABUNDANCIA
SIGNIFICADO
NUMRICO
0
Ninguno
Pocos
Alguno
Comunes
Muy comunes
Abundantes
Excesivos
Ambos sistemas no son comparativos, siendo ms exacto el recuento sobre la cmara Neubauer
improved. En cualquier caso, estos sistemas pueden servir de referencia si se practican de forma metdica en la
E.D.A.R., al detectar la proliferacin de bacterias filamentosas y las oscilaciones en la frecuencia de stas.
3.- Evaluacin de la microfauna presente en fangos activos. Valoracin cuantitativa. ndice bitico de
Madoni e ndice de Biodiversidad de Shannon-Weaver.
En esta hoja de trabajo se pretende valorar la diversidad de la microfauna presente mediante la
aplicacin del ndice de Madoni (Madoni, 1994) e ndice de Biodiversidad de Shanon (Margalef, 1981), as
como identificar y cuantificar los organismos presentes (protozoos y metazoos).
De estos organismos, se han clasificado y tabulado los ms comunes en aparicin para simplificar el
trabajo. La observacin se har a 10x/40x aumentos sobre volmenes de 25 L y dos rplicas.
La metodologa a seguir es la establecida por Madoni para el clculo del ndice Bitico (Madoni,
1994), complementado con el reparto porcentual de los organismos y el ndice de Biodiversidad de ShannonWeaver (H).
H = - (Pi (log2 Pi))
dnde,
Pi = n organismos SPA/ n total organismos
SPA = especie A
microscpicas se definen aquellas otras observables a travs del microscopio bajo un objetivo de 10X. Respecto
a estas ltimas, aclarar que las observaciones deben realizarse al menos por duplicado y con la muestra viva (sin
teir). Las identificaciones bacterianas se han realizado en base al manual Microorganismos filamentosos en el
fango activo (EMASESA, 1997) y apoyadas en distintos artculos que tratan el tema (Eikelboom, 1975; Surez,
1993; Laboratorio Central del Dep. de Saneamiento del Ayto. de Madrid, 1996; Moro, 1998).
Tabla 3: Valoracin del IF.
CARACTERSTICAS MACROSCPICAS
Turbidez
Alta
Media
4,5
Baja
Flculos en suspensin
Alta
Media
4,5
Baja
Sedimentabilidad
9
9
Alta
4,5
Media
Olor
Forma
Baja
Agradable
Desagradable
CARACTERSTICAS MICROSCPICAS
Regular
Irregular
Tamao
Grande
Medio
Pequeo
4
0
4
7
0
Estructura
Compacta
Media
Abierta
18
9
0
Textura
Fuerte
Dbil
4
0
Cobertura
< 10%
10-50%
>50%
0
7
3,5
Filamentos en flculos
>20
5-20
<5
0
7
14
Filamentos en disolucin
Alta
Baja
0
3
Diversidad de Protozoos
<7 especies
4-7 especies
<4 especies
13
7
0
NDICE DE FANGO
TOTAL
Como se observa en la Tabla 3, las caractersticas macroscpicas presentan como valor mximo de
puntuacin 30 unidades sobre el valor del IF. Las caractersticas microscpicas, en cambio, presentan un
mximo de puntuacin de 70, puntos al considerarse que eran stas las que definan con mayor exactitud el IF.
La suma de puntuaciones para ambos grupos de caractersticas se traduce en un valor final de ndice de fango,
del que se definen cinco categoras, cada una de las cuales alude a una calidad distinta del fango (Tabla 1).
110
Alta: la mayor parte del fango decanta en los 10 primeros minutos del ensayo y el fango esta muy
compactado.
Media: la mayor parte del fango decanta entre 10-20 minutos y se observa un ligero
esponjamiento.
Baja: la mayor parte del fango decanta despus de 20 minutos y se observa un claro
esponjamiento.
Olor: caracterstica macroscpica del fango activado que se define como agradable o desagradable,
indicando este ltimo, situaciones como septicidad, presencia de vertidos, etc.
Caractersticas microscpicas:
Forma: caracterstica que define la morfologa externa del flculo como regular si aparece de forma
redondeada e irregular si difiere de esta configuracin.
Tamao: caracterstica que determina el tamao medio del flculo, medido entre las distancias mas alejadas
de ste (Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid, 1997). Se definen tres
tamaos:
111
Estructura: caracterstica que define la constitucin interna del flculo (Departamento de Agua y
Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid, 1997), establecindose tres tipos:
Abierta: existen bastantes huecos dentro del flculo que rompen la unidad interna.
Textura: caracterstica que alude al grado de cohesin entre las partculas que forman el flculo,
establecindose las categoras fuerte y dbil en funcin de la ausencia o presencia de disgregacin de
los flculos, respectivamente, tras puncin sobre el cubreobjetos (Departamento de Aguas y Saneamiento
del Ayuntamiento de Madrid, 1997).
Cobertura: caracterstica que valora si la unin de todos los flculos presentes en el ocular de 10x cubren
menos del 10 % de su superficie, del 10-50 % o ms del 50 %.
Filamentos en el flculo: caracterstica que cuantifica el nmero de filamentos observables a 10x que
sobresalen de la superficie del flculo. Se definen tres categoras:
Filamentos en disolucin: caracterstica que cuantifica la existencia de filamentos libres entre los espacios
interfloculares del licor mezcla. Si son observables ser baja mientras que si se observan normalmente
ser alta.
Diversidad de protozoos: caracterstica que cuantifica el nmero de especies distintas que son detectables a
10x. Se definen tres rangos:
Menos de 4 especies.
De 4-7 especies.
Ms de 7 especies.
112
Tras el perodo de contraste y una vez establecidos los criterios generales de valoracin, se pas a un
periodo de recopilacin de datos fsico-qumicos en distintas depuradoras, en las que el IF se implantara de
forma sistemtica. El objetivo de esta fase del trabajo lo constitua el estudio del IF, en funcin de las
caractersticas del influente y las calidades del efluente. El rea de estudio se localiz en cuatro E.D.A.R.s de la
ciudad de Sevilla, que trabajan a media y alta carga y estn dotadas de fangos activos en el tratamiento
biolgico. En cada una de ellas, adems de la aplicacin del IF en el anlisis de las caractersticas del fango, se
recopilaron los datos referentes a SS, DQO, DBO5, N y P tanto del agua de entrada a la depuradora, como a la
salida. Los anlisis de estos ltimos se realizaron segn los Mtodos Normalizados (APHA, AWWA, WPCF,
1992).
Del periodo de estudio en planta se obtuvieron 109 datos, los cuales aparecen reflejados en la Tabla 5,
y a los que se realiz un anlisis estadstico de correlaciones. En tal estudio se pretenda buscar una posible
relacin entre el valor del IF y los parmetros que definen la calidad del efluente (SS, DQO, DBO5, N y P).
10
Participante 2
38
Participante 3
13
Participante 4
19
Participante 5
29
El anlisis de los datos demostr la imposibilidad de obtener una relacin directa entre el ndice de
fango y los SS, DQO, DBO5, N y P del agua de salida. En cambio, cuando los datos fueron agrupados segn la
categora de ndice, se pudo encontrar, tal y como se muestra en las figuras 1-4, una relacin directa entre los
porcentajes de reduccin de SS y DQO respecto al IF, si bien esta relacin se hace ms palpable para el caso de
los slidos en suspensin (Figura 1) que para la DQO (Figura 2). Es necesario aclarar que no han aparecido
valores de IF psimo, con lo que no se ha podido corroborar esta relacin de proporcionalidad entre el IF y el
porcentaje de reduccin de SS y DQO en todo el rango de valores del IF.
Tal y como se observa en la Figura 3, la relacin establecida entre la DBO5 y el ndice de fango parece
no estar tan clara, al no detectarse diferencia significativa entre los porcentajes de reduccin, una vez que los
ndices de fangos sobrepasan el intervalo de puntuacin de 0-20 (calidad psima). No se ha podido encontrar
explicacin a esta falta de proporcionalidad entre la calidad del fango estimada mediante el IF y el porcentaje de
reduccin de DBO5. Sin embargo, la extrema variabilidad y escasa reproducibilidad de esta determinacin
(APHA, AWWA, WPCF, 1992), junto con la inferioridad de datos aportados respecto a los SS y DQO, hacen
que este resultado haya de tomarse con precaucin. Reflexiones similares se pueden hacer con respecto a los
113
datos de reduccin de Nitrgeno y Fsforo, en los que los resultados obtenidos estn adscritos a tres categoras
de fango (malo, regular y bueno) y los mtodos analticos variaron de un laboratorio a otro tanto para el
Nitrgeno (Nessler y Destilacin sobre brico) como para el Fsforo (Molibdovanadato y Ascrbico). Por lo
tanto, si bien la tendencia es a una mejora gradual de los porcentajes de reduccin de ambos nutrientes frente al
aumento de puntuacin del ndice, las diferencias ms claras se encuentran entre la categora malo y el resto
(Figura 4). Estos resultados, por tanto, habran de ser tomados con reservas, ya que parece conveniente ampliar
el banco de datos antes de determinar la tendencia ms clara posible.
% Reduccin SS
95
90
85
80
75
70
20-40
40-60
60-80
80-100
Rango de IF
% Reduccin DQO
100
90
80
70
20-40
40-60
60-80
80-10
Rango de IF
% Reduccin DBO
100
90
80
70
20-40
40-60
60-80
80-100
Rango de IF
114
% Reduccin N y P
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
P
N
20-40
40-60
60-80
Rango de IF
Figura 4: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de nitrgeno y fsforo (n = 67).
Durante el estudio fue curioso observar como cada planta presentaba un valor medio de IF
caracterstico de ella y distinto al de las dems, segn el cual, un distanciamiento de dicho valor se traduca en
anomalas en el funcionamiento normal de la planta, entendidas stas como empeoramientos en los rendimientos
de depuracin. Como parte de este comportamiento particular de cada una de las plantas, se encuentran las
distintas respuestas de las caractersticas macro y microscpicas ante aumentos o disminuciones en los valores
de los contaminantes en el agua de llegada; comportamientos que en algunas ocasiones han resultado
contrapuestos.
El parmetro IF parece ser un buen sistema de control rpido para obtener un ndice biolgico y una
aproximacin a los rendimientos de depuracin en las E.D.A.R.s. En general, podemos hablar de la definicin
de ndice de Fango (IF) como un parmetro indicador de la eficacia de la reduccin de la DQO y los SS en las
E.D.A.R.s, tomndose con reserva las relaciones que mantiene con la DBO5, nitrgeno y fsforo. Una
observacin general del fango activado, que puede durar unos veinte minutos, nos proporcionar idea del estado
de ste y de la respuesta esperable de la E.D.A.R.
115
Resultados
Grupo dominante
Densidad de la microfauna en nmero de individuos/mL
Nmero de especies detectadas
Recuento de pequeos flagelados
ndice bitico de fango: SBI
Clase de Madoni correspondiente al valor de SBI
116
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activated sludge plants based on the microfauna analysis. Wat. Res. 28, 1, 67-75.
Margalef, R. (1981). Ecologa. Ed. Omega, Barcelona.
Moro, P. (1998). Aparicin de organismos filamentosos en fangos activos. Ingeniera Qumica,
Junio, 97-106.
Surez, J., Llorente, V. y Mogolln, T. (1993). Microorganismos filamentosos en las E.D.A.R.s.
Ingeniera Qumica, Enero, 146-151.
117
118
fecha:
Cdigo de muestra:
CARACTERSTICAS MACROSCPICAS
RELLENAR CON VALORACIN
TURBIDEZ
FLC EN SUSPENSIN
SEDIMENTABILIDAD
OLOR
ALTA
MEDIA
BAJA
ALTA
MEDIA
BAJA
ALTA: V30=0,6*V5
MEDIA : 0,6V5<V30<0,75V5
BAJA: V30> 0,75*V5
AGRADABLE
DESAGRADABLE
0
4,5
9
0
4,5
9
9
4,5
0
3
0
MACRO:
CARACTERSTICAS MICROSCPICAS
RELLENAR CON VALORACIN
FORMA
TAMAO
ESTRUCTURA
FIL EN FLCULO
FIL EN DISOLUCIN
DIV PROTOZOOS
0-20: PSIMO
REGULAR
IRREGULAR
GRANDE
MEDIO
PEQUEO
COMPACTA
MEDIA
ABIERTA
FUERTE
DBIL
<10 %
10-50 %
>50 %
>20 fil/floc
5<*<20 fil/floc
<5 fil/floc
ALTA
BAJA
>7 SP
4-7 SP
<4 SP
20-40: MALO
4
0
4
7
0
18
9
0
4
0
0
7
3,5
0
7
14
0
3
13
7
0
40-60: REG
MICRO:
IF:
60-80: BUENO
80-100: PTIMO
OBSERVACIONES:
BACTERIAS HELICOIDALES
FIBRAS ORGNICAS
ZOOGLOEA sp.
PARTCULAS INORGNICAS
BURBUJAS
COLOR
HINCHAZN
ESPUMAS
119
fecha:
Cdigo de muestra:
2 DIAGONAL
0
RELACIN DE FILAMENTOS (IRF):
#DIV/0!
RECUENTO m / mL DE FILAMENTOS
0
0
0
0
m / mL de FILAMENTOSAS
* RECUENTOS A 20 X
* MUESTRA IN VIVO
ABUNDANCIA
NINGUNO
POCOS
ALGUNOS
COMUNES
MUY COMUNES
ABUNDANTES
EXCESIVOS
SIGNIFICADO
HAY FILAMENTOS PERO SE OBSERVAN SOLO EN ALGUNOS FLCULOS
SE VEN FILAMENTOS EN LOS FLCULOS PERO NO EN TODOS ELLOS
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS, DE 1-5 FIL / FLCULO
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS, DE 5-20 FIL / FLCULO
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS A DENSIDAD ALTA
FILAMENTOS EN ENORME CRECIMIENTO
OBSERVACIONES:
120
Flagelados
Amebas
GRUPO
pequeos *
grandes
con teca
sin teca
Carnvoro
nadador
Carnvoro suctor
C
I
L
Bacterifago
nadador
I
A
D
Bacterifago
reptante
O
S
Bacterifago
ssil
Metazoo
SPP
fecha:
OBS.
1cont
2cont
Cdigo de muestra:
ind/mL
ind/L
% ind/L
% GRUPO FUNC.
Litonotus
Amphileptus
Hemiophrys
otros
Acineta
Podophrya
Tokophrya
otros
Colpoda
Uronema
Tetrahynema
Paramecium
Colpidium
Glaucoma
otros
Aspidisca
Acineria
Euplotes
Oxitrichia
Stentor
otros
Carchesium
Epistylis
Opercularia
V. microstoma
V. convallaria
Zoothanium
Otros
Otros
Rotferos
Nematodos
Anlidos
N total sp
NDICE DE MADONI
SBI:
CLASE:
ND SHANON (bit)
GRUPO DOMINANTE:
* RECUENTO DE PEQ FLAG
En este orden : Peq.flag**// Cil.nad.bact.// V. microst// Operc spp.//
Si f<10, peq. flag/ml <50000
// Cil. Ssiles (>80%)// Cil rept+Cil ssi+tecamebas.
Si f>10, peq. flag/ml >50000
** >100 en diagonal completa de cmara Fuchs-Rosenthal
NOTA1 : No se consideran para el N total de individuos
NOTA 2: Si existen organismos distintos a los que aparecen en la tabla; sustituirlos en el listado.
TABLA PARA LA DETERMINACIN DEL NDICE BITICO (MADONI, 1994)
GRUPO DOMINANTE Y
NMERO TOTAL DE UNIDADES TAXONMICAS DE LA MICROFAUNA Y NMERO DE PEQUEOS FLAGELADOS
DENSIDAD TOTAL
(F), CONTADOS EN LA DIAGONAL DE FUCHS-ROSENTHAL.
GRUPO
DENSIDAD
>10
ENTRE 8-10
ENTRE 5-7
<5
DOMIN
(ind/mL)
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
6
>10(EXP 6)
10
8
9
7
8
6
7
5
<10 (EXP 6)
9
7
8
6
7
5
6
4
5
>10(EXP 6)
9
7
8
6
7
5
6
4
<10 (EXP 6)
8
6
7
5
6
4
5
3
4
>10(EXP 6)
7
5
6
4
5
3
4
2
<10 (EXP 6)
6
4
5
3
4
2
3
1
3
>10(EXP 6)
6
4
5
3
4
2
2
1
<10 (EXP 6)
5
3
4
2
3
1
2
0
2
>10(EXP 6)
5
3
4
2
3
1
1
0
<10 (EXP 6)
4
2
3
1
2
0
0
1
>10(EXP 6)
4
3
2
1
<10 (EXP 6)
3
2
1
0
1: PEQUEOS FLAGELADOS NADADORES (>100 EN DIAGONAL F-R)
4: OPERCULARIA spp
3: VORTICELLA MICROSTOMA
121
fecha:
Cdigo de muestra:
CONCLUSIONES
PSIMO
MALO
REGULAR
BUENO
IF:
BACTERIAS FILAMENTOSAS
DOMINANTE:
SECUNDARIO:
OTROS:
CATEGORA NUMRICA:
RELACIN FILAMENTOS:
IRF
m/mL
MICROFAUNA PROTOZOARIA
PARMETROS ASOCIADOS
0
SBI:
I SH:
0
CALIDAD PREVISIBLE DEL AGUA TRATADA
REPARTO PORCENTUAL
GRANDES FLAGELADOS
AMEBAS
CIL NADADORES
#####
CIL REPTANTE
CIL SSIL
SS
METAZOOS
DBO
PARMETROS ASOCIADOS
122
DQO
PTIMO
INTRODUCCIN
Las especies de ciliados que viven en aguas residuales, pueden sobrevivir en un amplio abanico de
condiciones (Curds y Cockburm, 1970). Prcticamente, todos los autores coinciden en que los protozoos son el
grupo rey de la bioindicacin y en que contribuyen al consumo de materia orgnica y bacterias libres,
consiguindose reducciones considerables de la DBO5 y de las concentraciones bacterianas de E. coli en un 50
%. La vida media de E. coli fue estimada en 16 horas en ausencia de protozoos y en 1,8 horas en presencia
(Curds, 1973).
Se identifican ms de 200 especies de protozoos en aguas residuales (Curds, 1975), de las cuales 33 son
flagelados, 25 rizpodos, 6 actinpodos y 160 ciliados, con una densidad de 10.000 clulas/mL (Madoni, 1984),
aunque solamente la mitad de ellas se encuentra con cierta frecuencia (Curds y Cockburn, 1970; Madoni y
Ghetti, 1981).
Resumiendo, podemos decir que el papel de los protozoos en la depuracin es:
-
Estar directamente envueltos en la cadena alimentaria como paso entre niveles trficos,
transformando la materia orgnica de pequeo tamao en partculas mayores accesibles a otros
organismos.
Para conocer mejor el entramado ecolgico existente y las tendencias de desarrollo, es necesario
controlar el ciclado de materia y energa del reactor, as como el movimiento de los nutrientes. En este sentido,
las bacterias desempean un papel crucial. Desde el punto de vista de la depuracin, las bacterias se pueden
equiparar a pequeas procesadoras de la materia orgnica por medios bioqumicos, cuyo metabolismo est
controlado por diversos factores externos e internos. Y adems de los protozoos, es tambin posible considerar
determinadas bacterias filamentosas, como indicadoras de situaciones alteradas en el reactor aerobio.
123
CATABLICA
PRODUCCIN ENERGA
ANABLICA
DEGRADATIVAS
VAS
METABOLISMO RUTAS
EXCRECIN AL EXTERIOR
OXIA
VA CATABLICA
RESIDUOS PARTICULADOS
VIA ANABLICA
La definicin de "respiracin en presencia de oxgeno" en castellano se corresponde con el nombre respiracin aerobia/aerbica; sin
embargo, dado que en la literatura tcnica se cita como xica, por influencia del ingls, se mantendr esta nomenclatura.
124
OXIA / NITRIFICACIN
N2 ( DESNITRIFICACIN / ANAEROBIOSIS)
NH4/ N ORG
NO2
NO3
MATERIAL CELULAR
OXIA
P ORGNICO
MATERIAL CELULAR
-
PO4
POLMEROS DE RESERVA
ANOXIA
ANAEROBIOSIS
Figura 4: Metabolismo del fsforo en fangos activados.
OXIA / ANOXIA
S
2-
0
3
SO
SO4
H2S
SO3
ASIMILACIN CELULAR
ANAEROBIOSIS
125
Una vez definidas las principales rutas metablicas y sus necesidades respecto al oxgeno, podemos
aplicar estos conocimientos a la seleccin bacteriana. Las bacterias utilizarn una u otra va, en funcin de las
disponibilidades y la relacin entre O2/C/N/P.
Las condiciones con las que llega el agua residual al tratamiento biolgico, van a ser determinantes
para la microfauna que se desarrolle en los fangos activados, aunque sta presenta amplios mrgenes de
tolerancia (Esteban, 1989).
En un sistema de depuracin convencional, las bacterias utilizan el oxgeno como sustrato base del
metabolismo, oxidando los productos de desecho presentes en las aguas residuales para conseguir la energa y la
materia prima necesarias para formar sus metabolitos, tanto para el mantenimiento como para la reproduccin.
As, en este proceso la seleccin est dirigida, fundamentalmente, hacia las bacterias aerobias, que adems,
gracias a su capacidad de formar flculos, aglomeran la materia orgnica. Sin embargo, las reducciones de
nutrientes para este tipo de procesos no son altas y pueden variar en un amplio rango, dependiendo de la
actividad metablica del reactor aerobio. El objetivo final de este proceso, a parte de la oxidacin biolgica de la
materia orgnica, es la reduccin de sta mediante la separacin de fases, operaciones ambas que consiguen
reducciones superiores al 90 % en DBO5.
El control microbiolgico sobre este tipo de reactores estriba en la identificacin de las bacterias,
principalmente de bacterias filamentosas y formadoras de flculo.
Los desequilibrios se pueden producir en dos frentes, fundamentalmente, mal o escaso reparto del
oxgeno y/o parmetros operacionales no correctos. En ambos casos las bacterias tienden a buscar soluciones y
metabolismos alternativos (respiracin por nitratos, metabolismo del azufre, etc.), situacin que puede
seleccionar bacterias filamentosas, ms eficientes y adaptativas ante situaciones de estrs, que las formadoras de
flculos (lminas 83, 84, 76-77, 81 y 85).
Situaciones similares se establecen ante desequilibrios nutricionales, producidos por influentes
alterados por vertidos industriales o parmetros operacionales mal programados. La rpida respuesta de estas
bacterias filamentosas se debe a que la mayora puede reproducirse con relativa facilidad, de forma que si las
condiciones del medio no son adecuadas, pueden fragmentarse y generar explosiones demogrficas cuando tales
condiciones sean las adecuadas.
Este tipo de problemas ocasionado por las bacterias filamentosas (bulking, foaming...), puede atajarse
por medios mecnicos y qumicos (lavadores de espumas, adicin de reactivos...) y, preferentemente, intentando
conocer el factor que desencadena el desequilibrio de la estructura trfica en en nuestro sistema. Es por lo tanto
indispensable conocer bien los ciclos nutricionales y los niveles de oxigenacin de nuestro reactor, para explicar
la biota establecida. En muchos casos esto no es posible y el razonamiento es a la inversa, en funcin del
organismo presente y de su concentracin, se estima el estado del reactor.
Existen varios parmetros operacionales que son interesantes de controlar como indicadores de la
actividad bacteriana (Surez, 1997):
126
Carga flocular: Nivel de carga asimilable instantneamente en el licor mezcla (mg DQO soluble/ g
SS)
Capacidad de bioabsorcin: Cantidad de materia orgnica que puede ser internalizada en funcin
del tiempo (mg DQO/ g MLSS).
Reactor anaerobio: Las bacterias Poli-P asimilan DQO fcilmente biodegradable. Al no existir
nitratos ni oxgeno utilizan el metabolismo fermentativo y liberan ortofosfatos al medio.
Reactor aerobio: Las bacterias Poli-P utilizan los polifosfatos como fuente de energa (previa
liberacin), eliminndose por estraccin del fango. Se realizan procesos de nitrificacin.
Las bacterias poli-P juegan un papel fundamental, al realizar una liberacin de ortofosfato al medio
anaerobio para asimilar la DQO fcilmente degradable y utilizar en el reactor aerobio el fsforo previamente
liberado como fuente de energa. Ya que la velocidad de asimilacin es mayor que la de liberacin previa, el
balance final es el de reduccin de fsforo en el agua y su retirada en los fangos.
Una vez llegados a este punto, es necesario aplicar todos los conocimientos biolgicos adquiridos sobre
el ecosistema para ayudarnos a interpretarlo. Para ello es muy til conocer la bibliografa especializada, en la
que se citan asociaciones de determinados organismos a causas especficas. Estas observaciones, si bien son
muy interesantes, siempre hay que tomarlas con precaucin, ya que en un ecosistema las respuestas no son
normalmente causa-efecto, si no que el entramado ecolgico implica muchos factores y es necesario conocer la
situacin global para tomar una decisin.
Las citas obtenidas en la bibliografa nos pueden aportar una idea que aplicaremos a nuestro
ecosistema. En muchos casos los datos pueden ser contradictorios, debido, por ejemplo, a la versatilidad de los
127
organismos, o a que no se han tenido en cuenta determinados factores para realizar esta asociacin. Es por
ejemplo el caso de Nocardia sp. (lminas 52 y 53), que normalmente aparece asociada a edades de fango
bastante altas (10 das), pero que en muchos casos se encuentra en edades inferiores (3-4 das) debido a
desequilibrios nutricionales que la hacen ms competitiva; o la razn estriba en que se desarrolla en ambientes
especiales como son las espumas, que mantienen edades superiores al resto del reactor.
Los factores que regulan la aparicin de un organismo particular, necesitan una investigacin ecolgica
histrica (Pratt y Cairns, 1985). Por lo tanto, hemos de intentar tener siempre una visin panormica del sistema,
anando todos los factores analizados por separado de forma que confluyan en un puzzle bien encajado.
Por otra parte, siempre hemos de tener en cuenta que estamos trabajando con organismos y que los
tiempos de respuesta no son inmediatos. Si aplicamos una modificacin operacional a nuestro sistema, debemos
permitir la aclimatacin de los organismos a la nueva situacin antes de valorar el cambio.
Cada E.D.A.R. y en ella cada reactor biolgico, se comporta como un ente nico que podemos abstraer
y analizar en cada uno de sus factores, pero que para su comprensin es necesario eliminar las ideas
preconcebidas e integrar todos los datos.
El anlisis de una comunidad nos refleja los datos integrados de un sistema, mientras que los anlisis
qumicos no (Salvad, 2000). Si nos aproximamos por primera vez al estudio de un fango, una valoracin de los
organismos presentes y de la estructura trfica, nos informar de la estabilidad de la comunidad biolgica
presente y de la madurez del fango, en funcin de la presencia o ausencia de los distintos grupos de bacterias,
protozoos y metazoos. El estudio puede seguir una serie de pasos, que se encuentran recogidos en las "fichas de
recogida y anlisis de datos microbiolgicos" (captulo 5) pero el orden que se siga o la importancia de cada uno
va a depender del observador.
Como ya se ha comentado, el agua residual entrante viene cargada de bacterias libres y algunos
protozoos, pero con la formacin del fango, bacterias formadoras de flculo, ciliados nadadores, reptantes y
ssiles sern los que se establezcan en el sistema, a la vez que se forma una masa orgnica, que permanece ms
o menos constante, si las condiciones ambientales no se alteran.
La observacin microscpica de las muestras permitir descubrir que grupos son los predominantes. Si
estudiamos el entramado y estado del flculo, podremos apreciar en que fase de desarrollo se encuentra nuestro
reactor. Se define como flculo ptimo aquel que se encuentra en torno a 1.500 m de dimetro y con l se
consiguen los mejores rendimientos de depuracin (Garrido et al, 1988). A medida que aumenta el tamao
flocular y alcanza el dimetro de flculo ptimo, los rendimientos, tal como se puede apreciar en la Figura 6,
aumentan.
128
% RED
100
80
60
40
20
0
30
90
350
1500
m
RENDIMIENTO DBO (%)
RENDIMIENTO SS (%)
Figura 6: Relacin entre el tamao flocular y los rendimientos depuradores (Garrido et al, 1988).
kg DBO/g MLSS
1,5
1
0,5
0
30
90
350
1500
Sin embargo, esta relacin es orientativa, ya que se encuentra en funcin de la planta, siendo el
operador quien determine el tamao ptimo.
En relacin a la estructura flocular, habra que citar la proliferacin de las bacterias filamentosas, ms
adaptables frente a desequilibrios nutricionales que las formadoras de flculo (N/DBO5: 0,035-0,05 y P/DBO5:
0,007-0,01). Las bacterias filamentosas son favorecidas por alteraciones en las concentraciones de oxgeno,
puesto que captan mejor el oxgeno que las floculantes al tener ms superficie y son favorecidas tambin por
129
ciertas concentraciones de sutrato (Figura 8). En cuanto a la concentracin de sustrato, es sabido que las
bacterias filamentosas, en general, se desarrollan ms rpidamente a bajas concentraciones que las bacterias que
forman las colonias de Zoogloea sp. (Moro y Leborans, 1988).
CONCENTRACIN DE ALIMENTO
VELOCIDAD DE CRECIMIENTO NF
VELOCIDAD DE CRECIMIENTO F
Figura 8: Aprovechamiento del sustrato por bacterias filamentosas y no filamentosas. (Moro y Leborans, 1988)
BIOINDICACIN APLICADA
Existe mucha bibliografa al respecto, asocindose cada bacteria a determinadas condiciones de
explotacin (Tabla 1).
Tabla 1: Relacin de bacterias filamentosas ms comunes en fangos activados con sus asociaciones operacionales. (EMASESA, 1997).
ESPECIE
CARACTERSTICAS
FILAMENTOS
PRESENTAN
ESTRATEGIAS
EVOLUTIVAS
OPORTUNISTAS,
POR
FRAGMENTACIN DEL FILAMENTO. EL CRECIMIENTO SOBRE UN FILAMENTO
EN PARALELO SE DEBE A GRANDES CONCENTRACIONES DE CRECIMIENTO
DISPERSO, POR MALA FLOCULACIN O POR EDADES EXCESIVAS DE FANGO.
ALTOS NIVELES DE CRECIMIENTO EPIFTICO INDICAN CRECIMIENTO LENTO
DEL FILAMENTO.
TIPO 0041
130
TIPO 0092
TIPO 0211
TIPO 021N
TIPO 0411
TIPO 0675
TIPO 0803
TIPO 0961
TIPO 1701
TIPO 1851
TIPO 1852
TIPO 1863
BACILLUS
BEGGIATOA SP.
FLEXIBACTER SP.
HALISCOMENOBACTER
HYDROSSIS
MICOTRIX PARVICELLA
NOCARDIA SP.
131
NOSTOCOIDA LIMICOLA
SPHAEROTILUS NATANS
STREPTOCOCCUS
THIOTHRIX SP.
INFLUENTE
OPERACIONALES
132
Control de sobrenadantes punta de los distintos equipos, que puedan aportar sustratos parcialmente
digeridos
Con relacin a los protozoos presentes en el medio, se ha demostrado que el papel de los ciliados es
fundamental en el proceso de depuracin, al funcionar como filtros que eliminan las bacterias dispersas del
agua; en una hora, un protozoo puede filtrar las partculas contenidas en un volumen 105 veces superior al de la
clula (Salvad, 2000).
Su estudio puede abordarse desde muy distintos enfoques (alimentacin, reproduccin, interacciones
trficas, contaminantes...), que van a permitir valorar el fango en funcin de su actividad y biomasa. As por
ejemplo, la forma de alimentacin de los protozoos puede ayudarnos a estimar el tamao medio de partculas
presentes en el medio (Tabla 2).
Estos organismos, que desarrollan su ciclo biolgico en presencia de bacterias y de materia orgnica del
medio, juegan un importante papel dentro de la estructura y estado de formacin flocular, sobre los sustratos del
medio y sobre la relacin entre depredadores (Tabla 3).
Tabla 2: Tipo de alimentacin de diferentes especies de protozoos en funcin del tamao de partcula (Pratt-Cairns, 1985)
ALIMENTO
TAMAO DE PARTCULA
ORGANISMO (GNERO)
0,5 m
BACTERIAS Y DETRITUS
BACTERIAS, ALGAS Y DETRITUS
DIVERSO
Stentor
DIVERSO
Astasia
ROTFEROS Y PROTOZOOS
>10 m
HBITAT
ALIMENTO
Opercularia microdiscum
ssil
bacterias
Carchesium polypinum
ssil
bacterias
Vorticella convallaria
ssil
bacterias
Chilodonella uncinata
nadador
filamentos,algas,bacterias
Opercularia coarctata
ssil
bacterias
Vorticella octava
ssil
bacterias
Cinetochilum margaritaceum
reptante
bacterias
Vorticella microstoma
ssil
bacterias
Trachelophyllum pusillum
nadador/reptante
carnvoro
Vorticella alba
ssil
bacterias
Euplotes moebiusi
reptante
bacterias
Vorticella fromentelli
ssil
bacterias
133
En general, parece que la mayor cantidad de especies se encuentra entre cargas msicas de 0,3,
aumentando las poblaciones de ciliados ssiles y nadadores a medida que dicha CM aumenta. Los ciliados
reptantes van a codominar con los ciliados fijos en rangos de 0,2-0,4 de CM, disminuyendo su nmero a medida
que aumenta la CM. IVFs en torno a 400 (mL/g) impiden el desarrollo adecuado de ciliados reptantes, ya que la
formacin de flculos en estos rangos de IVF es escasa, factor ste determinante para el desarrollo de este
grupo.
Podemos establecer una relacin entre los grupos predominantes y factores operacionales tales como
CM, MLSS, etc., lo que nos permitira valorar el estado de las comunidades y optimizar el rendimiento del
proceso, en funcin del porcentaje de los grupos mayoritarios. Podemos hilar ms fino al definir las especies
presentes y relacionarlas con sus condiciones ecolgicas ptimas de desarrollo: en funcin del tipo de
organismo presente podemos estimar la DBO5 de salida (Pratt y Cairns, 1985). Organismos como Euplotes sp.
se encuentran asociados a DBO5 de efluente muy bajas (Tabla 4), mientras que el grupo de los flagelados se
asocia a concentraciones altas.
Tabla 4: Frecuencia de aparicin de determinados organismos en funcin del rango de DBO5 de salida (Pratt y Cairns, 1985).
FRECUENCIA DE APARICIN (%) EN FUNCIN DBO (mg O2/L)
ORGANISMO
0-10
10-20
21-30
MS 30
Vorticella convallaria
63
73
37
22
Vorticella fromentelli
38
33
12
Carchesium polypinum
19
47
12
Aspidisca cicada
75
80
50
56
Euplotes patella
38
25
24
Flagelados
37
45
Mediante anlisis de correlaciones se puede llegar a conclusiones que relacionan parmetros como el
oxgeno, MLSS, materia orgnica de entrada o tiempo de residencia, con determinados organismos. Esta
informacin permitir establecer un sistema de asociaciones entre comunidades bsicas, secundarias y
asociadas.
La Figura 9 representa la relacin existente para algunos organismos en funcin de los MLSS y el nivel
de oxgeno presente en el reactor. Oscilaciones severas en la curva de crecimiento total de los protozoos ciliados
y el estado de floculacin, aparecen asociados con drsticas reducciones de oxgeno en el reactor (Madoni,
1984).
Asociaciones similares se pueden realizar entre la materia orgnica del influente y el tiempo de
residencia (Figura 10).
134
OXGENO
Amebas
Rotifero
Euplotes sp.
Aspidisca sp.
V. convallaria
MLSS
V. microstoma
Nematodos
Euglena sp.
Figura 9: Distribucin de los organismos en funcin de los MLSS y el oxgeno presente en el reactor.
135
MO
Oligoquetos
Aspidisca sp.
Hemiophrys sp.
V. microstoma
Trachelophyllum sp.
Arcella sp.
TR
Chilodonella sp.
V. convallaria
Litonotus sp.
Carchesium sp.
Peranema sp.
Zoothamnium sp.
Figura 10: Distribucin de los organismos entre la materia orgnica del influente y el tiempo de residencia. TR: tiempo de residencia. MO:
materia orgnica.
136
Se confirma la distribucin de las distintas especies con sus adaptaciones especficas en las diversas
clases de ambiente (Madoni, 1981). La cantidad de alimento presente en el medio determina el nmero de
individuos que podr mantener nuestro ecosistema.
Esta distribucin de alimentos y su modificacin posterior en funcin de la colonizacin establecida, se
puede seguir claramente en una fase de puesta en marcha de una E.D.A.R. Podemos valorar la estabilizacin del
fango en funcin del desarrollo de los organismos presentes en l. Se puede hablar de tres fases de colonizacin
(Madoni y Ghetti, 1981), en las que los protozoos flagelados constituyen uno de los primeros grupos de
protozoos que se ven reemplazados por los ciliados nadadores. Ms tarde, aparecen los hipotricos como
Aspidisca sp. y finalmente se establecen los ciliados ssiles (Curds, 1982).
Podemos establecer, en trminos generales, las siguientes etapas, en las que se incluye la fase de
envejecimiento o degradacin del fango:
Colonizacin. Aparecen multitud de flagelados, ciliados nadadores libres que son consumidores de
bacterias dispersa y materia orgnica: Peranema trichophorum, Bodo sp, larvas trocforas,
Tetrahymena sp...
Fango maduro. Se ha modificado totalmente la estructura del ecosistema en funcin del efecto de
los organismos presentes en l, de forma que la materia orgnica junto con las bacterias dispersas
se encuentra aglutinada en los flculos, sectorizando la alimentacin de los distintos organismos.
Los ciliados peritricos e hipotricos cobran fuerza en el reparto porcentual de organismos,
regulando el nmero de bacterias dispersas y favoreciendo la floculacin: Arcella hemisphaerica,
Aspidisca cicada, Zoothamnium simplex, Vorticella elongata, Zoogloea ramigera, Vorticella
sepulcreti, Acineta cuspidata...
Fango envejecido. El aumento de poblacin junto con la degradacin del ambiente, provocan un
desplazamiento de las comunidades hacia organismos superiores (metazoos), que rompen las
estructuras establecidas (flculos) y dispersan la materia orgnica y las bacterias. Se generan
medios ricos en glicolax, consecuencia del metabolismo bacteriano. Abundancia de Rotferos y
metazoos.
La sucesin temporal de los distintos tipos de protozoos presentes indica el grado de madurez del
fango, que puede resultar alterado por factores externos al desarrollo de la sucesin, como pueden ser la entrada
de vertidos txicos.
137
Se confirma la subclase de los peritricos como una de las ms importantes en los procesos aerobios
(Curds, 1982), ya que estos organismos, adems de optimizan sus costes energticos de alimentacin,
contribuyen a la separacin de fases.
Se produce un desplazamiento en las estrategias de colonizacin de los microorganismos que ira,
desde altas concentraciones de sustrato y tasas especficas de crecimiento (estrategia r), a condiciones limitadas
de sustrato con adaptaciones especficas (estrategia k).
La presencia de flculos determina, en muchos casos, la tasa de crecimiento de los distintos ciliados, lo
que condiciona tambin la abundancia relativa de un organismo en particular. Esta distribucin de la abundancia
relativa indica a menudo su importancia en la estructura ecolgica del hbitat (Curds, 1982).
Las poblaciones se expanden o retraen como respuesta a condiciones como la abundancia de alimento.
La actividad frente al alimento entre los protozoos puede apreciarse, en determinados casos, con el nmero de
vacuolas digestivas presentes en los organismos; este efecto es muy claro en Tetrahymena pyriformis, en la que
se detectan claramente las vacuolas digestivas. Pero al igual que se modifican los grupos de ciliados presentes
en el medio en funcin del tiempo o la abundancia de alimento, stos favorecen modificaciones en su entorno.
La actividad reproductora tambin nos puede informar sobre el estado de actividad del medio. Esta fase
es muy obvia en casos de alteraciones o arranque del reactor. Durante estos periodos las especies de protozoos
de talla pequea se reproducen ms rpidamente y aparecen como grupo dominante. Los organismos sedentarios
tienen un periodo de divisin celular ms largo que los libres, ocupando las formas reptantes una posicin
intermedia (Salvad, 2000). Por otra parte, los ciliados peritricos, que viven fijados al flculo, presentan larva
trocfora (libre nadadora) que se puede fijar a cualquier superficie. La presencia abundante de larvas trcoforas
y una alta actividad por parte de stas, indica fenmenos de actividad y reproduccin consistentes, mientras que
fenmenos de enquistamiento se pueden asociar a situaciones de estrs, como pueden ser la reduccin de
oxgeno o entrada de txicos. En ste ltimo caso, habra que aclarar que no todos los organismos responden de
igual manera a una concentracin de txico. En general, los protozoos son ms sensibles que las bacterias a los
compuestos txicos (Esteban, 1989), con lo que podemos utilizarlos como indicadores de vertidos industriales.
En el caso de C. campyllum, su poblacin est limitada por la concentracin de detergentes de entrada a las
balsas de aireacin (Esteban, 1989), mientras que otros ciliados presentan mayor resistencia.
Es muy importante controlar y valorar los efectos del cloro en los ciliados, ya que este agente
desinfectante se utiliza en muchos casos como control qumico de fenmenos de crecimiento filamentoso. En
este caso, la sensibilidad de los protozoos frente al cloro se mide estudiando los porcentajes de supervivencia
para distintos tiempos de contacto (Esteban, 1989). La cloracin controlada de los caudales recirculados en el
reactor biolgico presenta una limitacin, en tanto que la comunidad biolgica no se debe destruir. Se debe
sopesar la eliminacin de filamentos, frente a la destruccin de la comunidad protozoaria. Empleando la
observacin microscpica durante la operacin de cloracin en planta, podemos obtener la dosificacin
adecuada para conseguir nuestro propsito. La observacin microscpica nos permitir valorar la forma celular,
locomocin y generacin de quistes de forma que encontremos la situacin ms apropiada.
138
Un parmetro operacional muy relacionado con los protozoos es la CM (Figura 11). Curds y Cockburm
(1970) sealan la necesidad de este estudio y consideran que puede ser estimada la relacin entre MLSS y CM
en funcin de los porcentajes de los grupos protozoarios presentes.
BAJA
ALTA
NO FORMACIN FLOCULAR
MLSS
CM
BUENA
SEDIMENTACIN
FLAGELADOS
NADADORES
AMEBAS
SSILES
ROTFEROS
REPTANTES
NEMATODOS
ROTURA FLOCULAR
ALTA
BAJA
Figura 11: Reparto de los porcentajes de grupos de microorganismos en funcin de las caractersticas operacionales.
Cuando el fango presenta buena actividad biolgica codominan los ciliados fijos con los reptantes,
complementndose en sus diferentes hbitos alimenticios. En situaciones de variaciones de carga o extracciones
fuertes de fangos, son los reptantes las poblaciones ms afectadas, por su situacin en la interfase del flculo.
En la bibliografa existen numerosas citas que relacionan los ciliados (Tabla 5) con determinadas
circunstancias. Se han recogido algunas de las ms significativas:
139
ESPECIE
CARACTERSTICAS
AMEBAS DESNUDAS
AMEBAS TESTCEAS
AMPHILEPTUS SP.
ASPIDISCA CICADA
CARCHESIUM POLYPHINUM
CARCHESIUM SP.
CHILODONELLA UNCINATA
COLPIDIUM SP.
COLPODA SP.
CYCLIDIUM GLAUCOMA
DEXIOTRICHA COLPODIUPSIS
EPISTYLIS SP.
EUPLOTES SP.
GLAUCOMA SCINTILLANS
GRANDES
DOMINANTES
HELIOZOOS
HEMIOPHRYS BIVACUOLATA
HEMIOPHRYS FUSIDENS
LEPTOPHARYNX EUGLENIVORA
140
LITONOTUS SP.
NEMATODOS
OPERCULARIA SP.
PARAMECIUM SP.
PEQUEOS
DOMINANTES
PODOPHRYA FIXA
ROTIFEROS
A BAJA CONCENTRACIN
OXIGENADOS.
SATHROPHILUS
OVIFORMIS
FANGOS
ESTABLES,
BIEN
FLOCULADOS
STENTOR SP.
SUCTORES
TETRAHYMENA/URONEMA SP.
TRACHELOPHYLLUM PUSILLUM O REPTANTE. EN PROPORCIN SIMILAR CON ASPIDISCA, INDICA BUENA CALIDAD
ACINERIA UNCINATA
DEL AGUA TRATADA.
V SEPULCRETI/V ELONGATA
FANGO ESTABILIZADO.
VAGINICOLA SP.
VORTICELLA CAMPANULA
VORTICELLA CONVALLARIA
VORTICELLA ESTRIATA
VORTICELLA MICROSTOMA
ZOOTHAMNIUM SP.
141
TRANSITORIOS
DE
Concluyendo, los trabajos experimentales han demostrado que los protozoos ciliados son esenciales
para la produccin de una buena calidad del efluente (Salvad, 2000). Una concentracin alta de ciliados, con
suficiente diversidad, puede ser indicativa de la alta eficacia del proceso. As, en plantas con gran abundancia y
diversidad de protozoos ciliados (>3.000 clulas/mL), con un mnimo de 6-8 especies de ciliados (Salvad,
2000), se consiguen buenos efluentes. Adems, es necesario establecer los entramados entre los distintos grupos
y valorar el sistema como un ecosistema dnde todas las partes participan. No obstante, si bien los protozoos
son buenos indicadores de la marcha del proceso, si existen alteraciones floculares debido a la proliferacin
masiva de bacterias filamentosas, se puede reducir la capacidad bioindicadora de estos organismos.
Es necesario conocer todas las posibilidades bioindicadoras de los organismos presentes y, junto con el
dato de densidad poblacional, valorar el papel representado en el ecosistema, y a partir de ah tomar una
decisin sobre las medidas a adoptar en el proceso.
142
BIBLIOGRAFA
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143
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Departamento de Aguas Residuales (1997).
144
INTRODUCCIN
En este captulo se presenta una coleccin de lminas fotogrficas en las que se recogen imgenes de
protozoos, bacterias filamentosas y diversas circunstancias relacionadas con la observacin microscpica de un
fango activado.
Puesto que este material fotogrfico ha sido desarrollado con distintos sistemas de microfotografa tales
como cmaras fotogrficas, videocmaras, etc. y sometido posteriormente a un tratamiento de escaneado,
reduccin o ampliacin de tamao, la nica referencia en cuanto a tamao es la magnificacin empleada.
Lminas fotogrficas
Protozoos
145
147
148
149
BIBLIOGRAFA
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Streble, H. y Krauter, D. (1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota de
agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).
150
PROTOZOOS EN EL FANGO
ACTIVO.
SUBPHYLUM MASTIGOPHORA
Clase Phitomastigophora
Orden Euglenida
Clase Zoomastigophora
Orden Kinetoplastida
SUBPHYLUM SARCODINA
Clase Heterolobosea
Orden Schizopyreniida
Clase Lobosea
Subclase Gymnamoebia
Orden Euamoebida
Familia Amoebida
Familia Hartmannellidae
Subclase Testacealobosia
Orden Arcellinida
Suborden Arcellina
Familia Arcellidae
Suborden Difflugina
Familia Difflugidae
Clase Filosea
Orden Gromiida
Suborden Euglyphina
Familia Euglyphidae
Clase Heliozoa
PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA
PROTOZOOS
SISTEMTICA
Clase Kinetofragminophora
Subclase Gymnostomatia (Litostomatea)
Orden Prostomatida
Suborden Prodorontina
Familia Colepidae
Orden Haptorida
Familia Spathidiidae
Familia Trachelophyllidae
Orden Pleurostomatida
Familia Amphileptidae
Subclase Vestibuliferia
Subclase Hypostomatia
Orden Nassulida
Orden Cyrtophorida
Familia Chilodonellidae
Subclase Suctoria
Orden Suctorida
Suborden Exogenina
Familia Podophryidae
Suborden Endogenina
Familia Acinetidae
Familia Tokopryidae
Clase Oligohymenophora
Subclase Hymenostomatia
Orden Hymenostomatida
Suborden Tetrahymenina
Familia Tetrahymenidae
Familia Glaucomidae
Familia Turaniellidae
PHYLUM CILLIOPHORA
Clase Oligohymenophora
Subclase Hymenostomata
Orden Hymenostomatida
Suborden Peniculina
Familia Parameciidae
Orden Scuticociliatida
Suborden Philasterina
Familia Uronematidae
Familia Loxocephalidae
Familia Cinetochilidae
Suborden Pleuronematina
Orden Astomatida
Subclase Peritrichia
Orden Peritrichida
Familia Vorticellidae
Familia Epistylididae
Familia Operculariidae
Familia Vaginicolidae
Clase Polymenophorea
Subclase Spirotrichia
Orden Heterotrichida
Familia Spirostomatida
Familia Metopidae
Orden Hypotrichida
Familia Oxytrichidae
Familia Aspidiscidae
Familia Euplotidae
Clase Polichaeta
Clase Oligochaeta
Clase Hirudinea
PHYLUM ANELLIDA
PHYLUM NEMATODA
Orden Bdelloidea
Familia Adinetidae
Familia Philodinidae
Orden Ploimida
Familia Brachionidae
Familia Dicranophoridae
Familia Lecanidae
Familia Notommatidae
PHYLUM ROTIFERA
Orden Macrodasioideos
Orden Quetonoideos
PHYLUM GASTROTRICHA
METAZOOS
METAZOOS
CILIADOS
RHIZPODOS
FLAGELADOS
ROTFEROS
GASTROTRICOS
NEMTODOS
ANLIDOS
PERITRICOS
HOLOTRICOS
ESPIROTRICOS
SUCTORIOS
AMEBOIDES
TECAMEBOIDES
HELIOZOOS
ZOOFLAGELADOS
EUGLENFITOS
NDICE
EUGLENFITOS
ZOOFLAGELADOS
FLAGELADOS:
ORDEN. Kinetoplastida.
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS.
LMINA 1
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Aparecen en las fases iniciales de colonizacin de un fango activo. No obstante, si aparecen en fangos de cierta
madurez indican un empeoramiento en el estado de depuracin del sistema.
ALIMENTACIN. Carecen de cloroplastos o estructuras fotosintticas, por lo que se les considera hetertrofos.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 5-12 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CLASE. Zoomastigophora.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ZOOFLAGELADOS
GNERO.Peranema sp.
ORDEN. Euglenida.
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS.
LMINA 2
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Carga orgnica dbil y baja oxigenacin en el reactor. No obstante, compatibles con buenos rendimientos en la
depuracin.
ALIMENTACIN. Hetertrofo.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 40-70 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CLASE. Phitomastigophora.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
EUGLENFITOS
HELIOZOOS
TECAMEBOIDES
AMEBOIDES
RHIZPODOS:
GNERO. Amoeba.
ORDEN. Euamoebida.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajos rendimientos; a elevadas concentraciones implica la entrada de vertidos difcilmente degradables.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 3
TAMAO. 300-600 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
AMEBOIDES
In vivo.
Organismo: Ameba
(continuacin).
desnuda
LMINA 4
AMEBOIDES
GNERO. Arcella.
TAMAO. 45-200 m.
LMINA 5
OBSERVACIONES. Dentro de este gnero existen tres especies similares en cuanto a su aspecto. A. vulgaris, A. hemisphaerica y A. discoides. La principal
diferencia estriba en la vista de perfil de cada una de ellas. en forma de casco (A. vulgaris), con forma semiesfrica (A. hemisphaerica) y muy aplanada (A. discoides).
El tamao oscila entre 100 -145 m de dimetro y 50-70 m de altura.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. En general, buenos rendimientos de depuracin; a elevadas concentraciones indica fenmenos de nitrificacin.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo.
TECAMEBOIDES
In vivo.
LMINA 6
TECAMEBOIDES
GNERO. Centropyxis.
ORDEN. Euamoebida.
LMINA 7
OBSERVACIONES. Es caracterstica de estas tecamebas las prolongaciones a modo de espinas que le sobresalen. Su identificacin a nivel de especie se realiza en
funcin del nmero de espinas externas y de su localizacin. As, C. aculeata presenta entre 2 y 8 espinas en la parte posterior, con aparicin o no de espinas en la
parte anterior. C. discoides presenta espinas dispuestas irregularmente. Tamao 120-180 m .
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 50-260 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
TECAMEBOIDES
In vivo
LMINA 8
TECAMEBOIDES
GNERO. Cryptodifflugia.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevada edad celular y no por ello relacionada con buenos rendimientos en la depuracin.
ALIMENTACIN.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 9
TAMAO. 10-20 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
TECAMEBOIDES
OBSERVACIONES. Aunque existen especies de heliozoos que son ssiles, la mayora se encuentra libre en el medio acutico, arrastradas por la corriente.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Con escaso significado, son habituales en procesos de fangos activos muy poco concentrados.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 10
TAMAO. 20-60 m.
CLASE. Heliozoa.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
Organismo: Heliozoo.
HELIOZOOS
SUCTORIOS
ESPIROTRICOS
HOLOTRICOS
PERITRICOS
CILIADOS:
GNERO. Vorticella.
ORDEN.Peritrichida.
OBSERVACIONES. Este organismo es gregario, encontrndosele fcilmente formando pseudocolonias (siguiente fotografa).
LMINA 11
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a condiciones de buena aireacin en el reactor pero cuando aparece en pequeas proporciones se
le asocia a condiciones transitorias; no obstante son compatibles con una buena depuracin. Puede aparecer como organismo dominante ante condiciones de mala
floculacin.
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 30-120 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
PERITRICOS
Vorticella convallaria no forma colonias, pero por lo general vive en grupos parecidos a stas, es decir, es
una especie gregaria.
OBSERVACIONES:
In vivo
LMINA 12
PERITRICOS
FAMILIA. Vorticellidae.
ESPECIE. Vorticella microstoma.
ORDEN. Peritrichida.
GNERO. Vorticella.
anchura que el cuerpo; pednculo fino de aprox. 6 veces la longitud del cuerpo.
LMINA 13
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Organismo polisaprobio; efluentes de baja calidad; habitual en el proceso de fangos activos. Tambin se le
atribuye el carcter de mal indicador por la versatilidad de ambientes en que se desarrolla, aunque en general suele hacerlo en fangos en formacin.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 35-83 m.
FORMA CORPORAL. Campana invertida con pednculo fino anclado al sustrato. MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Ausencia (organismo ssil).
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
PERITRICOS
In vivo
LMINA 14
PERITRICOS
FAMILIA. Epistylididae.
ORDEN. Peritrichida.
NOTA. Al punzar una colonia de Epistylis, la retraccin no es comn, sino independiente para cada individuo sin que exista repliegue en los pednculos.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Media carga; proliferan con determinados vertidos industriales.
LMINA 15
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Epistylis.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
Verde de metilo
PERITRICOS
FAMILIA. Operculariidae.
ORDEN. Peritrichida.
bloquea el citostoma.
TAMAO. 45-50 m.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Oxigenacin insuficiente en el reactor; si su aparicin es masiva, indica condiciones cambiantes; si la
colonizacin del fango es casi exclusiva de este organismo, indica influentes industriales.
LMINA 16
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Opercularia.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
PERITRICOS
FAMILIA. Vaginicolidae.
ESPECIE. Vaginicola crystallina.
ORDEN. Peritrichida.
GNERO. Vaginicola.
LMINA 17
NOTA sobre el Gnero Vaginicola. Este organismo presenta el extremo posterior fijado a la base de un caparazn llamado lriga de aspecto alargado y cilndrico
que es la estructura que se fija al sustrato. Una misma lriga puede albergar a uno o dos individuos con capacidad contrctil, que se sujetan al caparazn mediante
un corto pednculo. Los individuos pueden albergar en su citoplasma varias zooclorelas.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buenos rendimientos en la depuracin; asociado a bajas cargas msicas y altos tiempos de retencin celular.
ALIMENTACIN. Bacterias.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 55-70 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
PERITRICOS
In vivo
LMINA 18
PERITRICOS
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 19
TAMAO. 25-70 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. S
FAMILIA. Chilodonellidae.
ORDEN. Cyrtophorida.
GNERO. Chilodonella.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
HOLOTRICOS
In vivo
LMINA 20
HOLOTRICOS
GNERO. Litonotus.
ORDEN. Pleurostomatida.
TAMAO. 80-100 m.
LMINA 21
OBSERVACIONES. Los cilios laterales as como la forma en botella son caractersticos de este gnero.Tres especies son L. fasciola (100 m de tamao; ms
esbelto que L. lamella), L. lamella (200 m de tamao) y L. cygnus (un cuello muy largo, de hasta 500 m ; de rara aparicin).
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Altas concentraciones de oxgeno, bajas concentraciones de H2S; estabilidad ecolgica si aparecen a bajas
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
HOLOTRICOS
FAMILIA. Trachelophyllidae.
ESPECIE. Acineria uncinata (anteriormente Trachelophyllum pusillum).
ORDEN. Haptorida.
GNERO. Trachelophyllum.
dos macroncleos esfricos (cada uno con microncleo prximo); vacuola contrctil.
LMINA 22
NOTA. El Profesor Paolo Madoni (Universidad de Parma, Italia) ha informado de que Trachelophyllum pusillum se denomina en la actualidad Acineria uncinata,
incluyndose en el grupo de los ciliados reptantes y no de los nadadores libres.
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 40-50 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
HOLOTRICOS
FAMILIA. Parameciidae.
ESPECIE. Paramecium caudatum.
GNERO. Paramecium.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Presencia espordica en fangos en formacin, con carga alta y buena oxigenacin.
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 23
TAMAO. 180-300 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
HOLOTRICOS
LMINA 24
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buena calidad de salida del efluente. Cuando est presente en altas densidades indica buena depuracin por
reduccin de DQO, DBO y NH4 .
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 30-50 m.
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Ciliaciones laterales densas y largo cilio caudal; CLAVE IDENTIFICATIVA. Largo cilio caudal y vacuola contrctil.
GNERO. Uronema.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
HOLOTRICOS
In vivo
LMINA 25
HOLOTRICOS
GNERO. Stentor.
ORDEN. Heterotrichida.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 26
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo.
ESPIROTRICOS
Stentor sp. durante la fase contrada (A) e instantes antes de pasar a la fase
extendida (B).
In vivo.
LMINA 27
ESPIROTRICOS
GNERO. Euplotes.
ORDEN. Hypotrichida.
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 28
TAMAO. 80-150 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ESPIROTRICOS
GNERO. Aspidisca.
ORDEN. Hypotrichida.
ventral.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buen biondicador, al ser caracterstico de fangos bien estabilizados.
ALIMENTACIN. Bacterifago.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 29
motrices.
TAMAO. 25-40 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ESPIROTRICOS
as como su nmero.
OBSERVACIONES. Ciliados caractersticos por la ausencia de cilios y de estructuras bucales que sustituyen por tentculos para alimentarse. Los gneros ms
comunes son Tokophrya y Acineta, ambos con tentculos agrupados. Podophrya presenta tales tentculos distribuidos por todo el cuerpo.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Edades avanzadas de fango. Al ser los ltimos eslabones de la cadena alimentaria, indican estabilidad
ecolgica.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO.60-300 m.
cilios.
LMINA 30
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Fascculos similares a tentculos; no presentan CLAVE IDENTIFICATIVA. Forma corporal y agrupacin de los fascculos.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
ORDEN. Suctorida.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
Organismo: Suctorio.
SUCTORIOS
FAMILIA. Acinetidae.
LMINA 31
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a altos tiempos de residencia con poblaciones asociadas de ciliados nadadores.
ALIMENTACIN. Carnvoro.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 60-700 m
FORMA CORPORAL. Cuerpo celular redondeado con pednculo medianamente largo. MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Metacineta.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
SUCTORIOS
GNERO. Tokophrya.
ALIMENTACIN. Carnvoro.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 40-60 m.
LMINA 32
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
SUCTORIOS
FAMILIA. Exogenina.
ORDEN. Suctorida.
ALIMENTACIN. Carnvoro.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 33
TAMAO. 50-70 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Podophrya.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo.
SUCTORIOS
ANLIDOS
NEMTODOS
GASTROTRICOS
ROTFEROS
METAZOOS:
FAMILIA. Philodinidae.
ORDEN. Bdelloidea.
o ms.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevadas edades de fango, buena calidad del agua tratada.
ALIMENTACIN. Detritus.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 34
TAMAO. 250-1.000 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Rotaria.
FILUM. Rotifera.
GRUPO. Metazoo.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ROTFEROS
FAMILIA. Philodinidae.
ORDEN. Bdelloidea.
LMINA 35
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. La presencia de Philodina en los sistemas de depuracin biolgica est condicionada por la edad del fango
que deber ser alta y la carga dbil (condiciones caractersticas de la aireacin prolongada).
ALIMENTACIN. Detritvora.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 100-500 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GNERO. Philodina.
FILUM. Rotifera.
GRUPO. Metazoos.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ROTFEROS
FAMILIA. Lecanidae.
ORDEN. Ploimida.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Procesos muy estabilizados; en nmero controlado indican eficiencia en la depuracin.
ALIMENTACIN. Bacterias.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 200-300 m.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FILUM. Rotfera.
GRUPO. Metazoo.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
LMINA 36
ROTFEROS
GNERO. Chaetonus.
ORDEN. Quetonoideos.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
TAMAO. 70-500 m.
LMINA 37
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FILUM. Gastrotricha.
GRUPO. Metazoo.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
Organismo: Gastrotrico.
GASTROTRICOS
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 38
FILUM. Nematoda.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
GRUPO. Metazoos.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
Organismo: Nematodo.
NEMTODOS
FAMILIA. Aelosomatidae.
CLASE. Oligochaeta.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 39
agrupadas en penachos de 3 o 4.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FILUM. Anellida .
GRUPO. Metazoo.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
In vivo
ANLIDOS
Cristal violeta
LMINA 40
BACTERIAS FILAMENTOSAS
EN EL FANGO ACTIVO.
LOCALIZACIN. Variable
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Baja carga msica y elevada edad de fangos. Este filamento es causa de disgregacin flocular.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 41
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presenta vaina, ni ramificaciones, ni movilidad. Septos celulares no visibles, al igual que las constricciones celulares.
Neisser.
FILAMENTOS
LMINA 42
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Son muchas las condiciones que se asocian a este filamento, tales como aguas residuales spticas, influentes
industriales deficientes en nitrgeno, bajas cargas msicas acompaadas de sustratos fcilmente degradable, etc.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Es un filamente muy largo y robusto, con septos celulares siempre visibles.
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones.
Gram.
FILAMENTOS
LMINA 43
FILAMENTOS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a altas edades de fango y bajas cargas msicas.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Se diferencia del Tipo 0675 en que este ltimo es ms pequeo.
LMINA 44
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Crecimiento epiftico muy importante que incluso puede provocar una cubierta Neisser positiva. Septos celulares visibles sin
constricciones. Vaina.
Gram.
FILAMENTOS
LOCALIZACIN. Interior.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Ocasionan disgregacin flocular y puentes intefloculares. En plantas de aguas residuales urbanas indican
elevada edad de fango y baja carga msica. En sistemas que reciben aguas residuales industriales indican desequilibrios nutricionales.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA.
LMINA 45
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Crecimiento epiftico variable. Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina.
In vivo.
FILAMENTOS
LMINA 46
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Baja Carga msica, oxgeno disuelto a baja concentracin; pueden estar asociados tambin con la afluencia de
aguas residuales industriales.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Sin ramificaciones, sin vaina y sin crecimiento epiftico. Septos celulares visibles as como las constricciones en dichos septos.
medida).
Neisser.
FILAMENTOS
LMINA 47
FILAMENTOS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajos valores de la carga msica, residuos industriales y bajas concentraciones de oxgeno.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 48
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones. Ausencia de vaina.
Neisser.
FILAMENTOS
LMINA 49
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Condiciones de septicidad, influentes ricos en sulfuros y cidos orgnicos, as como condiciones de deficiencia
de nitrgeno.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina. Pueden aparecer gonidios y rosetas.
In vivo.
Organismo.Thiothrix I.
FILAMENTOS
LMINA 50
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Se pueden presentar en medios ricos en azufre, pues pueden emplear el H2S como fuente de energa oxidable.
La acumulacin del azufre es transitoria y tiene lugar cuando el medio contiene sulfuro. Despus de que se ha utilizado completamente el sulfuro del medio. El S
almacenado es oxidado a sulfato. Es un organismo bioindicador de condiciones spticas, influentes ricos en sulfuros o cidos orgnicos, as como reboses en planta de
mala calidad.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina. Pueden aparecer rosetas y gonidios.
FILAMENTOS
LMINA 51
FILAMENTOS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Edades de fango elevadas y condiciones de buena aireacin (al tratarse de un organismo aerobio estricto).
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 52
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Presencia de ramificaciones verdaderas (continuidad citoplasmtica).
Gram.
FILAMENTOS
Neisser.
LMINA 53
FILAMENTOS
FORMA CELULAR.
RESPUESTA TINCIONES. G +, N - y grnulos N +.
LMINA 54
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas cargas msicas, bajas concentraciones deoxgeno disuelto, influentes ricos en grasas, bajas temperaturas
y pH>7 (siendo el ptimo pH 8).
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Filamentos Gram positivos que se encuentran enrrollados intraflocularmente o en los espacios interfloculares.
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presenta ni movilidad, ni ramificaciones, ni vaina ni septos celulares visibles.
Gram.
FILAMENTOS
Neisser.
LMINA 55
FILAMENTOS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas concentraciones de oxgeno disuelto y alternancia de la carga orgnica.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. La presencia de falsas ramificaciones proporcionan a este organismo apariencia de rbol.
LMINA 56
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Falsas ramificaciones que le confieren apariencia de rbol. . Septos celulares visibles con constricciones. Vaina.
Gram.
FILAMENTOS
In vivo.
LMINA 57
FILAMENTOS
FORMA CELULAR.
RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N -.
LOCALIZACIN. Libre.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
LMINA 58
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Se deplaza lentamente o mediante flexin. No presenta septos celulares visibles, aunque existe una nica constriccin en la
parte media del filamento. Ausencia de vaina.
In vivo.
FILAMENTOS
LMINA 59
FILAMENTOS
LOCALIZACIN. Libre.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas concentraciones de oxgeno disuelto. No obstante, ante un episodio de cloracin en planta pueden
aparecer en grandes densidades. Influente con elevados valores de DBO.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Cadena irregular de clulas relativamente corta con reaccin Gram - (a diferencia con estreptococos).
LMINA 60
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones.
In vivo.
FILAMENTOS
LOCALIZACIN. Libre.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Crecimiento disperso que provoca turbidez. Alternancias en la carga.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Cadenas irregulares de clulas con forma cocobacilar o bacilar con extremos redondeados.
LMINA 61
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles.
Gram.
FILAMENTOS
LOCALIZACIN. Libre.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
CLAVE IDENTIFICATIVA. Es un filamento mvil de importante longitud, que en in vivo presenta cierto color verdoso.
LMINA 62
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Mviles por deslizamiento. Septos celulares visibles.
In vivo.
FILAMENTOS
LOCALIZACIN.
LMINA 63
OBSERVACIONES. Son organismos no fotosintticos. Presentan una organizacin biolgica altamente diferenciada, con una estructura vegetativa denominada
micelio con capacidad de crecer indefinidamente mediante filamentos que se llaman hifas. Obtienen energa por respiracin o fermentacin de materiales solubles
presentes en su ambiente, aunque hay algunos que son parsitos y otros predadores. En general, los hongos presentes en aguas residuales seran los Phycomicetos
acuticos. Son un grupo muy variado.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. No suelen ser organismos dominantes en un sistema de fangos activos, pero cuando aparecen suelen hacerlo
asociados a la presencia de vertidos industriales. La proliferacin de estos organismos puede propiciar la aparicin de fenmenos de esponjamiento en el fango.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presentan motilidad, ni vaina, ni crecimiento epiftico. Ramificaciones verdaderas. Septos celulares y constricciones.
In vivo
Organismo. Hongo.
Organismo Filamentoso
NDICE
EL FENMENO DE BULKING VISCOSO
PROLIFERACIN BACILAR EN EL LICOR MEZCLA
BIOFILM EN DECANTADORES SECUNDARIOS
EVOLUCIN DEL BULKING FILAMENTOSO
ESTRUCTURA FLOCULAR DISPERSA
CRECIMIENTO DISPERSO LOCAL
CRECIMIENTO DISPERSO (alguna observacin)
BACTERIAS DE CRECIMIENTO INTRAFLOCULAR
BACTERIAS HELICOIDALES
FLCULOS CON BACTERIAS NITRIFICANTES
BACTERIAS DEL AZUFRE
COLONIAS DE ZOOGLOEA
RESTOS VEGETALES
FANGO ACTIVO DE OXIDACIN TOTAL
OBSERVACIONES MICROSCPICAS CORRESPONDIENTES A INFLUENTES DE
DEPURADORA
EL FENMENO DE BULKING
VISCOSO.
La generacin de bulking viscoso es ocasionada por una
proliferacin excesiva de la bacteria Zoogloea sp., responsable de la excrecin
de material extracelular tipo polmero que confiere al fango un aspecto mucoso
de difcil decantabilidad. Este problema aparece, o bien por un mantenimiento
de edades excesivas de fango en el reactor, o bien por entradas puntuales de
materia orgnica muy degradable (tipo cidos orgnicos) que ocasionan una
degradacin inmediata y la consiguiente liberacin del material intracelular,
que proporciona al fango un aspecto gelatinoso. Dicho aspecto gelatinoso
puede percibirse al microscopio ptico como un halo alrededor del flculo,
visible claramente en la tincin Neisser (diapositiva siguiente).
La eliminacin mediante flotado es fundamental para conseguir
regenerar el fango.
BULKING VISCOSO
LMINA 64
BULKING VISCOSO
LMINA 65
BULKING VISCOSO
LMINA 66
BULKING VISCOSO
BIOFILM EN DECANTADORES
SECUNDARIOS.
El estudio peridico de la capa de organismos que se fija en la
superficie del vertedero de los decantadores secundarios o del canal de
cloracin, nos puede proporcionar informacin sobre la comunidad que
normalmente se asienta sobre esta zona y detectar la influencia de vertidos
industriales.
LMINA 69
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Cyanophyta (algas azules).
CLASE.
ORDEN. Nostocales.
GNERO. Oscillatoria.
MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Si
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. No
LMINA 71
DIATOMEAS.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Chrysophyta.
GNERO. Navicula.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. En huso.
TAMAO. 20-60 m
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Se desarrolla en aguas muy ricas en materia orgnica (alfa-mesosaprobio).
LMINA 72
DIATOMEAS
LMINA 73
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Chlorophyla (algas verdes).
ORDEN. Chlorococcales.
FAMILIA. Oocystaceae.
GNERO. Oocystis.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Colonia redondeada con extremos alargados,
SPIRULINA (CIANOBACTERIA).
Organismo. Spirulina .
200x . Campo claro.
In vivo.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Eubacteria fotosinttica del grupo de Oscillatoria.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Aguas contaminadas con bajos ndices de turbidez; bajas concentraciones en SSLM; caracterstica de aguas
salinas.
LMINA 75
LMINA 76
LMINA 78
LMINA 79
CRECIMIENTO DISPERSO.
LMINA 80
Bacterias Gram positivas y Gram negativas dentro de flculos de fango activo. Son
organismos de forma cocal o bacilar siempre presentes en el fango activado.
LMINA 81
BACTERIAS HELICOIDALES.
Bacterias helicoidales.
400x .Contraste de fases.
In vivo.
LMINA 82
LMINA 83
Las bacterias del azufre captan este elemento del agua tratada y lo
incorporan a su sistema de reserva para utilizarlo en anaerobiosis.
La pelcula que se forma sobre la pared del decantador sirve de
soporte para las bacterias del S fijas (Thiopedia, Thiocystis, etc.). Mientras
que las filamentosas se deslizan sobre la superficie (Beggiatoa). Son
organismos habituales de ambientes polisaprobios.
LMINA 84
COLONIAS DE ZOOGLOEA.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
Eubacteria Aerobia Gram - .
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Fangos de poca edad, en formacin. Aportes de aguas de origen industrial.
OBSERVACIONES. Agrupaciones de bacterias (Gram -) gracias a la capacidad de secrecin de muclago, hecho que les permite permanecer unidas. Pueden crecer
en forma digitiforme o ramificada. Su proliferacin puede provocar bulking zoogleal si bien una concentracin moderada de estas bacterias ayuda a la formacin del
flculo durante las primeras fases de la puesta en marcha de un reactor biolgico.
LMINA 85
RESTOS VEGETALES.
Traqueida vegetal.
200x. Campo claro.
In vivo.
LMINA 86
Flculo caracterstico de una depuracin por oxidacin total. Fango muy mineralizado.
LMINA 87
OBSERVACIONES MICROSCPICAS
CORRESPONDIENTES A INFLUENTES DE
DEPURADORA.
El estudio microbiolgico de las muestras de influente puede
proporcionarnos informacin de la biota que normalmente entra en
la planta, de tal forma que, si en la observacin microscpica
existiera alguna irregularidad, el vertido anmalo podra ser
detectado.
A continuacin se muestran una serie de imgenes tomadas sobre
agua bruta llegada a la depuradora.
Influentes depuradora
MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Si
CLAVE IDENTIFICATIVA. Color y reaccin a tinciones
TAMAO. 5-20 m.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
Eubacteria fotosinttica unicelular; con divisin por gemacin.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Entrada en el agua residual generalmente procedente de un foso sptico; bajas concentraciones de SSLM.
LMINA 88
Influentes depuradora
LOCALIZACIN. Libre
FORMA CELULAR.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Condiciones de aerobiosis, en general .
LMINA 89
Influentes depuradora
Organismo: Espirilos.
100x. Campo claro.
In vivo.
LOCALIZACIN. Libre.
RESPUESTA TINCIONES. G -
LMINA 90
Influentes depuradora
Organismo. Cyanophiceas.
100x. Campo claro.
In vivo.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO .Eubacteria fotosinttica, denominada Cianobacteria, Cianofcea o alga azul.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Filamento grueso de extremos redondeados.
TAMAO. 100-1.000 m
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociados a entradas de aguas procedentes de fosos spticos.
LMINA 91
Influentes depuradora
Organismo. Cyanophiceas.
100x. Campo claro.
In vivo.
LMINA 92
Influentes depuradora
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Eubacteria fotosinttica; bacterias rojas del Azufre
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Cocos cbicos o esfricos
MOVIMIENTOS LOCOMOTORES.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Crecimiento quimioautotrfico en condiciones de baja concentracin de oxgeno con S como aceptor de
electrones.
LMINA 93
INTRODUCCIN
Los laboratorios de aguas residuales deben trabajar con mtodos estandarizados para los anlisis
biolgicos de los fangos activos, de forma que se pueda definir la capacidad ptima de medida, entendida sta
como la incertidumbre de medida ms pequea que un laboratorio puede conseguir (ENAC, 1998).
Para conseguir este objetivo y unificar criterios, se realizan ejercicios interlaboratorio de fango activo
con muestras de distintas caractersticas, con resultados muy satisfactorios.
Los ejercicios de intercomparacin entre laboratorios son una herramienta bsica, sobre todo en anlisis
de tipo microbiolgico, para unificar criterios debido a la alta densidad de microorganismos por mililitro y a la
gran dispersin de valores que pueden ocasionar pequeas diferencias en la metodologa de anlisis de los
fangos activos. As pues, estos ejercicios ofrecen la oportunidad de comparar los resultados y mtodos con los
dems laboratorios participantes, con objeto de detectar errores sistemticos y eliminar este tipo de
desviaciones.
Organismos de acreditacin y certificacin, tanto en el mbito nacional como internacional,
recomiendan la participacin en este tipo de ejercicios interlaboratorios, no slo para validar los mtodos, sino
para demostrar la calidad de los resultados de forma continuada.
En la actualidad se impone la necesidad de garantizar la fiabilidad de los resultados frente a clientes
internos y externos de la empresa. Este tipo de actividades genera confianza, tanto para los clientes habituales
como para futuros clientes, sobre todo a la hora de abrir mercado.
La participacin en estos ejercicios ofrece la asistencia a las reuniones, normalmente anuales, en las
que se ofrece un interesante foro de encuentro de profesionales del sector, en el que se debaten las
particularidades de las muestras y las incidencias del anlisis. Generalmente, se propone la sistemtica de los
ejercicios para el siguiente ao, abierta a comentarios y posibles modificaciones que puedan proponer los
participantes.
En definitiva, estos ejercicios constituyen un importante elemento de ayuda a la mejora de la calidad
interna de un laboratorio.
Al definir un interlaboratorio para fangos activos, debemos tener en cuenta varias ideas generales:
1.- La incertidumbre de medida es un parmetro asociado a la medicin, que caracteriza la dispersin
de los valores que pueden atribuirse razonablemente al mesurando (ENAC, 1998). Para fangos activos, la
dispersin de los datos es muy elevada y el esfuerzo de sistematizacin y contraste debe ser muy alto.
151
2.- Se deben definir los mesurandos, entendidos stos como las magnitudes particulares objeto de una
medicin (ENAC, 1988). En el caso particular de los fangos activos, podra estar representado por el IF, ndice
de Madoni, Identificacin de filamentos....
El ejercicio es recomendable que conste de varios apartados, donde se recojan los distintos enfoques de
los anlisis:
-
Valoracin del IF
Si bien los laboratorios pueden inscribirse slo en los apartados que deseen comparar y afianzar.
Ser necesario disponer de un microscopio con objetivos de 10X 20X, 40X y 100X as como del
material para su uso (portaobjetos, cubreobjetos), probeta de 100 mL, cmara de Fuchs-Rosenthal, cmara de
Neubauer y reactivos y material necesario para las tinciones Neisser, Gram, test de azufre y PHB.
Deber proporcionarse una referencia de la metodologa de anlisis a seguir, donde se describa el
procedimiento para cada unos de los apartados, as como la preparacin de reactivos y uso de materiales
necesarios para rellenar los formatos. En caso de usar distinta metodologa, deber indicarse en el apartado
observaciones.
Para asegurar la confidencialidad, cada participante recibir un cdigo en la entrega de muestra, que
tendr carcter permanente a lo largo de todo el circuito de ejercicios interlaboratorio del ao y ser
imprescindible para la identificacin de los resultados de cada laboratorio. No se incluirn los resultados que no
posean dicho cdigo. No se facilitar informacin del resto de laboratorios que no sean el propio.
Referente a la seleccin de la muestra objeto de anlisis, en fechas prximas al envo de la muestra, se
realizar un estudio previo de las muestras de las balsas de aireacin, de varias depuradoras de aguas residuales
urbanas o con poco aporte industrial. Con anterioridad, se habr solicitado por escrito al responsable de cada
E.D.A.R. permiso y habr sido concedido, para efectuar el citado sondeo. En caso de seleccionar su depuradora,
se requiere el beneplcito para extraer un mayor volumen de muestra, que se homogeneizar y dividir entre los
participantes, con la salvaguardia del anonimato del origen de la muestra. Se seleccionar aquella muestra que el
organismo organizador considere interesante y representativa de situaciones reales, o que en su caso lo estime
adecuado.
En cuanto a la preparacin de la muestra, se obtendr un volumen suficiente de fango activo de una
depuradora de aguas residuales annima, que garantice un volumen mnimo por participante, unos 300 mililitros
en botes de plstico estriles de cierre hermtico, con aproximadamente un tercio de su capacidad de cmara de
152
aire para evitar la anoxia durante el transporte. Es importante contar con un servicio de mensajera que garantice
la entrega en destino, como muy tarde, al siguiente da de la toma de muestra, para evitar alteraciones en la
misma. Previo a la distribucin de muestras, se realizar una homogeneizacin del volumen total. Tras el
envasado, se efectuar un estudio de homogeneidad de muestras, para garantizar esta propiedad. El bote ir
etiquetado con el cdigo de participante, el nmero del ejercicio y la fecha de envasado.
El anlisis de las caractersticas macroscpicas y microscpicas del fango y el anlisis de protozoos,
debern realizarse inmediatamente a la recepcin de la muestra y a lo sumo al siguiente da del envasado de la
misma. El anlisis de filamentos debe realizarse tambin en ese plazo, pero puede demorarse un par de das
siempre que se fijen frotis de forma adecuada. Deber indicarse la fecha de anlisis de cada bloque. Se
recomienda que, una vez recibido el bote con la alcuota de fango activo a analizar, se destape y someta a
agitacin suave durante algunos minutos. En cualquier caso, se destapar el bote y homogeneizar suavemente
antes de cada uno de los anlisis propuestos, evitando derrames y agitaciones bruscas que puedan alterar o
destruir la representatividad de la muestra, la estructura y cohesin flocular.
El envo para cada participante constar del bote continente de la muestra, unas placas refrigerantes y
las hojas de trabajo a rellenar. En el caso de la primera entrega, se adjuntar documentacin que indique el
cdigo de participante.
En un plazo mximo fijado a partir de la fecha lmite de entrega de resultados (suele ser 15 das
hbiles), se enviar a cada participante un informe detallado que incluir los resultados, los mtodos y los datos
tcnicos y estadsticos mediante tablas y grficos ilustrativos. Con los resultados de los laboratorios se proceder
a la conversin logartmica (evaluacin de la microfauna) y al tratamiento tcnico y estadstico de los mismos.
En cada ejercicio y para cada parmetro se calcular la media, desviacin tpica, coeficiente de variacin e
intervalo global de cada uno de los ndices de biocalidad implicados. Es conveniente valorar tambin los
porcentajes de la agrupacin de los resultados, el valor mximo y mnimo de fluctuacin de los datos y la
medida de tendencia central o moda (Pola, 1993).
Ejemplo 1: Tabla de recogida de resultados para un interlaboratorio:
Tabla 1: Resultados de un ejercicio interlaboratorio
MUESTREO
12/11/02
PARTICIPANTE
MACROSCOPIA
21
25,5
26
26
25,5
MICROSCOPIA
43
43
43
50
43
INDICE DE FILAMENTOS
64
68,5
69
75,5
68,5
CATEGORIA DE FILAMENTOS
4,5
FILAMENTO DOMINANTE
MICROTHRIX
MICROTHRIX
MICOTHRIX
MICROTHRIX
MICROTHRIX/1701
FILAMENTO SECUNDARIO
1701/NOSTOCOIDA
1701/NOSTOC III
021N
NOSTOCOID/HALISCOM
EFECTO FLOCULO
DISGREGACION
DISGREGACION
OTROS FILAMENTOS
NOCARDIA/HALISCOM
1,32
m/ml FILAMENTOS
770,24
2,86
4,38
3,23
3,04
4,6
INDICE DE SHANON
2,83
2,79
2,65
2,46
2,56
INDICE DE MADONI
10
10
10
10
CLASE MADONI
NUMERO DE ESPECIES
12
13
12
10
13
GRUPO DOMINANTE
SESIL/REPTANTE
SESIL/REPTANTE
SESIL/REPTANTE
SESIL/REPTANTE
SESIL/REPTANTE
DISGREGACION
HALISCOMENOBC
1,87
1,55
OBSERVACIONES
153
021N
1,68
Lab.1- 4
Lab.6- 4
Lab.2- 3
Lab.7- 3
Lab.3- 4
Lab.8- 4
Lab.4- 4
Lab.9- 4
Lab.5- 5
Lab.10- 4
xi
Media
X=
X= 3,9
n
siendo x el dato de cada participante y n el nmero de datos (en este caso, 10)
(xi X)2
Desviacin tpica S=
S = 0,57
n 1
S
Coeficiente de variacin CV = 100
CV = 14,6%
X
R=2
154
ndice de Madoni
20%
10%
70%
155
2.
3.
4.
5.
6.
Reunin final.
156
BIBLIOGRAFA
ENAC (1998). Expresin de la incertidumbre en las calibraciones. CEA-ENAC-LC/02. 1-24.
Pola, A. (1993). Aplicacin de la estadstica al control de calidad. Editorial Morcombo S.A. Barcelona.
157