Manual Toma Muestras PDF

Secretara Distrital de Salud de Bogot, D. C.
Direccin de Salud Pblica
Manual para la
toma de muestras
para anlisis
microbiolgico
Samuel Moreno Rojas

Alcalde Mayor de Bogot, D. C.
Hctor Zambrano Rodrguez
Secretario Distrital de Salud de Bogot, D. C.
Jos Fernando Martnez Lopera
Director de Salud Pblica
Mara Patricia Gonzlez Cullar
Profesional especializada, rea de Vigilancia en Salud Pblica
Daibeth Henrquez Iguarn
Profesional especializada, rea de Vigilancia en Salud Pblica

Direccin de Salud Pblica
Carrera 32 n 12-81, cuarto piso
Bogot, D. C.
www.saludcapital.gov.co
Coordinacin editorial
Ocina Asesora de Comunicaciones
ISBN 978-958 8313191
Primera edicin
Bogot, mayo de 2008
Diseo, diagramacin e impresin
Editorial Linotipia Bolvar y Ca. S. en C.
CONTENIDO
MANUAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS PARA ANLISIS MICROBIOLGICO

Introduccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. ASPECTOS GENERALES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1
1.2
1.3
1.4
1.5
1.6
1.7
1.8
1.9
Recomendaciones para la toma de muestras . .

Solicitud de estudio . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Precauciones de bioseguridad . . . . . . . . . . .
Preparacin de elementos . . . . . . . . . . . . . .
Equipo de asepsia y antisepsia . . . . . . . . . . .
Preparacin de la piel: limpieza y antisepsia .
Tcnica de extendido . . . . . . . . . . . . . . . . .
Identicacin de muestras . . . . . . . . . . . . .
Condiciones generales de almacenamiento
y transporte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Criterios de aceptabilidad
o rechazo de muestras . . . . . . . . . . . . . . . . .
Cadena de custodia y pruebas de laboratorio .
Objetivo general . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Objetivos especcos. . . . . . . . . . . . . . . . . .
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7
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8
9
10
10
10
2. MUESTRAS CLNICAS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
1.10
1.11
1.12
1.13
2.1
2.2
2.3
2.4
2.5
2.6
2.7
2.8
2.9
Muestras de orina . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Muestras de sangre . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Muestras del tracto respiratorio . . . . . . . . . .
Muestras lquidos corporales . . . . . . . . . . . .
Muestras de piel y mucosas . . . . . . . . . . . . .
Muestras de biopsia y tejidos . . . . . . . . . . . .
Muestras de heces . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Muestras ticas, oculares y dentales . . . . . . .
Muestras para deteccin de hongos . . . . . . . .
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53
4
2.10 Muestras tracto genitourinario . . . . . . . . . . .
2.11 Lista de chequeo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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3. MUESTRAS AMBIENTALES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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3.1 Supercies, soluciones y ambientes . . . . . . . . .

3.2 Muestras en personas. . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Glosario . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bibliografa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Participantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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CONFERENCIA DE CONSENSO PARA LA TOMA DE MUESTRAS

PARA ANLISIS MICROBIOLGICO
Introduccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Acerca del desarrollo de esta conferencia
de consenso . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Informacin para referenciar este documento . . . . .
Declaracin de conictos. . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Resumen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Cul es el volumen, dilucin y nmero
de hemocultivos recomendados en pediatra? . . . . .
Cul es la recomendacin para la preparacin
del rea de la piel adyacente de heridas quirrgicas, traumticas, absceso o biopsias de tejido
para la toma de muestras en el anlisis microbiolgico? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Es til la utilizacin de antispticos
antes de la toma de cultivos en el
tracto respiratorio?. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Cul es el volumen de sangre con mayor rendimiento para la deteccin de bacteriemia en pacientes adultos por medio de los mtodos automatizados de cultivo? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Conclusiones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Participantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Introduccin
El estudio microbiolgico de muestras de tejidos y lquidos corporales permite establecer el diagnstico etiolgico de diferentes
enfermedades infecciosas. Por tal motivo es importante garantizar
la calidad en la obtencin de la muestra y la informacin que debe
acompaarla durante el proceso que comienza en la fase previa al
anlisis, que incluye la preparacin, la obtencin y el transporte,
lo cual concluye en el anlisis de la muestra.
Errores en cualquiera de las fases llevan a prdidas econmicas y
temporales, mala utilizacin de recursos y, lo ms grave, a errores
diagnsticos de gran impacto en el pronstico y la seguridad en la
atencin de los pacientes.
El objetivo general de este Manual para la toma de muestras para
anlisis microbiolgico es unicar criterios en torno a la preparacin de una muestra microbiolgica, describiendo el equipamiento
necesario para su obtencin, los cuidados y las recomendaciones
especiales que se deben seguir en una tcnica adecuada de recoleccin y proceso de transporte, para garantizar la viabilidad del
espcimen.
Para la elaboracin de las recomendaciones iniciales se dispuso
de un documento base (1); las recomendaciones se actualizaron
mediante una bsqueda explcita de la literatura, con el n de
identicar y evaluar la evidencia publicada despus de 2003, para
actualizar las recomendaciones del documento en referencia.
-5-
6
Con el n de recopilar la experiencia local y de identicar aspectos
que requeran revisin y consenso, por medio del Comit distrital
de infecciones intrahospitalarias se solicit por escrito a todas las
instituciones prestadoras de servicios de salud (IPS) el envo de
los manuales, los protocolos o las guas disponibles sobre toma de
muestras para el anlisis microbiolgico en los laboratorios institucionales.
Los documentos remitidos por las instituciones prestadoras de servicios de salud se evaluaron con un instrumento diseado con base
en el instrumento de la colaboracin AGREE (Appraisal of guidelines
research and evaluation http://www.agreecollaboration.org/).
Como reas ms importantes dentro del instrumento diseado para
clasicacin de los manuales, los protocolos o las guas, se denieron el objetivo y el propsito, la participacin de los implicados, la
claridad y la presentacin de las recomendaciones y la aplicabilidad
de las mismas. Adems, se revisaron las referencias bibliogrcas
asociadas a cada documento.
A partir de la evidencia y la experiencia local, los participantes en
la elaboracin de este Manual identicaron temticas en las que
la evidencia disponible o las recomendaciones postuladas fueran
motivo de controversia; se llevaron entonces a una reunin de consenso formal, evento distrital del cual sus principales aspectos se
presentan en el anexo Consenso distrital.
1. Aspectos generales
1.1 Recomendaciones para la toma
de muestras
Para el xito de la atencin del paciente es esencial la comunicacin entre todo el equipo de salud. El mdico solicitar un estudio
microbiolgico con una orientacin clara de acuerdo con la situacin clnica del paciente. El personal de enfermera y laboratorio
microbiolgico requiere conocimientos e informacin precisa para
realizar el procedimiento en condiciones ptimas; y el personal
encargado del transporte debe estar capacitado adecuadamente
para mantener la muestra en trminos de tiempo y caractersticas
hasta su entrega al rea de anlisis. Todo el personal debe ser conciente de la importancia de sus actividades, para contribuir a los
objetivos de calidad.
1.2 Solicitud de estudio

Antes de colectar un espcimen se debe hacer una seleccin cuidadosa para garantizar que el sitio fuente representa el lugar de la
enfermedad activa. Las muestras para cultivo de bacterias se deben
obtener con prontitud, despus del inicio de la enfermedad activa
y preferiblemente antes del inicio de antibiticos.
Los sitios anatmicos que ofrecen ms posibilidad de obtener
muestras contaminadas son: la vejiga desde la uretra y el perin;
la sangre, las heridas superciales y el tejido celular subcutneo
desde la piel; el endometrio desde la vagina; el odo medio desde el
conducto auditivo externo; y el seno nasal desde la nasofaringe.
Recuerde:
Especicar el estudio requerido; por ejemplo, examen directo,
cultivo y antibiograma de lquido intraabdominal, estudios de
aerobios y anaerobios.
Resumir el diagnstico clnico presuntivo del paciente. La
impresin diagnstica es especialmente til cuando se solicita
estudio de hongos y micobacterias.
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8
Informar el uso de antibiticos u otros medicamentos (por
ejemplo, inmunosupresores) que pueden inuir y que el
personal del laboratorio puede utilizar para orientar el
anlisis.
1.3 Precauciones de bioseguridad

La manipulacin inapropiada puede convertirse en una fuente de
riesgo biolgico para las personas que estn en contacto o para
el medio ambiente. Utilizar los elementos de proteccin personal
necesarios para evitar exposicin con riesgo biolgico, de acuerdo
con la fuente de la muestra.
Proteccin ocular: gafas o mascarilla con visera.

Mascarilla.
Guantes.
Bata.
Contenedores para especmenes, a prueba de fugas y de fcil
sellamiento.
Cumplir con las recomendaciones de manejo de elementos cortopunzantes:

No reenfundar agujas.
Disponer y utilizar adecuadamente el contenedor para cortopunzantes.
No transportar jeringas con agujas. Se recomienda transferir el
aspirado a un tubo estril.
En caso de accidente con riesgo biolgico, avisar inmediatamente
segn las recomendaciones del protocolo de accidente de trabajo
con riesgo biolgico institucional.
1.4 Preparacin de elementos

Una vez conocida la solicitud del tipo de examen, se debe preparar el equipo necesario para la obtencin, la conservacin y el
transporte correctos de la muestra. Las propiedades biolgicas de
esta pueden ser alteradas por variables medioambientales como:
tiempo, contenedor, contaminacin externa.
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1.4.1 Escobillones o hisopos
El anlisis de anaerobios requiere que la muestra se obtenga por
biopsia o aspirado con aguja; el uso de escobillones est contraindicado.
Es importante tener en cuenta las caractersticas de los escobillones para la recoleccin de ciertas muestras, lo que asegurar
la viabilidad del espcimen. Hay escobillones de algodn, dacrn
(polister) y alginato de calcio.
Los de mango de madera y algodn en la punta no se recomiendan
para estudio de virus herpes simplex, ya que pueden ser inactivado
por sus componentes txicos; los componentes de cidos grasos
intereren con la sobrevida de algunas especies de Chlamydia.
Estn indicados para la deteccin de Mycoplasma en uretra, vagina
y crvix, y para la deteccin de la mayora de bacterias no exigentes nutricionalmente
Los escobillones de dacrn estn indicados para la deteccin de
virus y facilitan la sobrevida de Streptococcus pyogenes.
Los escobillones de alginato de calcio son tiles para la deteccin de Chlamydia spp. Estn contraindicados para la coleccin de
especmenes con sospecha de virus de desarrollo lipdico y algunas
cepas de Neisseria gonorrhoeae.
El procedimiento de recoleccin de muestras debe ser atraumtico
y lo menos incmodo para el paciente; por tanto, se recomienda el
uso de escobillones exibles y con puntas pequeas para obtener
muestras de nasofaringe y uretra masculina.
1.5 Equipo de asepsia y antisepsia

Las soluciones antispticas recomendadas para la preparacin de la
piel con el n de reducir el conteo de bacterias viables que pueden
contaminar los especmenes son: antispticos que contienen yodo,
incluyendo los yodforos, jabn y solucin, alcohol yodado y gluconato de clorhexidina.
Guantes estriles.
Gasas estriles: no se recomienda el uso de torundas de algodn
ya que son fuente frecuente de contaminacin.
Batas y campos estriles.
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1.6 Preparacin de la piel:

limpieza y antisepsia
Lavarse las manos, usar guantes estriles, aplicar jabn antisptico
en una gasa estril y con movimientos circulares desde el centro a
la periferia, hacer friccin mecnica del sitio que se va a puncionar
o penetrar. Repetir el mismo proceso con una gasa impregnada
en solucin antisptica. Finalizar con una aplicacin de alcohol al
70% o alcohol yodado. Dejar secar espontneamente el antisptico
sobre la piel durante 2 minutos.
1.7 Tcnica de extendido

Con el escobilln estril obtenga la muestra del sitio
especco.
Rote el escobilln sobre s mismo suavemente, a medida que
va cubriendo la supercie de la lmina de vidrio de un extremo
a otro. Evite devolverse sobre la lmina para evitar la ruptura
celular.
Asegrese que el grosor del extendido sea delgado y
homogneo.
1.8 Identicacin de muestras

Toda muestra debe ser etiquetada con los siguientes datos bsicos:
1. Nombre completo y edad del paciente.
2. Nmero de historia clnica: en algunas instituciones corresponde
al documento de identicacin.
3. Habitacin donde est ubicado el paciente o servicio de
localizacin.
4. Tipo de muestra y sitio anatmico. Por ejemplo, secrecin
de herida quirrgica abdominal; biopsia tejido lcera
pie diabtico; orina obtenida a travs de sonda vesical
permanente; sangre obtenida a travs de catter venoso
central, etc.
5. Fecha y hora de recoleccin.
6. Iniciales de la persona que obtiene la muestra.
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1.9 Condiciones generales de almacenamiento

y transporte
El tiempo de transporte de todos los especmenes obtenidos para
estudio debe ser corto (preferiblemente antes de 2 horas) y de
acuerdo con la viabilidad del organismo sospechado y el recipiente
donde se colect.
Las muestras para cultivo de bacterias no deben ser almacenadas
por ms de 24 horas, independientemente del medio y la
temperatura de almacenamiento.
Segn el volumen obtenido: menos de 1 ml 1 cc deben ser
transportados en los primeros 15 a 30 minutos para evitar
evaporacin, desecacin y exposicin a condiciones ambientales.
Si los volmenes son mayores y se almacena en el medio y a
temperatura recomendada puede extenderse hasta 24 horas,
mximo.
Las bacterias que requieren procesamiento inmediato por
su susceptibilidad al medio ambiente son: Shigella spp,
Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, Haemophilus inuenzae,
Streptococcus pneumoniae y anaerobios.
Las muestras para estudio de anaerobios no deben ser refrigeradas
y deben ser colectadas en recipientes que mantengan condiciones
libres de oxgeno.
Muestras de lquido espinal, especmenes de vagina, odo
interno y ojos no deben ser refrigeradas.
Los frascos para recoleccin de lquidos deben tener tapa rosca;
no se recomienda el uso de tapones de gasa o algodn que
pueden absorber el lquido colectado y generar el riesgo de
derramamiento y exposicin biolgica.
1.10 Criterios de aceptabilidad o rechazo

de muestras
Cuando no se mantienen las condiciones de coleccin y transporte
recomendadas se debe obtener una nueva muestra, siempre que
sea posible. Cantidades insucientes, temperaturas inadecuadas,
recipientes rotos o con fugas o deciente calidad de la muestra
(por ejemplo, esputo contaminado con saliva; orina obtenida de
12
bolsa colectora), deben ser tenidos en cuenta para no procesar el
espcimen2.
Muestras sin identicar: los especmenes obtenidos por
medios no invasivos se deben volver a obtener; los obtenidos
por medios invasivos se procesan previa autorizacin del
mdico.
Transporte demorado: denido como el tiempo superior al
recomendado para cada tipo de muestra; slo se procesan
previa autorizacin del mdico: de lo contrario se deben
repetir.
Muestras repetidas: en un mismo da y especmenes diferentes
a tejido o sangre, requieren conrmacin de la orden por parte
del mdico
1.11 Cadena de custodia y pruebas

de laboratorio
Este es un procedimiento de cumplimiento obligatorio para la
toma y el transporte de muestras de anlisis microbiolgico, intra
o interinstitucionalmente, y es opcional para otros anlisis de
laboratorio.
Las consideraciones jurdicas se basan en normas internacionales para el transporte de materiales peligrosos que incluye las
Recomendaciones del comit de expertos de las Naciones Unidas para
el transporte de artculos peligrosos. La Unin Postal Universal (UPU)
incluye estas recomendaciones en sus regulaciones, particularmente
las relacionadas con el embalaje. La Organizacin Internacional de
Aviacin Civil (OIAC) y la Asociacin Internacional de Transporte
Areo (Iata) tambin han incorporado, como lo han hecho otras
organizaciones de transporte, las Recomendaciones de las Naciones
Unidas en sus respectivas regulaciones3. La Organizacin Mundial
de la Salud acta como asesora de estos cuerpos.
1.12 Objetivo general

Garantizar la identidad, la integridad, la seguridad, la continuidad y
el registro de las muestras para estudio microbiolgico:
13
Identidad: que se enve lo que se maniesta.
Integridad: que la muestra se mantenga en condiciones
adecuadas.
Seguridad: cumplir las condiciones y los requisitos para
minimizar el riesgo que puede signicar para todos los
manipuladores o el medio ambiente.
Continuidad: durante todo el proceso.
Registro: de cada paso con su respectivo responsable para
demostrar la trazabilidad del proceso y la condencialidad de
los datos.
1.13 Objetivos especcos
Asegurar las caractersticas originales de las muestras.

Optimizar los recursos disponibles.
Organizar la red de trabajo.
Estandarizar los mtodos de trabajo.
Mejorar la calidad del servicio.
Ofrecer una fuente de orientacin a los funcionarios
involucrados.
Mejorar el desempeo y la conabilidad.
Mejorar la atencin al usuario.
2. Muestras clnicas
Un factor fundamental en la calidad del trabajo que se realiza en
el laboratorio de microbiologa es la coleccin y el transporte del
espcimen por analizar. La calidad del trabajo en el laboratorio de
microbiologa est determinada en gran parte por la naturaleza de
la muestra y su condicin de arribo al laboratorio. Si el laboratorio
no recibe una muestra apropiada no puede dar un informe de utilidad clnica y en muchos casos puede confundir y alejar al clnico
del verdadero agente etiolgico de la enfermedad.
Este manual incluye las recomendaciones y los aspectos relacionados con la tcnica de toma de muestras, los equipos requeridos y
el transporte adecuado de las mismas al laboratorio, y se dirige al
personal encargado de la toma y transporte de muestras clnicas y
ambientales en el mbito institucional.
- 15 -
17
2.1 Muestras de orina

TIPO DE MUESTRA:
1. UROCULTIVO
FUENTE DE LA MUESTRA
A. Orina de miccin espontnea

CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
Realizar higiene de genitales: en mujeres, es necesario lavar el vestbulo vaginal y la entrada de la uretra con agua jabonosa, enjuagar
con abundante agua. Secar y separar los labios e iniciar la miccin.
En el hombre se debe hacer retraccin del prepucio y lavar el meato
urinario con agua jabonosa, enjuagar con abundante agua y secar.
Con el prepucio retrado iniciar la recoleccin de la orina.
En pacientes ambulatorios es ideal recoger la muestra de la primera
miccin del da.
NO est indicada para identicacin de anaerobios. Es una muestra
importante para la deteccin de infecciones causadas por citomegalovirus (CMV), enterovirus, adenovirus (4). Para bsqueda de Mycobacterias se realiza la recoleccin de la misma manera, se realiza
cultivo pero no se realiza baciloscopia por la baja especicidad (5).
TCNICA DE RECOLECCIN
Instruir al paciente para que inicie la miccin, desechar la primera
parte de la orina, introducir el frasco colector, recoger la parte media
de la orina sin detener el ujo urinario (5-10 cc) y terminar de eliminar
en el sanitario o pato. Tapar el frasco sin contaminar la muestra.
EQUIPO
Frasco recolector estril de boca ancha de tapa rosca.
Equipo de higiene: jabn, gasas.
TRANSPORTE
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no
exceder de dos horas y a temperatura ambiente.
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B. Orina obtenida a travs de cateterismo

transuretral
Realizar higiene de genitales con guantes no estriles. Retirar y
desechar los guantes; realizar lavado de manos clnico, usar guantes estriles e insertar el catter urinario aspticamente.
La conabilidad diagnstica es cercana a una sensibilidad de 95%
y especicidad del 99%, constituyendo una buena alternativa en
nios sin control de esfnteres. El riesgo de introducir la infeccin
durante el cateterismo o de otras complicaciones es bajo si el personal entrenado emplea la tcnica correcta (2).
Eliminar la primera porcin de orina obtenida, colectar la siguiente
porcin de orina (5-10 cc) en el frasco estril, retirar la sonda de
nlaton y tapar el frasco.
EQUIPO
Sonda de Nelaton (No. 14 - 16 adultos, No. 6 -8 en nios).
Guantes estriles y no estriles.
TRANSPORTE
CC. Orina obtenida a travs de sonda vesical

permanente
Pinzar la sonda durante 30 a 60 minutos antes de obtener la muestr
muestra.
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Realizar desinfeccin del puerto en Y de la sonda de foley con
alcohol al 70%.
Vericar el retiro de la pinza de la sonda despus de obtener la
muestra.
No utilizar orina que ha estado depositada por varias horas en
bolsas o frascos colectores.
Los pacientes con catter vesical por largo tiempo, siempre
tienen microorganismos en la vejiga. No se recomienda
recolectar orina de estos pacientes, a menos que se sospeche
que el foco infeccioso es urinario.
Puncionar la sonda con jeringa estril con aguja de calibre
pequeo, aspirar 5 a 10 cc de orina, retirar jeringa.
Envasar en el frasco estril, manteniendo la tcnica asptica.
EQUIPO

Guantes no estriles, gasas estriles, alcohol al 70%.
Jeringa estril.
Guantes estriles.
TRANSPORTE

D. Orina obtenida en pacientes peditricos

Pacientes con control de esfnter: realizar higiene de genitales
con guantes no estriles. Secar adecuadamente el rea genital.
El paciente elimina en un recipiente limpio, de este recipiente
se reenvasa en un frasco limpio de tapa rosca.
Pacientes sin control de esfnter: realizar higiene de genitales
con guantes no estriles. Secar adecuadamente el rea genital.
Si el nio no tiene control de esfnteres y no se puede realizar
puncin suprapbica debe tomarse la muestra por sonda vesi-
20
cal. Otra mtodo es colocar bolsa recolectora, si la miccin no
se da en 20 minutos se deber repetir el aseo y colocar nueva
bolsa (6). La bolsa recolectora es el mtodo menos traumtico de obtener la muestra de orina, ofrece ms alto riesgo
de contaminacin comparado con la puncin suprapbica y el
cateterismo transuretral, la interpretacin cambia a ms de
10.000 UFC significativas para diagnstico de IVU y no cualquier
recuento como en puncin suprapbica o ms de 100.000 UFC
como por miccin espontnea. Un solo cultivo de orina obtenido con bolsa tiene una probabilidad alta de ser falso positivo.
Su sensibilidad es del 100%: un resultado negativo descarta la
infeccin urinaria, lo que la hace til en el seguimiento del
tratamiento (7, 8, 9).
Colocar bolsa plstica adherente, vericando ausencia de fugas.
Estar atento cuando el nio elimine, para retirar pronto la bolsa y
evitar derramamiento o contaminacin de la muestra. Son sucientes 5 - 10 cc de orina.
EQUIPO
Bolsa plstica recolectora estril.
TRANSPORTE
E. Orina obtenida a travs de sonda

de urostoma y nefrostoma
Mantener tcnica asptica para la manipulacin de este tipo de
catteres. No se recomienda puncionar ni colapsar el trayecto del
catter.
21
Realizar limpieza del trayecto del sitio de unin entre el catter,
la llave de tres vas y el sistema colector.
Insertar jeringa a la llave de tres vas y extraer 5-10 cc de
orina.
Envasar en el frasco colector estril. Volver a comunicar el
trayecto entre el catter y el sistema colector.
EQUIPO
Guantes estriles.
Gasas estriles.
Jeringa estril.
Frasco estril de boca ancha.
TRANSPORTE

FF. Orina obtenida por puncin suprapbica

Este procedimiento debe realizarlo personal mdico entrenado,
previa preparacin de la piel con tcnica asptica.
En los pacientes peditricos es ideal para el cultivo, en especial
cuando se necesitan muestras conables y rpidas antes de
iniciar terapia inmediata en nios muy enfermos.
Las complicaciones si se sigue una tcnica adecuada son muy
raras.
En lactantes con micciones frecuentes la puncin suprapbica
puede fallar si al realizarla hay escasa orina en la vejiga; en
estos casos se recomienda tomar la muestra por cateterismo
vesical transuretral (2, 10).
22
Puncionar con jeringa estril sobre la lnea media en tercio
medio entre el ombligo y la snsis pbica.
Aspirar 5 a 10 cc de orina.
Envasar en frasco estril o llevar directamente en la jeringa.
EQUIPO

Equipo de preparacin de la piel.
Jeringa estril.
Guantes estriles.
TRANSPORTE
Nota:
La solicitud de urocultivo debe estar basada en el anlisis
e interpretacin de un parcial de orina previo patolgico y
correlacionado con la clnica.
Con el n de aumentar la probabilidad de recuperacin de
microrganismos en pacientes con infeccin urinaria complicada o en tratamiento con antibiticos, se recomienda
inocular la muestra en una sola botella de hemocultivo (relacin 1:10 c.c), obtenida a travs de cateterismo transuretral.
No se recomienda cultivar puntas de catteres urinarios,
porque el crecimiento representa ora uretral distal.
No se recomienda solicitar baciloscopia en muestra de orina,
ya que su positividad es normal en el tracto urinario.
El cultivo para mycobacterias en orina se debe hacer en el
volumen total de la primera miccin de la maana.
23
2.2 Muestras de sangre

TIPO DE MUESTRA:
1. HEMOCULTIVOS
A. Sangre obtenida a travs

de puncin perifrica
Realizar lavado de manos quirrgico.
Mantener tcnica asptica durante todo el procedimiento.
Utilizar campo estril para evitar tener contacto con reas circundantes que ofrezca el riesgo de contaminacin.
Colocar mascarilla al paciente.
Realizar antisepsia de la zona a puncionar; no palpe la vena sin
guantes estriles una vez preparada la piel.
Utilizar otros guantes estriles para cada puncin.
No cambiar la aguja para envasar la sangre en los frascos
colectores.
En pacientes que estn recibiendo tratamiento antibitico,
recolectar las muestras en botellas con resina.
Se debe mantener una dilucin en las botellas de hemocultivos
de 1:5 para pacientes peditricos y 1:10 para pacientes adultos
de acuerdo con la recomendacin del fabricante.
Para buscar micobacterias es necesario tomar la muestra y
colocarla en heparina; se recomienda tomar muestra durante
dos das.
Colocar la muestra en botella con rtulo especco para cultivos
de hongos. No se recomienda obtener muestras mediante puncin
arterial porque la tasa de recuperacin de microorganismos es
baja (2, 11).
Limpiar el tapn del frasco colector con alcohol al 70% antes de
puncionar para envasar la muestra.
Obtener 8 a 10 cc de sangre para cada frasco en pacientes adultos.
24
Obtener cada muestra de sitios anatmicos diferentes y con un
intervalo de 10 a 15 minutos.
Para la deteccin de microorganismos en sangre en sospecha
de bacteriemia se recomienda recolectar entre 20 y 40 ml
de sangre (2 a 4 botellas de hemocultivos). En sospecha de
endocarditis pueden ser sucientes 20 ml de sangre (2 botellas
de hemocultivos).
En sospecha de bacteriemia a mayor volumen recolectado,
mayor la probabilidad de recuperacin microbiolgica (12).
En pacientes peditricos el volumen de los hemocultivos se
ajusta de acuerdo a la edad:
Prematuros extremos (menos de 1000 gr) 0,5 ml.
Neonatos hasta 1 ml.
Lactantes y nios hasta 6 aos 2-3 ml.
Mayores de 6 aos 5-10 ml.
El nmero de botellas a tomar depende de la situacin clnica
en pacientes peditricos:
En prematuros extremos (menos de 1.000 gr) 2 botellas.
Sospecha de bacteriemia: 2 botellas.
Sospecha de endocarditis 4-6 botellas (a tomar entre 6 y 24
horas) (12, 13).
EQUIPO
Bata y campos estriles.
Gorro y mascarilla con proteccin ocular.
Guantes estriles.
Equipo de asepsia (antisptico, gasas y guantes estriles).
Frascos para hemocultivos. Frascos para hemocultivos con rtulo
especco para hongos.
Jeringas estriles.
TRANSPORTE
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin a
temperatura ambiente. De 15 das a dos meses hongos miceliales.
Para levaduras de acuerdo con el tiempo de positividad del microorganismo puede crecer en las primeras 24 horas.
25
B. Sangre obtenida a travs

de catter venoso central
Realizar lavado de manos quirrgico.
Mantener tcnica asptica durante todo el procedimiento.
Utilizar campo estril para evitar tener contacto con reas
circundantes que ofrezca el riesgo de contaminacin.
Colocar mascarilla al paciente.
En pacientes que estn recibiendo tratamiento antibitico,
recolectar las muestras en botellas con resina.
Realizar desinfeccin del trayecto y sitio de conexin de equipos
de infusin al catter.
Utilizar la va proximal para la obtencin de la muestra en
catteres multilmenes (14).
No se recomienda tomar muestras a travs de catteres arteriales,
porque aumenta la posibilidad de contaminacin (2).
Limpiar el tapn del frasco colector con alcohol al 70% antes de
puncionar para envasar la muestra.
Extraer 10 c.c de sangre para limpiar la va y desecharlos.
Con otra jeringa obtenga 10 c.c ms de sangre y djelos a un
lado por un momento.
Utilice otra jeringa para extraer 10 c.c de sangre y envasar en el
frasco de hemocultivo.
Retornar los 10 cc de sangre que haba guardado temporalmente,
previa vericacin de ausencia de cogulos.
Obtener 8 a 10 cc de sangre para cada frasco en pacientes
adultos.
EQUIPO

Guantes estriles.
26
Frascos para hemocultivos.
Jeringas estriles.
TRANSPORTE
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin a temperatura ambiente.
C. Pacientes con sospecha de infeccin

de torrente sanguneo relacionada
con catter venoso central
En bacteriemia asociada a catter en pacientes adultos y peditricos se debe tomar una botella de hemocultivo de sangre perifrica
y uno de sangre obtenida a travs del catter (15, 16).
Obtenga 10 cc de sangre perifrica y 10 cc de sangre del catter.
EQUIPO

Guantes estriles.
Frascos para hemocultivos.
Jeringas estriles.
TRANSPORTE
27
TIPO DE MUESTRA:
2. PUNTA DE CATTER
A. Pacientes con sospecha de infeccin

de torrente sanguneo relacionada
con catter venoso central
Los cultivos de puntas de catter se recomiendan cuando se tienen
hemocultivos y existe una alta sospecha de infeccin del torrente
sanguneo relacionada con el catter.
Prepare la piel del rea circundante del sitio de insercin del
catter.
Cambie de guantes y coloque campo estril.
Retire el catter y corte de 4 a 5 c.m del trayecto distal del
catter con pinza estril, y colquelo inmediatamente en el
tubo estril.
EQUIPO
Gorro, mascarilla, bata.

Campos y guantes estriles.
Equipo de preparacin de piel.
Equipo de puntos o bistur.
Tubo estril.
TRANSPORTE
28
TIPO DE MUESTRA:
3. SECRECIN SITIO DE INSERCIN

DEL CATTER
A. Sitio de insercin del catter vascular

La presencia de signos locales en ausencia de manifestaciones sistmicas pueder estar asociada con reaccin a cuerpo extrao.
Prepare la piel del rea circundante del sitio de insercin del
catter.
Con escobillones estriles tome una muestra de la secrecin
y coloque en tubo estril con tapa; y con el otro escobilln
realice un extendido en lmina de vidrio.
EQUIPO
Guantes estriles.
Tubo estril con tapa rosca.
Lmina de vidrio.
Escobillones estriles.
TRANSPORTE
29
2.3 Muestras del tracto respiratorio

TIPO DE MUESTRA:
1. NASAL
Secrecin de fosa nasal

Evitar las gotas y los baos nasales antes de tomar la muestra
(6, 17, 18, 19).
No se recomienda enviar cultivos para anaerobios.
El frotis y cultivo nasal no es el cultivo para diagnstico de sinusitis,
otitis media o infecciones del tracto respiratorio inferior.
Slo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores
para la deteccin de portadores de Staphylococcus aureus o en
lesiones nasales. Para bsqueda de hongos se recomienda la
misma tcnica.
Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz.
Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir
el escobilln 1 cm en el interior de las fosas nasales, rotarlo
y luego retirarlo e identicar de qu fosa nasal se tom la
muestra.
Tomar dos escobillones, hacer con uno extendido en lmina de
vidrio; colocar el otro en el medio de transporte.
EQUIPO
Guantes no estriles.
Lmina de vidrio y tubo con medio de transporte.
TRANSPORTE
30
TIPO DE MUESTRA:
2. NASOFARINGE
Secrecin en rea nasofarngea

La persona que obtiene la muestra debe usar barreras de
proteccin (mascarilla, proteccin ocular).
No hacer grgaras ni limpieza con ninguna solucin bucofarngea
(6, 17, 18, 19).
Tomar la muestra preferiblemente en ayunas. No se recomienda
el cultivo rutinario de nasofaringe.
Introducir el escobilln exible hasta la nasofaringe posterior
evitando trauma.
Rotar el escobilln por 10 a 15 segundos para permitir la
impregnacin del hisopo.
Retirar lentamente y tomar dos escobillones, hacer con uno
extendido en lmina de vidrio y colocar el otro en el medio de
transporte.
EQUIPO
Barreras de proteccin (mascarilla y proteccin ocular).

Escobillones estriles exibles con alginato de calcio.
Tubo estril con medio de cultivo y lmina de vidrio.
TRANSPORTE

31
TIPO DE MUESTRA:
3. ASPIRADO NASOFARINGE
Secrecin de rea nasofarngea

La persona que obtiene la muestra debe usar barreras de
proteccin (mascarilla, proteccin ocular).
(6, 17, 18, 19).
Tomar la muestra preferiblemente en ayunas. No se recomienda
el cultivo rutinario.
Si se sospecha de Bordetella pertussis esta muestra deber ser
sembrada inmediatamente sea obtenida, para lo cual se dejarn
caer aproximadamente 5 gotas del aspirado nasofarngeo sobre
la supercie del agar Regan lowe. As mismo, se tomar aspirado
nasofarngeo en un tubo estril para inmunoorescencia directa.
Es colectado mediante el paso de una sonda nelaton de un
calibre apropiado dentro de la nasofaringe.
Aspirar luego el material con una jeringa estril u otro mecanismo
de succin y colocarlo en tubo estril seco.
En caso de no poder recolectar la muestra en la jeringa, enve el
extremo distal de la sonda con el material aspirado en el tubo
estril seco.
En virologa los aspirados nasofarngeos son usualmente
colocados en medio de transporte para virus.
EQUIPO
Barreras de proteccin (mascarilla y proteccin ocular).

Tubo estril seco o medio de transporte para virus.
Sonda nelaton de tamao ideal.
Jeringa estril.
32
TRANSPORTE
TIPO DE MUESTRA:
4. FARINGE
Secrecin de la faringe
No contaminar el escobilln con secrecin de cavidad oral o
dientes.
El hisopado de garganta est contraindicado en pacientes con
diagnstico de epiglotitis.
(6, 17, 18, 19).
Con un bajalenguas, presionar la lengua hacia abajo para
visualizar los pilares de la faringe y del rea tonsilar para
localizar el rea de inamacin y exudado.
Rotar el hisopo de alginato de calcio sobre el rea.
Tomar dos escobillones, hacer con uno extendido en lmina de
vidrio y colocar el otro en el medio de transporte.
EQUIPO
Guantes.
Escobillones estriles con alginato de calcio.
TRANSPORTE
33
TIPO DE MUESTRA:
5. ESPUTO POR EXPECTORACIN ESPONTNEA

Expectoracin secrecin respiratoria

El esputo no es la muestra ideal para el diagnstico de neumona;
se recomienda preferiblemente el lavado broncoalveolar.
Recolectar la muestra en la maana, en ayunas preferiblemente.
Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado
de la lengua slo con agua para remover el exceso de ora oral
y retirar prtesis dental en pacientes de edad.
Para pacientes pediatricos incapaces de producir un esputo,
la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a travs de
succin.
Para el estudio de mycobacterias se deben colectar tres muestras
seriadas en das consecutivos para pacientes hospitalizados.
En pacientes ambulatorios sintomticos respiratorios con
sospecha de tuberculosis, la primera muestra se toma el da de
la consulta mdica y las otras dos al da siguiente, cumpliendo
las recomendaciones descritas para paciente hospitalizado.
Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con
el n de obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio
inferior, libre de saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe
expectorar directamente en un recipiente estril de boca ancha de
tapa rosca.
EQUIPO
Frasco estril de boca ancha, de 5 cm de dimetro, de tapa
rosca, con capacidad de 30 a 50 ml, de material fcil de
rotular (5).
34
TRANSPORTE
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente. En caso de no ser inmediatamente procesada la muestra, debe ser conservada a 4C (5).
TIPO DE MUESTRA:
6. ESPUTO INDUCIDO
Expectoracin secrecin respiratoria

Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado
de lengua solo con agua.
Realizar nebulizacin con solucin salina normal.
Para pacientes peditricos incapaces de producir un esputo,
la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a travs de
succin.
Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con
el n de obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio
inferior, libre de saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe
expectorar directamente en un recipiente estril de boca ancha de
tapa rosca.
EQUIPO
Frasco estril de boca ancha de tapa rosca de 5 cm de dimetro,
con una capacidad de 30 a 50 ml y material fcil de rotular (5).
Nebulizador.
Solucin salina normal.
TRANSPORTE
35
TIPO DE MUESTRA:
7. SECRECIN TRAQUEAL
Secrecin obtenida por aspirado traqueal.

Realice el procedimiento con tcnica asptica.
De acuerdo con las caractersticas de las secreciones, irrigar con
solucin salina normal previo a realizar el procedimiento.
Introducir la sonda sin hacer succin a travs del tubo endotraqueal
o cnula de traquestoma, hasta ubicarla en el espacio traqueal.
Ocluya el oricio distal de la sonda y comience a succionar, retire
la sonda lentamente mientras la va limpiando externamente con
una gasa estril.
Tenga precuacin de suspender la succin, retirando la oclusin
de la sonda para que se conserve la muestra obtenida en el
trayecto de la misma.
Coloque la muestra obtenida en frasco estril cortando el segmento
distal de la sonda, si no es posible el depsito de la muestra sola,
para lo cual retira la presin en el oricio de la sonda lo que
permitar la expulsin de la muestra en el recipiente.
EQUIPO
Guantes estriles.
Mascarilla con proteccin ocular.
Sonda de nelaton.
Hoja de bistur.
Solucin salina normal.
Gasas estriles.
Frasco de boca ancha estril o trampa recolectora.
TRANSPORTE
36
TIPO DE MUESTRA:
8. LAVADO O CEPILLADO BRONCOALVEOLAR
Fibrobroncoscopia para lavado broncoalveolar

Fibrobroncoscopia para cepillado broncoalveolar
El paciente debe estar en ayunas para realizar el procedimiento,
ya que se requiere de sedacin.
Tener en cuenta que los anestsicos locales pueden inhibir el
crecimiento bacteriano.
Para el cultivo de hongos y mycobacterias se realiza la misma
tcnica.
A traves de tcnica de brobroncoscopia.
Conecte una trampa de Lukens al brobroncoscopio.
Irrigar con 10 cc de solucin salina no bacteriosttica (Lactato
de Ringer) a travs del canal abierto.
Succione para obtener la muestra en dos frascos estriles de
boca ancha; de uno de estos se realiza extendido en lmina de
vidrio.
EQUIPO
Equipos de brobroncoscopia.
Sistema de succin.
Recipiente de boca ancha estril de tapa rosca.
Lmina de vidrio.
TRANSPORTE

37
2.4 Muestras lquidos corporales

TIPO DE MUESTRA:
1. LQUIDO PLEURAL, PERICRDICO,

PERITONEAL, SINOVIAL O ARTICULAR,
CULDOCENTESIS, AMNITICO
Lquidos o uidos de espacios estriles

La recoleccin de muestras de este origen est reservada
estrictamente al mdico especialista.
No se recomienda usar escobillones, la muestra debe ser
obtenida por aspirado o drenaje quirrgico.
Los lquidos susceptibles de formar cogulo deben ser colectados
en tubos con anticoagulante SPS (polisulfonato de sodio) para
pruebas especiales, excepto si se est hacindo busqueda de
Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Peptostreptococcus
y Gardnerella vaginalis. En este caso se puede usar anticoagulante
tipo heparina, citrato de sodio y EDTA (cido etilendiaminotetrac
tico).
Con el n de aumentar la probabilidad de recuperacin de
microorganismos, se recomienda inocular la muestra en una
sola botella de hemocultivo (relacin 1:10 cc).
Lquido amnitico y uido de culdocentesis deben ser
transportados en medio anaerobio. En el liquido amnitico los
virus que causan infeccin en el tero son CMV, Parvovirus B-19
y VIH, menos frecuentemente observados virus herpes simplex
(HSV) y virus Zoster (VZV). Para bsqueda de hongos se utiliza la
misma tcnica.
Realice preparacin de la piel con tcnica asptica.
Puncionar con jeringa y aguja estril, y recoger mnimo 50 ml
de lquido repartido en los tubos necesarios:
38
Recoleccin en frasco aparte para citologa, bloque celular.
Recolectar en frasco con anticoagulante para citoqumico.
Recolectar en frasco con citrato de sodio para ADA, si se considera
necesario.
Recolectar en frasco estril con 25 ml para cultivo de bacterias,
hongos y mycobacterias.
Si se requiere cultivo para anaerobios se recolectar en la
jeringa manteniendo las condiciones ideales para el crecimiento
de estos grmenes, evitando la exposicin de la muestra al
medio ambiente. No olvide solicitar coloraciones Gram y ZN
con cultivos o, en caso necesario, coloraciones y cultivos para
hongos. Si se requiere PCR (reaccin en cadena de polimerasa),
conservar a la menor temperatura posible mientras se envan al
sitio de referencia, por debajo de -10C.
EQUIPO
Equipo de preparacin de piel y anestesia local.

Jeringa y aguja estril.
Tubo estril seco para cultivos.
Tubo estril con citrato de sodio para ADA.
Tubo estril con anticoagulante para citoqumico y pruebas
especiales.
Frascos estriles para citologa y cultivo.
Frasco de hemocultivo.
Frasco de hemocultivo para hongos.
TRANSPORTE
Inmediatamente despus de la recoleccin a temperatura ambiente. Para cultivo de mycobacterias el tubo debe ser protegido de la
luz directa. Si se requiere PCR (reaccin en cadena de polimerasa)
se debe transportar en recipiente con hielo seco.
39
TIPO DE MUESTRA:
2. LQUIDO CEFALORRAQUDEO
Puncin lumbar. A travs de catter de ventriculostoma intraoperatoriamente o a travs de

cmara de vlvula de derivacin ventriculoperitoneal
Procedimiento realizado por personal mdico.
Utilice tcnica asptica.
En el caso de recolectar la muestra por puncin lumbar,
recomendar al paciente luego del procedimiento permanecer
acostado en posicin horizontal de 4 a 6 horas.
Los virus ms comnmente aislados son los enterovirus.
Realice preparacin de piel.
Obtenga de 1 a 2 ml de muestra en mnimo 3 tubos estriles
secos con tapa rosca o tapn de caucho para estudio citolgico,
citoqumico y microbiolgico. Esta muestra sirve para la
bsqueda de micobacteriosis extrapulmonar.
Si se requiere PCR (reaccin en cadena de polimerasa) para
enterovirus, herpes simple o tuberculosis, recolectar un tubo
adicional de 1ml y conservar a la menor temperatura posible
(debajo de - 10C).
EQUIPO
Equipo de puncin lumbar desechable.

Tubos estriles secos con tapa rosca o tapn de caucho.
Apsito para cubrir el sitio de puncin.
40
TRANSPORTE
Inmediatamente luego de la recoleccin a temperatura ambiente.
Si se requiere PCR (reaccin en cadena de polimerasa) se debe enviar el tubo en recipiente con hielo seco.
TIPO DE MUESTRA:
3. ASPIRADO GSTRICO
Jugo gstrico
La sonda se debe jar y marcar al nivel que se introdujo, con el n
de evaluar si se moviliz durante la noche.
Dejar cerrada durante la noche.
Recolectar la muestra de la maana, luego de 6 horas de ayuno.
Tomar la muestra con el paciente en reposo.
Informar al laboratorio clnico el volumen probable que se va a
obtener, ya que la proporcin recomendada de fosfato trisdico es
2 cc por cada 10 cc de jugo gstrico obtenido.
Proteger de la luz el frasco donde se recolecta la muestra durante
su transporte.
En una muestra utilizada para la bsqueda de mycobacterias
en nios y adultos que al no expectorar degluten sus esputos,
para aumentar la sensibilidad de diagnstico la muestra debe ser
recolectada de manera seriada durante tres das consecutivos.
Pasar una sonda nasogstrica la noche anterior y explicar la
nalidad de la misma.
En la maana y con el paciente en reposo, aspirar de 5 a 10 cc de
contenido gstrico con una jeringa estril.
Depositar la muestra en recipiente estril con fosfato trisdico
al 10%.
Posteriormente instilar de 25 a 50 cc de agua destilada y aspirar 20
cc de contenido gastrico.
Agregar al recipiente estril con la muestra inicial y tapar
hermticamente.
41
EQUIPO
Jeringa de 10 cc.
Recipiente de boca ancha estril de tapa rosca con fosfato
trisdico al 10%, con capacidad para 50 ml.
Sonda nasogstrica.
Agua destilada.
TRANSPORTE
Inmediatamente luego de la recoleccin a temperatura ambiente,
debe protegerse de la luz.
43
2.5 Muestras de piel y mucosas

TIPO DE MUESTRA:
ABSCESOS
A. Heridas abiertas
Limpiar la herida del borde hacia afuera con gasa impregnada con
solucin salina normal y alcohol isoproplico al 70%, con el n
de evitar la contaminacin de la muestra con ora colonizante
que no est realmente implicada en el proceso infeccioso.
Lavar la parte interna de la herida con solucin salina abundante,
sin presin. No usar antispticos.
Aspire si es posible o pase un escobilln dentro de la herida.
Tome la muestra con dos escobillones.
Si emplea medio de transporte coloque uno en dicho medio y
con el otro haga un extendido en lmina de vidrio.
Si no tiene medio de transporte coloque los escobillones en un
tubo estril con tapa.
EQUIPO
Guantes estriles.
Solucin salina normal o alcohol al 70%.
Gasa estril.
Medio transporte o frasco estril con tapa rosca o tapn de
caucho.
Lmina de vidrio.
TRANSPORTE
44
B. Heridas cerradas
Herida cerrada con rgano adyacente estril: lavar con jabn y
soluciones antispticas a base de yodopovidona o clorhexidina.
Posteriormente aplicar alcohol isoproplico al 70%.
Herida cerrada con rgano adyacente no estril: limpiar con
solucin salina normal y luego alcohol isoproplico al 70%.
Cuando se toman muestras para anaerobios por aspiracin no se
recomienda colocar tapn de caucho en la aguja, por riesgo de
accidente biolgico. Utilice el capuchn de la aguja.
Puncionar el absceso con aguja y jeringa estriles.
Colocar el material obtenido en tubo estril con tapa o dejar el
material en la jeringa, mantener las condiciones ideales para el
crecimiento de grmenes anaerobios evitando la exposicin de
la muestra al medio ambiente.
Cuando no se realiza puncin-aspiracin, tomar la muestra con
los escobillones del medio de cultivo para anaerobios.
EQUIPO
Guantes estriles.
Solucin salina normal o alcohol al 70%.
Gasa estril.
Jeriga con agujas estriles.
Medio de cultivo para anaerobios.
TRANSPORTE
En caso de enviar la muestra en jeringa con aguja protegida por
el capuchn, el transporte debe ser inmediato para garantizar el
crecimiento de grmenes anaerobios. Si se enva la muestra en tubo
estril con tapa, se recomienda hacerlo en los primeros 15 minutos
de la recoleccin a temperatura ambiente.
Nota:
En este tipo de muestras es posible realizar aislamientos
para hongos; se debe tener en cuenta el tiempo de incubacin para los hongos miceliales.
45
2.6 Muestras de biopsia y tejidos

TIPO DE MUESTRA:
CULTIVO BIOPSIA TEJIDO

A. Segmento de tejido de cualquier

sitio anatmico
Realizar preparacin antisptica del rea de donde se va a tomar
la biopsia.
Conservar la esterilidad de la muestra hasta su recepcin en el
laboratorio clnico o de patologa.
Colocar la muestra de tejido en solucin salina no bacteriosttica
(lactato de Ringer).
No agregar formol a la muestra que se va a enviar al laboratorio
clnico.
Se recomienda tomar cultivo de biopsia tejido para lesiones
relacionadas con lceras de presin, lceras varicosas,
quemaduras y pie diabtico, realizar limpieza previa con solucin
salina estril.
Si el cultivo de biopsia tejido no es posible de realizar, aspire
material inamatorio de la base de la lesin.
No se recomienda hacer bsqueda de anaerobios en este tipo
de lesiones.
Este procedimiento debe ser realizado por el mdico.
Seccionar la muestra en fresco para enviar a patologa y al
laboratorio clnico.
EQUIPO
Equipo para preparacin de piel.
Frasco estril para la muestra microbiolgica.
46
Frasco limpio para la muestra patolgica.
Solucin salina no bacteriosttica (lactato de Ringer).
TRANSPORTE
Inmediatamente despus de la recoleccin a temperatura ambiente.
B. Aspirado de mdula sea

Preparacion de la piel con tcnica asptica.
Procedimiento realizado por mdico bajo anestesia local.
Para bsqueda de hongos se sigue la misma tcnica.
Aspirar y colectar de la cresta iliaca posterior superior.
EQUIPO
Equipo para preparacin de piel.
2 botellas para hemocultivo (mycobacterias, aerobios y hongos).
TRANSPORTE
47
2.7 Muestras de heces

TIPO DE MUESTRA:
1. COPROCULTIVO
Materia fecal
No cultive muestras de consistencia dura.
Para estudio de rotavirus y Clostridium difcile, enviar muestra
diarreica y no utilizar escobilln.
En el caso de pacientes peditricos, si no es posible recoger
muestra de materia fecal se puede tomar la muestra a travs de
frotis rectal.
No se recomienda realizar coprocultivo de rutina para pacientes
con estancia hospitalaria mayor de 3 das, a no ser que el
diagnstico de ingreso haya sido gastroenteritis.
Recolectar en lo posible ms de 2 cc o gramos de materia fecal.
EQUIPO
Guantes.
Frasco plstico limpio, de boca ancha.
TRANSPORTE
Se recomienda durante la primera hora luego de la recoleccin a
temperatura ambiente. Para estudio de mycobacterias debe enviarse inmediatamente al laboratorio, protegida de la luz directa.
48
Hisopado rectal
Recomendado en pacientes peditricos y adultos incapaces de
recolectar muestra de materia fecal.
Recomendado para deteccin de Neisseria gonorrhoeae, Shigella,
Campylobacter, Herpes simplex y portadores de Streptococcus del
grupo B y otros Streptococcus Beta-hemolytico.
La muestra fecal debe ser visible en el escobilln para la
deteccin de los patgenos.
En virologa la muestra es til para la deteccin de virus
entricos como: adenovirus, calicivirus, astrovirus y rotavirus.
Para bsqueda de enterovirus polioviurs o no poliovirus en
pacientes con sndrome Guillain Barr.
Cuidadosamente introducir el escobilln una pulgada en el
esfnter anal.
Rotar suavemente el escobilln para obtener la muestra.
EQUIPO
Escobillones.
Tubo estril con tapa rosca o tapn de caucho.
TRANSPORTE
temperatura ambiente. Estudios virales deben enviarse al Instituto
Nacional de Salud en medio de transporte viral.
49
2.8 Muestras ticas, oculares y dentales

TIPO DE MUESTRA:
1. SECRECIN OCULAR
Secrecin conjuntival
Raspado corneal
Aspirado de uido vtreo
No usar gotas oftlmicas 18 a 24 horas antes de la muestra.

Ausencia de cualquier cosmtico.
No tomar antibiticos 24 a 48 horas antes.
No usar anestsicos que posean actividad antimicrobiana.
En el caso de obtencin de la muestra intraoperatoriamente,
el mdico especicar el sitio de donde se tom la muestra:
corneal, del humor acuoso, etc.
Si sospecha endoftalmitis enve muestra de aspirado intraocular.
Si sospecha queratitis tome dos muestras con escobillones
impregnados con alginato de calcio.
Los virus ms comnmente aislados son HSV, adenovirus, CMV
y VZV.
Secrecin conjuntival: tome una muestra por cada ojo con
escobillones separados, previamente humedecidos con solucin
salina. Rote el escobilln en cada conjuntiva, coloque un
escobilln en el medio de transporte o en tubo estril seco con
tapa rosca o tapn de caucho y con el otro realice extendido en
lmina de vidrio.
Raspado corneal: esta muestra es recolectada por el especialista.
Use esptula estril y raspe las lesiones o lceras e inocule la
50
muestra en el medio de transporte o en tubo estril seco con
tapa rosca o tapn de caucho; realice extendido en lmina de
vidrio.
Aspirado de uido vtreo: utilice tcnica asptica para realizar
puncin por aspiracin.
EQUIPO
Guantes estriles
Escobillones estriles, jeringa y aguja estriles
Medio de transporte (agar sangre o chocolate) y lmina de
vidrio.
TRANSPORTE
Inmediatamente luego de la recoleccin a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
2. SECRECIN DEL ODO

Paciente con secrecin proveniente del odo
No usar gotas ticas de 18 a 24 horas antes de la toma de la
muestra.
No tomar o aplicar antibiticos de 24 a 48 horas antes.
Otitis supurativa requiere conrmacin con cultivo de la
secrecin.
Pacientes con otitis supurativa con probable ruptura de tmpano
no practicar lavado.
Si la sospecha de infeccin es de otitis media la muestra deber
ser tomada por un especialista a travs de timpanocentesis. No
se recomienda hacer de rutina, sino en aquellos casos crnicos
que no responden a la terapia instaurada.
51
Este procedimiento lo debe realizar un mdico especialista.
No se recomienda toma de muestras con escobilln rotado en
otitis media o externas supurativas.
De ser posible la muestra debe ser tomada con ayuda de
microscopio por otorrinolaringlogo.
Si la membrana timpnica est intacta se har con puncin
timpnica en casos de otalgia intensa, paciente inmunosuprimido,
neonato.
La toma por escobilln cuando hay otorrea est sujeta a
mayor contaminacin externa, no ayuda mucho y por el
contrario, confunde a quien no sabe cmo interpretar los
resultados.
EQUIPO
Solucin antisptica.
Medio de transporte y lmina de vidrio.
TRANSPORTE
exceder de dos horas y a tempertatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
3. CULTIVO DENTAL
Gingival, periodontal, periapical,

estomatitis de Vicent
Limpie cuidadosamente el margen gingival y la supercie dental
supragingival, para remover la saliva, los detritos y la placa.
Usando una esptula periodontal remueva cuidadosamente
material de la lesin subgingival y transralo al medio de
transporte anaerobio.
Realice extendido en lmina de vidrio para coloracin de Gram.
EQUIPO
Mascarilla, proteccin ocular.
Esptula periodontal.
Medio de transporte anaerobio y lmina de vidrio.
TRANSPORTE
53
2.9 Muestras para deteccin de hongos

MUESTRAS MICTICAS
TIPO DE MUESTRA:
1. LESIONES DESCAMATIVAS
Capas superciales de la piel

Cabello
Cuero cabelludo
No aplicar ningn tratamiento fngico oral o tpico por lo
menos 3 das antes.
No aplicar cremas, ungentos o polvos en el sitio de la toma de
la muestra.
La toma de la muestra debe ser realizada por personal experto.
Limpiar la zona afectada con alcohol al 70%; dejar secar.
En lesiones secas raspar los bordes de la lesin y de varios sitios
con el bistur estril; depostelos directamente en la caja de petri.
En lesiones hmedas obtenga la muestra con un escobilln de
dacrn y colquelo en un tubo estril.
Si son pelos, tome con pinzas estriles por lo menos 15 de
ellos; depostelos en caja de petri.
Las muestras recolectadas servirn para cultivo y realizar la
prueba de KOH.
EQUIPO
Guantes estriles, mascarilla.

Gasas estriles.
Alcohol al 70%.
Escobillones de dacrn.
Bistur estril.
54
Pinzas estriles.
Tubo estril.
Cajas de petri.
TRANSPORTE
Inmediato a temperatura ambiente
TIPO DE MUESTRA:
2. LQUIDOS Y FLUIDOS CORPORALES

Capas profundas de la piel lesionada

Abscesos
Lesiones nodulares
En micosis subcutnea se puede obtener diferente material
entre los que se encuentra pus o exudados de lesiones que
drenen.
Si hay sospecha de esporotricosis se debe dejar una gasa durante
24 horas para recoger el material a examinar o toma de biopsia
por dermatlogo (13, 20).
Si la coleccin se presenta como un absceso se debe aspirar con
jeringa y aguja estriles;
Si la secrecin est en una lesin abierta se toma la muestra
con escobilln estril preferiblemente de dacrn.
EQUIPO
Guantes estriles.
Mascarilla.
Gasas estriles.
Jeringas estriles.
55
Tubos estriles.
Escobilln de dacrn.
TRANSPORTE
Inmediato a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
3. SECRECIONES OCULARES
Material purulento, material necrtico

y material de lceras.
Procedimiento mdico bajo tcnica asptica.
Realizar raspado de la crnea con una esptula de platino y depositar la muestra sobre medio de cultivo y realizar lmina para
coloracin.
El uido vtreo necesita aspiracin y puede colocarse directamente en el medio o en un tubo estril (13, 20).
EQUIPO
Equipo de asepsia: mascarilla, guantes y campo estriles.
Esptula de platino.
Botellas de hemocultivo.
TRANSPORTE
Inmediato a temperatura ambiente
56
TIPO DE MUESTRA:
4. LQUIDO CEFALORRAQUDEO
Espacio medular
Enviar, adems de LCR, un tubo con suero sanguneo 2 cc
refrigerado.
Enviar con resumen de historia clnica.
Procedimiento realizado por personal mdico.
Preparacion aseptica de la piel: el paciente debe estar recostado
sobre un costado con el torso doblado hacia delante.
Bajo anestesia local se introduce una aguja larga en el conducto
espinal; no necesita ser aspirado, uye por presin en individuos
sanos.
Obtener mnimo 3 cc de LCR en tubo estril tapa rosca (20).
EQUIPO
Equipo de asepsia: mascarilla, guantes y campo estriles.
Equipo de puncin lumbar.
TRANSPORTE
Inmediato a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
5. CUERO CABELLUDO Y PELO

Cabellos quebrados, lesiones de cuero cabelludo

menos 3 das antes.
57
la muestra.
Raspar los bordes activos de la lesin.
Obtenga escamas, costras o partes del cabello afectado y recoja
material de los bordes de las lesiones.
En afecciones del cuero cabelludo, retire con pinzas los cabellos
sin brillo, quebradizos.
La muestra se coloca en una caja de petri limpia (13, 20).
EQUIPO
Equipo estril con pinzas, tijeras, cajas de petri, guantes, tapabocas.
TRANSPORTE
Menos de dos horas a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
6. PIEL, COSTRAS Y ESCAMAS

Material raspado, costras o escamas

menos 8 das antes.
la muestra.
Lave bien el sitio de la lesin, con agua y con jabn, y luego
con alcohol al 70%, utilizando gasa; no use algodn y deje
secar.
58
Con bistur estril raspe el borde de la lesin y recoja el material
que se desprende.
Recoja las costras o escamas con pinzas estriles.
Coloque el material raspado, las costras o escamas en una caja de
petri estril y asegure la tapa con cinta adhesiva para que no se
abra (13, 20).
EQUIPO
Equipo estril con pinzas, tijeras, cajas de petri, guantes,
tapabocas.
TRANSPORTE
Menos de dos horas a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
7. UAS
Raspado, corte y fragmentos de ua

menos 3 das antes.
la muestra.
No debe tener esmalte aplicado en las uas.
Lavar bien el sitio de la lesin, con agua y con jabn y luego
con alcohol al 70%,utilizando gasa. No usar algodn.
Deje secar.
Con bisturi estril raspe la zona afectada y recoja el detritus,
debajo de la ua.
59
Coloque el material en una caja de petri estril y asegure la tapa
con cinta adhesiva para que no se abra.
EQUIPO
Equipo estril de pinzas, tijeras, bistur, cajas de petri estriles,
guantes, tapabocas.
TRANSPORTE
Menor a 72 horas a temperatura ambiente.
TIPO DE MUESTRA:
8. ODO EXTERNO
Material del canal auditivo externo

No usar ningn medicamento 18 a 24 horas previo a la toma de
la muestra.
Rotar el escobilln rmemente en el canal externo del odo,
previamente humedecido con agua destilada estril o solucin
salina estril.
Realizar lmina para coloracin de Gram.
EQUIPO
Escobilln, tubo tapa rosca o tapn de caucho. Enviar el
escobilln en un tubo estril con tapa de rosca con 1 cc de
solucin salina.
TRANSPORTE
Inmediatamente a temperatura ambiente.
60
TIPO DE MUESTRA:
9. FLUIDO PROSTTICO
Secrecin uretral
Vericar que se haya realizado una limpieza previa y adecuada de los genitales externos para eliminar secreciones contaminantes.
La muestra se debe tomar al menos una hora despus de que el
paciente haya orinado.
Realice masaje prosttico para tomar la muestra; si se observa
la salida de material por la uretra recolctelo en un tubo seco
estril.
En caso de no obtener drenaje con el masaje uretral, lave en el
rea periuretral con antisptico y enjuague con agua.
Inserte un escobilln estril pequeo 2 a 4 cm dentro de la
uretra, rtelo y djelo introducido al menos por 2 segundos para
facilitar la absorcin (18,19).
EQUIPO
Equipo para higiene externa (Jabn antisptico, gasas).
Tubo estril.
TRANSPORTE
61
2.10 Muestras tracto genitourinario

TIPO DE MUESTRA:
1. GENITALES FEMENINOS
A. Secreciones de la glndula de Bartholin

Se recomienda realizar slo estudio de anaerobios.
La recoleccin de esta muestra la realiza personal mdico.
Realice tcnica de preparacin de piel.
Realice puncin para aspirar lquido de la glndula.
Coloque la muestra en el medio de transporte para anaerobios.
EQUIPO
Guantes estriles.
Medio de transporte para anaerobios.
TRANSPORTE
B. Secreciones cervicales
La paciente debe haber suspendido el tratamiento antibitico,
aplicacin de ovulos o duchas vaginales 3 das antes de la toma
de la muestra.
Evitar tener relaciones sexuales 3 das antes de la toma de la
muestra y no realizar la toma durante el sangrado menstrual.
62
Este procedimiento est contraindicado en pacientes embarazadas.
Utilizar espculo estril o desechable. No usar lubricantes
durante el procedimiento.
En caso de sospechar presencia de Chlamydia trachomatis tomar
la muestra con el escobilln de transporte correspondiente
suministrado por el laboratorio; en este caso no se realiza
extendido en lmina de vidrio.
Con un primer escobilln estril remover moco y secreciones del
oricio de entrada del cuello cervical, y desecharlo.
Con un nuevo escobilln estril tome cuidadosamente la
muestra del canal endocervical y colquelo en tubo estril con
tapa rosca o tapn de caucho.
Con otro escobilln realice extendido en lmina de vidrio.
EQUIPO
Escobilln estril.
Tubo estril con tapa rosca o tapn de caucho.
TRANSPORTE
Se recomienda inmediatamente sin exceder ms de 15 minutos y a
temperatura ambiente.
C. Productos de la concepcin
No se recomienda hacer cultivo de loquios, por alta probabilidad de
resultados rroneos.
Este procedimiento lo realiza personal mdico.
Enviar una porcin de tejido en recipiente estril.
Vericar el envo de muestra para cultivo anaerobio.
63
EQUIPO
Recipiente estril.
TRANSPORTE
D. Secreciones vaginales
La paciente no debe aplicar ovulos o duchas vaginales 24 horas
antes de la toma de la muestra.
Vericar que se haya realizado una limpieza adecuada de los
genitales externos previamente, para eliminar secreciones
contaminantes.
Obtener secrecin de la membrana mucosa de la pared vaginal
con un escobilln estril.
Con el escobilln estril realice extendido en lmina de vidrio
y con otro escobilln colquelo en tubo estril con un mililitro
de solucin salina estril para bsqueda de Trichomonas,
Gardnerella vaginalis y hongos.
EQUIPO
Lmina de vidrio.
Tubo estril.
Solucin salina.
TRANSPORTE
Hacer la lectura lo ms pronto posible; de lo contrario, mantener

el tubo con el escobilln a 37C con el n de evitar la prdida de
movilidad de las Trichomonas.
64
TIPO DE MUESTRA:
2. GENITALES MASCULINOS
A. Secreciones uretrales
Vericar que se haya realizado una limpieza adecuada de los
genitales externos previamente, para eliminar secreciones contaminantes.
La muestra se debe tomar al menos una hora despus de que el
paciente haya orinado.
Realice masaje prosttico para tomar la muestra; si se observa
la salida de material por la uretra, recolctelo en un tubo seco
estril.
En caso de no obtener drenaje con el masaje uretral, realice
lavado en el rea periuretral con antisptico y enjuague con
agua.
Inserte un escobilln estril pequeo 2 a 4 cm dentro de la
uretra, rtelo y djelo introducido al menos por 2 segundos para
facilitar la absorcin (18, 19).
EQUIPO
Equipo para higiene externa (jabn antisptico, gasas, jarra con
agua).
Tubo estril.
TRANSPORTE
65
B. Secrecin prosttica
Vericar que el paciente haya evacuado la vejiga.
Realice la limpieza del meato uretral con agua y jabn.
Realice masaje prosttico a travs del recto y recolecte el uido
expulsado a travs de la uretra en un tubo estril o recolecte
ms de un mililitro.
EQUIPO
Escobilln de transporte o tubo estril.
TRANSPORTE
TIPO DE MUESTRA:
3. LESIONES GENITALES
Lesiones genitales
Realice limpieza de las lesiones con solucin salina estril antes
de tomar la muestra.
Los virus aislados con mayor frecuencia de lesiones genitales
son HSV-1 y HSV-2, CMV y virus de papiloma humano.
Con una hoja de bsturi remueva la supercie de la lesin.
Mientras presiona rmemente la base de la lesin, permita que
el trasudado se acumule y con el escobilln estril recolecte la
muestra y colquelo en tubo estril.
66
EQUIPO
Escobilln de transporte.
Tubo estril.
TRANSPORTE
67
2.11
Lista de chequeo
MANUAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS
PARA ANLISIS MICROBIOLGICO
Objetivo: vericar el cumplimiento de las recomendaciones para la toma de los diferentes tipos de muestras microbiolgicas, segn manual establecido con el n de
garantizar la calidad del resultado.
Fecha:_____________
SOLICITUD DEL ESTUDIO
Servicio:_____________
S
NO
NO
APLICA
OBSERVACIONES
1. En la orden de solicitud de la toma

de muestras para anlisis microbiolgico se especica de forma completa el
estudio requerido.
2. En la orden de solicitud de la toma
de muestras para anlisis microbiolgico aparece el diagnstico presuntivo del
paciente.
3. En la orden de solicitud de la toma de
muestras para anlisis microbiolgico se informa el uso de antibiticos u otros medicamentos que puedan inuir en el resultado.
PRECAUCIONES DE BIOSEGURIDAD
4. Utiliza los elementos de proteccin
personal (gafas o mascarilla con visera,
mascarilla, guantes, bata, contenedor
de cortopunzantes).
PREPARACIN DE ELEMENTOS
5. De acuerdo con la solicitud de toma
de muestras para anlisis microbiolgico, prepar el equipo completo y necesario para la correcta toma, conservacin y transporte de la muestra.
6. Prepara el equipo de asepsia y antisepsia:
- Guantes estriles.
- Gasas estriles.
- Jabn y solucin antisptica.
- Alcohol al 70 % y alcohol yodado.
- Batas y campos estriles.
PREPARACIN DE LA PIEL, LIMPIEZA Y ANTISEPSIA (En la toma de muestras
que se requiera)
7. Realiza lavado de manos clnicos y
se coloca guantes estriles.
Contina
68
SOLICITUD DEL ESTUDIO
NO
NO
APLICA
OBSERVACIONES
8. Aplica jabn antisptico en una

gasa estril y con movimientos circulares del centro a la periferia realiza
friccin mecnica del sitio a friccionar
o penetrar.
9. Repite el proceso anterior con una
gasa estril impregnada en solucin antisptica.
10. Finaliza con la aplicacin en el sitio
a puncionarr o penetrar
penetrar, alcohol al 70 % o
alcohol yodado con una gasa estril.
11. Deja secar espontneamente el alcohol antisptico sobre la piel durante
2 minutos.
IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA
12. La muestra para anlisis microbiolgico es etiquetada con los siguientes
datos bsicos:
- Nombre completo de paciente y edad.
- Nmero de historia clnica.
- Habitacin donde se encuentra ubicado el paciente o servicio de localizacin.
- Tipo de muestra y sitio anatmico.
- Fecha y hora de recoleccin.
- Iniciales de la persona que obtiene
la muestra.
13. Coloca en el frasco recolector adecuado, el material obtenido en la toma
de muestra para anlisis microbiolgico.
14. Cumple con el tiempo mximo estipulado para el transporte de acuerdo con
la muestra para anlisis microbiolgico.
Evaluado: ________________________________________________
Evaluador: ________________________________________________
RECOMENDACIONES:_________________________________________
Puntaje aprobado: la persona conoce y est capacitada para realizar este procedimiento cuando
cumpla con ms del 80 % de las recomendaciones del manual.
Puntaje no aprobado: la persona requiere una nueva capacitacin y evaluacin para asegurar el
procedimiento de toma muestras cuando cumpla con menos del 60 % de las recomendaciones del
manual.
Informar y retroalimentar al evaluado para que identique las debilidades encontradas y hacer un
plan de mejoramiento.
Indicadores de cumplimiento
1. Porcentaje de personas por servicio con evaluaciones aprobadas = Nmero de evaluaciones
aprobadas/total de evaluaciones realizadas.
2. Porcentaje de contaminacin = Nmero de aislamientos considerados contaminados/total de
muestras procesadas en un perodo.
3. Porcentaje de muestreos rechazados = Nmero de muestras mal recolectas/total muestras tomadas.
69
Proceso de divulgacin
Manual para la toma de muestras
para anlisis microbiolgico
Objetivo:
Vericar que el personal de la institucin encargado de la toma de muestras
conozca el Manual para la toma de muestras para anlisis microbiolgico.
Servicio: ________________________ Fecha: ______________________

Total personas del servicio: __________ Total de asistentes a la divulgacin: __________________
Indicador:
1. Porcentaje de asistencia = Nmero de asistentes / total de esperados
del servicio *100
2. Porcentaje de servicios cubiertos = Nmero de servicios capacitados /
total de servicios a capacitar*100
Contenido de la sesin:
1. Presentacin del objetivo del Manual.
2. Clasicacin segn tipo de muestras.
3. Explicacin de los cuadros de consulta: cada tipo de muestra contiene
una tabla con el listado de elementos necesarios, el mtodo para la
recoleccin, los cuidados y las recomendaciones especiales, y el tiempo
de transporte.
4. Firma de asistencia a la sesin de divulgacin.
5. Entrega del Manual a la jefe de servicio.
3. Muestras ambientales
En dcadas pasadas y en medio del desinters general en el personal de salud, los departamentos de epidemiologa hospitalaria se
dedicaban principalmente a la toma de cultivos ambientales y a la
obtencin de inferencias de cmo el medio inua en la aparicin
de infecciones en los pacientes, aceptndolas con frecuencia como
complicaciones naturales e inevitables. Las tasas de infeccin se
consideraban poco, por lo cual no sorprende que las tasas ociales
fueran siempre cercanas a cero.
Actualmente se sabe que los cultivos ambientales son de muy poca
utilidad a pesar de su alto costo, y que todos los esfuerzos deben
iniciar con la formacin de un grupo de personas que coordinen las
acciones de control, en lo que se conoce como el Comit de infecciones intrahospitalarias. Este Comit y el laboratorio de microbiologa, como miembro del mismo, deben actuar en conjunto para
evitar la sobrecarga de estudios que brinden poca informacin y
garantizar la toma de muestras que sean indispensables para la
accin.
Como parte de la investigacin de brotes se ha contemplado la utilidad de tomar muestras de reas hospitalarias y del personal, que
deben tomarse tan pronto como sea posible, teniendo en cuenta
que los resultados son soporte esencial al momento de evaluar las
hiptesis dentro del proceso de investigacin del evento.
El manual contiene aspectos relacionados con la tcnica de toma
de muestras, los equipos requeridos y el transporte adecuado al
laboratorio.
- 71 -
73
3.1 Supercies, soluciones y ambientes

MUESTRAS AMBIENTALES
TIPO DE MUESTRA:
1. SUPERFICIES
Pisos, paredes, mesas, mesones, camillas, etc.

Utilizar escobillones estriles, vericar la vigencia y esterilidad
del equipo para la toma de las muestras (caldo y medios de
cultivo).
Las muestras deben ser recolectadas con elementos de proteccin
como guantes, tapabocas, gorro y bata.
En caso de ser recolectadas por evento de brote por infecciones
intrahospitalarias, se recomienda recolectarlas antes de la
limpieza y desinfeccin.
En el caso de requerirse evaluar el proceso de limpieza y
desinfeccin, se debe tomar despus del mismo.
TCNICA RECOLECCIN
Existen dos formas de anlisis:
La cualitativa: con un escobilln estril, humedecido en caldo
de cultivo estril, se toma la muestra rotndolo sobre s mismo
y recorridendo la supercie a tomar y se pasa a un medio de
cultivo directamente o se puede pasar a un caldo de cultivo
para incubarlo y luego pasarlo al medio de cultivo.
La cuantitativa: se toma con un escobilln estril con ayuda de
una plantilla de, por ejemplo: 5,10,20 cm2 para luego realizar
siembra en placa profunda que permite realizar un recuento
y reportarlo por UFC/ml. La forma cuantitativa se realiza por
mtodos de contacto y existen las siguientes opciones: 1) por
medio de la ayuda de una plantilla (5,10,20 cm2) adquirida
comercialmente o fabricada por el usuario en un material que
se pueda esterilizar, y depositar el escobilln en un tubo que
74
contenga 10 ml de de caldo de cultivo o agua peptonada; esto
con el n de poder realizar diluciones y sembrar en profundidad;
2) el mtodo rodac; y 3) el mtodo de petrilm (30,31,32).
EQUIPO
Tubos con caldo de cultivo o agua peptonada.
Guantes.
Tapabocas, segn tcnica a utilizar: cajas para el mtodo
rodac, lminas de petrilm, plantilla estril, medios de cultivo
especcos para microorganismos meslos, coliformes, hongos
y levaduras.
TRANSPORTE
TIPO DE MUESTRA:
2. LQUIDOS
A. Soluciones - Jabones desinfectantes

Existen dos alternativas: 1) que las muestras sean tomadas y
analizadas por laboratorios con experiencia industrial; 2) que
sean procesadas en el laboratorio clnico (rea de microbiologa),
teniendo en cuenta que se debe contar con los caldos y los
medios de cultivo necesarios para su procesamiento.
1. En caso de ser procesadas por el laboratorio clnico de la
institucin, se recomienda tomar una alicuota del jabn,
solucin o desinfectante, preferiblemente del frasco del tiempo
75
del evento. Se puede realizar utilizando: a) la tcnica de
dilucin en tubo; b) la tcnica de la placa en agar; c) tcnica del
coeciente fenlico (utilizada especcamente para comparar el
poder desinfectante de un agente qumico frente al fenol).
2. En caso de contratar un laboratorio con experiencia industrial,
ellos mismos se encargarn de recolectar las muestras (32,33).
EQUIPO
Caldos y medios de cultivo para identicar microorganismos
meslos, coliformes, hongos y levaduras.
TRANSPORTE
B. Aguas - Leches
Las muestras deben ser recolectadas con elementos de
proteccin como guantes, tapabocas, gorro y bata. Existen dos
alternativas: 1) que las muestras sean tomadas y analizadas por
laboratorios con experiencia industrial; 2) que sean procesadas
en el laboratorio clnico (rea de microbiologa), teniendo en
cuenta que se debe contar con los caldos y los medios de cultivo
necesarios para su procesamiento.
En caso de ser procesadas por el laboratorio clnico de la institucin, se recomienda tomar una alicuotas de aguas o leches, preferiblemente en el tiempo del evento.
EQUIPO
Para leches: caldo verde brillante, Buffer fosfato sdico o agua
peptonada 1%.
Para aguas: Sustrato denido o ltracin de membrana.
76
TRANSPORTE
TIPO DE MUESTRA:
3. AIRE
A. Sedimentacin
Utilizar cajas con medios que hayan pasado la prueba de
esterilidad.
Nota: no se encontr evidencia bibliogrca que sustente su
utilidad y la calidad de sus resultados.
Dejar un nmero de cajas, de medio de cultivo (agar nutritivo,
agar BHI o agar sangre) abiertas, de acuerdo con el tamao del
espacio a estudiar por un perodo entre 15 a 30 minutos; cerrar
luego las cajas y enviarlas a incubar (35,36).
EQUIPO
Cajas de agar nutritivo, agar sangre o agar BHI.
TRANSPORTE
B. Muestreador de aire
77
Garantizar que el equipo este funcionando correctamente.
No se encontr evidencia bibliogrca que sustente su utilidad
y la calidad de sus resultados.
Este mtodo es costoso.
El aire muestreado se hace incidir sobre un medio de cultivo determinado, segn se pretenda valorar bacterias u hongos
(30,31,32,33,34,35,36).
EQUIPO
Equipo muestreador de aire.
Cajas con medios de cultivo.
TRANSPORTE
79
3.2 Muestras en personas

MUESTRAS AMBIENTALES
TIPO DE MUESTRA:
PERSONAL ASISTENCIAL
A. Manos
Utilizar escobillones estriles, vericar la vigencia y esterilidad
del equipo para la toma de las muestras (caldo y medios de
cultivo).
En caso de ser recolectadas por evento de brote por infecciones
intrahospitalarias, se recomienda recolectarlas sin avisar al
personal con el n de evaluar el proceso de lavado de manos.
Procesar mano derecha y mano izquierda por separado.
Existen dos formas de anlisis:
La cualitativa: con un escobilln estril, humedecido en caldo
de cultivo estril, se toma la muestra rotndolo sobre s mismo
y recorridendo la supercie de la mano (palma, dorso, lecho
ungueal, espacio intergidital), se pasa a un medio de cultivo
directamente o se puede pasar a un caldo de cultivo para
incubarlo y luego pasarlo al medio de cultivo.
La cuantitativa: 1) se toma con un escobilln estril y se recolecta
en un tubo que contenga 10 ml de caldo o agua peptonada para
realizar siembre en profundidad y reportarlo por UFC/ml; 2) el
mtodo rodac; 3) el mtodo de petrilm (37,38,39,40,41,42).
EQUIPO
Tubos con caldo de cultivo o agua peptonada.
80
Guantes.
Tapabocas.
Cajas para el mtodo rodac.
Lminas de petrilm.
Medios de cultivo especcos para microorganismo meslos,
coliformes, hongos y levaduras.
TRANSPORTE
B. Nasal
Evitar las gotas y los baos nasales antes de tomar la muestra
(6, 17, 18, 19).
No se recomienda enviar cultivos para anaerobios.
Slo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores
para la deteccin de portadores de Staphylococcus aureus o en
lesiones nasales.
Para bsqueda de hongos se recomienda la misma tcnica.
Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir
el escobilln 1 cm en el interior de las fosas nasales, rotarlo
y luego retirarlo e identicar de qu fosa nasal se tom la
muestra.
Tomar dos escobillones, hacer con uno extendido en
lmina de vidrio y colocar el otro en el medio de transporte
(37,38,39,40,41,42).
81
EQUIPO
TRANSPORTE
C. Faringe
No contaminar el escobilln con secrecin de cavidad oral o
dientes.
El hisopado de garganta est contraindicado en pacientes con
diagnstico de epiglotitis.
(6, 17, 18, 19).
TCNICA RECOLECCIN
Con un bajalenguas presione la lengua hacia abajo para visualizar
los pilares de la faringe y del rea tonsilar para localizar el rea
de inamacin y exudado.
Rote el hisopo sobre el rea.
Tomar dos escobillones, hacer con uno extendido en
lmina de vidrio y colocar el otro en el medio de transporte
(37,38,39,40,41).
EQUIPO
Guantes.
82
TRANSPORTE
D. Uas
Utilizar escobillones estriles.
Vericar la vigencia y la esterilidad del equipo para la toma de
las muestras (caldo y medios de cultivo).
Cultivar las uas de cada mano por separado.
Para el estudio de microorganismos comunes se debe abrir una
caja de medio slido y las uas de la persona por cultivar deben
introducirse en el medio y permanecer de 5 a 10 segundos
en esta posicin; luego se debe cerrar la caja y llevarla a
cultivar.
Otra forma es humedecer el escobilln en un caldo o solucin
salina estril y realizar un movimiento similar al de limpieza por
debajo de la ua, en las cinco uas de cada mano, y depositar el
escobilln en un tubo que contenga caldo de cultivo para luego
sembrarlas en el medio de cultivo (37,38,39,40,41).
EQUIPO
Tubos con caldo de cultivo.

Escobillones.
Guantes.
Tapabocas.
TRANSPORTE
Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin a temperatura ambiente
83
E. Coprocultivo
No cultive muestras de consistencia dura.
Para estudio de rotavirus y Clostridium difcile, enviar muestra
diarreica y no utilizar escobilln.
Es recomendable para el personal asistencial del lactario, cocina
y del personal asistencial de los servicios cuando se sospecha
Enterococcus faecalis y Enterobacterias lactosa negativa.
Recolectar en lo posible ms de 2 cc o gramos de materia fecal
(37,43,44).
EQUIPO
Guantes.
Frasco plstico limpio, de boca ancha.
TRANSPORTE
temperatura ambiente. Para estudio de mycobacterias debe enviarse inmediatamente al laboratorio, protegida de la luz directa.
Glosario
Sustancias infecciosas. Sustancia que contiene un microorganismo

viable, como una bacteria, un virus, una rickettsia, un parsito, un
hongo o un prin que se sabe o se cree en forma razonable que
causa enfermedad en humanos o animales.
Con respecto al embalaje y el transporte, las sustancias infecciosas
incluyen:
Todos los cultivos que contienen o se sospecha que contienen
un agente que puede causar infeccin.
Especmenes humanos o animales que contengan tal agente en
cantidades sucientes para causar infecciones.
Muestra(s) de un paciente con una enfermedad seria de causa
desconocida.
Otros especmenes que no se incluyen en las categoras anteriores, pero identicados como infecciosos por una persona calicada, por ejemplo, mdicos, cientcos, personal de enfermera,
etc.
Los especmenes diagnsticos recolectados durante la investigacin de un brote epidmico de una enfermedad seria de causa desconocida deben ser manejados como sustancias infecciosas.
Especmenes diagnsticos. Cualquier material humano o animal,
incluyendo, pero no limitado a, excretas, sangre o sus componentes, tejidos y uidos tisulares, recolectados con el propsito de
hacer un diagnstico o estudio. Se excluyen los animales vivos
infectados.
- 84 -
85
Especmenes teraputicos. Cualquier rgano humano o sustancias
biolgicas recolectados con el propsito de ser transplantado en
un organismo, considerado como receptor o de ser aplicado como
mtodo de inmunizacin.
Asepsia. Ausencia de microorganismos que pueden causar enfermedad infecciosa.
Antisepsia. Mecanismo o proceso para inhibir o reducir el nmero
de microorganismos de la piel o tejidos vivos. La tcnica asptica
incluye el uso de principios de asepsia, elementos de barrera y
equipo estril.
Antisptico. Sustancia qumica utilizada para realizar antisepsia:
Clorhexidina 2 4%.
Yodados: jabn al 7%; solucin 10%.
Alcohol al 70%.
Bibliografa
1. Thomson BR (JR.), and Miller M. Specimen collection, transport, and

processing: Bacteriology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH,
Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed.
Washington: ASM Press; 2003.
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Participantes

rea de vigilancia en Salud Pblica
Mara del Socorro Chal Palacios

Laboratorio de Salud Pblica
Stella Vanegas Morales

Hospital Universitario Fundacin Santa Fe de Bogot
Diana Bermdez Olarte

Instituto Nacional de Cancerologa
Laline Osorio
Hospital Simn Bolvar
Luz Mila Lpez

Hospital Santa Clara
Agradecimientos:
A las instituciones prestadoras de servicios de salud,

por el envo de protocolos y manuales institucionales
de toma de muestras; al Grupo para el Control de
la Resistencia Bacteriana en Bogot (Grebo), por su
apoyo durante el proceso.
- 90 -
Conferencia
de consenso para la
toma de muestras
para anlisis
microbiolgico
- 91 -
Introduccin
La calidad y la conabilidad en el diagnstico microbiolgico

depende en gran medida de la toma de los especmenes; este
aspecto, complementario al procesamiento, es esencial para garantizar la calidad de todo el proceso. Existen diversos puntos controversiales relacionados con la toma de hemocultivos, muestras
de origen hemtico, tegumentario y respiratorio. Estos aspectos
fueron identicados durante la revisin ampliada que llev a la
construccin del Manual para la toma de muestras para anlisis
microbiolgico adelantado por el rea de vigilancia en salud pblica
de la Secretara Distrital de Salud de Bogot, D. C.
Este documento contiene la sntesis de una reunin distrital de
consenso que deliber sobre cuatro aspectos esenciales, en los que
la evidencia disponible no era suciente para la adopcin de una
recomendacin precisa.
Este cuerpo de recomendaciones complementa los elementos incluidos en el Manual, y pretende generar recomendaciones estandarizadas para la red de prestadores pblicos y privados de servicios
de salud de la ciudad, especialmente dirigidas a los profesionales
de la salud que participan en la toma y el transporte de muestras
microbiolgicas.
Con este documento se pretende lograr la remisin al laboratorio
clnico de microbiologa de muestras con alta calidad para el procesamiento y remisin de reportes que redunden en la mejor atencin
para nuestros pacientes.
- 93 -
94
Acerca del desarrollo de esta

conferencia de consenso
Como parte de la elaboracin del Manual para la toma de muestras para anlisis microbiolgico, la Secretara Distrital de Salud de
Bogot, D. C., por medio del rea de vigilancia en Salud Pblica,
desarroll una conferencia de consenso en noviembre de 2006. En
esta participaron profesionales de la salud, representantes de las
instituciones y agremiaciones de usuarios. El objetivo era evaluar la
evidencia disponible en algunos aspectos controversiales del documento inicial. En este reporte se presentan las recomendaciones de
esa reunin.
La informacin discutida en el presente consenso es importante
hasta la fecha de realizacin del mismo, sin desconocer el avance
y la produccin continuas de nueva informacin.
Informacin para referenciar este documento

Para hacer una referencia bibliogrca de este documento1 favor
usar el siguiente formato:
Secretara Distrital de Salud. Consenso en toma de muestras microbiolgicas. SDDS 2007.
Declaracin de conictos
Ninguno de los participantes en esta conferencia de consenso
declaro algn conicto de inters o impedimento para participar
en la presentacin, la votacin o la generacin de las recomendaciones.
Para ver una lista de los participantes del proceso con sus respectivas aliaciones institucionales remtase al nal de este documento.
Este documento usa la estructura de presentacin de los consensos del Instituto

Nacional de Salud de los Estados Unidos (NIH) disponible en Http://consensus.nih.
gov/ABOUTCDP.htm
1
95
Resumen
Objetivos
Discutir la evidencia que sustenta las recomendaciones en cuatro
escenarios controversiales relacionados con la toma de muestras
para anlisis microbiolgico en una reunin distrital de consenso e
incorporar las recomendaciones al Manual para la toma de muestras
para anlisis microbiolgico desarrollado por la Secretara Distrital
de Salud.
Participantes
Profesionales de ciencias de la salud (mdicos, profesionales de
enfermera, bacterilogas y profesional tcnico auxiliar), representantes de sociedades cientcas, universidades, entidades gubernamentales y privadas con injerencia en el asunto, delegados de las
reas involucradas de la Secretara Distrital de Salud y representantes de agremiaciones de usuarios.
Evidencia
Un panel de cuatro expertos con suciencia en los aspectos seleccionados prepar previamente una revisin de la evidencia en
cada una de las reas controversiales, que se present en plenaria
durante la reunin de consenso realizada en noviembre de 2006.
La metodologa de presentacin inclua el establecimiento de la
pregunta, la bsqueda de informacin importante y la sntesis de
la evidencia.
Conferencia de consenso
Previa convocatoria de miembros del Comit de infecciones intrahospitalarias distrital, autoridades nacionales y distritales en salud,
Instituto Nacional de Salud, sociedades cientcas y asociaciones
de usuarios, se hizo una reunin de consenso en la que, previa
presentacin de la evidencia por el panel de expertos y discusin
de los participantes en la plenaria, se someti a votacin cada uno
96
de los asuntos de controversia. Todos los asistentes participaron en
la discusin de la evidencia presentada por el panel de expertos.
El anlisis de las posiciones y presentaciones estuvo a cargo del
jurado, que present las recomendaciones nales.
Conclusiones
Existe evidencia controversial en algunos aspectos de la toma de
muestras para anlisis microbiolgico, tales como el volumen y
el nmero de botellas en hemocultivos en nios; el volumen que
ofrece el mejor rendimiento en adultos; las recomendaciones de
preparacin con antispticos para la toma de cultivos respiratorios;
y la preparacin de reas contaminados para el cultivo. En este
documento estn las recomendaciones extractadas de la reunin
distrital de consenso que discuti la evidencia disponible en relacin con estos aspectos.
97
Cul es el volumen, dilucin y nmero de hemocultivos recomendados en pediatra?

Experta: Martha lvarez
Volumen y dilucin
La concentracin bacteriana en pacientes con bacteriemia parece
ser comparativamente mayor en nios; sin embargo, hay limitaciones para la toma de muestras sanguneas en esta edad, especialmente en neonatos y con mayor frecuencia con prematuros de
menos de 1.000 g. Los volmenes recomendados por botella de
hemocultivo se encuentran en los siguientes rangos:
Prematuro extremo
(hasta 1.000 g de peso):
Neonatos:
Lactantes y nios < 6 aos:
Nios > de 6 aos:
Tomar hasta 0,5 ml

Tomar hasta 1 ml
2-3 ml
5-10 ml
El volumen de sangre por tomar debe ser diluido con una relacin 1:5
a 1:10. El volumen puede variar de acuerdo con la tcnica de hemocultivo disponible en el laboratorio de cada institucin. En opinin
del consenso, los mtodos automatizados son recomendados sobre
los mtodos manuales, por su facilidad y mejor sensibilidad.
En el comercio se dispone de botellas que contienen diferentes
tipos de volmenes y diluciones, pero para neonatos y menores de
6 aos se preeren las denominadas peditricas. Existen datos en
la literatura que han avalado la posibilidad de utilizar volmenes
menores (0,6 en un estudio ingls y 0,2 con dilucin 1:10 en un
estudio mexicano, con adecuada sensibilidad para la deteccin de
bacilos Gram negativos).
Nmero de botellas
El nmero de botellas por tomar depende de la situacin clnica:
Sospecha de bacteriemia: 2 botellas
Sospecha de endocarditis: 4-6 botellas /a tomar entre 6 y 24 horas
Sospecha de bacteriemia
asociada con el catter:
1 botella por va central y
1 botella por va perifrica
98
Se debe establecer el tiempo de crecimiento del (los) microorganismo(s) para hacer el diagnstico de bacteriemia asociada con el
catter, en los casos en los que el tiempo de crecimiento es inferior
en al menos dos horas en el cultivo tomado por el catter frente al
tiempo de aquel tomado por va perifrica.
Un mayor volumen aumenta la sensibilidad de la tcnica de hemocultivo, as como hacerlo en presencia de ebre. Sin embargo, en
pacientes prematuros el clnico podr determinar el volumen por
tomar, as como el momento ideal, sin olvidar que no se debe retardar el inicio del antibitico en las situaciones en las que el mdico
lo considere.
Tcnica
La muestra de sangre se puede hacer a travs de la arteria radial por
una persona experta (mdico o enfermera). En prematuros se puede
utilizar la va umbilical para la toma de muestras, aun cuando la
posibilidad de contaminacin puede ser mayor. Se considera que
una verdadera bacteriemia por Staphylococcus epidermidis con 2
hemocultivos positivos y clnica positiva.
En todos los casos, la toma de hemocultivos se debe hacer con
tcnica de asepsia y antisepsia apropiada por personal de salud con
lavado de manos, guantes estriles, bata y tapabocas.
Se pueden tomar hemocultivos de control 48 a 72 horas despus de
la toma inicial. En pacientes con uso previo de antibiticos (incluyendo neonatos cuyas madres hayan recibido antibiticos durante
el trabajo de parto) se puede considerar el uso de resinas en los
hemocultivos para mejorar la sensibilidad.
Recomendaciones del consenso

Volumen de los hemocultivos debe ser ajustado con la edad:
Prematuros extremos (menor a 1. 000 g):
Neonatos:
Lactantes y nios hasta 6 aos:
Mayores de 6 aos:
Dilucin:
0,5 ml
hasta 1 ml
2-3ml
5-10 ml
mantener una dilucin en 1:5 a 1:10
99
Nmero de hemocultivos: el nmero de botellas por tomar
depende de la situacin clnica:
En prematuros extremos:
2 botellas
Sospecha de bacteriemia:
2 botellas
Sospecha de endocarditis:
4-6 botellas (tomar entre 6 y

24 horas)
Sospecha de bacteriemia
asociada con el catter:
1 botella por va central, una

por va perifrica
100
Cul es la recomendacin para la preparacin del rea
de la piel adyacente de heridas quirrgicas, traumticas, absceso o biopsias de tejido para la toma de
muestras en el anlisis microbiolgico?
Experta: Sandra del Pilar Torres
El objetivo en la toma de muestras es identicar el microorganismo
causante de la infeccin del absceso herida traumtica. El antisptico reduce carga bacteriana en el momento de la muestra, este
puede ser yodado o clorhexidina. Antes de tomar el cultivo se debe
hacer una curacin de la herida, incluso cuando se han usado preparaciones con plata o diferentes tipos de apsitos previamente.
No se recomienda aplicar antisptico sobre la herida o usar presin
para hacer el barrido de la ora contaminante.
No hay evidencia sobre el uso de alcohol como un segundo antisptico, y no es clara la ventaja de uno sobre otro antisptico en esta
situacin (yodado frente a alcohol). De igual forma, no se dispone
de informacin en lo relacionado con hongos.

Herida abierta:
Limpiar bordes (del borde hacia afuera) con solucin salina
normal y alcohol isoproplico al 70%. Lavar la herida interna con
solucin salina abundante, sin presin. No usar antispticos.
Herida cerrada con rgano adyacente estril:
Usar como antisptico: jabn yodado, solucin yodada ms
alcohol isoproplico al 70%.
Herida cerrada con rgano adyacente no estril:
Usar solucin salina y alcohol isoproplico al 70%.
101
Es til la utilizacin de antispticos antes de la

toma de cultivos en el tracto respiratorio?
Experto: Elkin Lemos
Parte de la ora del tracto respiratorio puede incluir bacterias y hongos
como Stretptococcus spp, Veillonella spp, Neisseria spp, Peptostreptococcus
spp, Haemophilus spp, Actynomyces spp, Corynebacterium spp, mycoplasma
spp, Staphylococcus spp, Bacteroides spp, Micrococcus,
Micrococcus Fusobacterium y
Candida.
El enjuague bucal busca disminuir la probabilidad de alimentos en
la muestra. Se ha documentado que el lavado de la boca disminuye
un logaritmo el aislamiento de contaminantes2; sin embargo, los
productos bucofarngeos disponibles en el mercado que tienen una
diversidad de componentes no han demostrado su impacto sobre la
ora. Existen diferentes recomendaciones no basadas en la evidencia sobre el uso de cepillado de dientes.
Una vez tomada la muestra debe transportarse inmediatamente al
laboratorio y su siembra debe ser realizada de la manera ms rpida
posible.

1. Muestras de faringe y orofaringe: no hacer grgaras ni utilizar
enjuagues bucales ni soluciones bucofarngeas.
2. Muestras de esputo espontneo o inducido: cepillado de dientes
y lavado de la lengua slo con agua estril.
Respiration 1989; 56(3-4):137-46.
102
Cul es el volumen de sangre con mayor rendimiento
para la deteccin de bacteriemia en pacientes adultos
por medio de los mtodos automatizados de cultivo?
Experto: Carlos lvarez
El volumen de sangre cultivado permite discriminar entre las verdaderas bacteriemias y las contaminaciones. A mayor volumen de
sangre existe una mayor posibilidad de descartar contaminantes.
Cockerill y colaboradores3 responden a la pregunta cul es la eciencia de los distintos volmenes de sangre hemocultivos automatizados?, que en los pacientes con endocarditis a partir de los
20 ml no hay cambio en la sensibilidad de los hemocultivos. En
pacientes sin endocarditis se observ un aumento en la sensibilidad de los hemocultivos, con un volumen de 40 ml se incrementa la
positividad de hemocultivos en 57% con respecto a 10 ml y en 21%
con respecto a una alcuota de 20 ml y en 7% con respecto a 30 ml.
Los hemocultivos tomados en das posteriores pueden contribuir a
detectar hasta 10% de los pacientes.
Mermel y colaboradores4, en una revisin de hemocultivos no automatizados, demuestran que la sensibilidad aumenta cerca de 3%
por cada mililitro extra de muestra de sangre.
La sensibilidad puede ser similar para las muestras arteriales o
venosas y las resinas pueden mejorar la sensibilidad del hemocultivo, por razones no claramente establecidas. No hay datos que permitan decidir cul es el mejor momento para tomar de la muestra
en relacin con la ebre.
Otros aspectos
La muestra puede ser tomada a partir de una o dos venopunciones;
sin embargo, se corre mayor riesgo de contaminacin cuando se
toma en un solo sitio. Las tomas se pueden hacer con intervalos
de 20 minutos. Al tomar la muestra se puede limpiar la tapa de la
botella con alcohol y la piel con alcohol o yodado. Tambin hay
Clin Infect Dis 2004; 38:1724-30.
Ann Intern Med 1993; 119:270-72.
103
mayor riesgo de contaminacin con lneas centrales (arteriales o
perifricas). En bacteriemia asociada a catter debe tomarse una
muestra por la lnea central y otra por vena perifrica.
El cultivo de anaerobios se solicitar en las situaciones clnicas en
las que estos microorganismos se consideren apropiados y el procesamiento debe ser el adecuado para este tipo de microorganismos.
Debe contemplarse la bacteriemia por mltiples microorganismos,
considerando que el tiempo de incubacin puede ser de 5 das en
grmenes comunes y de ms das (usualmente 7) para grmenes no
comunes, dependiendo del microorganismo sospechado.

1. Para la deteccin de microorganismos en sangre se recomienda
enviar entre 20 y 40 ml (2 a 4 botellas de hemocultivos).
2. En sospecha de endocarditis pueden ser sucientes 20 ml de
sangre (2 botellas), y en ausencia de esta 40 ml (4 botellas) son
apropiados.
Conclusiones
En este documento se resumen las recomendaciones para la toma

de muestras en cultivos como producto de la reunin distrital de
consenso. Se lograron algunos acuerdos generales sustentados en
evidencia y discusin de un pblico experto sobre el volumen y el
nmero de tomas para el diagnstico microbiolgico adecuado en
muestras de origen sanguneo; por otra parte, se recomend el uso
de un proceso de lavado para la toma de muestras de esputo espontneo o inducido y la toma de muestras de faringe u orofaringe sin
el uso previo de soluciones de limpieza previa. Finalmente, se logr
un acuerdo general sobre la preparacin de las reas correspondientes a heridas abiertas, cerradas con rgano adyacente estril y con
rgano adyacente no estril.
Esperamos que la adherencia de la red de prestadores distritales de
salud a las recomendaciones de este consenso y del Manual para la
toma de muestras microbiolgicas garantice la consecucin de los
objetivos esperados, ambientes y procesos ms seguros y de calidad
para usuarios y trabajadores del sistema sanitario de nuestra ciudad.
De igual forma, la efectividad y el impacto en costos sanitarios de la
adecuada implementacin de estas medidas deber tener un impacto
positivo en su funcionamiento y eciencia.
- 104 -
Participantes
Integrantes del jurado
Jorge Alberto Corts Luna
Mdico internista, especialista en infectologa
Asociacin Colombiana de Infectologa
Presidente Captulo Central
Margarita Gonzlez Caldern

Enfermera. Especialista perinatologa. Magster en biotica
Comit de tica, Hospital Universitario Fundacin Santa Fe de Bogot
Sandra Mnica Rodrguez Colmenares

Enfermera especialista en cardiorrespiratorio
Representante Facultad de enfermera, Ponticia Universidad Javeriana
Mary Luz Gmez Mayorga

Bacteriloga
Profesional Laboratorio de Salud Pblica
Carmen Rosa Gallego Velasco

Bacteriloga
Profesional Laboratorio de Salud Pblica
Beatriz Eugenia Mojica Carreo

Enfermera
Comit de infecciones intrahospitalarias, Clnica Nueva
Jaime Alberto Morales Barrios

Mdico pediatra neonatlogo
Unidad recin nacidos, Hospital Simn Bolvar
Dioselina Pelez Carvajal

Bacteriloga. Magster en microbiologa
Profesional rea de enterovirus, Instituto Nacional de Salud
Mara Eugenia Rodrguez Caldern

Enfermera epidemiloga
Comit de infecciones intrahospitalarias, Hospital La Victoria
- 105 -
106
Panel de expertos
Martha lvarez Pia
Mdico pediatra, especialista infectologa
Fundacin Cardio Infantil, Bogot
Evalu: Cul es el volumen, dilucin y nmero de hemocultivos recomendados en pediatra?
Sandra Mara del Pilar Torres

Enfermera terapeuta enterostomal
Jefe clnica de heridas, Hospital Universitario Fundacin Santa Fe de
Bogot
Evalu: Cul es la recomendacin para la preparacin del rea de la piel
adyacente de heridas quirrgicas, traumticas, absceso o biopsias de tejido
para la toma de muestras en el anlisis microbiolgico?
Elkin Vladimir Lemos

Mdico, especialista en infectologa, candidato a doctor en Salud Pblica
Jefe unidad de infectologa, hospitales El Tunal y de Kennedy
Evalu: Es til la utilizacin de antispticos antes de la toma de cultivos
en el tracto respiratorio?
Carlos Arturo lvarez Moreno

Mdico, especialista en infectologa
Presidente, Asociacin Colombiana de Infectologa
Jefe unidad de infectologa Hospital San Ignacio
Evalu: Cul es el volumen de sangre con mayor rendimiento para la
deteccin de bacteriemia en pacientes adultos por medio de los mtodos
automatizados de cultivo?
Comit organizador
Mdico especialista en epidemiologa
Profesional especializado, coordinadora del Comit de infecciones intrahospitalarias distrital
rea de vigilancia en salud pblica, Secretara Distrital de Salud de Bogot,
D. C.
Enrique Ardila
Medic internista, especialista en endocrinologa y epidemiologa clnica
Asesor metodolgico conferencias de consenso y guas de prctica clnica
Profesor Especial Universidad Nacional de Colombia
Grupo para la Resistencia Bacteriana (Grebo)
107
Aura Luca Leal
Mdico, especialista en microbiologa clnica, magister en control de infecciones
Profesora asociada, Universidad Nacional de Colombia
Juan Sebastin Castillo

Mdico, magister en epidemiologa clnica (candidato)
Giancarlo Buitrago
Mdico, magister en epidemiologa clnica (candidato)
Diana Bermdez Olarte

Enfermera Comit de infecciones y vigilancia epidemiolgica, Instituto
Nacional de Cancerologa
Stella Vanegas Morales

Enfermera. Especialista en cuidado intensivo
Coordinadora comit prevencin de infecciones
Hospital Universitario Fundacin Santa Fe de Bogot
Mara del Socorro Chal Palacios

Bacteriloga. Magster en microbiologa. Especialista en epidemiologa
Profesional especializado Laboratorio de Salud Pblica
Luz Mila Lpez

Comit de infecciones Hospital Santa Clara
Laline Osorio
Enfermera. Especialista en salud ocupacional
Comit de infecciones, Hospital Simn Bolvar
La planeacin y el desarrollo de esta conferencia de consenso

estuvo respaldada econmica e institucionalmente por la

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Secretara Distrital de Salud de Bogot, D. C.

Direccin de Salud Pblica

Samuel Moreno Rojas

Secretara Distrital de Salud de Bogot, D. C.

MANUAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS PARA ANLISIS MICROBIOLGICO

Recomendaciones para la toma de muestras . .

3.1 Supercies, soluciones y ambientes . . . . . . . . .

CONFERENCIA DE CONSENSO PARA LA TOMA DE MUESTRAS

1.2 Solicitud de estudio

1.3 Precauciones de bioseguridad

Proteccin ocular: gafas o mascarilla con visera.

Cumplir con las recomendaciones de manejo de elementos cortopunzantes:

1.4 Preparacin de elementos

1.5 Equipo de asepsia y antisepsia

1.6 Preparacin de la piel:

1.7 Tcnica de extendido

1.8 Identicacin de muestras

1.9 Condiciones generales de almacenamiento

1.10 Criterios de aceptabilidad o rechazo

1.11 Cadena de custodia y pruebas

1.12 Objetivo general

1.13 Objetivos especcos

Asegurar las caractersticas originales de las muestras.

2.1 Muestras de orina

A. Orina de miccin espontnea

B. Orina obtenida a travs de cateterismo

CC. Orina obtenida a travs de sonda vesical

Frasco recolector estril de boca ancha de tapa rosca.

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no

D. Orina obtenida en pacientes peditricos

E. Orina obtenida a travs de sonda

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no

FF. Orina obtenida por puncin suprapbica

Frasco recolector estril de boca ancha de tapa rosca.

2.2 Muestras de sangre

A. Sangre obtenida a travs

B. Sangre obtenida a travs

Bata y campos estriles.

C. Pacientes con sospecha de infeccin

Bata y campos estriles.

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin a temperatura ambiente.

A. Pacientes con sospecha de infeccin

Gorro, mascarilla, bata.

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin a temperatura ambiente.

3. SECRECIN SITIO DE INSERCIN

A. Sitio de insercin del catter vascular

2.3 Muestras del tracto respiratorio

Secrecin de fosa nasal

Secrecin en rea nasofarngea

Barreras de proteccin (mascarilla y proteccin ocular).

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no

Secrecin de rea nasofarngea

Barreras de proteccin (mascarilla y proteccin ocular).

5. ESPUTO POR EXPECTORACIN ESPONTNEA

Expectoracin secrecin respiratoria

Expectoracin secrecin respiratoria

Secrecin obtenida por aspirado traqueal.

8. LAVADO O CEPILLADO BRONCOALVEOLAR

Fibrobroncoscopia para lavado broncoalveolar

Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recoleccin, no

2.4 Muestras lquidos corporales

1. LQUIDO PLEURAL, PERICRDICO,

Lquidos o uidos de espacios estriles

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