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Los triglicridos forman la mayor parte del peso seco del tejido adiposo,
constituyendo por lo tanto una potente forma de almacenamiento de energa.
El movimiento de cidos grasos entre los distintos compartimientos del
organismo, se produce con gran rapidez en respuesta a diversos estmulos
(dieta, actividad fsica, stress, edad, etc.). Por este motivo es de esperar que
los triglicridos (uno de los ms importantes vehculos para el transporte de
cidos grasos) varen tambin su concentracin en respuesta a estos factores
fisiolgicos.
Sin embargo, el equilibrio de estos mecanismos puede verse alterado,
conduciendo a niveles anormales de triglicridos circulantes. La persistencia de
esta condicin, se asocia con numerosas patologas, tales como enfermedad
heptica, renal, hiperlipidemias esenciales, etc.
Los mtodos enzimticos se basan en la determinacin del glicerol contenido
en las molculas de los triglicridos, tras la hidrlisis (qumica enzimtica)
para remover los cidos grasos. La determinacin enzimtica del glicerol ha
sido usada durante muchos aos; sin embargo, en estos mtodos se empleaba
la hidrlisis alcalina de los triglicridos. El reciente desarrollo del uso de
enzimas (lipasa, usualmente combinada con una proteasa) para catalizar la
hidrlisis, ha posibilitado el empleo de mtodos directos, rpidos y especficos.
Los sistemas totalmente enzimticos eliminan el uso de reactivos custicos,
extraccin con solventes, baos de altas temperaturas y mezclas de adsorcin
para la remocin de fosfolpidos. Estudios recientes se han concentrado en
desarrollar reactivos con lipasas, que hidrolizan completamente los triglicridos.
OBJETIVOS DE LA PRCTICA
MARCO TERICO
Se ejercita regularmente
CH2COOR-CHCOOR'-CH2-COOR"
Donde R, R', y R" son cidos grasos; los tres cidos grasos pueden ser
diferentes, todos iguales, o slo dos iguales y el otro distinto. Cada cido graso
se une por la reaccin de esterificacin:
R1-
triglicrido + agua
3 Cuerpos
cetnicos.
Pequeas
molculas
hidrosolubles
(acetoacetato y -hidroxibutirato) producidas en el hgado por oxidacin
de los cidos grasos. Dado que son solubles en agua (y por tanto en la
sangre), pueden viajar en ella sin problemas.
Explicacin de este transporte
El movimiento de cidos grasos entre los distintos compartimentos del
organismo se produce con gran rapidez en respuesta a diversos estmulos
(dieta, actividad fsica, estrs, edad). Los triglicridos (uno de los ms
importantes vehculos para el transporte de cidos grasos) varan tambin su
concentracin en respuesta a estos factores fisiolgicos.
La digestin de los triglicridos provenientes de la dieta se realiza en el
duodeno e leo proximal. La mayor parte de la digestin tiene lugar por accin
de las lipasas intestinales y pancreticas y de los cidos biliares. Los
triglicridos son hidrolizados a glicerol y cidos grasos y resintetizados en la
mucosa intestinal.
Mientras que los quilomicrones y las VLDL son partculas ricas en triglicridos,
las LDL (lipoprotenas de baja densidad) son ricas en steres de colesterol. El
colesterol total es, en realidad, el colesterol plasmtico de virtualmente todas
las lipoprotenas, mientras que los triglicridos son, fundamentalmente,
indicadores de la cantidad de triglicridos en quilomicrones y en VLDL.
METODO
Enzimtico-colorimtrico. Hidrlisis con lipasa y esterasa. Glicerol libre luego de
clivaje hidroltico.
Tcnicas directas: cromatografa en capa fina de alta performance, CG, CGL.
Fundamento:
Los triglicridos son enzimticamente hidrolizados por lipasa a cidos grasos
libres y glicerol. El glicerol es fosforilado por adenosin-trifosfato (ATP) por la
glicerol cinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato y adenosin-difosfato (ADP).
Glicerol-3-fosfato es oxidado a dihidroxiacetona-fosfato (DAP) por la glicerol
fosfato oxidasa (GPO) para producir perxido de hidrgeno (H2O2). La
produccin de color es catalizado por perxidasa, el H2O2 reacciona con 4aminoantipirina (4-AAP) y 4-clorofenol (4-CP) para producir un derivado rojo. La
absorbancia de este producto es proporcional a la concentracin srica de
triglicridos presente en la muestra. El reactivo est basado en el mtodo de
Wako con modificacin de McGowan et al. ,y Fossatietal.
VALORES DE REFERENCIA
1. Una concentracin en ayunas de triglicridos menores de 150 mg/dl es
considerada normal.
2. Una concentracin en el lmite es de 150-199mg/dl.
3. Se considera elevado una concentracin de triglicridos en ayunas entre
200-499 mg/dl.
4. Valores mayores de 499mg/dl en un paciente en ayunas se consideran
muy altos.
En estudios de investigacin realizados en 1970 identificaron que la
hipertensin era el mayor riesgo de enfermedad coronaria arterial, con
concentraciones altas de colesterol, y fumadores de cigarrillo. Nuevos estudios
del corazn demostraron que hombres y mujeres con concentraciones de
triglicridos alta y concentraciones bajas de HDL tienen una velocidad
significativamente alta de enfermedad coronaria arterial. Este grupo de alto
riesgo parece ser independiente del factor de riesgo mayor que incluye
concentraciones bajas de HDL.
En otros estudios del corazn reportados en 5 aos de ensayos de prevencin
coronaria entre dislipmicos, en hombres de edad media, se encontr un riesgo
relativo de 3.8 para aquellos hombres con una relacin colesterol HDL / LDL de
5 y unos triglicridos sricos mayores de 203 mg/dl.
Hombres con una relacin colesterol HDL /colesterol LDL de 5 con triglicridos
menores de 203 mg/dl tienen un riesgo relativo de 1.2. Este grupo de alto
SIGNIFICADO CLINICO
Los triglicridos se elevan en:
La hipertrigliceridemia: aumento de grasa neutra en plasma puede ser
primaria o secundaria. Es dudosa su influencia atergena, pero constituye un
factor de riesgo en las enfermedades vasculares especialmente en las mujeres.
La primaria se registra en las hiperlipidemias familiares de tipo I, II,
III, IV, V en grado variable.
La secundaria aparece en al obesidad, en al diabetes sacarina, en
1/3 de cada gota.
Hiperlipoproteinemia tipo I, IIb, IV y beta.
Hepatopatas y alcoholismo.
Quilomicronemia (Fredickson tipo I y V)
Sndrome nefrtico y nefropata.
Hipotiroidismo.
Diabetes sacarina mal controlada.
Pancreatitis.
Enfermedad del almacenamiento del glucgeno.
Infarto al miocardio (la elevacin puede persistir durante varios meses).
Anemia perniciosa, hipertensin maligna, pancreatitis aguda, sndrome de
Down, cirrosis biliar, septicemia.
Los triglicridos se reducen en la lipoproteinemia alfa-Beta congnita,
desnutricin e hipotiroidismo.
AVISO CLINICO
Una cifra de > 500 mg/ 100 ml indica hipertrigliceridemia en presencia de
pancreatitis diagnosticada.
La cifra de > 1000 mg/ 100 ml constituye un riesgo considerable de
lapancreatitis.
La quilomicronemia, aunque se acompae de pancreatitis, no padece
con mayor aterognesis. En el suero normal de ayuno se observan
quilomicrones, sino que constituyen triglicridos exgenos en el
individuo sano despus de ingerir una comida grasosa.
INTERFERENCIAS ANALITICAS
Hemoglobina >2 g/L, cido ascrbico >30 mg/l, bilirrubina > 20 mg/dl,
5. Reduzca de peso:
Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes
laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados
especficos de su examen.
Los niveles de triglicridos varan con la edad, y tambin dependen de qu tan
reciente ingiri alimentos antes del examen. La medicin es ms precisa si no
se ha comido en las 12 horas previas al examen. El valor normal es de 150
mg/dL. Para quienes sufren problemas cardiacos, los niveles de esta sustancia
deben ser inferiores a los 100 mg./dl.
Riesgos
Sangrado excesivo
Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)
Nombre
genrico
Nombre
comercial
Cmo funcionan?
Experimentacin
Experimento A
Determinacin de Triglicridos en suero
Fundamentos del mtodo:
Se producen reacciones qumicas basadas en la determinacin qumica de
glicerol a partir de glicridos.
La primera etapa consiste en que los triglicridos son hidrolizados
enzimticamente por una lipoprotein lipasa especfica, produciendo glicerol y
cidos grasos.
Reactivos provistos:
Material requerido:
Espectrofotmetro.
Probeta, micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes
indicados.
Frasco de vidrio color mbar.
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas.
Bao de agua a 37C.
Reloj timer.
Procedimiento:
Homogenizar la muestra antes de usar, especialmente frente a sueros
lechosos.
En tres tubos de ensayo marcados B (Blanco), S (Standard) y M
(Muestra), colocar:
Tubos
Blanco
Standard
Muestra
25 ul
---
---
Standard
---
25 ul
---
Muestra
---
---
25 ul
2.5 ml
2.5 ml
2.5 ml
Agua
Reactivo de
trabajo Agua
Mezclar.
Incubar 10 minutos en bao de agua a 37C.
Enfriar y leer en espectrofotmetro a 505 nm llevando el aparato a cero
con agua destilada.
Calculo de los resultados:
Corregir las lecturas con el blanco y usar las lecturas corregidas para los
clculos.
Para hallar la concentracin de triglicridos en el suero problema, se debe
utilizar el mtodo del factor de calibracin.
Triglicridos (mg%) = M x Fc
Fc = 200 / S
M = Abs muestra Abs blanco
S = Abs standard Abs blanco
(A de muestra / A de Standard) * n = ?
n= concentracin del Standard = 200
Frmula:
Valores de referencia:
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP)
provee los siguientes valores de triglicridos:
Deseable: < 150 mg%.
Moderadamente elevado a elevado: 150 199 mg%.
Elevado: 200 499 mg%.
Muy elevado: > 500 mg%.
Resultados:
Lecturas:
Blanco
---
Standard
0.503
Muestra
0.274
Reemplazando a la frmula:
(0.274/0.502) * 200 = 108,99 = 109
CONCLUCIONES
CUESTIONARIO
1.- Describa las caractersticas principales de los lpidos y su
clasificacin.
Caractersticas:
Los lpidos son molculas muy diversas; unos estn formados por
cadenas alifticas saturadas o insaturadas, en general lineales, pero algunos
tienen anillos (aromticos). Algunos son flexibles, mientras que otros son
rgidos o semiflexibles hasta alcanzar casi una total Flexibilidad mecnica
molecular; algunos comparten carbonos libres y otros forman puentes de
hidrgeno.
La mayora de los lpidos tiene algn tipo de carcter no polar, es decir, poseen
una gran parte apolar o hidrofbico ("que le teme al agua" o "rechaza el agua"),
lo que significa que no interacta bien con solventes polares como el agua,
pero s con la gasolina, el ter o el cloroformo. Otra parte de su estructura es
polar o hidroflica ("que tiene afinidad por el agua") y tender a asociarse con
solventes polares como el agua; cuando una molcula tiene una regin
hidrfoba y otra hidrfila se dice que tiene carcter de anfiptico. La regin
hidrfoba de los lpidos es la que presenta solo tomos de carbono unidos a
tomos de hidrgeno, como la larga "cola" aliftica de los cidos grasos o los
anillos de esterano del colesterol; la regin hidrfila es la que posee grupos
polares o con cargas elctricas, como el hidroxilo (OH) del colesterol,
el carboxilo (COOH) de los cidos grasos, el fosfato (PO4) de
los fosfolpidos.
Clasificacin:
Los lpidos son un grupo muy heterogneo que usualmente se subdivide en
dos, atendiendo a que posean en su composicin cidos grasos (lpidos
saponificables) o no los posean (lpidos insaponificables):
Lpidos saponificables
funcin a las comidas, por lo tanto deben medirse luego de un ayuno nocturno
y abstinencia de alcohol.
Las VLDL, IDL, LDL son sintetizadas por por va endgena (por el
hgado), poseen una estructura dinmica, porque van variando su
estructura a medida que circulan por el plasma perdiendo triglicridos
gracias a la lipoprotein lipasa ubicada en los capilares. Se caracterizan
por tener sobre su estructura la apolipoproteina B 100
REFERENCIAS
Kaplan LA, Pesce AJ, eds. Qumica Clnica. Teora y Anlisis 4ta edicin,
Editorial Panamericana, Mosby co. 2003.
http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/trigliceridos.htm
http://www.farestaie.com.ar/te/bc/384.htm
www.farestaie.com.ar
www.lablasamericas.com.co
www.laboratorioabc.com
www.labbolivar.com
http://www.medilegis.com/BancoConocimiento/T/TM103N5_abp/ABP.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Triglic%C3%A9ridos
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003493.htm
http://www.trigliceridos.net/