Metodologa De La

Investigacin
Benemrita Universidad Autnoma de Puebla

Protocolo de investigacin

Docente:
Domnguez Bolaos Rosa Elba

Presenta:
Meza Rodrguez Hctor David

Situacin actual: La regeneracin de miembros amputados es una disciplina contempornea que

se
lleva a cabo mayoritariamente en laboratorios de investigacin.
Situacin deseada: Establecer una tcnica de regeneracin novedosa que se pueda llevar a la
prctica.
Brecha: La incertidumbre y el estancamiento de los avances cientficos por dependencia de
nuevas tecnologas.
Necesidad: Necesidad de disear tcnicas de regeneracin celular que se puedan llevar a la
prctica en la atencin mdica diaria.
Idea: Disear una tcnica de regeneracin celular por estimulacin mecnica en miembros
humanos amputados.

Antecedentes
1 Medicina regenerativa.
1.1 Historia de la medicina regenerativa.
1.2 Tipos de protocolos para regeneracin.
2 Evolucin.
2.1 La evolucin en la regeneracin.
2.2 Antecedentes de regeneracin en diferentes organismos.
3 Regeneracin en la prctica.
3.1 Similitudes en la regeneracin de diferentes organismos.
3.2 Regeneracin en humanos.
3.3 Regeneracin de miembros amputados
3.4 Regeneracin por estimulacin mecnica.
1 Medicina regenerativa.
La medicina regenerativa es una disciplina con amplias ramas destinadas a la recuperacin
funcional y estructural de los tejidos y rganos que se han lesionado. Los actuales recursos que se
emplean son: clulas troncales autlogas o clulas madre, moldes de soporte para la formacin de

tejidos y rganos bioartificiales, estimulacin de las clulas para su crecimiento y diferenciacin

por medio de inductores bioqumicos artificiales o autlogos. La investigacin sobre los procesos
de proliferacin y diferenciacin celulares han sido la plataforma del desarrollo de la medicina
regenerativa.

El tratamiento definitivo en la etapa final de una lesin en un rgano es el trasplante

alognico. Los pacientes que reciben rganos donados deben recibir de por vida tratamiento
inmunosupresor.
En Estados Unidos tienen registrados 95 protocolos de terapia que emplean diferentes
modalidades de medicina regenerativa, esto en pacientes relacionados con lesiones agudas de
cerebro, corazn, hgado, vasculares perifricas, neurolgicas y dentales.

1.1 Historia de la medicina regenerativa.

El concepto de medicina regenerativa tiene pocas dcadas desde su implementacin en el rea
mdica. La regeneracin de miembros tras amputacin en algunos organismos, como las
salamandras y otras criaturas han planteado la premisa en comn dentro de la evolucin, que ha
sido el incentivo para desarrollar la medicina regenerativa en humanos.

Algunos antecedentes de la moderna medicina regenerativa en humanos son los trasplantes de

rganos. La medicina regenerativa tiene el potencial de solucionar los problemas de escasez de
rganos y el problema del rechazo del rgano. Al parecer es la medicinan del futuro si se quiere
denominar, pero la realidad es que los avances parecen estancarse un poco ms cada ao.

Hasta hace poco tiempo se pensaba que el proceso normal de regeneracin de tejidos
dependa de un estricto control de renovacin y diferenciacin de las clulas madre, dado por su
exposicin de seales externas de diferentes molculas orgnicas particularmente por los
componentes de la matriz extracelular. Ahora se sabe que otras clulas juegan un papel
importante en el proceso normal de regeneracin.

1.2 Tipos de protocolos para regeneracin.

Los ensayos clnicos se iniciaron con el empleo de las clulas madre, y han continuado con el
uso de molculas moduladoras para este tipo de clulas, y de diferentes componentes de la matriz
extracelular. Los componentes que modulan la regeneracin, proliferacin, renovacin y
diferenciacin celular y tisular son sealamientos modulados por las clulas y el ambiente que las
rodea.

Actualmente diferentes hospitales de las instituciones de salud de Estados Unidos han

registrado 4,609 protocolos clnicos en fase III que emplean distintos tipos de clulas madre o
biomolculas que favorecen su expansin. La basta cantidad de protocolos puede deberse
proporcionalmente a la gran cantidad de molculas que pueden inducir en mayor o menor grado
una regeneracin.

La identificacin de molculas inductoras de regeneracin es una de las metas fundamentales

de la medicina regenerativa porque pueden activar, in vivo, los mecanismos de reparacin tisular,
sin necesidad de recurrir a la terapia celular. Cada vez hay un nmero mayor de molculas que
pueden inducir la regeneracin, aunque a nivel bioqumico no se conozca el mecanismo de
accin.

Hoy en da se pueden reconocer por lo menos cuatro niveles en la teraputica de la medicina

regenerativa: Aplicacin de sustancias como pptidos, protenas, genes, etc., de origen humano u
otras especies como animales, plantas, bacterias, etc. Aplicacin de clulas y tejidos. Aplicacin
de clulas madre de origen embrionario y adulto. Y aplicacin de nuevos materiales.

2 Evolucin.
El ADN es una molcula que tiene la capacidad de hablarnos del pasado, debido a que tienen
una historia en su propia estructura, es el tiempo y la vida que se inscribe en la materia. La
evolucin de las clulas es y fue parte de la historia de la vida y est impregnada en los genes de
cada clula que ha llegado a nuestros das.

2.1 La evolucin en la regeneracin.

En la medicina se conoce poco o nada de la biologa evolucionista, porque se ha desarrollado
separada de la medicina. Esta brecha se debe a que los bilogos conocen poco o nada de la
medicina como al hecho de que los mdicos conocen poco o nada de biologa evolucionista, al
indagar sobre las relaciones se abren muchas nuevas posibilidades para ambas disciplinas.

2.2 Antecedentes de regeneracin en diferentes organismos.

La descripcin de un tratado sobre la reproduccin de las piernas en la salamandra acutica y
la regeneracin de hidras bajo un microscopio fueron las observaciones que dieron inicio hace
siglos al estudio de la medicina regenerativa. El asombro por parte de los primeros investigadores
fue aumentando conforme a los nuevos descubrimientos y ms recientemente el estudio de las
clulas madre ha abierto todo un mundo de posibilidades.

3 Regeneracin en la prctica
3.1 Similitudes en la regeneracin de diferentes organismos.
A pesar de los notables avances de la biologa y la medicina, muchos de la mayora de los
notables rasgos de la regeneracin de miembros en estos animales an hoy permanecen en el
misterio. Adems de la regeneracin del miembro de un anfibio como la salamandra acutica,
tambin conocemos que el pez cebra tiene la capacidad de regenerar varios rganos y hasta su
corazn daado.

3.2 Regeneracin en humanos

La potencialidad de regenerar miembros y corazones daados parece un cuento de ciencia
ficcin. Sin embargo, la capacidad de los humanos, que slo podemos regenerar grandes partes
del hgado y el pncreas y reparar en forma limitada el msculo esqueltico y el sistema nervioso
perifrico, palidece si se compara con la asombrosa habilidad que tienen los anfibios y los peces
de reparar la mayora de sus rganos, incluidos el cristalino, la retina, el msculo cardaco y el
sistema nervioso central, adems de recrear miembros y aletas amputadas.

En los mamferos, como nosotros, el hgado es uno de los pocos rganos que tiene una
capacidad notable para restaurarse completamente por s mismo despus de una prdida
significativa de tejido heptico, ya sea debido a una hepatectoma parcial o una lesin heptica
aguda.

La regeneracin del hgado despus de una hepatectoma parcial est mediada por la
proliferacin de las distintas clulas maduras residentes en el hgado hasta restaurar el tejido

heptico perdido. Sin embargo, no fue sino en estos ltimos aos que nos hemos dado cuenta de
que una clula del hgado tiene que diferenciarse hacia atrs, para pasar de un estado posmittico
hacia el ciclo celular mittico.

Aprender sobre los animales que han conservado la capacidad regenerativa hasta niveles
altamente especializados debera ser el principal objeto de estudio de la medicina regenerativa, y
explicar por qu los mamferos no ha retenido esta propiedad notoriamente til en el curso de la
evolucin. Esta es una perfecta estrategia para desarrollar mtodos para la regeneracin en
humanos.

3.3 Regeneracin de miembros amputados

La capacidad de los anfibios, como las salamandras acuticas, de regenerar un miembro entero
despus de la amputacin ha atrado la atencin de los cientficos por siglos, con la esperanza de
que fuera posible reproducir en los humanos esta utilsima habilidad. En los ltimos aos,
trabajos pioneros con estas especies han aportado muchos puntos de vista seminales.

Siguiendo a la amputacin, el miembro de la salamandra acutica sangra slo un tiempo

breve y comienza rpidamente el importante proceso de curacin de la herida que llevar a la
regeneracin del miembro. Si no se sutura la piel, la superficie del corte queda completamente
envainada por clulas de la epidermis, que proliferan y migran hacia la superficie del mun
formando un casquete.

Si la piel es suturada no se forma un casquete que ser la base de todo el proceso y el miembro
queda como un mun residual definitivo. Otra evidencia de la importancia de este paso viene de

la medicina humana: en nios pequeos con amputacin distal de los dedos puede ocurrir una
regeneracin perfecta de la punta del dedo, pero esto ocurre nicamente si no se sutura la piel del
mun.

El paso crtico siguiente es la creacin de un blastema, que es un o agregado celular, del cual
se desarrollar un nuevo miembro. Las clulas del extremo distal del mun forman una
excrecencia transparente debajo casquete primeramente formado, que prolifera en forma de cono.
Se pens por mucho tiempo que el blastema comprenda un grupo de clulas multipotentes que
tenan que especializarse nuevamente. Sin embargo, sorpresivamente, los ltimos estudios
destacados de rastreo de linajes han mostrado que las clulas no son pluripotentes, sino que cada
tejido produce clulas progenitoras con potencial restringido.

Por lo tanto, el blastema es una coleccin heterognea de clulas progenitoras restringidas, la

identidad posicional es una propiedad especfica de cada tipo de clula del blastema; en su lugar
permanecen clulas dedicadas al cartlago, hueso, nervio y msculo.

El desarrollo final es la reconstruccin de un miembro igual al amputado, con los nuevos

vasos y los finos nervios integrados sin solucin de continuidad a las estructuras existentes en el
mun, quedando con una morfologa y funcin indistinguible del resto de los miembros. Si un
animal pierde un pie le volver a crecer solamente el pie que le falta y no ms; si pierde el
miembro desde el nivel del muslo, le volver a crecer todo el faltante que una vez estaba distal al
plano de amputacin del muslo.

Comprender el mecanismo celular y molecular que le permite a una salamandra crear y

desarrollar un blastema o la simple comparacin de un renacuajo en la etapa regenerativa contra
el renacuajo que en la etapa tarda no puede regenerar su cola, permitira ayudar al desarrollo de
terapias para mejorar la capacidad de regeneracin en animales, como nosotros, que no la
tenemos.

La biologa evolutiva nos puede explicar la inhibicin del ciclo celular: Algunos han sugerido
que la prdida de la potencialidad regenerativa de los mamferos durante la evolucin, con el
avance de la complejidad, se debera a que se requiere el mantenimiento de un metabolismo de
reproduccin muy estable y esto implicara una negociacin para la proteccin de la proliferacin
de clulas que podran producir cncer.

Se ponen a prueba clulas musculares diferenciadas conocidas como miocitos, que no pueden
reentrar en el ciclo celular a pesar de exponerlas a una andanada de factores de crecimiento. Para
demostrar en forma definitiva que una clula posmittica diferenciada puede iniciar la divisin y
proliferar, fue esencial que un grupo de investigadores experimentando con miocitos lograra
proliferar miocitos mediante supresin gentica. Estos hallazgos sugieren que clulas de
mamferos diferenciadas terminalmente pueden ser indiferenciadas a un estado proliferativo,
reteniendo su identidad y sin producir tumores al transformarse.

3.4 Regeneracin por estimulacin mecnica.

Bilogos y fsicos han demostrado que si se ejerce fuerza mecnica sobre clulas se activan
protenas Rho GEF por medio de rutas de sealizacin especficas. Estas protenas Rho
pertenecen a la superfamilia RAS, una clase de protenas asociada a la actividad cancergena. Los

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autores ejercieron fuerzas sobre las clulas mediante imanes y partculas magnticas. De este
modo pudieron generar tensin extracelular.

La aplicacin de fuerza sobre integrinas provoca reconfiguraciones citoesquelticas y

crecimiento de los complejos de adhesin asociados, lo que aumenta la firmeza celular, tambin
conocida como refuerzo. Estudios de mayor envergadura estn permitiendo unos avances cada
da ms prometedores en el cultivo de tejidos sanguneos, de piel, de hgado, algunas clulas del
pncreas, vasos sanguneos, sistemas sensoriales, hueso y cartlago.

El descubrimiento del mecanismo que la evolucin haba diseado y utilizado previamente en

vertebrados inferiores, para adaptarlo al hombre de evolucin posterior, es una aventura
fascinante; ya que este mecanismo de desdiferenciacin puede ayudar a proporcionar mayor
comprensin sobre las enfermedades humanas, quizs llevar al descubrimiento y desarrollo de
drogas y, sobre todo, disear una nueva tcnica para intentar la regeneracin de nuestros tejidos
daados.

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07/09/2015,
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Gonzles G.. (2009). Terapia celular con clulas madre y medicina regenerativa. Mxico: Alfil.
Pregunta de investigacin.
Cmo se puede crear un mtodo de regeneracin celular en humanos por estimulacin mecnica
para tratar eficientemente una amputacin?

Objetivo general.
Disear un mtodo de regeneracin celular por estimulacin mecnica para tratar eficientemente
una amputacin en humanos.

Preguntas secundarias.
Cmo la estimulacin mecnica puede producir una regeneracin celular?
Un mtodo de regeneracin celular puede recuperar una porcin considerable de un miembro
amputado en humanos?

Objetivos especficos.
Investigar cmo la estimulacin mecnica puede producir una regeneracin celular.
Demostrar que la regeneracin celular puede recuperar una porcin considerable de un miembro
amputado en humanos.

Tipo de investigacin.

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Cualitativa.

Justificacin terica.
El diseo de nuevo mtodo de regeneracin celular por mtodos no convencionales abrira una
nueva rea de estudio en la ciencia.