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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO

Facultad de Ciencias de la Salud


Dr. Wilman Manuel Ruiz Vigo
Carrera Profesional de Estomatologa
EFICACIA INHIBITORIA ENTRE ACEITE ESENCIAL DE ROMERO AL 10% Y
GLUCONATO DE CLORHEXIDINA AL 0.12% EN COLONIAS DE
Porphyromonas Gingivalis DE LA CEPA ATCC 25175 IN VITRO.

Flor de Mara Snchez Quintana (Coordinadora)


Marleny Saucedo Tirado
Leonardo Rodrguez
Martin Amrico Pariona Vargas
Alison Arribasplata Narro
Jhoselyn Tatiana Fernndez Chacn (alumna no matriculada)
Leonardo Sangay Cerqun
Briscy Roncal Ruiz
Asesores:
C.D Jorge Carrascal (marco terico)
Ms. Esp. C.D. Sandra Rojas Padilla (proyecto de tesis)

Cajamarca Per

EFICACIA INHIBITORIA ENTRE ACEITE ESENCIAL DE ROMERO AL 10% Y


GLUCONATO DE CLORHEXIDINA AL 0.12% EN COLONIAS DE
Porphyromonas Gingivalis DE LA CEPA ATCC 25175

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA


1.1 Enunciado del problema
1.1.1 Descripcin del problema o datos del campo
El ser humano desde tiempos remotos ha usado a las plantas para
satisfacer sus necesidades y una de ellas es su salud. Mediante el
ensayo error, a travs del tiempo llego a determinar las propiedades
curativas de algunas plantas. Estos conocimientos fueron trasmitidos
a travs del tiempo y espacio a las generaciones actuales. La
medicina tradicional peruana, herencia de tiempos precolombinos,
sigue siendo la primera instancia de consulta y tratamiento en gran
parte de nuestro pas. En ella las plantas medicinales ocupan un rol
muy importante, con una variada flora de aproximadamente 80,000
especies.1
Las plantas medicinales son usadas en la odontologa de dos
maneras: una mediante la informacin que la medicina tradicional
provee y otra bajo la forma cientfica mediante preparados tales
como pasta dental, pasta tpica, enjuagues bucales, colutorios, etc.
para el tratamiento de gingivitis, aftas, odontalgias, procesos
inflamatorios; como fungicidas y antibacterianos.2
La planta Rosmarinus officinalis L. conocida usualmente como
romero, es conocida dese la antigedad por sus usos medicinales,
estudios

recientes

le

dan

propiedades

antimicrobianas

antioxidantes.3
El Gluconato de Clorhexidina es indicado como parte del tratamiento
periodontal en enjuagues orales y tambin puede ser usado como

irrigadores a nivel infragingival. El Gluconato de Clorhexidina es uno


de los antimicrobianos ms seguros que se conocen, ya que la
produccin de resistencia en los microorganismos bucales no es
muy significativa.
El microorganismo anaerobio al cual se expondr los enjuagues ser
la Porphyromona Gingivalis (ATCC 33277). Anaerobio obligado
hallado frecuentemente en bolsillos periodontales profundos y placa
subgingival.4
En

base

que

se

sabe

que

la

clorhexidina

es

una

sustancia antisptica de accin bactericida y fungicida. Pertenece al


grupo de las biguanidas y se utiliza ampliamente en odontologa en
concentraciones de 0,2%, 0,12% y 0,10 % en presentaciones para el
uso como colutorio o enjuague bucal. y se ha demostrado que
generan resultados positivos, esta investigacin propone evaluar
cul de estas dos es ms efectiva en colonias de Porphyromonas
Gingivalis

Por tal razn en el ao 2015, se desarrollar una investigacin en la


la Universidad Privada Antonio Guillermo Urrelo (UPAGU), ubicada
en el distrito de Cajamarca, en el noreste del Per, con el fin de
verificar si la eficacia del aceite esencial de Romero comparando con
la clorhexidina y si esta es es la esperada, para lo cual se usar el
mtodo cientfico.

1.1.2 Fundamentacin del problema o informacin documental


El romero es un arbusto perenne aromtico, perteneciente a la
familia Labiatae, caracterizada por tener aproximadamente 1.5
metros de altura, los tallos jvenes que se vuelven leosos al
madurar, presenta pequeas flores agrupadas en densas ramas
terminales.5

Tiene propiedades analgsicas, espasmoltico, antiinflamatorio,


antifngico y posible propiedad antineoplsica. 6,

El romero es

una especie vegetal comn en la pennsula Ibrica y, en general,


en toda la cuenca mediterrnea.8
Llega al Per en el siglo XVI. En el Per crece en la costa, sierra y
la selva hasta los 3500 msnm.9 Las enfermedades periodontales
representan infecciones mixtas de los tejidos periodontales,
causadas principalmente por bacterias anaerobias gramnegativas 10
La profundizacin del surco gingival que se produce durante estas
infecciones coincide con una proliferacin bacteriana importante,
desafiando al sistema inmunitario, generando una respuesta local y
una respuesta sistmica del husped. 11 En investigaciones in vitro
con aceite esencial de Rosmarinus officinalis (romero) ha
demostrado tener actividad antibacteriana frente a bacterias de la
cavidad oral como: Porphyromonas Gingivalis, Actinobacillus
actinomycetemcomitans, Fusobacterium nucleatum, Streptococcus
mutans, y Streptococcus sobrinus.12
Tambin el extracto de R.officinalis a demostrado actividad
antibacteriana contra S. mutans, S. aureus, S. casei 13 y en
Streptococcus mitis estndar de ATCC 98811, Streptococcus
sanguinis ATCC 10556, Streptococcus mutans ATCC 25175,
Estreptococcus sobrinus ATCC 27609 y Lactobacillus casei14 El
presente estudio tiene como objetivo determinar el efecto
antibacteriano in vitro del extracto etanlico de Rosmarinus
officinalis (Romero) sobre flora bacterias de bolsa periodontal.

1.2 Formulacin del problema de investigacin


Entre el aceite esencial de Romero al 10% y el Gluconato de
clorhexidina al 0.12% cual tendr mayor eficacia inhibitoria en las
colonias de Porphyromonas Gingivalis de la sepa ATCC 25175 in
vitro?

1.3 Justificacin del problema de investigacin


1.3.1 Justificacin terica
Es importante realizar esta investigacin, pues existen muy
pocas investigaciones en las que se proponga una relacin
entre las variables de estudio; adems esta investigacin en
un futuro usando los resultados que obtendremos, servir
como referencia para realizar ms investigaciones del tema y
lograr nuevos conocimientos.

1.3.2 Justificacin Bsica


En la presente investigacin se buscara reforzar los escasos
conocimientos los cuales nos permitirn orientar a futuras
investigaciones.
1.3.3 Justificacin aplicada
La importancia de esta investigacin ser en beneficio de los
profesionales de la salud con el uso de una nueva alternativa
de conocimiento y beneficio para el tratamiento de pacientes
las

cuales

sean

portadoras

de

las

Porphyromonas

Gingivalis.
1.3.4 Justificacin tecnolgica
Mediante el uso del aceite esencial de Rosmarinus officinalis
(romero) se va disear un tratamiento alternativo para
controlar la eficacia inhibitoria de la Porphyromonas Gingivalis
de la sepa ATCC 37277. Que hasta el momento se controla
con Gluconato de Clorhexidina al 0.12%. La investigacin
tendr

un

valor

estomatologa.

agregado

aplicado

la

carrera

de

1.4 Objetivos
1.4.1 Objetivos General
Evaluar la eficacia en la actividad antibacteriana del extracto
de aceite esencial de Rosmarinus officinalis (romero) y
Gluconato de Clorhexidina al 10 % en cultivos de colonias
de Porphyromonas Gingivalis de la sepa ATCC 37277.

1.4.2 Objetivos Especficos


- Evaluar eficacia inhibitoria mediante el dimetro del halo de
inhibicin con
(romero)

aceite esencial

de Rosmarinus officinalis

en concentracin de 10 %

en colonias de

Porphyromonas Gingivalis de la cepa ATCC 25175, in vitro.


- Evaluar eficacia inhibitoria mediante el dimetro del halo de
inhibicin con Gluconato de clorhexidina al 0,12% en colonias
de Porphyromonas Gingivalis de la cepa ATCC 25175, in vitro.
- Comparar la actividad antibacteriana de las dos sustancias
de experimentacin, mediante la medida del dimetro de los
halos de inhibicin generados por el aceite esencial

de

Rosmarinus officinalis (romero) y Gluconato de clorhexidina al


0,12% sobre colonias de Porphyromonas gingivalis de la cepa
ATCC 25175.

2. MARCO CONCEPTUAL
2.1 Esquemas que sustentan el esquema conceptual
A nivel internacional y a nivel regional no existen antecedentes sobre
el tema a llevar.
A nivel nacional encontramos antecedentes de una tesis de la
Universidad Nacional De San Marcos para obtener el ttulo de
cirujano dentista en el ao 2013 Lima Per, nos dice que existe
actividad antibacteriana in vitro del extracto etanlico de Rosmarinus
officinalis (romero) sobre cultivos de bacterias anaerobias frecuentes
en pacientes con bolsa periodontal. A comparacin de nuestro
proyecto de tesis sobre la variable aceite escencial de romero
(Rosmarinus officinalis), se tiene en cuenta como una variable de la
tesis referida al extracto etanlico de Rosmarinus officinalis (romero).

Teixeira L. (2012). Determin la accin antimicrobiana in vivo del


extracto de R.officinalis Linn, en bacterias orales presentes en la
biopelcula. Realiz un estudio con 11 voluntarios, quienes realizaron
un enjuague bucal con las siguientes soluciones:
placebo;clorhexidina al 0,12 (control positivo) y extracto de R.
officinalis Linn, en 3 fases de 14 das cada uno. El ndice de higiene
oral simplificado se utiliz para determinar la accin de las
soluciones en la biopelcula. Despus del uso de clorhexidina, el 64
% de los voluntarios presento buena higiene y menos del 36 %
limpieza regular, con una media de 1,16. Despus de usar extracto
de R. officinalis el 54 % presento buena higiene y 45 % limpieza
regular, con una media de 1,3.19.
Genena A. y Col. (2008). Evaluaron la actividad antioxidante,
antibacteriana y
anti fngica del extracto de R. officinalis. Se us una tcnica para la
obtencin del extracto llamada: Extraccin con fluidos supercrticos
(SFE), tcnica eficaz para la separacin de compuestos activos de
las hierbas. El extracto de R. officinalis mostro mayor actividad

antibacteriana contra las bacterias Gram-positivas (Staphylococcus


aureus ATCC 25923 y Bacillus cereus ATCC 11778) el extracto se
hizo ms eficiente con el paso tiempo de extraccin (MIC 0.25 y
0.125 mg/ml espectivamente). Tambin mostr un efecto contra las
bacterias Gram-negativas (Escherichia coli ATCC 25922 y
Pseudomonas aeruginosaATCC 27853) con un MIC 1.0 mg/ml. El
extracto obtenido en los primeros 60 minutos no present actividad
antifngica suficiente para inhibir el crecimiento de C. albicans (MIC
> 2.0 mg/ml), pero el obtenido con un perodo de extraccin
creciente este lleg a presentar actividad (MIC= 0.5 mg/ml).30
Koo et al. (16) evaluaron la actividad antibacteriana in vitro del
extracto etanlico propleo y de la Arnica montana sobre bacterias
orales (Streptococcus mutans,Actinomyces naeslundi,Actinomyces
viscosus,Porphyromonas gingivalis yTreponema denticola).
Muli y Maingi (11) evaluaron la actividad antimicrobiana del propleo
de tres regiones de Kenia (Taita, Tana y Samburu) sobre
Pseudomona aeuroginosa,Escherichia coli y Staphylococcus El
extracto etanlico de propleo al 10% de la regin de Tana y
Samburu tenan una mayor actividad.antibacteriana que el extracto
etanlico de propleo al 10% de la regin de Taita (p<0,05). aureus.

2.2 Bases del esquema conceptual


En base a Rengifo R 7 (Per, 2013) y Moromi, H et al 8 (Per,
2009) que demostraron la actividad antibacteriana in vitro de los
propleos contra microorganismos patgenos orales como la
Porphyromonas gingivalis.
As se crea el siguiente esquema conceptual: el extracto etanlico
de propleo peruano deber usarse para obtener mayor eficacia
inhibitoria en colonias de Porphyromonas gingivalis de la cepa
ATCC 25175 que el gluconato de clorhexidina al 0,12% in vitro.
De lo cual se deriva el siguiente contexto de investigacin.

a. Aceite esencial del romero: La especie vegetal Rosmarinus


officinalis L. perteneciente a la familia Lamiaceae, y conocida
popularmente como romero, es una especie originaria de la
regin mediterrnea, rica fuente de metabolitos activos, esta
planta es muy usada en la medicina tradicional por sus efectos
digestivos, antiespasmdicos y carminativos (4).
El aceite esencial obtenido de sus hojas es considerado como
un antimicrobiano natural que puede ser utilizado en la
produccin de nuevos agentes con actividad antimicrobiana
para la industria farmacutica y alimentara (5). Su actividad
contra algunas cepas patgenas ha sido reportada por varios
autores (6-11). Se han realizado estudios in vitro con extractos
de R. officinalis en los que se ha evaluado su actividad
inhibitoria Gram positivas y Gram negativas.
b. Gluconato de clorhexidina al 0.12%: El espectro antibacteriano
de la clorhexidina segn lo referido por Bascones A et al
(Espaa, 2002) incluye tanto a bacterias gram positivas como
gram negativas, algunos virus como el HIV y algunos hongos,
pero slo es esporicida a elevadas temperaturas. Su utilizacin
es amplia y es el agente ms efectivo para tratamientos
periodontales 11. Los vehculos de administracin que se
utilizan con ms frecuencia son los colutorios (a una
concentracin de 0,12 y 0,2%), aerosoles (0,12 y 0,2%), geles
(0,12 y 1%) y barnices, su eficacia est relacionada con la
concentracin de la misma y la frecuencia de aplicacin. La
accin preventiva del barniz de clorhexidina sobre la
enfermedad periodontal, fue determinada por primera vez en
estudios in vitro por Petersson et al, donde se demostr una
alta sensibilidad a la clorhexidina, tanto de Porphyromonas
gingivalis como de Actinobacillus actinomycetencomitans,
bacterias que se hayan altamente implicadas en su etiologa 12.
c. Eficacia inhibitoria: Se puede definir como la resistencia de
cepas de bacterias gram positivas y gram negativas dndose
la concentracin mnima inhibitoria expuestas a frmacos
bacteriostticos como flavonoles, flavononas y flavononoles,

se mide a travs del dimetro (milmetros) de los halos de


inhibicin.

2.3 Discusin del esquema conceptual


La investigacin consistir en confirmar el esquema
conceptual que se ha creado. Las razones por las que se cre el
esquema conceptual son las que refiere Takarada K. y col.
(2004)11, comprob que el aceite esencial de Rosmarinus
officinalis con una concentracin inhibitoria mnima de 0.5%
inhibi el crecimiento de las bacterias Gram-negativas A.
actinomycetemcomitans, P. gingivalis y F. nucleatum. Dalirzani Z.
y col. (2011)20 demostr el efecto antimicrobiano del extracto
etanlico de R.officinalis sobre Streptococcus mutans, la media de
la zona de inhibicin fue 11,52 0,96 significativamente menor
que la clorhexidina (14.07 1.70). Castao H. y Col. (2010)16
comprobaron la actividad antimicrobiana del extracto etanlico de
R. officinalis contra las bacterias S. sonnei, S. typhimurium y L.
monocytogenes. Monroy A. y Col. (2009)26 evaluaron la actividad
antimicrobiana del extracto etanlico de R. officinalis, comparado
con clorhexidina al 0,12% . in vitro contra Listeria monocitogenes,
Salmonella typhi Staphylococcus aureus, donde encontraron una
inhibicin del 90% de las UFC. Alves M. y Col. (2008)12
estudiaron la actividad antimicrobiana de Rosmarinus officinalis
sobre especies de microorganismos predominantes en el biofilm
supragingival, como en cepas de Streptococcus mutans,
Streptococcus mitis, Setreptococcus sobrinus y Lactobacillus
casei demostr ser susceptible a la accin del observndose
halos de inhibicin de 11 a 20mm. Silva M. y Col. (2008)13
comprobaron actividad antimicrobiana del extracto hidroalcholico
de R. officinalis sobre cepas estndar como Streptococcus
sanguinis , Streptococcus mutans, Estreptococcus sobrinus y
Lactobacillus casei , Se observ halos de inhibicin del
crecimiento bacteriano de 11 a 18 mm. En la investigacin de

Albado E et al 15 (Per, 2001) en la actualidad existe una gran


variedad de agentes antimicrobianos, llamados colutorios, entre
estos la clorhexidina al 0,12 %, como el agente ms utilizado en el
medio, dada su eficacia en la eliminacin de microorganismos
cariognicos. Sin embargo, presenta efectos adversos de este
medicamento generalmente leves y transitorios en especial
manchas pardas en los dientes, la lengua, prtesis y
restauraciones de silicato y resina, as como la alteracin pasajera
de la percepcin gustativa y descamacin de la mucosa oral que
limitan su utilizacin 16. Adems la clorhexidina es una sustancia
antisptica que tiene un amplio espectro de actividad frente a
bacterias gram positivas y gram negativas, y en especial es eficaz
frente a estreptococos del grupo mutans, estreptococos simples,
Selenomonas spp y Propionibacterium spp, sin embargo, su
accin sobre los hongos es evaluada como relativa y no es
esporicida, ni virucida ni acta sobre bacterias cido-alcohol
resistentes. En concentraciones elevadas suele ser bactericida y
en concentraciones bajas, bacteriosttica
2.4. Definicin de trminos bsicos
2.4.1. Aceite esencial de Romero al 10 %: Uso de Aceite
Esencial de Romero ( Rosmarinus officinalis L) al 10% .
2.4.2. Gluconato de clorhexidina al 0,12 %: Uso de gluconato
de clorhexidina al 0,12 %.
2.4.3. Eficacia inhibitoria: Dimetro del halo de inhibicin.

3. HIPTESIS Y OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES


3.1. Hiptesis
3.1.1.Hiptesis de investigacin o trabajo
Hi: Aceite escencial de Romero (Rosmarius officinalis) al 10%
debe usarse para obtener mayor eficacia inhibitoria que el
gluconato

de

clorhexidina

al

0,12

en

colonias

de

Porphyromonas gingivalis de la cepa ATCC 25175 in vitro.


1.1.1. Hiptesis nula
H0: Aceite escencial de Romero (Rosmarius officinalis) al 10%
gluconato de clorhexidina al 0,12 %.
Interpretacin de la hiptesis nula
La media poblacional del Aceite

Escencial del Romero (

Rosmarius officinalis) tendr menor o igual eficacia inhibitoria que


la media poblacional del gluconato de clorhexidina al 0,12 % en
colonias de Porphyromonas ginvivalis de la cepa ATCC 25175 in
vitro.
1.1.2. Hiptesis alterna
La media poblacional Alternativa del Aceite escencial del romero
(Rosmarius officinalis) tendr mayor eficacia inhibitoria que la
media poblacional del gluconato de clorhexidina al 0,12 % en
colonias de Porphyromonas ginvivalis de la cepa ATCC 25175 in
vitro

3. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1
Pallar T, Plantas tiles para Emergencia y Primeros Auxilios. II Congreso
Internacional de Medicinas Tradicionales. rea Farmacognosia; 1988 Junio
26-29; Lima, Per.
2
Calixto M. Plantas medicinales utilizadas en odontologa parte I. Kiru 2006;
3(2): 80.
Afonso M. y col. La actividad antimicrobiana y antioxidante del romero
(Rosmarinus officinalis L.) filetes de tilapia (Oreochromis spp) saladas

durante el almacenamiento congelado. Revista Brasileira de Plantas


Medicinais 2008; 10(2): 12-17. vol. (4):6. Disponible

Barni M, fontanals A, Moreno S. Estudio de la eficacia antibitica de un

extracto
etanlico de Rosmarinus officinalis L. contra Staphylococcus aureus en dos
modelos
de infeccin en piel de ratn. Boletn Latinoamericano y del Caribe de
Plantas
Medicinales y Aromticas 2009;8 (3):219-223.
4

http://www.cop.org.pe/bib/tesis/MARIA%20DE%20GUADALUPE
%20FRANCHESTY%20MONTESTRUQUE.pdf

5
Alonso J. Tratado de fitomedicina: bases clnicas y farmacolgicas. Buenos
Aires: ISIS
Ediciones SRL, 1998.

6
Arruda TA. Estudio etnofarmacobotanico y actividad antimicrobiana de
plantas
medicinales [Tesis]. Paraiba, Brasil: Universidad Estatal de Paraba. 2002.
7
Amorim JA. Fitoterapia y salud de la comunidad popular: propuesta para el
diagnstico
integracin en los servicios de salud en Campina Grande, Paraba, Brasil.
[Tesis].
Bauru, So Paulo, Brasil: Universidad de So Paulo. 1999.
8
Trnsito M, Lpez L. El romero Planta aromtica con efectos antioxidantes.
Ambito
Farmaceutico Fitoterapia 2008 jul/ago; 27(7): 123-129.
9

Per ecolgico. Romero (Rosmarinus officinalis); [2 paginas]


http://www.peruecologico.com.pe/flo_romero_1.htm; consultado Setiembre
17, 2012.
10
Haffajee, AD, Socransky SS. Microbial etiological agents of destructive
periodontal
diseases. Periodontology 2000 1994; 5: 78-111.
11
Lindhe J. Periodontologa clnica e Implantologa odontolgica. 4ta ed.
Buenos Aires.
Mdica Panamericana. 2005.
12
Takarada K, Kimizuka R, Takahashi N, Honma K, Okuda K, Kato T. A
comparison of
the antibacterial efficacies of essencial oils against oral pathogens. Oral
Microbiol
Immunol 2004; 19: 61-64.
13
Alves PM, Pereira JV, Higino JS, Pereira MSV, Queiroz LMG. Atividade
antimicrobiana
e antiaderente in vitro do extrato de Rosmarinus officinalis linn. (alecrim)
sobre
microrganismos cariognicos. Arquivos em Odontologia 2008 Abril/Junio.

14
Silva. MSA, Silva MAR, Higinio JS. Atividade antimicrobiana e antiaderente
in vitro do
extrato de Rosmarinus officinalis Linn. sobre bactrias orais planctnicas.
Revista
Brasileira de Farmacognosia 2008 Abr./Jun.; 18(2): 236-240.
15

Abutbul S, Goldhirsh G, Barazani O, Zilberg D. Use of Rosmarinus


officinalis L. as a treatment against Streptococcus iniae in tilapia (Oreochromis
sp.). Aquaculture. 2004 Sep; 238 (1-4): 97-105.
5. Mounchid K, Bourjilat F, Dersi N, Aboussaouira T, Rachidai A, TantaouiElaraki A, et al.The susceptibility ofEscherichia coli strains to essential oils of
Rosmarinus officinalis and Eucalyptus globules. Afr J Biotechnol. 2005 Oct; 4
(10): 1175-1176.
16.
Abate G, Mshana RN, Miorner H. Evaluation of a colorimetric assay based
on 3-(4,5-dimethyl-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide for rapid detection of
rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis. Int J Tuberc Lung D. 1998
Dec; 2 (12): 1011-1016.
17.
Moreira MR, Ponce AG, Del Valle CE, Roura SI. Inhibitory parameters of
essential oils to reduce a foodborne pathogen. Food Sci Technol Int. 2005
Aug;38 (5): 565-570.