TEMA 15: ESPECTROMETRA DE MASAS ATMICA

La espectrometra de masas tomica es muy utilizada para identificar los elementos presentes en muestras
de materia y determinar sus concentraciones. Casi todos los elementos de la tabla peridica se pueden
determinar mediante espectrometra de masas. La espectrometra de masas atmica ofrece numerosas
ventajas frente a los mtodos espectromtricos pticos atmicos. Entre dichas ventajas estn
1. Los lmites de deteccin que para muchos elementos son tres rdenes de magnitud mejores que en
los mtodos pticos.
2. Espectros notablemente sencillos que casi siempre son nicos y a menudo se interpretan con
facilidad.
3. Capacidad para medir relaciones isotpicas atmicas.
Entre las desventajas estn:
1. El costo del instrumento es de dos a tres veces mayor comparado con los instrumentos pticos
atmicos.
2. La deriva del instrumento puede ser de 5 a 10 % por hora y 3.
3. Ciertos tipos de interferencias.
Un espectrmetro de masas es un instrumento que produce iones y los separa de acuerdo con sus relaciones
masa/carga (m/z). La mayor parte de los iones que se estudian tienen una sola carga, de modo que la
relacin es simplemente el nmero de masa del ion.
En todos los casos, alguna forma de energa es transferida a las molculas (o tomos) a analizar para afectar
la ionizacin. Las molculas ionizadas del analito explotan en una variedad de fragmentos ionizados, el
patrn de fragmentacin resultante as como los iones residuales constituyen el espectro de masas. En
principio, el espectro de masas de cada compuesto es nico y puede ser usado como la huella qumica
para caracterizar el analito.

El pico ms alto se denomina pico base o pico de referencia y se le asigna el valor arbitrario de 100.
Normalmente el espectrmetro asigna de forma automtica el pico base y luego normaliza los picos
restantes en el espectro en relacin al pico base.
Un anlisis por espectrometra de masas atmica consta de las etapas siguientes:
1. Atomizacin.
2. Conversin de una fraccin significativa de los tomos formados en la etapa 1 en un flujo de iones
(casi siempre positivos en una sola carga).
3. Separacin de los iones formados en la segunda etapa con base en su relacin masa/carga (m/z),
donde m es el nmero de masa del in en unidades de masa atmica y z es el nmero de cargas
fundamentales.
4. Conteo del nmero de iones de cada tipo o medicin de la corriente inica producida cuando los
iones formados a partir de la muestra inciden en un detector adecuado.
Masas atmicas en espectrometra de masas
Las masas atmicas y moleculares se expresan generalmente en unidades de masa atmica (uma) o en
Daltons (Da). El dalton se define en relacin con el peso del istopo de carbono 126 , al cual se le asigna
exactamente un peso de 12 uma. Por consiguiente, la uma, o Da se define como 1/12 de la masa de un
tomo neutro de 126 , es decir:

Entonces la unidad de masa atmica es

La masa atmica relativa de un istopo como el 35

17 se mide entonces respecto a la masa del tomo de
referencia 126 . El cloro 35 tiene una masa que es 2.914071 veces mayor que la masa del istopo de carbono.
Por tanto, la masa atmica del istopo del cloro es:

En espectrometra de masas, a diferencia de otros mbitos de la qumica , interesa con frecuencia la masa
exacta m de determinados istopos de un elemento o la masa exacta de los componentes que contienen un
cierto grupo de istopos. Por tanto, es necesario poder diferenciar entre las masas de los compuestos como:

La masa atmica qumica o masa atmica promedio(A) de un elemento en la naturaleza viene dado por la
ecuacin:

Donde A1,A2,,An son las masas atmicas, en daltons, de los n isotopos de un elemento y p1,p2,,pn son las
abundancias fraccionarias de estos istopos en la naturaleza. Naturalmente la masa atmica qumica o
promedio de un compuesto es entonces la suma de las masas atmicas qumicas de los tomos que
aparecen en la frmula del compuesto. Por consiguiente, la masa molecular qumica del CH4 es 12.01115+(4
x 1.00797)= 16.0434 Da. La masa atmica o molecular expresada sin unidades es el nmero de masa.
Otro trmino que se utiliza es la relacin masa- carga de un in atmico o molecular. Para un in esta es la
relacin adimensional entre su nmero de masa y el nmero de cargas fundamentales z que tiene. Por
consiguiente:

EJEMPLO:
Espectro de masas del etilbenceno (Masa molecular 106 Da)

El producto

principal del etilbenceno es

el C6H5CH2 , surge de la prdida de un grupo CH3. Tambin se forman otros fragmentos ms pequeo,
aunque en menor cantidad, con carga positiva.

EJEMPLO:
Espectro de masas del cloruro de metileno (Masa molecular 84 Da)

El pico de base aparece a una relacin m/z= 49 que corresponde a la prdida de un tomo de Cl.

El pico del in molecular aparece a una masa correspondiente a la masa molecular del analito, m/z=
84.

Se puede observar los picos correspondientes a las especies isotpicas ms importantes:

El tamao de los diferentes picos depende de la abundancia relativa de los istopos.

COMPONENTES DE UN ESPECTRMETRO DE MASAS

El objetivo del sistema de entrada es introducir una cantidad muy pequea de muestra en la fuente de iones,
donde los componentes de dicha muestra se transforman en iones gaseosos gracias al bombardeo de
electrones, fotones, iones o molculas. Otra manera de lograr la ionizacin es aplicar energa trmica o
elctrica. La salida de la fuente de iones es un flujo de iones positivos, que es lo ms comn, o iones
negativos gaseosos que son acelerados en el analizador de masas.
La funcin del analizador de masas es similar a la de un monocromador de un espectrmetro ptico. En el
analizador de masas la dispersin depende de la relacin masa- carga de los iones del analito y no de la
longitud de onda de los fotones.
Al igual que un espectrmetro ptico, un espectro de masas contiene un transductor que convierte el haz
de iones en una seal elctrica que pueda ser procesada, almacenada en la memoria de una computadora y
mostrada de una pantalla o almacenada en otros medios. A diferencia de los espectrmetros pticos, los
espectrmetros de masas requieren un complejo sistema de vaco para mantener una presin baja en todos
los componentes, excepto en los sistemas para procesar la seal y de lectura. La presin baja asegura
colisiones no frecuentes en el espectrmetro de masas para producir y conservar iones y electrones libres.

1. Sistema de entrada: su objetivo es introducir una pequea cantidad de muestra (un micromol o
menos) en el espectrmetro de masas. A menudo el sistema de entrada contiene un medio que
permite la volatilizacin de muestras slidas o lquidas.

Vaporizacin electrotrmica (ETV):

-

Una alcuota de la muestra se introduce en un pequeo horno de grafito y se procede con un

programa de temperaturas.

Se obtienen seales transitorias en forma de pico ms o menos achatado dependiendo de la

velocidad de volatilizacin y volatilidad de los elementos.

Adecuado para:
-En caso de disponer slo de pequeos volmenes de muestra
-Muestras slidas
-Muestras difciles de disolver (slurries)

Ablacin Laser (LA):

Consiste en una cmara de ablacin donde los fotones de un lser inciden en un punto especfico de la
muestra slida para vaporizarla. La elevada energa de los fotones laser origina, al interaccionar, pequeas
partculas, tomos e iones de las capas atmicas superficiales de la muestra creando un aerosol sobre la
superficie de la misma. Este aerosol es transportado a ICP-MS a travs de un flujo de gas inerte
(normalmente Ar).

Empleado para el anlisis directo de muestras slidas.

El proceso de ablacin lser fuertemente en el ICP-MS no se corresponde con la composicin de la muestra.

2. Fuente de ionizacin: convierte los componentes de la muestra de iones. Esto puede conseguirse
por bombardeo con electrones, molculas o fotones. Alternativamente tambin puede lograrse la
ionizacin mediante energa trmica o elctrica. En muchos casos la fuente de ionizacin y el sistema
de entrada estn combinados en un nico componente. Si se emplean fuentes de fase gas la
muestra es primero volatilizada y despus ionizada, si se emplean fuentes de desorcin la energa se
transmite directamente a la fase slida o lquida, producindose la ionizacin y la transferencia de
los iones al estado gaseoso.
Existen diversos tipos de fuentes de ionizacin segn los distintos tipos de muestras y para
diferentes aplicaciones. De forma general se distinguen dos tipos: duras y blandas.
a) Las fuentes duras comunican elevadas energas a los iones formados, de esta forma estos iones
se encuentran en niveles vibracionales y rotacionales muy elevados. La relajacin de estos iones

produce gran cantidad de fragmentacin, resultando espectros de masas de gran complejidad,

nicos para cada compuesto como una huella dactilar y que permiten la identificacin
inequvoca del mismo. Un ejemplo muy representativo de fuente dura es la de impacto de
electrones, en la que la muestra se bombardea con un haz de electrones de elevada energa.
b) Las fuentes blandas por el contrario, producen relativamente poca excitacin de los iones de
modo que tiene lugar poca fragmentacin y los espectros son sencillos. Estos espectros suelen
permitir la determinacin exacta del peso molecular de un compuesto. Entre las fuentes blandas
ms empleadas estn la de ionizacin qumica, que emplea unos iones gaseosos reactivos y la de
electroaspersin (o electronebulizacin).

3. Aceleracin y enfoque: el sistema est formado por una serie e lentes electroestticas entre las que
existe una elevada diferencia de potencial que imprime a las partculas su velocidad final.El enfoque
de los iones se realiza mediante un sistema de lentes electroestticas que coliman y focalizan el haz
de iones. demas de dirigir y enfocar los iones, el sistema de lentes inicas es responsable de
separar los iones de las especies neutras y de los fotones gracias a los campos electroestticos
creados.

4. Analizadores: deben ser capaz de distinguir un haz de iones de masa m de otro de masa m+m
muy prxima. Debera permitir el paso de iones suficientes para producir corrientes inicas fciles de
medir. Anlogos a los monocromadores pticos.

*RESOLUCIN Y PODER DE RESOLUCIN: capacidad de un espectrmetro de masas de distinguir

entre masas

Dependiendo de la aplicacin se requiere mayor o menor poder de resolucin:

Para diferenciar iones de la misma masa nominal: poder de resolucin de varios miles.

Iones de bajo peso molecular que difieren de una unidad o mas: poder de resolucin inferior a 50.

Para cuantitativa, se considera que dos picos estn separados si la altura del valle entre ellos no es
mayor del 10% de su altura.

Los espectrmetros comerciales disponibles tienen un poder de resolucin que va de 500 a 500000.

Un espectrmetro con poder de resolucin = 4000 distingue picos con m/z= 400.0 m/z= 40.00 ya
que:

*LMITE MSICO SUPERIOR: cualquier espectrmetro permite determinar la relacin m/z hasta un valor
mximo. La correspondiente masa ms elevada , en Daltons, depende por tanto del nmero de cargas z
transportadas por el in. Por ejemplo, si m/z llega a 2000, el equipo podr detectar una masa de 80000Da si
el ion lleva una carga de 40e.
*SENSIBILIDAD: la sensibilidad de un espectrmetro de masas se mide en relacin al peso de la muestra
consumido por segundo (algunos pg/s o fmol/s) para obtener una seal de intensidad normalizada. Dado
que los iones estn permanentemente renovndose, los espectros se obtienen por barridos repetidos.
*TRANSMISIN: es la razn entre el nmero de iones que llega al detector y el nmero de iones producido
por la fuente.
TIPOS DE ANALIZADORES

Analizadores de sector magntico (enfoque simple)

-El campo magntico sirve para separar los iones en base a su masa/carga.
-El radio de curvatura descrito por los iones es una funcin del campo magntico (B) aplicado.
-El campo magntico es generado por una corriente de intensidad variable.
-Solo aquellos iones cuyo radio de curvatura descrito coincida con el del sector magntico
alcanzarn el detector.

-Equipos voluminosos.
-Requieren alto vaco (10-7 torr)
-La dispersin del haz de iones conduce a prdidas de resolucin. Todos los iones que salen de la
fuente de ionizacin no tienen la misma energa cintica. En una fuente EI la dispersin de valores de
energa cintica puede ser mayor de 1eV y en el caso de una fuente FAB de 4eV. Este rango de

valores causa una imagen difusa en el detector porque el campo magntico no puede enfocar los
iones de la misma masa y diferente energa cintica hacia un mismopunto.
-Su principal caracterstica es que permiten trabajar a alta resolucin (diferenciar m/z que solo
difieren a partir del cuarto decimal) con gran sensibilidad.

Analizador de sector elctrico:

-El analizador electrosttico dispersa un haz inico de acuerdo a sus energas cinticas.
-Los iones con igual energa cintica se movern en una trayectoria comn de igual radio r.
-El radio de curvatura descrito por los iones es una funcin voltaje de aceleracin V y el campo
elctrico.

Analizadores de doble enfoque:

-Se consigue utilizando combinaciones de campos magnticos y electrostticos. El electrosttico

acta sobre el haz de iones a modo de filtro energtico y el analizador magntico enfoca nicamente
un ion con determinada m/z en el plano focal.
-Capaces de alcanzar resoluciones del orden de 105.
-tiles para la determinacin exacta de m/z.
-Muy sensibles sobre todo a valores elevados de la razn m/z.

Analizadores de cuadrupolo
-Consiste en cuatro rodillos paralelos a los que se aplica una corriente continua (DC) sobre la que se
superpone una corriente alterna (RF)
-El campo creado en los rodillos acta a modo de filtro y determina los iones que alcanzarn el
detector.

-Su funcionamiento no depende de la energa cintica de los iones cuando estos abandonan la
fuente de ionizacin.
-El alcance de masas, o relacin m/z ms elevada detectable, se limita a unos 4000th
-Tiempos de barrido pequeos (<100ms) lo que los hace tiles para realizar barridos de picos
cromatogrficos en tiempo real.
-Robustos.
-Compactos.
-Bajo coste.
-Baja resolucin (aprox. 3000). Resolucin unitaria.
-Son los analizadores ms ampliamente utilizados en los espectrmetros de masas modernos.
-Puede utilizarse como lente de enfoque, dejando que todos los iones con m/z superiores a un
mnimo dado por V lo atraviesen (potencial esttico nulo(U) y valores adecuados del potencial
alterno).

-Un espectrmetro de masas puede utilizar varios analizadores cuadrupolares situados uno despus
de otro (tndem de masas en el espacio), con lo que se pueden realizar diferentes tipos de barrido.(
ejemplo: EM cuadrupolar triple)

TIPOS DE DETECTORES

SISTEMA DE VACO

ESPECTROMETRA DE MASAS ELEMENTAL (ICP-MS)

APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRA DE MASAS MOLECULAR

Las principales aplicaciones de la espectrometra de masas molecular pueden resumirse en:

Elucidacin de la estructura de molculas orgnicas y biolgicas.

Determinacin del peso molecular de pptidos, protenas y oligonucletidos

Identificacin de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel.

Determinacin de secuencias de aminocidos en muestras de polipptidos y protenas.

Deteccin e identificacin de especies separadas por cromatografa y electroforesis capilar.

Identificacin de drogas de abuso y sus metabolitos en sangre, orina y saliva.

Control de gases en enfermos respiratorios durante los procesos quirrgicos.

Pruebas para confirmar la presencia de drogas en sangre de caballos de carreras y en atletas

olmpicos.

Datacin de ejemplares en arqueologa.

Anlisis de partculas en aerosoles.

Determinacin de residuos de pesticidas en alimentos.

Control de compuestos orgnicos voltiles en el agua de suministro.

1. Identificacin de compuestos puros:

Se establece mediante una comparacin de su espectro de masas con los de compuestos

conocidos hasta llegar a una total coincidencia, suponiendo:

Que los modelos de fragmentacin son nicos

Que las condiciones experimentales se pueden controlar lo suficiente como para

conseguir espectros reproducibles.

La ionizacin por impacto de electrones es el mtodo de eleccin para la comparacin de espectros.

Existen sistemas computarizados de comparacin de espectros. El espectro de masas de un
compuesto proporciona datos tiles para su identificacin (peso molecular, frmula molecular,
presencia o ausencia de grupos funcionales)
-Determinacin de los pesos moleculares a partir de los espectros de masas:
Se requiere la identificacin del ion molecular, o en algunos casos del pico (M+1)* y (M-1)*. Tambin
hay que tener en cuenta el tipo de fuente de impacto de electrones utilizada. Cuando existen dudas,
son tiles los espectros adicionales de ionizacin qumica, de ionizacin por campo y de ionizacin
por desorcin.

-Frmulas moleculares
-

A partir de esos pesos moleculares exactos es necesaria la identificacin del ion molecular, y
conocer la masa exacta de la molcula. Requiere un instrumento de alta resolucin

A partir de relaciones isotpicas: pico molecular suficientemente intenso para que su altura
y la de sus istopos puedan determinarse con precisin. Especialmente til para la
determinacin y estimacin del nmero de tomos de azufre, cloro y bromo que hay en la
molcula dado que contribuyen en gran medida a la formacin de (M+2)*.

2. nalisis de mezclas por mtodos espectrales de masas acoplados:

Los espectros de masas de mezclas son muy complejos y en la mayora de las ocasiones
imposibles de interpretar.
Se utilizan los mtodos acoplados (cromatografa/espectrometra de masas, espectrometra de
masas en tndem.

3. Determinacin cuantitativa de especies moleculares:

A partir de las alturas de pico de los espectros de masas.

A partir de las reas y alturas de pico de los cromatogramas y electroferogramas

Patrn externo

Patrn interno

nalogo estable del analito marcado isot

APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRA DE MASAS ATMICA

-Aplicaciones cualitativas, semicuantitativas y cuantitativas

Medioambiente: medida de contaminantes en los distintos compartimentos

medioambientales.(anlisis de aguas, efluentes de procesos industriales y domsticos, lodos, suelos,
sedimentos y biota.)

Geologa: determinacin de elementos traza en diversas matroces (tierras raras, metales

nobles(Pt,Pd,Rh,Ru,Ir,Os,Re y Au)

Estudio de materiales: pureza de los materiales involucrados en la fabricain de materiales

especiales (semiconductores. Industria nuclear.

Medicina y Biologa: determinacin a nivel de traza de diversos elementos txicos en matrices

biolgicas (elementos txicos, metabolismo de metales y en general de biomolculas asociadas a un
elemento metlico.

-Medida de la relacin isotpica

Medidas tiles para arquelogos y gelogos (establecimiento de la edad de los artefactos y de los
distintos depsitos), qumicos y clnicos (emplean los materiales enriquecidos isotpicamente como
marcadores en distintos tipos de estudios.

Medidas mas rpidas aunque menos reproducibles que las obtenidas mediante atomizacin e
ionizacin trmica.

Medioambiente: medida en las variaciones de las relaciones isotpicas de ciertos elementos como
indicadores de procesos en distintos compartimentos medioambientales.( 15N: contaminacin de
aguas por residuos urbanos y granjas,13C: procedencia del CO2 de efecto invernadero,2H y 18:
estudio de acuferos.)

Geologa: determinacin de la edad de formaciones geolgicas (relaciones isotpicas de los sistemas

U-Th-Pb, Rb-Sr,Sm-Nd,

Industria nuclear: control del enriquecimiento de 235U en el reprocesado de combustibles nucleares.

Medicina y Biologa: las molculas marcadas con istopos radiactivos y/o estables han sido
especialmente tiles para aclarar las trayectorias metablicas de la sntesis y degradacin
bioqumicas (15N: fijacin de nitrgeno en plantas, 13C : dficit de amilasa, metabolismo oxidativo de
cidos grasos y carbohidratos,57Fe,67Zn,63Cu,74Se: dficit de micronutrientes.