[INFORME DE BIOQUIMICA PRACTICA N.

2]

DE 2015

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: MEDICINA
CTEDRA: BIOQUMICA PRCTICA II
DOCENTE: DRA. ROSA ELISA CRUZ
PERIODO ACADEMICO:
MARZO - AGOSTO 2015
DATOS GENERALES:
SEMESTRE: SEGUNDO PARALELO: B
GRUPO:

C
1. ATACUSHI ROSERO SHIRLEY MICHELLE
2. FIALLOS CASTILLO PAMELA PRISCILA (COORDINADOR)
3. PATIO BRAVO KARLA VANESSA
4. MEDINA GAVIDIA KAREN STHEFY

INFORME No. 2
FECHA DE REALIZACIN DE LA PRCTICA: Martes 19 de mayo de 2015
FECHA DE PRESENTACIN DEL INFORME: Martes 26 de mayo de 2015

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1. TEMA: Determinacin cuantitativa de Glucosa Basal suero sanguneo

2. OBJETIVO(S)
2.1 OBJETIVO GENERAL
Cuantificar adecuadamente la concentracin de glucosa basal en suero sanguneo..
2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Identificar el mtodo de anlisis utilizado en esta determinacin.
Conocer los valores de referencia para glucosa en suero sanguneo en ayunas.
Calcular la concentracin de glucosa en una muestra de suero obtenido.
Interpretar los resultados obtenidos y correlacionarlos con su importancia

biomdica.
Expresar los resultados obtenidos en unidades SI (mmol/L).
Interpretar los trminos linealidad y lmite de deteccin para esta determinacin.
Realizar diluciones de suero sanguneo de ser necesario con solucin salina.

3. FUNDAMENTO TEORICO

La glucosa es el carbohidrato ms importante en los mamferos, por ser su principal

fuente de energa y, la nica en el feto y los tejidos glucodependientes (retina, eritrocitos
y el epitelio germinativo de las gnadas). Adems de esta vital funcin tiene otra de
gran importancia, por ejemplo: puede almacenarse como glucgeno, se puede
transformar en lpidos, origina la ribosa para los cidos nucleicos y puede formar
complejos con protenas.
La glucosa es derivada de la degradacin de los carbohidratos, incorporados a travs de
la dieta diaria y regulada a travs de los procesos de gluconeognesis (sntesis endgena
a partir de aminocidos y otras sustancias) y glucogenolisis (degradacin del depsito
de glucgeno heptico).
El nivel en sangre se mantiene a travs de la ingesta y de hormonas reguladoras como la
insulina, glucagn y epinefrina. Las determinaciones de glucosa se realizan en sangre
total, Plasma, Suero, Lquido Cefalorraqudeo, Lquido Pleural y orina.
REACCIONES QUIMICAS DE LOS MONOSACARIDOS
Los monosacridos tienen un grupo aldehdo

o una cetona y varios hidroxilos;

consecuente con ello los cambios qumicos a los que estn sujetos se relacionan con las

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transformaciones de estas funciones: se ven afectados por los cidos, bases, las altas
temperaturas y los agentes oxidantes y reductores que provocan su isomerizacin,
enolizacin, deshidratacin oxidacin , etc.
Bases: Segn la concentracin que se emplee, los hidroxidos inducen diversas
transformaciones en los monosacridos; en soluciones dbiles provoca enolizacin y
aun fragmentacin del azcar, a las que pueden seguir reacciones secundarias.
cidos: La isomerizacin de los azcares en condiciones cidas es muy lenta en
comparacin con la que se efecta con las bases; la enolizacin de los azcares es
lenta tambin en condiciones cidas. Sin embargo las reacciones de deshidratacin
son ms rpidas y se aceleran ante altas temperaturas produciendo derivados
furanos.
Altas temperaturas: Las altas temperaturas aceleran todos los cambios que sufren
los monosacridos en condiciones tanto cidas como alcalinas, pero a pH neutro
catalizan las reacciones de caramelizacin y de oscurecimiento no enzimtico.
Otras reacciones: Existen reacciones qumicas o enzimticas de reduccin y de
oxidacin en las que interviene el grupo aldehdo de los monosacridos, que se
transforma en su correspondiente alcohol primario o en cido carboxlico,
respectivamente.
METODO DE ANALISIS: ENZIMTICO COLORIMTRICO, PUNTO FINAL
CONDICIONES DE REACCION: COLOR PROPORCIONAL A LA
ABSORBANCIA
GLUCOSA
En la reaccin de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa
oxidasa (GOD), con formacin de perxido de hidrgeno. En presencia de
peroxidasa (POD), el fenol y la 4-minoantipirina (4-AA) se condensan por accin
del perxido de hidrgeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la
concentracin de glucosa en la muestra.

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En muestras hemolizadas las enzimas liberadas de los hemates originan una

disminucin de la tasa de glucosa presente, obtenindose valores bajos falsos.
Adicionalmente la catalasa presente compite con la peroxidasa por el perxido de
hidrogeno dando as mismo valores errneo bajos.

INTERFERENCIAS:
-

Lipemia puede afectar los resultados.

Bilirrubinas (>10mg/dL) puede afectar los resultados.
Hemoglobina (>1g/dL) puede afectar los resultados.
VALORES DE REFERENCIA
En suero o plasma en ayunas
70-105 mg/dL (3,89Adultos

5,83mmol/L)
60-110mg/dL (3,33-

Nios
Neonato

6,11mmol/L)
40-60mg/dL (2,22-

3,33mmol/L)

SIGNIFICADO CLINICO
Un aumento anormal en la tasa de glucosa sangunea, conocida como
hiperglucemia, puede estar asociado con la Diabetes Mellitus y con la
hiperactividad de las glndulas (adrenales, tiroides o pituitaria).
La hipoglucemia o disminucin anormal por debajo de la tasa hallada en ayunas, se
observa en casos de sobredosis de insulina, tumores secretores de insulina,
hipopituitarismo, enfermedad de Addison, mixedema y condiciones que interfieren
con su absorcin.

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La determinacin de glucosa en sangre, es una prueba clave para evaluar y

diagnosticar desrdenes relacionados con el metabolismo de los carbohidratos.
VALORES DE REFERENCIA
Plasma.
MTODO:
Enzimtico colorimtrico, punto final reactivos:
EQUIPOS
Centrifugadora
Espectrofotmetro
REACTIVOS
Suero o plasma heparinizado libre de hemlisis, en ayunas.
La glucosa es estable unas 24 horas a 2-8C, cuando el suero o el plasma se
separan dentro de los 30 minutos posteriores a la extraccin.
Agua destilada
Solucin salina
PROCEDIMIENTO
-

Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente

Pipetear en los tubos rotulados:

TUBOS

BLANCO

PATRON

MUESTRA

(STANDARD)
(SUERO)
Reactivo
1mL
1mL
1mL
Standard
10L
Muestra(Suero)
10L
Mezclar y reposar los tubos 10 minutos a temperatura ambiente cinco minutos
a 37C.

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Leer la absorbancia (A) del patrn (standard) y de la muestra frente al blanco del

reactivo. El color es estable 2 horas protegido de la luz.

Calcular la concentracin de glucosa mg/dL, Para expresar los resultados en

unidades SI aplicar: mg/dL*0.0555=mmol/L

Muestras con concentraciones superiores a 500mg/dL deben diluirse 1:4 con

solucin salina y repetir el ensayo. Multiplicar los resultados por 4.

- Lmite de deteccin=0.63mg/dL
- Linealidad= 500mg/dL
4. CALCULOS
Absorbancia B: 0,292 U/L
Absorbancia del Estndar: 0,347 U/L
Absorbancia Muestra 1: 0,268 U/L
Absorbancia Muestra 2: 0,234U/L
Concentracin de la glucosa basal = A muestra x C estndar
A estndar
Concentracin de la glucosa basal =

0.268
0.347

Concentracin de la glucosa basal = 77,233 mg/dl

5. RESULTADOS Y DISCUCIONES
Datos del Paciente
Nombre: Mara Irene Cumbicos Santn
Edad: 35 aos
Sexo: Mujer
Fecha de anlisis: Martes 19 de mayo de 2015
Hora: 09h00 am
Tipo: Glucosa
Muestra: Suero
Ayunas: Si
Antecedentes Familiares: Diabticos
Patologia en especial: Ninguna

100 mg
dl

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Los resultados de los anlisis realizados demuestran una concentracin de glucosa

dentro de los valores normales.
OBSERVACIONES

Se observ que la muestra de sangre obtenida de personas con diabetes tena

un tono mucho ms oscuro de las personas sin esta patologa

Observamos que al mezclar el reactivo con el plasma dio un tono rojo claro.
6. CONCLUSIONES
Al terminar esta prctica determnanos que el aumento o disminucin de los
valores referenciales de glucosa pueden indicar una patologa como la
diabetes

Tras tomar la muestra de sangre y luego de centrifugarla fue posible obtener

el suero necesario para realizar la practica

La glucosa es un monosacrido con frmula molecular, misma que la

fructosa pero con diferente posicin relativa de los grupos -OH y =O

RECOMENDACIONES

Es importante tomar las medidas de precaucin correctas por lo que se sugiere

usar bien las herramientas del laboratorio ya que puede alterar los resultados
Se debe pipetear de manera correcta pues el resultado depende mucho de cmo

se pipetee la muestra.
Para obtener la muestra de sangre el paciente obligatoriamente se debe encontrar

en ayunas
7. CUESTIONARIO
1. Qu es un azcar reductor y no reductor, seale ejemplos de los mismos?
Los azcares reductores son aquellos azcares que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto, y que a travs del mismo pueden reaccionar como reductores con
otras molculas.
Todos los monosacridos son azcares reductores, ya que al menos tienen un -OH
hemiacetlico libre, por lo que dan positivo a la reaccin con reactivo de Fehling, a la
reaccin con reactivo de Tollens, a la Reaccin de Maillard y la Reaccin de Benedict.
Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan equilibrio con la forma

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abierta, presentan mutarrotacin (cambio espontneo entre las dos formas cicladas
(alfa) y (beta)), o decir que forma osazonas. Ejemplos
Monosacridos reductores incluyen glucosa, gliceraldehdo y galactosa. Muchos
disacridos, como la lactosa y maltosa, tambin tener una forma de reducir, como una
de las dos unidades pueden tener una forma de cadena abierta con un grupo aldehdo.
Sin embargo, sacarosa y trehalosa, en la que los carbonos anomricos de las dos
unidades estn unidas entre s, son disacridos no reductores ya que ninguno de los
anillos es capaz de apertura.
En los polmeros de glucosa tales como almidn y derivados de almidn como el jarabe
de glucosa, maltodextrina y dextrina la macromolcula comienza con un azcar
reductor, un aldehdo libre. Ms almidn hidrolizado contiene ms azcares reductores.
El porcentaje de azcares reductores presentes en estos derivados de almidn se llama
equivalente de dextrosa.
Azucares no reductores.- Los disacridos son azucares formados por la unin de dos
monosacridos mediante el enlace glucosdico. Si este enlace se efecta entre dos
carbonos anomricos, el disacrido no tendr el potencial aldehdo o cetona libre, por lo
tanto no dan positivas aquellas pruebas que involucren la participacin de estos grupos,
recibiendo el nombre de azcar no reductor, la sacarosa y la trealosa son ejemplos de los
disacridos no reductores. Ejemplos:
-Azcares no reductores: Oligosacridos y Polisacridos.
Oligosacridos: molculas formadas por 2 a 10 monosacridos.
Polisacridos molculas formadas por ms de 10 monosacridos. Ej: almidn, Celulosa,
Glucgeno, Ac. Hialurnico
2. Explique

las

reacciones

qumicas

que

nos

permiten

identificar

Carbohidratos (por ejemplo prueba de Benedict, Molish, etc).

1. Reaccin de Molisch
La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reaccin de

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Molisch, que a cierto punto es la reaccin universal para cualquier carbohidrato. Se basa
en la accin hidrolizante y deshidratante del cido sulfrico sobre los hidratos de
carbono. En dicha reaccin el cido sulfrico cataliza la hidrlisis de los enlaces
glucosdicos de la muestra y la deshidratacin a furfural (en las pentosas) o
hidroximetilfurfural (en las hexosas).Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del
reactivo de Molisch (reaccin de Molisch) dando un producto coloreado
2. Reaccin de Benedict
Una de las reacciones ms comunes en la identificacin de carbohidratos es la reaccin
de Benedict. Esta reaccin es especfica para azcares con grupo reductores libres
(C=O).Todos los monosacridos poseen un grupo reductor libre. Los disacridos
maltosa y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que
se pierden los grupos reductores de sus componentes cuando sta es formada. Se basa
en la capacidad del carbohidrato de reducir el
+2 Cu en un medio alcalino. Este +1 Cu se oxida y precipita en forma deOCu2, lo que
proporciona la coloracin positiva de la reaccin. La coloracin depender de la
concentracin de xido de cobre y sta a su vez de la reduccin del cobre; va desde
verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la coloracin
3. Reaccin de Seliwanoff
Los carbohidratos se clasifican como cetosas o aldosas. Vale decir, que lascetosas en el
carbono 2 tienen una funcin cetona, que en presencia de uncido fuerte producen
rpidamente derivados furfricos que reaccionancon un difenol llamado resorcina que
est contenido en el reactivo deSeliwanoff. La sacarosa (un disacrido formado por
glucosa y fructosa) yla inulina (un polisacrido de la fructosa) dan positiva la reaccin,
ya queel HCl del reactivo provoca en caliente la hidrlisis del compuestoliberando
fructosa (responsable de la reaccin positiva).
3. Explique la diferencia entre los siguientes tipos de Diabetes: Diabetes
Mellitus (DM) tipo I, Tipo II, Diabetes Gestacional.
Diferencias
DM tipo 1 (DM1): debida a la destruccin de la clula beta y, en general, con dficit

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absoluto de insulina.
DM tipo 2 (DM2): debida a un dficit progresivo de secrecin de insulina sobre la base
de una insulinoresistencia.
Diabetes gestacional (DG): DM diagnosticada durante el embarazo es causada por el
bloqueo de la insulina por parte de las hormonas del embarazo.
4. Signos y sntomas de la Diabetes Mellitus (DM) tipo I, Tipo II y Diabetes
Gestacional.
Diabetes Mellitus (DM) tipo I:
Los siguientes sntomas pueden ser los primeros signos de diabetes tipo 1 o pueden
ocurrir cuando el azcar en la sangre est alto:

Estar muy sediento

Sentirse hambriento

Sentirse cansado a toda hora

Tener visin borrosa

Sentir entumecimiento o sentir hormigueo en los pies

Perder peso sin proponrselo

Orinar con mayor frecuencia (incluso el hecho de orinar de noche o mojarse en

la cama en los nios que pasaban las noches secos antes)

Respiracin profunda y rpida

Boca y piel seca

Cara enrojecida

Aliento con olor a fruta

Nuseas o vmitos, incapacidad para retener lquidos

Dolor de estmago

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Diabetes Mellitus (DM) tipo II

Las personas con diabetes tipo 2 generalmente no presentan sntoma alguno al principio
y es posible que no tengan sntomas durante muchos aos.
Los sntomas iniciales de la diabetes pueden abarcar:

Infeccin en la vejiga, el rin, la piel u otras infecciones que son ms

frecuentes o sanan lentamente

Fatiga

Hambre

Aumento de la sed

Aumento de la miccin

El primer sntoma tambin puede ser:

Visin borrosa

Disfuncin erctil

Dolor o entumecimiento en los pies o las manos

Diabetes Gestacional.
En la mayora de los casos no se presentan sntomas. El diagnstico se realiza durante
un estudio prenatal de rutina.
En casos en los que se presentan sntomas, estos pueden incluir:

Visin borrosa

Fatiga

Infecciones frecuentes, entre ellas las de vejiga, vagina y piel

Aumento de la sed

Incremento de la miccin

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Nuseas y vmitos

Prdida de peso a pesar de un aumento del apetito

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5. Explique los signos y sntomas de la persona que presenta diabetes

inspida, y como se presentan los parmetros bioqumicos bsicos?
Se debe esta enfermedad a carencias en la sntesis de la llamada hormona antidiurtica,
ADH o vasopresina, o bien a un bloqueo en su accin, o una falla en los riones para
responder al ADH.
Esta sustancia es secretada por la neurohipfisis y tiene como principal misin regular y
limitar la eliminacin de agua a travs de la orina y acta en el tbulo renal, impidiendo
de esta forma la eventual deshidratacin del organismo.
Si se registra una disfuncin o destruccin de los ncleos hipotalmicos (centros
cerebrales donde se sintetiza la ADH), o de los conductos a travs de los cuales se
conduce la ADH, tiene lugar el desarrollo de la diabetes inspida. Si la produccin de la
hormona es normal y son los tbulos renales los que no responden a la accin de la
vasopresina, se produce la diabetes inspida nefrognica. En cualquiera de los dos casos
se registra una gran poliuria, llegndose a eliminar hasta quince litros de orina por da,
cuando los niveles normales no superan los dos litros diarios.
Al mismo tiempo, los pacientes padecen una intensa sensacin de sed y existe riesgo de
deshidratacin. A diferencia de la diabetes mellitus en este proceso no se detecta exceso
de glucosa en sangre ni orina; de ah el nombre de inspida.
En muchos casos el tratamiento no es necesario, pero pueden administrarse hormonas
de composicin afn a la vasopresina, drogas para ayudar a los riones a que respondan
al ADH, o administrarse frmacos diurticos.
Los sntomas de la diabetes inspida pueden ser:

Aumento en la cantidad de produccin de orina

Sed excesiva

Confusin y cambios en la lucidez mental debido a la deshidratacin y a un nivel

de sodio ms alto de lo normal en el cuerpo si la persona es incapaz de bebe

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8. ANEXOS

Karen Medina
Pipeteando reactivo de
glucosa

Pamela Fiallos colocando

10u/L de suero

ui

Michelle Atacushi colocando

Michelle Atacushi y Karla
la muestra sangunea dentro
Patio
de la centrifugadora

BIBLIOGRAFIA
http://docsetools.com/articulos-enciclopedicos/article_88324.html

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https://espanol.answers.yahoo.com/question/index?
qid=20080227145957AAc9uvf
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000305.htm
http://es.scribd.com/doc/23351531/Reacciones-de-Identificacion-Para-LosCarbohidratos#scribd
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000313.htm