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de
sus
vidas.
Con
independencia
del
pronstico,
el
y rganos. En
para
buscar
ventajas
sobre
las
clulas
normales
en
una
DIAGNSTICO
El diagnostico de cncer se basa fundamentalmente en la biopsia de tejido.
Nunca
debe
realizarse
el
diagnostico
sin
obtener
tejido;
ningn
los
especialistas
en
enfermera
oncolgica,
los
Anemia
La anemia en el cncer es frecuente y puede producirse por diferentes
causas: 1) dficit de Fe, vitamina B12 y cido flico; 2) liberacin de
citocinas como IL-2, IL-6, TNF, que provocan una anemia hipocrmica de los
procesos crnicos; 3) infiltracin medular, y 4) efecto de la radioterapia o
quimioterapia por bloqueo intramedular de hierro.
Tambin, la hemorragia por lesiones agudas de la mucosa gstrica es
frecuente en pacientes que reciben antiinflamatorios y glucocorticoides, y
que estn sometidos a un gran estrs.
El tratamiento de la anemia se basar en la suplementacin de Fe, cido
flico o vitamina B12, en funcin del dficit en el paciente, y en la
administracin de eritropoyetina. Las transfusiones se reservarn para
anemias agudas, pacientes muy sintomticos o valores de hemoglobina por
debajo de 8 g/L.
La eritropoyetina estimula la produccin de hemates en la mdula sea.
Para conseguir respuesta a la misma, las concentraciones sricas de hierro
deben ser adecuadas, lo cual con frecuencia slo se consigue mediante la
administracin I.V. de carboximaltosa de hierro con mejores resultados que
la administracin p.o. La aplicacin de eritropoyetina en pacientes con
valores de hemoglobina inferiores a 10 g/dL (100 g/L) disminuye en un 62%
los requerimientos de transfusin.
Desnutricin y caquexia
La anorexia es un sntoma muy frecuente en los pacientes con cncer y
puede ser debida a mltiples causas: psicolgicas (depresin), efecto del
tumor que invade el tracto intestinal, inhibicin directa del centro del
apetito
travs
de
protenas
tumorales
por
los
tratamientos
Astenia
Es otro sntoma muy frecuente en pacientes con cncer. Lo primero que hay
que hacer es diagnosticar si es psicolgica (por depresin muy frecuente en
estos pacientes) o somtica. Hay que descartar causas somticas que, con
frecuencia, producen astenia, como la anemia, alteraciones metablicas
(valores bajos de Na, K, Ca, Mg, glucemia, etc.), la quimioterapia o agentes
biolgicos, progresin tumoral rpida, afeccin del SNC o gastritis crnica o
alteraciones intestinales crnicas. Con frecuencia es fcil diagnosticar la
causa mediante anamnesis dirigida y anlisis de laboratorio. Entonces, cabe
orientar el tratamiento. Con frecuencia hay un componente de depresin
psquica que mejora con antidepresivos y ansiolticos. Los protectores de la
mucosa gstrica, como omeprazol o pantoprazol 40 mg/d p.o. osimilares
suelen mejorar la astenia producida por quimioterapia.
Cuando la astenia se produce por progresin tumoral, puede mejorar con
glucocorticoides o mejor con medroxiprogesterona 160 mg p.o. varias veces
CLASIFICACION TNM
OBJETIVOS:
La estadificacin describe la extensin o gravedad del cncer que aqueja a una
persona. El conocer el estadio (o etapa) de la enfermedad ayuda al mdico a
hacer un plan del tratamiento y a calcular el pronstico de la persona.
QU ES LA ESTADIFICACIN?
La estadificacin describe la gravedad del cncer que aqueja a una persona
basndose en el tamao o en la extensin del tumor original (primario) y si el
cncer se ha diseminado en el cuerpo o no. La estadificacin es importante por
las siguientes razones:
La
estadificacin
ayuda
al mdico a
planificar
el tratamiento apropiado.
El estadio del cncer se puede usar para calcular el pronstico de una persona.
Conocer el estadio del cncer es importante para identificar los estudios
clnicos que podran ser una opcin adecuada de tratamiento para un paciente.
Las
clulas cancerosaspueden
tambin
sitio
del tumor
primario y
el tipo
de
clula (p.
QU ES EL SISTEMA TNM?
El sistema TNM es uno de los sistemas de estadificacin de cncer de mayor
uso. Este sistema ha sido aceptado por la Union for International Cancer Control
(UICC), y por el American Joint Committee on Cancer, AJCC. La mayora de los
establecimientos mdicos usan el sistema TNM como mtodo principal al dar
algn informe sobre el cncer.
El sistema TNM se basa en el tamao o extensin (alcance) del tumor
primario (T), el grado de diseminacin a los ganglios linfticos (N) cercanos, y la
presencia de metstasis (M) o de tumores secundarios que se formen por la
diseminacin de las clulas cancerosas a otras partes del cuerpo. Un nmero
se aade a cada letra para indicar el tamao o extensin del tumor primario y el
grado de diseminacin del cncer.
Tumor primario (T)
TX
T0
Tis
T4
Ganglios linfticos regionales (N)
NX
N0
MX
M0
M1
Estadio
Definicin
Estadio 0
Carcinoma in situ.
Estadio I,
Estadio II y
Estadio III
Estadio IV
estadificacin
de
Ann
Arbor
se
usa
comnmente
para estadificar linfomas y ha sido adoptada tanto por la AJCC como por la UICC.
Sin embargo, otros cnceres de sangre o de mdula sea, incluidos la mayora
de los tipos deleucemia, no tienen un sistema definido de estadificacin.
Otro sistema de estadificacin, creado por la International Federation of
Gynecology and Obstetrics (FIGO), se usa para clasificar el estadio de cnceres
de cuello del tero, de tero, de ovarios, de vagina y de vulva. Este sistema se
basa tambin en informacin de TNM. Adems, a la mayora de los cnceres
infantiles se les asigna un estadio ya sea por el sistema TNM o por los criterios
del Grupo de Oncologia Infantil (COG), el cual lleva a cabo estudios clnicos para
nios; sin embargo, otrossistemas de estadificacin pueden usarse para
algunos cnceres de la niez.
Muchos registros de cncer, como el programa de Surveillance, Epidemiology,
and End Results (SEER) financiado por el Instituto Nacional del Cncer, usan
una "estadificacin concisa". Este sistema se usa para todo tipo de cncer.
Agrupa los casos de cncer en cinco categoras principales:
Regional: El
cncer
se
ha
diseminado
ms
all
del sitio
Los estudios
de
imgenes producen
imgenes
de
regiones
computarizada (TC),
la
resonancia
magntica
(RM)
las
funciones
del hgado y
de marcadores de
tumores
de clulas cancerosas y
del grado
del
tumor.
QU ES LA REESTADIFICACIN?
Los mdicos pueden reevaluar el cncer de una persona despus de terminado
el tratamiento para determinar cmo respondi la enfermedad al mismo. Esta
reevaluacin, o reestadificacin, tambin puede hacerse cuando el cncer
ha regresado y puede requerir ms tratamiento. La reevaluacin comprende las
mismas pruebas que se hicieron cuando se diagnostic el cncer por primera
vez. Despus de las pruebas, el mdico puede asignar una nueva estadificacin
al cncer. Esta nueva estadificacin ser precedida por la letra "r" para indicar
que refleja la reestadificacin. La estadificacin original al momento del
diagnstico no cambia.
ANN ARBOR
CLASIFICACIN PARA NEOPLASIAS NO SLIDAS
En la estadificacin de los linfomas se utiliza la clasificacin de Ann Arbor,
que se desarroll inicialmente para la enfermedad de Hodgkin. De esta
forma, los linfomas se estadifican en :
Estado I: afectacin de una regin individual de ganglios linfticos, o
afectacin localizada de un rgano o localizacin extralinftica
individual sin afectacin ganglionar.
Estado II: afectacin de dos o ms regiones ganglionares en el mismo
lado del diafragma o afectacin localizada de un rgano o afectacin
extralinftica individual junto con afectacin ganglionar regional.
Estado III: afectacin de ganglios a ambos lados del diafragma.
Estado IV: afectacin difusa o diseminada de uno o ms rganos
extralinfticos, con o sin afectacin asociada de ganglios linfticos.
GENETICA
BASES GENTICAS DEL CNCER
EL CNCER ES UNA ENFERMEDAD DE BASES GENTICA S
El cncer surge a travs de una serie de alteraciones somticas en el DNA que culminan
en la proliferacin celular irrestricta. Muchas de las alteraciones mencionadas
comprenden cambios secuenciales reales en el DNA (es decir, mutaciones). Pueden
aparecer como consecuencia de errores aleatorios en la rplica, exposicin a
carcingenos (como radiacin), o por defectos en los procesos de reparacin del DNA.
Muchos de los canceres aparecen de manera espordica, pero tambin en algunas
familias que poseen una mutacion germinal en un gen oncolgico se observa
agrupamiento de algunas neoplasias, es decir, aparecen en varios de sus miembros.
HISTORIA
En los ltimos 25 aos ha tenido aceptacin general el planteamiento de que la
progresin del cncer es impulsada por mutaciones somticas seriadas en genes
especficos. Antes de que se contara con el microscopio se pensaba que el cncer estaba
compuesto de cmulos de moco u otro material acelular. A mediados del siglo xix se
pudo advertir que los tumores eran masas de clulas y estas ltimas surgan de clulas
normales de los tejidos en los cuales se originaba la neoplasia. Sin embargo, durante
ms de 100 aos no se conocieron las bases moleculares de la proliferacin incontrolada
de las clulas cancerosas. En ese lapso, se plantearon diversas teoras de su origen. El
gran bioqumico Otto Warburg, propuso la teora de la combustin que sealaba que el
cncer era producto del metabolismo anormal de oxgeno. Adems, algunos autores
pensaron que todos los canceres eran causados por virus, y que de hecho constituan
enfermedades contagiosas.
Al final, las observaciones del cncer que afectaba a deshollinadores, estudios
radiogrficos y los datos abrumadores que demostraban que el humo de cigarrillos era
un agente causal del cncer de pulmn, junto con las investigaciones de Ames sobre la
mutagnesis qumica, apuntaron pruebas convincentes de que el cncer se produca
gracias a cambios en el DNA. En trminos generales, no se comprob la exactitud de la
teora viral en las neoplasias (con excepcin de los virus del papiloma humano que
Con base en las observaciones de que la frecuencia del cncer aumenta durante el
envejecimiento y tambin datos de estudios de gentica molecular, se piensa ahora que
se necesitan cinco a 10 mutaciones acumuladas para que una clula evolucione de su
situacin normal y alcance finalmente un fenotipo maligno absoluto. Los cientficos
Los dos tipos de genes ejercen sus efectos en la proliferacin tumoral gracias a su
capacidad de controlar la divisin (nacimiento) o la muerte (apoptosis) de clulas, pero
por mecanismos muy complejos. Los oncogenes, a pesar de que estn estrictamente
regulados o controlados en clulas normales, experimentan mutaciones en las clulas
cancerosas, mismas que hacen que dicho control quede anulado, y ello hace que
aumente la actividad de los productos gnicos. El fenmeno de mutacin comentado
surge de manera tpica en un solo alelo del oncogn y acta de manera dominante. A
diferencia de lo comentado, la funcin normal de los genes supresores de tumores es
frenar y controlar la proliferacin celular, funcin que se pierde en el cncer. Dada la
naturaleza diploide de las clulas de mamferos, es importante inactivar ambos tipos de
alelos para que una clula pierda totalmente la funcin del gen oncosupresor, y as surge
un mecanismo recesivo a nivel celular. Knudson y otros investigadores, a partir de las
ideas anteriores y datos de estudios de la forma hereditaria del retinoblastoma,
plantearon la hiptesis bifactorial o de la inactivacin de las dos copias (doble
inactivacin) en la cual, en su versin actual, seala que en el cncer deben quedar
inactivadas las dos copias del gen oncosupresor
Se ha identificado a un subgrupo de genes supresores de tumores, los cuidadores, que
no modifican de manera directa la proliferacin celular, sino que mas bien controlan la
capacidad de la clula para conservar la integridad de su genoma. Las celulas con defi
ciencia de tales genes tienen un ndice mayor de mutaciones en todos sus genomas que
incluyen a los oncogenes y los genes supresores de tumores.
Loeb fue el primero en plantear la hiptesis del fenotipo mutador para explicar la
forma en que durante toda la vida de una persona se producen mltiples fenmenos de
mutacin necesarios para la oncognesis. Se ha observado en alguna forma de cncer un
fenotipo mutador, como en las neoplasias que surgen por virtud de deficiencias en la
reparacin de discordancias en el DNA. Sin embargo, la mayor parte de los canceres no
incluye defi -ciencia de la reparacin y su rapidez de mutacin es semejante a la
observada en clulas normales. A pesar de lo comentado, muchos de los canceres en
cuestin al parecer poseen un tipo diferente de inestabilidad gentica que influye en la
prdida o la ganancia de cromosomas completos o grandes partes de los mismos (como
sera explicado luego).
tumores, refleja el hecho de que es menos posible que las mutaciones con ganancia de
funcin surjan, en comparacin con las mutaciones que simplemente originan prdida
de actividad. Sobre tal base, en teora, la inactivacin de un gen se puede realizar por
medio de la introduccin de un codn de interrupcin en cualquier punto de la secuencia
de codificacin, en tanto que las activaciones necesitan de sustituciones exactas en
residuos que de alguna manera originan un incremento de la actividad de la protena
codificada. Como dato importante, la especificidad de las mutaciones de oncogenes
permite contar con oportunidades para el diagnostico, porque es mas facil elaborar
mtodos que identifiquen mutaciones en posiciones definidas, que otros orientados a
detectar cambios aleatorios en un gen.
AMPLIFICACIN DE DNA
El segundo mecanismo de activacin de los oncogenes es la amplificacin de secuencias
de DNA, que origina sobreexpresion del producto genico; ese incremento en el nmero
de copias de dicho acido nucleico puede originar alteraciones cromosmicas
identificables por tcnicas citolgicas, conocidas como regiones de tincin homognea
(HSR, homogeneous staining regions), si estn integradas dentro de los cromosomas, o
cuerpos cromatnicos dobles diminutos (dmins, double minutes) si estn en un sitio
extracromosomico. La identificacin de la amplificacion de DNA se obtiene gracias a
algunas tcnicas citogeneticas como la hibridacin genomica comparativa (CGH,
comparative genomic hybridization), o la hibridacion in situ por fluorescencia (FISH,
fluorescence in situ hybridization), con la cual se visualizan las aberraciones
cromosmicas y para ello se usan colorantes fluorescentes. Adems, se cuenta hoy con
tcnicas de micromatrices multigenicas (microchip de DNA) no citogeneticas, para
identificar cambios en el nmero de copias, con gran resolucin. Se han utilizado
nuevas tcnicas de establecimiento de secuencias basadas en tramos cortos, para valorar
las amplificaciones. El mtodo anterior, cuando se coteja con los instrumentos de
secuenciacin de la siguiente generacin, permite obtener el mximo grado de
resolucin y de cuantificacin posible. Con la tecnica de micromatrices y las
tecnologias de secuenciacion es posible repasar todo el genoma en busca de ganancias
y perdida de secuencias de DNA y de este modo se pueden precisar con exactitud las
regiones cromosomicas que muy posiblemente contienen genes que son decisivos en la
genesis o en la progresin del cncer.
Las translocaciones son particularmente frecuentes en tumores linfoides, tal vez porque
dichas lneas celulares poseen la capacidad de redisponer su DNA para generar
receptores antignicos. De hecho, los genes del receptor de antgeno intervienen a
menudo en las translocaciones, lo cual denota que en la patogenia pudiera participar la
regulacin imperfecta de la predisposicin del gen del receptor. Un ejemplo interesante
es el linfoma de Burkitt, un tumor de linfocitos B que se caracteriza por la translocacin
recproca entre los cromosomas 8 y 14.
El anlisis molecular de dicho tipo de linfoma demostr que los puntos de rotura se
produjeron dentro del locus MYC del cromosoma 8 o muy cerca de el o dentro del locus
d las cadenas inmunoglobulinas pesadas en el cromosoma 14, todo lo cual dio como
resultado la activacin transcriptiva de MYC. La activacin acrecentada, gracias a la
translocacion, a pesar de no ser unnime, interviene importantemente en la progresion
maligna. Adems de los factores de transcripcion y las molculas de transduccion de
impide
la
La perdida del segundo alelo APC funcional en los tumores que surgen en familias con
FAP tiene lugar gracias a la perdida de la heterocigosidad. Sin embargo, de tales miles
de adenomas benignos algunos invariablemente tendran mas anormalidades e incluso un
subgrupo al final terminara por ser un cncer totalmente maligno. Por todo lo anterior,
se considera que la APC actua como guardabarrera de la tumorigenesis en el colon: en
caso de que no haya mutacin de tal guardabarrera (o de un gen que acta en la misma
forma), simplemente no aparecer un tumor colorrectal.
No se conoce en detalle la funcin de la protena APC, pero posiblemente permite la
diferenciacin, y envia seales apoptosicas a las clulas del colon, al migrar en su
ascenso en las criptas. Los defectos de tal proceso pueden culminar en la acumulacion
anormal de clulas que en circunstancias corrientes deben mostrar la apoptosis.
A diferencia de las personas con poliposis adenomatosa familiar, las que tienen un
cancer de colon no poliposico hereditario (HNPCC, hereditary non-polyposis colon
cancer) o sndrome de Lynch, no presentan poliposis multiple; en vez de ella terminan
por mostrar solo un adenoma o unos cuantos de ellos que evolucionan rpidamente
hasta la forma de cncer. Muchos de los casos de HNPCC son producto de mutaciones
de uno de los cuatro genes de reparacin de las desigualdades de DNA (cuadro 83-3),
que son componentes de un sistema de reparacin que se encarga en circunstancias
normales de corregir errores en el DNA que surgi de una replica reciente. Las
mutaciones de la lnea germinal en MSH2 y MLH1 explican mas de 90% de los casos de
HNPCC, en tanto que las mutaciones de MSH6 y PMS2 son mucho menos frecuentes.
Cuando una mutacin somtica inactiva el alelo natural o salvaje restante de un gen que
interviene en la reparacin de desigualdades, la clula termina por mostrar un fenotipo
hipermutable que se caracteriza por inestabilidad genomica profunda, en particular para
las secuencias cortas repetitivas llamadas microsatlites. La inestabilidad de los
microsatelites (MSI, microsatellite instability) induce la aparicin de cncer al
incrementar la rapidez y el numero de mutaciones en muchos genes, incluidos los
oncogenes y los genes supresores de tumores.
Por ello, cabria considerar a tales genes como guardianes. Como dato interesante,
tambin se identifica en el cncer de colon inestabilidad
cromosmica (CIN), pero al parecer MSI y CIN son excluyentes en forma mutua, lo
cual sugiere que representan mecanismos alternativos para la generacin de un fenotipo
mutante en dicho cncer. Otros tipos de cncer rara vez muestran MSI, pero muchos si
presentan CIN.
las
mutaciones
de
para identificar los genes vinculados con la predisposicion a mostrar cncer de mama
(BRCA1 y BRCA2), melanoma (p16INK4) y cancer de colon (genes APC y HNPCC).
Ante los problemas inherentes de los estudios genticos, como costo, especificidad y
sensibilidad, todava no es adecuado plantear la practica de los mismos a la poblacin
general. Sin embargo, la realizacin de dichas pruebas puede ser apropiada en algunas
subpoblaciones en que existe un riesgo mayor probado, incluso sin un antecedente
familiar definido. Por ejemplo, dos mutaciones en el gen BRCA1 (185delAG y
5382insC)
de
susceptibilidad
al
cncer
mamario,
presenta
una
frecuencia
MICRO-RNA Y CNCER
Los microRNA (miRNA) son pequeos RNA no codifi cadores de 20 a 22 nucleotidos
de longitud que participan en la regulacion genica postranscriptiva.
Los estudios sobre leucemia linfocitica cronica originalmente sugirieron un vinculo
entre los miRNA y el cncer, cuando se advirtio que en casi todos los tumores habia
delecion o disminucin del numero de miR-15 y miR-16. Desde esa fecha se ha
descubierto expresin anormal de varios miRNA en algunas neoplasias de seres
humanos. La expresin aberrante de tales miRNA en el cncer se ha atribuido a
mecanismos como redisposiciones cromosomicas, cambios en el numero de copias
genomicas, modificaciones epigeneticas, defectos en la via de biogenesis de miRNA y
regulacion por factores transcriptivos.
Desde el punto de vista funcional se ha sugerido que los microRNA contribuyen a la
tumorigenesis, a causa de su capacidad de regular las vias de senales oncogenas. Por
ejemplo, se ha demostrado que la estructura en que actuan miR-15 y miR-16 es el
oncogen BCL2, y hace que disminuya el numero de clulas leucemicas y surja
apoptosis. Como otro ejemplo de participacion de microRNA en las vas oncogenas, el
gen oncosupresor p53 puede, por medio de transcripcion, inducir miR- 34 despues de
estres genotoxico, induccion importante para mediar la funcion de p53. La expresion de
microRNA es extraordinariamente especifica y hay datos de que sus perfiles de
expresin pueden ser tiles
accin de dichos virus, pero siempre abarcan la activacin de vas que estimulan la
proliferacin o la inhibicin de productos supresores de tumores de las clulas
infectadas. Por ejemplo, las protenas E6 y E7 de HPV se unen e inactivan los genes
supresores de tumores p53 y pRB, respectivamente.
No basta la intervencin de virus para la gnesis del cncer, pero constituyen una
alteracin en la serie de varias fases en la evolucin y progresin del cancer.
CANCER
CARCINOGENESIS
Mecanismos genticos y epigenticos. Lo expuesto anteriormente, anticipa de alguna
manera algunos de los mecanismos intrnsecos celulares que podran estar afectados en
el proceso de la carcinognesis.
Para que una clula normal cambie su fenotipo y se convierta en una clula neoplsica,
se requieren varias mutaciones en varios genes y eso ocurre a travs de mucho tiempo, a
veces de aos, de estar expuesto a un agente carcinogentico.
El cncer comienza en una clula, es decir que es de origen monoclonal. Esa clula
alterada, escapa a los controles que anteriormente habamos mencionado y se vuelve
anrquica, iniciando una generacin de ms clulas anrquicas, que a su vez pueden
inducir a cambios similares, en las clulas vecinas. Pero no slo afectan a la clula las
mutaciones inducidas por los carcingenos, sino que a lo largo de cada divisin celular
(recordemos que pueden llegar a 50 divisiones) se producen errores espontneos en cada
duplicacin y los mismos se van acumulando constituyendo un factor intrnseco de
riesgo; aqu vale la pena sealar, que los radicales libres, son productos normales del
metabolismo celular pero un exceso de los mismos, pueden acarrear efectos genotxicos
por lo que toma vigencia el valor de los suplementos dietarios con antioxidantes. La
mutacin gentica conduce a la modificacin de los productos que codificara el gen
normal y en la va de la carcinognesis darn origen a:
a) Los cnceres heredables por mutaciones en uno o ambos alelos de las clulas
germinales El anlisis citogentico ha permitido individualizar algunos genes
cuyas mutaciones han demostrado ser de predisposicin familiar
b) Los cnceres espordicos, donde las alteraciones genticas dependen de los
mutgenos ambientales ( virus, radiaciones o substancias qumicas) En la
predisposicin no heredable , la mutacin de algunos genes, conduce a
consecuencias
metablicas
que
podra
significar
una
ruta
hacia
la
carcinognesis.
El 80% de los cnceres espordicos, se deben a exposicin ambiental, esto sustentado
por la gran cantidad de carcingenos qumicos existentes y los distintos tipos de
cnceres que promueven. Por ejemplo: el cigarrillo predispone al cncer de pulmn y de
vejiga; las aminas aromticas al cncer de vejiga; la aflatoxina al cncer de hgado; el
benceno a las leucemias. Los carcingenos qumicos pueden actuar como inhibidores o
activadores de enzimas que a su vez podran facilitar la accin de esos carcingenos en
el dao genmico y activar algunos oncogenes. En la dieta diaria se ingieren diferentes
txicos y mutgenos y los organismos han desarrollado un sistema de adaptacin
relacionado a su capacidad individual de detoxificacin; Cabe sealar que existen dos
mecanismos por los cuales los genes pueden alterarse:
A. GENTICO donde se producen alteraciones estructurales del genoma por
cambios en la disposicin de los propios genes o de sus bases, como ser las
mutaciones, translocaciones o deleciones,
B. EPIGENTICO en acciones moleculares por alteraciones de las enzimas o de
los sustratos de las mismas, tal el caso de la metilacin de las bases. Este
mecanismo generalmente compromete simultneamente los dos alelos y la
hipometilacin conduce a la mayor expresin de los genes, por lo tanto, una
mayor cantidad de la enzima metiltransferasa que inhibe la metilacin, puede
conducir a la mayor expresin de oncogenes. Esta enzima se encuentra elevada
en los tejidos tumorales. Para una mejor comprensin de los mecanismos
epigenticos deben tenerse en cuenta tres enzimas que juegan un rol importante
en la susceptibilidad al cncer: Citocromo p 450 mono-oxigenasa; Glutatin-
Las
protenas
denominadas MMR (mismatch repair genes) que localizan los sectores daados,
devanan la hlice, excluyen el segmento de ADN afectado e incorporan las
secuencias correctas.
a. LA INICIACIN ocurre a nivel del genoma y las alteraciones pueden darse en los
tumores benignos y malignos al igual que la segunda etapa, pero la tercera, o sea
la de progresin, es exclusiva de la transformacin maligna. Los agentes que
actan en la primer etapa pueden ser: FSICOS - QUMICOS o VIRALES.
Iniciacin Promocin y Progresin
Los carcingenos fsicos estn constituidos por las radiaciones que daan,
ionizando las bases, deprimen el gen de la protena p53, pueden estimular
citoquinas como la IL 1 y 6, que actan como verdaderos factores de crecimiento,
facilitan la formacin de radicales libres y pueden lesionar el gen que codifica
para el Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) el cual se encuentra en el
Cr 6. Las fuentes radiantes pueden surgir de la metodologa diagnstica o
teraputica como as tambin por exposicin a los rayos solares en forma
persistente o por emanaciones de radn de los suelos.
Los carcingenos qumicos tienen como blanco preferencial al nitrgeno de la
guanina (alquilantes, aminas aromticas, nitrosaminas y grasas poliinsaturadas)
produciendo mutaciones irreversibles.
La aflatoxina (aislada de alimentos contaminados con un tipo de hongo) se
considera oncognica para la clula heptica. Se atribuyen afectos genotxicos a
los compuestos policlorados contenidos en insecticidas y plaguicidas, as como
tambin productos de la manufactura de materiales elctricos y plsticos
formando parte de los contaminantes ambientales, que llegan a los seres vivos a
travs del aire, del agua y de los alimentos. Los carcingenos virales actan
introduciendo sus propias oncoproteinas al genoma de la clula afectada con lo
que la misma cambiar su cdigo normal, por el que le imponen los oncogenes
virales. Tal es el caso del papiloma virus humano, del Epstein Bar y de las
hepatitis B y C. Los oncogenes virales se ubican generalmente en las
proximidades de proto-oncogenes o de oncogenes supresores, activando a los
primeros y desactivando a los segundos.
B. LA PROMOCIN, representa la etapa de crecimiento tisular con la formacin
del tumor. Participan: los factores de crecimiento y los receptores a los factores de
crecimiento, como as tambin la angiognesis y degradacin de las matrices
extracelulares. Los factores de crecimiento (FC), son pptidos producidos por las
mismas clulas o por las vecinas y actan como facilitadores de la mitosis
incorporando en fase S, a algunas clulas que se encuentran en fase G0 o G1
prolongada.
Los FC se sintetizan en una clula y luego migran al espacio intercelular,
ejerciendo sus acciones sobre las clulas vecinas. Los primeros FC descubiertos
fueron el de crecimiento neuronal ( NGF) y el epidrmico (EGF), a los que se
sumaron muchos ms, entre ellos el derivado de plaquetas( PDGF) ,el de
hepatocitos (HGF), el de crecimiento de fibroblastos (FGF) el estimulante de
crecimiento de colonias, el simil insulina IGF-1). Algunas hormonas ejercen
acciones similares a stos factres peptdicos una vez que fueron captadas por los
receptores de membrana o intracitoplasmticos. Es reconocido el efecto
proliferativo de los estrgenos sobre los epitelios mamarios y del tracto genital;
las gonadotrofinas hipofisarias, estimulan especialmente al epitelio ovrico; la
prolactina ejerce su accin en el mbito de la mama y tambin del ovario; la
insulina de origen pancretico y el factor smil insulina, de origen heptico, son
verdaderos factores de crecimiento Merece un comentario aparte la accin de los
estrgenos, tan vinculados a cnceres hormonodependientes y su uso como terapia
hormonal de reemplazo, a originado controversias al respecto.
a) estimulan algunos proto-oncogenes como el FOS
b) estimulan la accin de otros factores de crecimiento (FC) y los
receptores para FC.
c) Facilitan la sntesis y liberacin de prolactina
d) Estimulan la sntesis de receptores de PG
e) Aumentan el AMP cclico que participa en la transduccin de
seales activando la replicacin celular.
f) Eleva los niveles de ciclinas (especialmente la E) posiblemente por
mecanismos indirectos.(va estimulacin de proto-oncogenes por el
AMPc responsive elements)
EL CNCER DEFINICIN
El Cncer: Es un crecimiento tisular producido por la proliferacin continua de clulas
anormales
con
capacidad
de
invasin
destruccin
de
otros
tejidos.
El cncer, que puede originarse a partir de cualquier tipo de clula en cualquier tejido
corporal, no es una enfermedad nica sino un conjunto de enfermedades que se
clasifican en funcin del tejido y clula de origen. Existen varios cientos de formas
distintas, siendo tres los principales subtipos:
Los sarcomas proceden del tejido conectivo como huesos, cartlagos, nervios, vasos
sanguneos, msculos y tejido adiposo.
Los carcinomas proceden de tejidos epiteliales como la piel o los epitelios que tapizan
las cavidades y rganos corporales, y de los tejidos glandulares de la mama y prstata.
Los carcinomas incluyen algunos de los cnceres ms frecuentes. Los carcinomas de
estructura similar a la piel se denominan carcinomas de clulas escamosas. Los que
tienen una estructura glandular se denominan adenocarcinomas.
En el tercer subtipo se encuentran las leucemias y los linfomas, que incluyen los
cnceres de los tejidos formadores de las clulas sanguneas. Producen inflamacin de
los ganglios linfticos, invasin del bazo y mdula sea, y sobreproduccin de clulas
blancas inmaduras.
El cncer no es una enfermedad contagiosa_Causas del cncer (Porcentaje de todos los
cnceres)
la herencia,
Los investigadores estudian como estos diferentes factores pueden interactuar de una
manera multifactorial y secuencial para producir tumores malignos. El cncer es, en
esencia, un procesogentico. Las alteraciones genticas pueden ser heredadas, o
producidas en alguna clula por un virus o por una lesin provocada de manera externa.
a.
b.
conservados,
ocasiona
cncer
de
hgado
en
La radiacin produce
cambios
en
el ADN,
como
roturas
trasposiciones cromosmicas en las que los cabos rotos de dos cromosomas pueden
intercambiarse. La radiacin acta como un iniciador de la carcinognesis,
induciendo alteraciones que progresan hasta convertirse en cncer despus de un
periodo de latencia de varios aos. Los rayos ultravioletas del sol y los rayos
X aumentan la propensin a adquirir cncer de la piel y leucemia. La
excesiva exposicin a lso rayos solares, por parte de personas de piel blanca,
aumenta el riesgo.
d.
No fumar
Evitar exponerse al sol por tiempo prolongado (especialmente personas
bebidas.
Una dieta adecuada, rica en fibras vegetales, frutas y baja en grasas.
En los grupos de lato riesgo como lo son los trabajadores de ciertas
industrias, se deben tomar las precauciones adecuadas para protegerlos y
En sus primeros estudios se puede decir que el 50% de los tumores malignos son
curable, de aqu la importancia dl diagnstico precoz. Las invasiones metastsica
generalmente ocurren cuando el tumor primario ya ha adquirido un tamao
considerable, ese lapso de tiempo depende del tipo de tumor, algunos son
de evolucin muy rpida como el cncer del testculo, otros de diez o ms aos (algunos
tipos de cncer de la tiroides); pero lo ms frecuente es que el tumor alcance su
pleno desarrollo en un lapso de cinco aos.
de
alguna
otra
infeccin.
Quines deben hacerse el examen?, es recomendable que toda mujer que haya
tenido sus relaciones sexuales se le practique el examen peridicamente (una vez
al ao o cada 2 aos) o cuando el mdico lo indique.
Existen
otros
exmenes
como
son:
en
caso
(uso
de
de
tumores
istopos
cerebrales).
radiactivos).
Ecosonografa
Tomografa computarizada (consiste en cortes trasnsversales del gano a estudiar).
Resonancia magntica (de uso muy reciente)
LOCALIZACIN
tero
Mama
Estmago
Pulmn
Contaminacin ambiental
La contaminacin ambiental del aire, el agua y el suelo por
productos qumicos carcingenos causa entre el 1% y el 4% de
todos los casos de cncer (CIIC/OMS, 2003). La exposicin a
productos qumicos carcingenos presentes en el ambiente puede
producirse a travs del consumo de agua o de la contaminacin
ambiental y en espacios cerrados. En Bangladesh, entre el 5% y el
10% de las muertes por cncer en una regin contaminada por
arsnico fueron atribuibles a la exposicin a esa sustancia (Smith,
Lingas y Rahman, 2000).
La exposicin a agentes carcingenos tambin puede producirse a
travs de alimentos contaminados por sustancias qumicas, como
las aflatoxinas o las dioxinas. La contaminacin del aire de
interiores causada por fuegos de carbn duplica el riesgo de cncer
de pulmn, especialmente entre las mujeres no fumadoras (Smith,
Mehta y Feuz, 2004). En todo el mundo, la contaminacin del aire
de interiores por fuegos de carbn domsticos causa
aproximadamente el 1,5% de todas las muertes por cncer. El uso
del carbn en los hogares est especialmente extendido en Asia.
Carcingenos ocupacionales
Ms de 40 agentes, mezclas y circunstancias de exposicin en el
ambiente laboral son cancergenos para el hombre y estn
clasificados como carcingenos ocupacionales (Siemiatycki et al.,
Datos y cifras
INMUNOHISTOQUIMICA
FUNDAMENTOS.
El objetivo de la tcnica es detectar, amplificar y hacer visible un antgeno determinado
(generalmente una protena). Para la deteccin especfica se emplean anticuerpos
dirigidos especialmente contra el antgeno buscado (es el llamado anticuerpo
primario).
Para amplificarlo se emplean tambin anticuerpos, dirigidos contra el anticuerpo
primario (son los llamados anticuerpos secundarios).
Finalmente, para visualizar el conjunto se emplea una combinacin de Avidina, Biotina y
Peroxidasa que permite, mediante una simple reaccin qumica local, colorear y hacer
visible al microscopio la cadena de anticuerpos.
PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
La inmunohistoqumica se puede realizar en tejidos de biopsia y de autopsia,
generalmente fijados en formol e incluidos en parafina, as como en material de
citologa.
FIJACIN
Permite preservar el tejido del deterioro provocado por la putrefaccin y autolisis
derivada de la muerte celular. El fijador ms empleado es el formaldehdo en
microscopa de luz, mientras que en microscopa electrnica se utiliza ms el
glutaraldehdo.
Los
morfolgicos
inactivacin enzimtica .
funcionales
que
fijadores
desnaturalizan
insolubilizan
INCLUSION
Consiste en sustituir el agua tisular por un medio lquido capaz de solidificar a fin de
proporcionar a la muestra la consistencia y homogeneidad adecuadas para obtener
secciones muy delgadas mediante un instrumento llamado micrtomo.
Deshidratacin
Tiene como finalidad la eliminacin completa del agua de la muestra tisular
2.
El volumen del bao debe ser 10 veces superior al volumen de la muestra que
se va a deshidratar.
3.
4.
5.
la
Sustitucin del agente deshidratante por una sustancia que pueda disolverse con el
medio de inclusin que va a utilizarse.
Principal agente:
Xileno
Rpido
En este mtodo existen dos anticuerpos: El Ac primario unido al Ag, que se revela a
travs de un Ac secundario previamente conjugado con una enzima (anti- Ig), con la
consiguiente formacin del Ac secundario conjugado que se une al Ac primario,
visualizndose la reaccin anti-Ig.
Tiene una gran capacidad de detectabilidad, pero la desventaja principal radica en el
nmero incrementado de pasos de incubacin y el gran nmero de controles
requeridos:
Figura2
Mtodo Indirecto de dos pasos: El anticuerpo primario unido al antgeno se revela a
travs de un anticuerpo secundario (3), previamente conjugado con la enzima (4).
4. Mtodo anticomplemento
Constituye una variante del mtodo indirecto desde que el complemento es antignico,
ya que pueden ser revelados por Acs anti- complemento conjugado con la enzima.
5. Mtodo Complejo Avidina- Biotina
En este mtodo se utiliza la propiedad de la alta afinidad de la avidina o la
estreptavidina por la biotina a travs del mtodo: Complejo Enzima- Avidina- Biotina
(ABC).
La avidina y la biotina pueden ser usadas por diferentes sistemas
inmunohistoqumicos. En el mtodo directo, el Ac biotinilado reacciona con una enzima
marcada con avidina o una enzima biotinilada se une al Ac biotinilado a travs de la
avidina.
En el mtodo indirecto son similar los hechos explicados anteriormente pero aplicado a
un Ac secundario.
Figura
de inmunodeteccin tradicionales.
El principio de este sistema es la aplicacin alternativa y subsecuente de Acs
policlonales mutuamente atractivos a formar un largo complejo de Acs, el cual puede
tener en lace cruzado del tejido unido a Acs primarios
ENZIMAS UTILIZADAS
La ciclooxigenasa (COX)
Es una enzima que cataliza la sntesis de prostaglandinas.
Se han demostrado incrementos en la expresin de la COX2 en enfermedades
inflamatorias y en distintas neoplasias como carcinomas de colon, estomago, esfago,
mama, pulmn, hgado, ovario y pncreas.
Se ha relacionado al COX-2 en la carcinognesis por la estimulacin de la
angiognesis y esto es un proceso crucial para el crecimiento y expansin tumoral.
Ki-67
Es una protena nuclear expresada en las clulas durante las fases activas del ciclo
celular
CITOMETRIA DE FLUJO
l.- Introduccin
En su esencia la citometra de flujo representa un proceso en el que clulas u otras
partculas biolgicas includas en un flujo de lquido isotnico son empujadas a pasar,
alineadas y de una en una, por delante de uno o varios detecto- res capaces de
recoger y medir diferentes caractersticas fsicas y/o qumicas de esas clulas o
partculas, a la vez que son iluminadas por un haz de luz, habitualmente un lser. En
trminos generales, las caractersticas celulares analiza- das mediante esta tecnologa
son el reflejo de dos grandes grupos de parmetros: por un lado, los derivados de la luz
que al incidir sobre la clula o partcula es dispersada y que se relacionan entre otras
caractersticas con el tamao y la granularidad celulares y, por otra parte los que se
asocian con la luz generada como consecuencia de la presencia en la clula de
fluorocromos, bien de forma natural (autofluorescencia) o unidos a ella artificialmente.
Desde su aparicin, la citometra de flujo ha sufrido un importante desarrollo debido en
gran medida a que por su carcter multidisciplinario se ha beneficiado de los avances
ocurridos en los ltimos aos en campos diversos como la informtica, la produccin
de anticuerpos monoclonales, la qumica de los fluorocromos, los procedimientos de
tincin citoqumica, la electrnica, la ptica y la tecnologa lser. Todo ello unido a
su progresiva utilizacin en el anlisis automtico y separacin de clulas ha
abierto nuevas perspectivas
la utilizacin
de la citometra
de flujo
para
la identificacin y
El empleo de fluorocromos
onda similares emiten en diferente zona del espectro. luminoso, ampla a su vez el
campo de aplicaciones
misma
muestra
fluorescena,
de diferentes
la ficoeritrina
anticuerpos
monoclonales.
(luz azul)
respectivamente.
si bien
emiten
La pequea
corrige mediante
de
El isotiocianato
superposicin
una compensacin
naranja
y rojo,
electrnica
realizada en el citmetro,
mediante
avances en el diagnstico
esta metodologa
clnico, destacando
y linfomas.
ser de gran
autoanticuerpos
se han logrado
la aportacin
linfocitarias
importantes
de la citometra de
y al diagnstico
y clasificacin
utilidad
en otras
e inmunocomplejos,
el
reas
como
diagnstico
la deteccin
ha
de
de trombocitopatas
pa- ra factores
de crecimiento
y hormonas
como de receptores
y la identificacin
de
de las subpoblaciones
linfocitarias
experimentada
inmunodeficiencia
re-
en la ltima
dcada
por el virus
de la
en sangre
gran
contribu- do de forma
linfocitarias
valor
diagnstico
decisiva
y pronstico.
Estos
a que la determinacin
factores
han
de las poblaciones
As
y clasificacin
de las inmunodeficiencias
en el seguimiento
de la recuperacin
alognico, o en la monitorizacin
linfocitarias se ha
extendido a otros tipos de patologa y as cada vez son ms numerosos los trabajos
en los que se hace referencia a su utilidad clnica en hemopatas
malignas y en
sangre perifrica
asociado
adems un incremento
a un peor pronstico.
de clulas natural-killer
Estos pacientes
(NK), especialmente
presentan
notorio en
por el momento, pero que podra reflejar un intento del sistema inmune de controlar
el crecimiento tumoral.
1-b.- Inmunofenotipaje
de leucemias y linfomas:
linfoblsticas
mieloproliferativos
agudas
as como
y mielodisplsicos
en la clasificacin de
de las crisis
blsticas
de los
que morfolgicamente
la reactividad
para
algunos
antgenos
-CD34,
CDllb, CD7-
se ha
diagnstica.
En este sentido,
el empleo
combinaciones
linfocitosis
de anticuerpos
crnicas
de linfocitos
grandes granulares
Cuadro 1
Panel de anticuerpos para la inmunofenotipificacin de la leucemia aguda
linfoblstica de precursor de clulas B.
Linaje*
CD19
CD79a (citoplsmico)
Madurez
HLA-DR
TdT
CD34
CD45
Sub-clasificacin
CD10
Ig superficie
Cadenas citoplsmicas
Opcional**
CD20
CD38
Madurez
Sub-clasificacin
Opcional
MPO (citoplsmica)
HLA-DR
CD15
CD36
CD13
CD34
CD64
Los blastos deben expresar dos (si MPO+) o ms (si MPO-) marcadores mieloides.
isin completa, contribuyen de forma significativa al diagnstico precoz de recadas.
1-c.- Otras aplicaciones de la determinacin de antgenos:
La utilizacin de las tcnicas de inmunofluorescencia para la deteccin de
inmunoglobulinas humanas mediante citometra de flujo ha abierto las puertas a la
utilizacin de esta tecnologa como mtodo de rutina en el diagnstico de diferentes
enfermedades autoinmunes como la prpura trombopnica idioptica, las anemias
hemolticas y las neutropenias autoinmunes. Por otra parte, su empleo para la
realizacin del test cruzado linfocitario constituye en la actualidad el mtodo de mayor
sensibilidad y especificidad para demostrar, previamente a un transplante, la presencia
de anticuerpos preformados dirigidos frente a antgenos HLA de clase 1 y II, antgenos
de clulas del endotelio vascular y del sistema monoctico.
La identificacin mediante citometra de flujo de la ausencia de expresin en la
membrana plaquetaria de reactividad para las glicoprotenas Ilb/llIa y lb se viene
utilizando desde hace algn tiempo para el diagnstico de trombocitopatas congnitas
como la enfermedad de Glanzman y el sndrome de Bernard-Soulier, respectivamente.
En este campo, la posibilidad
antgeno en la membrana
de cuantificar
plaquetaria
el nmero de molculas
de un
plaquetaria.
cuantificarse
As, a modo
diferentes
glicoproteinas
activado-,
de ejemplo,
-CD62,
en la actualidad
CD63-
pueden
y la conformacin
activacin plaquetaria.
El estudio de la expresin
plasmtica
constituye
citode la
citometra
de flujo
en el diagnstico
hemoglobinuria
diak-Higashi,
cuantificacin
mama,
del dficit
paroxstica
afectos de inmunodeficiencias
nocturna
y de la enfermedad
de Che-
el recuento
en los tumores
de
la deteccin de la incorporacin
en clulas
agentes, representan
la
membrana de las clulas necesita haber sido fijada y/o permeabilizada, con lo que
su utilizacin
se limita
a clulas
que no vayan
posteriormente.
En el caso del naranja de acridina no se presentan los problemas anteriores ya que
este fluorocromo
Sin
embargo,
este fluorocromo
presenta el inconveniente
de unirse al material
cromomicina-A3
que de forma
especfica
adenina/timina o citosina/guanina,
timidina como la bromodeoxiuridina
se unen
respectivamente
a pares
de bases
y de los anlogos de la
o la yododeoxiuridina,
incorporados de forma
de ADN proporciona
celular. La gran cantidad de estudios clnicos realizados hasta la fecha han puesto
de manifiesto que adems de proporcionar una informacin de gran valor sobre la
biologa de clulas normales y patolgicas,
la cuantificacin
adverso
en la gran mayora
con excepcin
linfoblstica
evolucin
aguda
de los tumores
del neuroblastoma,
del nio
de la enfermedad.
proliferativa
globalmente
se asocia a una
mejor
en tumores
slidos
slidos y hemopatas
el rabdomiosarcoma y la leucemia
de
y en hemopatas
malignas
se asocia
aunque asociada a
sndromes mielodisplsicos
a la teraputica
donde la existencia
de
de la cuantificacin
muestras heterogneas
celular.
en
de ARN
mediante
citometra
de flujo empleando
diferentes
10.000
informacin
clulas
en pocos
segundos)
sino que
adems proporciona
una
que refleja en gran medida su estado madurativo. Pese a que esta sea la aplicacin
ms extendida de la cuantificacin de ARN en el diagnstico
repercusin
clnica. As, estudios recientes han de- mostrado la utilidad de esta determinacin
en el estudio
drogas antiblsticas
muy diversas. De ellas hay algunas que presentan una clara utilidad clnica
destacando el cariotipo de flujo, la separacin de cromosomas
y los estudios de
un complemento
cromosomas
un fluorocromo
anlisis
emplendose habitualmente
combinacin
del Hoechst
unidimensional
o dos estudio
bidimensional,
y la cromomicina-A3,
respectivamente.
citometra de flujo ofrece ciertas ventajas que hacen de ella una alternativa
analtica
de 100.000 cromosomas-
en pocos minutos
pueden analizarse
ms
adems
cromosmicas
de su potencial
compensadas
empleo
en la identificacin
de anomalas
como la traslocacin
de cromosomas
intensidad de fluorescencia,
citosina/guananina
humanos.
de acuerdo a su
segn el fluorocromo
siendo la purificacin
ha demostrado
conseguida
conjunta de la hibridacin
han demostrado
alteraciones
numricas
cromosmicas
su utilidad en la identificacin
de
mediante
No obstante,
translocaciones
por el momento
esta
metodologa
no permite la deteccin
de
compensadas.
MARCADORES TUMORALES
Los marcadores de tumores son sustancias producidas por las clulas cancerosas o por
otras clulas del cuerpo como respuesta al cncer o a ciertas afecciones benignas (no
cancerosas). La mayora de los marcadores de tumores son producidos tanto por las
clulas normales como por las clulas cancerosas; sin embargo, se producen en
concentraciones ms altas en enfermedades cancerosas. Estas sustancias pueden
encontrarse en la sangre, en la orina, en la materia fecal, en tejido de tumores o en
otros tejidos o lquidos del cuerpo de algunos pacientes con cncer. La mayora de los
marcadores de tumores son protenas. Sin embargo, ms recientemente, los patrones
de expresin de los genes y los cambios de ADN han empezado a usarse como
Tamizaje.
A la inversa:
Un incremento consistente de los niveles de MT, junto a una falta de mejora clnica,
puede indicar una falla en el tratamiento.
La elevacin residual, despus de un tratamiento definitivo, usualmente indica
enfermedad persistente.
El seguimiento del MT, es til cuando no hay otra evidencia de enfermedad.
Marcadores TUMORALES que se usan actualmente:
a. Activador del plasmingeno urocinasa (uPA) e inhibidor del activador del
plasmingeno (PAI-1)
o
b. Alfa-fetoprotena (AFP)
o
f.
g. CA15-3/CA27.29
o
h. CA19-9
o
i.
CA-125
o
j.
Calcitonina
o
k. CD20
o
l.
Cromogranina A (CgA)
o
m. Fibrina y fibringeno
o
o. HE4
o
p. HER2/neu
o
o
o
q. Inmunoglobulinas
o
o
o
r.
Lactato deshidrogenasa
o
PRUEBAS GENETICAS
Amplificacin gnica- En esto proceso poco comn, el proceso normal de
la replicacin del ADN tiene errores muy serios. El resultado es que en vez de hacer
una sola copia de una regin en el cromosoma, varias copias son producidas. Esto
lleva a la produccin de varias copias de los genes que se encuentran en esa regin
del cromosoma. A veces existen tantas copias de la regin amplificada que stas
pueden formar sus propios pseudocromosomas pequeas llamadas dobles diminutos.
Los genes en cada una de las copias de las cromosomas pueden ser transcritos y
traducidos llevando a una sobreproduccin del ARNm y la protena correspondientes
a los genes amplificados, tal como se encuentra ilustrado debajo. Las lneas
onduladas representan el ARNm que est siendo producido por medio de la
transcripcin de cada copia del gen.
Mientras este proceso no es visto en las clulas normales, ste ocurre varias veces en
las clulas cancerosas. Si un oncogen est includo en la regin amplificada, la
sobreexpresin resultante
de
ese
gen
puede
llevar
al
crecimiento
celular
los cnceres de la mama y de los ovarios. En el caso del oncogen HER2/neu, tratamientos clnicoshan sido diseados para combatir solamente las clulas
que sobreexpresan esta protena.
La amplificacin gnica tambin contribuye a uno de los problemas ms grandes en el
tratamiento del cancer: la resistencia a los frmacos. Los tumores resistentes a los
frmacos pueden continuar creciendo y tambin propagarse en la presencia de
medicamentos quimoterapeticos. Un gen comnmente involucrado es el MDR
por multiresistencia a las drogas en ingls. El producto protenico de este gen acta
como una bomba localizada en la membrana de las clulas. ste es capaz de sacar
selectivamente a molculas que se encuentran dentro de las clulas, incluyendo los
frmacos quimoterapeticos. Esta eliminacin hace que los medicamentos sean
inefectivos.
La PCR (reaccin en cadena de la polimerasa) en tiempo real es un mtodo altamente
sensible que requiere muestras muy pequeas, es decir que con muy poco material
biolgico se pueden obtener resultados y muy rpidamente (1 hora). Como la PCR
convencional, puede ser utilizada para determinaciones cualitativas pero, a diferencia
de aquella, es tambin una herramienta cuantitativa (Q-PCR). Es justamente esta
propiedad la que ha convertido a la PCR en tiempo real en la vedette de los
laboratorios de Biologa Molecular de ltima generacin. La PCR en tiempo real
permite amplificar y simultneamente detectar el producto amplificado, en cada ciclo
de amplificacin, ya que el amplicon es revelado midiendo la seal fluorescente a
medida que se va produciendo. La intensidad de la fluorescencia en cada ciclo es
directamente proporcional a la cantidad de producto de PCR en cada ciclo y esto
depende de la cantidad inicial de templado. Por esto, la cuantificacin est facilitada, a
diferencia de la PCR convencional donde se evala el resultado final. La PCR en
tiempo real tambin permite que varias reacciones se realicen en un mismo tubo
(multiplex).
Como
no
requiere
manipulacin
post-PCR,
se
pueden
reducir