INFORME N 01:

Preparacin del Material y Area de Trabajo.

ALUMNAS:
-Bernuy Chvez, Gianela.
-Lama Segura, Raisa.
-Matheus Valero, Danella.
-Zapata Lovera, Katherine.
PROFESORA:
Vargas Crdenas, Jessie.
FECHA DE REALIZACION:
29/03/2012.
FECHA DE ENTREGA:

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CULTIVO DE ALIMENTO VIVO
INFORME N01
I.

INTRODUCCION.

A lo largo del tiempo, una de las preocupaciones que se han suscitado, es

la de proporcionar un alimento adecuado a diferentes recursos durante su
etapa post-larval; debido a que debe predominar el incremento de su peso
en un tiempo corto.
La mayora de post-larvas cultivadas en aguas clidas consumen
zooplancton como primer alimento, despus cambian al alimento natural
(fitoplancton, plantas, etc.). En algunos casos comolos juveniles del Paco y
de la Gamitana, se alimentan del zooplancton, durante buen tramo de sus
vidas. Es as que se opta por un alimento que cubra todas las necesidades
del recurso, por el ALIMENTO VIVO.
Este tipo de alimento se cultiva en laboratorio y bajo condiciones
especficas, segn el tipo de especie con que se trabaja; tomando en
cuenta la sensibilidad de estas especies, se debe evitar la contaminacin
de estos, ya sea de manera directa e indirecta; puesto que puede incidir
de manera decisiva en la supervivencia y produccin del alimento.
Para el mantenimiento de las buenas conductas de higiene en el
laboratorio se hace uso de procedimiento como la desinfeccin y
esterilizacin de diversos materiales que se emplean durante la prctica.
En el primero se logra la eliminacin de formas vegetativas de
microorganismos aunque no necesariamente de la espora; mientras que
en la esterilizacin, se logra la eliminacin completa de toda forma
microbiana mediante mtodos fsicos, qumicos o gaseosos.
II.

OBJETIVOS.
Obtener

la

prctica

conocimiento

necesarios

para

aplicar

mecanismos de esterilizacin y preparacin del agua, as como del

material a utilizar para los cultivos de alimento vivo.

Describir los pasos a seguir para una buena limpieza de vidriera.
Explicar como hacer para preparar y almacenar agua de mezcla y

como remover materia orgnica disuelta del agua.

Usar la autoclave y estufa en el proceso de esterilizacin de vidrios y

de soluciones.
Aplicar los conocimientos de las condiciones de asepsia en los
cultivos de laboratorio de microalgas.

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INFORME N01

III.

MATERIALES.
Bomba de Vacio: Son de medio y alto vaco para
aplicaciones en laboratorio, con capacidad entre 3 y 75
m3/h. Son sistemas de taponamiento y roscado para viales
y botellas

Autoclave: Este equipo esteriliza a la muestra, mediante

Vapor a presin; esta mata a las bacterias,
microorganismos, etc. por desnaturalizacin de protenas.
Existe la relacin presin-temperatura, adems, la
existencia de bolsas de aire impedir la penetracin del vapor, es por eso que
se debe de eliminarse todo el aire que rodea y penetra en la carga antes de
que pueda comenzar la esterilizacin por vapor. En el laboratorio este equipo
trabaja a presin de 15lb/pulg2.
Balanza Analtica: Esta tiene la funcin de
proporcionarnos un pesaje exacto de elementos tangible.
Es un artefacto con una alta sensibilidad.
*INSTRUMENTOS

Placa Petri: Es un recipiente redondo, de cristal o

plstico, con una cubierta de la misma forma que la
placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se
pueda colocar encima y cerrar el recipiente.

Tubo de ensayo: Es parte del material de vidrio de un

laboratorio de qumica. Consiste en un pequeo tubo de
vidrio con una punta abierta (que puede poseer una tapa) y
otra cerrada y redondeada, que se utiliza en los
laboratorios para contener pequeas muestras lquidas.

Matraz: Es un frasco transparente de forma cnica con una abertura en el

extremo angosto, generalmente prolongado con un cuello cilndrico, suele
incluir algunas marcas. Por su forma es til para realizar
mezclas por agitacin y para la evaporacin controlada de
lquidos; adems, su abertura estrecha permite la
utilizacin de tapones.

la

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CULTIVO DE ALIMENTO VIVO
INFORME N01
Probeta: es un instrumento volumtrico, que permite medir volmenes
superiores y ms rpidamente que las pipetas, aunque con menor precisin.
Sirve para contener lquidos.

Pipeta: Es un instrumento volumtrico de laboratorio que permite medir

alcuotas de lquido con bastante precisin. Suelen ser de vidrio. Est formado
por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cnica, y
tiene una graduacin (una serie de marcas
grabadas) indicando distintos volmenes.

Esptula de Drigalsky: Sirve para realizar separaciones de las colonias de

microorganismos; consiste en remover verticalmente en
un recipiente, junto con cualquier fluido.

Pipeta Pasteur: Es una pipeta de plstico no calibrada

pero si graduada que se utiliza apretando la boquilla de arriba e introduciendo
en la probeta, para poder sacar el lquido.

Vaso de precipitado: Es un simple contenedor de

lquidos, usado muy comnmente en el laboratorio. Son
cilndricos con un fondo plano; se les encuentra de varias capacidades, desde
1 mL hasta de varios litros. Normalmente son de vidrio.

Aguja de Kolle: Estas agujas sirven para realizar el

conteo de poblaciones de microorganismos, sin provocar
sobre estos.

dao

Mechero Bunsen: Es un instrumento utilizado en

laboratorios cientficos para calentar o esterilizar
muestras o reactivos qumicos.

IV. METODOLOGIA
1. LIMPIEZA : LAVADO DE VIDRIO
Utilizar escobillas de cerdas anchas tipo pluma;
para material de boca ancha y las pequeas para
limpieza de pipetas .Lavar con detergente lquido y
enjuagar con agua corriente.

la

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2. ESTERILIZACIN
E. qumica
Lavar con solucin acida cido muritico (cloro o formol) 0.5ml de
cloro por litro de agua para eliminar solventes e impurezas del
detergente, enjuagar con agua las veces que sea necesario hasta que
el olor a acido haya desaparecido y luego con agua destilada.
Enjuagar 3 veces con agua destilada o agua caliente.
Cuando se haya utilizado la vidriera primero enjuague la cristalera
con agua de cao inmediatamente despus de usarla. Djela
remojando toda la noche en una solucin con detergente preparada
con agua destilada, en un recipiente de acero inoxidable
La solucin con la vidriera calintela o hirvala por una hora. Haga
un primer enjuague con agua de cao.
E. Fsica (calor)
Pipetas y material de vidrio luego de lavadas envolverlas en papel .En
elcaso de las pipetas sedebe tratarde proteger con cuidado las puntas
de a pipeta con papel. Luego colocarlas en estufa a 120C, si es
material metlico a 150C.
ERLENMEYER: Deja un poco de agua en su interior. Tapar con
algodn, luego papel aluminio y envolver en papel la boca del mismo.
Sujetar con pabilo. Llevar la autoclave a 121 psi de 15-20 minutos.

Funcionamiento y mtodo para esterilizar en Autoclave:

La esterilizacin se logra autoclavando el medio a 121 grados
centgrados de temperatura, 15 lb/pulgada cuadradade presin
(de vapor), por un tiempo que vara de 10minutos para un
volumen de 100 ml, 20 minutos para 2 lt y 35 minutos para 5
lts. Todo el aire debe salir del autoclave antes de iniciar
la esterilizacin. De no ser as la correcta esterilizacinno se
dar.
En algunos autoclaves este aire se eliminaautomticamente,
no as en otros, donde la vlvula de escapedebe permanecer
abierta hasta que se vea salir unacolumna de vapor en forma
persistente. Cerrando la vlvula, se deja subir la presin hasta
15 libras, momento enque se inicia la esterilizacin y se toma
el tiempo.

Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los

objetos que se disponen sobre una rejilla o canasta de metal. Se cierra
asegurando la tapa, ajustando los bulones y se da calor, dejando abierta la

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CULTIVO DE ALIMENTO VIVO
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vlvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salida de
vapor en forma de chorro continuo y abundante.
Se cierra la espita de vapor y se espera hasta que llegue a la temperatura
adecuada. A partir de all se cuenta el tiempo de esterilizacin, luego del
cual se debe esperar al descenso de la temperatura para abrir la espita de
purga y la tapa del autoclave nuevamente.
3. Preparacin del agua de cultivo
Preparar agua de mezcla con agua de mar (previamente esterilizada,
para esto filtrar el agua de mar por filtros de 5u. Verter la en un
tanque de 250l y agua dulce, hasta que tenga una salinidad de 20
%. Agregar hipoclorito de sodio, formalina o acido hidroclrico puros
(comnmente cido muritico) en concentracin de 25 ppm.

FILTRACIN: Este procedimiento es aplicable a la

esterilizacin de lquidos y gases, especialmente los primeros.
Cuando el lquido a filtrar no puede resistir, sin descomponerse,
la accin del calor, se aplica la tcnica de filtracin, la que
puede efectuarse mediante presin o aspiracin. Se basa en el
pasaje de lquidos a travs de sustancias porosas que detienen
a los microbios. Los antiguos filtros se fabricaban en forma de
bujas que son cilindros huecos abiertos por una extremidad y
cerrados por otra, de paredes de espesor variable. Airear por 4
horas .el cloro puede ser desactivado con tiosulfato de sodio
(248g/l), en proporciones de 0.15ml/l de agua clorinada.

Fig. Proceso de filtrado.

4. Desinfeccin del ambiente en el laboratorio de microalgas.
Preparar solucin de alcohol de 70 %
Grados de alcohol puro X vol. de alcohol puro =70 X vol. a preparar

IV.

REVISION LITERARIA

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INFORME N01
1. Esterilizacin
Murray (2009) hace referencia a la esterilizacin como un proceso de
destruccin completa de todos los microorganismos, incluidas las formas
resistentes como esporas bacterianas, virus sin envoltura (no lipdicos) y
hongos. Ello puede conseguirse mediante esterilizacin fsica, esterilizacin
gaseosa y esterilizacin qumica.
Los esterilizantes fsicos, como el calor hmedo y el calor seco, son los
mtodos de esterilizacin utilizados ms a menudo en los laboratorios y estn
indicados para la mayora de los materiales, con excepcin de los
termosensibles o los que poseen componentes qumicos txicos o voltiles. La
filtracin es un mtodo til para eliminar las bacterias y los hongos de las
soluciones o el aire (mediante filtros de partculas de alta eficiencia (HEPA)).
AGENTES
No obstante, estos
filtros no FSICOS
consiguen eliminar los virus ni algunas bacterias
de pequeo tamao. Tambin se utiliza con frecuencia la esterilizacin por
rayos ultravioleta o radiacin ionizante (p. ej. Microondas o rayos gamma). La
principal limitacin de laCALOR
esterilizacin po rayos ultravioleta radica en la
necesidad de una exposicin directa del material a esterilizar.
Hmedo. son (Gutirrez, 2008):
Algunos principales usos de la esterilizacin
Ej. Vapor a Presin (autoclave).
La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso mdico
con el propsito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes.
Seco. (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas,
El acondicionamiento del material
Ej. los
Aire
Caliente (horno) Incineracin
etc.) que va a ser utilizado en
laboratorios.
La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes
propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o
personal, anlisis microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos,
RADIACIONES
etc.)
La descontaminacin de material utilizado.
Existen diversos AGENTES
mtodos deMECNICOS
esterilizacin. La seleccin del mtodo a aplicar
en cada caso est determinada por el tipo de producto a esterilizar.
FILTRACIN
1.1. Clasificacin de los Mtodos
de Esterilizacin
En el siguiente esquema explica los principales mtodos de esterilizacin,
AGENTES
QUMICOS
clasificados de acuerdo
al tipo
de agente que acta.
GASEOSOS
Oxido de etileno
NO GASEOSOS
Aldehdos.
Ej. Glutaraldehdo
cido Peractico
Perxido de Hidrgeno

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1.2. Esterilizacin por Calor Hmedo

El calor hmedo destruye los microorganismos por coagulacin de sus
protenas celulares.
El principal mtodo de esterilizacin que emplea calor hmedo es la
esterilizacin por vapor a presin.
Existen otros mtodos de descontaminacin que emplean este tipo de calor los
cuales, aunque no permiten la destruccin total de los microorganismos,
disminuyen la carga microbiana que posee un material.
Entre estos mtodos podemos citar:
Tindalizacin (esterilizacin fraccionada)
Agua hirviendo
Pasteurizacin
Olla de presin
Esterilizacin por vapor a presin

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La esterilizacin por vapor a presin se lleva a cabo en un autoclave. Estos
equipos emplean vapor de agua saturado, a una presin de 15 libras lo que
permite que la cmara alcance una temperatura de 121C. El tiempo de
esterilizacin usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas
oportunidades, dadas las caractersticas del material, es necesario variar el
tiempo de esterilizacin. (Gutirrez, 2008)
Cuando se utiliza este mtodo es importante controlar en el autoclave la
relacin entre la temperatura, la presin y el tiempo de exposicin, ya que
stos son factores crticos en el proceso. Slo cuando el vapor se coloca bajo
presin, es cuando su temperatura aumenta por encima de los 100C y esto
permite alcanzar las temperaturas de esterilizacin (121C).
Entre las ventajas de este mtodo de esterilizacin tenemos que no deja
residuos, las autoclaves modernas son sencillas de manejar y es un mtodo
rpido de esterilizacin. ste es el mtodo de eleccin para esterilizar
materiales termoestables y no sensibles a la humedad como medios de cultivo,
cultivos de microorganismos para descartar, lencera, uniformes, instrumentos
quirrgicos, etc.
Entre sus desventajas estn que no permite la esterilizacin de materiales
sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de
polvos, aceites y grasas.
Precauciones
Antes de comenzar el proceso de esterilizacin es necesario remover todo
el aire de la cmara del autoclave, porque de lo contrario no se podrn
alcanzar las condiciones de esterilizacin requeridas debido a que la
cmara interna del equipo no podr ser saturada por el vapor de agua.
El tiempo de esterilizacin se debe comenzar a contar una vez que se han
alcanzado los 121C en la cmara interna del autoclave.
Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos quirrgicos,
equipos, etc. no se deben cubrir con materiales impermeables al agua
como por ejemplo el papel de aluminio, porque ste no permite que el
vapor tenga acceso al material y por lo tanto no se lograr la esterilizacin.
Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del equipo se debe
garantizar la libre circulacin del vapor de agua alrededor de todo el
material.
Para controlar la esterilizacin por vapor a presin se emplean indicadores
fsicos tales como medidores de presin, termmetros, o termgrafos.
Aunque estos controles son ampliamente utilizados, actualmente se
consideran mtodos secundarios para el control del proceso y son los
indicadores biolgicos los que permiten determinar si realmente se llev a
cabo en forma efectiva la esterilizacin.
Uso del Autoclave
Colocar en la base de la autoclave un volumen de agua ionizada hasta
cubrir la bandeja del fondo en caso de que no contenga agua.
Colocar la cesta adentro con todos los materiales a esterilizar y
enchufar la autoclave. Cerrar correctamente sin ajustar demasiado. (Lo
suficiente como para que no escape el aire del interior).

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Una vez enchufada, mover el termo regulador hasta HI y programar

un tiempo de 10 minutos. Una vez terminado el tiempo, bajar la palanca
en la parte superior del autoclave y esperar que la presin comience a
subir hasta 15 psi. (Dar un tiempo cualquiera).
Una vez llegada a esa presin, girar el regulador desde HI hasta 2 o 3
psi, tratando de mantener constante la presin de 15 psi sin que
aumente, y colocarle 20 minutos.
En caso de que la presin suba demasiado, se puede bajar hasta 1 psi
o LOW.
Una vez terminado el tiempo, subir la palanca para liberar la presin
interna y destapar. Retirar con cuidado los materiales de vidrio y sacar
la cesta (Nuca dejarla en contacto con el agua porque entra en un
proceso de oxidacin y deterioro).

Figura.
Laboratorio

Autoclave de

Parmetros de esterilizacin
Tiempo desde que alcanza
temperatura y presin
15 minutos
10 minutos
3 minutos

Temperatura

Presin

121 C
126 C
134 C

1,5 Atm.
2,0 Atm.
2,9 Atm.

Recomendaciones para la duracin del material estril segn Norma

Envoltura
Un envoltorio
Doble envoltorio
Con cobertor plstico

Estante cerrado
Seis semanas
Seis semanas
Mximo 5 aos

Estante abierto
Un da
Seis semanas
Mximo 5 aos

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INFORME N01

1.3. Esterilizacin por Filtracin

La esterilizacin por filtracin se logra por el paso de un lquido o un gas a
travs de un material capaz de retener los microorganismos presentes.
La esterilizacin por filtracin se emplea para materiales sensibles al calor,
tales como ciertos medios de cultivo, azcares, soluciones de antibiticos y
otros medicamentos, etc. (Gutirrez, 2008)
Tipos de Filtros
Hay varios tipos de filtros, entre ellos los que ms se usan son los filtros de
profundidad y los filtros de superficie o filtros de membrana.

Filtros de profundidad

Estos filtros estn elaborados por un material fibroso (papel, asbesto o fibra de
vidrio) dispuesto al azar, de manera que dentro de la estructura del filtro se
crean vas tortuosas donde pueden quedar retenidos la mayora de los
contaminantes presentes.
Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidad de retencin de partculas
sobre su superficie y a travs de toda su estructura y que permiten filtrar
grandes volmenes. Sin embargo, tienen como desventajas que no presentan
un tamao de poro uniforme y existe la posibilidad de liberacin, hacia el
material filtrado, de partculas y microorganismos que hayan crecido dentro del
filtro.
Dadas sus caractersticas los filtros de profundidad se usan principalmente
como prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la
eliminacin total de los microorganismos.

Filtros de superficie
Son filtros elaborados generalmente de acetato de celulosa o nitrato de
celulosa y contienen poros de tamao uniforme. Este tipo de filtro tiene como
ventaja que, al conocer exactamente el tamao de poro que presentan, se
pueden seleccionar filtros capaces de retener la totalidad de los
microorganismos presentes en una solucin.
Sin embargo, se saturan rpidamente y la velocidad de filtracin a travs de
ellos es lenta.
Para la filtracin esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de
profundidad con un filtro de superficie que tenga un tamao de poro de 0.22
m. La mayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en
autoclave y luego se manipulan aspticamente al ensamblar el equipo.
Equipos de Filtracin
Existen diferentes equipos de filtracin, la seleccin del mismo est
determinada principalmente por el volumen de lquido a filtrar. As tenemos
equipos de filtracin para pequeos volmenes, los cuales generalmente se

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esterilizan por separado y se ensamblan aspticamente en el momento de la
filtracin. Cuando se requiere filtrar volmenes mayores, el filtro de membrana
se dispone en un cartucho y se coloca en un estuche de acero inoxidable.
Tambin existen pequeos cartuchos de plstico que se pueden esterilizar
despus de la insercin de un filtro de membrana; con estos dispositivos la
filtracin se hace utilizando una jeringa que permite forzar el lquido a filtrar a
travs del filtro hasta un recipiente estril.
Antes de utilizar cualquier sistema de filtracin hay que determinar que los
filtros
no presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el
proceso de filtracin.

Fig. Sistema de Filtracin al Vaco

2. Lavado
Para desarrollar correctamente cualquier trabajo en el laboratorio es necesario
mantener siempre limpio el material y la mesa de trabajo. El material debe
estar limpio y seco antes de empezar el experimento.
La limpieza del material se debe realizar inmediatamente despus de cada
operacin ya que es mucho ms fcil y adems se conoce la naturaleza de los
residuos que contiene.
Para limpiar un objeto, en primer lugar se quitan los residuos (que se tiran en el
recipiente adecuado) con una esptula o varilla y despus se limpia con el
disolvente apropiado. El agua con jabn es uno de los mejores mtodos de
limpieza. Ocasionalmente, se utilizan cidos, bases o disolventes orgnicos
para eliminar todos los residuos difciles.
La ltima operacin de lavado consiste en enjuagar todo el material con agua
destilada. El material limpio se seca en un soporte adecuado inclinado o
vertical, colocando el material boca abajo, o bien se utiliza una estufa de
secado. En este ltimo caso el material debe ser introducido en la estufa sin
tapones ni llaves.
Existen otros mtodos para lavar el material que comportan la utilizacin de
agentes ms agresivos (cidos, bases, agua regia, mezcla crmica, potasa
alcohlica, etc.). En caso de tener un residuo intratable consultar al profesor.

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3. Desinfeccin
La desinfeccin es la destruccin de formas vegetativas de microorganismos
en objetos inanimados y no necesariamente esporas. Se realiza por mtodos
qumicos o fsicos. La desinfeccin de alto nivel implica la eliminacin total de
toda forma de vida microbiana excluyendo slo a esporas bacterianas. Existen
agentes desinfectantes que no tienen capacidad para la destruccin completa
de todos los microorganismos vegetativos, en este caso la desinfeccin que
obtiene se califica como de nivel intermedio o bajo. Estos ltimos niveles de
desinfeccin tienen muy poca aplicacin prctica en la actualidad.
Preparacin del alcohol de 70 (v/v):
Para realizar la limpieza del rea de trabajo se utiliza la preparacin de este
alcohol, para ello se parte de alcohol de 96.
(Preparacin de 300 ml de alcohol de 70)

C1 x V1 = C2 x V2
96 x V1 = 70 x 300 ml
V1= 218.75 ml de alcohol de 96
Por lo tanto se necesita mezclar 218.75 ml de alcohol de 96
enrazando este volumen con agua destilada hasta llegar a 300
ml.
V.

RESULTADOS.

Preparacin del agua de cultivo (agua de mezcla)

Clculos:
-Salinidad del agua de mar: 38
-Salinidad deseada del agua de mezcla: 20
-Volumen deseado del agua de mezcla: 2L
-Volumen inicial de agua de mar = ? = V1
-Volumen inicial de agua del cao = ? = V2
(38) x V1 + (3) x V2 = 2L x (20)
V1 + V2
= 2L
38V1 + 3(2 - V1) = 40
38V1 + 6 - 3V1
= 40
35V1 = 34
V1 = 0.97 L de Agua de Mar
2L - V1 = V2
2L - 0.97L = 1.03L de Agua del Cao
Preparacin de solucin desinfectante

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INFORME N01
Es la solucin que se usara en las prximas sesiones para
desinfectar manos, mesas, ambiente de trabajo y objetos a usar
en el desarrollo del cultivo de alimento vivo.
Clculos:
-Grado de pureza inicial del alcohol = 96
-Grado de pureza del alcohol solucin = 70
-Volumen deseado de solucin = V2 = 500 ml
-Volumen inicial del alcohol = ? = V1
-Volumen de agua de cao = ? = V3
(96) x V1 = (70) x V2
96 x V1 = 70 x 500ml
V1 = 364.6ml de Alcohol de 90
V3 = V2 - V1
V3 = 500ml - 354.6ml

V3 = 135.4ml de

Agua de Cao

VI.

DISCUSIN.

Durante el proceso de esterilizacin en el autoclave, los alumnos

estuvimos muy pendientes de dicho proceso, esto debido a que cuando
se utiliza este mtodo es importante controlar la relacin entre la
temperatura, la presin y el tiempo de exposicin, ya que stos son
factores crticos en el proceso (Gutirrez, 2008) que determinan el xito
de la esterilizacin, as como la prevencin de posibles accidentes.

() Entre las ventajas de esterilizacin en autoclave tenemos que no

deja residuos, es un mtodo de fcil manipuleo y rpido. Entre sus
desventajas tenemos que no permite la esterilizacin de materiales
sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso
de polvos, aceites y grasas() Sin embargo, en el caso del laboratorio
de cultivo de alimento vivo es de mucha utilidad pues abunda la
presencia de materiales termoestables y no sensibles a la humedad
como instrumentos quirrgicos y medios de cultivo.

Para la esterilizacin por filtracin es necesario contar con el equipo

adecuado, pues los filtros de material fibroso (papel, asbesto o fibra de
vidrio) tienen una alta capacidad de retencin de partculas grandres. Sin
embargo, al no presentar un tamao de poro uniforme pueden permitir la
liberacin, hacia el material filtrado, de partculas y microorganismos que
hayan crecido dentro del filtro. Por ello se usan principalmente como

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INFORME N01
prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la
eliminacin total de los microorganismos. En el presente laboratorio se
uso un sistema de filtracin al vacio a fin de garantizar un mayor %
retencin de impurezas del agua de mar.

El lavado, a pesar de sonar como un procedimiento simple y comn, es

muy importante en un laboratorio. () La limpieza del material se debe
realizar inmediatamente despus de cada operacin ya que es mucho
ms fcil y adems se conoce la naturaleza de los residuos que contiene
(). En el presente laboratorio, realizamos el lavado de materiales del
ciclo pasado, situacin que debemos cambiar pues como seala la
revisin bibliogrfica es mejor realizar el lavado inmediatamente
terminado la operacin.

La solucin de alcohol a 70 nos permite desinfectar el ambiente de

trabajo, se entiende por desinfeccin como () la destruccin de formas
vegetativas de microorganismos en objetos inanimados y no
necesariamente esporas (). El conocimiento de la preparacin de
dicha solucin es muy importante pues, es ser muy utilizada en las
prxima sesiones de laboratorio.

VII.

CONCLUSION.

VIII.

Se logr el aprendizaje del protocolo del uso del autoclave.

Se logr el aprendizaje del procedimiento para la ptima limpieza de
vidriera.
Se logr el aprendizaje de la preparacin de agua de cultivo.
Se logr el aprendizaje de la preparacin de la solucin desinfectante de
alcohol.
Se comprendi la importancia de los procedimientos llevados a cabo
durante el presente laboratorio, como procedimientos imprescindibles
para el desarrollo de las prximas sesiones de laboratorio.
Se comprendi la importancia de las condiciones de asepsia en cada
uno de los procedimientos dentro del laboratorio de cultivo de alimento
vivo.

BIBLIOGRAFIA.

2009
MURRAY, Patrick R.
Microbiologa Mdica. ElsevierMosby. Sexta Edicin. (Versin On
line)
2008
GUTIERREZ, Sofa
Mtodos de Esterilizacin. Laboratorio de Microbiologa, UCV.
(Versin On line)

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CULTIVO DE ALIMENTO VIVO
INFORME N01
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMi
cro/10_M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf

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GUTIERREZ, Sofa
Esterilizacin por Calor Hmedo. Laboratorio de Microbiologa,
UCV.
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Esterilizacin por Filtracin. Laboratorio de Microbiologa, UCV.
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VARGAS, Jessie.
Preparacin del Material y rea de Trabajo. Gua Laboratorio de
Cultivo de Alimento Vivo.
http://aula.lamolina.edu.pe/mod/resource/view.php?id=7687
Otros links:
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/neteja.html