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UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERIA EN ALIMENTOS


CARRERA DE INGENIERIA BIOQUIMICA
LABORATORIO DE INGENIERIA GENTCICA
Profesor: Ing. Ana Cunachi
Ayudante: Karen Hidalgo
Estudiante: Tarsis Camacho
Fecha: 18-12-2014
I.

Prctica: 1

TEMA

Morfologa y fisiologa de la mosca de la fruta, Drosophila melanogaster


II.

OBJETIVOS
A. GENERAL
Analizar la Morfologa y fisiologa de la mosca de la fruta, Drosophila
melanogaster.
B. ESPECFICOS
Desarrollar dos pie de cra con dos tipos de Drosophila melanogaster.
Determinar las caractersticas morfolgicas externas de Drosophila

melanogaster.
Comparar las diferencias anatmicas entre hembras y machos de esta especie.
Establecer las principales caractersticas fisiolgicas de la mosca de la fruta.
III.
MARCO TERICO
El gnero Drosophila consta de unas 2000 especies, de las cuales ms de la mitad viven
en las islas Hawai, y unas 40 especies en la Pennsula ibrica. Los adultos de D.
melanogaster se suelen encontrar posados o revoloteando encima de la fruta madura de
fruteros o de basuras con restos de fruta madura o podrida, porque sus larvas viven a
expensas de las levaduras que se hallan en la fruta con un cierto grado de
descomposicin. De hecho, D. melanogaster convive con otras especies de Drosophila
domsticas, pero es la ms abundante y nica que puede vivir sobre residuos de vino
fermentado o vinagre.
En la investigacin gentica D. melanogaster ha suscitado tanto inters y se ha
convertido en uno de los organismos ms utilizados ya que posee muchas ventajas a
diferencia de la mayora de insectos, ante todo es muy fcil de criar en el laboratorio,
uno de sus medios de cultivo habituales es una papilla de harina de maz mezclada con

azcar y agar, hervida en agua, y a la que se aaden luego unas gotas de fungicida y una
pequea cantidad de levadura de pan. El medio de cultivo recin hervido, se deposita en
el fondo de frascos de vidrio de unos 0,250cm3 de volumen, tapados con algodn, en
cuyo interior se les coloca un trozo de papel filtro plegado en acorden, sobre el cual
puedan pupar las larvas maduras y posarse los adultos sin riesgo de quedar atrapados
por la pegajosa papilla. (Barahona, 2009).
El desarrollo de D. melanogaster, comienza con una clula, el cigoto, resultado de la
fusin de un vulo y un espermatozoide y que tiene toda la informacin para el
desarrollo de una mosca. Primero se produce el blastoderma por la activacin de un
conjunto particular de genes que contiene clulas no diferenciadas, hojas embrionarias,
que despus darn origen a la epidermis (futura piel), el sistema nervioso, el tubo
digestivo, los msculos y la grasa. Cada segmento dar lugar en una fase ulterior a
estructuras distintas. Los tres segmentos de trax tendrn un par de patas cada uno, no
as los abdominales. En el segundo segmento torcico, mayor que los otros dos, se
desarrolla el par de alas de la mosca. Los segmentos que componen la cabeza difieren
del resto del animal, en lugar de patas portan antenas, apndices con funciones olfativas;
en lugar de alas tienen ojos compuestos y rganos especializados para la visin.
(Castagnino, 2004). Drosophila melanogaster, tambin llamada mosca del vinagre o
mosca de la fruta, es una especie de dptero braqucero de la familia Drosophilidae.
Recibe este nombre debido a que se lo encuentra alimentndose de frutas en proceso de
fermentacin tales como la manzana, pltano, uva etc. Es una especie utilizada
frecuentemente en experimentacin gentica, dado que posee un reducido nmero de
cromosomas (4 pares), breve ciclo de vida (15-21 das) y aproximadamente el 61% de
los genes de enfermedades humanas que se conocen tiene una contrapartida
identificable en el genoma de las moscas de la fruta, y el 50% de las secuencias
protenicas de la mosca tiene anlogos en los mamferos. Para propsitos de
investigacin, fcilmente pueden reemplazar a los humanos. Se reproducen rpidamente
y presenta diferentes etapas de desarrollo (huevo, tres estadios larvales, pupa e imago)
las cuales pueden ser expuestas a diferentes frmacos, de modo que se pueden estudiar
muchas generaciones en un corto espacio de tiempo y observar sus alteraciones, ya se
conoce el mapa completo de su genoma. Fue adoptado como animal de experimentacin
gentica por Thomas Morgan a principios del siglo XX. Sus 165 Mb de genoma (1Mb=

1 milln de pares de bases) fueron publicados en marzo 2000 gracias al consorcio


pblico y la compaa Celera Genomies. Alberga alrededor de 13.600 genes.
La mosca de la fruta Drosophila melanogaster presenta una serie de caractersticas que
la hacen un material biolgico para ser utilizada como modelo experimental, ya que
tiene un ciclo de vida muy corto, distincin clara entre cada una de sus fases de
desarrollo, gran cantidad de descendientes, su mantenimiento requiere poco espacio y es
de costo reducido. De tal manera que esta mosca es un material ideal para poder
experimentar en cualquier nivel acadmico, ya que presenta diferentes etapas de
desarrollo (huevo, tres estadios larvales, pupa e imago) las cuales pueden ser expuestas
a distintos tratamientos experimentales por parte de los estudiantes. (Adams, 2000)
El gnero Drosophila se utiliza de forma generalizada en los laboratorios de gentica, de
hecho ha sido uno de los primeros organismos cuyo genoma ha sido secuenciado por
completo. Que las moscas de la fruta se utilicen para estos fines no es fruto de la
casualidad. Este pequeo organismo es en extremo prolfico y fcil de mantener; se
alimenta casi de cualquier materia vegetal fermentada, y no necesita unos cuidados
especiales. Por otro lado, su ciclo vital es muy corto, con lo que resulta sencillo
comprobar rpidamente el resultado de cualquier experimento donde se utilice. Con
todas estas caractersticas no es de extraar que sea un alimento idneo para pequeos
animales o cras recin nacidas, tanto de artrpodos como de reptiles. En el campo de la
terrariofilia su uso ha sido muy intensivo, sobre todo por parte de los criadores de
anfibios. Quizs sean los artrpodos los que ms puedan aprovechar el potencial
alimenticio de esta especie. En la actualidad ya es posible encontrar a la venta cultivos
preparados con varias especies de Drosophila. La ms comn y fcil de mantener es la
Drosophila melanogaster, que se caracteriza por un pequeo tamao y un color
amarillento claro. Es la especie reina en el campo de la gentica, y constituye un
alimento ideal para pequeos anfibios y artrpodos. En el mbito de la terrariofilia
tambin podemos encontrar otra especie, Drosophila funebris, de mayor tamao y un
color oscuro; la nica ventaja frente a melanogaster es su mayor tamao. En su contra
funebris es ms difcil de criar en masa y parece menos prolfica; si a esto unimos que
tarda ms del doble en llegar a adulta, concluiremos que la especie ms apropiada para
nuestros objetivos es melanogaster.

El ciclo vital de D. melanogaster tiene una metamorfosis completa. Su ciclo biolgico,


desde la fecundacin hasta llegar a adulto, pasa por los estados de huevo-larva-pupaimago. El desarrollo embrionario tiene lugar en el huevo, tras la fecundacin y
formacin del cigoto. La duracin de los estadios puede variar en funcin de un gran
nmero de factores, de los cuales el ms importante es la temperatura.
La exposicin continua a temperaturas superiores a 30C puede provocar la
esterilizacin y muerte de las moscas, adems de producir efectos sobre el fenotipo, o
variaciones en la penetracin o expresividad de determinados genes.
As mismo, las temperaturas inferiores a 20C hacen decrecer la viabilidad de las
moscas y prolongan el ciclo biolgico.
Una hembra puede empezar a depositar los huevos desde el segundo da despus de
emerger, y podr estar poniendo huevos durante 10 das aproximadamente, tiempo tras
el cual puede haber depositado alrededor de 400-500 huevos. El huevo depositado es de
forma ovoide, cubierto por una fuerte membrana quitinosa, corion, con la cara dorsal
ms aplastada que la ventral, que es redondeada. La superficie del corion presenta unas
marcas o relieves hexagonales. El huevo tiene un tamao aproximado de 0,5 mm. De su
parte anterior se proyectan dos palas, a modo de remos, cuya funcin es la de hacer de
flotadores para prevenir el hundimiento del huevo en la superficie semilquida en que es
depositado. (Guerrero, 2012).
Desarrollo de Drosophila. De una clula derivan clulas hijas que generan una posible
asimetra. Presenta una asimetra inicial en la distribucin de sus componentes
citoplasmticos que da lugar a sus diferencias de desarrollo. En la ovognesis se
generan clulas foliculares, clulas nodrizas y el ovocito. La mosca de la fruta, a 29 C,
alcanza a vivir 30 das; y de huevo a adulto 7 das. El desarrollo temprano determina la
formacin de ejes. El primordio desarrolla diferencias en los ejes: anteroposterior,
dorsoventral. Una sucesin de acontecimientos derivados de la asimetra inicial del
cigoto se traduce en el control de la expresin gnica de forma que las regiones
diferentes del huevo adquieren distintas propiedades. Esto puede ocurrir por la diferente
localizacin de los factores de transcripcin y traduccin en el huevo o por el control
diferencial de las actividades de estos factores.

Despus sigue otra etapa en la que se determinan las identidades de las partes del
embrin: se definen regiones de las que derivan partes concretas del cuerpo.
Los genes que regulan el proceso codifican reguladores de la transcripcin y actan
unos sobre otros de forma jerrquica y adems tambin actan sobre otros genes que
son los que verdaderamente se encargan del establecimiento de este patrn (actan en
cascada).

(Thompson, 1978)
Tambin hay que tener en cuenta las interacciones clula-clula ya que definen las
fronteras entre los grupos celulares.
Con respecto a la estructura de un segmento:
Hay 3 grupos de genes en funcin de sus efectos sobre la estructura de un segmento:
Genes maternos: expresados por la madre en la ovognesis. Actan durante o despus
de la maduracin del ovocito. Un ejemplo es el gen bicoid.
Genes de segmentacin: se expresan tras la fertilizacin. Se encargan del nmero y
polaridad de los segmentos (hay 3 grupos que actan secuencialmente para definir las
partes del embrin).
Genes hometicos: controlan la identidad de los segmentos (no el nmero, ni polaridad
o tamao).
Etapas del desarrollo

La siguiente etapa del desarrollo depende de los genes que se expresan en la mosca
madre. Estos genes se expresan antes de la fertilizacin. Pueden dividirse en:

Genes somticos maternos: se expresan en clulas somticas = clulas


foliculares.

Genes de lnea germinal materna: pueden actuar tanto en clulas nodriza como
en el ovocito.

Existen cuatro grupos de genes que intervienen en el desarrollo de las diferentes partes
del embrin. Cada grupo se organiza en una va diferente que presenta un orden
concreto de actuacin. Cada va se inicia con hechos que tiene lugar fuera del huevo, lo
que tiene como resultado la localizacin de una seal dentro de este. Estas seales (son
protenas que reciben el nombre de morfgenos) se distribuyen de forma asimtrica para
cumplir funciones diferentes.
Del eje antero-posterior se encargan 3 sistemas y del dorso-ventral se encarga uno:

Sistema Anterior: responsable del desarrollo de cabeza y trax. Se requieren


productos de la lnea germinal materna para situar al producto del gen bicoid en el
extremo anterior del huevo.

Sistema Posterior: responsable de los segmentos del abdomen. Muchos


productos intervienen en la localizacin del producto del gen nanos, que inhibe la
expresin de hunchback en el abdomen.

Sistema Terminal: desarrollo de estructuras de los extremos no segmentados


del huevo. Depende de los genes somticos maternos (activan el receptor codificado
por torso).

Sistema Dorso-ventral: se inicia por una seal desde una clula folicular de la
cara ventral del huevo y se transmite a travs del receptor codificado por el gen Toll.
Esto produce la generacin de un gradiente de activacin del factor de transcripcin
producido por el gen Dorsal.

Todos los componentes de los cuatro sistemas son maternos por lo que los sistemas que
establecen el patrn inicial dependen de sucesos anteriores a la fertilizacin.
(Ashburner et al, 1978).
El genoma de D. melanogaster (secuenciado en 2000, y curado en el FlyBase database)
contiene cuatro pares de cromosomas: un par X/Y, y tres autosomas sealados como 2,
3, 4. El cuarto cromosoma es tan pequeo que a veces se ignora, salvo el importante
gen sin ojos. El genoma secuenciado de D. melanogaster de 139,5 millones de pares de
bases contiene aproximadamente 15.016 genes. Ms del 60% de su genoma es funcional
al codificar ADN no codificador de protenas involucrados en el control de la expresin
gnica. La determinacin de sexo en Drosophila se produce por la relacin de
cromosomas X a autosomas, no debido a la presencia de un cromosoma Y como ocurre
en la determinacin de sexo en humanos. Aunque el cromosoma Y es enteramente
heterocromtica, contiene al menos 16 genes, muchos de los cuales cumplen funciones
relativas al sexo macho. (Castaeda, 2008).
A los pocos aos del redescubrimiento de las reglas de Mendel en 1900, Drosophila
melanogaster (la llamada mosca de la fruta) se convirti en un organismo favorito
"modelo" para la investigacin gentica.
Algunas de las razones de su popularidad:

Las moscas son pequeos y fcilmente criados en el laboratorio.

Tienen un ciclo de vida corto La figura muestra las diversas etapas del ciclo de
vida (no todos dibujado a la misma escala). Una nueva generacin de moscas
adultas puede producirse cada dos semanas.

Son fecunda; una hembra puede poner cientos de huevos fertilizados durante su
breve perodo de vida. Las grandes poblaciones resultantes hacen anlisis
estadstico fcil y fiable.

El gigante ("polytene") cromosomas en la saliva (y otros) glndulas de las larvas


maduran.

Ms recientemente, Drosophila ha demostrado en otras formas de haber sido una


eleccin feliz.

Su embrin crece fuera del cuerpo y puede ser fcilmente estudiado en cada
etapa de desarrollo.

La etapa de blastodermo del embrin es un sincitio (miles de ncleos no


confinados por las clulas), de modo que, por ejemplo, las macromolculas
como el ADN se inyecta en el embrin tienen fcil acceso a todos los ncleos.

El genoma es relativamente pequea para un animal (menos de un dcimo de los


seres humanos y ratones).

IV.

Las mutaciones pueden dirigidos a genes especficos. (Barahona, A. 2009).


GRFICOS Y RESULTADOS
Tabla N1: Morfologa de Drosophila Melanogaster

Partes de
Drosophila

Caractersticas

Melanogaster

Organismo
completo

Cabeza

La morfologa de D.
melanogaster se divide en
tres secciones principales:
cabeza, el trax y el
abdomen.

Se observa las siguientes


partes: antenas, ojos,
trompa, mandbula,
adems de numerosas

Grfico

cerdas que rodean toda la


cabeza.

Trax

Abdomen

Patas

Se
conforma
por
segmentos que involucran
transversalmente una placa
dorsal, una lateral en cada
lado entre las alas y la base
de las patas, y en una placa
ventral entre las bases de
las patas. Todos los
segmentos del trax se
encuentran casi fusionados
formando una caja casi
slida, cubierta de pelos.

Al igual que el trax se


conforma, en ambos sexos
por una segmentacin.
Adems se puede observar
su sistema digestivo casi
con claridad y otros
rganos internos. Al igual
que el resto del cuerpo se
rodea de pelos.

Se diferenci 6 patas
distribuidas
proporcionalmente, estas
estn introducidas en el
trax, y se conforman cada
una por 3 divisiones de

diferente tamao.

Se inicia en medio de los


ojos y es larga, con un
Trompa

grosor variable, termina en


un tipo de boca claramente
dividida.

Ojos

Antenas

Los ojos compuestos son


relativamente
grandes,
estn
separados
con
amplitud y son del mismo
tamao y forma en los dos
sexos, presentas zetas
pequeas y rgidas que
surgen de cada ngulo de
unin, posee miles de ojos
diminutos.

Entre los ojos estn las


antenas, que se encuentran
muy cercanas entre s.

Alas

Se encuentran adheridas a
la parte superior del trax,
son ligeras y poseen un
conjunto de lneas con un
grosor claro en forma de
venas.

Fuente: Laboratorio de Ciencias Biolgicas - ESPOCH


Elaborado por: Tarsis Camacho

V.
V.1.

CUESTIONARIO
Drosophila melanogaster tiene especificidad por diferentes ambientes para

su supervivencia?
Drosophila melanogaster, tiene especificidad por ambientes hmedos como parques,
jardines (cerca de los mercados), en lugares como ros o estanques, en casas o edificios
humanos, como almacenes de frutas, cerveceras, bodegas y restaurantes. (Annimo,
1999).
V.2.

Describa o explique las caractersticas del genoma de Drosophila

melanogaster y su importancia en ingeniera gentica.


Se reproducen rpidamente, de modo que se pueden estudiar muchas generaciones
en un corto espacio de tiempo, y ya se conoce el mapa completo de su genoma.
Posee 165 Mb de genoma (1 Mb = 1 milln de pares de bases) y alberga alrededor

de 13.600 genes.
Contiene cuatro pares de cromosomas: un par X/Y, y tres autosomas sealados
como 2, 3, 4. El cuarto cromosoma es tan pequeo que a veces se ignora, salvo el

importante gen sin ojos. El genoma secuenciado de D. melanogaster de 139,5


millones de pares de bases contiene aproximadamente 15.016 genes. Ms del 60%
de

su

genoma

es

funcional

al

codificar

ADN

no

codificador

de

protenas involucrados en el control de la expresin gnica.


Fue adoptada como animal de experimentacin gentica por Thomas Morgan a

principios del siglo XX.


Drosophila sigue siendo usado extensamente como modelo gentico para diversas
enfermedades

humanas

incluyendo

desrdenes

neurodegenerativos Parkinson, Huntington, ataxia espinocerebelosa y Alzheimer.


Esta mosca tambin se usa en estudios de mecanismos del envejecimiento y estrs

oxidativo, sistema inmunitario, diabetes, cncer, abuso de drogas.


(Reiter et al, 2001)
V.3.

Los machos y hembras de Drosophila melanogaster tienen el mismo tiempo

de vida?
Su longevidad es de dos meses, pero los machos comnmente viven menos tiempo que
las hembras. (Barahona, 2009)
V.4.

Cules son los genes estructurales del genoma de Drosophila ms

estudiados?
Genes Hometicos
Genes Hox
(Castaeda, 2008)
VI.
CONCLUSIONES

Se analiz la morfologa y fisiologa de la mosca de la fruta, Drosophila


melanogaster, para esto se observ microscpicamente dos tipos de mosca de la
fruta, una de ojos blancos, cuerpo oscuro y otra de ojos rojos, cuerpo claro, las
mismas que fueron inmovilizadas mediante la aplicacin controlada de ter.

Se desarroll dos pie de cra con dos tipos de Drosophila melanogaster, se aisl
a tres machos y cinco moscas hembras en un medio de cultivo especial para el
desarrollo, reproduccin y crecimiento de las moscas de la fruta, de esta manera
se realiz un seguimiento desde su incubacin hasta su mximo desarrollo como
mosca adulta.

Se determin las caractersticas morfolgicas externas de Drosophila


melanogaster, se observ a los dos tipos de moscas de la fruta de manera
detallada, distinguiendo as cada parte que conforma el organismo de la mosca.
Se distingui que su estructura morfolgica consta de 3 partes; cabeza, trax y
abdomen, adems de partes anexas como las alas, antenas y patas.

Se compar las diferencias anatmicas entre hembras y machos de esta especie,


se logr diferenciar su gnero mediante caractersticas como el tamao, en el
caso de las hembras son ms grandes que los machos, otra caracterstica fue la
terminacin del abdomen, en el caso de las hembras su abdomen termina en
punta, en el macho es redonda.

Se estableci las principales caractersticas fisiolgicas de la mosca de la fruta,


como son su reducido nmero de cromosomas, su corto ciclo de vida, y su tipo y
manera de alimentacin, estas caractersticas han hecho que Drosophila
melanogaster sea utilizada frecuentemente para experimentacin en ingeniera
gentica.

VII.

BIBLIOGRAFIA

Barahona, A. 2009. Morgan y la teora cromosmica de la herencia. Filosofa e historia


de la biologa. Facultad de Ciencias. UNAM. Mxico. Pg. 12-15.
Castagnino j. 2004. Acta Bioqumica Clnica Latinoamericana. Mxico. pp. 147-50
Adams MD, Celniker SE, Holt RA, et al. 2000. The genome sequence of Drosophila
melanogaster. Science. United States, New Jersey. Pg. 218595.
Guerrero M. 2011. Las moscas de la fruta, Revista de la SECA n 1. Madrid Espaa.
Pg. 17-23.
Ashburner M, Thompson JN. 1978. The laboratory culture of Drosophila. En: The
genetics and biology of Drosophila. (Ashburner M, Wright TRF (eds.). Academic Press.
volume 2A: pp. 181.

Castaeda, P. L. 2008. Drosophila melanogaster, un modelo experimental. FES Iztacala,


UNAM. Mxico. Pg. 123-135.
Reiter, LT; Potocki, L; Chien, S; Gribskov, M; Bier, E. 2001. A Systematic Analysis of
Human Disease-Associated Gene Sequences In Drosophila melanogaster. Genome
Research. Ucrania. Pg. 11141125.

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