Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Trabajo Práctico Nº3 2.0
Trabajo Práctico Nº3 2.0
Facultad de Ciencias
Escuela de Pregrado
Biologa General
I. Resumen
La clula es la unidad estructural de la vida, todos los organismos se
componen de clulas, y todas las clulas tienen muchas caractersticas
en comn, en este trabajo prctico analizaremos una de stas: El DNA.
En este prctico estaremos mencionando la importancia del DNA en el
desarrollo de la vida, ms especficamente en el entorno celular. La
explicacin de la extraccin y las propiedades de los materiales
utilizados sern los que ayudarn a cumplir el objetivo principal de
forma que puedan responder: Qu es el DNA?, Cules son sus
componentes?, Qu ocurre a nivel celular con los reactivos de la
extraccin?, e incluso otras preguntas ms profundas. Esto, con el fin
de informar al lector, con bases experimentales, sobre las caractersticas
del DNA, y a su vez, orientar a quien desee reproducir el prctico.
Esperamos obtener una hebra de DNA, para esto llevaremos a cabo una
serie de procesos, que desencadenarn en nuestro resultado final.
El laboratorio donde se realiza esta actividad est bajo condiciones
ambientales de temperatura y presin, sin tomar en cuenta la humedad
ya que esta ltima condicin no modificara nuestros resultados. Los
resultados en este prctico son cualitativos, as que se torna innecesario
el uso de alguna frmula. Segn los conocimientos previos, podemos
concluir el motivo del uso de los reactivos, ya que estos dejaran al
descubierto nuestra hebra de DNA.
Materiales:
- 2 frutillas
- 30 mL de agua destilada
- 4 gr de sal
- 4 gr de lavalozas
- Etanol fro de distintas graduaciones (50%, 65%, 80%, 95%) en agua
- Mortero
- Centrfuga
- 4 tubos de ensayo
- 1 Tubo de centrfuga 50 mL
- 4 pipetas Pasteur
- 2 pipetas plsticas 3 mL
- Gradilla
- Balanza granataria
Metodologa:
1.- Quitar las hojas de las frutillas, luego de eso proceder a moler con el
mortero, hasta dejar una pulpa de frutillas. Luego agregar 20 mL de
agua destilada y seguir revolviendo hasta obtener una mezcla
homognea de agua con frutillas.
2.- Luego proceder a depositar en el tubo de centrfuga, 30 mL de la
mezcla homognea y proceder a masar con una balanza granataria.
3.- Con el tubo en la balanza, colocar 4 gr de lavalozas y 4 gr de sal.
Despus agregar agua destilada hasta completar 50 gr, masa acordada
para el equilibrio en la centrfuga.
4.- Agitar con suavidad, para evitar la efervescencia de la sal con el
lavalozas, realizar esto hasta que no queden cmulos de sal en el tubo.
V. Anlisis de resultados:
Durante el desarrollo de este prctico se fueron observando distintos
cambios indicados anteriormente en el punto IV. El primer cambio ocurre
con la adicin de sal y lavalozas a la pulpa de frutilla, la accin de la sal
en el medio provoca por osmosis que la clula trate de equilibrar el
medio hipertnico liberando agua y con esto deshidrata la clula; a su
vez el lavalozas produce otros cambios en el medio, ya que el lavalozas
cambia el pH del medio dejando un pH bsico, esto rompe los lpidos
presentes en la membrana celular de la frutilla, y deja libre el resto de
los organelos de la clula.
El ltimo cambio se produce con la accin del etanol en el tubo de
ensayo, los cidos nucleicos al no ser solubles en alcohol, precipitan en
direccin a la capa de alcohol. En contacto con alcohol, los cidos
nucleicos se desenrollan, y precipitan en la interfase agua-alcohol
hacindose visibles; se trata de unas fibras blanquecinas que tienen el
aspecto de una telaraa, visibles a simple vista como se muestran en
las imgenes 1 y 2.
Es esta la etapa del proceso en el que precipita el ADN y se observa en
los tubos de 65%, 80% y 95%, pero en mayor medida se pueden ver en
el tubo de 95%. En este tubo se observan muchas hebras de ADN,
debido a la accin que tiene mayor fuerza en las hebras por su
concentracin de etanol.
VI.- Discusin:
Como ya hemos mostrado anteriormente en el proceso de la extraccin
de DNA se agregan sal comn y lavalozas que provocan ciertas
reacciones en la clula, que gracias a varios procesos, que explicaremos
a continuacin, conlleva a la extraccin del DNA.
El detergente disuelve los lpidos (grasas) lo cual es indispensable para
extraer las protenas integradas a la bicapa lipdica celular y nuclear,
rompiendo las uniones que mantienen la integridad de las membranas y
mantenindolos en la solucin acuosa (2). De esta forma se libera el
contenido celular. Gracias a esto se puede extraer el ADN sin daarlo
innecesariamente. Luego, el detergente forma complejos con los lpidos
y las protenas, permitiendo que los mismos sean separados del ADN por
filtracin. As se libera el ADN. (3)
La sal se utiliza para: cubrir los terminales fosfatos negativos,
permitiendo as que los extremos de las protenas se unan; Deshidratar
la clula; evitar la unin de las protenas al material gentico, y que el
ADN plsmido precipite en la solucin de alcohol.
El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero,
cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase
entre el alcohol y el agua, y dependiendo del grado de alcohol que se
utilice har que se precipite ms ADN en la solucin (Se logra notar la
diferencia en las imgenes presentadas en los resultados brutos) lo cual
esperbamos resultados ms notables con el ADN disperso en la fase
transparente.
VII.- Conclusin.
VIII.- Bibliografa