INSTITUTO TECNOLGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE MONTERREY

CAMPUS ESTADO DE MXICO

CULTIVO DE TEJIDOS
DRA. ESTELA FLORES
SOFA GUEVARA GALICIA - A01169433
29 DE ABRIL DEL 2015
ESCRITO

BIOENSAYOS CON CLULAS ANIMALES

En las ltimas dcadas, la necesidad de desarrollar nuevos compuestos que permitan atender
la alta demanda de patologas crnicas, han motivado a la bsqueda de fuentes alternas para
nuevos compuestos, para esto se han diseado diferentes bioensayos para la aprobacin de
estos. Existen bioensayos in vitro e in vivo, se ha puesto mucho nfasis en los sistemas in
vitro dado el ahorro de tiempo, materiales y factores relacionados con las campaas de
proteccin de animales, as como la gestin de las leyes que prohben las pruebas en
humanos. Sin embargo las pruebas in vitro son insuficientes para las evaluaciones globales
de toxicidad, los estudios corporales de dosis repetidas son imprescindibles y mantienen toda
su vigencia. En este escrito se presentan las principales consideraciones metodolgicas que
determinan que en este tipo de bioensayos no pueden realizarse las evaluaciones de toxicidad,
debido a la importancia de las interacciones entre clula y clula.
La exposicin humana a nuevas sustancias debe ser siempre acompaada por una valoracin
del riesgo de daar la salud, este riesgo no puede ser evitado o predecido. Esto ha motivado
a la comunidad cientfica para generar nuevos compuestos. La diversidad de protenas con
actividades en los diferentes procesos celulares, han propuesto la posibilidad de influir sobre
las respuestas celulares al emplear pptidos que alteren las propiedades de protenas
estructurales, enzimas, receptores, canales trasportadores que participan en respuestas
celulares como proliferacin, citotoxicidad, regulacin de estrs oxidativo y efectos
antimicrobianos.
Existen diferentes tipos de bioensayos, estos pueden clasificarse segn su duracin o la
cantidad de especies que abarca. El primer tipo son los ensayos de toxicidad aguda, estos son
de corto tiempo, con un periodo de 24 a 48 hrs. Tambin existen los ensayos de toxicidad
crnica, los cuales son pruebas que se realizan durante un periodo largo, caso contrario a los
anteriores, este tipo de bioensayo se lleva a cabo especialmente para determinar la dosis
mxima que no presenta efectos txicos fuertes a exposiciones constantes y para reconocer
los mecanismos de toxicidad acumulativos, por lo general estos bioensayos comprenden los
periodos de gestacin para hembras y de espermatognesis para machos, as como tiempos
pertinentes para evaluar el crecimiento individual o el aumento de biomasa.

En el siguiente tipo se encuentran los ensayos multi-especies, estas pruebas incluyen ms de

una especie, realizadas con el fin de evaluar las alteraciones producidas por interacciones
entre organismos y por la influencia del medio ambiente. Este bioensayo se puede clasificar
en tres:
1. Microcosmos: nmero reducido de especies, usualmente mide interacciones
depredador-presa o de competencia.
2. Mesocosmos: mayor cantidad de especies y por ende interacciones ms complejas
como cadenas trficas.
3. Estudios de campo: pueden ser experimentales u observacionales, incluye todos los
niveles de organizacin biolgica y la totalidad de variables temporales, climticas y
espaciales.
Tambin existen diferentes tipos de respuestas a los bioensayos, estas son las respuestas
cuantitativas y las respuestas de porcentajes. En las respuestas cuantitativas se mide en cada
individuo una variable cuantitativa, discreta o continua. En las respuestas de porcentaje para
cada nivel de dosis se mide el porcentaje de individuos que presentan una respuesta
determinada.
Para poder realizar bioensayos existen requerimientos de control de calidad. Es primordial
considerar que en la realizacin de pruebas biolgicas se requiere del control de los aspectos
que garantizan los resultados. Estos estndares de calidad se encuentran en la Norma
Mexicana NMX-EC.17025-IMNC-2006 Requisitos generales para la competencia de los
laboratorios de ensayo y de calibracin. Esta norma considera los siguientes aspectos:
organizacin y administracin del laboratorio, sistema de calidad y auditora, personal
distribucin y medio ambiente, instrumentos y equipos de medicin, trazabilidad en las
mediciones y mtodos de medicin y prueba.
Algunos de los aspectos mencionados en la NMX relacionados con el desarrollo de los
ensayos son las condiciones generales y la colecta y preservacin de muestras. En las
condiciones generales se menciona que lo ideal es que estos ensayos sean estandarizados, es
decir que los resultados demuestren estadsticamente que existe una relacin entre la
concentracin del compuesto txico y la respuesta biolgica de las clulas. En el caso de la
colecta y preservacin de muestras se deben llevar protocolos de muestreo y manipulacin o
preservacin de las muestras deben ser incluidas como parte de los procedimientos
estandarizados.

Algunas de las ventajas y desventajas de los bioensayos a nivel in vitro o in vivo son
mostradas en la tabla 1.
Tabla 1. Ventajas y desventajas de los bioensayos

Tipo

In vitro

In vivo

Ventajas
Disponibilidad de metodologas
estandarizadas
Comparacin de especies de
diferentes niveles
Posibilidad de utilizar las clulas
ms sensibles
Los resultados puede
correlacionarse con los datos fsicoqumicos
Proporcionan evidencia
incuestionable del deterioro
Indica los contaminantes
responsables de la afectacin

Desventajas
Deficiencia de realismo
Incapacidad de predecir efectos bajo
condiciones de campo
Aplicable solo en clulas probadas
Incapacidad de aislar los factores
causantes
No utilizable para pruebas de
hiptesis

La mayora de las pruebas alternativas con sistemas celulares y componentes subcelulares pueden
ayudar a entender los efectos y mecanismos a estos niveles. Pero estas pruebas tienen la limitacin
de no predecir la respuesta morfofuncional general del organismo.
Las investigaciones que emplean animales son de distinta ndole y, por supuesto, van dirigidas a
evaluar diferentes situaciones relacionadas con la toxicidad de los compuestos, incluyen, adems de
las clsicas pruebas agudas, precrnicas y de larga duracin, otros sistemas como los estudios de
toxicidad reproductiva, reacciones alrgicas y de inmunotoxicidad.
Debe recordarse que en el campo particular de los animales el problema de la evaluacin toxicolgica
es extraordinariamente complejo. Los cuales no ejercen sus acciones individualmente, sino que son
capaces de interactuar entre ellos y afectar una amplia variedad de parmetros fisiolgicos, por
ejemplo, absorcin/distribucin, activacin/desactivacin de enzimas, metabolismo de cidos
grasos/hormonas, microflora/enzimas intestinales, pH y trnsito a travs del tracto digestivo, rgano,
especificidad, estado de radicales libre y sistema inmune, entre otros.

REFERENCIAS
Cuevas Daz, M. d. (n.d.). INECC. Retrieved from Requerimientos de control de calidad en
Bioensayos: http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/665/requerimientos.pdf
E. Moreira, E. (1995). Fundamentos metodolgicos de los bioensayos de
oxicidad/carcinogenicidad. Scielo.
UNAD. (n.d.). Univesidad Abierta y a Distancia. Retrieved from Tipos de Bioensayo:
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/358027/358027/leccin_36_tipos_de_bioensayos.htm
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