TP 5: ANESTESIA EXCITACIN ANSIEDAD

Objetivos: Disear experimentos de psicofarmacologa. Realizar pruebas

de

psicofarmacologa

experimental,

con

observaciones

registros

comportamentales sencillos.
a) Anestesia
Para la realizacin de todo procedimiento quirrgico experimental o
teraputico es necesario contar con anestsicos que garanticen la analgesia
completa del sujeto de experimentacin y la seguridad del experimentador.
La anestesia se define como la supresin total o parcial, en forma temporal,
de la sensibilidad y la movilidad de los animales sin comprometer las
funciones vitales de los mismos, mediante la accin de frmacos aplicados
segn procedimientos especiales.

Los anestsicos pueden tener efectos

locales, troncales (regionales) o generales.

Clasificacin de anestsicos:
Segn vas de administracin:

Inhalatorios - por circuitos cerrados

- por circuitos semicerrados
- por circuitos abiertos
Parenterales -

administracin

subcutnea

(SC)
- intramuscular (IM)
- intraperitoneal (IP)
- endovenosa (EV, IV)
Segn grados de control:

Controlables
Semicontrolables
No controlables

Procedimiento:
Se estudiarn los efectos de anestesia en ratones por inhalacin (ter
sulfrico), por administracin IP de un cctel de clorhidrato de ketamina y
xilacina, o pentobarbital sdico, en cuanto a:

tiempo de induccin

dosis requerida

tiempo de mantenimiento

reflejos oculares

tiempo de reflejo de enderezamiento

El reflejo de enderezamiento se utiliza comnmente como una variable para

determinar el efecto anestsico de diversas drogas. Se registra el tiempo
necesario para que los animales recuperen su posicin normal luego de
haber sido colocados de espaldas.
Proponemos que diseen (junto con los simpticos e incansables profesor e
instructor) el experimento destinado a comparar los anestsicos disponibles,
teniendo en cuenta la necesidad de grupos controles, los tiempos de
registro, etc.
NOTA: Las dosis de 75 mg/kg de ketamina, y 10 mg/kg de xilacina
comnmente reportadas,

producen anestesia profunda y sostenida por

aproximadamente 1 h. A los fines del prctico, es conveniente aplicar dosis

sub-anestsicas.
b) Prueba de ansiedad
En un grupo de investigadores ingleses construy un laberinto con cuatro
ramas en forma de cruz, y demostraron que el estado de ansiedad de un
animal era mayor en las ramas abiertas, y que,efectivamente, la proporcin
de entradas y de tiempo pasado en cada rama reflejaba ms que slo un
cambio en la tendencia exploratoria (Pellow y File, 1986; Pellow et al., 1985).
Si un comportamiento est relacionado con la ansiedad, puede entonces
ser modificado con drogas que afecten la ansiedad, y no con drogas que
afecten otras respuestas conductuales. Es decir, drogas con efecto
ansioltico aumentan la exploracin de las ramas abiertas, mientras que las
ansiognicas lo disminuyen. La prueba del laberinto en cruz elevado es
uno de los modelos ms utilizados, por varias razones: es el modelo mejor
validado, en forma conductual, farmacolgica y fisiolgica; es capaz de
detectar cambios en el estado de ansiedad de un animal en ambas
direcciones (ansiolisis y ansiedad); es de fcil construccin y no involucra
entrenamiento previo de los animales, ya que se observa el comportamiento
espontneo de los mismos, no sometidos a estmulos nocivos como shocks
elctricos o deprivacin de alimentacin o bebida.
Procedimiento
El laberinto es una construccin de madera, con dos ramas abiertas de 50 x
10 cm y dos cerradas de 50 x 10 x 40cm con el techo descubierto, arreglada
de tal modo que las ramas abiertas quedan opuestas, al igual que las
cerradas. El laberinto est elevado 50cm del suelo, y el observador se ubica

a 2.5m enfrentando una rama abierta. En cada sesin experimental, los

animales son trasladados con anticipacin a la habitacin donde se realiza
la prueba, se los coloca en celdas individuales y se los inyecta con droga o
vehculo. A los 15 min, se colocan en forma individual en el centro del
laberinto, enfentando una rama abierta, y se los observa durante 5 min de
exploracin libre. Se registran los siguientes parmetros: porcentaje de
tiempo de permanencia en ramas abiertas respecto del tiempo total de
observacin (%T.R.A); el cociente entre las entradas a las ramas abiertas y
las entradas totales a ambas ramas (%A/T); y las entradas totales a ambas
ramas

(Ent.Tot).

(benzodiacepinas:

Para

ensayar

el

efecto

de

las

drogas

utilizadas

diazepam 1 mg/kg, flunitrazepam 0.5 mg/kg), se

inyectarn grupos de animales, siempre bajo la supervisin de los atentos y

elegantes

profesor

instructor

del

curso.

Nuevamente,

el

diseo

experimental ser realizado por los grupos de alumnos, previa consulta con
ya se imaginarn quienes.

c) Excitacin
Se determinar el efecto de un agente excitador como la anfetamina sobre
la actividad locomotora de ratones. Como paso previo se construir el

llamado open field sobre una cartulina de 50x50 cm, con una cuadrcula
con rayas separadas por 10 cm. Esta cartulina ser colocada en una caja de
cartn del mismo tamao. Los animales sern inyectados IP con anfetamina
dosis? (no jalar!!!! Los intrpidos y modernos profesor e instructor del
curso les recordarn la famosa escena de la pelcula Pulp Fiction en la cual
la joven Uma Thurman conocida personalmente por los seductores y
mundanos docentes- sufre las consecuencias de introducir en sus delicados
orificios nasales cierta sustancia de dudoso origen) y colocados en la arena
de experimentacin durante 5 minutos. Los grupos de estudiantes
registrarn los pasajes a travs de las rayas del open field, previa
determinacin del criterio a utilizar.
Entonces:
Qu nos dicen estos experimentos acerca de la accin de las drogas
utilizadas? Qu se sabe del modo de accin de estas drogas?
Casi todo lo que sabemos de la accin de psicofrmacos viene de este tipo
de pruebas. Te parece que es condicin suficiente para probar estas drogas
en humanos? Qu otras pruebas se te ocurren?
Qu variables hay que tener en cuenta para estos ensayos?
Ya que estamos:
Se adjuntan copias de prospectos de psicofrmacos de uso relativamente
comn en Argentina.
Qu conclusiones pods sacar de la informacin que figura en las
secciones de mecanismo de accin, administracin y efectos secundarios?
Bibliografa adicional:
Brailowsky, S. Las sustancias de los sueos: Neuropsicofarmacologa. Fondo de
Cultura Econmica, Mxico, 1995.
Castaneda, C. Las enseanzas de don Juan. Fondo de Cultura Econmica, 1991.