FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS EN LOS
ALIMENTOS INTRODUCCIN.- Conocer los factores que afectan el crecimiento de los microorganismos es necesario para el microbilogo de alimentos. A veces se requiere de condiciones deseables de crecimiento para hacer un recuento de los microorganismos, para llevar a cabo una fermentacin o para la produccin de protena unicelular. En otras ocasiones se requiere de condiciones desfavorables para el crecimiento de los microorganismos como es el caso de la conservacin de los alimentos. En los alimentos se crean microambientes que estn cambiando constantemente. Esto se debe a que en ellos se realizan muchas reacciones las cuales son catalizadas por enzimas naturales de los alimentos, de esas reacciones hay algunas que generan calor, otras consumen ogeno y se generan diido de carbono y otros gases. Estos cambios en el alimento afectan el desarrollo de loa sistemas microbianos. El medio ambiente determina las condiciones ba!o las cuales el microorganismo eiste y los microorganismos in"uencian las condiciones que prevalecen en el medio ambiente. En cualquier ambiente alimenticio, ciertas especies microbianas sobreviven y llegan a ser las especies dominantes. #os organismos que carecen de la habilidad para resistir el estr$s inducido por un medio ambiente desfavorable morirn. %ucho se ha discutido sobre las condiciones medioambientales requeridas para el crecimiento de manera de relacionar el macroambiente del sistema con el microambiente en el cual un microorganismo se desarrolla. Esto es necesario debido a que esencialmente no hay informacin acerca del microambiente en alimentos u otros productos. Algunos microorganismos pueden desarrollarse en el microambiente, pero no soportan el macroambiente. &a!o condiciones optimas de desarrollo, algunas bacterias se reproducirn cada '( ) *+ minutos. Aunque ellas pueden crecer en condiciones por arriba o por deba!o de las optimas, solo que la fase lag y,o el tiempo de generacin se alargara. -i el estr$s llega a ser muy severo, los microorganismos no crecen o no sobreviven. #as condiciones optimas para el crecimiento microbiano son in"uenciadas por el sistema enzimtico. #as enzimas son catalizadores orgnicos que incrementan la velocidad de reaccin. #a velocidad de las reacciones metablicas es in"uenciada por las condiciones ambientales que afectan la actividad de las enzimas. #as condiciones que afectan el metabolismo y multiplicacin de los microorganismos incluyen. nutrientes, agua, p/, ogeno, luz, inhibidores, temperatura, tiempo. Como los microorganismos son parte del ambiente y pueden alterar $ste, interacciones microbianas 0efecto de un microorganismo sobre otro1 son importantes. El estr$s previo ocasionado por un 0calentamiento subletal, congelamiento o radiaciones1 que unos microorganismos ha sufrido afectar su habilidad para competir con el ambiente. 2entro de los factores o condiciones que in"uencian el crecimiento microbiano tenemos parmetros intrnsecos y parmetros etrnsecos. 3armetros intrnsecos.4 todos aquellos factores que estn relacionados con el alimento. Composicin del alimento 0nutrientes1 p/ Contenido de agua 0A5 1 3otencial redo 0 oigeno 1 1 6nhibidores microbianos Estructuras biolgicas 6nteracciones microbianas 3armetros 6ntrnsecos.4 Nutrientes 7odos los biosistemas requieren de ciertos compuestos qumicos y de ciertas reacciones qumicas para sobrevivir y reproducirse. #a c$lula microbiana es capaz de obtener una fuente de energa y sintetizar su protoplasma celular a partir de su medio ambiente. #os organismos requieren una fuente de carbono y nitrgeno, factores de crecimiento, tales como vitaminas, minerales y agua. #a habilidad de los organismos para utilizar compuestos y sintetizar componentes celulares depende del sistema enzimtico que el microorganismos pueda elaborar, de acuerdo a su cdigo gen$tico. Como el cdigo gen$tico puede cambiar 0mutar1 puede haber ligeras o importantes diferencias entre cepas de una especie de microorganismos. El sustrato y otros factores ambientales afectarn la cantidad de enzimas producidas por el microorganismo. Energa y fuentes de carbono #os organismos de inter$s principal en microbiologa de alimentos son los 8uimioorganotrofos que usan compuestos orgnicos como fuente de energa y fuentes de carbono. Como fuente de energa, los microorganismos utilizan. az9cares, alcoholes y aminocidos. Algunos microorganismos son capaces de utilizar carbohidratos comple!os como. almidones, celulosa que al degradarlos a compuestos ms simples, genera energa. #as grasas son usadas tambi$n por los microorganismos como fuente de energa, pero estos compuestos solo pueden ser utilizados por un relativamente muy peque:o n9mero de microorganismos. Fuentes de nitrgeno: Como fuentes de nitrgeno el o los microorganismos pueden utilizar tanto compuestos nitrogenados orgnicos como inorgnicos y $stos son necesarios para producir protenas celulares, incluyendo enzimas. As las fuentes principales de nitrgeno para los microorganismos hetertrofos son aminocidos. ;n gran n9mero de otros compuestos nitrogenados pueden servir de $sta funcin para otros microorganismos. Algunos microorganismos por e!emplo son capaces de utilizar nucletidos y aminocidos libres, mientras que otros utilizan p$ptidos y protenas. En general, compuestos simples tales como aminocidos. Otros factores de crecimiento Algunos microorganismos necesitan factores de crecimiento, tales como vitaminas, purinas o pirimidinas. Algunos microorganismos fastidiosos requieren que los metabolitos antes mencionados se les suministren como mol$culas elaboradas. En general, las bacterias <rampositivas requieren de ms factores de crecimiento elaborados que cualquier otro microorganismo. Algunos microorganismos requieren de vitaminas del comple!o & en ba!as cantidades y la mayora de los alimentos tienden a tener una cantidad abundante para aquellos microorganismos que son incapaces de sintetizarlos. =uncin de las vitaminas,. Actuar como coenzimas en los ciclos metablicos. 2 7abla >.' =unciones de las ?itaminas VITAMINA COENZIMA FUNCIN-REACCIN &6@76AA C@EAB6%A &6@76AA 7ransferencia de gpos. Carboilo, desaminacin y C!acin de co* Dcido panttenico CoA 7ransferencia o intercambio de grupos acilo Dcido flico trtrahidrofolato 7ransferencia de unidades de un4carbn, mutilacin, sntesis de purinas y pirimidinas. 7iamina 3irofosfato de tiamina Aceptor de grupos Carboilo de la descarboilacin de ceto4cidosE ciclo de Frebs, metabolismo de lpidos. Gibo"avina 0&*1 =lavin mononucleotido 0=%A1 =lavin adenindinucleotido 0=A21 2eshidrogenacin, transferencia de electrones4 oidaciones 2eshidrogenacin Aicotinamida 0&(1 0Aiacina1 Aicotinaminadenindinucl eotido 0AA21 Aicotinaminadenindinucl eotido fosfato 0 AA231 2eshidrogenacin,generacin de energa 2eshidrogenacin, aceptor de hidrogeno, sntesis de cidos grasos. 3iridoina 0&H1 =osfato de 3iridoina 2esaminacin, racemizacin, transaminacin, descarboilacin de aminocidos Cobamida 0&'*1 Coenzima cobamida 2esoiadenosil 0&'*1 7rasferencia de grupos metilo Elementos y minerales.- Ciertos elementos o minerales encontrados en compuestos celulares son requeridos en cantidades traza por los microorganismos. Algunos en cantidades grandes como el. sodio, potasio, calcio y magnesio comparados con el hierro, cobre, manganeso, zinc, cobalto, y molibdeno que se requieren en cantidades traza. #a actividad de algunos sistemas enzimticos es estimulada por minerales traza. Algunos otros elementos son necesarios para la produccin de toinas, pigmentos u otros metabolitos secundarios. Adems de los metales, los microorganismos necesitan elementos tales como fsforo y azufre. #os fosfatos son encontrados en los enlaces de alta energa de A73. 7abla >.* A#<;A@- %6AEGA#E- 6A?@#;CGA2@- C@A #A AC76?62A2 EAB6%D76CA 3 MINERAL ENZIMA(S) CA#C6@ C@&A#7@ C@&GE /6EGG@ %A<AE-6@ %AA<AAE-@ %@#6&2EA@ 3@7A-6@ B6AC amilasas y proteinasas peptidasas tirosinasas, oidasas citocromos, sistema de transporte de e4 en las mitocondrias, ferredoinas. fosfatasas, reacciones de A73, carboilasas peptidasas, isomerasas Geduccin de nitrato, antn4oidasas fructoIinasas, trasfosforilasa4fosfopiruvato deshidrogenasas, peptidasas, anidrasa carbonica Actividad de a!a.4 #os te!idos animales y vegetales contienen agua en diferentes concentraciones distribuida de una manera muy comple!a y heterog$nea. #as protenas, los carbohidratos y los lpidos, contribuyen a la formacin de comple!os hidratados de alto peso molecular dentro de estos te!idos y cuya caracterizacin y cuantiCcacin en un alimento es demasiado difcil de efectuar. El agua no solo contribuye a las propiedades reolgicas y de tetura de un alimento a trav$s de su estado fsico, sino que sus interacciones con los diferentes componentes tambi$n determina el tipo reacciones qumicas que se pueden suscitar en el alimento. 2e aqu pues que el t$rmino Jactividad de aguaK determina el grado de interaccin del agua con los dems constituyentes de los alimentos, y es pues una medida indirecta del agua disponible para llevar a cabo las diferentes reacciones a las cuales estn su!etos los alimentos. Este factor lo podemos calcular por medio de la siguiente ecuacin. A5L 3 L M/G 3@ '++ 2onde. A5 L actividad de agua 3 L presin de vapor del alimento a temperatura 7 3oL presin de vapor del agua pura a temperatura 7 M/GL humedad relativa de equilibrio del alimento a la cual no se gana ni se pierde agua. #a adicin de solutos aumenta el punto de ebullicin del agua y reduce el de congelamiento, lo cual depender del peso molecular del soluto y de su concentracin. @tra forma de calcular la actividad de agua de los alimentos con base en los solutos que contiene es mediante la siguiente formula. A5 L 3 L %a 3o %a N%s 2onde. 4 %a L moles de agua %s L moles de soluto /umedad En condiciones de deshidratacin, algunos microorganismos pueden permanecer vivos, pero no pueden llevar a cabo sus actividades metablicas o de multiplicacin normales sin agua. #os microorganismos pueden crecer 9nicamente en soluciones acuosas. Ao pueden crecer en el agua pura o en la ausencia de agua. El agua es el disolvente universal. 3or $sta capacidad, el agua es usada para el transporte de nutrientes dentro de la c$lulas y para eliminar los productos de desecho. El agua esta involucrada en las reacciones qumicas que desdoblan sustratos a mol$culas utilizables. Estas reacciones incluyen la hidrlisis de los enlaces peptdicos en las protenas, los enlaces ester en las grasas y en la conversin de los polisacridos a monosacridos. Aunque el contenido de agua de los alimentos se da en porcenta!e, no es lo ms correcto, dada que $ste no es un determinante vlido de actividad biolgica. El agua en un alimento se encuentra en dos formas JligadaK y JlibreK. El agua ligada esta unida a las macromol$culas por medio de fuerzas fsicas y no esta disponible para actuar como solvente o para participar en las reacciones qumicas. 3or tanto, no esta disponible para las actividades metablicas de los microorganismos. Cuando en el agua se disuelven solutos, el punto de congelamiento es reducido, el punto de ebullicin se incrementa, la presin de vapor del agua se reduce y hay un desarrollo potencial de una presin osmtica. Actividad de agua Esta es un indicie de la disponibilidad de agua para las reacciones qumicas y para el crecimiento microbiano. #a actividad biolgica del agua, o actividad de agua 0 A5 1, se relaciona con la humedad relativa en equilibrio 0 /GE 1 o presin de vapor 0 3? 1. #a A5 ha sido deCnida como la relacin eistente entre la 3? del agua del alimento a la presin de vapor del agua pura a la misma temperatura, o A5 L 3,3o. 3resin de vapor #a presin de vapor de un lquido depende en si de la velocidad de escape de las mol$culas de la superCcie del lquido. El escape del vapor de agua hacia el aire se mide por la /GE. Asi, la 3? y la /GE se relacionan. Cuando el agua es alterada por la adicin de un soluto, la concentracin del agua disminuya y la velocidad de escape disminuye tambi$n. En una solucin ideal, la 3? parcial de un componente es directamente proporcional a la fraccin de mol$culas de aqu$l componente en la mezcla. 2e acuerdo a la ley de Gaoult, la 3? parcial del solvente es igual a la presin de vapor del solvente puro multiplicado por la fraccin mol del soluto en la solucin. #a ecuacin para esta relacin es. 3 L 3o A Cuando 3 es la presin parcial del agua, 3o es la 3? del agua pura y A es la fraccin mol del soluto. A es com9nmente epresado como. A L n* , n* Nn' A* L moles de agua A' L %@#E- 2E -@#;7@ ;n litro de agua pesa '+++g y el peso molecular gramo del agua es 'O.+'H. Esto signiCca que hay '+++ , 'O.+'H o ((.(' moles de agua en '+++g. Con agua pura, la fraccin mol es ((.(' , ((.(' N + L '.++ -i un mol de un soluto es adicionado a '+++g de agua, la fraccin mol del agua es ((.(' , ((.(' N ' L +.PO*Q. #a /GE de la solucin tericamente es POM y la A5 es +.PO. Este tipo de clculos pueden ser aplicados 9nicamente a soluciones muy diluidas, soluciones ideales. 5 #a actividad de agua de una solucin es deCnida en t$rminos de 3? y /GE por la formula. A5 L 3 , 3o L /GE ,'++ A5 medida o calculada. 2ebido a que las soluciones no4ideales, la A5 calculada por la fraccin mol del agua no corresponde a la A5 medida por la 3? o humedad en las determinaciones. #a A5 calculada y medida de soluciones electrlitos compara favorablemente deba!o de concentraciones de +.H molal. En un nivel de > molal, el valor de A5 calculado de una solucin de sacarosa es +.PQ pero el valor medido es de alrededor +.P+. En concentraciones molales equivalentes, la sacarosa ba!a el A5 ms que el glicerol. %uchos m$todos han sido sugeridos para medir el A5 de varias soluciones. -iete m$todos de los ms comunes fueron comparados por #abuza y col 0'PRRH1. #a t$cnica de la presin de vapor manom$trica tiene la me!or reproducibilidad en los resultados. 7ericamente en soluciones ideales, la A5 es independiente de la temperatura. #os alimentos, as como tambi$n muchas soluciones, no son ideales. As que estos factores no son independientes 0Goss 'PR(1. Actividad de agua y crecimiento microbiano #os microorganismos tienen una A5 mima, optima y mnima para crecer. 3uesto que el A5 del agua pura es '.++ y los microorganismos no pueden crecer en agua pura, el lmite mimo superior para crecimiento microbiano $sta en un A5 algo menor de '.++. Algunos alimentos tienen valores de A5 mayores de +.PP(, que estn cercanos a '.++. Ao obstante los microorganismos no crecen en estos alimentos. #a inhibicin del crecimiento microbiano es de importancia para los microbilogos de alimentos. 3or eso, el A5 mnima en que el crecimiento puede presentarse ha sido de mucho inter$s. En general, para crecer, las bacterias requieren una mayor A5 que las levaduras y las levaduras requieren una mayor A5 que los hongos. #os valores de A5 mnimos para el crecimiento de varios microorganismos estn registrados en la tabla >.H. A9n en diferentes cepas de la misma especie los valores de A5 mnima para el crecimiento varan. El A5 lmite para crecer esta in"uenciado por otros factores ambientales que estarn en valores ptimos pero el organismo que esta siendo probado si el a5 mnimo absoluto es el que va ha ser determinado. -i estos factores no estn ptimos durante la prueba, el resultado de a5 mnimo para crecer de un organismo aparecera para ser superior que el valor real. el soluto usado para ba!ar la a5 afecta el a5 mnimo. 3or e!emplo, Sacc"a#$%&ce' #$!(ii es tolerante al az9car y puede crecer cerca de un a5 de +.H* en una solucin azucarada, pero 9nicamente arriba de +.O' si la sal es el soluto. #os microorganismos tienden a crecer me!or en un substrato en el que el a5 es alterado por desorcin me!or que por adsorcin. En un sistema alimenticio, las P'e!d$%$)a' crecen a una a5 de +.O> 0#abuza y col 'PR*1. El a5 mnimo para el crecimiento de bacterias es +.P4+.P', ecepto para S. a!#e!' y las bacterias haloflicas. El valor para los haloClos es enlistado como +.R(, que es tambi$n el a5 de una solucin saturada de AaCl 0tabla >.R1. El crecimiento de S. a!#e!' a varios niveles de a5 se muestra en la Cgura >.*. Como el a5 se reduce aba!o de +.PP, la velocidad de crecimiento se reduce, as como tambi$n es evidente un menor crecimiento total. Adems del a5 mnimo para el crecimiento bacteriano, hay otros aspectos de estos parmetros que son importantes. Estos incluyen. formacin y germinacin de esporas y la formacin de toinas por microorganismos potencialmente da:inos 0tales como S. a!#e!' y C *$t!+i)!%1. 3itt y Christian 0'PHO1 enlistaron los requerimientos de a5 de QH mohos para la germinacin y la formacin de esporas aseuales y seuales. Con frecuencia una alta actividad de agua es necesaria para la esporulacin ms que para la germinacin y el crecimiento. #a esporulacin seual usualmente requiere una mayor a5 que la esporulacin aseual. En las actividades de agua deba!o de la mnima, los microorganismos supuestamente no crecern. Como la a5 se ba!a de la optima, hay un incremento en la fase lag y una 6 disminucin en la velocidad de crecimiento. Esto signiCca que alimentos con niveles de a5 mnima estarn almacenados por ms tiempo con menos deterioro microbiano que alimentos con actividades de agua superior. ;na muy alta a5 puede limitar la velocidad de crecimiento. ;na curva tpica relacionando la velocidad de crecimiento con la a5 se muestra en al Cg. >.Q. =razier 0'PHR1 enlista valores de a5 ptimos para el crecimiento de St#e,t$c$cc!' -aeca+i' como +.PO* y para Lact$*aci++!' viridescens como +.PR(, .i*#i$ c$'tic$+a no crece en valores de a5 arriba o alrededor de +.PO. @tros efectos.4 #a actividad de agua in"uencia la resistencia de los microorganismos a efectos fsicos tales como el calor. En general, al ba!ar la a5 incrementa la resistencia hasta unos valores etremadamente ba!os de a5, la resistencia puede ser disminuida. #as esporas son ms resistentes al calor en valores de +.* a +.>. El a5 tambi$n in"uencia el tiempo de supervivencia durante el almacenamiento. #os efectos de la tensin del agua sobre los microorganismos fueron revisados por &ro5n 0'PRH1. Actividad de agua de los alimentos El a5 de los alimentos se puede disminuir al remover el agua 0deshidratacin1, por adicin de solutos 0az9car, sal1 o por congelamiento. #os a5 comunes de varios alimentos son enlistados en la tabla >.O. 2ependiendo del sistema de medicin, =ett 0'PRQ1 reporta variaciones de a5 de N4 +.++Q a N4+.+'' y #abuza et al 0'PRH1 reportaron que diferentes m$todos de medicin pueden variar N4 +.+* unidades de a5. Alimentos frescos, tales como frutas, vegetales, carne, pollo y pescado tienen valores de a5 de +.PO o arriba de +.PP que permitirn el crecimiento de la mayora de los microorganismos. #a velocidad de crecimiento de las bacterias es mayor que el de las levaduras y de los mohos. 3or eso, en alimentos de a5 altos las bacterias se desarrollaran ms rpidamente que los hongos 0levaduras y mohos1. S causarn deterioroE mientras que en alimentos con valores de a5 que restringen el crecimiento bacteriano, los hongos crecen y llegan a ser dominantes. Ecepciones a estas generalizaciones se dan en las frutas que se deterioran por el desarrollo de hongos debido a la acidez del producto que restringe el crecimiento bacteriano. #os productos que tienen a5 ba!os por su alto contenido de az9cares como 0mermeladas, !aleas o miel1 estarn su!etos al ataque por levaduras osmoflicas, mientras que en productos que contienen altas concentraciones de sal 0a5 ba!o1 se deterioran por bacterias haloflicas o halotolerantes. #os alimentos deshidratados generalmente tienen valores de a5 por aba!o de +.R(. -e considera que un nivel de a5 seguro para almacenar los alimentos es usualmente el de +.R o menor. En alimentos prote!idos por a5 ba!a, se pueden presentar cambios enzimticos aunque a una velocidad muy lenta. Aiveles de humedad seguros.4 puesto que muchos microorganismos no crecern deba!o de +.R de a5, si el a5 de los alimentos se reduce hasta $ste nivel, se mantendr estable a temperatura ambiente. #abuza y col 0'PR*1 estudiaron una mezcla de platano a!ustado a varios valores de a5 por desorcin y absorcin de agua. En las mezclas a!ustadas por desorcin, las esporas de los mohos germinaron y crecieron en una a5 de +.HO 0a *(TC1, pero cuando las a5 fueron a!ustadas por absorcin, los mohos mostraron una disminucin aun a una a5 de +.P. Con estos datos, el concepto de a5 de +.R siendo el nivel seguro ser reevaluado.
7 M/TODOS PARA REDUCIR EL A0 EN LOS ALIMENTOS 2eshidratacin del alimento 0eliminacin del agua por "u!o de aire caliente1. Adicin de solutos 0 az9car, sal 1. Congelamiento del alimento FUNCIONES DE AGUA EN LA .IDA DE LOS MICROORGANISMOS '.4 7ransporte de nutrientes 0hacia el interior de la c$lula y el retiro de los productos de desecho1. *.4 -oporte de todas las reacciones bioqumicas celulares. /idrlisis de enlaces peptdicos en protenas /idrlisis de enlaces $ster en los lpidos /idrlisis de polisacridos a sus correspondientes monosacridos Q.4 Gegulacin de temperatura >.4 Gegulacin del p/ (.4 #ubricante EFECTOS DEL DESCENSO DE LA A0 SO1RE EL CRECIMIENTO MICRO1IANO 1. 6ncrementa la fase #ag. *. 2isminuye la velocidad de crecimiento. Q. Ao hay produccin de toinas. >. 6ncrementa la resistencia al calor. (. 6ncrementa la sobrevivencia. H. <erminacin de las esporas .ALORES DE A0 DE ALGUNOS ALIMENTOS ALIMENTO A0 =rutas y vegetales frescos +.PR4'.++ 3ollo y pescado frescos +.PO4'.++ Carnes frescas +.P(4'.++ 8 /uevo +.PR Uugo de frutas y vegetales +.PR 3an blanco +.P>4+.PR 3an tostado +.Q 8ueso 0mayora de tipos1 +.P'4'.+ Carne curada +.OR4+.P( 3astel horneado +.P4+.P> /arina +.HR4+.OR Arroz +.O4+.OR %iel +.(>4+.R( Az9car +.' Cereales +.'4+.* ?egetales deshidratados +.* /uevo deshidratado +.> Chocolates y dulces +.HP =rutas deshidratadas +.(4+.OP P$te)cia+ O(id$-Red!cci2) El potencial oido4reduccin 0@G1. Cuando una substancia es oidada, esta perdiendo electrones y estos electrones pueden ser aceptados por otra substancia que entonces llega a reducirse. El potencial @G es una medida de la tendencia de un sistema reversible a dar o recibir electrones. El potencial @G a un p/ constante es descrito por la ley de Aernst cuya ecuacin es. E L Eo ) 0G7,nf1 #n 0red,o1 2onde. Eo L Constante caracterstica del sistema G L Constante de los gases 0O.Q'( coulombs ) volt1 7 L 7emperatura absoluta n L A9mero de electrones involucrados en el proceso @G = L =araday 0PH,(++ coulombs1 #n L #ogaritmo natural Ged L Concentracin del estado reducido @ L Concentracin del estado oidado A Q+VC, a un p/ constante y substituyendo los valores para G, 7, = y multiplicando por *.Q+* para convertir el logaritmo natural a logaritmo com9n, la ecuacin queda. E L Eo ) 0+.+H,n1 log 0red,o1 E L Eo N 0+.+H,n1 log 0o,red1 Cuando o L red, el sistema esta (+M oidado y (+M reducido, el log de ' L +, y la E L Eo. #os valores de Eo de varios indicadores son enlistados en la tabla >.'' para p/ de R.+ a Q+VC. el potencial de @G esta interrelacionado a la temperatura y p/. El azul de %etileno 9 tiene un Eo de N+.'+' volt a p/ de (.+, N+.+'' volt a p/ de R.+ y de )+.+(+ volt a p/ de P, a Q+VC. Como se estableci en el capitulo *, por el uso de estos indicadores, el potencial @G de un sistema puede ser estimado. El indicador dar un color distinto al de la solucin en el p/ del sistema que se esta estudiando. 2esgraciadamente, algunos se comportan tanto como indicadores de p/ como de @G. Ellos pueden dar un color intenso en una solucin alcalina, pero en soluciones cidas o neutrales rinden 9nicamente un d$bil tinte. #a E es una medida de la intensidad, no de la capacidad de un sistema. #a capacidad es la habilidad de envenenamiento, que act9a en una manera similar a los buWer que mantienen un valor constante de p/. ;n sistema se dice que esta envenenado si $ste resiste cualquier cambio en su potencial. Efecto sobre os !icroor"#nis!os En cultivos microbianos las oidaciones y reducciones simultneas son la fuente de energa para la c$lula. 3uesto que la energa es necesaria para que la c$lula funcione normalmente, las reacciones @G y el potencial @G son importantes. #a amplia clasiCcacin de los microorganismos en aerobios y anaerobios, como se discuti en microbiologa en general, esta basado sobre su aparente tolerancia al oigeno durante el crecimiento. #os anaerobios obligados o estrictos pueden crecer 9nicamente en la ausencia de oigeno. <eneralmente, $stos microorganismos crecen ms rpidamente en condiciones aerbicas. Ao obstante, el Streptococo y el Lactobacillus crecen igual de bien con o sin oigeno. Ciertas especies de Streptococcus y Pediococcus son microaeroflicos. Ellos crecen me!or en muy peque:as cantidades de oigeno. #os aerobios estrictos u obligados requieren de oigeno para su crecimiento. 2iscutiendo los efectos que limitan el crecimiento en una bacteria anaerobia, /entges y %aier 0'PR*1 citaron referencias para mostrar que algunos tipos de microorganismos anaerobios obligados fallaron para crecer al ser epuestos al oigeno del aire durante el mane!o de dilucin y siembra. Estos anaerobios obligados raramente son reportados en alimentos, probablemente porque no se toman los suCcientes cuidados para descubrirlos en ellos. -i ellos son tales anaerobios estrictos, ellos probablemente causen poco, si alg9n, problemas serios en los alimentos. #oesche 0'PHP1 reportaron que los anaerobios diCeren en su sensibilidad al oigeno. #os anaerobios estrictos u obligados incluyen microorganismos de los g$neros Treponema !lostridium Selenomas Succini"ibrio #utyri"ibrio y Lac$nospira. Este grupo es llamado anaerbico con un metabolismo anoybiotico 0no son capaces de usar oigeno atmosf$rico en su crecimiento1. El segundo grupo de microorganismos, designado como anaerobios moderados, incluyen. #acteroides Fusobacterium !lostridium % Peptostreptococcus. ;n tercer grupo de microorganismos produciendo menos crecimiento en condiciones anaerobias estrictas que en presencia de peque:as cantidades de oigeno. Este es tpico de microaeroflicos. El 9nico g$nero fue nombrado &ibrio. #os anaerobios moderados pueden ser sembrados en atmsferas ambientales e incubados en !arras de anaerobiosis. Estos son los anaerobios que han sido de signiCcacin en microbiologa de alimentos. 2e estudios preliminares, /etges y %aier 0'PR*1 establecieron que el potencial @G no es importante tomando en cuenta la multiplicacin de las especies de &acteroides. Cuando el ogeno es ecluido del medio ambiente, los &acteroides no se vieron afectados con el potencial de @G elevado del medio. Xadel y /eges 0'PR(1 estudiaron el crecimiento y supervivencia de #acteroides fragilis, !lostridium perfringens y Peptococcus magnus. En altos y ba!os potenciales redo con y sin ogeno. Aun en un nivel de potencial redo de )(+ mv estos microorganismos no crecen en la presencia de ogeno. Ao se observo ninguna inhibicin y la ausencia de ogeno aun en potencial redo de NQ*( mv. Esto indica, que el ogeno ms que un potencial redo positivo, fue el factor limitante para el crecimiento de estos anaerobios. 2e estos tres microorganismos el 3. %agnus fue el ms sensible al ogeno 10 y el C. perfringens el menos sensible. @nderdoI y col 0'PRH1 reportaron que & fragilis no se afect con un potencial redo de NQ++ mv en la ausencia de ogeno, pero la muerte celular ocurri con ogeno a N*(+ mv. Ellos sugirieron que el ogeno disuelto tiene un efecto inhibitorio sobre &. =ragilis, que puede ser independiente de cambios en el potencial redo solamente. Efectos similares de ogeno en ba!os potenciales redo fueron notados para la esporulacin y crecimiento de Clostridium butiricum. 2ebido a la comple!idad de mantener y medir los potenciales @G, no hay mucha informacin sobre $ste parmetro como lo hay para el p/. 7ambi$n, los resultados varan considerablemente de un eperimento a otro, entre cepas de especies y entre diferentes investigaciones. Feeney 0'PRQ1 sugiri los intervalos para el crecimiento de aerobios de N Q(+ a N(++ mv, anaerobios facultativos de N'++ a NQ(+ mv y anaerobios obligados aba!o de )'(+ mv. Clostridium perfringens no es un anaerobio estricto y es conocido para ser aerotolerante. #os valores limites de @G para crecimiento estn en el intervalo de )'*( a N*OR mv. Algunos clostridios son anaerobios 0C. botulinum, C. histolyticum. C. sporogene1 no necesitan un potencial @G negativo para crecer. Estos microorganismos crecern en niveles de potencial @G de NO( N'H+ mv. EFECTO DE LOS MICROORGANISMOS SO1RE EL POTENCIAL REDO3 /a sido bien establecido que, cuando un microorganismo esta metabolizando substratos, se reducen los valores del potencial redo en el medio o sustrato. El descenso de los potenciales se cree que se debe al consumo de ogeno o a la produccin de substancias reductoras. Cuando se trata de bacterias anaerobias, hay un ligero descenso del potencial @G durante la fase log de crecimiento, el ogeno consumido durante el metabolismo causa una rpida cada en el potencial redo. Cuando el potencial redo llega a valores negativos, la velocidad de crecimiento de las bacterias disminuye. ;n descenso global del potencial esta entre >++ y (++ mv. En los inicios del crecimiento, los anaerobios facultativos alteran el potencial redo del sustrato de una manera similar que los microorganismos aerobios, pero la velocidad de reduccin puede ser algo lenta. 2espu$s de que las bacterias entran en la fase log de crecimiento, hay un rpido descenso en el potencial redo. Esta cada global del potencial puede ser R++ a O++ mv o ms. Cuando el cultivo alcanza la fase estacionaria, y con el incremento en la fase estacionaria, el potencial @G cambia a valores ms positivos. En el crecimiento de los microorganismos anaerobios, el ogeno del medio es removido antes de la inoculacin. 2ando como resultado un potencial redo inicial ms ba!o que el de los microorganismos aerobios o anaerobios facultativos. 2urante la germinacin y salida de la espora o la fase lag de crecimiento, el potencial redo disminuye hasta valores de (++ a R++ mv. 0 2ouglas y Gigby 'PR>1 . /ay un descenso muy ba!o del potencial redo durante la fase log del crecimiento. Aunque la reduccin total del potencial redo generalmente es menos para microorganismos anaerobios que para anaerobios facultativos, el potencial redo ba!o es atribuido al potencial inicial ba!o de los substratos. 3@7EAC6A# GE2@Y 2E #@- A#6%EA7@- El potencial @G de un alimento depende del potencial redo natural y de la capacidad de amortizacin del potencial de los componentes del alimento y de la tensin de ogeno en la atmsfera circundante y del acceso que los gases del medio circundante hacia el alimento. 2ebido a las complicaciones para determinar el potencial redo en los alimentos y las variaciones obtenidas debido a las in"uencias de los gases de la atmsfera, el potencial redo de solo unos pocos alimentos esta disponible. /arrison 0'PR*1 estableci que en una mezcla conglomerada con diferentes sistemas, que no esta en equilibrio, un potencial redo global no puede ser determinado. Es evidente que 11 muchos alimentos son mezclas conglomeradas. A menos que hayan sido ensayados para medir y comparar el potencial redo de los alimentos. #as c$lulas vivientes tienden a tener un potencial @G ba!o debido a los grupos )-/ en los productos de origen animal y a los azucares reductores y el cido ascrbico en los productos de origen vegetal. En los productos lcteos, el potencial redo esta relacionado a la oidacin de la grasa. 3or eso, hay una relacin inversa del potencial @G y el mantenimiento de la calidad del producto. #a contaminacin de la leche con iones c9prico o f$rrico tiende a incrementar el potencial @G resultando en una menor vida de anaquel del producto. El potencial @G del queso depende del tipo, para queso suizo 0Emmental1 vara de )*++ a ) (+ mv y para queso cheddar de N**+ a NQ>+ mv 0%ossel e 6ngram 'P((1. Zl Eh de la carne ha sido reportado en un intervalo de )'(+ a N*(+ mv. /ay un requerimiento de oigeno por el te!ido postmortem. #a mioglobina del m9sculo puede enlazar oigeno para formar oimioglobina o $ste puede ser oidado para formar metamioglobina. 3ara oigenar el pigmento se requiere alrededor de ( microlitros de oigeno por gramo de carne. %ientras que la oidacin a metamioglobina requiere de alrededor de 'Q microlitros de oigeno por gramo de carne. @tros requerimientos de oigeno son. respiracin de los te!idos, oidacin de lpidos, "uidos de te!idos con ba!a tensin de oigeno, disolviendo oigeno y las demandas bacterianas. 2e?ore -dberg 0'PR>1 encontraron que la respiracin calculada para O+M del oigeno demandado de la carne post4mortem, mientras que la demanda bacteriana era insigniCcante. El Eh de los productos vegetales vara de NQOQ a N>QH mv para !ugos de frutas,NR> mv para espinacas, N**( mv para manzana y )>R+ mv para germen de trigo. Zl Eh de cerezas y duraznos es de NRP mv y 'R(mv, respectivamente. #a adicin de cido ascrbico ba!a $l Eh de las frutas. Aparentemente ninguna medicin ha sido hecha sobre la capacidad de los alimentos. %uchos alimentos frescos tienen aminocidos que contienen tiol y p$ptidos, azucares reductores y cido ascrbico as que el 3@* puede cambiar gradualmente antes de que el Eh sea afectado 0%ossel 'PR'1. El contenido de oigeno de la atmsfera y el acceso de la atmsfera del alimento in"uencia el potencial @G. 3iezas grandes de alimentos, tales como carcasas, tienen una rea superCcial total menor que alimentos de tama:o menor. #os alimentos en un recipiente profundo tienen menos superCcie epuesta que alimentos en recipientes slidos y lquidos agitados o mezclados. #os alimentos que estn empacados en un material impermeable al oigeno estarn en un potencial de @G ms ba!o que aquellos alimentos que no est$n empacados. El empaquetado al vaco cambiar la atmsfera circulante del alimento y tambi$n prevendr el acceso libre de oigeno al alimento. 'elaciones del potencial O' de los alimentos y los microorganismos Zl Eh relativamente alto de los !ugos de frutas favorece el crecimiento de microorganismos aerobios. 3ero como esos productos tienen un p/ ba!o, las levaduras aerbicas y los mohos son los microorganismos predominantes que causan su deterioro. En la carne, las superCcies epuestas a la atmsfera permitirn el crecimiento de bacterias aerbicas, pero en el te!ido profundo, $l Eh es mas ba!o as que los anaerobios pueden crecer. En la carne en pre4rigor, $l Eh es suCcientemente alto para prevenir el crecimiento de tipos anaerbicos, pero durante el rigor, $l Eh es reducido para permitir el crecimiento de sp. 2e !lostridium. El calentamiento de la leche ba!a el Eh, as que aunque los Clostridium no crecen en la leche cruda o fresca, !lostridium botulinum crece en leche completamente esterilizada por el calor. Aunque los hongos son considerados para ser aerobios estrictos, algunos tipos pueden crecer en niveles ba!os de oigeno. ;na de las razones por las cuales Penicillum ro(ueforte puede crecer en el interior de queso tipo Goqueforte es su tolerancia a ba!as 3@*. #yssoc$lamys ful"a crece en productos de uva en niveles etremadamente ba!os en oigeno. 12 POTENCIAL O3IDO-REDUCCIN El potencial oido4reduccin de un substrato se deCne como la facilidad con la cual el sustrato pierde o gana electrones. El potencial oido4reduccin es una medida de la tendencia de un sistema reversible para dar o recibir electrones. Cuando un elemento o compuesto pierde electrones el sustrato se esta oidando, mientras que el sustrato que gana electrones es reducido por e!emplo. CuNN oida Cu NNN N e4 reducc #a oidacin puede tambi$n ser llevada acabo por la adicin de ogeno. *Cu N @* Cu@ ;na sustancia que dona electrones con mucha facilidad es un buen reductor. ;na sustancia que rpidamente toma electrones es un buen agente oidante. Cuando se transCeren electrones de un compuesto a otro, entre ambos se establece una diferencia de potencial. Esta diferencia se puede medir utilizando un instrumento apropiado y se puede epresar en milivoltios 0 mv 1. Entre ms intensamente se oida una sustancia, tanto ms positivo ser su potencial el$ctrico, y entre ms intensamente es reducida una sustancia, tanto ms negativo ser su potencial el$ctrico. 0N144444444444444443@7EAC6A#E- @Y62A2@-444444444444444444AEG@&6@- 041444444444444444443@7EAC6A#E- GE2;C62@-4444444444444444AAAEG@&6@- S AAAEG@&6@- =AC. CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS SEG4N SUS REQUERIMIENTOS DE O35GENO Mic#$$#a)i'%$ De6)ici2) Aerobios m.o. que requieren de ogeno para vivir Anaerobios m.o. que viven en ausencia de ogeno Anaerobios facultativos m.o. que pueden vivir tanto en ausencia como en presencia de ogeno %icroaeroflicos m.o que se desarrollan a ba!as presiones de ogeno. FACTORES QUE DETERMINAN EL POTENCIAL REDO3 DE UN ALIMENTO 13 -eg9n =razier 0'PPQ1, el potencial @,G de un alimento est determinado por. '.4 El potencial de @,G caracterstico u original del alimento *.4 #a capacidad de equilibrio, esto es, la resistencia del alimento a cambiar de potencial. Q.4 #a presin de ogeno de la atmsfera eistente en torno al alimento. >.4 El acceso que tiene la atmsfera hacia el alimento. -ubstancias alimenticias que ayudan a mantener condiciones reductoras son los grupos sulfhdrilo 0 )-/ 1 en las carnes y el cido ascrbico y az9cares reductores en frutas y vegetales. POTENCIAL REDOX DE ALGUNOS ALIMENTOS )L*+E,TO POTE,!*)L 'E-O. / m" 0 Uugos de frutas y vegetales vara de NQOQ a N*(+ Carnes 4'(+ a N*(+ Espinacas NR> %alta N**( <ermen de trigo 4>R+ Cerezas N'RP 2uraznos N'R( Alimentos enlatados 4'O mv para la zanahora a 4>>H 3ara carne. p/ El p/ es deCnido como el logaritmo negativo de la concentracin de iones hidrgeno. El p/ es actualmente una funcin de la concentracin aparente o actividad de los electrolitos en solucin. Es por eso que el p/ es el logaritmo negativo de la actividad de los iones hidrgeno. El p/ es usualmente determinado por medio de un potencimetro, este puede ser deCnido como un valor calculado de la fuerza electromotriz 0emf1 de una celda electromotriz en la cual la sustancia que se esta analizando es uno de los electrolitos. En la industria de los alimentos, la determinacin y el mantenimiento del p/ de los alimentos es importante en el control de calidad y para requerimientos de procesamiento. Efecto sobre los microorganismos En general, los mohos pueden crecer a valores de p/ ms ba!os que las levaduras y las levaduras son ms tolerantes a valores de p/ ba!os que las bacterias. #as bacterias usualmente crecen ms rpido que las levaduras en substratos con p/ neutro o ligeramente 14 cido, pero a p/ de (.+ o menos, las levaduras competirn en crecimiento con las bacterias. El p/ del substrato in"uencia la actividad de las enzimas y los productos de metabolismos de los microorganismos. #a toicidad de valores de p/ es debido parcialmente a la penetracin de mol$culas no disociadas de sustancias cidas o bsicas dentro de la c$lula. A valores de p/ ba!os, cidos d$biles no disociados pueden entrar a la c$lula, luego ionizarse y alterar el p/ interno. En soluciones alcalinas, bases d$biles no disociadas pueden entrar a la c$lula, si el p/ interno es alcalino se inhibe la sintesis de protenas. El p/ del substrato puede in"uenciar la permeabilidad de la membrana. A p/ ba!os la membrana se satura de iones hidrgeno limitando el paso de cationes esenciales. En p/ altos hay saturacin de la membrana con iones hidroilo limitando de esta forma el paso de aniones esenciales. #a alteracin del p / de un substrato puede relacionarse indirectamente con el crecimiento de microorganismos. 3or e!emplo, la disponibilidad de iones metlicos es alterada. Aunque coeisten en la forma libre a p / ba!os, el magnesio y el fsforo forman un comple!o insoluble a valores de p/ superiores. En un medio alcalino, iones ferrico, zinc y calcio son insolubles. Alteraciones del p/ por los microorganismos El p/ del medio ambiente determina que tipos de microorganismos podrn desarrollarse, mientras que el crecimiento microbiano cambiar el p / del medio ambiente. 2urante el crecimiento se forman productos del metabolismo. Estos productos pueden ser cidos o alcalinos, dependiendo del sustrato que se esta metabolizando, los microorganismos involucrados y el tiempo permitido para el crecimiento. #a reaccin inicial de la mayora de los microorganismos son cidas, debido al desdoblamiento de carbohidratos y la subsecuente formacin de cidos orgnicos. #a alteracin del p / por la produccin de cidos es usada y las industrias de alimentos fermentados. #as bacterias cido4lcticas tienden a ba!ar el p / de la leche por la produccin de cido lctico, mientras que tipos proteolticos como las 3seudomonas tienden a elevar el p / de los alimentos por la produccin de amonio o de otros compuestos qumicos bsicos. En el !ugo de tomate, el #acillus coagulans se desarrolla elevando el p / de >.( (.+ 0Anderson 'PO>1. #os mohos crecen sobre los tomates levando el p / a niveles que permiten el crecimiento de las bacterias en los alimentos 0%undt y Aorman 'PO*1. -obrevivencia El p/ para la sobrevivencia de los microorganismos es algo diferente del que requieren para crecer. Algunos microorganismos muestran mayor sobrevivencia a niveles de p / cidos entre (.H a H.( y un crecimiento optimo a H.O4R.*. #os microorganismos pueden sobrevivir a niveles de p / tanto cidos como bsicos para metabolismo y crecimiento. El efecto del p / sobre la sobrevivencia durante el calentamiento es muy evidente. p/ de los alimentos El p/ de un alimento, !unto con otros factores medio ambientales, determina los tipos de microorganismos que son capaces de crecer y dominar y eventualmente causar deterioro, una fermentacin deseable o un da:o potencial a la salud. Adems de los aspectos microbiolgicos del p / de los alimentos, los cidos en los alimentos !uegan otros papeles importantes. El alimento puede ser naturalmente cido, se le pueden agregar intencionalmente cidos al alimento o tambi$n por actividad enzimtica con o sin crecimiento microbiano se pueden producir cidos. El p / de un alimento es determinado por el balance entre la capacidad buWer y las sustancias cidas o alcalinas que $ste contiene. Como las protenas poseen una alta 15 capacidad buWer, los alimentos proteicos tienen una mucho mayor capacidad buWer que la que tienen las frutas y los vegetales. Estos datos son importantes en la fermentacin lctica debido a que la produccin de peque:as cantidades de cido lctico en la col cida o en los pepinillos disminuir signiCcativamente el p/. EFECTO DE LOS 7CIDOS O ALCALIS SO1RE LOS MICROORGANISMOS '.46n"uye sobre el sistema enzimtico y su metabolismo. *.46n"uye sobre la membrana celular Cuando hay saturacin de ines /N la membrana se hace impermeable al paso de cationes esenciales. Cuando hay saturacin de ines @/4, la membrana se hace impermeable al paso de aniones esenciales. Q.46nterferencia con la aceptacin de ines minerales necesarios para el m.o. >.4Cuando aumenta el p/ en las c$lulas o sea que se hace bsico, interCere en la sintesis de protenas debido a que el GAA transferasa se inhibe. (.4 A p/ alcalinos la produccin de toinas y su virulencia se favorece. H.4En un medio cido se favorece la produccin de a"atoinas. CLASIFICACIN DE LOS ALIMENTOS DE ACUERDO A SU ,8 Ai!ento R#n"o de ,8 Alimentos altamente cidos p/ aba!o de Q.R Alimentos cidos Q.R4>.H Alimentos medianamente cidos >.H4(.Q Alimentos de ba!a acidez p/ arriba de (.Q RANGOS APRO3IMADOS DE ,8 PARA EL CRECIMIENTO MICRO1IANO 16 p/ @G<AA6-%@- [[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[ %\A6%@ @376%@ %DY6%@ &acterias 0mayora 1 >.( H.(4R.( P.+ )cetobacter >.+ (.>4H.Q [ #acillus subtilis >.*4>.( H,O4R.* P.>4'+.+ !lostridium botulinum >.O4(.+ H.+4O.+ O.(4O.O !. perfringens (.+4(.O H.+4R.H O.( !. sporogenes (.+4(.O H.+4R.H O.(4P.+ Er1inia caroto"ora >.H R.' P.Q Esc$eric$ia coli >.Q4>.> H.+4O.+ P.+4'+.+ 2luconobacter o3idans >4>.( (.(4H.+ [ #actobacillus 0 mayora 1Q.+4>.> (.(4H.+ R.*4O.+ L. acidop$ilus >.+4>.H (.(.4H.+ R.+ L. plantarum Q.( (.(4H.( R.+ Leuconostoc cremoris (.+ (.(4H.+ H.( 3seudomonas 0mayora 1 (.H H.H4R.+ O.+ P. aeruginosa (.H H.H4R.+ O.+4P.+ -almonella 0 mayora1 >.(4(.+ H.+4R.( O.+4P.H S. typ$i >.+4>.( H.+4R.* O.+4P.+[ Serratia marcescens >.H H.+4R.+ O.+ Stap$ylococcus aureus >.+4>.R H.+4R.+ P.(4P.O Streptococcus lactis >.'4>.O H.> P.* &ibrio (.(4H.+ [[[[ P.+ &. c$olerae [[[[ O.H [[[[ &. para$aemolyticus >.O4(.+ R.(4O.( ''.+ #evaduras '.(4Q.( >.+4H.( O.+4O.( 4ansenula [[[[[ >.(4(.( [[[[ Pic$ia '.( [[[[[ [[[[ Sacc$aromyces cere"isiae *.+4*.> >.+4(.+ [[[[ /ongos '.(4Q.( >.(4H.O O.+4''.+ )spergillus niger '.* >.(4H.O O.+4''.+ #otrytis cinerea *.( [[[[[ R.> +ucor [[[ Q.+4H.' P.* Penicillium '.P >.(4H.R P.Q '$i5opus nigricans [[[ >.(4H.+ [[[[ RANGOS APRO3IMADOS DE ,8 DE ALGUNOS ALIMENTOS ALIMENTO ,8 [[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[[ /uevo R.H4P.( Camarn H.O4O.* #eche H.Q4H.O %antequilla H.'4H.> %iel H.+4H.O Coli"or H.+4H.R #echuga H.+4H.> Sema de huevo H.+4H.Q 17 %az dulce (.P4H.H @stiones (.R4H.+ 3avo (.H4H.+ 3ollo (.(4H.> 3uerco (.Q4H.* Ges (.Q4H.* Cebolla (.Q4(.O 3apa dulce (.Q4(.H Espinaca (.'4H.O 8ueso (.+4H.' 8ueso Camembert H.'4R.+ 8. Cottage >.'4(.> 3an (.+4H.+ 1ARRERAS PROTECTORAS O ESTRUCTURAS 1IOLGICAS9 Algunos alimentos estn protegidos del contacto directo con microorganismos por su cubierta natural o barrera. #a cubierta natural de algunos alimentos da ecelente proteccin contra la entrada y su subsecuente da:o por organismos deteriorativos. En la categora de estructuras biolgicas tenemos. las cubiertas de las semillas la cubierta eterior de las frutas la cscara de la nuez el cuero o la piel de los animales y el cascarn del huevo. $#rrer#s %rotector#s en e &ue'o. !utcula.4 ;na pelcula muy Cna, seme!ante a la protena, natural e invisible, que esta sobre el cascaron del huevo, tambi$n se le conoce como pelusilla es considerada por algunos para ser la primera lnea de defensa contra la penetracin microbiana del huevo. # segunda barrera fsica es el cascarn del huevo y dentro del cascaron hay dos membranas. la interior y la eterior, las cuales forman la Qra. y >ta. barrera a la penetracin microbiana. C#sc#r(n.4 El cascarn no es una estructura homog$nea. Consiste de un armazn orgnico de Cbrillas u una sustancia intersticial de material inorgnico. #as dos principales capas del cascarn son las membranas interna y eterna. #a membrana eterna es una capa muy delgada que contiene la mayora de los minerales contenidos en el huevo. El cascarn contiene de H a O mil poros microscpicos. Estos poros permiten el intercambio del vapor de agua y los gases entre los contenidos del cascaron y la atmsfera eterior. El tama:o promedio de los poros $sta entre *+ y >( micrmetros. El tama:o de los poros permite el paso de microorganismosE las levaduras pasan forzadas y el micelio f9ngico crece a trav$s de los poros. /ay una relacin lineal entre porosidad del cascarn y contaminacin de los huevos. El peso y espesor del cascaron no se correlacionan con la penetracin de los microorganismos. Ao obstante, estos factores pueden involucrarse cuando se producen da:os al cascarn durante el mane!o, puesto que una cscara delgada tiene una tendencia a romperse ms fcilmente que las cscaras gruesas. #os huevos con cascarn da:ados estn ms su!etos a la penetracin de bacterias y al deterioro del huevo. 18 SUSTANCIAS ANTIMICRO1IANAS #a estabilidad de algunos alimentos contra el ataque de microorganismos se debe a la presencia en estos alimentos de ciertas sustancias presentes naturalmente en $stos, dichas sustancias muestran actividades antimicrobianas. ACC6]A 2E #A- -;-7AAC6A- 6A/6&62@GA-. 3ueden actuar sobre la c$lula completa -obre la pared membrana celular 6nterferencia con el mecanismo gen$tico 6nterferencia con el sistema enzimtico A trav$s de enlace con nutrientes esenciales #as sustancias inhibidoras se encuentran tanto en alimentos de origen animal como en alimentos de origen vegetal *n$ibidores en alimentos de origen animal) -e han encontrado sustancias antimicrobianas en el huevo, leche y en las carnes de pollo, res, puerco y pescado. S6ST),!*)S ),T*+*!'O#*),)S E, EL 46E&O: Li*osi!# 0enzima conocida como agente ltico1.4 act9a a nivel de pared celular A'i+in# .4 una mol$cula de avidina se combina con dos de biotina Con#b,!in#.4 forma un comple!o estable con los iones f$rrico y ferroso. =orma tambi$n comple!os con el cobre. In&ibi+ores en*i!-ticos.4 ovomucoides, ovoinhibidores y el inhibidor Ccin4papain. Adems de las sustancias antimicrobianas el huevo posee un %. #c#ino, inhibiendo el crecimiento de una gran cantidad de microorganismos. *,4*#*-O'ES +*!'O#*),OS ,)T6')LES -E L) LE!4E: Liso*i!#.4 en la leche humana esta en poca cantidad y su efecto sobre los m.o. no es signiCcativo /rote0n#s c#ti(nic#s.4 act9an sobre las envolturas celulares, por unirse a sitios de enlaces aninico de la membrana y pared celular. A"utinin#s o #nticuer%os.4 3seudoglobulinoas y globulinas se han encontrado en la leche y causan inhibicin en varias especies de Propionibacterium. Leucocitos.4 =agocitan microorganismos L#ctenin#s1-tienen propiedades antiestreptococales L#cto%ero2i+#s#.4 Es la enzima peroidasa de la leche que cataliza la oidacin de las mol$culas con perido de hidrgeno como fuente de ogeno. Act9a sobre las enzimas, cidos n9cleicos, sintesis de protenas y membrana celular L#ctoferrin#.4 -e combina con el Cerro, inhibiendo el crecimiento de m.o. que requieren de Cerro. 3ci+os "r#sos.- 3ueden estimular el crecimiento, inhibirlo o no tener ning9n efecto. 19 *,4*#*-O'ES +*!'O#*),OS ,)T6')LES E, !)',E -E 'ES POLLO % PES!)-O #isozima Anticuerpos -ustancias antiestaClococales 3olip$ptidos bsicos 3oliaminas, poliaminocidos bsicos.4 #a espermina y espermidina son poliaminas e inhiben varios tipos de m.o. #os poliaminocidos se combinan con componentes de la pared, inhibiendo su sintesis, act9an tambi$n sobre los virus. #eucocitos /ormonas como la %ro"esteron# que ataca a bacterias <rampositivas, tiene accin bacteriostticaE el +ietiestibestro que ataca a Stap$ylococcus aureus, tiene accin bactericida y la +eso2icorticosteron# que ataca a bacterias <rampositivas, hongos y levaduras. S6ST),!*)S ),T*+*!'O#*),)S E, P'O-6!TOS &E2ET)LES. #os etractos y !ugos de muchos vegetales se probaron para observar su actividad antimicrobiana. En ellos se encontraron sustancias como. "avonoides, taninos, inhibidores enzimticos, lecitinas, cidos grasos, ciclopropeno y cido ftico. Algunos e!emplos de sustancias inhibidoras presentes naturalmente en vegetales y frutas. /ro+ucto 'e"et# Sust#nci# in&ibi+or# Microor"#nis!o in&ibi+o =rutas Acetaldehdo #evaduras =rutas Antocianinas &acterias -oya Dcido ftico )spergillus parasiticus 3apa blanca Compuestos fenlicos ). parasiticus %enta 7aninos Antiviral Cacahuate 7aninos ). parasiticus Cocoa Dcidos grasos libres ). parasiticus Cebada inhibidor4proteasa ). parasiticus =rutas 6so"avonoides /ongos =rutas Dcidos orgnicos &acterias =r!ol 6nhibidor.enzimtico Celulasa4f9ngica %az 6nhibidor4tripsina /ongos =rutas ctricas Aceites esenciales <ram0N1 y <ram 041 @livos @leuropeina Lactobacillus y Leuconostoc Etracto de olivo 7aninos /ongos y levaduras Cocoa Antocianinas /ongos y bacterias 7omate Alfa tomatina /ongos y bacterias -emillas de algodn <ossypol <ram 0N1, lev. S hongos Endospermo del trigo 3olip$ptidos bsicos 3atgenos, lev., y purotioninas Pseudomonas, .antomonas 20 Etractos de cebolla y a!o Geacciona con el sulfoido #acillus cereus, !andida de cistena thiosulCnato albicans !riptococcus neoforms <ermen de trigo 0semillas1 #ectinas Tric$oderma "iride FACTORES E3TERNOS O E3TR5NSECOS. #os factores etrnsecos de los alimentos son aquellas propiedades del medio ambiente de almacenamiento que afectan tanto a los alimentos como a los microorganismos presentes en estos. 7emperatura /umedad relativa Concentracin y tipo de gases de la atmsfera TEMPERATURA.4 #a temperatura es uno de los factores ambientales ms importantes que regula el crecimiento de los microorganismos. #a temperatura no solamente se relaciona con la habilidad de un microorganismos para crecer, sino tambi$n para sobrevivir. La temperatura de desarrollo de un microorganismo afecta. 7ama:o de la c$lula 3roductos metablicos como. pigmentos, toinas, etc. Gequerimientos nutricionales Geacciones enzimticas Composicin qumica de la c$lula Cada tipo de microorganismos tiene su temperatura mnima, ptima y mima de desarrollo. C#A-6=6CAC6]A 2E #@- %6CG@@G<AA6-%@- -E<^A -; 7E%3EGA7;GA 2E 2E-AGG@##@ /sicrof0icos.4 son aquellos microorganismos que crecen bien a +TC, y que producen una colonia visible a $sta temperatura en R, '+ o '> das. 7emperatura mima L *+TC 7emperatura optima L '(TC 7emperatura mnima a +TC Mesof0icos.4 microorganismos que se desarrollan a temperatura medias. En un intervalo de temperatura desde *+TC hasta los>(TC. /ay dos grupos muy importantes. %icroorganismos saprCtos temperatura optima entre *( a Q+TC. %icroorganismos patgenos temperatura optima entre Q( a >(TC. Ter!o4icos.- microorganismos que se desarrollan a altas temperaturas. 7emperatura mnima Q( a >(TC 21 7emperatura optimaL >( a H(TC 7emperatura mima H+ a P+TC 7ermoClos obligados m.o. que no crecen a temperaturas de QRTC 7ermoClos facultativos m.o. que pueden crecer en los rangos de temperaturas para los mesClos. 7ermod9ricos.4 microorganismos que pueden sobrevivir a altas temperaturas pero que son incapaces de multiplicarse. TEMPERATURA : CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS 7 TC '++ . %uerte de bacterias por calentamiento en 7iempo suCciente. O+
H+ Geproduccin a velocidades reducidas >+ Geproduccin normal *+ 22 Geproduccin a velocidades reducidas + 8UMEDAD RELATI.A #a actividad de agua del alimento debe estar en equilibrio con la humedad relativa del medio ambiente. -i los alimentos se almacenan a. ;na humedad relativa ; que la actividad de agua del alimento hay una perdida de humedad en el alimento que si es muy rpida sufre quemaduras el alimento. ;na humedad relativa < que la actividad de agua del alimento hay formacin de una capa acuosa sobre la superCcie del alimento, favoreciendo con ello el desarrollo microbiano. #a humedad relativa del medio ambiente de almacenamiento es importante desde el punto de vista de calidad de los alimentos y del crecimiento de microorganismos en las superCcies de los alimentos. ATMOSFERAS GASEOSAS.4 El tipo de gas en la atmsfera que rodea al alimento puede determinar los tipos de organismos que llegan a ser dominantes. El ogeno en la atmsfera favorece el crecimiento de tipos aerbicos. #a ausencia de ogeno, o un vaci, permitir que los anaerobios facultativos lleguen a ser dominantes. #os microorganismos varan ampliamente en su tolerancia al diido de carbono. En una atmsfera de diido de carbono, el crecimiento de algunos microorganismos es totalmente suprimido, mientras que otros se ven menos afectados. En la conservacin de alimentos por atmsferas controladas se usan proporciones de '+ a *+M de diido de carbono para evitar el crecimiento tanto de aerobios como de anaerobios. 1i*+i$#a-=a.- &an5art, <. 'POP. &A-6C =@@2 %6CG@&6@#@<S. 23