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ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERA AMBIENTAL

TRATAMIENTO DE DRENAJE CIDO DE MINA UTILIZANDO BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS, DE LA MINA LAR CARBN S.A. EN EL PERIODO FEBRERO JUNIO 2013

TESIS PARA OBTENER EL TTULO PROFESIONAL DE: INGENIERO AMBIENTAL

AUTOR: Valerio Zuiga Maria Elena ASESOR: Mag. Mara Aliaga Martnez LNEA DE INVESTIGACIN: Procesos Industriales Limpios LIMA - PER 2013

DEDICATORIA A Dios por haberme dado salud para lograr mis objetivos, a mi Madre por haberme apoyado en todo momento, por sus consejos, por su motivacin constante, por su amor, a mi Padre que desde el cielo ilumina mi camino y me protege, a mis hermanos por su cario y compaa, a mis Asesores por su gran apoyo y motivacin para la culminacin de mis estudios profesionales y para la elaboracin de la tesis. Valerio Zuiga Maria Elena

AGRADECIMIENTO Le agradezco a Dios por haberme permitido llegar a concluir mi tesis, por haberme acompaado y guiado a lo largo de mi carrera, por darme fortaleza en los momentos difciles, por su infinito amor. Le doy gracias a mi madre Gloria por sus consejos, su preocupacin, su empuje diario para sacarnos adelante a mis hermanos y a m, por estar siempre apoyndome en todo, por haberme dado la oportunidad de tener una excelente educacin, en el transcurso de mi vida, por hacer que sea una persona de bien, y sobre todo por su amor infinito. Le agradezco a mi padre Vctor que se desde el cielo siempre me protege y me acompaa en todo momento, aunque no est presente fsicamente, lo est espiritualmente, gracias por los aos que compartimos juntos, por tu amor infinito. Le doy gracias a mis hermanos por ser parte de mi vida, Jess, Yulisa, Betsy, Jhonnier por llenar mi vida de alegras y momentos inolvidables. Agradecer a mi asesora Mag. Mara Aliaga Martnez por su apoyo, su tiempo, su dedicacin y colaboracin para realizar mi montaje preliminar del experimento en su curso de Contaminacin de Aguas y Control en el laboratorio de la Universidad Nacional del Callao. Agradecer al Dr. Jos Luis Bauer Cuya por su apoyo y asesora para la elaboracin experimental de la tesis en el laboratorio de Biotecnologa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia.

Valerio Zuiga Maria Elena

PRESENTACIN En el presente trabajo se desarrollaron los fundamentos terico y experimental del drenaje cido de mina y del tratamiento de este utilizando bacterias sulfato reductoras, se hizo dos muestreos representativos del agua de mina y del rio Pampahuay de diferentes puntos de muestreo, se realiz el tratamiento y finalmente se hace un anlisis e interpretacin de la informacin obtenida. Los objetivos de la investigacin son: General: Determinar el porcentaje de remocin de metales As, Cd, Fe y sulfatos en el drenaje cido de mina durante el tratamiento con bacterias sulfato reductoras, en la Unidad de Produccin Minera, (UPM), en el periodo Febrero Junio, 2013? Objetivo Especfico: Determinar el nivel de reduccin de metales As, Cd, Fe y sulfatos utilizando bacterias sulfato reductoras en el tratamiento de drenaje acido de mina a partir de los dos tipos de sustratos? Para el lugar donde se desarroll la investigacin no existen estudios sobre el tratamiento de drenaje acido de mina utilizando bacterias sulfato reductoras en minera del carbn. Por esta razn el mtodo de tratamiento desarrollado no solamente sirve para solucionar un problema, a nivel local si no tambin se puede extrapolar a otras regiones carbonferas del pas, con miras a la prevencin y mitigacin del impacto ambiental generado por el drenaje acido de mina. Sin embargo para aplicar el tratamiento empleado es necesario aumentar el nmero de muestras, anlisis y pruebas del carbn.

NDICE
DEDICATORIA ............................................................................................................................ 2 AGRADECIMIENTO ................................................................................................................... 3 PRESENTACIN ........................................................................................................................ 4 NDICE ......................................................................................................................................... 5 Lista de Cuadros ......................................................................................................................... 7 RESUMEN ................................................................................................................................. 10 ABSTRACT................................................................................................................................ 12 1. INTRODUCCION ............................................................................................................... 14 1.1. 1.1.1. 1.1.2. 1.1.3. 1.1.4. Problema de Investigacin ........................................................................................ 14 Realidad Problemtica........................................................................................... 14 Justificacin ............................................................................................................ 16 Antecedentes.......................................................................................................... 17 Objetivos ................................................................................................................. 21

1.1.4.1 Objetivo General ................................................................................................... 21 1.1.4.2 Objetivo Especfico ............................................................................................... 21 1.2. Marco Referencial ...................................................................................................... 21 Marco Terico ..................................................................................................... 21

1.2.1.

1.2.1. Marco Conceptual ................................................................................................... 41 2. MARCO METODOLGICO ............................................................................................. 46 2.1. 2.2. Hiptesis ..................................................................................................................... 46 Variables .................................................................................................................... 48

Variables ................................................................................................................................ 48 Definicin Conceptual ....................................................................................................... 48 Definicin Operacional ...................................................................................................... 48 Indicadores......................................................................................................................... 48 Escala de Medicin ........................................................................................................... 48 2.3. Metodologa ................................................................................................................ 49 Tipo de Investigacin ......................................................................................... 49

2.3.1.

Tipo de Diseo de Investigacin ................................... Error! Marcador no definido.

2.4. 2.5. 2.6.

Poblacin y Muestra .................................................................................................. 49 Mtodo de Investigacin ........................................................................................... 50 Tcnicas e Instrumentos de Recoleccin de Datos ................................................ 50

2.6.1 Procedimiento de Recoleccin de Datos ............................................................... 51 2.6.2. Validacin y Confiabilidad del Instrumento ........................................................... 66 2.7. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Mtodo de Anlisis de Datos .................................................................................... 66

RESULTADOS .................................................................................................................. 71 DISCUSIN ....................................................................................................................... 82 CONCLUSIONES .............................................................................................................. 84 SUGERENCIAS................................................................................................................. 85 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................ 86 ANEXOS ............................................................................................................................ 88

Lista de Cuadros Pg. Cuadro: 1.1 Volumen del material no metlico de carbn que se extrae Cuadro: 1.2 Temperaturas promedio segn poca y estacin Cuadro: 1.3 Dimensiones de las galeras de acarreo de la UPM Cuadro: 1.4 Dimensiones de la chimenea de la UPM Cuadro: 1.5 Parmetros de diseo de los botaderos Cuadro: 1.6 Parmetros para el diseo de disposicin de desmonte Cuadro: 2.1 Variables de Operacionalizacion Cuadro: 2.2 Punto de toma de muestra de agua acida Cuadro: 2.3 Parmetros de medicin de campo Cuadro: 2.4 Condiciones para la toma de muestras de agua cida Cuadro: 2.5 Anlisis de metales de agua acida realizado por el laboratorio Servicios Analticos Generales (SAG) Cuadro: 2.6 Anlisis de metales de agua acida y realizado por el Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera Cuadro: 2.7 Anlisis de sulfatos realizado por el Laboratorio de Servicios Analticos Generales SAG y Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera Cuadro: 2.8 Recojo de muestra de sustratos para el tratamiento Cuadro: 2.9 Condiciones para el experimento en reactores Cuadro: 2.10 Condiciones para el experimento en el receptor de sulfuro de hidrogeno Cuadro: 2.11 Condiciones de concentracin de la muestra de agua cida de mina Cuadro: 2.12 Composicin de solucin reguladora para determinacin de sulfato. 54 55 59 60 60 65 54 53 22 24 26 27 29 31 48 50 51 52

Lista de Fotos Pg. Foto: 1.1 Vista de tolva con parrilla 28

Foto: 2.1 Vista de muestra PM 1, salida de bocamina del socavn N 1 del drenaje acido de mina a tratar, Oyn 2013 Foto 2.2: Vista de punto de muestreo N 1 de estircol de vaca para el tratamiento cerca de la mina Lar Carbn. Foto 2.3: Vista de estircol recolectado de oveja para el tratamiento Foto 2.4: Vista de crecimiento de bacterias sulfato reductoras, coloracin negra Foto 2.5: Vista del experimento de la influencia del pH en el crecimiento de bacterias sulfato reductoras 64 54 55 63 53

Lista de Figuras Pg. Fig. 1.1. Diagrama de flujo de operaciones de la mina Fig. 1.2 Esquema de tratamiento que utiliza la mina Fig. 2.1 Esquema de tratamiento de drenaje acido de mina en reactores anaerobios Fig. 2.2 Diagrama de flujo para el tratamiento de drenaje cido de mina en reactores anaerobios Fig. 2.3 Esquema del procedimiento de dilucin exhaustiva Fig. 3.1 Influencia del pH en el crecimiento de bacterias sulfato reductoras Fig. 3.2 Reduccin de sulfato en funcin al tiempo Fig. 3.3 Porcentaje de remocin para arsnico Fig. 3.4 Porcentaje de remocin para hierro Fig. 3.5 Porcentaje de remocin para cadmio Fig. 3.6 Porcentaje de remocin para sulfato Fig. 3.7 Comparacin entre los reactores para arsnico Fig. 3.8 Comparacin entre los reactores para hierro Fig. 3.9 Comparacin entre los reactores para cadmio Fig. 3.10 Comparacin entre los reactores para sulfatos 61 62 73 74 74 75 76 76 78 89 80 81 30 32 58

Lista de Tablas Pg.

Tabla: 2.1. Composicin del medio de cultivo Postage B Tabla: 2.2. Composicin del medio de cultivo Postage C Tabla: 2.2. Composicin de solucin para anaerobiosis Tabla: 3.1. Porcentaje (%) de remocion, reactor 1, utilizando sustrato ( estiercol de oveja) Tabla: 3.2. Porcentaje (%) de remocion, reactor 2, utilizando sustrato (estiercol de vaca) Tabla: 3.3. Efecto del pH en el crecimiento bacteriano Tabla: 3.4 Resultados de comparacion con los dos tipos de reactores utilizados

55 58 58

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72 72 77

Lista de Anexos Pg. Anexo 1: Mapa de Ubicacin de la mina. Anexo 2: Resultados de Anlisis Fsico Qumico de los drenajes cidos de mina ao 2013 Informe de Ensayo N 071202 - 2013 antes del tratamiento elaborado por laboratorio SAG Anexo 3: Lmites Mximos Permisibles segn el Decreto Supremo N 010 2010 MINAM Anexo 4: Rotulado para las muestras Anexo 5: Fotografas Anexo 6: Certificados 90 90 91 96 89 88

RESUMEN Hoy en da los problemas generados sobre el medio ambiente por la explotacin de los recursos naturales, especialmente los yacimientos de minerales, tienen repercusiones a nivel global, los minerales no metlicos como el carbn tambin generan aguas acidas de mina, que contaminan el agua superficial y subterrnea produciendo as impactos negativos sobre la flora, fauna de los ecosistemas acuticos, terrestres y genera un impacto socioeconmico a las personas que habitan en el entorno. Las Bacterias Sulfato Reductoras (BSR) son responsables de la produccin de sulfuro de hidrgeno (H2S) en anaerobiosis a partir de sulfatos y un donador de electrones. El sulfuro producido se puede utilizar para precipitar metales catinicos divalentes, permitiendo la biorremediacin de efluentes contaminados. En el presente trabajo de investigacin se desarrolla los fundamentos tericos y experimentales de drenaje cido de mina, pretendindose demostrar que empleando bacterias sulfato reductoras se puede lograr un tratamiento adecuado para el drenaje cido de mina, generados en la mina LAR Carbn S.A. Finalmente se hace un anlisis e interpretacin de la informacin obtenida. Se tom una muestra representativa en el punto de monitoreo establecido por la empresa minera, para luego ser caracterizado y corroborar su acidez siendo analizado mediante el mtodo ICP, en el Laboratorio SAG y laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera. Como etapa preliminar se realiz un montaje experimental en el laboratorio de la Universidad Nacional del Callao con la finalidad de determinar las variables de operacin para el experimento, y para tener un control operacional adecuado las pruebas experimentales se llevaron a cabo en el laboratorio de la Universidad Cayetano Heredia en el departamento de Biotecnologa, las muestras obtenidas

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fueron analizadas antes y despus del tratamiento, logrndose la remocin de los metales y sulfatos presentes en el drenaje cido de mina. Con el tratamiento usando bacterias sulfato reductoras en los reactores se determin que el sustrato de estircol de vaca tuvo mayor eficiencia que el sustrato de oveja, para la remocin de los metales con sustrato de vaca se alcanzaron 99% de remocin de Arsnico, 94% de remocin de Hierro, 91% de remocin de Cadmio y respecto al sulfato se lleg a precipitar el 70% y con respecto a la remocin de metales con sustrato de oveja se alcanzaron 99% de remocin de As, 91% de remocin de Hierro, 79% de remocin de Cadmio y respecto al sulfato se lleg a precipitar el 68%.

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ABSTRACT Today the problems caused on the environment by the exploitation of natural resources, especially mineral deposits have global repercussions, non-metallic minerals such as coal also generate acidic mine waters that contaminate surface water and ground thus producing negative impacts on flora, fauna of aquatic ecosystems, terrestrial and generates an economic impact to the people living in the environment. Sulfate-reducing bacteria (BSR) are responsible for the production of hydrogen sulfide (H2S) from anaerobically sulfates and an electron donor. Sulphide produced may be used to precipitate divalent cationic metal, allowing the bioremediation of contaminated effluent. In the present research develops the theoretical and experimental acid mine drainage, pretending to show that using sulfate-reducing bacteria can be achieved by a suitable treatment for acid mine drainage generated in LAR Coal Mine SA Finally, an analysis and interpretation of the information obtained. A sample representative monitoring point established by the mining company, to then be characterized and corroborate its acidity being analyzed by the ICP method in the Laboratory SAG Spectrometry Laboratory, National Engineering University. As a preliminary step experimental setup was performed in the laboratory of the National University of Callao in order to determine the operating variables for the experiment, and to have a proper operational control experimental tests were carried out in the laboratory of the University Cayetano Heredia in the Department of Biotechnology, the obtained samples were analyzed before and after treatment, achieving removal of metals and sulphates present in acid mine drainage.

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With treatment using sulfate-reducing bacteria in the reactor was determined that the cow dung substrate had higher efficiency than the substrate of sheep, for the removal of metals with cow substrate reached 99% removal of arsenic, 94% Removal of Iron, 91% removal of cadmium sulphate and compared to precipitate it was 70% with respect to the removal of metals with sheep substrate reached 99% removal of As, 91% removal of iron, 79 % removal of cadmium and for sulphate precipitate was reached 68%.

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1. INTRODUCCION 1.1. 1.1.1. Problema de Investigacin Realidad Problemtica

El deterioro de la calidad del agua en el mbito nacional es un problema que comienza a asumir caractersticas preocupantes, debido a un uso irracional, en la actividad minera y el uso de energas o tecnologas obsoletas. La generacin del drenaje cido de mina es un problema comn en los yacimientos polimetlicos pero tambin este problema se presenta en las minas de carbn y por tanto requiere especial atencin. El drenaje cido de mina es uno de los grandes problemas que causan al medio ambiente, esto ocurre cuando se vierten estas aguas, sin ningn tratamiento en los cauces de los ros as como el drenaje cido de las minas abandonadas que existen en distintos lugares de nuestro pas, que por aos no se le han tomado importancia. Por lo general el drenaje contaminado contiene: pH, acidez, sulfatos; metales; slidos disueltos totales (SDT); y slidos suspendidos totales (SST). El drenaje cido de la mina ocurre cuando los minerales del sulfuro se ponen en contacto con el oxgeno y el agua, condiciones favorables para su oxidacin qumica o a la oxidacin rpida por bacterias tales como Thiobacillus ferrooxidans. Algunos auttrofos de hierros oxidados tales como Leptospirillum ferroxidans, Thiobacillus thiooxidans y Sulfolobolus brierleyii se pueden asociar tambin a la oxidacin mineral biolgica, estos son organismos capaces de sintetizar su propio alimento a partir de sustancias inorgnicas, usando la luz o energa qumica. La alta acidez de drenaje cido de mina (DAM) es causada a menudo por la oxidacin de la pirita, la forma cristalina del sulfuro del hierro ( ). Como

resultado de esa oxidacin, el cido sulfrico se genera dando condiciones cidas a los drenajes de la mina. La pirita es comnmente asociada tanto con las

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situaciones de minas de carbn como las minas polimetlicas, pero el drenaje cido de minas polimetlicas presenta un problema ms severo que la mayora de drenajes de mina de carbn porque los agentes prioritarios de contaminacin tal como As, Cd, Pb, Hg, Cu y Zn pueden estar presentes en altas concentraciones". Con respecto al drenaje cido de mina en el Per, la preocupacin fundamental sera los niveles elevados de acidez, sulfato, niveles de hierro, cobre y la lixiviacin de otros metales asociados con el mineral sulfuroso, es importante su tratamiento para as no seguir contribuyendo a la contaminacin de los ros. Para la realizacin de la tesis se tomaron muestras de drenaje cido de mina de la unidad de produccin minera (UPM), mina Pampahuay. La empresa minera actualmente viene tratando sus drenajes cidos con cal y con esto logran adecuarse a los lmites mximos permisibles para efluentes mineros detallados en el Decreto Supremo N 010 2010 - MINAM, luego se vierte estos drenajes cidos de mina tratados al ro Pampahuay. Es esta razn por la cual se va a realizar esta investigacin, buscando otra alternativa de tratamiento. Formulacin del Problema Ser posible determinar el porcentaje de remocin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos en el drenaje cido de mina durante el tratamiento con bacterias sulfato reductoras en la UPM, en el periodo Febrero Junio, en el 2013? Problema Especifico Determinar los niveles de concentracin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos en el pre y post tratamiento con bacterias sulfato reductoras? De qu manera se lograra que el tratamiento con bacterias sulfato reductoras resulte eficiente para la remocin de metales As, Cd, Fe y sulfatos.?

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1.1.2.

Justificacin

El uso de procesos biolgicos en la remediacin de ambientes contaminados presenta algunas ventajas comparativas respecto de las tecnologas tradicionales: suele ser ms econmico, menos contaminante y de mayor eficacia para grandes volmenes y pequeas concentraciones. Los metales pesados, a diferencia de los contaminantes orgnicos, no pueden ser degradados, por ello, los procesos de remediacin se reducen a provocar la movilizacin y/o inmovilizacin de los mismos. En el caso de efluentes contaminados con iones metlicos, es posible utilizar microorganismos capaces de precipitarlos retirndolos de los cursos de agua. Se sabe que las bacterias sulfato reductoras producen sulfuro de hidrogeno como producto final de su metabolismo y este elemento al estar en presencia de metales pesados va a precipitarlos como sulfuro, disminuyendo la contaminacin de los drenajes cidos de mina tanto en acidez, metales pesados y sulfatos principalmente. Ambiental: La generacin del drenaje cido es un impacto ambiental muy significativo y su tratamiento es muy importante, por ende se busca minimizar los drenajes cidos que se genera en la Mina Lar Carbn, Unidad de Produccin Pampahuay utilizando las bacterias sulfato reductoras, para mejorar el tratamiento existente actual que se usa en la mina logrando un manejo adecuado y eficiente de los drenajes cidos de mina. Social: Desde el punto de vista social, la mitigacin cuida el entorno en el que viven las comunidades o las ciudades, no degradando los suelos, la calidad del agua, no generando enfermedades y por consiguientes favoreciendo el desarrollo sostenible de la zona. Econmico: Con el presente trabajo de investigacin lo que tambin se busca es encontrar un tratamiento adecuado y sobre todo que no requiera de mucha inversin, ya que se trata de una mina a pequea escala.

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1.1.3. Antecedentes Para Gutirrez. V., (2008). Existen numerosos mtodos para el tratamiento de DAM, pero pocos han sido aplicados. Los mtodos ms comunes son mtodos qumicos, como la neutralizacin, usando cal u otros componentes alcalinos causando la precipitacin de metales en forma de xidos e hidrxidos. Sin embargo estos son procesos caros y los resultados desaparecen a corto tiempo. Aunque la remocin de metales txicos de industrias en aguas de desecho ha sido practicada por varias dcadas, stas tienen sus limitaciones debido al costo en el proceso fsico-qumico comnmente usado. Otra desventaja es el uso de reactivos agresivos y contaminantes, siendo ente un proceso enemigo del medio ambiente. Esto especialmente cuando la remediacin de DAM y otras industrias contaminantes son el blanco de estos procesos. Los tratamientos biolgicos utilizados para la remocin de metales en aguas de desecho son: bioadsorcion, captacin, acumulacin intracelular, complexacion, oxidacin, reduccin, metilacin, volatilizacin y precipitacin extracelular. Este ltimo est dado por consorcios de Bacterias Sulfato Reductoras (BSR), las cuales llegan a producir en su metabolismo sulfuro de hidrogeno ( ) a travs de la

reduccin de sulfatos presentes en el drenaje acido de mina (DAM), que tienen la caracterstica de presentar una acidez extrema y una gran cantidad de metales pesados. Para Villachica, C; LLamosas J. y Villachica J. (2005). El Proceso NCD Tecnologa Nacional comprobada para el tratamient o de efluentes cidos mineros, actualmente viene siendo aplicada para descontaminar los ros Yauli y Mantaro en la principal fuente de contaminacin cida que es el efluente del Tnel Kingsmill que descarga de 1100 a 1800 L/s de agua cida, en lo que probablemente constituye en mayor caudal de agua cida del mundo. En el tratamiento de drenajes cidos de mina por el mtodo NCD se neutraliza con cal y paralelamente se adiciona un coagulante slido granular que permite la

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coagulacin y sedimentacin de los precipitados coloidales aprovechando el fenmeno de recubrimiento de lamas que ocurre en la flotacin de minerales. Para lvarez (2005). Con respecto a la produccin de sulfuros, que se realiz en un sistema de cultivo batch se emple como sustrato paja de trigo y un consorcio de bacterias logrndose reducir la concentracin de sulfatos de 31 a 18 mm, con una produccin de 5.9 mm de sulfuros; y en un birreactor de columna. Para Palomino, Paredes y Villanueva (2004). A nivel de laboratorio se han realizado una serie de experimentos y se lograron incrementar el pH de 2.39 a 7.23, una remocin de 94,8% de sulfatos; 99,60% de precipitacin de hierro, 99,23% de plomo, y 98,57% de cobre empleando BSR y mecanismos de liosorcin con especies fitorremediadoras (44 especies identificadas). Este sistema sinrgico se denomina sistema de humedales o wetlands, el humedal se implement en la Cancha de Relave Mesapata (Huaraz). Para Gagliano W. Columbus (2004). El drenaje de las minas de carbn abandonadas ha dado lugar a graves problemas de calidad del agua. La oxidacin de los minerales de sulfuro en el carbn y rocas asociadas, son ricos en hierro, las soluciones cidas daan la vegetacin y los ecosistemas acuticos. El objetivo de este estudio fue caracterizar la columna de sedimentos de un humedal construido de compost establecida para el tratamiento de drenaje cido de mina para profundizar en los procesos biogeoqumicos que podran afectar la eficacia del tratamiento. Para ello, la mineraloga y la estabilidad geoqumica de sedimentos ocres se examinaron, las tendencias espaciales y estacionales en la qumica del agua intersticial se midieron y perfilado la composicin de la comunidad bacteriana. La composicin mineralgica de la parte de ocre de la columna de sedimentos era una mezcla de schwertmannita [Fe8O8 (OH) 4.8 (SO4) 1,6] y goethita (a-FeOOH). Las condiciones iniciales de drenaje favorecieron la precipitacin de schwertmannita, que se transforma a una velocidad de 10-30 mol/m3/yr a goetita. Los minerales de sulfuro, pirita (FeS2) y greigita (Fe3S4), fueron identificados junto con magnetita (Fe3O4) en la capa de compost de los

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sedimentos. Las gradientes verticales en la qumica de poros eran similares en todo el sistema de humedales, con la excepcin de la concentracin de sulfuro disuelto, no hay tendencias estacionales consistentes y no fueron detectados. Para Beltrn, V. (2004). Se realiz un tratamiento pasivo para tratar DAM en Orcopampa, Arequipa. Que consiste en un sistema de empozamiento, donde las plantas acuticas tal como el Juncus imbricatus "totora ", y el alga del gnero Cianophyta y Clorophyta contribuyeron en la oxigenacin del proceso. Los agentes contaminadores presentes en el DAM tales como pH, Fe, Cu, Pb y Zn fueron reducidos considerablemente y el efluente final fue utilizado para propsitos agrcolas. La tecnologa de tratamiento con humedales construidos todava no est siendo aplicada en Per, pero algunas tentativas para emplear el tratamiento pasivo han sido realizadas. Considerando la capacidad de tierra y tomando en cuenta los recursos econmicos que se pueden ahorrar, los humedales construidos pueden ser considerados como un mtodo eficaz en tratamiento de DAM. Sin embargo, los experimentos de campo necesitan ser observados y tambin es importante identificar la disponibilidad de los profesionales expertos. Para Oriol G., Cortina J. y Ayora C. (2003). Mencionan que los principios de la reduccin y caracterizacin bacteriana de sulfatos, y la precipitacin de los metales blancos en la forma de sulfuros. Que hasta la fecha, no se han visto aplicaciones de esta tecnologa a escala real para aguas de minas. (La nica aplicacin a escala real ha sido para un ingenio de zinc en Holanda).Sin embargo, se han visto aplicaciones exitosas a escala piloto (en la mina Wheal Jane, UK, por ejemplo), y de estas pruebas es claro que los procesos de RBS ocupan un nicho importante en dos circunstancias comunes donde la desalinizacin de las aguas es imprescindible-donde existen aguas altamente contaminadas por metales valiosos (tales como Cu, Zn).

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Para Lpez P. eat. (2002) Los drenajes cidos de antiguas explotaciones de carbn y minera metlica son una de las principales fuentes de contaminacin de las aguas superficiales y subterrneas en el mundo. Debido a que este problema puede persistir durante dcadas e incluso cientos de aos una vez finalizado el ciclo productivo, existe la necesidad de aplicar tecnologas basadas en sistemas de tratamiento pasivo de probada eficacia y de bajo coste de operacin y mantenimiento respecto a los procesos de tratamiento activo. Los mtodos de tratamiento pasivo se basan en los mismos procesos fsicos, qumicos y biolgicos que tienen lugar en los humedales naturales (wetlands), en donde se modifican las condiciones de Eh y pH de los drenajes de mina, de forma que se favorezca la formacin de especies insolubles y la retencin de cationes metlicos. En este trabajo se hace una revisin bibliogrfica de las ltimas innovaciones tecnolgicas alcanzadas en el tratamiento pasivo de drenajes cidos de mina. Tambin se estudian los resultados obtenidos en las diversas experiencias de laboratorio y de campo a nivel mundial, con el fin de dar las pautas necesarias para su dimensionamiento y una correcta eleccin del mtodo de tratamiento. Uno de los sistemas wetland que viene funcionando con xito es el implementado en la Unidad Minera de Orcopampa (Arequipa), en el que han conseguido aprovechar el efecto sinrgico de plantas fitorremediadoras propias del lugar de la mina con las bacterias sulfato reductoras nativas existentes en dicho medio y su posterior obtencin de aguas clarificadas y con niveles mnimos de metales pesados. Para Kolmert (1997). La optimizacin de la produccin de sulfuro de hidrgeno en un proceso anaerbico continuo utilizando consorcios de bacterias sulfato reductoras inmovilizadas, para la remediacin de aguas cidas, el mismo

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demostr que el pH ptimo para la produccin de ( a una concentracin de sulfato en el medio de 15 mm.

) se encontraba entre 7 y 8

1.1.4.

Objetivos

1.1.4.1 Objetivo General Determinar el porcentaje de remocin de metales As, Cd, Fe y sulfatos en el drenaje cido de mina durante el tratamiento con bacterias sulfato reductoras, en la Unidad de Produccin Minera, (UPM), en el periodo Febrero Junio, 2013? 1.1.4.2 Objetivos Especficos Caracterizar el agua acida de mina de la Unidad de Produccin Minera, (UPM) Determinar las condiciones ptimas para el crecimiento de bacterias sulfato reductoras para lograr la remocin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos en el tratamiento del drenaje acido de mina. 1.2. Marco Referencial

1.2.1. Marco Terico La mina LAR. Carbn Unidad de Produccin Minera Pampahuay, se encuentra ubicada a una altitud aproximada de 3,900 m.s.n.m. a unos 10 Km. de la ciudad de Oyn, distrito y provincia de Oyn; departamento y regin de Lima. Los trabajos de explotacin se ejecutan mediante el mtodo de explotacin subterrnea Longwall llamado en Espaa explotacin por testeros, debido a los estudios que se han realizado por las condiciones del terreno es la ms ptima, aplicando tcnicas convencionales en el desarrollo de galeras, subniveles y chimeneas sobre los mantos. (Cuadro 1.1)

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Cuadro 1.1. Volumen del material no metlico de carbn que se extrae: Produccin diaria: Produccin mensual: Produccin anual: 30,000 TM. 100 TM. 2,500 TM.

Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005 Los materiales no metlicos de carbn que se extraen de las Concesiones mineras no metlicas Demasa El Coco N 2 y Mazzini, es bsicamente carbn tipo bituminoso. La mina no requiere la instalacin de una planta de procesamiento, debido a que el carbn que se est extrayendo es trasladado a la planta de la Empresa Cementos Andino S.A. que est ubicado en la ciudad de Tarma. 1.2.1.1. Lnea Base Ambiental

1.2.1.1.1. Ambiente Fsico Fisiografa El rea donde se encuentra la Unidad de Produccin Minera, est ubicado entre la cordillera Central y Occidental, conformada por los Andes del Centro. Presenta accidentes fisiogrficos caractersticos de nuestra sierra, con desniveles que van desde los 3800msnm hasta los 4400msnm, de topografa moderada y en algunas zonas, con pendientes abruptas. Se ha delimitado como rea de influencia directa de la mina los terrenos que estn siendo utilizados por las labores superficiales de explotacin, caminos de acceso y otros servicios relacionados con la actividad minera. El rea de influencia indirecta (AII), ha sido delimitada en funcin del micro cuenca hidrogrfica. El (AII) abarca un rea de 72 Ha

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Geologa Superficial El yacimiento est constituido por lutitas gris oscuras, con importantes horizontes de areniscas y capas de carbn del tipo bituminoso. Suelos Los suelos de la zona donde se encuentra la mina, estn localizados en paisajes montaosos principalmente con pequeas zonas de planicies. De acuerdo a la zona de ubicacin de la mina Pampahuay, el tipo de suelo est clasificado de la siguiente manera: Entisoles (Soil Taxonomy) Regosoles (FAO) Clima y Meteorologa Los datos disponibles para la regin se encuentran en la estacin meteorolgica de Oyn, dista aproximadamente 5.5 Km. en lnea recta de la zona de ubicacin de la Mina Pampahuay. El clima de Oyn, es fri y seco. Temperatura

Las temperaturas promedio segn la poca y la estacin del ao se mantienen de la siguiente manera: (Cuadro: 1.2) Cuadro: 1.2. Temperaturas promedio segn poca y estacin MESES Enero a Abril Septiembre a Diciembre Mayo a Agosto DESCRIPCIN Estacin lluviosa de alta precipitacin pluvial: 10.5 C Estacin de lluvias moderadas en 9.9 C Estacin veraniega, la temperatura promedio al medio da es de 9.7 C.

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Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005 Precipitacin La mayor precipitacin pluvial se presenta en los meses de: Enero, Febrero, Marzo y Abril. Con menor intensidad en los meses de Setiembre, Octubre, Noviembre y Diciembre. El resto del ao se caracteriza por la ausencia de lluvias e intensa luminosidad solar. El rea de influencia donde se ubica las concesiones de la mina, es el distrito de Oyn, donde la precipitacin media anual vara de 250 a 530 mm/ao. La calidad del aire dentro del rea de influencia y alrededores de la concesin, es muy buena dado que no existe ninguna fuente de emisin de gases o partculas que pueda afectar su calidad.

1.2.1.1.2. Ambiente Biolgico Flora Terrestre La flora en el rea de las concesiones de la mina y su entorno est constituida por vegetacin muy pobre en las partes altas debido a las condiciones climticas existentes. En las partes ms bajas se pueden reconocer algunos arbustos conocidos localmente como: Chilca, quinual, etc. Adems existe una cantidad considerable de eucaliptos. Fauna Terrestre Se caracteriza por presentar una fauna regular tpica de la regin andina as como animales domsticos. La fauna silvestre est representada por el zorro, vizcacha, animales domsticos alejados de la mina como: vaca, carnero, caballo, burro, aves de corral, entre otros.

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1.2.1.1.3. Ambiente Socio - Econmico Poblacin El distrito de Oyn pertenece a la provincia de Oyn, departamento de Lima, tiene una Poblacin de 10,031 habitantes, de los cuales 5471 habitantes pertenecen al rea urbana y 4560 habitantes pertenecen al rea rural, segn informacin recopilada del IX Censo Nacional de Poblacin del INEI. Salud La poblacin de Oyn, cuenta con servicios mdicos, tales como Postas Mdicas del Ministerio de Salud y el Hospital ESSALUD cubriendo los servicios de:

Consulta Mdica General Externa, Odontologa, Obstetricia, adems de Emergencias y los distintos programas preventivos de salud de la poblacin. Educacin El distrito de Oyn cuenta con colegios a nivel inicial, primario y secundario; adems tiene un Instituto de Educacin Superior y cuenta con una filial de la Universidad Nacional Faustino Snchez Carrin. Servicios Los poblacin de Oyn, cuenta con agua y luz elctrica, tambin cuentan con una buena red telefnica tanto particular como comunitaria que permiten fluida comunicacin nacional e internacional.

1.2.1.2.

Operaciones de la Mina

Mtodo de Explotacin Minera El mtodo de explotacin que se emplea es de minera convencional subterrnea Longwall llamado en Espaa explotacin por testeros. El ciclo de minado ser de la siguiente manera: Perforacin, voladura, limpieza, acarreo, sostenimiento, ventilacin.

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1.2.1.2.1. Perforacin En el Plan de minado de la mina Pampahuay, se ha programado las actividades siguientes: preparacin y desarrollo, explotacin y extraccin. a) Desarrollo y Preparacin.- Se efectan labores mineras horizontes, inclinados y verticales como las chimeneas, sub niveles, cortadas sobre mantos para ventanas y otros de acuerdo al requerimiento cuyas secciones son menores dependiendo de la potencia de los mantos y el

comportamiento de las cajas. b) Galeras de acarreo.- Labor horizontal de una seccin de 8 x 9 que fueron trazadas siguiendo el rumbo de los mantos de carbn y que se extienden a partir del socavn. (Cuadro: 1.3). Cuadro: 1.3. Dimensiones de las galeras de acarreo de la UPM Socavones: Seccin : Gradiente : N 2 y Chicagua (Cota Aproximada 3,880 m.s.n.m.) 8 x 9 (2.4m x 2.7m) 10 %

Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005 Mina Pampahuay

c) Chimenea.- Labor vertical de una seccin de 5 x 10 que fueron construidas siguiendo el manto con la finalidad de reconocer y cubicar el mineral a explotar, estas son de doble compartimiento. (Cuadro: 1.4)

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Cuadro: 1.4. Dimensiones de la chimenea de la UPM Seccin: Longitud: 5 x 10 (1.50 m x 3.00 m) 50 m. como promedio

Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005 Mina Pampahuay

Se construy cada 50m en la longitud de la galera con salida a superficie u otro subnivel que permitir la ventilacin, accesos y desarrollo. Sub nivel.- Labor horizontal de preparacin de seccin variable generalmente de 8 x 9 que se desarrolla sobre el manto, labor de preparacin para iniciar la explotacin, el diseo de corte es la misma de una galera. 1.2.1.2.2. Voladura Para las voladuras, los explosivos que se utilizan son las dinamitas de 65%, fulminante comn N 6, mecha de seguridad de 7 pies. Se cuenta con un polvorn el cual tiene las medidas del reglamento de seguridad e higiene minera. Limpieza y Extraccin Se estn usando carros mineros metlicos para cargar el desmonte y/o mineral de los chuts a la superficie (canchas y/o tolvas) La carga de mineral y/o desmonte al carro minero se efecta mediante dos procedimientos el lampeo manual y/o Palas neumticas El mineral roto es limpiado en las labores a travs de Winches de Arrastre Neumticos. (Foto 1.1)

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Foto: 1.1 Vista de tolva con parrilla Las canchas de mineral en superficie estn compuestas por una tolva con parrilla inclinada que termina en un chut desde donde se carga por gravedad a los vehculos de transporte para ser trasladados a la ciudad de Tarma. Sostenimiento El sostenimiento requerido para las labores mineras, es a travs de entibados de madera. Estos permiten una fortificacin de las labores. Ventilacin Para un trabajo eficiente y por la salud del personal, las labores son ventiladas. Se cuenta con ventiladores elctricos lo cual inducir suficiente aire a las labores mineras. Equipos y Herramientas a utilizar Los equipos que se utilizan son los siguientes: Compresora, Perforadoras manuales, Locomotoras, carros mineros, Grupo Electrgeno, Palas Neumticas, Winches Izaje Neumticos, Herramientas (palas, picos, barretillas, combas, etc.) y Equipo de seguridad (cascos, lmparas, botas, mamelucos, lentes, respiradores, etc.).

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1.2.1.2.3. Acarreo Rutas de acarreo relacionadas El mineral es extrado de los socavones N 2 y Chicagua hacia la tolva de superficie con parrilla inclinada que termina en un chute, desde donde se cargar por gravedad a los vehculos transporte 1.2.1.2.4. Transporte Son transportados mediante (Camiones de 30 TM) para ser trasladados a la ciudad de Tarma. El nmero de viajes de estos camiones con mineral es de 3 a 4 veces da. Disposicin del Mineral (Cancha de Mineral) En otra rea cercana a la bocamina del N 2, se almacena en forma temporal el mineral proveniente de la explotacin. Los parmetros a considerar para el diseo de los botaderos son: (Cuadro: 1.5, Fig. 1.1) Cuadro: 1.5. Parmetros de diseo de los botaderos Peso especfico: rea: Altura: Capacidad: 3.0 TM/m3 10 m x 5 m 2m 300 TM de mineral

Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005

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Fig. 1.1. Diagrama de Flujo de Operaciones de la Mina

Mina

Perforacin

Mtodo de explotacin Longwall

Voladura

Acarreo

Carbn del tipo bituminoso

Mineral no metlico apilado para su transporte

Transporte

Planta de Cemento Andino, Ciudad de Tarma

Fuente: Elaboracin propia, 2013

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1.2.1.3.

Instalaciones de Manejo de Residuos Solidos

Disposicin de desmonte Est ubicado a una distancia de 300 m. (Cota Aproximada 3,900 m.s.n.m.) de la bocamina N 2, se acumula el desmonte en forma de plataforma, su talud es de 45 que obedece al ngulo de reposo natural. (Cuadro: 1.6). Cuadro: 1.6. Parmetros para el diseo de disposicin de desmonte Peso especfico: rea: Altura: Capacidad: 2.50 TM/m3. 20 m x 10 m 2m 1,000TM de desmonte.

Fuente: Estudio de Impacto Ambiental Semidetallado, 2005 Residuos Slidos Domsticos Los escasos residuos slidos que se generan en superficie, son almacenados temporalmente en un cilindro debidamente rotulado con su respectivo cdigo de colores para su correspondiente traslado y disposicin final hacia la ciudad de Oyn Residuos Slidos Industriales Los Residuos Slidos Industriales estn constituidos por residuos que por sus caractersticas fsico-qumicas requieren un manejo particular, siendo

adecuadamente dispuestos o segregados antes de su disposicin final a travs de EPS RS registrada y habilitada en DIGESA, en cilindros pintados; y estn ubicados cerca de las instalaciones de la mina. El Volumen de Residuos Slidos Industriales a generados son de 1 m 3 /mes.

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1.2.1.4.

Instalacin de Manejo de Aguas para uso Industrial

El agua utilizada para uso industrial (perforacin), es abastecida por gravedad de los manantiales ubicado en la quebrada Cuarto Piso, en una longitud aproximada de 50 m. con tuberas de polietileno de 1 de dimetro hacia tanques de

concreto armado con las siguientes dimensiones de 3m x 3.5m x 2m, con capacidad de almacenamiento de 20 m3, que est ubicada en la parte alta de la bocamina Chicagua; a partir del cual se distribuir para su uso. El volumen requerido de agua para las actividades mineras es de 20 m3/da Manejo de Aguas de Mina, Desmonte Las aguas de mina provenientes de la bocamina del Nivel (Socavn N 2) a su salida, estn siendo derivadas a travs de cunetas a una poza de sedimentacin y decantacin para eliminar los residuos alterables, antes de su vertimiento final al ro Pampahuay. (Fig. 1.2). Fig. 1.2 Esquema de tratamiento que utiliza la mina para el tratamiento de agua acida

Bocamina (Socavn N 2)

Adicin de cal Rio Pampahuay

Fuente: Elaboracin propia, 2013

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En el esquema se muestra el tratamiento con neutralizante cal, que actualmente utiliza la mina para poder adecuarse a los lmites mximos permisibles 1.2.1.5. Drenaje cido de Mina

Es el agua contaminada originada de la explotacin minera, ya sea superficial o profunda, tpicamente de alta acidez, rica en sulfato y con niveles elevados de metales pesados, principalmente hierro, manganeso y aluminio. Debido a la alta cantidad de hierro oxidado, el drenaje cido de la mina es a menudo rojizo. Para Silver (1989). El drenaje cido de minas, pilas de estril y de desechos es uno de los ms graves problemas ambientales de la explotacin minera. La presencia de minerales sulfurados en contacto con el agua produce cido sulfrico presente en las aguas de drenaje, que puede presentar un pH extremadamente bajo, alcanzando el valor de 2,0 Proceso de Formacin de Drenaje cido de Mina Se cree que el proceso bsico de formacin de drenaje cido se produce en tres etapas, incluyendo diferentes reacciones qumicas. Las pilas de estril y las cuencas de desecho son lugares privilegiados para la generacin de drenaje cido, debido a la presencia de partculas recientemente fragmentadas (por el desmonte de roca o por el proceso de fragmentacin en el circuito de beneficiamiento) con gran superficie especfica. Adems de ello, esas pilas se presentan poco compactadas, o sea con gran permeabilidad, lo que facilita la percolacin de agua de lluvia o de escurrimiento superficial, favoreciendo la oxidacin de los sulfuros. a) La primera etapa es la oxidacin de los sulfuros, aqu representado por la pirita, el mineral de sulfuro ms comn; esta oxidacin puede darse en presencia de aire o de agua:

FeS2 + 3 O2

FeSO4 + SO2 [aire]

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2 FeS2 + 2 H2 O + 7O2

2FeSO4 + 2H2 SO4 [agua]

b) Sulfato ferroso, en presencia de cido sulfrico y oxgeno, se puede oxidar y producir sulfato frrico (soluble en agua). Cuando el pH se reduce en el microambiente en torno de los minerales sulfurados, la poblacin de la bacteria acidoflica Thiobacillus ferrooxidans comienza a crecer, lo que provoca una cada todava mayor en el pH: 4 Fe SO4 + 2 H2 SO4 + O2 2Fe2 (SO4) 3 + 2H2 O

c) El ion frrico se combina con el radical hidroxilo, produciendo hidrxido frrico, que es insoluble en cido y precipita:

Fe2 (SO4) 3 + 6 H2 O

2Fe (OH) 3 + 3 H2 SO4

d) Pero el ion frrico tambin puede reaccionar con la pirita y producir ms cido: Fe2 (SO4) 3 + FeS2 S +3/2 O2 + 3Fe SO4 + 2S H2 SO4

Para Nordstrom y Alpers (1999). Describe el proceso de oxidacin de la pirita como el principal responsable de la formacin de aguas cidas; esta oxidacin se ve favorecida en reas mineras debido a la facilidad con la que el aire entra en contacto con los sulfuros a travs de las labores mineras de acceso y por los poros existentes en las pilas de estriles y residuos as como al incremento de la superficie de contacto de las partculas. Dichos autores consideran que los factores que ms afectan a la generacin del drenaje cido de mina son el volumen, la concentracin, el tamao de grano y la distribucin espacial de la pirita. La geoqumica de las aguas cidas de mina es un fenmeno complejo al haber diversos procesos fsicos, qumicos y biolgicos jugando un papel importante en la produccin, liberacin, movilidad y atenuacin de los contaminantes.

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La importancia que tiene el problema de la formacin de aguas cidas ha llevado a desarrollar y establecer una serie de ensayos capaces de determinar el potencial generador de acidez de los residuos mineros. La USEPA (1994) en un documento tcnico sobre prediccin de drenajes cidos de mina hace un anlisis de cada uno de los tipos de ensayos empleados en la prediccin del potencial generador de cido: estticos, cinticos y modelos matemticos. Los ensayos estticos predicen la calidad de los drenajes cidos de mina mediante la comparacin entre la capacidad de neutralizacin y el potencial de generacin cida. La caracterizacin precisa del drenaje cido de mina es muy importante para efectuar la correcta seleccin y dimensionamiento de los dispositivos operacionales que configuran el conjunto del tratamiento pasivo. Una adecuada caracterizacin debe incluir la medida precisa y representativa del caudal, y de al menos los parmetros qumicos siguientes: pH in situ, pH en laboratorio, alcalinidad total, acidez o alcalinidad neta (expresadas todas como CaCO3); adems de contenidos de y conductividad (Hyman y Watzlaf, 1995). Estos autores consideran deseable analizar tambin el Ca, Mg, Na, Cl, K, Br y Zn, lo que permite en la mayora de los casos efectuar un correcto balance inico. El conjunto de estas medidas se ha de registrar al menos durante un ao hidrolgico. La acidez y la alcalinidad de un drenaje cido de mina son parmetros bsicos en la seleccin del tipo de tratamiento pasivo; representan la capacidad de esas aguas para neutralizar una base o un cido. Que una solucin presente acidez o alcalinidad est en funcin de que predomine en ella su acidez total o su alcalinidad total, hablndose entonces con ms precisin de soluciones con acidez o alcalinidad neta. En la prctica, lo que se mide en el laboratorio es la acidez neta y la alcalinidad total. La acidez y la alcalinidad se suelen medir como equivalentes de CaCO3. La acidez medida en el laboratorio generalmente representa la acidez neta, ya que se suele efectuar la valoracin con CaCO3 despus de haber aadido H2O2 y

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calentado la muestra para promover la total oxidacin e hidrlisis de todos los metales. Para Wildeman y Laudon (1989). El drenaje cido de la mina ocurre cuando los minerales del sulfuro se ponen en contacto con el oxgeno y el agua, condiciones favorables para su oxidacin qumica o a la oxidacin rpida por bacterias tales como Thiobacillus ferrooxidans. Algunos autotrophs de hierros oxidados tales como Leptospirillum ferroxidans, Thiobacillus thiooxidans y Sulfolobolus brierleyii se pueden asociar tambin a la oxidacin mineral biolgica. La alta acidez de DAM es causada a menudo por la oxidacin de la pirita, la forma cristalina del sulfuro del hierro ( )

Como resultado de esa oxidacin, el cido sulfrico se genera dando condiciones cidas a los efluentes de la mina. La pirita es comnmente asociada tanto con las situaciones de minas de carbn como las minas de metal, pero el drenaje cido de minas de metal presenta un problema ms severo que la mayora de drenajes de mina de carbn porque los agentes prioritarios de contaminacin tal como AS, Cd, Pb, Hg, Cu y Zn pueden estar presentes en peligrosas concentraciones" Proceso de Drenaje cido de Mina La calidad del agua de drenaje proveniente de faenas mineras depende tanto de la presencia en la roca, de metales que se pueden lixiviar, como del incremento en el grado de lixiviacin que resulta de la generacin de cido y que puede ocurrir cuando hay presencia de sulfuros reactivos en cantidades suficientes. Por lo tanto, la generacin de cido es controlada por: El tipo de mineral sulfuroso La distribucin y exposicin del mineral sulfuroso El tipo, distribucin y exposicin de minerales alcalinos Las caractersticas de oxidacin qumica y biolgica La temperatura y pH

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El flujo de oxgeno y agua Las concentraciones qumicas

El desarrollo del drenaje cido es un proceso de tres etapas. Inicialmente, dominan los procesos de oxidacin qumica, relativamente lentos, y la alcalinidad disponible controla los valores de pH en el rango cercano al neutro. Durante esta etapa, se reducen los productos cidos y la velocidad de lixiviacin de muchos de los contaminantes potenciales. A medida que se consume la alcalinidad disponible, el pH se vuelve ms cido y la velocidad de oxidacin aumenta. A valores de pH por debajo de 4,5; predominan las reacciones de oxidacin biolgicamente catalizadas, las cuales son ms rpidas, el pH disminuye y la concentracin de muchos contaminantes aumenta. El control de las reacciones de generacin de cido, en las etapas inciales de oxidacin, exige el control del pH, para evitar la ocurrencia de oxidacin biolgica; o bien, el control del suministro de oxgeno, el oxidante principal. En las etapas posteriores de la oxidacin rpida, es ms difcil el control de las reacciones de generacin de cido. La oxidacin de minerales sulfurosos produce hierro ferroso. La actividad biolgica oxida el hierro ferroso y lo convierte en frrico, el cual acta como el oxidante principal. En este momento, las reacciones son esencialmente "autosuficientes". Finalmente, el drenaje cido de mina que se produce de esta forma, no slo tiene un pH bajo, sino que adems presenta metales pesados tales como hierro, manganeso, cobre, zinc y plomo, entre otros. Debido a la alta solubilidad de dichos metales en una solucin cida, el origen de las altas concentraciones de metales pesados en el drenaje cido de minas se atribuye a la lixiviacin de los metales de las rocas que se encuentran en un rea minera.

Fuentes de Drenaje cido de Mina

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Los minerales sulfurosos estn en todas partes en el ambiente geolgico, pero se encuentran principalmente en rocas que yacen debajo de una capa de suelo y, a menudo, debajo de la napa fretica. Bajo condiciones naturales, el suelo que cubre la roca y el agua subterrnea minimiza el contacto con el oxgeno, permitiendo as que la generacin de cido prosiga a una velocidad tan baja que el efecto sobre la calidad general del agua ser insignificante o indetectable. La exposicin de roca sulfurosa reactiva al aire y al agua, como resultado de actividades tales como la construccin de carreteras o explotacin minera, puede acelerar la velocidad de generacin de cido y ocasionar un impacto en el ambiente. Tipos de Tratamiento Existen dos tipos principales de sistemas de tratamiento del drenaje cido de mina: los sistemas activos que requieren la operacin y mantenimiento

continuos; y los sistemas pasivos que se basan en el tratamiento "natural" y pretenden funcionar sin cuidados ni mantenimiento mayor. En la primera alternativa, comnmente conocida como sistema de tratamiento activo, el drenaje cido de mina es tratado en una planta de tratamiento a travs de tcnicas de neutralizacin y precipitacin. En la segunda alternativa, conocida como sistema de tratamiento pasivo, se aprovecha la topografa e hidrologa natural para construir en el mismo lugar un sistema que aumenta espontneamente el pH y forma precipitados de los metales disueltos en el DAM. Tratamiento Activo Los sistemas activos para el tratamiento de drenaje cido de mina presentan muchas dificultades. Aparte del alto costo asociado a la construccin y mantenimiento de la planta de tratamiento en un lugar remoto de actividad minera, un sistema de tratamiento activo es difcil de mantener durante un perodo prolongado de tiempo. Muchas veces, los problemas de drenaje cido de mina despus del abandono de una mina son ms severos que los problemas durante la operacin de la mina. Esto ocurre porque, en general, el

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drenaje en y alrededor del rea minera durante su operacin es controlado y se toman otras medidas tcnicas para minimizar la generacin de drenaje cido de mina. Despus del abandono de una mina, dichas medidas dejan de existir. Adems, la exposicin de rocas y desechos de rocas excavadas a la atmsfera y la precipitacin, lleva a un mayor grado de oxidacin de los minerales sulfurados que hay en estas rocas y a la posterior generacin de drenaje cido de mina por lixiviacin y disolucin. Por consiguiente, un sistema de tratamiento pasivo es ms atractivo para atenuar el drenaje cido de mina en y alrededor de una mina abandonada. Tratamiento Pasivo Un sistema de tratamiento pasivo es aquel que se utiliza para tratar el drenaje cido de mina a travs de procesos qumicos, biolgicos y gravitacionales que ocurren en forma natural, para lo cual, se aprovecha la topografa e hidrologa para crear un medio ambiente controlado para el tratamiento.

Conceptualmente, los sistemas de tratamiento pasivos ofrecen muchas ventajas sobre los sistemas de tratamiento activos convencionales. El uso de aditivos qumicos y el consumo de energa son prcticamente eliminados. En un sistema pasivo, los costos de operacin, mano de obra y mantenimiento son considerablemente menores que los de un sistema activo, donde es necesario construir y mantener plantas de tratamiento qumico. Adems, un sistema pasivo se construye sobre los escenarios naturales de un asiento minero y por lo tanto las preocupaciones ambientales que se asocian a la construccin y operacin de una planta de tratamiento por lo general no se dan en este caso. En general, las principales tecnologas pasivas incluyen una combinacin de los siguientes componentes: humedal aerbico, humedal anaerbico, desage de caliza anxica, desage de caliza xica, y canal abierto de caliza. Varias otras tecnologas se han propuesto y usado en sistemas pasivos para el tratamiento de drenaje cido de mina, como el pozo de derivacin llenado con caliza. El principal propsito de estas tecnologas es adaptarse a varias situaciones especficas de cada asiento.

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1.2.1.6. Bacterias Sulfato Reductoras

Para Mudryk (2000). Indica que una de las caractersticas de las bacterias sulfato reductoras es la produccin biolgica de sulfuro de hidrgeno en ambientes acuticos se conoce desde el siglo pasado. Las bacterias sulfato reductoras (BRS) forman un grupo especializado de procariotas que tienen la capacidad de usar sulfato como aceptor final de electrones en la respiracin Caractersticas relevantes de estas bacterias: Fisiolgicamente se pueden dividir en tres grupos celulares bsicos: Eubacterias gram negativas Eubacterias gram positivas Arqueobacterias

Estas bacterias llevan a cabo el proceso de reduccin desasimilatoria de sulfato (es decir, cuando el sulfuro producido en la reduccin del sulfato no es incorporado a la biomasa); este ion es utilizado como un oxidante para la degradacin de la fuente orgnica de carbono (Postgate, 1954). En forma general, este proceso puede representarse mediante la siguiente ecuacin qumica: 2CH2O + SO4 = 2HCO3 - + H2S

Las caractersticas morfolgicas de estas clulas varan considerablemente. Se han descrito distintos tipos celulares, entre los que se encuentran: bacilos, vibrios, cocos, espirilos, etc. (Widdel y Bak, 1992). Las capacidades oxidativas y metablicas de las BSR varan de acuerdo al gnero. Entre los compuestos orgnicos ms utilizados se encuentran: lactato, acetato, piruvato, etanol, propanol y glucosa (Gibson, 1990). Los medios ms utilizados para el crecimiento de BSR son los diseados por J.R. Postgate (denominados medios B y C de Postgate) que poseen lactato como fuente de carbono. Adems, el medio B contiene cido abscrbico y tiogliclico como agentes reductores.

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Las bacterias sulfato-reductoras son estrictamente anaerobias y por lo general, son muy sensibles a los medios xicos, muriendo de forma ms o menos rpida cuando son expuestas a ese tipo de medios (Barton y Tomei, 1995). Las BSR requieren ausencia de oxgeno para su crecimiento y tambin un potencial redox bajo (Gibson, 1990). Los metales son importantes como cofactores para varias enzimas de las BSR y as son necesarios para el crecimiento. El nquel y el selenio son requeridos por la enzima hidrogenasa, 16 el calcio es importante para incrementar la eficiencia del crecimiento en placa, por otra parte el hierro es un elemento esencial para la produccin de la hidrogenasa y de los citocromos (Barton y Tomei, 1995). Las BSR crecen mejor bajo condiciones levemente alcalinas, en un relativamente estrecho rango de pH (entre 7,0 y 7,8). Sin embargo, se han encontrado BSR con capacidad de tolerar ambientes levemente cidos (pH 4,0) as como tambin especies con capacidad de desarrollarse en ambientes alcalinos (pH 9,5) (Barton y Tome, 1995). Un factor muy importante en la actividad de las bacterias sulfato reductoras es la temperatura del sistema. La mayora de las BSR son mesfilas, es decir, con un crecimiento ptimo en el rango de temperatura de 25 a 40 C (Okabe y Characklis, 1992). Se ha comprobado que la actividad metablica de las BSR es mxima cuando se encuentran formando biopelculas (biofilms) (Beyenal y Lewandowski, 2004). 1.2.1. Marco Conceptual Fuentes de Carbono Indica que las fuentes de carbono para el Proceso de Sulfato Reduccin, desde el punto de vista ambiental, la demanda qumica de oxgeno (DQO) es una medida aproximada del contenido total de materia orgnica presente en una muestra de agua. Algunas aguas residuales ricas en sulfatos como el DAM y otros efluentes industriales, son usualmente deficientes en materia orgnica. (Segn Romero & Aguilar 2009).

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Acidez de un Agua Residual Seala que el acidez de un agua residual se debe a la presencia de ciertos cidos minerales y/u orgnicos, o a la hidrlisis sufrida por la existencia de sales de cidos fuertes y bases dbiles. Puede causar accin corrosiva en las instalaciones, por la accin del catin hidrgeno. (Segn Freeman H. 2006). pH Seala que el pH es una medida de la concentracin del in hidrgeno en el agua. Se expresa la concentracin de este in como pH, y se define como el logaritmo decimal cambiado de signo de la concentracin de in hidrgeno. *Smbolo que se utiliza para la concentracin de hidrogeniones, los valores de pH abarcan de 0 a 14 correspondiendo un valor de pH 7 si es neutro siendo menor a 7 cido y mayor a 7 alcalino. Concentracin del ion hidrgeno y de la acidez de soluciones acuosas. El agua pura tiene pH 7 y es considerado como neutro. Por encima de l se trata de soluciones bsicas y por debajo de soluciones cidas. El agua de lluvia oscila entre un pH 4. 6 y 5. 6. (Segn Emmel T. 2005). Metales Pesados Seala que los metales pesados contribuyen fuertemente a la contaminacin ambiental, la cantidad de metales disponibles en el suelo est en funcin del pH, el contenido de arcillas, contenido de materia orgnica, la capacidad de intercambio catinico y otras propiedades que las hacen nicas en trminos de manejo de la contaminacin. (Sauve et al., 2000). Fuentes de Energa y Nutricin Indica que las fuentes de energa y carbono presentan dos grupos principales de bacterias sulfato-reductoras. El primer grupo lo comprenden especies cuyo metabolismo implica la oxidacin incompleta del sustrato orgnico a acetato, mientras que el segundo grupo abarca aquellos microorganismos capaces de oxidar completamente la materia orgnica excretando dixido de carbono. En general, las bacterias que realizan la oxidacin incompleta se caracterizan por

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ser nutricionalmente menos verstiles que las especies oxidantes completas y presentar velocidades de crecimiento ms rpidas. BSR no oxidantes de acetato: las fuentes de energa que utilizan son el malato, formiato y alcoholes como metanol, etanol, propanol y butanol, oxidndolos hasta acetato como producto final y excretan cido graso. BSR oxidantes de acetato: oxidan lactato, succinato e incluso benzoato para producir CO2. (Segn Vincke et al. 2000) Bacterias Sulfato Reductoras Seala que las Bacterias Sulfato-Reductoras (BSR) son microorganismos anaerobios obligados, metablicamente verstiles provenientes de varias familias y diferentes gneros. Utilizan sulfato u otros compuestos oxidados de azufre como aceptor final de electrones (agente oxidante) para la produccin de H2S. Pueden crecer de forma heterotrfica usando molculas orgnicas de bajo peso molecular y de manera autotrfica usando hidrgeno y dixido de carbono. (Segn Lens & Kuenen, (2001). Clasificacin de Bacterias Sulfato Reductoras Las bacterias reductoras de sulfato comprenden varios grupos de bacterias que utilizan el sulfato como agente oxidante, reducindolo a sulfuro. La mayora pueden tambin utilizar compuestos de azufre oxidados tales como sulfito y tiosulfato o azufre elemental. Es un metabolismo disimilativo de azufre puesto que no se asimila ningn compuesto orgnico. Las bacterias reductoras de sulfato se han considerado como un posible tratamiento para las aguas cidas de las minas que otras bacterias originan. Las bacterias reductoras de sulfato se tratan como un grupo fenotpico junto con otras bacterias reductoras de azufre para propsitos identificativos. Se encuentran en varias lneas filogenticas, tres de las cuales se incluyen en Proteobacteria, todas en el subgrupo del delta: Desulfobacterales Desulfovibrionales

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Syntrophobacterales

Un cuarto grupo incluye termfilos en su propio filo, Thermodesulfobacteria. Las bacterias reductoras de sulfato restantes se clasifican con otras bacterias en Nitrospirae y en el grupo gram positivo Peptococcaceae (por ejemplo, Thermodesulfovibrio y Desulfotomaculum, respectivamente). Hay tambin un nico gnero de Archaea capaz de la reduccin del sulfato, Archaeoglobus. El olor a huevos podridos del sulfuro de hidrgeno es a menudo un marcador para la presencia de bacterias reductoras de sulfato en la naturaleza. (Segn Dexter D., Betsey 2003). Bacterias Sulfato Reductoras y Corrosin La presencia de xidos de hierro y de la actividad sulfato reductora constituyen los principales factores determinantes de la corrosin mediada por sulfato bacterias. Otro hecho destacable es que las sulfato bacterias aumentan significativamente la corrosin cuando se desarrollan bajo

un biofilm aerbico/anaerbico que cuando el biofilm es totalmente anaerbico, debido a que en el proceso aerbico (que domina la corrosin durante los primeros estadios de acumulacin del biofilm) se acumulan hidrxidos de hierro (principales productos de la corrosin) que son fcilmente transformados en sulfuros de hierro y que causan una mayor corrosin del metal gracias a la actividad sulfato reductora. En un biofilm totalmente anaerbico, la naturaleza y extensin de la corrosin est ntimamente ligada a la acumulacin de sulfuro de hierro dentro del biofilm, mientras que en condiciones abiticas (sin microorganismos) y aerobias, la corrosin del metal es proporcional al oxgeno disuelto en el lquido que circunda el mismo, ya que se acumulan ms hidrxidos de hierro sobre la superficie del metal a elevadas concentraciones de oxgeno disuelto. (Lee & Characklis, Corrosin, 49:186, (1993) Ventajas del proceso de Sulfato - Reduccin Las ventajas que tiene el proceso de sulfato-reduccin en el tratamiento de efluentes, son una valiosa herramienta biotecnolgica para la remocin de

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metales en lixiviados de minas y efluentes industriales. Es considerado potencialmente superior a otros procesos biolgicos debido a su capacidad para producir alcalinidad y neutralizar el pH de aguas cidas; y su facultad para la remocin simultnea de materia orgnica, sulfatos y metales pesados. (Segn Van L. et al. 2001). Reactores Biolgicos Los reactores biolgicos utilizados para el tratamiento de aguas residuales pueden ser divididos en dos grandes grupos en base a tipo de crecimiento microbiano: 1. De lecho fijo, formando biopelculas, 2. De crecimiento libre o suspendido. En los primeros la biomasa est constituida por bacterias formando una pelcula sobre un soporte inerte, mientras que los segundos dependen de que los microorganismos formen grnulos o flculos en el reactor. Las bacterias que crecen en suspensin deben de formar estructuras que las permitan permanecer en el reactor y no ser lavadas con el efluente, y la eficiencia del proceso depende en buena parte de la capacidad del inculo (lodos/residuos) para formarlas. (Segn Jos C., 1990, Mxico). Ventajas: Bajo consumo de energa; no se requiere aporte de O2 Posibilidad de recuperar y utilizar CH4 como combustible (caro) El lodo obtenido es un lodo ya estabilizado Desventajas: Largo perodo de arranque si no se utiliza inculo (4-6 meses) Sensibilidad a variacin de condiciones ambientales Menor eficiencia en remocin de MO (aprox.80%)

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Dilucin exhaustiva Es un procedimiento intensivo que se sigue para preparar una disolucin menos concentrada a partir de una ms concentrada. (Brown L. (2004) Qumica la ciencia central. Novena edicin. Pginas 137 a 138. Mxico. Pearson Educacin). Sulfatos El sulfato se distribuye ampliamente en la naturaleza y puede presentarse en aguas naturales en concentraciones que van de unos pocos a varios miles de miligramos por litro. Las aguas residuales del drenado de minas de hierro pueden aportar grandes cantidades de sulfato debido a la oxidacin de la pirita. (Rafael M. Fisicoqumica y Microbiologa de los medios acuticos, Tratamiento y control de calidad de aguas. Inoculo Es una suspensin de microorganismos vivos que se han adaptado para reproducirse en un medio especfico. (Quintero R. Ingeniera Bioqumica: teora y aplicaciones, 1993). Sulfuro de Hidrogeno El sulfuro de hidrgeno es un gas txico, incluso en concentraciones muy bajas (aprox. 2,5 l/m3) tiene un olor muy fuerte y caracterstico. El H2S se elimina de los gases de escape por conversin a SO2 a travs de procesos de absorcin o, en grandes cantidades, con una reaccin de sulfuro elemental (proceso Claus). 2. 2.1. MARCO METODOLGICO Hiptesis

La hiptesis es una respuesta (solucin) tentativa al problema de investigacin, que por su alto grado de fundamentacin terica y emprica tiene altas probabilidades de ser verdadera.

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Todo el conocimiento cientfico est constituido por hiptesis, por lo que siempre tiene carcter probabilstico. No existen verdades definitivas en la ciencia. Hiptesis General El tratamiento con bacterias sulfato reductoras contribuye a la remocin de los metales Fe, As, Cd y sulfatos presentes en el drenaje cido de mina de la UPM, en el periodo Febrero Junio, en el 2013? Hiptesis Especfica H1: Se determinara el nivel de concentracin de metales en el drenaje acido de mina antes, durante y despus del tratamiento con bacterias sulfato reductoras. H2: Las condiciones ptimas para el crecimiento de bacterias sulfato reductoras lograran la remocin de metales As, Cd, Fe y sulfatos en el tratamiento del drenaje acido de mina

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2.2. Variables

Cuadro: 2.1 Variables de Operacionalizacion Variables Definicin Conceptual V. D.


Remocin As, Cd, Fe y sulfatos La capacidad de reducir la concentracin contaminantes acido de mina que de se Concentracin durante el tratamiento de metales As, Cd, Fe y sulfatos Concentracin Final de metales As, Cd, Fe y sulfatos Determinacin concentracin antes, Concentracin inicial de metales As, Cd, Fe y sulfatos Escala de Intervalo

Definicin Operacional

Indicadores

Escala de Medicin

durante, y despus del tratamiento

encuentra en el drenaje

V. I.

Actividad de las bacterias sulfato reductoras

Es la capacidad que tienen las bacterias para crecer en un determinado rango de pH, con un determinado fuente de carbono y medio de cultivo

Crecimiento de las bacterias sulfato reductoras capaces de reducir el sulfato del drenaje acido de mina para generar sulfuro de hidrogeno.

pH Poblacin de bacterias Tipo de bacterias (genero Desulfovibrio, Desulfomonas, Desolfubulbus Tiempo

Escala ordinal

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2.3. Metodologa

2.3.1. Tipo de Estudio Investigacin Aplicada, Es la utilizacin de los conocimientos en la prctica, para aplicarlos, en la mayora de los niveles de investigacin. Nivel de Investigacin Investigacin Explicativa, Se encarga de buscar el porqu de los hechos mediante el establecimiento de relaciones causa-efecto. En este sentido, los estudios explicativos pueden ocuparse tanto de la determinacin de las causas (investigacin postfacto), como de los efectos (investigacin experimental), mediante la prueba de hiptesis. Sus resultados y conclusiones constituyen el nivel ms profundo de conocimientos. Tam, J., G Vera y R. Oliveros (2008). Tipo de Diseo de Investigacin El tipo de diseo de Investigacin es Cuasi Experimental, presenta corte longitudinal debido a que el experimento durara 3 meses. 2.4. Poblacin y Muestra

Es el conjunto de todos los elementos (unidades de anlisis) que pertenecen al mbito espacial donde se desarrolla el trabajo de investigacin. Para el desarrollo de la tesis se tom como muestra el drenaje acido de mina (Mapa de Ubicacin de la mina. (Ver Anexo 1) La mina Pampahuay se encuentra ubicada en un rea despoblada del paraje Pampahuay a una altitud aproximada de 3,900 m.s.n.m. a unos 10 Km. de la ciudad de Oyn, distrito y provincia de Oyn; departamento y regin de Lima. (Cuadro 2.2, Foto 2.1)

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Cuadro: 2.2 Punto de Toma de Muestra de Agua Acida Descripcin de Muestra Coordenadas UTM

PM 1: Drenaje acido de E 310 937.12 mina N 8 817965.31 30/04/2013 3,784 msnm

Fecha muestreo: Altitud:

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Foto 2.1: Vista de muestra PM 1, salida de Bocamina del socavn N 1 del drenaje acido de mina a tratar, Oyon 2013

2.5.

Mtodo de Investigacin

Mtodo Experimental, Se fundamenta en el Mtodo Cientfico y utiliza como procesos lgicos de deduccin. Consiste en realizar actividades con la finalidad de comprobar, demostrar o reproducir ciertos fenmenos hechos o principios en forma natural o artificial, de tal forma que permita establecer experiencias para formular hiptesis que permitan a travs del proceso cientfico conducir a

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generalizaciones cientficas, que puedan verificarse en hechos concretos en la vida diaria. 2.6. Tcnicas e Instrumentos de Recoleccin de Datos

Tcnica de Recoleccin de Datos Ficha de Identificacin de Bacterias Sulfato Reductoras Ficha de registro de datos de campo Cadena de Custodia de muestras de agua acida Formato de toma de muestras de sustrato Formato de toma de muestra de lodo 2.6.1 Procedimiento de Recoleccin de Datos Trabajo de Campo 2.6.1.1. Toma de Muestras de Agua cida

En campo se tom la muestra del agua cida de mina, que se genera en la Mina Lar Carbn S.A. se hicieron las mediciones en las siguientes condiciones: (Cuadro 2.3, Cuadro 2.4.) Cuadro: 2.3. Parmetros de medicin de campo Parmetros Temperatura Ph Caudal Muestra PM 1 14.5 C 2.5 5.5 (l/s)

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

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Cuadro: 2.4 Condiciones para la toma de muestras de agua cida de mina para anlisis de metales Parmetro Fisicoqumico Metales Las muestras se Se utiliz el Las muestras se Recipiente Preservante Condicin

tomaron recipientes

en preservante de HNO3(1:1)

mantuvieron refrigeradas desde el

plstico de litro con 1ml HNO3(1:1) hasta pH < 2

momento de la toma de muestra hasta su

recepcin en laboratorio para los anlisis

correspondientes Fecha muestreo: 30/04/2013 de Muestreado por: Lugar: Mina Lar

Maria Elena Valerio Carbn, Provincia Zuiga de Oyn

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Parmetros de medicin en laboratorio En laboratorio se hizo un barrido de metales por el mtodo de espectroscopia de plasma acoplado inductivamente (ICP), se determin la concentracin inicial y final de los metales y para sulfatos el anlisis se hizo por el mtodo de SM 4500 (
) E. Sulfate Turbidimetric Method. (Cuadro 2.5, Cuadro 2.6)

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Cuadro: 2.5 Anlisis de metales de agua acida realizado por el Laboratorio Servicios Analticos Generales (SAG) y Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera Ensayo Mtodo Unidades

Metales Totales y Disueltos, EPA Method 2007, Rev 4.4. EMMC mg/L Arsnico, Cadmio, Hierro Version, Determination of Metals and trace Elements in Wter and Wates Plasma by Inductively Atomic Coupled Emission

Spectrometry - 1994 Fecha 02/05/2013 08/07/2013 de Ensayo: Muestra PM 1, agua acida de mina Lar carbn, Provincia de Oyn, Muestra de agua acida tratada de Laboratorio de Biotecnologa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

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Cuadro: 2.6 Anlisis de sulfatos realizado por el Laboratorio Servicios Analticos Generales (SAG) y Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera Laboratorios Laboratorio SAG Laboratorio de la Anlisis de sulfatos Sulfatos
(

Unidades
) mg/L

Mtodo SM 4500 (
) E.

Sulfate Turbidimetric Method.

Universidad Nacional de Ingeniera Fecha de Ensayo: 02/05/2013 08/07/2013

Muestra PM 1, agua acida de mina Lar carbn, Provincia de Oyn, Muestra de agua acida tratada de Laboratorio de Biotecnologa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

2.6.1.2. Recoleccin de Sustratos Para el tratamiento del drenaje acido de mina se recolectaron sustratos que se emplean como fuente de carbono y energa para el crecimiento de las bacterias sulfato reductoras. Se utiliz el estircol de vaca y oveja, por su potencial fuente de carbono. (Cuadro 2.7, Foto 2.2, Foto 2.3).

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Cuadro: 2.7 Recojo de muestra de sustratos para el tratamiento Sustrato Recipiente Cantidad muestra gr. Estircol de Vaca Bolsa plstica 10 gr. 10 gr. No requiere No requiere de Preservacin

Estircol de Oveja Bolsa plstica Fecha muestreo: 30/04/2013 de Muestreado Maria

por: Lugar: Cerca de la Mina Lar Carbn, Elena Provincia de Oyn

Valerio Zuiga Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Foto 2.2: Vista de punto de muestreo N 1 de estircol de vaca para el tratamiento cerca de la mina Lar Carbn.

Foto 2.3: Vista de estircol recolectado de oveja para el tratamiento

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2.6.1.2. Descripcin del Experimento

Fase Experimental Acondicionamiento para el aislamiento de Bacterias Sulfato Reductoras Para el aislamiento de las bacterias sulfato reductoras se tom lodo residual por el olor caracterstico a huevo podrido, obtenido de un canal por la zona del Rio Chilln

Se emple el medio de cultivo API para el aislamiento de las bacterias sulfato reductoras. Para preparar el medio de cultivo API se tom un cultivo en medio Postage B Tabla 2.1. Composicin del medio de Cultivo Postage B Compuesto KH2PO4 NH4Cl CaSO4 MgSO4.7H2O Lactato de Sodio Extracto de levadura FeSO4 c. Ascrbico c. Tiogliclico Agua destilada pH Cantidad 0,5 g 1g 1g 2g 3.5 g (5 ml al 50%) 1g 0,5 g 0,1 g 0,1 g 1 litro 7,5 0,2

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

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Se filtr con papel filtro y se aadi a un frasco de 100ml donde se tena 90 ml de cultivo Postage C, que se prepara para las experiencias en las siguientes condiciones: El medio se preparaba sin el agregado de FeSO4 para evitar la precipitacin del FeS, que interferira en las posteriores determinaciones analticas a realizar, y sin citrato de sodio ya que ste acta como complejante del hierro (II). A dicho medio se le hizo desplazar el oxgeno durante 30 minutos.

Antes de cerrar el frasco con tapn de goma, se le adicion solucin para anaerobiosis (ver tabla 2.3), previamente esterilizada por filtracin. La incubacin se realiz a 30C y cuando el cultivo alcanzaba la fase de crecimiento exponencial, fue utilizado como inculo para la realizacin de las distintas experiencias. (Tabla 2.2, Tabla 2.3)

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Tabla 2.2. Composicin del medio de Cultivo Postage C Compuesto KH2PO4 NH4Cl Na2SO4 CaCl2.6H2O MgSO4.7H2O Lactato de Sodio Extracto de levadura FeSO4 Citrato de Sodio. 7H2O Agua destilada pH Cantidad 0,5 g 1g 4,5 g 0,06 g 0,06 g 6 g (8,5 ml al 50%) 1g 0,004 g 0,3 g 1 litro 7,5 0,2

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013 Tabla 2.3. Composicin de solucin para Anaerobiosis Compuesto Ac. Abscrbico c. Tiogliclico Agua Destilada pH Cantidad 0,2 g 200 l 10 ml 7,5 0,2

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

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Determinacin del Crecimiento Poblacional de las Bacterias Sulfato Reductoras El crecimiento de las bacterias sulfato reductoras se realiz por dilucin exhaustiva, (Consorcio de bacterias obtenidas de lodo), el procedimiento por dilucin exhaustiva consiste en tomar muestras de la primera botella de cultivo para luego pasarlas de una botella hacia otra sucesivamente desde la primera botella de cultivo, para luego ser incubada de 10 a 15 das, a temperatura de 36 37 C, luego que se realice el procedimiento se va a identificar el crecimiento de bacterias cualitativamente, esto por la coloracin negra que toma la botella. (Fig. 2.1).

Fig. 2.3 Esquema del procedimiento de dilucin exhaustiva

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Se

identific

el

crecimiento

de

bacterias

del

gnero

Desulfovibrio,

Desulfomonas, Desulfobulbus. Se hace por el Manual de Bacteriologa de Bergeys.

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Foto 2.4: Vista de crecimiento de bacterias sulfato reductoras, coloracin negra

Influencia del pH en el Crecimiento de las Bacterias Sulfato Reductoras El medio de cultivo Postgate C fue preparado y dividido en tres partes equivalentes, a cada una de las cuales se le ajust el pH a los siguientes valores: 5,0, 6,0 y 7,5. El proceso experimental fue llevado a cabo en 9 frascos de 100 ml cada uno (3 frascos para cada pH) los cuales fueron inoculados al 15 % v/v (la preparacin del inculo fue descripta en la seccin anterior). Antes de realizarse la se adicion solucin para anaerobiosis. Los frascos fueron llenados en toda su capacidad para evitar que ingrese oxigeno; se taparon con tapn de goma para mantener la anaerobiosis. Los cultivos fueron mantenidos a 30C. Se evalu el crecimiento bacteriano en los distintos cultivos a travs de la determinacin de sulfato de cada uno, utilizando la tcnica ya detallada en la seccin anterior. Estas mediciones se llevaron a cabo en diferentes das.

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Foto 2.5: Vista del experimento de la influencia del pH en el crecimiento de bacterias sulfato reductoras Cuando se dio por finalizado el cultivo (mediante el seguimiento de la reduccin de sulfato) se procedi a tomar 5 ml de muestra de cada uno de los frascos; dicho volumen fue filtrado y fue utilizado para la determinacin del pH final del cultivo, que es de 7.5 que es el pH ptimo para que se desarrollen las bacterias sulfato reductoras. Cuantificacin analtica de Sulfato

Se utiliz el mtodo turbidimtrico que se basa en la reaccin del in sulfato con el bario en medio cido, para formar sulfato de bario slido en forma de cristales de tamao uniforme. La luz absorbida por la suspensin es medida en un espectrofotmetro.

Antes de la determinacin del sulfato remanente en el medio de cultivo, los elementos suspendidos (bacterias y precipitados inorgnicos) fueron separadas de la muestra usando papel filtro, para su clarificacin y posterior anlisis

Para la determinacin de sulfato se midieron 25 ml de la muestra diluida y se agreg 1 ml de solucin reguladora (ver Cuadro 2.11), luego se adicion solucin de BaCl2, se agit vigorosamente durante 30 segundos y se midi en celda de 1 centmetro de camino ptico contra el blanco (agua destilada). La

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lectura se realiz a 450 nm en un espectrofotmetro Bekman DU 640 (Greenberg, y col., 1985) y el valor promedio de la absorbancia se us para calcular la concentracin

Cuadro: 2.8 Composicin de solucin reguladora para determinacin de sulfato. Compuesto HCl (C) Alcohol etlico NaCl Glicerina Agua destilada Cantidad 4.5 ml 15 ml 11.25 gr. 7.5 ml 45 ml

Fuente: Elaboracin propia, 2013

2.6.1.3.1. Experimento en Reactores El experimento se realiz utilizando 2 reactores anaerobios de capacidad de 1000 ml cada uno, con la finalidad de determinar la eficiencia de remocin de metales y sulfatos con sustratos de oveja y vaca, se aadi medio de cultivo Postage C sin el agregado de FeSO4, por las mismas razones antes detalladas

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Fig. 2.2 Esquema de tratamiento de drenaje acido de mina en reactores anaerobios

Fuente: Elaboracin propia, 2013

Los sustratos se usan como fuente de carbono y energa para la produccin de las bacterias sulfato reductoras, en conjunto con el medio de cultivo. (Postage C y las bacterias sulfato reductoras aisladas). Todas las entradas fueron selladas con silicona con la finalidad de evitar el ingreso de oxgeno, porque es un tratamiento anaerbico. La temperatura se mantuvo en 30 C y los gases generados (Sulfuro de Hidrogeno) fueron transportados por medio de mangueras de a otro recipiente donde se coloc el drenaje acido de mina, tambin sellado, el sulfuro de hidrogeno producido fue traspasado por la manguera hacia el contenedor del drenaje acido de mina por medio de una bomba peristltica.

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Cuadro 2.9: Condiciones para el experimento en reactores Parmetros Sustrato Peso de sustrato Medio de cultivo Temperatura operacin Tiempo de Tratamiento 30 das 30 das Reactor 1 Estircol de Vaca 10 gr. 500 ml de 30 C Reactor 2 Estircol de Oveja 10 gr. 500 ml 30 C

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Cuadro 2.10: Volumen de drenaje acido de mina para el experimento en el receptor de sulfuro de hidrogeno Volumen Agua acida de la mina Lar carbn Fuente: Elaboracin propia, ao 2013 Receptor 1 500 ml Receptor 2 500 ml

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Cuadro 2.11: Parmetros de medicin antes, durante y despus del tratamiento Concentracin Inicial Concentracin durante el experimento Arsnico (As) Cadmio (Cd) Hierro (Fe) Sulfatos ( ) Arsnico (As) Cadmio (Cd) Hierro (Fe) Sulfatos ( ) Arsnico (As) Cadmio (Cd) Hierro (Fe) Sulfatos ( ) Concentracin Final

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

Fig. 2.1 Diagrama de Flujo para el tratamiento de drenaje cido de mina en reactores anaerobios Medio de Cultivo

Sustrato

Reactor Anaerobio 1
T = 30 C

Receptor 1

Filtracin

Anlisis de metales, As, Cd, Fe y Sulfatos Fuente: Elaboracin propia, ao 2013

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a) La toma de muestra de agua tratada se realiz durante el tratamiento y al final del tratamiento (receptor 1) con la finalidad de evitar fugas. b) Se control cualitativamente mediante el cambio de coloracin de la muestra de drenaje acido de mina, que dio coloracin negra, indicador de precipitacin de metales y sulfato. Determinacin de la Concentracin de Metales y Sulfatos en el receptor de sulfuro de hidrogeno 1 y 2 Se tomaron 20 ml de muestras las cuales fueron filtradas usando papel filtro whatman 42 para remover cualquier tipo de elementos suspendidos, se preservo con cido ntrico pH <2 y refrigero a 4C hasta su anlisis respectivo por (ICP). En el Laboratorio de Servicios Analticos y Generales (SAG) y Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera.

2.6.2. Validacin y Confiabilidad del Instrumento La validacin de la investigacin fue por medio de los anlisis y tratamiento que se realizaron en el laboratorio de Biotecnologa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia, la caracterizacin de la muestra de drenaje acido de mina se realiz en el laboratorio (SAG) Servicios Analticos Generales, la determinacin de las concentraciones de metales y sulfatos se realiz en los laboratorios (SAG) Servicios Analticos Generales y Laboratorio de Espectrometra de la Universidad Nacional de Ingeniera. Analizndose las muestras antes, durante y despus del tratamiento evalundose as su eficiencia de remocin. (Ver Anexo 6) 2.7. Mtodo de Anlisis de Datos

El mtodo de anlisis de datos consisti en estadstica descriptiva se utiliz la Prueba No Paramtrica (llamadas tambin de libre distribucin, la prueba de

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hiptesis se realiz mediante la prueba de signos y Anova los resultados estadsticos fueron procesados utilizando el software SPS. Para el clculo de la remocin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos se utiliz el indicador:

Fuente: Morillo A. & Botero L. 2005.

Para la prueba de Hiptesis se realiz la prueba de signos que consisti: Prueba de Signo para Arsnico 1. Planteamiento de Hiptesis Ho: Me 0.1 H1: Me < 0.1 2. Nivel de Significancia = 0.05 3. Estadstica de Prueba

n=6

S=0

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4. Valor Critico P valor = P (x 0) P valor = 5. Conclusin Con el resultado obtenido se rechaza la Hiptesis Prueba de Signo para Hierro 1. Planteamiento de Hiptesis Ho: Me 2 H1: Me < 2 2. Nivel de Significancia = 0.05 3. Estadstica de Prueba

n=6

S=6

4. Valor Critico P valor = P (x 6) P valor = P valor = 1 > 0.05 5. Conclusin Con el resultado obtenido se acepta la Hiptesis

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Prueba de Signo para Cadmio 1. Planteamiento de Hiptesis Ho: Me 0.05 H1: Me < 0.05 2. Nivel de Significancia = 0.05 3. Estadstica de Prueba

n=6

S=4

4. Valor Critico P valor = P (x 6) P valor = P valor = 0.343 > 0.05 5. Conclusin Con el resultado obtenido se acepta la Hiptesis

Prueba de Signo para Sulfato 1. Planteamiento de Hiptesis Ho: Me 300 H1: Me < 300 2. Nivel de Significancia = 0.05

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3. Estadstica de Prueba

n=6

S=0

4. Valor Critico P valor = P (x 6) P valor = P valor = 0.0156 > 0.05 5. Conclusin Con el resultado obtenido se rechaza la Hiptesis

El anlisis de varianza Anova de un factor nos sirve para comparar varios grupos en una variable cuantitativa. Esta prueba es una generalizacin del contraste de igualdad de medias para dos muestras independientes. Se aplica para contrastar la igualdad de medias de tres o ms poblaciones independientes. 1. H0: 1 =2 ==k Las medias poblacionales son iguales 2. H1: Al menos dos medias poblacionales son distintas

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3. RESULTADOS

A continuacin se presenta los resultados que se obtuvieron en el desarrollo experimental de la tesis. Los porcentajes de remocin se obtuvieron despus de 30 das de tratamiento. Estos porcentajes fueron calculados para cada tipo de sustrato y metal. (Tabla 3.1, Tabla 3.2, Tabla 3.3, Tabla 3.4)

Tabla 3.1. Porcentaje (%) de remocion, Reactor 1, utilizando sustrato (estiercol de oveja)
Drenaje acido de mina As Reactor 1 Estircol de oveja Cd ( ) 0.189 601.19 0.038 195.2 79 68 Fe Sustrato Metal Concentracin inicial (ppm) 2.033 80.00 Concentracin final (ppm) 0.005 6.962 % de Remocin 99 91

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

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Tabla 3.2. Porcentaje (%) de remocion, Punto de Control 2, utilizando sustrato (estiercol de vaca)
Drenaje acido de mina As Reactor 2 Estircol de vaca Cd ( ) 0.189 601.19 0.017 179.1 91 70 Fe Sustrato Metal Concentracin inicial (ppm) 2.033 80.00 Concentracin final (ppm) 0.013 4.067 % de Remocin 99 94

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

Tabla 3.3. Efecto del pH en el crecimiento bacteriano pH 5 6 7.5 Tiempo 1 dias 6 dias 13 dias Concentracion de ( 601.19 411.79 189.4 )

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

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Fig. 3.1 Influencia del pH en el crecimiento de Bacterias Sulfato Reductoras

Fuente: Elaboracin propia, ao 2013 El pH es un parmetro crtico en el cultivo de microorganismos ya que estos slo pueden crecer en un rango estrecho de pH. Cada tipo de microorganismo tiene un rango de pH. Fuera de ese intervalo, los microorganismos son inhibidos parcial o totalmente. Los drenajes cidos de mina que llevan alta carga metlica poseen amplios rangos de pH, por lo que resulta importante la evaluacin de la capacidad de las clulas de Desulfovibrio, Desulfomonas, Desulfobulbus para crecer a distintos valores de pH. En particular, resulta importante analizar valores ms bajos de pH que favorecen la solubilidad de los iones metlicos.

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Fig. 3.2 Reduccin de Sulfato en funcin al Tiempo

Fuente: elaboracin propia, ao 2013 Puede observarse que a medida que el nmero de bacterias se incrementa, la concentracin de sulfato decrece. Este comportamiento es una comprobacin de que la reduccin de sulfato est directamente asociada al crecimiento bacteriano. Fig. 3.3 Porcentaje de Remocin para Arsnico

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

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Se puede observar que se ha producido la remocin de Arsnico en el Reactor 1 y 2 utilizando el sustrato de oveja y vaca con un porcentaje de remocin de 99%. En ambos casos.

Fig. 3.4 Porcentaje de Remocin para Hierro

Fuente: elaboracin propia, ao 2013


Se puede observar que se ha producido la remocin de Hierro en el Reactor 2, utilizando el sustrato de vaca, con un porcentaje de remocin de 94 %. Sin embargo la remocin fue menor en el Reactor 1 logrndose un porcentaje de remocin de 91 %.

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Fig. 3.5 Porcentaje de Remocin para Cadmio

Fuente: elaboracin propia, ao 2013


Se puede observar que se ha producido la remocin de Cadmio en el Reactor 2, utilizando el sustrato de vaca, con un porcentaje de remocin de 94 %. Sin embargo la remocin fue menor en el Reactor 1 logrndose un porcentaje de remocin de 79 %.

Fig. 3.6 Porcentaje de Remocin para Sulfatos


700 600 500 400 300

200
100 0 Reactor 1, (estiercol de oveja) 601.19 195.2 68 Reactor 2, (estiercol de vaca) 601.19 179.1 70

Concentracion Inicial

Concentracion Final
Porcentaje de Remocion

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

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Se puede observar que se ha producido la remocin de Sulfatos en el Reactor 2, utilizando el sustrato de vaca, con un porcentaje de remocin de 70 %. Sin embargo la remocin fue menor en el Reactor 1 logrndose un porcentaje de remocin de 68 %.

Tabla: 3.4 Resultados de comparacin con los dos tipos de reactores utilizados
ANOVA Suma de cuadrados ARSENICO Inter-grupos Intra-grupos Total HIERRO Inter-grupos Intra-grupos Total CADMIO Inter-grupos Intra-grupos Total SULFATO Inter-grupos Intra-grupos Total .000 .000 .000 14.589 3.608 18.197 .003 .002 .004 411.682 120.947 532.628 gl 1 4 5 1 4 5 1 4 5 1 4 5 411.682 30.237 13.615 .021 .003 .000 6.867 .059 14.589 .902 16.174 .016 Media cuadrtica .000 .000 F 25.043 Sig. .007

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

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Fig. 3.7 Comparacin entre los dos reactores para Arsnico (As)

Fuente: elaboracin propia, ao 2013 En la Fig. 3.7, se evidencia que el Reactor 1 tiene un mayor porcentaje de remocin de metal As, a comparacin del Reactor 2. Logrndose estar as dentro de los lmites mximos permisibles para As. Con un valor de significancia de 0.007.

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Fig. 3.8 Comparacin entre los dos reactores para Hierro (Fe)

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

En la Fig. 3.8, se evidencia que el Reactor 2 tiene un mayor porcentaje de remocin de metal Fe, a comparacin del Reactor 1. Pero no se logr estar dentro de los lmites mximos permisibles para Fe. Con un valor de significancia de 0.16.

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Fig. 3.9 Comparacin entre los dos reactores para Cadmio (Cd)

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

En la Fig. 3.9, se evidencia que el Reactor 2 tiene un mayor porcentaje de remocin de metal Cd, a comparacin del Reactor 1. Pero no se logr estar dentro de los lmites mximos permisibles para Cd. Con un valor de significancia de 0.59.

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Fig. 3.10 Comparacin entre los dos reactores para Sulfato (
)

Fuente: elaboracin propia, ao 2013

En la Fig. 3.10, se evidencia que el Reactor 2 tiene un mayor porcentaje de remocin de sulfato, a comparacin del Reactor 1. Logrndose estar dentro de los estndares de calidad ambiental para sulfatos. Con un valor de significancia de 0.021.

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4. DISCUSIN El principal objetivo de esta investigacin fue determinar el porcentaje de remocin de metales Fe, As, Cd, y sulfato utilizando las bacterias sulfato reductoras, estos metales y sulfatos estn presentes sobrepasando los lmites mximos permisibles y estndares de calidad ambiental en el drenaje acido de mina, de la Empresa Lar Carbn, unidad de produccin Minera Pampahuay.

La presencia de metales en el drenaje cido de mina estn asociados a la actividad minera que existe en la zona y que generalmente se genera en poca de lluvia ya que en esta temporada arrastra sedimentos y materiales ferrosos, generando el drenaje acido, donde ya previamente se estn tratando los drenajes cidos antes de ser descargados al rio, evitando as la contaminacin.

El drenaje cido de la mina Pampahuay fue caracterizado en el laboratorio SAG, corroborando as su acidez.

En cuanto a los resultados de anlisis de drenaje cido de mina se determina que hay presencia de metales, lo cual originan la contaminacin llegando a los siguientes resultados presencia de (Fe) 80 mg/L, (As) 2.033 mg/L, (Cd) 0.189, sulfatos, 601.19, pH 2.5, sobrepasando los lmites mximos permisibles y estndares de calidad ambiental.

El tratamiento con sustrato de estircol de oveja no tuvo muy buenos resultados como se observa en la (tabla 3.1, resultados) solo se logr la remocin en 99% de metal As. El tratamiento con sustrato (estircol de vaca) tuvo muy buenos resultados como se observa en la (tabla 3.2 resultados) a comparacin con el sustrato (estircol de oveja) que para arsnico si tuvo buenos resultados, alcanzndose un 99% de remocin.

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El pH es un parmetro critico en el cultivo de microorganismos, estos solo pueden crecer en un determinado rango estrecho de pH. Cada microorganismo tiene un rango de pH, como es el caso del consorcio de bacteria que se logr desarrollar, el gnero Desulfovibrio, Desulfomonas, Desulfobulbus, para su crecimiento se mantuvo el pH en 7.5. Fuera de ese intervalo los microorganismos son inhibidos parcial o totalmente. El crecimiento de las bacterias a pH 7,5 fue el ms adecuado para el tratamiento, dentro del rango estudiado no se observ crecimiento a pH menor a 6,0. En la experiencia realizada, las fuentes de carbono que se utilizaron son el estircol de oveja y estircol de vaca, resultaron ser eficientes para el crecimiento de los gneros Desulfovibrio, Desulfomonas, Desulfobulbus. Desde el punto de biorremediacin y en vista de la eficacia observada, los sustratos utilizados resultaron eficientes se obtuvieron mayores cantidades de sulfuro, si bien la reduccin de sulfato se logr conseguir, se deberan optimizar las condiciones de cultivo que permitan obtener una mayor reduccin de sulfato, para poder utilizarlo en un proceso industrial. Conociendo ya estos resultados se pretende obtener concentraciones ms adecuadas y a la vez optimizar el crecimiento bacteriano. De esta manera se podran establecer biorreactores que permitan la

precipitacin eficiente de metales, alcanizar el pH del efluente y disminuir la concentracin de sulfatos.

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5. CONCLUSIONES
1. Se logr la remocin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos, presentes en

el drenaje cido de mina, demostrndose as que el tratamiento con bacterias sulfato reductoras es un mtodo menos contaminante y factible, es una alternativa eficiente, econmica y ecolgica.
2. Para el tratamiento de drenaje cido de mina se utilizaron muestras de

agua cida de mina, de la UPM Lar Carbn, Unidad Pampahuay su tratamiento se llev a cabo en reactores por un periodo de 30 das. Logrndose as remover en un 99% de Arsnico, 94% de Hierro, 91 % de Cadmio, 70 % de sulfatos con sustrato de vaca.
3. En base a la hiptesis planteada segn los datos obtenidos despus del

tratamiento se puede afirmar que las bacterias sulfato reductoras usando estircol de vaca y oveja si contribuyen a la remocin de los metales As, Cd, Fe y sulfatos.

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6. SUGERENCIAS 1. Se recomienda que para un adecuado tratamiento del drenaje cido de mina se realice un estudio ms exhaustivo para as conseguir mejores resultados. 2. Realizar estudios de adaptacin de consorcio de bacterias sulfato reductoras a menores valores de pH. 3. Realizar estudios con otros tipos de fuentes de carbono, variando las condiciones para obtener un crecimiento ms adecuado de los distintos gneros de bacterias sulfato reductoras. 4. Se debera extender el presente estudio a otras fuentes de carbono que sean econmicas y de fcil disponibilidad y que permitan un crecimiento similar al conseguido.

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7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Alvarado, J. Obagi, J. (2008) Fundamentos de la Inferencia Estadstica. Ed. Pontifica Universidad Javeriana 1era Edicin. Colombia 2. Fernndez R, (2002). Tratamientos pasivos en humedales, de aguas cidas con carga en metales pesados. V Congreso Nacional del Agua y el Medio Ambiente. Per 3. Freeman H., (2006). Se debe a la presencia de ciertos cidos minerales y/u orgnicos, o a la hidrlisis sufrida por la existencia de sales de cidos fuertes y bases dbiles. Puede causar accin corrosiva en las instalaciones, por la accin del catin hidrgeno. La Paz 4. Gutirrez A., (2008). Enriquecimiento de bacterias sulfato reductoras, aisladas de la regin altiplnica de Bolivia, para la produccin de sulfuro biognico en la precipitacin de metales pesados. [Tesina de licenciatura]. Universidad Mayor e San Andrs, La Paz 5. Gutirrez A., Terrazas E, lvarez MT. (2007). Aislamiento y cultivo de bacterias sulfato reductoras acidfilas para la produccin de sulfuro biognico para la precipitacin de metales pesados. BIOFARBO, pg. 15: 5-12. Bolivia 6. Gagliano W. (2004). Biogeochemical Characterization of a Constructed Wetland for Acid Mine Drainage Treatment. [Doctoral Thesis]. The Ohio State University. Ohio 7. Hernndez Sampieri, Roberto; et al. (2001) Metodologa de la Investigacin 2da. Edicin McGraw-Hill. Pg. 52 134, Mxico D.F. 8. Henstra, A. M., Dijkema, C. y Stams, A. (2007). Archaeoglobus fulgidus couples CO oxidation to sulphate reduction and acetogenesis with transient formate accumulation. Environ. Microbiol. Page. 9, 18361841.

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9. Kolmert A. (2000). A fast and simple Turbidimetric method for the determination of sulphate-reducing bacterial cultures. J. Microbiol Meth, page. 41: 179-184. Suecia 10. Lpez P., E. et al. (2002). Tratamientos pasivos de drenajes cidos de mina: estado actual y perspectivas de futuro. Boletn Geolgico y Minero, pg. 113 (1): 3-21, ISSN: 0366-0176. Per 11. Morillo A. & Botero L. 2005. Evaluacin de la remocin de colifagos y bacterias indicadoras de contaminacin en la Planta de Tratamiento Sur de aguas servidas de la ciudad de Maracaibo. CIENCIA. 13(2): 147-161. Maracaibo, Venezuela 12. Oriol G., De Pablo J., Cortina J. & Ayora C., (2003). Caracterizacin qumica de sustratos orgnicos naturales para mitigacin biolgica de drenaje cido de mina. Bolivia 13. Real Academia Espaola. (2010).Diccionario de la lengua espaola (23. ed.). Consultado en http://lema.rae.es/drae/ 14. Skousen, J. (2000). Overview of passive systems for treating acid mine drainage. In Reclamation of Drastically Disturbed Lands (eds. Barnhisel R.I., Darmody R.G., and Daniels W.L.), American Society of Agronomy. 15. Villachica, C.; LLamosas J. y Villachica J.; (2005). Proceso NCD Tecnologa Nacional comprobada para el tratamiento de efluentes cidos mineros, tomado del IV Congreso Internacional de Medio Ambiente en Minera y Metalurgia, pg. 13-16 Per 16. http://biblioteca.unmsm.edu.pe/redlieds/Recursos/archivos/MineriaDesarr olloSostenible/MedioAmbiente/DAMhumedales.pdf 17. http://www.sumanasinc.com/webcontent/animations/content/winogradsky .html

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8. ANEXOS

Anexo 1, Ubicacin de la Mina Lar Carbn S.A. Provincia de Oyn, Departamento de Lima

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Anexo 2, Resultados de Anlisis Fsico Qumico de los drenajes cidos de mina ao 2013 Informe de Ensayo N 071202 - 2013 antes del tratamiento elaborado por laboratorio SAG PARAMETROS Unidad Lmites de deteccin T C pH Hierro (Fe) Arsnico (As) Cadmio (Cd) mg/L mg/L mg/L 2.5 0.001 0.001 0.0004 2.5 80 2.033 0.189 Resultados

Fuente: elaboracin propia, 2013

PARAMETROS Sulfato
(

Unidad
) mg/L

Resultados 601.19

Fuente: elaboracin propia, 2013

Se realiz el anlisis del drenaje acido de mina tomando muestra del punto de monitoreo 1 (PM 1), encontrndose que el Hierro, Arsnico, Cadmio sobrepasan los lmites mximos permisibles exigidos por el Decreto Supremo N 010 2010 MINAM, en cuanto a sulfato supera los estndares de calidad ambiental, el pH se encontr en 2.5 que indica que es acido, por esta razn se someti a tratamiento la muestra de drenaje acido de mina.

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Anexo 3, Lmites Mximos Permisibles segn el Decreto Supremo N 010 2010 - MINAM Parmetro Unidad Limite en cualquier momento pH Arsnico total Cadmio total Hierro disuelto mg/L mg/L mg/L mg/L 6-9 0.1 0.05 2

Fuente: Decreto Supremo N 010 2010 MINAM

Anexo 4, Rotulado para las muestras MUESTRA DE AGUA PARA ANALISIS N de Muestra 01 Fecha: 30/04/2013 Hora: 11:55 am

Punto de muestreo: PM 1 Socavn 1 Nombre del Proyecto/ Mina Localidad: Oyn Temperatura: 14.5 C pH: 2.5 Observaciones: Fuente: elaboracin propia, 2013 Mina Lar carbn

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Anexo 5, Fotografas

Foto. 1 Vista de acceso a la mina Lar carbn, Provincia de Oyon

Foto. 2 Vista de las oficinas de la mina Lar carbn, Provincia de Ayn

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Foto. 3 Vista panormica de la mina Lar carbn, Provincia de Ayn

Foto. 4 Vista panormica de la mina Lar carbn, Provincia de Ayn

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Foto. 5 Vista de punto de muestreo N 2, rio Pampahuay, Provincia de Oyon

Foto. 6 Vista de punto de muestreo N 3, rio Pampahuay, Provincia de Oyon

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Foto. 7 Vista muestreo PM 1, en la salida de la Bocamina, mina Lar carbn, Provincia de Oyon

Foto. 8 Vista toma de muestra, en la salida de la Bocamina, mina Lar carbn, Provincia de Oyon

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Foto. 9 Vista de preparacin de Dilucin Exhaustiva, en la Universidad Nacional del Callao

Foto. 10 Vista de montaje experimental, en la Universidad Nacional del Callao

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Foto. 11 Vista de preparacin de pH para el experimento, en la Universidad Nacional del Callao

Foto. 12 Vista de preparacin de Dilucin Exhaustiva para el experimento, en la Universidad Nacional del Callao

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