1

INTRODUCCIN

El Laboratorio Clnico es una herramienta primordial para el rea mdica, ya
que por medio de este se diagnostican diferentes patologas y adems se
realizan estudios para establecer el tipo de tratamiento que se debe
administrar al paciente, al igual que el seguimiento del mismo.
El mdico solicita exmenes de laboratorio, para establecer, confirmar y
descartar un diagnstico. Para control de un tratamiento.
El personal de los laboratorios de microbiologa trabaja por definicin con
microorganismos infecciosos o con materiales que los contienen. Algunos de
estos, son patgenos o con potencial de convertirse en ello. Es importante
que el personal que labora en las instalaciones conozca y aplique todos los
conocimientos de BIOSEGURIDAD. El objetivo principal de estas normas es
la PROTECCION DEL PERSONAL QUE LABORA EN LAS
INSTALACIONES, reduciendo el riesgo en cada una de las etapas del
proceso; as como, evitar la contaminacin de las prcticas desarrolladas.
El concepto de bioseguridad se estableci con el propsito de reducir el
riesgo de transmisin de microorganismos de fuentes reconocidas, o no de
infeccin, en servicios de salud vinculados a accidentes por exposicin a
sangre y fluidos corporales. Sin embargo otros autores ampliaron el
concepto, y lo definieron como un sistema de conocimientos, actitudes y
prcticas que promueven la prevencin de accidentes laborales en el campo
de laboratorio y prctica mdica, o bien como una doctrina del
comportamiento que compromete a todas las personas del ambiente
asistencial con el fin de disear estrategias que disminuyan los riesgos.
La bioseguridad en el laboratorio se refiere al conjunto de medidas
preventivas destinadas a proteger la salud de las personas que laboran all.
El propsito bsico es obtener un ambiente de trabajo seguro y ordenado.
La destruccin completa de todos los microorganismos presentes sobre
cualquier material o dentro de l es indispensable en todos los
procedimientos analticos como la preparacin de medios de cultivo y otros
materiales.

2

Captulo I Generalidades

1. Definicin
Conjunto de medidas y normas preventivas, destinadas a mantener
el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes
biolgicos, fsicos o qumicos, logrando la prevencin de impactos
nocivos frente a riesgos propios de su actividad diaria, asegurando
que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no
atenten contra la seguridad de los trabajadores de la salud, animales,
visitantes y el medio ambiente.

1.1 Otras definiciones sobre Bioseguridad
Es una calidad y garanta en el que la vida est libre de
dao, riesgo o peligro.
La Bioseguridad es un trmino que ha sido utilizado para
definir y congregar las normas de comportamiento y manejo
preventivo, del personal de salud, frente a microorganismos
potencialmente infecciosos, con el propsito de disminuir la
probabilidad de adquirir infecciones en el medio laboral,
haciendo nfasis en la prevencin, mediante la asepsia y el
aislamiento.
Bioseguridad es un conjunto de medidas y disposiciones,
que pueden conformar una ley y cuyo principal objetivo es la
proteccin de la vida, en dos de los reinos, animal y vegetal y
a los que se le suma el medio ambiente
El concepto de bioseguridad puede ser definido desde la
perspectiva de la Biotica como un conjunto de actitudes de
tipo preventivo que tiene como base el conocimiento
cientfico, motivacin y conjunto de valores asumido desde la
responsabilidad. Una base de sustentacin constituye la
siguiente frase La Bioseguridad como una obligacin y un
derecho
Bioseguridad debe entenderse como una doctrina de
comportamiento encaminada a lograr actitudes y conductas
3

que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud de
adquirir infecciones en el medio laboral. Compromete
tambin a todas aquellas otras personas que se encuentran
en el ambiente asistencial, ambiente ste que debe estar
diseado en el marco de una estrategia de disminucin de
riesgos.

1.2 Objetivo de la bioseguridad
Contribuir a la construccin y apropiacin de una cultura de
comportamiento dentro del ambiente de Laboratorio (u otra rea de
riesgo) por parte del personal de salud, mediante la aplicacin de
normas de comportamiento tendientes a evitar los riesgos de
infeccin, con el fin de proteger al paciente, al personal de salud, y a
la comunidad en general preservando la calidad del medio ambiente.
Contribuir a adoptar conductas a seguir frente a un accidente por
exposicin a sangre y otros lquidos biolgicos.
1.3 Principios de Bioseguridad
Universalidad: Las medidas deben involucrar a todos los pacientes
y dadores de sangre, independientemente de conocer o no su
serologa. Todo el personal debe seguir las precauciones estndares
rutinariamente para prevenir la exposicin de la piel y de las
membranas mucosas, en todas las situaciones que puedan dar
origen a accidentes, estando previsto el contacto con sangre o
cualquier otro fluido corporal del paciente. Todo el personal debe
seguir las normas de precaucin rutinariamente para prevenir la
exposicin que pueda dar origen a enfermedades y/o accidentes.
Uso de barreras: Entiende el concepto de evitar la exposicin
directa a sangre y otros fluidos orgnicos potencialmente
contaminantes, mediante la utilizacin de materiales adecuados que
se interpongan al contacto de los mismos. La utilizacin de barreras
(Ej. Guantes) no evitan los accidentes de exposicin a estos fluidos,
pero disminuyen las consecuencias de dicho accidente.
4

Medios de eliminacin de material contaminado: Comprende el
conjunto de dispositivos y procedimientos adecuados a travs de los
cuales los materiales utilizados en la atencin de pacientes, son
depositados y eliminados sin riesgo.

1.4 Elementos bsicos de la bioseguridad

Los elementos bsicos de los que se sirve la seguridad biolgica
para la contencin del riesgo provocado por los agentes infecciosos
son tres:

Prcticas de trabajo: Unas prcticas normalizadas de
trabajo son el elemento ms bsico y a la vez el ms
importante para la proteccin de cualquier tipo de trabajador.
Las personas que por motivos de su actividad laboral estn
en contacto, ms o menos directo, con materiales infectados
o agentes infecciosos, deben ser conscientes de los riesgos
potenciales que su trabajo encierra y adems han de recibir
la formacin adecuada en las tcnicas requeridas para que el
manejo de esos materiales biolgicos les resulte seguro. Por
otro lado, estos procedimientos estandarizados de trabajo
deben figurar por escrito y ser actualizados peridicamente.

Equipo de seguridad (o barreras primarias): Se incluyen
entre las barreras primarias tanto los dispositivos o aparatos
que garantizan la seguridad de un proceso (como por
ejemplo, las cabinas de seguridad) como los
denominados equipos de proteccin personal (guantes,
calzado, pantallas faciales, mascarillas, etc).

Diseo y construccin de la instalacin (o barreras
secundarias): La magnitud de las barreras secundarias
depender del agente infeccioso en cuestin y de las
manipulaciones que con l se realicen. Vendr determinada
por la evaluacin de riesgos. En muchos de los grupos de
trabajadores en los que el contacto con este tipo de agentes
5

patgenos sea secundario a su actividad profesional, cobran
principalmente relevancia las normas de trabajo y los
equipos de proteccin personal, mientras que cuando la
manipulacin es deliberada entrarn en juego, tambin, con
mucha ms importancia, las barreras secundarias.

1.5 Niveles de Bioseguridad, Clasificacin del
riesgo y de los laboratorios de trabajo
Biolgico.
A raz de lo observado en los reportes iniciales, el Centers for
Disease Control and Prevention (CDC) de Estados Unidos, public
en 1974 el texto titulado Classification of etiologic agents on the
basis of hazard, en el cual se propona la clasificacin de los
agentes patgenos en cuatro grupos de riesgo. Posteriormente, tanto
los National Institutes of Health (NIH) de los Estados Unidos como la
Organizacin Mundial de la Salud (OMS) actualizaron el sistema,
sentando as las bases para la clasificacin de los laboratorios en
funcin del grupo de riesgo al que pertenecen los patgenos que
manejan. Los factores utilizados para agrupar a los microorganismos
son (I) patogenicidad, (II) dosis infectiva, (III) modo de transmisin,
(IV) rango de hospedero, (V) disponibilidad de medidas de
prevencin efectivas y, (VI) disponibilidad de tratamiento efectivo.
Actualmente, la clasificacin es la siguiente:
Grupo de riesgo 1 (GR1): Agentes no asociados con
enfermedades en humanos adultos saludables ni en
animales (nulo o bajo riesgo al individuo o la comunidad).
Ejemplo: Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, ciertas cepas
de Escherichia coli.
Grupo de riesgo 2 (GR2): Agentes asociados con
enfermedades humanas raramente serias para las cuales
siempre hay medidas preventivas y/o teraputicas
disponibles. El riesgo de diseminacin de la infeccin es
limitado (riesgo individual moderado, bajo riesgo a la
comunidad). Ejemplo: Campylobacter jejuni, Helicobacter
6

pylori, Neisseria gonorrhoeae, Blastomyces dermatitidis,
Coccidia, Toxoplasma gondii, Adenovirus, Papovavirus.
Grupo de riesgo 3 (GR3): Agentes asociados con
enfermedades humanas serias o letales para las cuales
podran estar disponibles medidas preventivas y/o
teraputicas. El contagio entre individuos infectados es poco
comn (alto riesgo individual, bajo riesgo a la comunidad).
Ejemplo: Coxiella burnetii, Mycobacterium tuberculosis, VIH,
virus de la fiebre amarilla, virus del oeste del Nilo, bacterias
multirresistentes como Staphylococcus aureus resistente a
meticilina (MRSA) y Streptococcus pyogenes resistente a
eritromicina (SPRE).
Grupo de riesgo 4 (GR4): Agentes causantes de
enfermedades humanas serias o letales para las cuales no
hay medidas preventivas y/o teraputicas disponibles. El
contagio entre individuos infectados se da fcilmente (alto
riesgo individual, alto riesgo a la comunidad). Ejemplo: virus
del bola, Marburg, Lassa.
Esta clasificacin en grupos de riesgo ha sido la ms utilizada desde
entonces para hacer referencia a la peligrosidad de los distintos
patgenos capaces de infectar al ser humano. Sin embargo, no fue
hasta la publicacin del textoBiosafety in microbiological and
biomedical laboratories (BMBL) en 1984 por parte del CDC que fue
posible definir con claridad los parmetros adecuados para la
manipulacin de estos patgenos en el laboratorio segn su grupo
de riesgo, dado que el sistema de grupo de riesgo no toma en cuenta
dichos procedimientos. El listado de microorganismos que
corresponden a cada grupo de riesgo se mantiene en constante
actualizacin. Al contrario de lo que comnmente se piensa, el
manejo de patgenos pertenecientes al GR3 es comn en los
laboratorios del sector salud. Entre 1979 y 1999, las diez infecciones
laborales ms comunes que ocurrieron en los Estados Unidos fueron
en su mayora por microorganismos de este tipo.
7

En relacin con el grado de riesgo los laboratorios que manipulan los
elementos que generan este tipo de situacin, se clasifican
actualmente en 3 categoras:
Laboratorio Bsico.- Es un recinto de diseo estndar, en
el cual la mayora del trabajo se realiza en el mesn y se
puede trabajar sobre ste con agentes de riesgo del grupo I
y II. Para agentes del grupo II, se recomienda el uso de
gabinete de Bioseguridad clase I.
Laboratorio de contencin.- Es un recinto cuyo diseo
contempla un acceso restringido y barreras de
contencin que protegen al operador. Se puede trabajar con
agentes de riesgo del grupo III. El laboratorio debe estar
habilitado con un gabinete de Bioseguridad apropiado para el
patgeno que se manipula.
Laboratorio de contencin mxima.- Es un recinto
separado o convenientemente aislado, con sistemas de
apoyo exclusivo y cuyo diseo incluye barreras de
contencin que dan proteccin mxima al personal y/o
comunidad y se puede trabajar con agentes de riesgo del
grupo IV.
La prevencin del escape y dispersin de agentes de riesgo,
se logra mediante las barreras de contencin.

1.6 Cmo ocurre el riesgo de adquirir una
infeccin en el laboratorio?
Las vas ms comunes de exposicin son:
a) Ingestin:
Pipeteo con boca.
Salpicaduras en boca.
Colocacin en boca de artculos o dedos contaminados.
Consumo de comida en lugar de trabajo.
b) Inoculacin:
Accidentes con agujas.
8

Cortaduras con objetos punzo cortantes.
Mordedura de animales.
c) Contaminacin de piel o mucosas:
Contacto con superficies, equipo o artculos contaminados.
Salpicaduras en piel intacta o no intacta (con algn tipo de
lesin).
Salpicaduras en ojos, boca o nariz.
d) Inhalacin:
Por diversos procedimientos que producen aerosoles.
e) Equipos sin mantenimiento.
Los peligros presentes en el laboratorio estn relacionadas
con:
Agentes biolgicos: depende de las caractersticas
particulares del microorganismo: virulencia, modo de
transmisin y va de entrada, concentracin en el inculo,
dosis infecciosa, estabilidad en el ambiente y de la existencia
de profilaxis o tratamiento eficaz.
Agentes fsicos y mecnicos: traumas,
quemaduras, accidentes cortopunzantes, malas condiciones
ergonmicas, cadas, incendios, inundaciones, instalaciones
elctricas incorrectas.
Agentes qumicos: exposicin a productos
corrosivos, txicos, irritantes, cancergenos, agentes
inflamables o explosivos.
Una vez detectado el riesgo, es necesario valorarlo lo que permite
planear con mayor facilidad las medidas de mitigacin que sern
empleadas para controlarlo. Para hacer esta calificacin, es
necesario considerar las probabilidades de ocurrencia y las
consecuencias del riesgo.
Las probabilidades de ocurrir pueden ser clasificadas en cuatro
grupos: Muy alta (A), Alta (B), Media (C), Baja (D):
A: Se espera que el evento ocurra la mayora de las veces.
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B: El evento podra ocurrir alguna vez.
C: El evento podra ocurrir, pero muy rara vez.
D: El evento puede ocurrir, pero es probable que nunca ocurra.
A modo de ejemplo, en el cuadro 1 se seala una forma de clasificar
las consecuencias que se dividen en cuatro grupos segn diversas
caractersticas analizadas (2, 3).

Cuadro 1. Modelo adaptado de la clasificacin de las consecuencias

De todas ellas, la generacin de aerosoles, junto con los accidentes
con agujas, es una de las principales causas de infecciones
adquiridas en el laboratorio. Los procedimientos ms comunes que
producen aerosoles son: centrifugar, moler, mezclar, agitar
vigorosamente, sonicar, abrir contenedores de material infeccioso
cuya presin interna pueda ser distinta a la ambiental, inocular
animales por va intranasal, colectar tejidos infectados de animales o
huevos.
La mejor forma de prevenir un accidente por exposicin a aerosoles
es mediante la aplicacin de una tcnica laboral adecuada. Para el
pipeteo de muestras con Bacillus subtilis, por ejemplo, se ha
estimado que la dosis de exposicin por aerosol utilizando una buena
tcnica es de 25 microorganismos y con una tcnica deficiente es de
1,200 microorganismos.
10

Capitulo II Equipos de Bioseguridad

2.1 Cmaras de seguridad biolgica
Las CSB estn diseadas para proteger al trabajador, la atmsfera
del laboratorio y los materiales de trabajo de la exposicin a las
salpicaduras y los aerosoles infecciosos que pueden generarse al
manipular material que contiene agentes infecciosos, como cultivos
primarios, soluciones madre y muestras de diagnstico. Los
aerosoles se producen en cualquier actividad que transmita energa
a un material lquido o semilquido, por ejemplo, al agitarlo, verterlo a
otro recipiente, removerlo o verterlo sobre una superficie o sobre otro
lquido. Las actividades como la siembra de placas de agar, la
inoculacin de frascos de cultivo celular con pipeta, el uso de pipetas
mltiples para dispensar suspensiones lquidas de agentes
infecciosos en placas de microcultivo, la homogeneizacin y la
agitacin vorticial de material infeccioso, y la centrifugacin de
lquidos infecciosos o el trabajo con animales pueden generar
aerosoles infecciosos. Las partculas de aerosol de menos de 5mm
de dimetro y las pequeas gotculas de 5 a 100mm de dimetro no
son visibles a simple vista. El trabajador no suele darse cuenta de
que se estn produciendo esas partculas, que pueden ser inhaladas
o provocar la contaminacin cruzada de los materiales que se
encuentran sobre las superficies de trabajo. Las CSB, cuando se
utilizan debidamente, han demostrado ser sumamente eficaces para
reducir las infecciones adquiridas en el laboratorio y la contaminacin
cruzada de cultivos por exposicin a aerosoles. Las CSB tambin
protegen la atmsfera del laboratorio.
A lo largo de los aos, el diseo bsico de las CSB ha sufrido varias
modificaciones. Un cambio importante fue la adicin de un filtro
HEPA. Los filtros HEPA retienen el 99,97% de las partculas de
0,3mm de dimetro y el 99,99% de las partculas de tamao mayor o
menor; esto les permite retener eficazmente todos los agentes
11

infecciosos conocidos y garantizar que de la cmara slo sale aire
exento de microorganismos.
Una segunda modificacin del diseo consisti en dirigir hacia la
superficie de trabajo aire que haya pasado por filtros HEPA, con el fin
de proteger de la contaminacin los materiales de esa superficie.
Esta caracterstica a menudo se conoce como proteccin del
producto. Estos conceptos de diseo bsicos han llevado a la
evolucin de tres clases de CSB. En el cuadro 2 se explica el tipo de
proteccin que ofrece cada una de ellas.

Cuadro. 2 Seleccin de una cmara de bioseguridad (CSB) segn el tipo de
proteccin necesaria.

2.1.1 Cmaras de seguridad biolgica de clase I

En la figura 1 aparece un esquema de una CSB de clase I. El aire de
la sala entra por la abertura delantera a una velocidad mnima de
0,38 m/s, pasa por encima de la superficie de trabajo y sale de la
cmara por el conducto de extraccin. La corriente de aire arrastra
las partculas de aerosol que puedan generarse en la superficie de
trabajo, alejndolas del trabajador y dirigindolas hacia el conducto
de extraccin. La abertura frontal permite que los brazos del
trabajador lleguen a la superficie de trabajo del interior de la cmara
12

mientras observa la superficie a travs de una ventana de cristal.
Esta ventana tambin puede levantarse por completo para tener
acceso a la superficie de trabajo para limpiarla o con otros fines.
El aire procedente de la cmara se evacua a travs de un filtro
HEPA: a) al laboratorio y a continuacin al exterior del edificio a
travs del sistema de evacuacin de aire del edificio; b) al exterior a
travs del sistema de evacuacin de aire del edificio, o c)
directamente al exterior. El filtro HEPA puede estar situado en la
cmara de distribucin del extractor de la CSB o en la salida de aire
del edificio. Algunas CSB de clase I llevan integrado un ventilador de
extraccin, mientras que otras funcionan con el ventilador de
evacuacin de aire del sistema general del edificio.
La CSB de clase I fue la primera CSB reconocida, y debido a la
sencillez de su diseo sigue teniendo un uso muy extendido en todo
el mundo. Su ventaja es que proporciona proteccin tanto personal
como ambiental y tambin puede utilizarse para trabajar con
radionclidos y sustancias qumicas txicas voltiles. Como se hace
pasar aire de la sala, sin esterilizar, sobre la superficie de trabajo, se
considera que no ofrece una proteccin fiable del producto.

Figura 1. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase I.
13

A: abertura frontal; B: ventana de cristal; C: filtro HEPA de
salida; D: cmara de distribucin del extractor.

2.1.2 Cmaras de seguridad biolgica de clase II

A medida que fue aumentando el uso de cultivos celulares y tisulares
para la propagacin de virus y otros fines, dej de considerarse
satisfactorio que el aire no esterilizado de la sala pasara por encima
de la superficie de trabajo. Adems de proporcionar proteccin
personal, las CSB de clase II protegen del aire contaminado del local
a los materiales de la superficie de trabajo. Las CSB de clase II, de
las que hay cuatro tipos (A1, A2, B1 y B2), difieren de las CSB de
clase I en que slo permiten que entre en contacto con la superficie
de trabajo aire que ha pasado por un filtro HEPA (aire estril). Las
CSB de clase II pueden utilizarse para trabajar con agentes
infecciosos de los grupos de riesgo 2 y 3, y tambin con agentes
infecciosos del grupo de riesgo 4, siempre que se utilicen trajes
presurizados.
2.1.3 Cmaras de seguridad biolgica de clase II tipo A1
Estas cmaras se representan en la figura 2. Un ventilador interno
succiona aire de la sala (aire de entrada) hacia la cmara a travs de
la abertura frontal y lo dirige hacia la rejilla frontal de entrada. La
velocidad de esta corriente de aire debe ser de al menos 0,38 m/s a
la altura de la abertura frontal. Ese aire pasa a continuacin por un
filtro HEPA antes de dirigirse, descendiendo verticalmente, hacia la
superficie de trabajo.
14


Figura 2. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase II tipo
A1.
A: abertura frontal; B: ventana; C: filtro HEPA de salida; D: cmara de
distribucin trasera; E: filtro HEPA de suministro; F: ventilador.

A medida que el aire desciende, se divide a unos 618 cm de la
superficie de trabajo, de modo que la mitad pasa a travs de la rejilla
de extraccin delantera y la otra mitad por la rejilla de extraccin
trasera. Toda partcula de aerosol que se genere en la superficie de
trabajo es inmediatamente capturada por esta corriente de aire
descendente y pasa a travs de la rejilla de evacuacin delantera o
trasera, con lo que se consigue el mximo nivel de proteccin del
producto. A continuacin el aire se evacua a travs de la cmara de
distribucin posterior hacia el espacio comprendido entre los filtros
de suministro y de evacuacin situados en la parte superior de la
cmara. Debido al tamao relativo de estos filtros, alrededor del 70%
del aire vuelve a circular a travs del filtro HEPA de suministro y
regresa a la zona de trabajo; el 30% restante pasa a travs del filtro
de evacuacin hacia la sala o el exterior.
El aire de salida de este tipo de cmara puede reciclarse en la sala o
evacuarse al exterior del edificio a travs de un acoplador de tipo
dedal conectado a un conducto destinado exclusivamente a este fin o
a travs del sistema de evacuacin de aire del edificio.
15

El reciclaje del aire de salida hacia la sala tiene la ventaja de reducir
los gastos de combustible del edificio, ya que no se evacua aire
caliente o fro a la atmsfera exterior. La conexin a los conductos
del sistema de evacuacin de aire tambin permite utilizar algunas
CSB para trabajar con radionclidos voltiles y sustancias qumicas
txicas voltiles. (Cuadro 2).

Figura 3. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de
clase IIB1.
A: abertura frontal; B: ventana; C: filtro HEPA de salida; D: filtro HEPA de
entrada; E: cmara de distribucin de salida con presin negativa; F:
ventilador; G: filtro HEPA para el aire de entrada. La salida de aire de la
cmara debe estar conectada al sistema de evacuacin de aire del edificio
2.1.4 Cmaras de clase II de tipo A2 con salida al exterior, y de
tipo B1 y B2
Las CSB de clase IIA2 con salida al exterior, IIB1 (Figura 3) y IIB2
son variaciones del tipo IIA1. Sus caractersticas, junto con las de las
CSB de las clases I y III, se indican en el cuadro 3. Cada una de
esas variaciones permite utilizar la CSB para fines especficos. Estas
CSB se distinguen entre s en varios aspectos: la velocidad de
entrada del aire por la abertura frontal; la cantidad de aire que se
vuelve a hacer pasar por la superficie de trabajo y que sale de la
cmara; el sistema de extraccin de aire, que determina si el aire se
16

evacua hacia la sala o al exterior por su propio sistema de
evacuacin o por el sistema de evacuacin de aire del edificio; y las
presiones en el interior de la cmara (en unas los conductos y las
cmaras de distribucin cargados de aire biolgicamente
contaminado estn bajo presin negativa, o estn rodeados por
conductos y cmaras de distribucin bajo presin negativa).

Cuadro 3. Diferencias entre las cmaras de seguridad biolgica
de las clases I, II y III
NA: No aplicable.
Todos los conductos biolgicamente contaminados se encuentran bajo
presin negativa o estn rodeados por conductos y cmaras de distribucin
con presin negativa.
2.1.5 Cmaras de seguridad biolgica de clase III
Este tipo de cmaras (figura 4) es el que proporciona mayor nivel de
proteccin personal y se utiliza para trabajar con agentes del grupo
de Riesgo 4. Todos los orificios estn sellados para impedir el paso
de gases. El aire de entrada es filtrado por HEPA y el aire de salida
pasa por dos filtros HEPA. La corriente de aire se mantiene mediante
un sistema de extraccin propio en el exterior de la cmara, que
mantiene el interior de sta a una presin negativa (alrededor de
124,5 Pa). El acceso a la superficie de trabajo se hace mediante
guantes de goma gruesa, conectados a unos orificios en la cmara.
17

La cmara debe tener una caja de paso que pueda esterilizarse y
vaya equipada con una salida de aire provista de un filtro HEPA.
Puede ir conectada a una autoclave de doble puerta en la que se
descontaminar todo el material que entre o salga de la cmara.
Pueden unirse varias cmaras de guantes para ampliar la superficie
de trabajo. Las CSB de clase III son idneas para los laboratorios de
los niveles de bioseguridad 3 y 4.

Figura 4. Esquema de una cmara de seguridad biolgica de clase III
(cmara de guantes).
A: orificios para guantes del largo de un brazo; B: ventana; C: dobles filtros
HEPA de salida; D: filtro HEPA de entrada; E: autoclave de doble puerta o
caja de paso; F: tanque de inmersin qumica. La salida del aire de la
cmara debe estar conectada a un sistema independiente de extraccin de
aire del edificio

2.1.6 Conexiones de aire de las cmaras de seguridad
biolgica
Las CSB de las clases IIA1 y IIA2 con salida al exterior estn
pensadas para tener conexiones mediante acopladores de tipo
dedal o de tipo campana en dosel. El dedal se ajusta a la
salida de aire de la cmara dejando un espacio libre de unos 2,5 cm
de dimetro. Este pequeo espacio permite succionar aire de la sala
tambin hacia el sistema de evacuacin de aire del edificio. La
capacidad del sistema de evacuacin del edificio debe ser suficiente
para captar aire procedente tanto de la sala como de la cmara. El
dedal debe ser extrable o estar diseado para permitir las pruebas
18

de funcionamiento de la cmara. En general, el rendimiento de una
cmara conectada mediante un dedal no se ve muy afectado por
las fluctuaciones en la corriente de aire del edificio.
Las de las clases IIB1 y IIB2 estn conectadas por conductos rgidos,
es decir slidamente conectadas sin abertura de ninguna clase, al
sistema de evacuacin del edificio o, preferiblemente, a un sistema
de conductos de extraccin propios. El sistema de evacuacin del
edificio debe adaptarse con precisin a los requisitos de flujo de aire
especificados por el fabricante tanto en relacin con el volumen
como con la presin esttica.
2.1.7 Uso de las cmaras de seguridad biolgica en el
laboratorio
Localizacin.- La velocidad del aire que ingresa en la CSB por la
abertura frontal es de unos 0,45 m/s. A esta velocidad, la integridad
del flujo direccional del aire de entrada es frgil y puede verse
fcilmente perturbada por las corrientes de aire que generan el
movimiento de personas en las proximidades de la cmara, las
ventanas abiertas, los registros del suministro de aire y la apertura y
cierre de puertas. Lo ms conveniente es situar la CSB en un lugar
alejado de la circulacin del personal y de corrientes de aire que
puedan provocar perturbaciones. Siempre que sea posibledebe
dejarse un espacio de 30 cm por detrs y a ambos lados de la
cmara con el fin de poder acceder fcilmente a todas las partes de
la cmara para las labores de mantenimiento. Por encima de la CSB
conviene dejar un espacio de 30 a 35 cm que permita medir
debidamente la velocidad del aire a travs del filtro de salida y
cambiar este filtro.
Trabajadores
Si las CSB no se usan correctamente, sus efectos protectores
pueden verse gravemente disminuidos. Los trabajadores deben tener
cuidado de mantener la integridad del flujo de entrada de aire por la
abertura frontal al meter y sacar losbrazos de la cmara. Los brazos
19

deben moverse con lentitud, perpendicularmente a la abertura
frontal. Es conveniente esperar aproximadamente un minuto despus
de meter las manos y los brazos en la cmara antes de comenzar a
manipular el material, con el fin de permitir que la cmara se ajuste y
el aire barra las manos y los brazos. El nmero de movimientos a
travs de la abertura frontal tambin debe reducirse al mnimo
colocando todo el material necesario en el interior antes de comenzar
las manipulaciones.
Colocacin del material
La rejilla frontal de entrada de las CSB de clase II no debe estar
bloqueada con papeles, instrumental ni otros objetos. La superficie
de los materiales que haya que colocar en el interior de la cmara
debe descontaminarse con alcohol al 70%. El trabajo puede
realizarse sobre paos absorbentes empapados de desinfectante
con el fin de que stos recojan las salpicaduras y los derrames.
Todos los materiales deben colocarse lo ms dentro posible de la
cmara, hacia el borde posterior de la superficie de trabajo, pero sin
bloquear la rejilla posterior. El equipo que pueda generar aerosoles
(por ejemplo mezcladoras, centrifugadoras) debe colocarse hacia la
parte posterior de la cmara.
Los artculos voluminosos, como las bolsas especficas para material
biolgico peligroso, las bandejas de pipetas desechadas y los frascos
de succin deben colocarse a un lado del interior de la cmara. El
trabajo debe proceder desde las zonas limpias hacia las
contaminadas a lo largo de la superficie de trabajo.
Las bolsas de recogida de material biolgico peligroso para la
autoclave y la bandeja de recogida de pipetas no deben colocarse
fuera de la cmara. Los frecuentes movimientos de entrada y salida
necesarios para utilizar estos recipientes perturban la barrera de aire
de la cmara y puede poner en peligro la proteccin tanto del
personal como del producto.
Operacin y mantenimiento
20

La mayora de las CSB estn diseadas para funcionar 24 horas al
da; los investigadores han llegado a la conclusin de que el
funcionamiento continuo ayuda a controlar los niveles de polvo y de
partculas en el laboratorio. Las de clase IIA1 y IIA2 que evacuan el
aire a la sala o que estn conectadas por acopladores de tipo
dedal a conductos de extraccin propios pueden apagarse cuando
no estn en uso.
Otros tipos, como las de la clase IIB1 y IIB2, que tienen instalaciones
a base de conductos rgidos, deben mantener una corriente de aire
en su interior en todo momento para contribuir a mantener el
equilibrio del aire de la sala. Las cmaras deben encenderse al
menos 5 minutos antes de comenzar el trabajo y despusde
terminarlo para permitir que se purguen, es decir, dejar tiempo
para que el aire contaminado sea eliminado del entorno de la
cmara.
Luz ultravioleta
Las CSB no necesitan lmparas de luz ultravioleta. Si se utilizan, las
lmparas deben limpiarse una vez a la semana para quitar el polvo y
la suciedad que puedan bloquear la eficacia germicida de la luz. La
intensidad de la luz ultravioleta debe comprobarse cada vez que se
vuelve a certificar la cmara para asegurarse de que la emisin de
luz es apropiada. Las luces ultravioletas deben apagarse cuando la
sala est ocupada, para proteger los ojos y la piel de exposiciones
involuntarias.
Llamas desnudas
Deben evitarse las llamas desnudas en el entorno prcticamente
libre de microorganismos creado dentro de la cmara. Esas llamas
alteran las corrientes de aire y pueden ser peligrosas cuando se
utilizan al mismo tiempo sustancias voltiles e inflamables.
Para esterilizar las asas microbiolgicas, es preferible utilizar
microincineradores u hornos elctricos.
21

Derrames
Se colocar en lugar visible una copia del protocolo del laboratorio
para tratar los derrames, que debern leer y comprender todos los
usuarios. Cuando se produzca un derrame de material de riesgo
biolgico dentro de una CSB, debe procederse de inmediato a su
limpieza, mientras la cmara sigue en funcionamiento. Debe
utilizarse un desinfectante eficaz y aplicarse de modo que se reduzca
al mnimo la formacin de aerosoles. Todos los materiales que entren
en contacto con el agente derramado deben desinfectarse o tratarse
en autoclave.
Limpieza y desinfeccin
Todos los artculos que entren en una CSB, incluido el material de
laboratorio, deben tener su superficie descontaminada y sacarse de
la cmara una vez terminado el trabajo, ya que los medios de cultivo
residuales pueden permitirla proliferacin de microbios.
Las superficies internas de las CSB deben descontaminarse antes y
despus de cada uso. Las superficies de trabajo y las paredes
internas deben limpiarse con un pao empapado en un desinfectante
que elimine los microorganismos que pudiera haber.
Al final del da de trabajo, la descontaminacin final de las superficies
debe incluir la limpieza de la superficie de trabajo, los laterales, la
cara posterior y el interior de la ventana de cristal. Para los
organismos sensibles se utilizar una solucin de leja o alcohol al
70%. Despus habr que pasar de nuevo un pao con agua estril
cada vez que se utilice un desinfectante corrosivo, como la leja.
Se recomienda dejar la cmara en funcionamiento. En caso
contrario, antes de apagarla habr que dejarla funcionando durante
5 minutos para purgar la atmsfera interior.
Descontaminacin
22

Las CSB deben descontaminarse antes de los cambios de filtro y
antes de cambiarlas de sitio. El mtodo de descontaminacin ms
comn es la fumigacin con formaldehdo gaseoso. La
descontaminacin de las CSB debe ser realizada por un profesional
cualificado.
2.1.8 Equipo de proteccin personal
Siempre que use una CSB, deber llevar prendas de proteccin
personal. Las batas de laboratorio son aceptables para trabajar en
los niveles de bioseguridad 1 y 2. En los niveles de bioseguridad 3 y
4 (salvo en los laboratorios diseados para trabajar con trajes
especiales) deben usarse batas de frente cerrado, abrochadas por
detrs, que protegen mejor. Los guantes deben estirarse bien por
encima de las mangas de la bata, en lugar de meterlos por debajo.
Pueden usarse mangas con elstico para proteger las muecas del
investigador. Para algunos procedimientos pueden hacer falta
mascarillas y gafas de seguridad
2.1.9 Equipo de Seguridad
Los aerosoles son importantes fuentes de infeccin, debe tenerse
cuidado de reducir su formacin y dispersin. Muchas operaciones
de laboratorio generan aerosoles peligrosos, como mezclar, triturar,
agitar, remover, someter a ultrasonidos o centrifugar material
infeccioso. Aunque se utilice equipo seguro, es preferible efectuar
esas operaciones en una CSB siempre que sea posible.
Cmaras aislantes de material flexible y presin negativa: son
dispositivos autoportantes de contencin primaria que ofrecen
mxima proteccin frente a materiales biolgicos peligrosos. Pueden
colocarse sobre un soporte mvil. El banco de trabajo est
totalmente encerrado en una envoltura de cloruro de polivinilo (PVC)
transparente, suspendida de un marco de acero. La cmara aislante
se mantiene a una presin interna inferior a la atmosfrica. El aire de
entrada pasa a travs de un filtro HEPA y el de salida a travs de dos
23

filtros HEPA, lo que hace innecesario conducir el aire evacuado hacia
el exterior del edificio. El aislador puede equiparse con una
incubadora, un microscopio y otro material de laboratorio, como
centrifugadoras, jaulas de animales o bloques trmicos, entre otros.
El material se introduce y se extrae de la cmara aislante a travs de
aberturas especiales, de modo que no se pone en peligro la
seguridad microbiolgica. Las manipulaciones se realizan utilizando
mangas largas con guantes desechables incorporados. La caja lleva
un manmetro para vigilar la presin de la envoltura.

24


Cuadro 4. Equipo de Bioseguridad

Dispositivos de pipeteo: Para los procedimientos de pipeteo debe
utilizarse siempre un dispositivo especial. El pipeteo con la boca
debe estar estrictamente prohibido. La aspiracin por la boca y la
ingestin de material peligroso han dado lugar a numerosas
infecciones en los laboratorios.

25

Homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores
ultrasnicos: Los homogeneizadores domsticos (de cocina) no son
hermticos y liberan aerosoles. Slo deben utilizarse aparatos
diseados especialmente para el trabajo de laboratorio, que estn
construidos de forma que se reduce al mnimo o se impide esa
liberacin de aerosoles.

Asas desechables: Las asas desechables ofrecen la ventaja de que
no necesitan ser esterilizadas, estas asas deben colocarse en un
desinfectante despus del uso y desecharse como material
contaminado.

Microincineradores: Los microincineradores calentados con gas o
electricidad llevan protecciones de cristal de borosilicato o de
cermica que reducen al mnimo las salpicaduras y la dispersin de
material infectado cuando se esterilizan las asas.

26

Captulo III Generalidades de Bioseguridad

3. Buenas prcticas en el laboratorio.
Para prevenir la adquisicin de enfermedades infectocontagiosas
relacionadas con el trabajo del personal del laboratorio, es
fundamental implementar medidas de buenas prcticas de
bioseguridad.
El jefe del laboratorio en representacin de la institucin, es el
responsable de gestionar la elaboracin de una poltica de
bioseguridad accesible para todo el personal junto a los
procedimientos y programas de bioseguridad; debe adems velar por
el cumplimiento de las medidas de bioseguridad establecidas y
proveer los recursos para sostenerlas.
El trabajador tiene el derecho a conocer los riesgos existentes en su
lugar de trabajo y es, en ltima instancia, el responsable de cumplir
las medidas de bioseguridad instauradas en la institucin
Se debe contar con un encargado de bioseguridad que contribuya a
la implementacin y cumplimiento de las medidas establecidas en el
laboratorio, adems de planificar, organizar y dirigir la capacitacin y
entrenamiento del personal en torno al tema.
Los procedimientos que implican el uso de elementos de proteccin
personal (EPP) para impedir la contaminacin con material infeccioso
o txico durante su manipulacin en el laboratorio se denominan
tcnicas de barrera y son utilizados como una medida de contencin
en el manejo de material infeccioso en el laboratorio.
En el trabajo de todo laboratorio, es imprescindible conocer y
respetar las prcticas bsicas de bioseguridad con el fin de
resguardar la seguridad del personal:
27

Diseo de un manual de bioseguridad para eliminar o
minimizar la exposicin laboral a patgenos, el cual debe
estar a disposicin de cada persona del laboratorio. Este
manual debe ser revisado anualmente por el supervisor o
director del laboratorio para hacer los cambios pertinentes al
sistema de bioseguridad.
Delimitar las reas tcnicas y las administrativas en el
laboratorio.
Las reas de trabajo deben mantenerse ordenadas, limpias y
libre de materiales no relacionados con el trabajo.
No est permitido comer, beber, fumar, manipular
lentes de contacto, maquillarse o aplicarse cremas en las
reas de trabajo.
No guardar alimentos o bebidas en refrigeradores destinados
al almacenamiento de muestras o reactivos.
No pipetear con la boca.
No tocar los materiales y reactivos sin guantes.
Equipo de proteccin personal
Vara de acuerdo al tipo de laboratorio. Debe utilizarse
de forma obligada si se va a trabajar con material
potencialmente infeccioso. Incluye: guantes, batas,
mscaras, lentes y cubrebocas, ente otros.
Los guantes desechables no deben lavarse o
descontaminarse para su reutilizacin.
Utilizar guantes siempre que se entre en contacto con
sangre o material biolgico- infeccioso.
Si usa lentes de contacto extremar la proteccin de la
mucosa ocular.
El cabello largo debe estar recogido.
Las propiedades personales deben ser guardadas y
aseguradas en casilleros provistos fuera del rea tcnica de
trabajo.
Est prohibido el uso y almacenamiento de decoraciones
festivas o de otro tipo en el rea tcnica.
28

No trasladar los registros del rea tcnica a las reas
administrativas.
Manejo adecuado de desechos.
No firmar documentos administrativos en las reas
tcnicas.
Al momento de salir de las reas tcnicas retirar los EPP y
lavar manos con abundante agua y jabn.

De vital importancia es la utilizacin de sealizaciones en el
laboratorio que permitan entregar informacin clara y rpida
al personal tanto interno como externo.

En general el propsito de las sealizaciones es indicar la
ejecucin de una actividad, prohibir una accin o conducta,
29

advertir respecto de una situacin o condicin ambiental o
instruir sobre cmo realizar una actividad. Para esto es
necesario utilizar smbolos entendibles, con un significado
nico, idealmente reconocidos a nivel internacional o
aceptados por convencin.


La Higiene de manos es una prctica fundamental en el
laboratorio y puede ser realizada de dos formas, lavado de
manos con agua y jabn o uso de soluciones de alcohol. El
uso de esta ltima opcin es efectivo y rpido, pero requiere
que las manos no se encuentren visiblemente sucias.
Las personas encargadas de tomar y manipular
cualquier muestra en el laboratorio, debe usar guantes y
batalarga, y observar las siguientes precauciones:
Evitar pincharse con la aguja o hacerse heridas.
Tapar los tubos, cajas o recipientes con muestras, para
evitar la contaminacin de otras personas que tengan
que manipularlas.
Utilizar guantes de caucho o neopreno cuando estn
manejando grandes cantidades de lquidos corrosivos,
irritantes de la piel o materiales contaminados.
Utilizar guantes de goma o ltex o vinilo en la realizacin de
trabajos con materiales infecciosos, y lvese las manos
antes de abandonar el laboratorio.
30

El rea tcnica debe disponer de por lo menos un lavamanos en el
que se encuentre dispensador de jabn y toalla secante, destinado
exclusivamente para el lavado de las manos. Se sugiere colocar
instrucciones por escrito y/o grficas para reforzar el correcto
procediendo de lavado de manos en un lugar visible y cercano al
lavamanos.
Dado que el lavado de manos es una prctica fundamental es muy
importante conocer:
En qu momento se debe realizar:
Cada vez que se contaminen con cualquier fluido biolgico.
Cada vez que se retiran los guantes de procedimiento.
Cada vez que se retire de su rea de trabajo y/o sale del
laboratorio.
Antes de comer.
Despus de ir al bao.
Tcnica de lavado de manos: La duracin mnima recomendada
para el lavado de manos con agua y jabn es de 40-60 segundos, e
incluye los siguientes pasos:
Abrir la llave de agua.
Mojar las manos y muecas.
Aplicar suficiente y moderada cantidad de jabn lquido.
Frotar vigorosamente ambas manos, los espacios
interdigitales, subungueales, dedos y muecas.
Enjuagar con abundante agua.
Secar sus manos con papel absorbente desechable.
Con el mismo papel, cerrar la llave y eliminar en basurero de
uso comn.

3.1 Niveles de bioseguridad
A partir de la definicin de los grupos de riesgo se gener la
clasificacin de los laboratorios en cuatro niveles de bioseguridad en
31

funcin de (i) la infectividad del patgeno, (ii) la severidad de la
enfermedad causada, (iii) el grado de transmisibilidad, (iv) el origen
del agente (extico o no) y, (v) la naturaleza del trabajo llevado a
cabo en el inmueble.
Cada nivel de bioseguridad refleja el tipo de prcticas
microbiolgicas, el tipo de equipo y las medidas de seguridad
tomadas en ese laboratorio en particular. En general, se procura
lograr un ambiente de trabajo seguro para el personal y para las
personas ajenas al laboratorio, incluyendo las que se encuentran
fuera de las instalaciones. De acuerdo al CDC, los cuatro niveles de
bioseguridad son los siguientes:
Nivel 1 (BSL-1): prcticas, equipo y medidas adecuadas para el nivel
de enseanza. El trabajo se realiza con cepas definidas y
caracterizadas de microorganismos que no causen enfermedad en
humanos adultos sanos. No se necesita el uso de equipo especial de
proteccin, con el equipo bsico es suficiente.
Nivel 2 (BSL-2): prcticas, equipo y medidas adecuadas para
laboratorios de anlisis, diagnstico o patologa clnica donde se
manejen microorganismos de riesgo moderado que estn presentes
en la comunidad y se encuentran asociados a enfermedades
humanas de severidad variable.
Nivel 3 (BSL-3): prcticas, equipo y medidas adecuadas para
laboratorios de anlisis/diagnstico clnico e investigacin donde
manejen agentes conocidos o no conocidos que potencialmente
puedan transmitirse por aerosol o salpicaduras y, que puedan causar
una infeccin potencialmente letal.
Nivel 4 (BSL-4): prcticas, equipo y medidas adecuadas para
laboratorios de anlisis/diagnstico clnico e investigacin que
involucren la manipulacin de agentes exticos peligrosos que
representen un gran riesgo por causar enfermedades letales, que
puedan transmitirse va aerosol y, para los cuales no haya vacuna ni
terapia conocida.
32


Cuadro 5. Diez principales agentes biolgicos causantes de infecciones
laborales en el laboratorio, grupo de riesgo (GR) al que pertenecen y
enfermedad que causan.

De los cuatro niveles mencionados, en los ltimos dos se manejan
agentes patgenos considerados como potencialmente peligrosos
por las posibilidades que existen del surgimiento de un subtipo
pandmico o por haber dado origen a una epidemia no controlada
(patgenos emergentes y reemergentes respectivamente).
Los laboratorios de bioseguridad nivel 3 y 4 son herramientas
esenciales en la investigacin por brindar la posibilidad de aislar,
cultivar y preservar estos microorganismos en su estado activo.
En cada laboratorio debe existir una persona encargada de la
valoracin de riesgo para seleccionar de forma adecuada el nivel de
contencin en el que se debe trabajar.
El proceso de valoracin de riesgo involucra, de acuerdo a Barkley,
cuatro pasos bsicos:
33

1. Identificacin de los factores de riesgo (peligros relacionados
al agente, al protocolo y a la susceptibilidad a la
enfermedad);
2. Evaluacin de la posibilidad de una exposicin (de personas
que lleven a cabo el protocolo, de personas presentes en el
laboratorio y de personas no asociadas al laboratorio);
3. Evaluacin de las consecuencias potenciales de una
exposicin;
4. Evaluacin de la capacidad de las medidas de seguridad
para controlar el riesgo.
La Organizacin Mundial de la Salud, mediante el Reglamento
Sanitario Internacional (2005), estipula otras recomendaciones
relacionadas a la bioseguridad en el laboratorio, las cuales tienen
como objetivo prevenir la propagacin internacional de
enfermedades, proteger contra esa propagacin, controlarla y darle
una respuesta de salud pblica proporcionada y restringida a los
riesgos para la salud pblica.
Nivel de Bioseguridad
a. Gestin de Bioseguridad
Deben implementarse en el laboratorio las polticas y
procedimientos documentados relacionados con
bioseguridad y difundirlos a todo el personal.
Se recomienda revisar y actualizar los procedimientos de
bioseguridad al menos cada 3 aos y cada vez que sea
necesario.
Se debe establecer polticas y procedimientos para las
condiciones de ingreso al laboratorio (advertencia de
riesgos).
El personal debe estar capacitado en el manejo de agentes
patgenos.
Debe existir polticas claras y estandarizadas sobre el
manejo y disposicin de material corto punzante.
34

El personal del laboratorio debe someterse a las
inmunizaciones o anlisis de agentes manejados o
potencialmente presentes.
El laboratorio debe tener implementado un sistema de control
de roedores e insectos.
b. Acceso
Se debe restringir el acceso solo a personal autorizado
durante el trabajo en reas tcnicas con agentes infecciosos.
No es recomendable el acceso de personas
inmunocomprometidas, sin embargo, es responsabilidad del
jefe del laboratorio evaluar cada caso. Adicionalmente no
debe permitirse la entrada de nios a las zonas de trabajo
del laboratorio.
La entrada general del laboratorio debe permanecer cerrada
y restringida por medios fsicos.
Debe estar sealizada con el smbolo de riesgo biolgico,
adems debe indicarse el nivel de bioseguridad, nombre y
telfono del responsable (encargado de bioseguridad o jefe
del laboratorio).
No debe permitirse el ingreso de animales al laboratorio,
salvo aquellos que sern usados para el trabajo.
c. Prcticas
Prcticas bsicas de bioseguridad descritas
anteriormente.
Los procedimientos deben realizarse con cuidado
para no producir salpicaduras o aerosoles y preferir
la utilizacin de dispositivos que prevengan su
generacin, tales como uso de tubos con tapas que
contengan aerosoles y sistemas automatizados y
semiautomatizados para destapar tubos.
Los procedimientos con grandes posibilidades de
producir aerosoles de agentes que se pueden
transmitir por inhalacin deben llevarse a cabo en
cabinas de bioseguridad o utilizando equipos de
35

contencin fsica como centrfuga con capachos de
bioseguridad.
Para extraer soluciones debe utilizarse dispositivos
pipeteadores mecnicos o automticos.
Las superficies de trabajo deben ser
descontaminadas con un desinfectante efectivo.
Los equipos deben descontaminarse y embalarse de
acuerdo a normativas locales antes de enviarlos a
reparacin o mantenimiento.
Respecto a las prcticas relacionadas con manejo
de cortopunzantes:
El uso de elementos corto-punzantes debe
restringirse a aquellos casos donde no existe otra
alternativa. Se recomienda usar materiales de
plstico.
Para las inyecciones o aspiracin de materiales
infecciosos, deben utilizarse solamente jeringas y
aguja descartables. Al momento de descartarlas,
deben colocarse en recipientes resistentes a
punciones.
Cuando sea conveniente, usar jeringas que
reenfundan las agujas, sistemas sin agujas y otros
dispositivos seguros.
Los artculos de vidrio rotos no deben manipularse
directamente con las manos.
En caso de derrames o accidentes con
exposicin a material infeccioso, debe avisarse
inmediatamente a la jefatura del laboratorio y
realizarse la evaluacin, control y tratamiento mdico
si corresponde. En todos los casos debe guardarse
registro de estos eventos.
Todos los cultivos, tejidos, fluidos corporales y
desechos potencialmente infecciosos, deben
colocarse en un recipiente con tapa que evite
36

filtraciones durante la recoleccin, manejo,
procesamiento, almacenamiento, transporte o envo.
Los desechos del laboratorio contaminados deben
ser descontaminados previo a su eliminacin. En el
caso que la descontaminacin se realice en un lugar
externo, el residuo debe ser transportado desde el
laboratorio en recipiente hermticamente cerrado.
d. Barreras de contencin.
Las barreras de contencin son aquellas que previenen el escape y
dispersin de agentes de riesgo.
Barrera primaria.- Es aquella que protege al personal y al
ambiente inmediato del agente de riesgo (vestimenta de
uso exclusivo, gabinete de Bioseguridad y equipos
provistos de dispositivos de seguridad).
Barrera secundaria.- Es aquella que protege el ambiente
externo contra los agentes de riesgo (diseo del laboratorio
e implementacin de equipos de seguridad de acuerdo
al nivel de Bioseguridad).
Barrera microbiolgica.- Es un dispositivo o sistema que
evita o limita la migracin de microorganismos entre los
espacios situados a ambos lados del mismo y permite
controlar la concentracin de microorganismos en el
ambiente, dentro de lmites prefijados. Tiene como
objetivo proteger al operador o al operador y al proceso.
Barrera microbiolgica parcial.- Es un dispositivo o
sistema que limita la migracin de microorganismos entre los
ambientes situados a ambos lados del mismo. En este
tipo de barrera se recomiendan Prefiltros, Filtros HEPA
(filtros de alta eficiencia para el control de partculas en
suspensin) as como gabinete de Bioseguridad clase I o II A
o B, lo cual depender del tipo de trabajo que se efecta en
un determinado laboratorio.
Barrera microbiolgica absoluta.- Es un dispositivo o
sistema hermtico, a prueba de filtraciones de aire o gas,
37

que evita en forma total la migracin de microorganismos
entre el ambiente confinado por la barrera y el ambiente
exterior de la misma. La barrera microbiolgica absoluta
puede confinar al producto o proceso, dejando al operador
fuera de la misma o viceversa. En este caso se recomienda
gabinete de Bioseguridad tipo III.(Ver Anexo 1)
Barrera qumica.- Son dispositivos o sistemas que protegen
al operador del contacto con sustancias irritantes, nocivas,
txicas, corrosivas, lquidos inflamables, sustancias
productoras de fuego, agentes oxidantes y sustancias
explosivas. En este caso se recomiendan los gabinetes
de seguridad qumica clase A, B o C (ver pg. 95).
Barrera fsica.- Son dispositivos o sistemas de proteccin
individual o colectiva que protegen contra las radiaciones
ionizantes, no ionizantes, ruidos, carga calrica,
quemaduras y vibraciones excesivas.

e. Infraestructura e instalaciones
Puertas de acceso con control de entrada.
Disponer de un lavamanos en cada una de las reas
tcnicas, idealmente aquellos operados sin el uso de las
manos.
Las superficies del laboratorio (cielo, paredes, piso) deben
ser fciles de limpiar, lavar y descontaminar.
Las superficies de los mesones deben ser de
material impermeable, resistente al calor moderado y
sustancias qumicas empleadas para descontaminar.
Los espacios entre muebles, cabinas y equipos deben ser
accesibles para la limpieza. Las sillas deben tener superficies
con material impermeable y de fcil limpieza.
El mobiliario debe soportar cargas y entre ellos debe dejarse
espacio que permita hacer la limpieza correspondiente.
En caso de contar con ventanas que se abren, debe cubrirse
con malla para prevenir la entrada de insectos.
38

Al instalarse las cabinas de bioseguridad, debe considerarse
que las fluctuaciones del aire de entrada y escape de la sala
no las hagan funcionar fuera de sus parmetros para
contencin.
Deben situarse lejos de ventanas que puedan abrirse,
puertas, reas de laboratorio con mucho trnsito y otros
equipos que puedan interferir sus flujos de aire.
Es necesario disponer de una estacin para el lavado de
ojos y ducha de emergencia.
La iluminacin debe ser adecuada, evitando reflejos y brillos
que puedan modificar la visin.

3.2 Precauciones estndar y equipo de proteccin
personal
Aqu encontramos la sntesis de las principales medidas de
proteccin para el manejo de sangre y fluidos corporales y aquellas
diseadas para reducir el riesgo de infeccin con patgenos a partir
de superficies o sustancias hmedas corporales (mucosas, heces,
etc.) y, las cuales, se aplican a todos los pacientes que reciben
atencin en los hospitales sin importar el diagnstico o la infeccin
que se presuma. (Figura 5)
Las precauciones estndar se aplican a sangre, todos los
fluidos, secreciones y excreciones corporales, excepto sudor, sin
importar si ellas contienen o no sangre visible, piel no intacta o
membranas mucosas. Estas precauciones permiten reducir el
riesgo de transmisin de microorganismos en el hospital, tanto
de fuentes conocidas, como desconocidas.
3.2.1 Higiene de Manos.
Es la medida ms sencilla y eficaz para prevenir infecciones
asociadas a la atencin en salud, su importancia radica en que las
manos son instrumentos ms importantes que se tiene, pueden servir
como vehculo para transportar grmenes, ya sea del trabajador al
39

paciente o del paciente al trabajador y de paciente a paciente a
travs del trabajador.
Esta medida es la ms importante y debe ser ejecutada
inmediatamente, antes y despus del contracto.
La higiene de manos es la estrategia fundamental en el control de
cualquier patologa infecciosa transmisible, y esto tiene relevancia
en la prevencin de las enfermedades virales respiratorias
agudas, entre ellas, las causadas por los virus del Influenza.
Objetivos.
Eliminar la flora microbiana transitoria y disminuir la flora
resistente de la piel.
Prevenir la diseminacin de las bacterias a travs de las
manos.
Materiales:
Llave mezcladora de agua caliente y fra, con clula
fotoelctrica o palanca para comandar con codos o pies.
Dispensador de jabn lquido (neutro o antisptico segn
corresponda al tipo de lavado) con sachet descartable.
Dispensador de papel toalla desechable.
No se recomienda el uso de secador de aire, por su lentitud y
riesgo de recontaminacin.
Lvese cuidadosamente las manos en los siguientes casos:
Al iniciar y terminar las labores.
Entre un procedimiento y otro.
Antes y despus de tener contacto con un paciente.
Antes y despus de usar guantes estriles y no estriles.
Despus de manejar material contaminado.
Al tener contacto con membranas mucosas, sangre o
lquidos corporales, secreciones y excretas.
40

Despus de la manipulacin de fuentes inanimadas que
puedan estar contaminadas con microorganismos
vulnerables.
Antes de tomar los alimentos.
Despus de realizar sus necesidades fisiolgicas.
La posibilidad de ejercer un efecto antimicrobiano se lograr
dependiendo del tiempo de lavado y si se usa o no algn
producto antisptico (lavado de manos higinico). Por otro lado, el
uso de frote higinico se hace sobre las manos limpias con el fin
de lograr una mayor erradicacin microbiana o alargar este
efecto en el tiempo, pero no sirve para eliminar residuos. Esta
estrategia comprende el lavado de manos en sus diferentes
modalidades, las cuales se explican a continuacin:
3.2.1.1 Lavado higinico de manos:
Objetivos
Reducir infecciones cruzadas
Eliminar:
Suciedad
Flora transitoria
Materia orgnica
Material
Agua corriente templada
Toalla de papel desechable
Indicaciones
Al inicio y fin de la jornada.
Despus de comer, fumar, utilizar el WC, etc.
Antes y despus del contacto con cada paciente.
41

Entre dos procedimientos en el mismo paciente si hay
sospecha de contaminacin de las manos.
Despus del contacto con alguna fuente de
microorganismos y objetos contaminados con suciedad.
Antes y despus del uso de guantes.
Jabn lquido neutro
Humedezca las manos con agua.
Aplique jabn lquido sobre la superficie de las manos,
Frote vigorosamente durante 30 segundos.
Enjuague con agua.
Seque las manos con toalla de papel desechable.
Cierre el grifo con el papel toalla que utilizo para secarse en
caso de no tener las griferas recomendadas anteriormente.

3.2.1.2 Lavado antisptico de manos:
Objetivos
Eliminar:
Suciedad
Flora transitoria
Parte de flora residente
42

Materia orgnica
Conseguir cierta actividad microbiana residual.
Material
Agua corriente templada.
Jabn lquido con antisptico.(Solucin jabonosa de
Clorhexidina o Povidona Iodada).
Indicaciones
Antes y despus de:
Tcnicas invasivas.
Manejo de pacientes aislados
Antes de:
Manejo de pacientes inmunodeprimidos.
Preparacin de soluciones parenterales y enterales.
Despus de:
Contacto con excreciones, secreciones y sangre del
paciente.
Toalla de papel desechable
Retire las joyas y suba las mangas arriba del codo.
Moje sus manos y antebrazos completamente.
Enjabonar manos, muecas y antebrazos.
Frotar las manos, muecas y antebrazos friccionando
especialmente en los espacios interdigitales y las uas,
durante 13 segundos.
Limpie las uas y frote las yemas de los dedos con la palma
de la mano contraria.
Enjuague con abundante agua.
43

Seque las manos y antebrazo con toalla desechable.
Cierre la llave utilizando la toalla de papel con la que se sec
( en caso de no contar con la grifera recomendada)
Deseche la toalla en el basurero.

3.2.1.3 Lavado quirrgico de manos:
Objetivos
Eliminar:
Flora transitoria
La mxima flora residente
Material
Agua corriente templada.
Jabn lquido con antisptico. (Solucin jabonosa de
Clorhexidina o Povidona Iodada).
Toalla o compresa estril
Cepillo de uas estril desechable

Procedimiento
44

Qutese las joyas de las manos y muecas.
Moje completamente sus manos y antebrazos, tome 2
aplicaciones de jabn y limpie la regin debajo de las uas
para eliminar las bacterias acumuladas, luego frtese cada
lado de cada dedo, entre los dedos, el dorso y la palma de la
mano durante dos minutos.
Proceda con un movimiento circular a frotarse iniciando en la
punta de los dedos de una mano y lave haciendo espuma
entre los dedos, continuando desde la punta de los dedos
hasta el codo, haga lo mismo con la otra mano y brazo y
contine lavando por aproximadamente dos minutos mas.
Enjuague cada brazo separadamente empezando con la
punta de los dedos cada lado del brazo hasta tres pulgadas
por encima del codo, el tiempo que sea necesario.
Repita el proceso en la otra mano y el otro antebrazo,
manteniendo la mano por encima del codo todo el tiempo. Si
por alguna razn la mano toca cualquier cosa, el lavado de
manos se prolongar un minuto ms en el rea contaminada.
Enjuague las manos y los brazos pasndolas por el agua en
una sola direccin, desde la punta de los dedos hasta los
codos. No mueva los brazos hacia atrs, y hacia delante
mientras los enjuaga. Las manos deben estar por encima de
los codos.
Secado de las manos: tome una toalla estril, utilice un
extremo para secar una mano, iniciando de la mano al
codo, con movimiento rotatorio luego tome el extremo
opuesto de la toalla con la mano seca e inicie el secado de la
otra.
Descarte la toalla como material contaminado.
Utilice de tres a cinco mililitros de jabn antisptico para cada mano o
use dos aplicaciones del dispensador, para que la accin antisptica
tenga efecto.
El jabn debe estar en contacto con la piel por lo menos durante tres
a seis minutos. Preste especial atencin a los espacios interdigitales
45

y las uas (deben mantenerse cortas y sin esmalte y no usar uas
acrlicas).
Deben lavarse las manos antes y despus de atender cada
paciente, despus de tocar sangre, fluidos corporales, secreciones,
excreciones y elementos contaminados, tenga o no los guantes
puestos. Lave las manos inmediatamente despus de quitarse los
guantes, cualquier elemento de proteccin personal, entre contactos
con pacientes y cuando sea indicado para disminuir o evitar la
transferencia de microorganismos a otros pacientes o al ambiente.
Puede ser necesario lavar las manos entre procedimientos con
el mismo paciente para evitar la contaminacin cruzada de otros
sitios corporales.

3.2.2 Productos antispticos
Se refiere a productos con actividad microbicida que se pueden
utilizar con seguridad en seres humanos. Los alcoholes tienen
buena accin frente a virus, entre los que se encuentra el virus
de influenza, virus sincitial respiratorio, el VIH y el virus de la
hepatitis B. Dentro de los alcoholes tenemos el etanol, el isopropanol
y el n-propanol en una concentracin entre el 60% y el 80%. Se
pueden combinar con la glicerina, la cual tiene la posibilidad de
favorecer su permanencia sobre la piel y disminuir los efectos
46

adversos como resequedad. Los yodados, del cul el ms
usado es la yodopovidona tienen buena actividad antiviral. La
clorhexidina tiene un espectro amplio sobre bacterias, virus y
hongos, quistes de protozoos en los que rompe la membrana celular,
no es txica a concentraciones inferiores al 2% en recin nacidos y
al 4% en adultos, y su absorcin es mnima. Su accin es intermedia
pues acta despus de 15 segundos de su aplicacin, permanece
activa en la piel por seis horas despus de su uso. Su actividad es
dependiente del pH de la piel y la humedad. No se debe
mezclar con emolientes porque pierde su efectividad. Los
agentes previamente mencionados presentan buena actividad
antiviral, y es similar entre ellos.
Diversos estudios han demostrado que el uso de este tipo de
productos se puede asociar con efectos adversos, de los cuales el
ms comn es la irritacin de la piel. El uso de alcohol glicerinado ha
demostrado una disminucin en este efecto adverso.


3.2.3 Elementos de Proteccin Personal
Los equipos de proteccin personal son un complemento
indispensable para los mtodos de control de riesgos que protege al
trabajador colocando barreras en las puertas de entrada del
organismo para evitar la transmisin de infecciones.
47

Muchos de los equipos de proteccin personal fueron diseados para
evitar la contaminacin y la transmisin de microorganismos de
paciente a paciente a travs del personal de salud.
Igualmente, es responsabilidad de cada individuo el uso pertinente y
correcto de los EPP.
La recomendacin de uso de los EPP en los laboratorios, depende
del tipo de agente que se manipula y los riesgos a los que se expone
el trabajador.

3.2.3.1 Mandil
Pngase una bata (limpia, no estril, es adecuada) para proteger la
piel y prevenir que la ropa se ensucie durante procedimientos y
actividades de cuidado del paciente que puedan generar
salpicaduras o derrames de sangre, fluidos corporales,
secreciones y excreciones.

Escoja una bata o vestimenta adecuada para el procedimiento
y la cantidad de fluidos que posiblemente encuentre. Algunos
tipos de batas estn recubiertas con sustancias que les dan un
cierto grado de impermeabilidad lo que contribuye a una mayor
proteccin en casos de salpicaduras o derrames.
48

Qutese la bata sucia tan pronto como sea posible, y lvese
las manos para evitar transferir microorganismos a otros pacientes
o ambientes.

3.2.3.2 Mascarillas
Se debe usar mascarilla cada vez que exista la posibilidad de
exposicin de la mucosa nasal u oral a cualquier fluido biolgico o a
sus aerosoles y en procedimientos en los que se est en riesgo de
inhalacin de vapores de sustancias txicas.
Existen varios tipos de acuerdo al peligro, por ejemplo, hay
respiradores con filtros cambiables para proteger contra gases,
vapores, partculas y microorganismos.

Mascarilla quirrgica: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de
salpicaduras con sangre u otro fluido potencialmente infeccioso para
evitar la exposicin de la mucosa oral y nasal.
Mascarilla de alta eficiencia: Se debe utilizar siempre que exista
riesgo de generacin de aerosoles de agentes que se puedan
transmitir por inhalacin. Por ejemplo cada vez que se manipulan
fuera del CBS, muestras que provienen de un paciente en el que se
sospecha Mycobacterium tuberculosis (5).Su uso es exclusivo en
reas tcnicas del laboratorio. Pueden ser reutilizadas por el
trabajador siempre y cuando se mantenga limpia, no deformada y
con el filtro seco.
49

Mascarilla autofiltrante: Se debe utilizar al manipular o estar
expuesto a productos qumicos como gases, vapores o sus
combinaciones con productos contaminantes particulados.Existen
varios tipos de acuerdo a la proteccin respiratoria que ofrecen.

3.2.3.3 Gafas
Colquese una mascarilla y gafas o una careta facial para proteger
las membranas mucosas de los ojos, nariz y boca durante
procedimientos y actividades de cuidado del paciente debido a la
posibilidad de que generen aerosoles o se produzcan derrames
de sangre, fluidos corporales, secreciones y excreciones.
Los ojos por su limitada vascularidad y baja capacidad inmunitaria
son susceptibles a lesiones microscpicas y macroscpicas.
El personal de laboratorio se encuentra en riesgo ante
microorganismos.
La mscara debe tener una pantalla de plstico semirgido, las
pantallas de plstico rgido se parten o cuartean con facilidad, no
solo en su manejo sino tambin cuando algn elemento metlico
choca contra ellas, las de plstico blando, tienen el inconveniente
que con la inspiracin o expiracin se pueden adosar a la cara o
alejarse de ella segn sea el momento del acto respiratorio.
La pantalla debe ser incolora y totalmente transparente, de esta
manera podemos garantizar un correcto trabajo microbiolgico
Caractersticas de las gafas:
Que tengan certificacin que cumple con estndares internacionales
y:
Que no se empaen con facilidad.
50

Que permita el uso de lentes prescritos al personal
adicionalmente a las gafas.
Que absorban los rayos ultravioletas.
Ser resistentes al impacto.
Que aslen las mucosas oculares de los riesgos fsicos,
qumicos y biolgicos.


Mantenimiento:
Lavar las gafas con agua y jabn lquido. La limpieza puede
realizarse con agua y jabn, tanto en su parte externa como interna
despus de cada uso, debe secarse con toallas de papel y se le
debe pasar un pao hmedo que contenga un desinfectante para
superficies.
Evitar que las gafas se caigan, nunca colocarlas con los lentes hacia
abajo porque se pueden rayar fcilmente.
Almacenarla en un lugar seguro y en ptimas condiciones de aseo.
Deben ser de uso personal.
3.2.3.4 Guantes
Son recomendados para eliminar o disminuir el riesgo de contacto de
las manos con sustancias txicas o microorganismos potencialmente
presentes en cualquier muestra clnica como tambin en el manejo
de cepas en el laboratorio de microbiologa. Los guantes
desechables de ltex, vinilo o nitrilo aprobados para uso
microbiolgico son los de uso ms extendido para el trabajo general
del laboratorio.
51

Antes y despus de su uso debe realizarse lavado de manos. Su
eliminacin debe hacerse junto con los residuos contaminados del
laboratorio. El uso de este implemento es exclusivo en reas
tcnicas del laboratorio
Es necesario brindar alternativas a los guantes de ltex en aquellos
individuos con hipersensibilidad a este material.
Existen varios tipos de guantes cuya eleccin depende del material
que se manipula:
Plstico: sustancias corrosivas y/o irritantes.
Ltex: material potencialmente infectante, fluidos corporales
(sangre). En caso de alergias pueden sustituirse por el vinilo
o nitrilo.
Caucho natural: sustancias corrosivas suaves y descargas
elctricas.
Goma, antideslizantes: lavado de material, manejo de
residuos, limpieza.
Neopreno: disolventes, aceites, sustancias ligeramente
corrosivas (cidos, lcalis).
Algodn: retarda el fuego, absorbe la transpiracin.
Amianto: aislante o resistente al calor.
En la toma de muestras clnicas, los guantes deben ser cambiados
entre paciente y paciente, y eliminados a la basura corriente, a
menos que se hayan ensuciado con sangre u otro fluido biolgico, en
cuyo caso se eliminan en la basura contaminada

Condiciones para el uso adecuado de los guantes.
Lavar y secar las manos antes de colocar los guantes.
El uso de guantes no sustituye el lavado de manos.
Llevar las uas cortas y no utilizar anillos ni pulseras por
peligro de rotura del guante.
52

Cubrir con un apsito cualquier herida localizada en las
manos.
Conservar los guantes alejados de fuentes de calor y
de la accin de la luz solar.
Elegir el guante del tamao apropiado , evitando que
est flojo , especialmente en la punta de los dedos
ya que se pierde sensibilidad y aumenta el riesgo de
punciones o cortaduras.
Evitar daar los guantes cuando se sacan del envase.
Se quitarn los guantes contaminados inmediatamente a
acabar la tcnica correspondiente, antes de tocar superficies
ambientales limpias, depositndolos en el cubo adecuado.
Se lavarn las manos inmediatamente despus de la retirada
de los guantes.
No se deben meter los guantes usados en los bolsillos.
Cuando el lavado de manos se realiza con solucin
hidroalcohlica los guantes que se utilicen no deben
contener polvo.
Deseche los guantes cuando se hayan perforado y lave
las manos inmediatamente.
No se toque los ojos, nariz o piel con las manos enguatadas.
Evite manipular telfonos y otros fmites con las manos
enguatadas (sin previa limpieza de las manos).
Permanezca en el rea de trabajo mientras tenga los
guantes puestos. NO DEAMBULE CON ELLOS PUESTOS
Los guantes no deben ser usados en actividades
cotidianas como; contestar telfono. Abrir puertas y/o
gabinetes,

Cundo cambiar de guantes

Entre acciones y procedimientos distintos realizados en
un mismo paciente.
Inmediatamente despus de tocar material contaminado.
53

Siempre que se produzcan salpicaduras, o los guantes en
uso se rompan o perforen, es necesario lavarse las
manos inmediatamente y ponerse un nuevo par.
En toma de muestra se utilizarn guantes sin talco y deben
ser cambiados entre paciente y paciente

Postura de guantes:
Lvese las manos con jabn antisptico segn norma y abra
el paquete de guantes. Tome el primer guante por su
cara interna, es decir, la que estar en contacto directo
con su mano.
Colquese el primer guante sin tocar la cara externa.
Tome el segundo guante con la mano ya enguantada,
cogindolo por su cara externa, es decir, por el pliegue
del puo.
Acomdese ambos guantes sin tocar la cara que est
en contacto con la piel.


Retiro de guantes:
Para retirar el primer guante, tome el borde por la cara
externa y d vuelta completamente el guante.
Para retirar el segundo guante, tmelo del puo, d
vuelta completamente el guante y deseche segn norma.
Lave y seque sus manos.
54


Cuadro 6. Secuencia para el uso de prendas de proteccin.

3.2.3.5 Proteccin de los pies.
Es recomendable el uso de zapato cerrado, puntera cerrada,
sin tacos.

.
Cuadro 7. Equipo de proteccin personal.



55

Captulo IV Descontaminacin

La descontaminacin es uno de los principios
fundamentales de la Bioseguridad. Se refiere por un lado, a
la esterilizacin o destruccin completa de todos los
microorganismos incluyendo las esporas bacterianas y, por otro
lado, a la desinfeccin o destruccin y eliminacin de tipos precisos
de microorganismos.
Es responsabilidad del Director del Laboratorio asegurar que
todos los miembros del personal del Laboratorio sean capacitados
sobre el tema y, a su vez, es responsabilidad de los miembros
del personal de utilizar de manera eficaz los procedimientos y
productos de descontaminacin cualquiera que sea su uso.
Todas las materias deben ser descontaminadas antes de ser
eliminadas o limpiadas antes de una utilizacin futura. La
eleccin del mtodo es definida por las materias mismas las
cuales pueden ser cultivos de laboratorio, cepas de referencias,
especmenes clnicos, equipos de laboratorios, objetos cortantes,
ropas protectoras o cualquier objeto que estuvo con las materias
infecciosas. La superficie y los mesones deben ser
descontaminados despus de cada desplomo de materias
eventualmente infecciosas y al final de cada jornada de trabajo. Las
zonas de laboratorios y los grandes equipos pueden tambin
necesitar ser descontaminados (antes de su mantencin o su
traslado). Deben preparase protocolos escritos y precisos, los que
deben ser respetados en cada caso.
Metodologas adecuadas para laboratorios de nivel 1 y nivel 2 los
cuales representan la mayora de nuestros laboratorios:
4.1 Autoclave
Los desechos infecciosos de laboratorio (Placas de Petri, pipetas,
tubos de cultivos, material de vidrio, etc.) pueden ser eficazmente
56

descontaminados utilizando una autoclave con vapor directo o
con una autoclave con extraccin de aire. Este ltimo sistema
permite resolver los problemas de bolsillos de aire que se
forman en las autoclaves de vapor directo debido al movimiento del
aire por gravedad. La eficiencia de descontaminacin depende de
varios factores de carga, que influencian la temperatura efectiva a la
cual el material est sometido y el tiempo de contacto. El
embalaje es tambin un factor determinante a la hora de favorecer la
libre circulacin del vapor. La sobrecarga y el apilamiento en la
autoclave pueden llevar al fracaso del proceso de
descontaminacin. Lo ideal es agregar un indicador biolgico
como por ejemplo una cantidad conocida de esporas.


4.2 Desinfeccin qumica
Los desinfectantes qumicos son tiles para descontaminar las
superficies y los aparatos que no pueden ser esterilizados en
autoclave. Tambin son tiles para limpiar las salpicaduras de
materias infecciosas, las salas y las unidades de hospedaje de
animales.
La seleccin del desinfectante depende de la resistencia de los
microorganismos manipulados. Los microorganismos ms sensibles
son las bacterias vegetativas, los hongos y los virus encapsulados.
57

Las micobacterias y los virus no-encapsulados son menos
sensibles; las esporas bacterianas y los quistes de protozoarios son
generalmente los ms resistentes.
Los peligros para la salud que representan los desinfectantes
qumicos, as como, la facilidad de manejo, estabilidad y
compatibilidad con los materiales a desinfectar son factores
importantes que deben considerarse para elegir el desinfectante
adecuado. Si bien existen numerosos productos en el mercado, los
compuestos activos pertenecen a un nmero limitado de familias
qumicas. Para elegir un desinfectante cabe entender la posibilidad y
limites de cada una de estas familias: hipocloritos, compuestos de
amonio cuaternario, compuestos fenlicos, yodados, alcohol, etc.

Puede ser conveniente que los laboratorios evalen por smismos la
eficiencia de tal o cual desinfectante. El mtodo principal para
dicha evaluacin consiste en contaminar artificialmente una
superficie, y luego descontaminarla con una dilucin apropiada
del desinfectante el cual luego debe ser neutralizado.
Finalmente, se debeverificar que todos los microorganismos han sido
eliminados.

4.3 Incineracin.
La incineracin ha sido desde siempre el mtodo favorito de
eliminacin de carcasas de animales y de desechos patolgicos. En
58

la mayora de los casos, los desechos que deben ser incinerados
tienen que ser embalados adecuadamente y de acuerdo a la
normativa para que sean retirados de los laboratorios por las
empresas certificadas que se encuentran operando en nuestro
pas. La responsabilidad de nuestros laboratorios recae entonces,
por un lado, en el almacenamiento cuidadoso dentro de un
congelador, de uso exclusivo, a -20 C, hasta que el material
biolgico sea retirado por la empresa contratada.
Para aquellos centros o laboratorios que disponen de un incinerador,
cabe resaltar que la eficiencia de la incineracin depende de la
calidad conceptual de los aparatos, del tiempo y de la temperatura de
incineracin, de las turbulencias y del aire necesario para una
oxidacin completa. Es importante constatar que las emisiones
producidas por la incineracin tienen que adecuarse a las normas
ambientalesvigentes en cuanto a emisin de partculas y
contaminantes qumicos.


















59

Captulo V Muestras de laboratorio

5.1 Toma de muestras de laboratorio.
La Gua integral de estudio y manejo de casos y sus contactos para
enfermedad similar a influenza, prev la realizacin de diferentes
pruebas de laboratorio, lo que obliga a la manipulacin de
muestras biolgicas provenientes, desde su toma hasta su
procesamiento. El personal de salud que realice la toma de
muestras y est en contacto estrecho con pacientes, o que realice
procedimientos que generen aerosoles debe utilizar obligatoriamente
los elementos de proteccin personal recomendados en la tabla 3.1,
de acuerdo al grado de contacto con el paciente. Siempre deben
respetarse las precauciones universales en el mo mento de la toma
de muestras. Si se prev salpicadura con sangre, fluidos,
secreciones durante el contacto con pacientes debe usarse delantal
de plstico.
5.2 Manejo de muestras en el laboratorio
Los manuales de bioseguridad de cada laboratorio deben seguirse,
con especial nfasis en impedir la generacin de aerosoles. Se
debe usar en el laboratorio ropa protectora apropiada (batas sin
abertura delantera o envolventes, trajes tipo pijama, overoles,
gorros y, si corresponde, proteccin para el calzado o calzado
exclusivo para el rea).
No son apropiadas las batas de laboratorio con botones delanteros,
ni mangas cortas. La ropa de laboratorio no debe usarse fuera de
ste y debe descontaminarse antes de enviarla a la lavandera.
Siempre se debe trabajar con gua ntes, mascarilla, y proteccin
ocular.
El procesamiento de muestras en el laboratorio requiere condiciones
BSL2 (Biosafety Level 2), en donde se manipulen las muestras en
cabinas de flujo Tipo II. Las pruebas de rutina que requieren este
60

nivel de seguridad son: pruebas de hematologa, qumica clnica,
empaque final de muestras para transporte en otros laboratorios. Si
no se renen las condiciones de trabajo BSL2, las muestras
deben remitirse a un laboratorio adecuado. El manejo de las
muestras antes de la remisin, se har siguiendo las
recomendaciones para la manipulacin de muestras infecciosas.
5.3 Transporte de Muestras
Todas las muestras deben ser tratadas como potencialmente
infecciosas. La OMS y la IATA han publicado normas de
bioseguridad en el documento Gua sobre la reglamentacin
relativa al Transporte de sustancias infecciosas 2007 2008.
El personal que transporta las muestras debe haber sido
previamente entrenado para el manejo seguro de muestras
biolgicas y para descontaminacin en el caso de accidentes o
derrames.
5.3.1. Remisin de muestras
Toda muestra debe estar adecuadamente rotulada, y el formato de
acompaamiento de la muestra debe estar marcado. Se debe
notificar telefnica o electrnicamente al laboratorio receptor al
momento del despacho de la muestra, y mantener actualizado
el registro de las muestras enviadas. Las muestras deben ser
empacadas en bolsas a prueba de derrames, las cuales deben
estar envueltas en un segundo empaque. Toda muestra remitida
al laboratorio debe ir correctamente embalada, de forma que se evite
el riesgo de difusin del virus por el transporte. Este sistema es
conocido como triple embalaje y conlleva tres componentes:
primario, secundario y terciario.


61

5.3.2 Triple embalaje

Figura 5. Triple Embalaje

5.3.2.1 Embalaje primario
El recipiente primario: en l se deposita la muestra clnica. Debe ser
de plstico con una tapa rosca sellada con cinta de parafina, cinta
adhesiva o similar. Envuelto en suficiente papel absorbente.
En el caso de que se vayan a mandar varios recipientes primarios,
cada uno de ellos deber ser envuelto individualmente para evitar
posibles daos.
Cuando se calcule el volumen de las muestras que se van a enviar,
se debe tener en cuenta el volumen del contenedor (caja, etc.).
5.3.2.2 Embalaje secundario
El contenedor secundario debe contener:
Las sustancias refrigerantes.
El suficiente material absorbente que permita absorber todo
el contenido de los embalajes primarios en caso de rotura o
filtraciones.
Los datos de la muestra clnica.
62

Debe ser lo suficientemente grande para poder llevar los documentos
necesarios del transporte y debe ser de un material que permita
la conservacin de la temperatura.
5.3.2.3 Embalaje externo
Entre el embalaje secundario y el embalaje externo se debe
incluir una lista detallada de los contenidos del paquete.
El embalaje externo debe introducirse en una bolsa sellada de
plstico para protegerlo de la humedad.
Debe consignarse el remitente y quien lo recibe.
La etiqueta correspondiente al RIESGO BIOLGICO de la
muestra debe estar visible.
5.4 Recomendaciones en relacin con tipo de material
5.4.1 Material crtico.
Son instrumentos o dispositivos que se introducen directamente en el
torrente sanguneo o en otras reas del organismo, normalmente
estriles. Estos dispositivos representan un riesgo alto de infeccin si
estn contaminados con cualquier microorganismo, por lo que deben
estar siempre estriles.
Siempre que sea posible hay que utilizar material desechable. Si no
es posible, es necesario someterlo a un proceso de esterilizacin.
5.4.2 Materiales semicrticos.
Se consideran materiales semicrticos los que entran en
contacto con membranas, mucosas o piel no intacta. Las mucosas
son, por lo general, resistentes a las infecciones por esporas
bacterianas comunes, pero susceptibles a las formas vegetativas
de las bacterias, virus y M. Tuberculosis. Estos artculos deben
63

estar libres de toda forma vegetativa de los microorganismos, y de
preferencia deben ser estriles. En caso de que la esterilizacin no
sea posible deben recibir, al menos, un procedimiento de
desinfeccin de alto nivel.
5.4.3 Materiales no crticos.
Estos artculos slo entran en contacto con la piel intacta o no
tienen contacto con el paciente. La piel sana acta como una
barrera efectiva para la mayora de los microorganismos, y por
lo tanto el nivel de desinfeccin puede ser mucho menor. En
general slo requieren limpieza con un detergente y secado; en
ocasiones requieren desinfeccin de bajo nivel. El tiempo de
exposicin es de 10 minutos. Pueden utilizarse sustancias como:
alcohol 70, fenoles, yodforos, asociacin de aldehdos.
6. Esterilizacin
Empleo de un procedimiento fisicoqumico dirigido a destruir toda la
flora microbiana, incluidas las esporas bacterianas, altamente
resistentes. Cualquier proceso de esterilizacin consta de los
siguientes pasos: recepcin; limpieza y descontaminacin;
secado; empaque e inspeccin; identificacin y rotulado;
seleccin del mtodo de esterilizacin; almacenamiento; y
transporte y distribucin.
Dado que no podemos ver la esterilidad de un elemento, es
muy importante el aseguramiento de los procesos de
esterilizacin. Estas se basan en cinco puntos: Esterilizacin de
la carga, control del paquete, control de exposicin, libros de
registros y control del equipo.
Para optimizar los resultados, utilice un indicador biolgico de lectura
rpida con cada carga (control de la carga), un indicador qumico
dentro de cada paquete (control del paquete), y un indicador
qumico fuera de cada paquete (control de exposicin). Por
ltimo registre sus procesos.
64


6.1 Recepcin de suministros
Se debe recordar que la garanta de esterilidad comienza en el
punto en donde la institucin asume la responsabilidad de los
equipos mdicos y suministros que recibe.
Todos los objetos deben ser desembalados de sus empaques
originales de transporte antes de ser trasladados a las reas de
procesamiento o de almacenamiento. Se debe tener mucho
cuidado de no contaminar los empaques individuales. Las cajas de
cartn utilizadas para el transporte, especialmente aquellas hechas
con materiales corrugados, sirven como generadores y depsitos de
polvo.
6.1.1 Objetos reutilizables nuevos
Algunos objetos, como los instrumentos quirrgicos, se reciben
sin haber sido previamente limpiados y esterilizados por sus
fabricantes y por lo tanto requieren limpieza antes de ser
esterilizados de acuerdo a las instrucciones del fabricante.
Adems, agentes anticorrosivos, como aceites y grasas, pueden
ser aplicados por el fabricante para proteger los productos
durante el envo; tales agentes, de no ser removidos
apropiadamente, interferirn con el proceso de esterilizacin.
Despus de desembalar los objetos de sus empaques originales
para transporte, deben ser trasladados directamente al rea de
descontaminacin, en donde deben ser lavados.
6.1.2 Objetos de un solo uso
Despus de haber sido removidos de sus contenedores exteriores de
envo, los objetos estriles preempacados o limpios no estriles
pueden ser recibidos directamente en las reas de preparacin
o de almacenamiento no estril sin que se requiera limpieza
adicional. Se deben utilizar bolsas rojas para el descarte de estos
elementos usados.
65

7. Manipulacin de desechos
Se considera desecho todo aquello que debe descartarse. En
los laboratorios y en las reas de manejo de pacientes, la
descontaminacin y la eliminacin de desechos son operaciones
estrechamente relacionadas. En el trabajo cotidiano, son pocos
los materiales contaminados que ameritan ser retirados o destruidos.
La mayor parte de la vidriera, los instrumentos y la ropa vuelve a
utilizarse o se recicla.
El principio bsico es que todo el material infeccioso ha de ser
descontaminado, esterilizado en autoclave o incinerado. El
procedimiento a seguir es (regulado por la resolucin 1164 de
2002 de los Ministerios de Proteccin Social y Medio Ambiente):
Descontaminar o desinfectar los objetos o el material por un
procedimiento aprobado.
Si esto no se ha realizado, se debe embalar con un mtodo
aprobado para ser incinerados inmediatamente in situ o
transferidos a otra rea que tenga capacidad para incinerar.
Se debe asegurar que el proceso de eliminacin de los
objetos o materiales descontaminados no represente algn
riesgo biolgico para quienes realizan las operaciones de
eliminacin inmediata o para quienes puedan entrar en contacto
con los objetos o materiales desechados fuera del recinto del
laboratorio. Por ello, todas las personas que participen de este
proceso deben cumplir con las precauciones estndar de
bioseguridad.
7.1 Clasificacin de los desechos
7.1.1 Residuos no peligrosos
Biodegradables (tener en cuenta los pauelos desechables
que se clasificaran como peligrosos)
Papel higinico (general, consultorio)

66

Papeles no aptos para reciclaje (general, laboratorio, banco
de sangre)
Reciclables
Papeles (Consultorio, general, laboratorio, banco de sangre)
Plsticos (laboratorio, banco de sangre)
Vidrio (laboratorio, banco de sangre: descontaminar
previamente)
7.1.2 Residuos peligrosos
Infecciosos o de riesgo biolgico
Biosanitario
Sangre, Orina, Materia fecal, Secrecin vaginal (laboratorio)
Gasas, aplicadores y algodones (Laboratorio, banco de
sangre)
Agujas y jeringas. (laboratorio, banco de sangre)
Tubos capilares y de ensayo, laminas porta objetos y
laminillas (Laboratorio, banco de sangre)
Medios de cultivo (Laboratorio)
Pauelos desechables y mascarillas
Cortopunzantes (Laboratorio y banco de sangre)
Lancetas, cuchillas, agujas
Pipetas y lminas

7.2 Disposicin de los desechos.
Todo el material de desecho generado en las reas de
aislamiento o en el laboratorio debe ser descartado en
recipientes adecuados en bolsa roja y ser manipulado como
desechos infecciosos.
Los desechos slidos secos, guantes, ropa y otros, deben
colocarse en bolsas rojas para elementos biopeligrosos y
disponerse de acuerdo al procedimiento regular.
Los desechos que estn saturados con sangre, fluidos
corporales o heces deben colocarse en bolsas
impermeables para biopeligrosos, para ser sometidos al
autoclave en el lugar.
67

Los objetos corto punzantes deben desecharse en el
recipiente especial para este tipo de desechos y sometido al
autoclave.
Los recipientes con secreciones respiratorias del
paciente, fluidos u otras secreciones, se podrn llenar
hasta una tercera parte, luego sustituirlos por unos
vacos, limpios y estriles. A dicho recipiente con
secreciones se le debe agregar una cantidad de hipoclorito
de sodio comercial (5%) y llenar hasta completar tres
cuartas partes del volumen total. Dejar en reposo en el rea
sptica por al menos 30 minutos y despus eliminar por el
drenaje. Debe evitarse cualquier manejo que produzca
derrames o aerosoles.
No es necesaria doble bolsa para el descarte de los
desechos a menos que se confirme contaminacin de la
superficie externa de la bolsa, en cuyo caso se usar doble
bolsa. Las bolsas debern tener la identificacin
universal de material infeccioso.
Los desechos provenientes de laboratorio se descartan
segn el manual de bioseguridad de cada institucin, y
se descartan de igual manera que los desechos
hospitalarios.

7.3 Eliminacin de desechos.
La eliminacin de los desechos mdicos y de laboratorio
est sometida a reglamentacin nacional (Resolucin 1164
de 2002).
La disposicin final se har por las personas y empresas
autorizadas para ello.
Las cenizas procedentes de los incineradores pueden
tratarse igual que las basuras domsticas corrientes y ser
evacuadas por los servicios locales. Los desechos de la
autoclave pueden ser eliminados en vertederos autorizados o
por incineracin fuera del laboratorio.

68

CONCLUCIONES

El trabajo en el laboratorio implica riesgos para el
personal que est en contacto con material
biolgico-infeccioso. Los laboratorios clnicos, por
ende, son sitios donde el concepto de
bioseguridad debe formar parte de la vida diaria de
cada persona.

Las medidas de bioseguridad deben estar
claramente definidas en un manual y deben ser
conocidas y estar al alcance de la mano de todos.
La idea de bioseguridad surgi para proteger a las
personas que, ya sea por trabajo o por estudio,
lleguen a estar en contacto con algn patgeno o
muestra potencialmente infecciosa.

No se debe pasar por alto que el establecimiento
de normas de bioseguridad tiene como principal
objetivo la reduccin de riesgos ocupacionales en
todo nivel, por lo que deben seguirse a conciencia.
Se debe capacitar al personal y supervisar en
forma constante.

Nunca debe olvidarse que "est seguro aquel que
aun sabindose proteger, toma sus precauciones".

69

Contenido
INTRODUCCIN ............................................................ 1
Captulo I Generalidades ................................................ 2
1. Definicin .......................................................... 2
1.1 Otras definiciones sobre Bioseguridad ........... 2
1.2 Objetivo de la bioseguridad ............................ 3
1.3 Principios de Bioseguridad ............................. 3
1.4 Elementos bsicos de la bioseguridad ............ 4
1.5 Niveles de Bioseguridad, Clasificacin del
riesgo y de los laboratorios de trabajo Biolgico. .... 5
1.6 Cmo ocurre el riesgo de adquirir una
infeccin en el laboratorio? ..................................... 7
Capitulo II Equipos de Bioseguridad ............................... 10
2.1 Cmaras de seguridad biolgica ................... 10
2.1.1 Cmaras de seguridad biolgica de clase I 11
2.1.2 Cmaras de seguridad biolgica de clase II13
2.1.3 Cmaras de seguridad biolgica de clase II tipo A1
........................................................................... 13
2.1.4 Cmaras de clase II de tipo A2 con salida al
exterior, y de tipo B1 y B2 ...................................... 15
2.1.5 Cmaras de seguridad biolgica de clase III ..... 16
2.1.6 Conexiones de aire de las cmaras de seguridad
biolgica .............................................................. 17
2.1.7 Uso de las cmaras de seguridad biolgica en el
laboratorio ............................................................ 18
2.1.8 Equipo de proteccin personal ........................ 22
2.1.9 Equipo de Seguridad...................................... 22
70

Captulo III Generalidades de Bioseguridad ..................... 26
3. Buenas prcticas en el laboratorio. ................. 26
3.1 Niveles de bioseguridad ............................ 30
3.2 Precauciones estndar y equipo de proteccin
personal ................................................................ 38
3.2.1 Higiene de Manos. ......................................... 38
3.2.1.1 Lavado higinico de manos: ........................ 40
3.2.1.2 Lavado antisptico de manos: ...................... 41
3.2.1.3 Lavado quirrgico de manos: ....................... 43
3.2.2 Productos antispticos .............................. 45
3.2.3 Elementos de Proteccin Personal ............ 46
3.2.3.1 Mandil ................................................. 47
3.2.3.2 Mascarillas .......................................... 48
3.2.3.3 Gafas ................................................... 49
3.2.3.4 Guantes ............................................... 50
3.2.3.5 Proteccin de los pies. ........................ 54
Captulo IV Descontaminacin ....................................... 55
4.1 Autoclave ..................................................... 55
4.2 Desinfeccin qumica.................................... 56
4.3 Incineracin. ................................................ 57
Captulo V Muestras de laboratorio ................................ 59
5.1 Toma de muestras de laboratorio. ................ 59
5.2 Manejo de muestras en el laboratorio .......... 59
5.3 Transporte de Muestras................................ 60
5.3.1. Remisin de muestras .................................. 60
71

5.3.2 Triple embalaje ................................................ 61
5.3.2.1 Embalaje primario ...................................... 61
5.3.2.2 Embalaje secundario ................................... 61
5.3.2.3 Embalaje externo ....................................... 62
5.4 Recomendaciones en relacin con tipo de
material ................................................................. 62
5.4.1 Material crtico. ............................................. 62
5.4.2 Materiales semicrticos. .................................. 62
5.4.3 Materiales no crticos. .................................... 63
6. Esterilizacin ................................................... 63
6.1 Recepcin de suministros .......................... 64
6.1.1 Objetos reutilizables nuevos .................. 64
6.1.2 Objetos de un solo uso ........................... 64
7. Manipulacin de desechos ............................... 65
7.1 Clasificacin de los desechos .................... 65
7.2 Disposicin de los desechos. ..................... 66
7.3 Eliminacin de desechos. .......................... 67
CONCLUCIONES .......................................................... 68